The authors acknowledge the following funding sources, Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health and Research to Prevent Blindness.

Todos los ojos enucleados se obtuvieron de un matadero y todos los experimentos se realizaron de acuerdo con las leyes de bioseguridad institucionales. <ol><li> Asegure ojo enucleado abajo sobre una superficie. Para ello, la colocación de pasadores de tejido a través del exceso de tejido alrededor de los ojos y la obtención abajo en un tablero de espuma de poliestireno. </li><li> Diseccionar y separar la conjuntiva del ojo perilimbal. <ol><li> Utilice unas pinzas finas (0,3 fórceps) y micro tijeras (tijeras Westcott) para incidir la conjuntiva en el limbo y sin rodeos diseccionarlo de la esclerótica. Cortar la conjuntiva a lo largo del limbo como la disección roma procede a permitir una mayor disección. </li><li> Retire conjuntiva todo el camino alrededor del ojo (360 grados) para exponer tanto esclerótica posible. NOTA: Es conveniente dejar una pequeña cantidad de la conjuntiva para facilitar fijando el ojo con los pasadores quirúrgicos o un fórceps durante el resto del procedimiento. </li></ol></li><li> Crear un colgajo escleral de espesor total a lo largo de unolado del ojo (hoja de bisturí 69). <ol><li> Hacer un ~ 5 mm incisión escleral paralela al limbo y 3 mm posterior al limbo cortando suavemente en la esclerótica con un bisturí (hoja de bisturí 11) hasta que coroides pigmentación oscura es visible. Tenga cuidado de no incidir la propia coroides. </li><li> Diseccionar cuidadosamente a lo largo del plano entre la esclerótica y la coroides, ya sea con tijeras (utilizando disección roma) o con el bisturí, hasta que sea posible para agrandar el espacio potencial entre estos tejidos empujando la coroides suavemente hacia adentro. </li><li> Hacer otra incisión escleral perpendicular a la primera incisión escleral con micro tijeras afiladas, la creación de una incisión en forma de T. </li><li> Luego continuar para diseccionar sin rodeos de una manera circunferencial para eliminar el tejido de la esclerótica de la coroides subyacente y empuje suavemente la coroides lejos de la esclerótica como se mencionó anteriormente. </li><li> Agrandar el colgajo escleral según sea necesario. <ol><li> Suavemente blunt diseccionar la coroides lejos de la escleróticadurante todo el proceso. </li><li> Ampliar la solapa hasta que la incisión hecha perpendicular al limbo alcanza el nervio óptico y la incisión hecha paralela al limbo es de al menos un tercio de la circunferencia del ojo (45º). </li><li> Utilice el colgajo escleral como una fuente de apalancamiento para manipular el ojo durante la disección roma. El contra-tracción en la solapa hace que sea más fácil para la disección roma. </li></ol></li><li> Repita el paso anterior en el otro colgajo escleral. </li></ol></li><li> Cortar las aletas esclerales para exponer una gran área de coroides. </li><li> Continuar la incisión hecha en el paso 3 alrededor de la circunferencia del ojo (360 grados). </li><li> Retire el tejido coroides-retina restante. <ol><li> Dentro de la región expuesta, utilice una punta de algodón para cepillar suavemente el tejido coroides retina restante. Alternativamente, agarra suavemente el tejido con pinzas y despegarlo el cuerpo vítreo subyacente. </li><li> Si es necesario hacer una incisión en la coroides starting desde el nervio óptico. Luego retire la coroides suavemente para exponer la retina y la corteza vítrea. </li></ol></li><li> Continuar contundente disección de la coroides lejos de la esclerótica y luego retire la coroides para obtener todo el vítreo, intacto. </li><li> Utilice el borde escleral unido a la córnea para colocar todo el vítreo en el lugar deseado. En este punto, el vítreo se adjunta a la esclerótica anterior y la lente. </li><li> Blunt diseccionar el vítreo desde el interior de la esclerótica, alrededor de la lente, la eliminación de todos esclerótica. </li><li> Utilice una herramienta contundente para sacar la lente de distancia del vítreo si es necesario. Usa el ejemplo de varios experimentos vitreodynamic. <ol><li> Coloque la muestra en un vaso de precipitados de vidrio con superficie conocida se expone al aire. Coloque oxígeno sonda sensible en el borde de la muestra. Use un micro-manipulador para mover la sonda a una distancia conocida (r) en la muestra. </li><li> Utilice Ley de Fick para obtener la ecuación de difusión teórica. Con la data recogido en el paso 10.1, obtenga el término coeficiente de difusión experimental / reacción, etc. </li></ol></li></ol>

<ol>
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The authors have nothing to disclose.

Existen dos pasos críticos que se deben realizar con cuidado durante la disección vítreo. Paso 3, la creación de un colgajo escleral de grosor completo, es crucial para toda la disección. Se debe tener cuidado para no cortar en la coroides cuando se crea el colgajo escleral de grosor completo. El otro paso fundamental está diseccionando de distancia de la esclerótica de la coroides. Este paso debe hacerse con cuidado para evitar la creación de múltiples orificios de la coroides de la que el humor vítreo puede derramarse. Hay una manera de modificar el protocolo y todavía diseccionar intacta humor vítreo conjunto. Paso 6 se puede retrasar hasta el paso 8. La coroides puede ser eliminado al final después de que el tejido vítreo se coloca en la ubicación deseada. La limitación de este procedimiento es que durante la disección, sólo hay señales visuales para sugerir el éxito y la precisión de la disección vítreo intacto. Desde el núcleo vítreo y la corteza son ambos transparente y indistinguibles a simple vista, estepuede ser un reto. Por darse cuenta de la adhesión de la retina en el vítreo es posible determinar si se ha producido una disección éxito de la corteza vítreo. De lo contrario, las sustancias farmacológicas, tales como Kenalog, se pueden utilizar para mejorar la visualización 15 del vítreo pero no pueden permitir fácilmente a uno distinguir entre la corteza y el núcleo vítreo vítreo. Otra limitación de esta técnica es que es más eficaz para la disección de vítreo gel. Gel vítreo humano es un tejido no regenerativa que se somete a la licuefacción con la edad. Esta licuefacción nos impide disección completamente todo el vítreo, intacta desde el ojo. Por lo tanto, nuestra técnica se extiende sólo al vítreo de los animales, como vacas, cerdos o conejos o los ojos de los seres humanos jóvenes que no tienen cantidades significativas de licuefacción. El humor vítreo en estos animales tiende a estar completamente en estado de gel. Sin embargo, en la actualidad, no existe un método establecido, que ha sido descRibed en detalle, para la disección de toda vítreo intacto de ojos de cadáver. En la actualidad, las únicas técnicas de disección vítreas que han sido bien detallados implican la disección de regiones únicas pero separadas del vítreo 7 o la disección de sólo el núcleo vítreo 6. Las aplicaciones de diseccionado humor vítreo intacta están bajo apreciadas y subutilizadas. Experiencia quirúrgica con el vítreo, así como los estudios clínicos, histopatológicos y bioquímicos sugieren que las propiedades químicas y estructurales del vítreo pueden variar significativamente 16,17. Por lo tanto, es necesario para preservar la estructura de todo el cuerpo vítreo para estudiar la función del vítreo en la fisiología ocular y la anatomía. Vítreo intacto puede explantó a un globo transparente para una mejor visualización durante los experimentos. Ellos pueden entonces ser utilizados para una variedad de pruebas / químicas mecánicos para mejorar las mediciones de prop física / biomecánicopropie- del humor vítreo. Por ejemplo, se sugiere que el vítreo intacta toda diseccionado se puede utilizar en lugar de la solución salina, sustitutos viscosos, o núcleo vítreo en los experimentos de reología citados 6,18.

El objetivo de este método es al detalle una técnica para aislar todo un cuerpo vítreo, intacta, con el núcleo vítreo y la corteza intacta, a partir de un ojo de cadáver, para los fines de análisis vitreodynamic. A medida que el campo de la fisiología del vítreo ha crecido, investigadores multidisciplinarios, como la mecánica de fluidos investigadores, están investigando las propiedades físicas y biomecánicas del vítreo 1. Para ello, es esencial al detalle una técnica para aislar todo el cuerpo vítreo intacta para ayudar a los investigadores multidisciplinarios. Sebag et al. 2 y otros 3 elegantes realizaron disecciones vítreas enteros en los ojos de cadáveres humanos y mostraban ilustraciones de los resultados. Sin embargo, la técnica utilizada no se describió en detalle los no expertos y no sería capaz de replicarse independientemente del método. Otros estudios han cosechado vítreo de los ojos de cadáver utilizando métodos más simples como la aspiración o la disección parcial,ambos de los cuales no dan lugar a todo un cuerpo vítreo, intacto. Gisladottis et al. 4 y Xu et al. 5 investigar la permeabilidad en el humor vítreo cosechado de ojos de cadáver. Sin embargo, desde que se describe ningún método de extracción del vítreo, se asumió que aspiran el humor vítreo con una jeringa. Watts et al. 6 fue un paso más allá mediante la descripción de un método de aislamiento de conejo humor vítreo con una técnica quirúrgica. Sin embargo, este método da lugar a un aislamiento de sólo el núcleo vítreo y no la corteza vítreo. Skeie et al. 7 más tarde organizó el vítreo en 4 regiones únicas y elegantes describe un método para diseccionar cada parte para su análisis. Esta técnica sin embargo, no resulta en una vítreo intacta como un todo. La técnica actual fue desarrollado para facilitar experimentos biofísicos que se realizan en la actualidad sólo a los ojos de cadáver. Los métodos anteriores, como se ha descrito unBove, están limitados porque 1) no aislar por completo a todo el cuerpo vítreo, núcleo vítreo 2) cosechada y la corteza se homogeneizan, 3) estructura anatómica vítreo no se mantiene, o 4) técnicas de disección no se detallan de manera adecuada para la replicación por investigadores de otros campos . Además, debido a la opacidad de la esclerótica y la coroides, la visualización del cuerpo vítreo está limitado en el globo ocular intacta. Esto limita la precisión y la viabilidad de las mediciones que se pueden hacer dentro de todo el ojo. Adicionalmente, los estructuras anatómicas que rodean a la del vítreo puede confundir del estudio de propiedades bioquímicas y físicas del humor vítreo. En los últimos años, el cuerpo de la ciencia vítreo ha crecido enormemente y no hay razón para creer que todo el cuerpo vítreo tiene diferentes propiedades que sus partes individuales. Existe un creciente interés en la investigación de las propiedades físicas, biomecánicos, y químicas del vítreo para vitreodynamics research, que tiene aplicaciones en la medicina clínica, tales como la administración de fármacos, la oxigenación intravítrea 8 y vitrectomía. Vitreodynamics farmacológicos, que utiliza agentes farmacológicos para manipular el vítreo, se pueden utilizar para mejorar los resultados de vitrectomía 9. Propiedades biomecánicas se utilizan para modelar el flujo de fluido vítreo, que se puede utilizar para mejorar las tecnologías de administración de fármacos intravítrea 10-12. Propiedades físicas de los diversos segmentos del vítreo son cruciales para entender el transporte de oxígeno vítreo-retiniana 13. La técnica de disección vítreo propuesto puede ser utilizado para estudiar diversas propiedades del humor vítreo intacto. Permite sobremesa experimentos por hacer en los cuerpos vítreos enteros, intactos, con mejor visualización. En resumen, los métodos actuales para el estudio del vítreo o bien no describen adecuadamente, o dan lugar a un aislamiento incompleta el núcleo vítreo y la corteza. Por lo tanto, hay una necesidad de realizar experimentos en un modelo de ojo transparente al tiempo que conserva la anatomía del vítreo que existe en el ojo de cadáver.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.3 forceps</td>
			<td>Storz Opthalmics</td>
			<td>E1793</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Westcott Tenotomy Scissors Curved Right</td>
			<td>Storz Opthalmics</td>
			<td>E3320 R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle No. 3</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25607-947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade, #11, for #3 Handle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470174-844</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whole vitreous humor dissection for vitreodynamic analysis

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous studies have shown the results of such dissections, the detailed steps have not been described, precluding researchers outside the field from replicating their methods. Other studies harvest vitreous either through aspiration, which does not maintain the vitreous structure anatomy, or through partial dissection, which only isolates the vitreous core. The proposed method isolates the whole vitreous body, with the vitreous core and cortex intact, while maintaining vitreous anatomy and structural integrity. In this method, a full thickness scleral flap in an enucleated porcine eye is first created and through this, the choroid tissue can be separated from the sclera. The scleral flap is then expanded and the choroid is completely separated from the sclera. Finally the choroid-retina tissue is peeled off the vitreous to leave an isolated intact vitreous body. The proposed vitreous dissection technique can be used to study physical properties of the vitreous humor. In particular, this method has significance for experimental studies involving drug delivery, vitreo-retinal oxygen transport, and intraocular convection.

Siguiendo el protocolo dará lugar a una disección vítreo éxito con el núcleo y la corteza (Figura 3) intacta. Esto es evidente a partir de las piezas residuales de retina adheridas a la corteza vítreo. Intacto humor vítreo conjunto se puede utilizar de varias maneras para experimentos vitreodynamic específicos. En nuestro caso, el índice de difusión del oxígeno en humor vítreo intacto y TI de constante de tiempo correspondiente se estudió (Figura 2). Vítreo que se disecó (núcleo y la corteza) usando nuestro método se colocó en un matraz de vidrio con un área de superficie expuesta conocido. Esto se comparó con vítreo que se cosechó utilizando un método publicado previamente que sólo aísla núcleo vítreo 6. Todos los demás factores se mantienen consistentes entre los grupos experimentales y de control. La superficie vítrea se expuso al aire, que tiene una tensión de oxígeno conocido (~ 160 mmHg). La tensión de oxígeno dentro del vítreo fue baja (&lt;10 mmHg). Basado en la tasa de vitrconsumo de oxígeno eous determine Shui et al. 14 de vítreo en el estado de gel, podemos usar la ecuación para el transporte de oxígeno 1 dimensiones (en formas de estado estable o inestable). Mediante la medición de la tensión de oxígeno una distancia conocida dentro de la superficie vítrea, podemos validar experimentalmente el coeficiente de difusión. La tensión de oxígeno se registró con una sonda de oxígeno, tal como Oxford, y la tasa de error fue de ± 10%. Una muestra se recogió cada 30 seg. La presencia de corteza vítreo afecta a la tasa de difusión de oxígeno en el vítreo media. En presencia de corteza vítreo, la difusión del oxígeno se produce durante un intervalo de tiempo más largo. Las propiedades físicas de la base del vítreo y la corteza tienen un impacto en la salud y enfermedad. Por ejemplo, localizada, la oxigenación intraocular complementaria ha sido propuesto como un tratamiento para la isquemia retiniana 8. La comprensión de los diferentes coeficientes de difusión de oxígeno a través de la corteza vítreanúcleo permitirá a los investigadores predecir la tasa real de la entrega de oxígeno a la retina. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52759/52759fig1.jpg" /> Figura 1:. Vista en sección transversal del ojo se presentan las estructuras anatómicas relevantes (modificado de Instituto Nacional del Ojo de los Institutos Nacionales de Salud) La córnea es el tejido transparente que forma la anterior más la sección del ojo y proporciona una parte significativa de la de óptica ojo poder. El limbo es la unión de la córnea, conjuntiva y la esclerótica. La esclerótica se extiende desde la limbo a la posterior más aspectos de ojo donde se une con el nervio óptico. La conjuntiva es un epitelio delgada que recubre el exterior del ojo y forma el límite entre el ambiente externo y la esclerótica. Los componentes internos del ojo consisten en la cámara anterior, cristalino, iris, cuerpo ciliar, la cámara posterior, la cavidad posterior, la retina y la coroides. El vitreous núcleo comprende la región central del cuerpo vítreo, dentro de la cavidad posterior del ojo. La corteza del vítreo se encuentra alrededor del cuerpo vítreo y se une a la retina en varios puntos, incluyendo la pars plana, vasos retinianos, disco óptico y la mácula. La base del vítreo es una zona tridimensional que se extiende desde ~ 2 mm anterior a la ora serrata a 3 mm posterior a la ora serrata. La coroides es una capa de tejido vascular que se encuentra entre la esclerótica y la retina y proporciona suministro de sangre a la retina externa. La retina es la capa neurosensorial del ojo que subordina la capacidad de enviar la luz del ojo. La esclerótica es la capa opaca blanca que ofrece mayor del soporte estructural a la pared del ojo. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52759/52759fig2.jpg" /> Figura 2:. Parcela de tensión de oxígeno del humor vítreo contra el tiempo Parcela de la tensión de oxígeno en el núcleo vítreo (línea verde) en comparación con todo intacto vitreous (línea azul). Una sonda de detección de oxígeno se coloca en el centro de la muestra y la muestra se expone al aire que tiene una tensión de oxígeno del 160 mmHg. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52759/52759fig3.jpg" /> Figura 3: Ejemplos de aislado cuerpo vítreo conjunto. Foto superior es un ejemplo de todo el cuerpo vítreo intacta todavía unido a la llanta escleral. Foto Medio es un ejemplo de todo el cuerpo vítreo intacta sin esclerótica pero con algo de tejido de la retina restante. El fondo es un ejemplo de todo el cuerpo vítreo, intacto.

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Whole Vitreous Humor Dissection for Vitreodynamic Analysis

The goal of this protocol is to show an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes.

Todo el humor vítreo Disección de Análisis Vitreodynamic

The authors propose an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes. While previous ...

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Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

11.3K vistas.  University of Southern California. The goal of this protocol is to show an effective technique to isolate whole, intact vitreous core and cortex from post mortem enucleated porcine eyes.

Video: Whole Vitreous Humor Dissection for Vitreodynamic Analysis

Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis

The vitreous is an optically clear, collagenous extracellular matrix that fills the inside of the eye and overlies the retina. 1,2 Abnormal interactions between vitreous substructures and the retina underlie several vitreoretinal diseases, including retinal tear and detachment, macular pucker, macular hole, age-related macular degeneration, vitreomacular traction, proliferative vitreoretinopathy, proliferative diabetic retinopathy, and inherited vitreoretinopathies. 1,2 The molecular composition of the vitreous substructures is not known. Since the vitreous body is transparent with limited surgical access, it has been difficult to study its substructures at the molecular level. We developed a method to separate and preserve these tissues for proteomic and biochemical analysis. The dissection technique in this experimental video shows how to isolate vitreous base, anterior hyaloid, vitreous core, and vitreous cortex from postmortem human eyes. One-dimensional SDS-PAGE analyses of each vitreous component showed that our dissection technique resulted in four unique protein profiles corresponding to each substructure of the human vitreous body. Identification of differentially compartmentalized proteins will reveal candidate molecules underlying various vitreoretinal diseases.

This video shows an effective technique for differentiating and dissecting the various semi-transparent structures of the human vitreous body in post mortem eyes.

La disección de los elementos humanos Cuerpo Vítreo para el análisis proteómico

The vitreous is an optically clear, collagenous extracellular matrix that fills the inside of the eye and overlies the retina. 1,2 Abnormal interactions ...

Investigación

Medicina

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

Hyperthermia is a general term used to define the increase in core body temperature above normal. It is often used to describe the increased core body temperature that is observed during fever. The use of hyperthermia as an adjuvant has emerged as a promising procedure for tumor regression in the field of cancer biology. For this purpose, the most important requirement is to have reliable and uniform heating protocols. We have developed a protocol for hyperthermia (whole body) in mice. In this protocol, animals are exposed to cycles of hyperthermia for 90 min followed by a rest period of 15 min. During this period mice have easy access to food and water. High body temperature spikes in the mice during first few hyperthermia exposure cycles are prevented by immobilizing the animal. Additionally, normal saline is administered in first few cycles to minimize the effects of dehydration. This protocol can simulate fever like conditions in mice up to 12-24 hr. We have used 8-12 weeks old BALB/Cj female mice to demonstrate the protocol.

This paper describes a protocol for whole body hyperthermia in mice that can stimulate fever like conditions up to 12-24 hr.

Protocolo para la hipertermia corporal Larga Duración Total en ratones

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Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has been used as a surrogate for discoveries in human prostate development and disease. Prostate micro-dissection allows consistent study of lobe-specific prostate anatomy, histology, and cellular characteristics in the absence of contamination of other tissues. Testosterone affects prostate development and disease. Androgen deprivation therapy is a common treatment for prostate cancer patients, but many prostate tumors become castration-resistant. Surgical castration of mouse models allows for the study of castration resistance and other facets of hormonal biology on the prostate. This procedure can be coupled with testosterone reintroduction, or hormonal regeneration of the prostate, a powerful method to study stem cell lineages in the prostate. Together, prostate micro-dissection and surgical castration opens up a multitude of opportunities for robust and consistent research of prostate development and disease. This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse.

This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse. We also depict representative results produced by these protocols. Finally, we discuss the advantages and utilization of these protocols.

Murino de próstata micro-disección y la castración quirúrgica

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has ...

3D Whole-heart Myocardial Tissue Analysis

Cardiac regenerative therapies aim to protect and repair the injured heart in patients with ischemic heart disease. By injecting stem cells or other biologicals that enhance angio- or vasculogenesis into the infarct border zone (IBZ), tissue perfusion is improved, and the myocardium can be protected from further damage. For maximum therapeutic effect, it is hypothesized that the regenerative substance is best delivered to the IBZ. This requires accurate injections and has led to the development of new injection techniques. To validate these new techniques, we have designed a validation protocol based on myocardial tissue analysis. This protocol includes whole-heart myocardial tissue processing that enables detailed two-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) analysis of the cardiac anatomy and intramyocardial injections. In a pig, myocardial infarction was created by a 90-min occlusion of the left anterior descending coronary artery. Four weeks later, a mixture of a hydrogel with superparamagnetic iron oxide particles (SPIOs) and fluorescent beads was injected in the IBZ using a minimally-invasive endocardial approach. 1 h after the injection procedure, the pig was euthanized, and the heart was excised and embedded in agarose (agar). After the solidification of the agar, magnetic resonance imaging (MRI), slicing of the heart, and fluorescence imaging were performed. After image post-processing, 3D analysis was performed to assess the IBZ targeting accuracy. This protocol provides a structured and reproducible method for the assessment of the targeting accuracy of intramyocardial injections into the IBZ. The protocol can be easily used when the processing of scar tissue and/or validation of the injection accuracy of the whole heart is desired.

This protocol describes a novel method for the 3D comparison of whole-heart myocardial tissue with MRI. This is designed for the accurate assessment of intramyocardial injections in the infarct border zone of a chronic porcine model of myocardial infarction.

El análisis del tejido de miocardio entero en 3D del corazón

Cardiac regenerative therapies aim to protect and repair the injured heart in patients with ischemic heart disease. By injecting stem cells or other ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at the 12 codon (Ptf1acre/+;LSL-KrasG12D/+) mouse strain as a model of human pancreatic cancer. The goal of our current studies is to identify novel metabolic biomarkers of pancreatic cancer progression. We have performed metabolic profiling of urine, feces, blood, and pancreas tissue extracts, as well as histological analyses of the pancreas to stage the cancer progression. The mouse pancreas is not a well-defined solid organ like in humans, but rather is a diffusely distributed soft tissue that is not easily identified by individuals unfamiliar with mouse internal anatomy or by individuals that have little or no experience performing mouse organ dissections. The purpose of this article is to provide a detailed step-wise visual demonstration to guide novices in the removal of the mouse pancreas by dissection. This article should be especially valuable to students and investigators new to research that requires harvesting of the mouse pancreas by dissection for metabolic profiling or histological analyses.

This video article provides a detailed demonstration of the procedures required to successfully remove the pancreas from a mouse by dissection for histological analysis and metabolic profiling.

Disección del páncreas de ratón para análisis histológico y perfiles metabólicos

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Discovering Middle Ear Anatomy by Transcanal Endoscopic Ear Surgery: A Dissection Manual

The middle ear is located in the center of the temporal bone and bears a highly complex anatomy. The recently introduced exclusively endoscopic transcanal approach to the middle ear is a minimally invasive technique sparing the bone and mucosa of the mastoid bone, since the middle ear is accessed through the external auditory canal. This emerging method has several advantages over the traditional (microscopic) approaches to the middle ear such as the panoramic wide-angle views of the anatomy, the possibility to approach and magnify tiny structures, and the possibility of looking around the corner using angled endoscopes.
The cadaveric dissection method presented here consists of an overview on the technical requirements and a precise description of a step-by-step protocol to discover the anatomy of the middle ear. Each step and anatomical structure is carefully described in order to provide a comprehensive guide to endoscopic ear anatomy. In our opinion, this is particularly important to any novice in endoscopic ear surgery as it provides thorough anatomical knowledge and may improve surgical skills.

The aim of this article is to describe the methodology of exclusively endoscopic cadaveric middle ear dissection. Moreover, we aim to provide a comprehensive guide to endoscopic middle ear anatomy.

Descubrir la anatomía del oído medio por cirugía endoscópica Transcanal: un Manual de disección

The middle ear is located in the center of the temporal bone and bears a highly complex anatomy. The recently introduced exclusively endoscopic transcanal ...

Dissection and Explant Culture of Murine Allantois for the In Vitro Analysis of Allantoic Attachment

The placenta is essential for the growth and development of mammalian embryos. For this reason, numerous genetic alterations and likely also environmental insults that disturb placenta development or function can cause early pregnancy loss in mice and humans. Nevertheless, simple in vitro assays to screen for potential effects on placenta formation are lacking. Here, we focus on modeling the first and critical step in placenta formation, which consists of the attachment of the allantois to the chorion. We describe a method to rapidly assess the attachment of allantoic explants on immobilized &#945;4&#946;1 integrin, which serves as a chorio-mimetic substrate.This in vitro approach enables a qualitative evaluation of the attachment and spreading behavior of multiple allantois explants at different consecutive time points. The protocol may be used to investigate the effect of targeted mouse mutations, drugs, or various environmental factors that have been linked to pregnancy complications or fetal loss on allantois attachment ex vivo.

Dissection and Explant Culture of Murine Allantois for the In Vitro Analysis of Allantoic Attachment

We describe an in vitro assay to model chorioallantoic attachment, the first step in placenta formation. The protocol demonstrates the dissection and explant culture of murine allantoides on immobilized &#945;4&#946;1 integrin. Allantois attachment is evaluated microscopically at pre-determined time points.

Disección y la cultura de explante de Allantois murino para el análisis In Vitro del accesorio alantoideo

The placenta is essential for the growth and development of mammalian embryos. For this reason, numerous genetic alterations and likely also environmental ...

Whole-brain Segmentation and Change-point Analysis of Anatomical Brain MRI&#8212;Application in Premanifest Huntington's Disease

Recent advances in MRI offer a variety of useful markers to identify neurodegenerative diseases. In Huntington&#39;s disease (HD), regional brain atrophy begins many years prior to the motor onset (during the &#34;premanifest&#34; period), but the spatiotemporal pattern of regional atrophy across the brain has not been fully characterized. Here we demonstrate an online cloud-computing platform, &#34;MRICloud&#34;, which provides atlas-based whole-brain segmentation of T1-weighted images at multiple granularity levels, and thereby, enables us to access the regional features of brain anatomy. We then describe a regression model that detects statistically significant inflection points, at which regional brain atrophy starts to be noticeable, i.e. the &#34;change-point&#34;, with respect to a disease progression index. We used the CAG-age product (CAP) score to index the disease progression in HD patients. Change-point analysis of the volumetric measurements from the segmentation pipeline, therefore, provides important information of the order and pattern of structural atrophy across the brain. The paper illustrates the use of these techniques on T1-weighted MRI data of premanifest HD subjects from a large multicenter PREDICT-HD study. This design potentially has wide applications in a range of neurodegenerative diseases to investigate the dynamic changes of brain anatomy.

This paper describes a statistical model for volumetric MRI data analysis, which identifies the &#34;change-point&#34; when brain atrophy begins in premanifest Huntington&#39;s disease. Whole-brain mapping of the change-points is achieved based on brain volumes obtained using an atlas-based segmentation pipeline of T1-weighted images.

Todo cerebro segmentación y análisis de punto de cambio anatómico cerebral MRI — aplicación asintomático enfermedad de Huntington

Recent advances in MRI offer a variety of useful markers to identify neurodegenerative diseases. In Huntington&#39;s disease (HD), regional brain atrophy ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of aortic disease exist, in vivo imaging of the vasculature has been limited. In recent years, micro-computerized tomography (micro-CT) has emerged as a preferred modality for imaging both large and small vessels both in vivo and ex vivo. In conjunction with a method of vascular casting, we have successfully used micro-CT to characterize the frequency and distribution of aortic pathology in &#946;-aminopropionitrile-treated C57/Bl6 mice. Technical limitations of this method include variations in the quality of the perfusion introduced by poor animal preparation, the application of proper methodologies for vessel size quantification, and the non-survivability of this procedure. This article details a methodology for the intravascular perfusion of a lead-based radiopaque silicone rubber for the quantitative characterization of aortopathy in a mouse model of aneurysm and dissection. In addition to visualizing aortic pathology, this method may be used for examining other vascular beds in vivo or vascular beds removed post-mortem.

This article describes a detailed methodology of using a radiopaque lead-based silicone rubber to perfuse the murine vasculature for aortic diameter quantification in a mouse model of aortic aneurysm and dissection.

Análisis de Micro-CT cuantitativa de Aortopathy en un modelo murino de disección y aneurisma de la aorta inducida por β-oxidasa

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Learning Modern Laryngeal Surgery in a Dissection Laboratory

Surgery for laryngeal malignancies requires millimetric accuracy from the different endoscopic and open techniques available. Practice of this surgery is almost completely reserved to a few referral centers that deal with a large proportion of this pathology. Practice on human specimens is not always possible for ethical, economic, or availability reasons. The aim of this study is to provide a reproducible method for the organization of a laryngeal laboratory on ex vivo animal models where it is possible to approach, learn, and refine laryngeal techniques. Porcine and ovine larynges are ideal, affordable, models to simulate laryngeal surgery given their similarity to the human larynx in their anatomical layout and tissue composition. Herein, the surgical steps of transoral laser surgery, open partial horizontal laryngectomy, and total laryngectomy are reported. The merging of endoscopic and exoscopic views guarantees an inside-out perspective, which is vital for the comprehension of the complex laryngeal anatomy. The method was successfully adopted during three sessions of a dissection course &#34;Lary-Gym&#34;. Further perspectives on robotic surgical training are described.

The purpose of this paper is to illustrate how to organize a reproducible laboratory for laryngeal surgery on affordable and closely similar animal laryngeal models in order to improve anatomical and surgical knowledge and skills.

Aprendizaje de cirugía laríngea moderna en un laboratorio de disección

Surgery for laryngeal malignancies requires millimetric accuracy from the different endoscopic and open techniques available. Practice of this surgery is ...