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Immunology and Infection

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Nanyang Technological University

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•

10:34 min

•

February 22nd, 2017

DOI :

10.3791/54581-v

February 22nd, 2017

•

Muthukumar Balasubramaniam¹^,², Benem Davids¹^,², Amma B. Addai¹^,², Jui Pandhare¹^,³^,⁴, Chandravanu Dash¹^,²^,⁵

¹Center for AIDS Health Disparities Research, Meharry Medical College, ²Department of Biochemistry and Cancer Biology, Meharry Medical College, ³School of Graduate Studies and Research, Meharry Medical College, ⁴Department of Microbiology and Immunology, Meharry Medical College, ⁵Tennessee Center for AIDS Research (TN-CFAR), Meharry Medical College

Resumen

This report describes an in vitro assay for measuring the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) preintegration complex (PIC)-associated integration activity in the cytoplasmic extracts of acutely infected cells. The integration of PIC-associated HIV-1 DNA into heterologous target DNA is quantified by using a nested real-time polymerase chain reaction strategy.

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PCR Edici n 120

complejo de pre integraci n

el ADN de destino

Capítulos en este video

0:05

Title

1:36

Virus Infection of Sup-T1 Cells

3:22

Harvesting and Lysis of Infected Cells

4:22

Preparation of Cytoplasmic Preintegration Complexes

5:32

In Vitro Integration Assay Using Preintegration Complexes

7:40

PCR Assays for Quantifying Preintegration Complex Activity

8:29

Results: HIV-1 Preintegration Complex-associated vDNA Integration Activity

9:47

Conclusion

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