Hybridisierung Kettenreaktion RNA Whole-Mount Fluoreszenz in situ Hybridisierung von chemosensorischen Genen in Riechanhängen von Mücken

Unsere Gruppe interessiert sich für das chemosensorische System von Stechmücken. Wir hoffen, dass wir, indem wir den Geschmacks- und Geruchssinn der Mücke ansprechen, verhindern können, dass sie uns findet und uns sticht. Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung ist eine neue Entwicklung.

Diese Technologie ist hochempfindlich, robust und in der Lage, mehrere Genziele zu multiplexen, so dass wir die Expression und Lokalisierung dieser Gene gleichzeitig in ihrer nativen Umgebung visualisieren können. Die spezielle Transkriptomik ist eine hochmoderne Methode, die auf dem Gebiet der Raumbiologie eingesetzt wird. Diese Technologie ist in der Lage, mehrere Tausend Gene zu multiplexen, und Sie können die Expression dieser Gene gleichzeitig visualisieren.

Unser Protokoll ermöglicht es uns, direkt zu visualisieren, welche Neuronen in der Antenne einen der etwa 50 möglichen ionotropen Rezeptoren exprimieren. Dies gibt uns eine grundlegende Roadmap, um unser Verständnis darüber zu leiten, wie diese klassischen Faktorrezeptoren Verhaltensweisen vermitteln könnten. Riechneuronen in den Riechorganen eines Insekts, wie z. B. die Antenne, sind typischerweise in einer schützenden Chitinhülle vergraben.

Dies macht es sehr schwierig, die Expression von Geruchsrezeptoren in diesen Neuronen sichtbar zu machen. Unser Protokoll verwendet eine Kombination aus Chitinase-Behandlungen und hochmodernen Fluoreszenz- und durchsichtigen Protokollen, um diese Herausforderungen zu meistern.