We would like to thank Dr. Lei Chen (Icahn School of Medicine at Mount Sinai, NY) who first established this model in our laboratory. Supported in part by HL126559, DA039576, MH098891, MH63022, MH072567, DA027569, and NSC 2015/17/B/NZ7/02985. Dr. Luc Bertrand is supported in part by a postdoctoral fellowship from the American Heart Association (16POST31170002).

Alle Verfahren wurden von der University of Miami Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC) in Übereinstimmung mit den National Institutes of Health (NIH) Richtlinien zugelassen. Die Verwendung in sterile Geräte und aseptischer Techniken erforderlich ist. 1. Vorbereiten der Occlusion Suture <ol><li> Verwenden einer Naht von 0,21 mm Durchmesser für Mäuse zwischen 20 bis 25 g und 0,23 mm für Mäuse zwischen 25 - 35 g Körpergewicht. Die Wahl der Art von Nähten für die MCAO Verfahrens beruht auf Tiergewicht. </li><li> Mit einem silbernen Stift, markieren Sie die Naht auf 9 mm von der silikonbeschichteten Spitze beginnen. Dies wird als Leitfaden für die Einbaulänge dienen. </li></ol> 2. Vorbereitung für Chirurgie <ol><li> Anesthetize Maus mit Isofluran mit Sauerstoff gemischt, ein Labor, Anästhesie-System. Verwenden Sie Isofluran bei Einstellung 5 und Sauerstoffstrom bei 2 auf der kommerziellen Maschine (siehe Werkstoff - Tabelle). Übertragen Sie das Tier auf dem Weg surgery Oberfläche und Aufrechterhaltung der Anästhesie einen Nasenkegel mit (Verwendung von Isofluran Einstellung 1,5-2,5 und Sauerstoffstrom bei 2). <ol><li> Stellen Sie sicher, dass die Maus Atemfrequenz liegt bei etwa 1 bis 2 Atmung pro Sekunde ohne Keuchen. Darüber hinaus gewährleisten, dass das Tier nicht Whiskers Stimulation nicht aufweist Reaktion und Pedal Reflex (toe Prise). Überwachen Sie die Atemfrequenz und Aufwand während der Operation, mindestens alle 5 Minuten. </li></ol></li><li> Geben Sie einen Tropfen ophthalmische Schmiermittel auf jedes Auge einen sterilen Tupfer, sie zu verhindern, dass während des Verfahrens zu trocknen. Alternativ gelten ophthalmischen Salbe in das Auge aus einer sterilen pharmazeutischen Röhre. </li><li> Flip das Tier auf den Rücken und rasieren den Schnittbereich. Anschließend desinfizieren gründlich den OP-Bereich 70% Ethanol, gefolgt von Chlorhexidin, und die endgültige Tupfer mit 70% Ethanol. Legen Sie das Tier an einem warmen chirurgischen Oberfläche unter einem Stereomikroskop. </li></ol> 3. Dissektion der Arteria carotis communis und interne / External Branching <ol><li> Mit chirurgische Schere und Pinzette, führen Sie einen flachen Mittelschnitt im Nacken, von oberhalb des Brustbeins bis unterhalb des Kiefers (ca. 3-4 cm). Operationstuch sollte rund um den OP-Bereich platziert werden Instrumente zu verhindern, dass in Kontakt mit nicht sterilen Oberflächen kommen. Das Operationstuch wurde in der aktuellen Video weggelassen Filmen zu unterstützen. </li><li> Mit einer Pinzette vorsichtig getrennte Fett- und Bindegewebe, um die Luftröhre aus. Gewebe sollte leicht und natürlich auf beiden Seiten zu trennen. </li><li> Legen Sie ein Kissen (rundes Objekt, etwa 0,5 cm im Durchmesser) auf der Rückseite des Halses der Mäuse den Hals zu verlängern, das weiterhin den Bereich für die Operation auszusetzen. </li><li> Öffnen Sie den Einschnitt entweder mit einem Geweberetraktor oder Haken. </li><li> Auf der linken Seite der Trachea des Tieres, tweeze sorgfältig das Bindegewebe neben der linken Arteria carotis communis (CCA) zu belichten. Achten Sie darauf, nicht die Nerven zu schädigen und die wichtigsten mit dem CCA gebündelten Adern. </li><li> Fortsetzung der CCA aussetzt, vorsichtig von darunterliegenden Gewebe zu lösen, und setzen die oben &quot;Y&quot; Verzweigung der inneren Hirnarterie (ICA) und externe Arteria cerebri (ECA). Zur Unterstützung des CCA in Abnehmen, legen Sie die gebogenen Pinzette unter der CCA das Bindegewebe zu durchdringen und dann langsam erlauben , sie zu öffnen. </li></ol> 4. Vorbereitung der CCA für die MCAO Suture Insertion <ol><li> Legen Sie drei Segmente von Nylonfaden von etwa 4 cm in der Länge unter der CCA. Stellen Sie sicher, dass der CCA nicht verdreht ist, da dies drastisch um das Einsetzen des Naht erschweren würde. </li><li> Am tiefsten Punkt möglich, schließen Sie die untere Naht einen permanenten Knoten. </li><li> Binden Sie die obere Naht knapp unter dem ICA / ECA Verzweigung einen herausnehmbaren Schlupf Knoten. </li><li> Binden Sie die mittlere Naht einen abnehmbaren Laufknoten verwenden, aber halten Sie es weit offen. Es ist wichtig, viel Platz zu verlassen, da nicht Naht Einsetzen zu verhindern. </li><li> Mit microdissection Frühjahr scissors, führen Sie einen Einschnitt in der CCA zwischen dem unteren und mittleren Nähten. Führen Sie die 0,2 mm Einschnitt nahe dem Boden Naht. </li></ol> 5. Middle Cerebral Artery Occlusion <ol><li> Mit einer Pinzette, legen Sie die MCAO Naht in die CCA Einschnitt, Führungs es bis an die Spitze. Führen Sie diesen Schritt schnell nach dem Schritt 4,5 bis Blutgerinnung und Schließen der CCA Öffnung verhindern. Für den Fall, dass Naht Einsetzen blockiert ist, verwenden Sie die Spitzen der Zange den Schnitt wieder zu öffnen. </li><li> binden vorsichtig die mittlere Naht auf der MCAO Nahtsilikonteil einen Belegknoten mit den Blutfluss um es zu beschränken, aber locker genug, um es zu ermöglichen, sich frei zu bewegen. </li><li> Vorsichtig lösen Sie die obere Naht, um sicherzustellen, dass die MCAO Naht nicht herausrutschen. </li><li> Legen Sie die MCAO Naht in der ICA um ein paar Millimeter und dann die obere Naht wieder geschlossen, in der gleichen Weise wie in Schritt 5.2 beschrieben. </li><li> Führen Sie die MCAO Naht an der Okklusion Bereich. Anzeige der erfolgreichen Insertionoffensichtlich durch die geringe Menge an Blutrückfluss aus dem CCA Schnitt und dass die Silber-9-mm-Markierung wird zwischen dem CCA Einschnitt und der ICA / ECA Bifurkation entfernt. Eine weitere Bestätigung der erfolgreichen Okklusion kann Überwachungsverfahren unter Verwendung von beispielsweise einem Laser - Doppler - Blutströmungsüberwachungssystem 15, 16 erhalten werden. HINWEIS: Ein Tropfen in 90% der den Blutfluss zum Gehirn mittleren Bereich auf der okkludierte Bereich Seite zeigt die erfolgreiche Okklusion. </li><li> Nach dem erfolgreichen Verschluss, binden Sie die mittlere und obere Naht fest nach unten. Wenn Schein Einfügung ausgeführt werden, dürfen nicht Nähte wieder zu verschließen, sondern sofort überspringen 7.3 zu treten. </li></ol> 6. Incision Closing und postoperative Pflege <ol><li> Tuck in den Nähten in den Schnittbereich. </li><li> Entfernen Aufroller oder Gewebehaken und Kissen. </li><li> Saubere Nahtbereich mit einer sterilen Kochsalzlösung und mit einem Wattestäbchen. </li><li> Schließen Sie den Schnitt mit Nylonfaden / Nadel und Pinzette. </li> &lt;li&gt; Verwalten entzündungshemmende (zB Carprofen 10 mg / kg, sc) und analgetische ( zum Beispiel Buprenorphin 0,1 mg / kg sc, zweimal täglich) Drogen postoperative Beschwerden zu lindern. Legen Sie die Mäuse in einem Käfig auf einem Heizkissen platziert Hypothermie zu verhindern und ad labium Zugang zu Wasser und erweicht Nahrung geben. </li><li> Überwachen Sie die Wiederherstellung von Tieren (5 - 10 min) und auf Anzeichen von Schlaganfall. Sie können von einer leichten seitlichen Lähmung variieren und kreisen zu starken Kontraktion der Gegenflanke und Rollen. Mehrere Bewertungspunkte werden in der Diskussion aufgeführt. Tiere Anzeichen von Atemnot oder schwere Anfälle Anzeige sollte eingeschläfert werden. </li><li> Je nach Ischämie Reperfusion Protokoll, lassen Sie die MCAO Naht anstelle von 30 min bis 120 min oder mehr. Okklusionszeit Reduzierung verhindert Mortalität. </li><li> Für einen dauerhaften Verschluss, lassen Sie die MCAO Naht an Ort und Stelle für 24 Stunden, jedoch signifikante Mortalitätsrate zu erwarten ist. Nach dieser Zeit außer Kraft treten, gehen steS. 7. <ol><li> Bei der Verwendung von permanenten Okklusion Modell, halten Mäuse im Käfig bis Endpunkt. Zu diesem Zeitpunkt entfernen Naht (Schritte 7,1-7,8). Dieses Verfahren kann auch nach der Euthanasie durchgeführt werden. </li></ol></li></ol> 7. Reperfusion <ol><li> Anesthetize das Tier wieder (folgen Sie den Anweisungen in 2.1) und Wundverschluss Nähte entfernen. </li><li> Mit einer Pinzette und Gewebe-Separatoren, die Inzision wieder öffnen und die CCA aussetzen. </li><li> Sie vorsichtig die obere Naht entfernen und vorsichtig auf die MCAO Naht ziehen, bis das Silikon beschichtete Teil in der Mitte Knoten befindet. </li><li> Wiederholen Sie die oben Knoten auf der Naht Blut zu verhindern, dass das Fließen des Naht passieren (es muss nicht ein Belegknoten sein). </li><li> Vorsichtig den mittleren Knoten lösen und die Naht nach dem oberen Knoten ziehen, aber es innerhalb des CCA halten. </li><li> Dicht schließen Sie die obere Knoten Arterie den Blutfluss zu blockieren. </li><li> Ziehen Sie vollständig die MCAO Naht und schließen dicht den mittleren Knoten. </li><li> Die MCAO Naht kannwiederverwendet mehrmals. Nach jedem Gebrauch reinigen Sie die Naht vorsichtig in 70% Ethanol Verunreinigungen (zB Blut oder Gewebe) mit einer sterilen Gaze zu entfernen. Danach legen Sie die Naht in einem Sterilisator Beutel und sterilisieren. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 6,1-6,4 und Tier Erholung zu überwachen. </li></ol> 8. Gewebeanalyse <ol><li> Zur Überwachung des Schlagvolumens, sezieren aus dem Gehirn. <ol><li> Euthanize die Maus einen zweistufigen Prozess. Zunächst aussetzen, das Tier zu einer Überdosierung von Isofluran bis Atemstillstand. Für TTC-Färbung, enthaupten die Maus sofort und fahren Sie mit Gehirn-Extraktion. Für Hirnschnitt (zB für Immunofärbung Analysen), die Perfusion über eine Herzpunktion vor der Enthauptung zuführen. </li><li> den Kopf an der Basis des Schädels und schneiden Sie die Kopfhaut von der Halsöffnung an der Oberseite des Schädels bis zwischen den Augen Cut-off. Mit dem Schädel ausgesetzt, schneiden Sie den Knochen auf beiden Seiten von der Schädelbasis Öffnung beginnenbis zur Augenhöhle. Machen Sie diesen Schnitt entlang der breiten Teil des Schädels. Seien Sie vorsichtig, nicht zu tief zu erreichen mit einer Schere zu schädigen das Gehirn zu verhindern. </li><li> Danach schneiden Sie den Knochen zwischen den beiden Augenhöhlen. </li></ol></li><li> Mit einer Pinzette, heben Sie die Oberseite des Schädels bis das Gehirn aus. Es sollte nur ein geringer Widerstand sein. Wenn es nicht leicht anheben, Schädel Einschnitte unvollständig sein kann. Hebeln Sie das Gehirn sanft stumpf gebogenen Pinzette. Das Gehirn kann noch durch mehrere Nerven angebracht werden. Fahren Sie langsam, Anlagen auf dem Weg zu entfernen. </li><li> Legen Sie die frische Gehirn in einem 1 mm Gehirn Matrix, fügen Sie ein paar Tropfen PBS, und in Scheiben schneiden entlang der Matrix mit einer Rasierklinge oder Kryostaten Klinge. </li><li> Übertragen Sie das Gehirn auf eine 100-mm-Schale und fügen Färbelösung (2% 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid [TTC], gelöst in PBS), um den Boden der Schale zu bedecken. Mit Hilfe von zwei Zangen, trennen Sie alle Gehirnscheiben (vorne nach unten) und legen Sie sie an der Unterseite der Schale um. HINWEIS: Die Färbung wird sich lebensfähiges Gewebe rot, mit nicht lebensfähiges Gewebe verbleibenden weißen. Erwärmen der Lösung auf 37 ° C beschleunigt Färbung. Anzeichen für einen Schlaganfall Bereich (weiß) so schnell wie 90 Minuten nach Schlaganfall und bleiben für mehr als 7 Tage sichtbar zu sehen ist. Imaging sollte zusammen mit einem Lineal erfolgen Berechnung des Schlagvolumens zu ermöglichen. </li><li> Prozess seziert Gehirne für das Schneiden, Immunfärbung, Proteinisolierung oder eine Vielzahl von anderen Verfahren 17, 18, 19. </li></ol>

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Authors have no competing or conflicts of interest.

Die erfolgreiche Anwendung des beschriebenen Verfahrens MCAO ist stark abhängig von einem Verständnis der Hirndurchblutung Anatomie. Da die korrekte Platzierung der Naht ist schwer aufgrund des fehlenden direkten visuelle Hinweise zu erkennen, wird wiederholt der Praxis wichtig, das Verfahren zu meistern, bevor es für den Untersuchungen verwendet. Hubvolumen sollten konsistente Ergebnisse zu gewährleisten, werden analysiert. Die Zugabe eines Laser-Doppler-System kann dazu beitragen, die erfolgreiche Okklusion des Blutflusses zu bestimmen, und sollte periodisch verwendet werden, um sicherzustellen, daß das Verfahren korrekt durchgeführt wird. Verlegung des MCAO Naht an der Okklusion Bereich kann durch Manipulation der Arterie erleichtert werden. Um die Naht zu dem MCA in Führungs, sobald es hat gerade die ECA / ICA Verzweigungs, drücken gegen die ICA geringfügig oberhalb der Verzweigung (2-3 mm) mit einer Zange um die Naht nach links zu lenken / unten und verhindern, dass es geht in die pterygopalatinum Arterie. Darüber hinaus das Kissen in Schritt 3.3 oder PU platziert bewegenBefüllungs Knoten die von unten nach oben und nach rechts kann bei der Ausrichtung der Arterie helfen, das Einführen zu erleichtern. Die verbleibenden Schritte des Protokolls umfassen Mikrochirurgie unter Stereomikroskop und sind relativ einfach. Die Erfolgsrate der Methode beschrieben, wie unsere Gruppe und berichtet von anderen erhalten, ist von rund 80 bis 90%. Dennoch können mehrere Faktoren das Überleben beeinflussen, einschließlich der Kontrolle der Körpertemperatur und der Fadenauswahl 20, 21, 22. Die Erhaltung der Tierkörpertemperatur während der Operation ist wichtig, das Überleben der Tiere zu verbessern. In Abhängigkeit von der Erfahrung des Benutzers kann dieses Verfahren in einem Hochdurchsatz Weise eingesetzt werden, um eine große Gruppe von Tieren zu untersuchen. Die statistische Signifikanz von tierexperimentellen Studien hängt von der Verwendung von ausreichenden Anzahl von Probanden zwischen den Behandlungsgruppen trotz intrinsischen Unterschiede zwischen den Versuchstieren zu erkennen. DasProtokoll vorgestellt ermöglicht solche Studien, während eng Teile des Krankheitsprozesses neu zu erstellen. Der Vorteil der MCAO Technik ist, dass, während es einige chirurgische Verfahren beinhaltet, ist es nicht sehr invasive Verfahren erfordert, wie in der Kraniotomie Modell. Darüber hinaus ist es in hohem Maße reproduzierbar und der Reperfusion ist höchst kontrollierbar, was nicht möglich ist, die Endothelin-1 oder der embolischen Schlaganfall Modelle. Die Technik ahmt den Prozess eines menschlichen ischämischem Schlaganfall und produziert Verletzungen charakteristische Gewebe beim Menschen gesehen, was nicht der Fall für die photothrombosis Modell. Im Vergleich zu anderen veröffentlichten Techniken, wird der MCAO Verfahren nicht die Kauterisation des ECA erfordern. Dies ist ein Vorteil , da sie mit unserer ICA Infusionsmodell kombiniert werden können therapeutische Mittel an den betroffenen Hemisphäre nach Schlaganfall Induktions 23, 24, 25 zu liefern. Zusätzlich zur Gewebeanalyse kann das Verhalten der Tiere in Längsrichtung der Schlaganfallschwere und Erholung zu bewerten überwacht werden. Dies kann helfen, Erholung zwischen den verschiedenen Behandlungsgruppen zu vergleichen. Mehrere Ansätze wurden, um zu bewerten Verhalten entwickelt. Eine einfache 5-Punkte-Skala kann verwendet werden, um neurologische Defizit nach Schlaganfall (0 bewerten: Nein Verhalten Defizit; 1: Keine kontralateralen forepaw Erweiterung; 2: Einkreisen auf der Gegenseite des Infarkts, 3: Fallen auf der Gegenseite der Infarkt; 4: Niedrige Bewusstseinsniveau und spontane Bewegung) 5. Darüber hinaus kann in eingehenden Analyse der Tier Zustand und das Verhalten durchgeführt werden Erholung zu bewerten als 2 in Tabelle 1 1 beschrieben. Das chirurgische Verfahren vorgestellt verwendet ein mechanisches Verfahren zur Induktion von Schlaganfall, die in Studien über Schlaganfall Suszeptibilität Nutzung dieser Technik begrenzt und / oderErreger. Allerdings kann dieses Protokoll bemerkenswert nützlich sein bei der Analyse Schlaganfall Schwere, deren Vermeidung oder Begrenzung Strategien, erschwerende Faktoren und mögliche Therapieansätze nach Schlaganfall. Vergleich zwischen den Behandlungsgruppen können bei der Identifizierung von potenziellen Behandlung helfen, die Schlaganfall Schaden minimieren können oder Erholung zu beschleunigen. Tatsächlich Erholung verbessern helfen Schlaganfall-Patienten von großer Bedeutung wäre.

Die Studie von kardiovaskulären Erkrankungen, wie Schlaganfall, beruht auf der Verwendung von in vivo - Modellen. Um die möglichen Auswirkungen von Ischämie, Arzneimitteltoxizität zu verstehen und / oder Behandlung, besteht ein Bedarf, einen geeigneten, standardisiert, zuverlässig zu verwenden und reproduzierbares Modell der Krankheit, die zwischen den Behandlungsgruppen vergleichende Untersuchungen ermöglicht. In diesem Manuskript, verwenden wir Mäuse, da die Verfügbarkeit einer großen Anzahl von transgenen Mäusen und standardisierte Bewertungsmodelle. Raking Partituren Motor und Verhaltensdefiziten folgenden experimentellen ischämischen Schlaganfall und der folgenden Erholung wurden 1 zu beurteilen , entwickelt, 2. Mehrere ischämischen Schlaganfall-Modelle stehen zur Verfügung, wie zum Beispiel komplette globale zerebrale Ischämie, unvollständige globale Ischämie, multifokale zerebrale Ischämie und fokaler zerebraler Ischämie. Die letztere Gruppe ist auch die Kategorie des Schlaganfalls am häufigsten bei Patienten. Die Mehrheit der Vorabendnts werden durch die Bildung eines embolischen oder thrombotischen Okklusion an oder nahe der mittleren zerebralen Arterie (MCA) initiiert. Vor dem Hintergrund dieser Parameter präsentierte das Modell ahmt Krankheitsätiologie des menschlichen Schlaganfall und macht erhaltenen Ergebnisse höchst relevant 3. Dennoch hat sich die Übersetzung von Entdeckungen aus Tiermodellen auf die Behandlung von Krankheiten beim Menschen erwiesen schwierig. Bisher ist nur die Verwendung der Thrombolyse Gewebe - Plasminogen - Aktivator wurde für die Behandlung des akuten ischämischen Schlaganfalls 4 zugelassen. Unter Modellen von fokaler zerebraler Ischämie in der Maus, sind cerebri posterior Zirkulation Hubmodell und Hirnvenenthrombose-Modell sehr invasiv, deren Anwendbarkeit verringern und die Bandbreite der Analysen zu beschränken, die durchgeführt werden können. Jedoch können auch andere Techniken, wie zum Beispiel die embolischen Modell, photothrombosis Modell, Endothelin-1-induzierten Schlaganfall-Modell und intraluminalen Naht Arteria cerebri media Okklusion (MCAO) Modell sind für den Einsatz ohne solche Einschränkungen zur Verfügung. Das MCAO-Modell ist eine Technik, die in diesem Protokoll beschrieben. Es bietet eine zuverlässige Methode der fokaler zerebraler Ischämie zu induzieren, die leicht Reperfusion und in einem Hochdurchsatz-Art und Weise durchgeführt werden kann. Es gibt zwei Ansätze für dieses Modell, nämlich die Zea-Longa und Koizumi Methoden. Sie unterscheiden sich etwas in der Art und Weise der Okklusion Naht in das Gefäßsystem eingeführt wird. In der Zea Longa-Technik wird der Faden über die Arteria carotis externa 5 eingesetzt. Die Technik , die hier präsentiert wird vom Koizumi Verfahren modifiziert , in der die okkludierende Naht über die Arteria carotis communis 6 eingesetzt ist. Das MCAO-Modell wurde erfolgreich verschiedene Ereignisse, die während ischämischen Schlaganfall zu bewerten angewendet. Nach Reperfusion kann Hirnödem mit dem Zusammenbruch der Blut-Hirn-Schranke beobachtet entlang werden. Peak-neuronalen Tod wird in der Regel bei 24 Stunden beobachtet; Es können jedoch wiederdreht sich auf das Ausgangsniveau nach 7 Tagen 7. Bei Menschen, Geschlecht und Alter sind wichtige Variablen bei Schlaganfall Ergebnis der Bestimmung, dies auch bei Mäusen und Ratten beobachtet 8, 9, 10. Mehrere Veröffentlichungen haben die MCAO - Modell zu zeigen , die Behandlungseffizienz 11, 12, 13, 14 verwendet.

<table><tbody><tr><td>MCAO suture 0.23 mm</td><td>Doccol</td><td>702345PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>MCAO suture 0.21 mm</td><td>Doccol</td><td>702145PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>Silver pen</td><td>staples</td><td>503205</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia machine</td><td>Vetequip</td><td>901806</td><td></td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td>Fine science tool</td><td>14558-09</td><td></td></tr><tr><td>Surgical forceps straight tip</td><td>Fine science tool</td><td>00108-11</td><td></td></tr><tr><td>Surgical forceps angled tip</td><td>Fine science tool</td><td>00109-11</td><td></td></tr><tr><td>Spring scissors</td><td>Fine science tool</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Nylon suture</td><td>Braintree scintific</td><td>SUT-S 104</td><td></td></tr><tr><td>Closing suture</td><td>VWR</td><td>95057-036</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td><td>FisherSci</td><td>50-121-8005</td><td></td></tr><tr><td>Brain block</td><td>Braintree scintific</td><td>BS-A 5000C</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat blade</td><td>VWR</td><td>89202-606</td><td></td></tr><tr><td>Optional:</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Periflux Laser doppler system</td><td>Perimed</td><td>Periflux 5000</td><td></td></tr><tr><td>Monitoring unit</td><td>Perimed</td><td>PF 5010 - LDPM</td><td></td></tr></tbody></table>

induction of ischemic stroke and ischemia-reperfusion in mice using the middle artery occlusion technique and visualization of infarct area

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of stroke on tissue injury and to evaluate the effectiveness of therapeutic interventions, several experimental models in a variety of species were developed. They include complete global cerebral ischemia, incomplete global ischemia, focal cerebral ischemia, and multifocal cerebral ischemia. The model described in this protocol is based on the middle cerebral artery occlusion (MCAO) and is related to the focal ischemia category. This technique produces consistent focal ischemia in a strictly defined region of the hemisphere and is less invasive than other methods. The procedure described is performed on mice, given the availability of several genetic variants and the high number of tests standardized for mice to aid in the behavioral and neurodeficit evaluation.

Die Einfügungs Route für die Okklusion Naht wird in Abbildung 1 gezeigt. Die MCAO Naht ist in die Okklusion Bereich geführt werden, in der ICA-gegabelt. Erfolgreiche Verschluss der MCA wird auf Gewebeverletzung, sichtbar durch TTC-Färbung führen. Abbildung 2 zeigt Bilder der Färbung von Schein - behandelten Tier (2A) und von einer 60 min MCAO Ischämie Reperfusion Tier (Färbung bei 90 min oder 24 Stunden nach der Okklusion, 2B). Um das Schlagvolumen zu bestimmen, berechnen zuerst den Hubbereich für jeden Abschnitt, mit dem Lineal in dem Bildgebungsverfahren einbezogen, durch die Nicht-Infarkt-Bereich der ipsilateralen Seite von der Gesamtfläche der Gegenseite abgezogen wird. Diese Berechnung kann unter Verwendung von kommerzieller Software oder Open-Source-Software durchgeführt werden. Danach Schlagvolumen für jede Scheibe unter Berücksichtigung berechnen, dass Dias 1 mm dick sind und fassen die Hubvolumen for alle Scheiben. Durch dieses Verfahren wird das gesamte Hubvolumen für jedes Tier zur Verfügung stellen, die dann zwischen den verschiedenen Tiergruppen und Behandlungen verglichen werden. Im Durchschnitt eine 60 min Okklusion nach 23 h Reperfusion resultiert in einem Hubvolumen von etwa 21 ± 3 mm 3 in Wildtyp nicht-behandelten C57BL / 6J - Mäuse 15 Wochen alt gefolgt. Neben Hubvolumen untersuchen kann Immunofluoreszenz für eine Vielzahl von Zielen durchgeführt werden, wie Mikrotubuli-assoziiertes Protein-2 (MAP2) für neuronale Schädigung (3A) oder glial fibrillary acidic protein (GFAP) für Astrogliose (3B). Solche Analysen weiter die Analyse von Schlaganfall Progression und Erholung sowie andere Prozesse in der Schlaganfall-Gewebeschäden und Reparatur beteiligt ermöglichen. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/54805/54805fig1.jpg" /> Abbildung 1: </st<html> rong&gt; Schematische Darstellung der Gehirn Arterielle Physiologie. Route der MCAO Insertion Erlös aus der Arteria carotis communis (CCA) an die Okklusion Bereich in blau angegeben. (:;: Mittelnaht; BS: Bodennaht MS Top Naht TS) Der OP-Bereich befindet sich am unteren Ende der Figur (ovale Form) und Nahtplatzierung befindet sich durch schwarze Linien angedeutet. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54805/54805fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54805/54805fig1large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/54805/54805fig2.jpg" /> Abbildung 2: TTC - Färbung von Gehirnschnitten. Top-Panel stellen typische Färbung folgende Schein Insertion. um 90 Minuten oder 24 Stunden Reperfusion mittleren und unteren Platten wurden nach einer 60-minütigen MCAO, gefolgt erhalten. Maßstabsbalken beträgt 1 mm. 3 &quot;src =&quot; / files / ftp_upload / 54805 / 54805fig3.jpg &quot;/&gt; Abbildung 3: Immunfluoreszenzanfärbung von Mäusehirn nach Schlaganfall. Nach einer 60-minütigen Okklusion wurden Gehirne für 23 Stunden, geerntet und verarbeitet für Kryoschneiden Reperfusion. Mit Antikörpern gegen MAP2 (oben) und GFAP (unten) wurde das Gewebe für die neuronale Verletzungen analysiert und astroglyosis entweder Schein (linke Felder) oder 90 min Ischämie-Reperfusion Gehirne (rechte Felder). Bilder präsentiert werden aus mehreren Bildern kombiniert durch konfokale Mikroskopie genommen ein 10X-Objektiv verwendet wird. Maßstabsbalken beträgt 1 mm. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54805/54805fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54805/54805fig3large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Bewertungskriterien </td><td></td><td colspan="3"></td></tr><tr><td> Allgemeinzustand </td><td> Haar Zustand </td><td colspan="3"> Selbstreinigungsverhalten (0: keine; 2: normal) </td></tr><tr><td> (0: Worst; 2: Normal) </td><td> Ohren </td><td colspan="3"> Ears Position (Droopy oder angehoben) </td></tr><tr><td></td><td></td><td colspan="3"> Hearing (Reactive oder nicht) </td></tr><tr><td></td><td> Augenzustand </td><td colspan="3"> Augenlid Position </td></tr><tr><td></td><td></td><td colspan="3"> Antwort </td></tr><tr><td></td><td> Haltung </td><td colspan="3"> Krabbeln, stützte sich, normal </td></tr><tr><td></td><td> Spontane Aktivität </td><td colspan="3"> Bewusstlos / keine Bewegung, niedrige Aktivität, normale Aktivität </td></tr><tr><td> Neurodeficit </td><td> Körpersymmetrie </td><td colspan="3"> Wenn die Maus ist immer noch (keine Bewegung, kriechen, Umkreisen, teilweise schiefe, normal) </td></tr><tr><td> (0: Worst; 4: Normal) </td><td> Gangart </td><td colspan="3"> Keine Bewegung, drehen, kreisen, auf der einen Seite zu Fuß, normal </td></tr><tr><td></td><td> Kletterei </td><td colspan="3"> Wanderverhalten auf angewinkelt Pfad (Kriterien wie Gait) </td></tr><tr><td></td><td> Umkreisen Verhalten </td><td colspan="3"> Lifting Tier am Schwanz (keine Bewegung, wirbelnden, Contracting auf der einen Seite, beide Seiten aber bevorzugt, normal) </td></tr><tr><td></td><td> Vorderschenkel Symmetrie </td><td colspan="3"> Schauen Sie sich Grabbing Verhalten von Vorderpfoten (No greifen überhaupt, nur eine Seite gewinnen, beide greifen aber eine Pfote starr, beide greifen aber ein ständig lose erste, normal) </td></tr><tr><td></td><td> Pflicht Umkreisen </td><td colspan="3"> Setzen Sie die Maus auf eine ebene Fläche und drücken Sie auf die Schulter von der Seite (keine Antwort / Bewegung, drehen, fallen auf der einen Seite, stützte sich mit Widerstand zu drücken, normal) </td></tr><tr><td></td><td> Whisker Antwort </td><td colspan="3"> Berühren Sie Whiskers der einen Seite zu der Zeit (keine Antwort, Whiskers Bewegung nur, drehen Sie den Kopf, drehen Stamm, normal)</td></tr><tr><td></td><td> Epileptische Verhalten </td><td colspan="3"> Verhalten nach plötzlichen Lärm oder Lichtwechsel (Bewusstlos, konsistente allgemeines Tonikum Krampf, vorübergehende allgemeines Tonikum Krampf, transienter fokaler Tonikum Krampf, normal) </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. Maßstab für die Beurteilung von Maus - Zustand und Neurodeficit Nach Ischemia Stroke. Angepasst von 1, 2.

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Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

Die Induktion von ischämischem Schlaganfall und Ischämie-Reperfusion bei Mäusen die Mittel Artery Occlusion Technik und Visualisierung von Infarktbereich verwenden

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

induction-ischemic-stroke-ischemia-reperfusion-mice-using-middle

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

16.2K Aufrufe.  University of Miami. We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

Serie: Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable clinical state; in the development of animal models of focal ischemia, however, achieving reproducibility of experimentally induced infarct volume is essential. The rat is a widely used animal model for stroke due to its relatively low animal husbandry costs and to the similarity of its cranial circulation to that of humans2,3. In humans, the middle cerebral artery (MCA) is most commonly affected in stroke syndromes and multiple methods of MCA occlusion (MCAO) have been described to mimic this clinical syndrome in animal models. Because recanalization commonly occurs following an acute stroke in the human, reperfusion after a period of occlusion has been included in many of these models. In this video, we demonstrate the transient endovascular suture MCAO model in the spontaneously hypertensive rat (SHR). A filament with a silicon tip coating is placed intraluminally at the MCA origin for 60 minutes, followed by reperfusion. Note that the optimal occlusion period may vary in other rat strains, such as Wistar or Sprague-Dawley. Several behavioral indicators of stroke in the rat are shown. Focal ischemia is confirmed using T2-weighted magnetic resonance images and by staining brain sections with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) 24 hours after MCAO.

Surgical induction of ischemic brain damage in the rat is a widely used model for stroke research. Here we demonstrate the induction of focal cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery. Visualization of the resulting infarct by histological staining and magnetic resonance imaging is also shown.

Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Forschung

Neurowissenschaften

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

Mouse Model of Middle Zerebralarterie

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Medizin

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United States in 20091,2. The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was developed by Koizumi4 in 1986 to simulate this 
impactful human pathology in the rat. A modification of the MCAO method was later presented by Longa3. Both techniques have been widely used to identify 
molecular mechanisms of brain injury resulting from ischemic stroke and potential therapeutic modalities5. This relatively noninvasive method in rats has been 
extended to use in mice to take advantage of transgenic and knockout strains6,7. To model focal cerebral ischemia, an intraluminal suture is advanced via 
the internal carotid artery to occlude the base of the MCA. Retracting the suture after a specified period of time mimics spontaneous reperfusion, but the 
suture can also be permanently retained. This video will be demonstrating the two major approaches for performing intraluminal MCAO procedure in mice in a 
stepwise fashion, as well as providing insights for potential drawbacks and pitfalls. The ischemic brain tissue will subsequently be stained by 
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to evaluate the extent of cerebral infarction8.

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

The intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is the most frequent used model among experimental ischemic stroke models. Here we will demonstrate the entire model in detail with the guide of Laser Doppler flowmetry, and its representative results.

Intraluminale Nahen Zerebralarterie (MCAO) Modell des ischämischen Schlaganfalls mit Laser-Doppler-Flussmessung Guidance in Mäuse

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to develop suitable animal models to study the events that unfold during ischemic insult. These techniques include transient or permanent, focal or global ischemia models using many different animal models, with the most common being rodents.
The permanent MCA ligation method which is also referred as pMCAo in the literature is used extensively as a focal ischemia model in rodents 1-6. This method was originally described for rats by Tamura et al. in 1981 7. In this protocol a craniotomy was used to access the MCA and the proximal regions were occluded by electrocoagulation. The infarcts involve mostly cortical and sometimes striatal regions depending on the location of the occlusion. This technique is now well established and used in many laboratories 8-13. Early use of this technique led to the definition and description of &#x201C;infarct core&#x201D; and &#x201C;penumbra&#x201D; 14-16, and it is often used to evaluate potential neuroprotective compounds 10, 12, 13, 17. Although the initial studies were performed in rats, permanent MCA ligation has been used successfully in mice with slight modifications 18-20 .
This model yields reproducible infarcts and increased post-survival rates. Approximately 80% of the ischemic strokes in humans happen in the MCA area 21 and thus this is a very relevant model for stroke studies. Currently, there is a paucity of effective treatments available to stroke patients, and thus there is a need for good models to test potential pharmacological compounds and evaluate physiological outcomes. This method can also be used for studying intracellular hypoxia response mechanisms in vivo. 
Here, we present the MCA ligation surgery in a C57/BL6 mouse. We describe the pre-surgical preparation, MCA ligation surgery and 2,3,5 Triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining for quantification of infarct volumes.

Middle cerebral artery (MCA) ligation is a technique to study focal cerebral ischemia in animal models. In this method, the middle cerebral artery is exposed by craniotomy and ligated by cauterization. This method gives highly reproducible infarct volumes and increased post-operative survival rates compared to other methods available.

Die Anwendung des dauerhaften mittleren Hirnarterie Ligation in der Maus

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining

Stroke is the third cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic stroke accounts for approximately 80% of all strokes. However, the thrombolytic tissue plasminogen activator (tPA) is the only treatment of acute ischemic stroke that exists. This led researchers to develop several ischemic stroke models in a variety of species. Two major types of rodent models have been developed: models of global cerebral ischemia or focal cerebral ischemia. To mimic ischemic stroke in patients, in whom approximately 80% thrombotic or embolic strokes occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), the intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is quite relevant for stroke studies. This model was first developed in rats by Koizumi et al. in 1986 1. Because of the ease of genetic manipulation in mice, these models have also been developed in this species 2-3.
	Herein, we present the transient MCA occlusion procedure in C57/Bl6 mice. Previous studies have reported that physical properties of the occluder such as tip diameter, length, shape, and flexibility are critical for the reproducibility of the infarct volume 4. Herein, a commercial silicon coated monofilaments (Doccol Corporation) have been used. Another great advantage is that this monofilament reduces the risk to induce subarachnoid hemorrhages. Using the Zeiss stereo-microscope Stemi 2000, the silicon coated monofilament was introduced into the internal carotid artery (ICA) via a cut in the external carotid artery (ECA) until the monofilament occludes the base of the MCA. Blood flow was restored 1 hour later by removal of the monofilament to mimic the restoration of blood flow after lysis of a thromboembolic clot in humans. The extent of cerebral infarct may be evaluated first by a neurologic score and by the measurement of the infarct volume. Ischemic mice were thus analyzed for their neurologic score at different post-reperfusion times. To evaluate the infarct volume, staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) was usually performed. Herein, we used cresyl violet staining since it offers the opportunity to test many critical markers by immunohistochemistry. In this video, we report the MCAO procedure; neurological scores and the evaluation of the infarct volume by cresyl violet staining.

The intraluminal middle cerebral occlusion model in mice is herein presented. The extent of cerebral infarct is evaluated by a neurologic score and cresyl violet staining, an alternative staining to TTC, offering the great advantage to test in parallel many interest markers.

Maus-Modell der Intraluminal MCAO: Hirninfarkt Evaluation durch Cresylviolett Staining

Stroke is the third  cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic  stroke accounts for approximately 80% of all strokes. ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ischemic in origin and occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA). Currently the only Food and Drug Administration (FDA) approved drug for the treatment of this devastating disease is tissue plasminogen activator (tPA). However, tPA has a small therapeutic window for administration (3 - 6 hr), and is only effective in 4% of the patients who actually receive it. Current research focuses on understanding the pathophysiology of stroke in order to find potential therapeutic targets. Thus, reliable models are crucial, and the MCA occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) is deemed to be the most clinically relevant surgical model of ischemic stroke, and is fairly non-invasive and easily reproducible. Typically the MCAo model is used with rodents, especially with mice due to all the genetic variations available for this species. Here we describe (and present in the video) how to successfully perform the MCAo model (with reperfusion) in mice to generate reliable and reproducible data.

In order to understand the pathophysiology of stroke, it is important to use reliable models. This paper will describe one of the most frequently used stroke models in mice, termed the middle cerebral artery occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) with reperfusion.

Chirurgische Ansatz für Arteria cerebri media Occlusion und Reperfusion fokaler zerebraler Ischämie bei Mäusen

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue plasminogen activator (tPA) as an approved drug treatment to target ischemic strokes. Current research in the field of ischemic stroke focuses on better understanding the pathophysiology of stroke, to develop and investigate novel pharmaceutical targets. Reliable experimental stroke models are crucial for the progression of potential treatments. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is clinically relevant and the most frequently used surgical model of ischemic stroke in rodents. However, the outcomes of this model, such as lesion volume, are associated with high levels of variability, particularly in mice. The alternative MCAO model described here allows the reperfusion of the common carotid artery (CCA) and the increased perfusion of the middle cerebral artery (MCA) territory, using a tissue pad with fibrinogen-based sealant to repair the vessel, and the improved welfare of the mice by avoiding external carotid artery (ECA) ligation. This reduces the reliance on the Circle of Willis, which is known to be highly anatomically variable in mice. Representative data show that using this alternative surgical approach decreases the variability in lesion volumes between the traditional MCAO approach and the alternative approach described here.

Intraluminal filament occlusion of the middle cerebral artery is the most frequently used in vivo model of experimental stroke in rodents. An alternative surgical approach to allow common carotid artery repair is performed here, which allows the reperfusion of the common carotid artery and a full reperfusion to the middle cerebral artery territory.

Mittlere zerebrale Arterie Okklusion so dass Reperfusion über gemeinsame Halsschlagader Reparatur bei Mäusen

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse model is useful for investigating the pathophysiology of cerebral ischemia-reperfusion and determining potential therapeutic strategies for patients with stroke. Variations in the anatomy of the circle of Willis of C57BL/6 mice affects their infarct volume after cerebral-ischemia-induced injury. Studies have indicated that distal MCA occlusion (MCAO) can overcome this problem and result in a stable infarct size. In this study, we establish a two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion through the interruption of the blood flow to the right MCA. We distally ligate the right MCA and right common carotid artery (CCA) and restore blood flow after a certain period of ischemia. This ischemia-reperfusion injury induces an infarct of stable size and a behavioral deficit. Peripheral immune cells infiltrate the ischemic brain within the 24 h infiltration period. Additionally, the neuronal loss in the cortical area is less for a longer reperfusion duration. Therefore, this two-vessel occlusion model is suitable for investigating the immune response and neuronal recovery during the reperfusion period after cerebral ischemia.

A mouse model of cerebral ischemia-reperfusion is established to investigate the pathophysiology of stroke. We distally ligate the right middle cerebral artery and right common carotid artery and restore blood flow after 10 or 40 min of ischemia.

Zwei-Schiff Okklusion Mausmodell der zerebralen Ischämie-reperfusion

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Ein Modell der transitorischen zerebralen Ischämie durch Verschluss der Arteria cerebralis media

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

Autor im Rampenlicht: Bewertung von ischämischen Schlaganfallschäden durch ein Modell zur Okklusion der mittleren Hirnarterie 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

Die Induktion von ischämischem Schlaganfall und Ischämie-Reperfusion bei Mäusen die Mittel Artery Occlusion Technik und Visualisierung von Infarktbereich verwenden

Zusammenfassung

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Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Mouse Model of Middle Zerebralarterie

Intraluminale Nahen Zerebralarterie (MCAO) Modell des ischämischen Schlaganfalls mit Laser-Doppler-Flussmessung Guidance in Mäuse

Die Anwendung des dauerhaften mittleren Hirnarterie Ligation in der Maus

Maus-Modell der Intraluminal MCAO: Hirninfarkt Evaluation durch Cresylviolett Staining

Chirurgische Ansatz für Arteria cerebri media Occlusion und Reperfusion fokaler zerebraler Ischämie bei Mäusen

Mittlere zerebrale Arterie Okklusion so dass Reperfusion über gemeinsame Halsschlagader Reparatur bei Mäusen

Zwei-Schiff Okklusion Mausmodell der zerebralen Ischämie-reperfusion

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls