Diese Arbeit wurde teilweise durch NIH AI069358 und die BloodCenter Research Foundation unterstützt.

<ol><li> Vor Beginn des Prozesses, müssen die folgenden Punkte zu sein, gesammelt und aufbereitet: <ul><li> Eis </li><li> 5ml Spritze mit 27g Nadel </li><li> 5ml Spritze mit 25G-Nadel </li><li> Styropor-Block und Stifte für die Montage der Maus </li><li> Tablett, auf dem der Montageblock platziert werden können </li><li> Schere und Pinzette </li><li> Sammelröhrchen </li><li> 70% Ethanol </li><li> PBS mit 3% fötalem Kälberserum (FCS) (Pre gekühlt und auf Eis gehalten) </li></ul></li><li> Euthanize der Maus, sprühen sie mit 70% Ethanol und montieren Sie ihn auf den Styropor-Block auf den Rücken. </li><li> Mit einer Schere und Pinzette schneiden die Außenhaut des Bauchfells und ziehen Sie es vorsichtig zurück in die Innenhaut Auskleidung der Bauchhöhle aussetzen. </li><li> Inject 5 ml eiskaltem PBS (mit 3% FCS) in die Bauchhöhle mit einer 27g Nadel. Drücken Sie die Nadel langsam in das Bauchfell man aufpassen, nicht zu durchstechen alle Organe. </li><li> Nach der Injektion sanft massieren das Bauchfell an alle angeschlossenen Zellen in der PBS-Lösung zu entfernen. </li><li> Legen Sie eine 25 g Nadel-, Kegel auf, an einer 5 ml Spritze in das Bauchfell und sammeln die Flüssigkeit während der Bewegung die Spitze der Nadel vorsichtig, um ein Verstopfen durch das Fettgewebe oder anderen Organen. Sammeln Sie so viel Flüssigkeit wie möglich und Einzahlung der gesammelten Zellsuspension in Röhrchen auf Eis nach dem Entfernen der Nadel von der Spritze gehalten. Optional: Wiederholen Sie Schritt 4-6 </li><li> Machen Sie einen Schnitt in der inneren Haut des Bauchfells und während hält die Haut mit einer Pinzette einen Kunststoff Pasteurpipette auf die verbleibenden Flüssigkeit aus dem Hohlraum sammeln. </li><li> Wenn in Schritt 6 oder 7 sichtbaren Kontamination mit Blut festgestellt wird dann das verunreinigte Probe zu verwerfen. </li><li> Spin der gesammelten Zellsuspension bei 1500 RPM für 8 Minuten, den Überstand verwerfen und Zellen in das gewünschte Medium oder PBS für das Zählen. </li></ol> Alternative Protokoll Thioglycolat erhalten hervorgerufen Makrophagen: Diese Methode wird verwendet, um eine höhere Ausbeute an Makrophagen zu erhalten. <ol><li> Inject 5 ml 3% (w / v) Brewer Thioglycolat Medium (7) in die Bauchhöhle von jeder Maus. </li><li> Warten Sie 3-5 Tage und fahren bis 1 oben für die Entnahme der Zellen Schritt. </li></ol> Im Vergleich zu den nonelicited Ansatz können etwa 10 mal mehr Makrophagen gesammelt werden. Die einzige Sorge ist, dass Makrophagen durch dieses Verfahren erhalten in einigen ihrer physiologischen Eigenschaften unterscheiden. Repräsentative Ergebnisse: Von einem unmanipulierten Maus können 5 bis 10.000.000 Bauchhöhle Zellen mit einer guten Isolierung Protokoll erreicht werden. Unter allen lebenden Zellen, 50-60% B-Zellen sind, sind ca. 30% Makrophagen und 5-10% T-Zellen (Abb. 1). <img src="/files/ftp_upload/1488/1488fig1.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1. Phänotyp von Zellen aus der Bauchhöhle getrennt. Nach der Isolierung der Bauchhöhle Zellen wurden mit anti-Maus-FITC TCRβ, B220-PE-Texas-Rot, CD11b-Pazifik blau, CD23-PE-Cy7 und CD5-APC. Vertreter durchflusszytometrischen Plots zeigen Prozentsätze der B-und T-Zellen (a), Makrophagen (b), B1 und B2-Zellen (c) und B1a und B1b-Zellen (d).

<ol><li>Zhang, X., Goncalves, R., Mosser, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+isolation+and+characterization+of+murine+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">The isolation and characterization of murine macrophages.</a> Current Protocols in Immunology. , (2008).</li>
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<li>Baumgarth, N., Herman, O. C., Jager, G. C., Brown, L. E., Herzenberg, L. A., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B-1+and+B-2+cell-derived+immunoglobulin+M+antibodies+are+nonredundant+components+of+the+protective+response+to+influenza+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">B-1 and B-2 cell-derived immunoglobulin M antibodies are nonredundant components of the protective response to influenza virus infection.</a> J. Exp. Med. 192, 271-280 (2000).</li>
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</ol>

Isolation der Bauchhöhle Zellen ist eine wichtige Technik für die Untersuchung von verschiedenen Immunzellen, vor allem Makrophagen und spezifische B-Zell-Subpopulationen. Obwohl dies ein einfacher Vorgang, es gibt einige wichtige Schritte beteiligt. Vorhandensein von kontaminierenden Blut in den gesammelten Proben sollte vermieden werden, um eine reine Bauchhöhle Zellpopulation zu erhalten. Euthanasie durch Genickbruch sollte sorgfältig durchgeführt werden, um Kontamination mit Blut in der Bauchhöhle zu vermeiden. Alternativ CO 2 eingesetzt werden kann. Darüber hinaus sollte im Laufe des Verfahrens die richtige Pflege genommen, um zu vermeiden Punktion der Blase oder anderer Organe in der Bauchhöhle werden. Wiederherstellen meisten der injizierten Flüssigkeit ist auch wichtig, um die Zelle zu erhalten. Dieses Verfahren ist weit verbreitet, um Makrophagen Biologie seit moderate Zahl der Einwohner studieren, können nicht stimulierten Makrophagen leicht aus der Bauchhöhle gewonnen werden, im Gegensatz zu den mühsamen Aufgabe der Differenzierung myeloischer Vorläuferzellen zu reifen Makrophagen in vitro mit Makrophagen-Kolonie-stimulierender Faktor (8 , 9). Die Makrophagen-Ausbeute aus der Bauchhöhle kann durch die Verwendung der Thioglycolat Erhebung Methode verbessert werden, obwohl Thioglycolat Nutzung physiologischen Eigenschaften der Makrophagen (7) verändern könnten. B-Zellen sind ein wichtiger Teil unseres Immunsystems spielen eine entscheidende Rolle bei angeborenen und erworbenen Immunität. Unter den verschiedenen B-Zell-Subpopulationen umfassen B1-Zellen eine einzigartige Subpopulation von B-Zellen in der angeborenen Immunität, Autoimmunität und Immunregulation beteiligt. B1-Zellen sind in erster Linie in der Bauchhöhle und sind selbst Nachfüllen. Sie sind einer der wichtigsten Produzenten von natürlichen IgM, die die erste Verteidigungslinie gegen eine Reihe von Viren und Bakterien (10-12) zur Verfügung stellt. B1-Zellen sind auch eine wichtige Quelle von IL-10 (6), die eine wichtige Zytokin in der Immunregulation beteiligt ist. Obwohl mehrere Studien mit dem B1-Zellen ausgeübt worden sein, noch gibt es Spielraum für die weitere Auswertung ihrer gegensätzlichen Funktionen, die speziell ihre regulatorische Rolle. Bauchhöhle Zellisolation Methode bietet die einzigartige Möglichkeit, die Funktionen des B1-Zellen zu studieren.

<table><tbody><tr><td>Thioglycollate Medium, Brewer Modified</td><td>BD Biosciences</td><td>211716</td><td></td></tr></tbody></table>

isolation of mouse peritoneal cavity cells

Die Bauchhöhle ist eine Membran-gebundene und mit Flüssigkeit gefüllte Bauchhöhle von Säugetieren, die die Leber, die Milz, die meisten von den Magen-Darm-Trakt und anderen Innereien enthält. Es birgt eine Reihe von Immunzellen einschließlich Makrophagen, B-Zellen und T-Zellen. Die Anwesenheit einer großen Zahl von naiven Makrophagen in die Bauchhöhle macht es zu einem bevorzugten Standort für die Sammlung von naiven Gewebe Makrophagen (1). Die Bauchhöhle ist auch wichtig, die Studie von B-Zellen durch die Anwesenheit eines einzigartigen Bauchhöhle ansässige B-Zell-Untergruppe als B1-Zellen zusätzlich zur konventionellen B2-Zellen bekannt. B1-Zellen werden in B1a und B1b-Zellen, die durch die Oberflächenexpression von CD11b und CD5 unterschieden werden können unterteilt. B1-Zellen sind eine wichtige Quelle der natürlichen IgM frühzeitige Schutz vor einer Vielzahl von Erregern (2-4). Diese Zellen sind autoreaktive in der Natur (5), sondern wie sie kontrolliert werden, um Autoimmunität zu verhindern, ist noch nicht vollständig verstanden. Im Gegenteil, CD5<sup&gt; +</sup&gt; B1a-Zellen besitzen einige regulatorische Eigenschaften durch ihre IL-10 produzieren Kapazität (6). Daher sind Bauchhöhle B1-Zellen eine interessante Zellpopulation aufgrund ihrer unterschiedlichen Funktion und viele unadressierte Fragen mit ihrer Entwicklung und Regulierung verbundenen studieren. Die Isolierung der Bauchhöhle ansässigen Immunzellen ist wegen des Fehlens einer definierten Struktur im Inneren der Bauchhöhle tricky. Unser Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Gewinnung von lebensfähigen Immunzellen aus der Bauchhöhle von Mäusen, die dann für phänotypische Analyse mittels Durchflusszytometrie und für verschiedene biochemische und immunologische Tests eingesetzt werden kann.

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Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

Die Bauchhöhle bei Säugetieren enthält verschiedene Immunzellen Bevölkerung entscheidend für angeborenen Immunantwort. Eine effiziente Isolierung Methode ist für biochemische und funktionelle Analyse dieser Zellen erforderlich ist. Hier bieten wir eine umfassende Methode zur Isolierung von Bauchhöhle Zellen in der Maus.

Isolierung von Maus Bauchhöhle Cells

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

isolation-of-mouse-peritoneal-cavity-cells

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

143.3K Aufrufe.  Blood Research Institute. Die Bauchhöhle bei Säugetieren enthält verschiedene Immunzellen Bevölkerung entscheidend für angeborenen Immunantwort. Eine effiziente Isolierung Methode ist für biochemische und funktionelle Analyse dieser Zellen erforderlich ist. Hier bieten wir eine umfassende Methode zur Isolierung von Bauchhöhle Zellen in der Maus.

Serie: Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the respiratory tract. At least three main subsets of lung dendritic cells have been described in mice: conventional DC (cDC) 4, plasmacytoid DC (pDC) 5 and the IFN-producing killer DC (IKDC) 6,7. The cDC subset is the most prominent DC subset in the lung 8. 
The common marker known to identify DC subsets is CD11c, a type I transmembrane integrin (&beta;2) that is also expressed on monocytes, macrophages, neutrophils and some B cells 9. In some tissues, using CD11c as a marker to identify mouse DC is valid, as in spleen, where most CD11c+ cells represent the cDC subset which expresses high levels of the major histocompatibility complex class II (MHC-II). However, the lung is a more heterogeneous tissue where beside DC subsets, there is a high percentage of a distinct cell population that expresses high levels of CD11c bout low levels of MHC-II. Based on its characterization and mostly on its expression of F4&#47;80, an splenic macrophage marker, the CD11chiMHC-IIlo lung cell population has been identified as pulmonary macrophages 10 and more recently, as a potential DC precursor 11. 
In contrast to mouse pDC, the study of the specific role of cDC in the pulmonary immune response has been limited due to the lack of a specific marker that could help in the isolation of these cells. Therefore, in this work, we describe a procedure to isolate highly purified mouse lung cDC. The isolation of pulmonary DC subsets represents a very useful tool to gain insights into the function of these cells in response to respiratory pathogens as well as environmental factors that can trigger the host immune response in the lung.

A highly purified preparation of mouse lung dendritic cells is described. Specific emphasis is given to the isolation of conventional dendritic cell subset.

Isolierung von Maus Lung Dendritischen Zellen

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Forschung

Immunologie und Infektion

Isolating And Immunostaining Lymphocytes and Dendritic Cells from Murine Peyer's Patches

Peyer's patches (PPs) are integral components of the gut-associated lymphoid tissues (GALT) and play a central role in intestinal immunosurveillance and homeostasis. Particulate antigens and microbes in the intestinal lumen are continuously sampled by PP M cells in the follicle-associated epithelium (FAE) and transported to an underlying network of dendritic cells (DCs), macrophages, and lymphocytes. In this article, we describe protocols in which murine PPs are (i) dissociated into single cell suspensions and subjected to flow cytometry and (ii) prepared for cryosectioning and immunostaining. For flow cytometry, PPs are mechanically dissociated and then filtered through 70 &mu;m membranes to generate single cell suspensions free of epithelial cells and large debris. Starting with 20-25 PPs (from four mice), this quick and reproducible method yields a population of &gt;2.5 x 106 cells with &gt;90% cell viability. For cryosectioning, freshly isolated PPs are immersed in Optimal Cutting Temperature (OCT) medium, snap-frozen in liquid nitrogen, and then sectioned using a cryomicrotome. Tissue sections (5-12 &mu;m) are air-dried, fixed with acetone or methanol, and then subjected to immunolabeling.

There is an increasing interest in understanding the immunological functions of specific subpopulations of cells in Peyer's patches (PPs), the primary inductive sites of gut-associated lymphoid tissues. Here we outline parallel protocols for preparing PP single cell preparations for flow cytometric analysis and PP cryosections for immunostaining.

Isolierung und Immunfärbung Lymphozyten und dendritische Zellen aus Murine Peyer-Plaques

Peyer's  patches (PPs) are integral components of the gut-associated lymphoid tissues  (GALT) and play a central role in intestinal immunosurveillance and ...

Isolation of Murine Peritoneal Macrophages to Carry Out Gene Expression Analysis Upon Toll-like Receptors Stimulation

During infection and inflammation, circulating monocytes leave the bloodstream and migrate into tissues, where they differentiate into macrophages. Macrophages express surface Toll-like receptors (TLRs), which recognize molecular patterns conserved through evolution in a wide range of microorganisms. TLRs play a central role in macrophage activation which is usually associated with gene expression alteration. Macrophages are critical in many diseases and have emerged as attractive targets for therapy. In the following protocol, we describe a procedure to isolate murine peritoneal macrophages using Brewer&#8217;s thioglycollate medium. The latter will boost monocyte migration into the peritoneum, accordingly this will raise macrophage yield by 10-fold. Several studies have been carried out using bone marrow, spleen or peritoneal derived macrophages. However, peritoneal macrophages were shown to be more mature upon isolation and are more stable in their functionality and phenotype. Thus, macrophages isolated from murine peritoneal cavity present an important cell population that can serve in different immunological and metabolic studies. Once isolated, macrophages were stimulated with different TLR ligands and consequently&#160;gene expression was evaluated.

We describe here a simple protocol to isolate murine peritoneal macrophages. This procedure is followed by RNA extraction to carry out gene expression analysis upon Toll-like receptors stimulation.

Isolierung von Murine Peritonealmakrophagen zur Durchführung Genexpressionsanalyse Nach Toll-like Rezeptoren Stimulation

During infection and inflammation, circulating monocytes leave the bloodstream and migrate into tissues, where they differentiate into macrophages. ...

Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays

Mast cells (MCs), as a part of the immune system, play a key role in defending the host against several pathogens and in the initiation of the allergic immune response. The activation of MCs via the cross-linking of surface IgE bound to high affinity IgE receptor (Fc&#949;RI), as well as through the stimulation of several other receptors, initiates the rise of the free intracellular Ca2+ level ([Ca2+]i) that promotes the release of inflammatory and allergic mediators. The identification of molecular constituents involved in these signaling pathways is crucial for understanding the regulation of MC function. In this article, we describe a protocol for the isolation of murine connective tissue type MCs by peritoneal lavage and cultivation of peritoneal MCs (PMCs). Cultures of MCs from various knockout mouse models by this methodology represent a useful approach to the identification of proteins involved in MC signaling pathways. In addition, we also describe a protocol for single cell Fura-2 imaging as an important technique for the quantification of Ca2+ signaling in MCs. Fluorescence-based monitoring of [Ca2+]i is a reliable and commonly used approach to study Ca2+ signaling events, including store-operated calcium entry, which is of utmost importance for MC activation. For the analysis of MC degranulation, we describe a &#946;-hexosaminidase release assay. The amount of &#946;-hexosaminidase released into the culture medium is considered as a degranulation marker for all three different secretory subsets described in MCs. &#946;-hexosaminidase can easily be quantified by its reaction with a colorigenic substrate in a microtiter plate colorimetric assay. This highly reproducible technique is cost-effective and requires no specialized equipment. Overall, the provided protocol demonstrates a high yield of MCs expressing typical MC surface markers, displaying typical morphological and phenotypic features of MCs, and demonstrating highly reproducible responses to secretagogues in Ca2+-imaging and degranulation assays.

Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays

Here, we present a protocol to isolate and cultivate murine peritoneal mast cells. We also describe two protocols for their functional characterization: a fluorescent imaging of intracellular free Ca2+ concentration and a degranulation assay based on colorimetric quantification of the released &#946;-hexosaminidase.

Isolierung von Mastzellen Bauchfell abgeleitet und deren funktionelle Charakterisierung mit Ca2 +-imaging und Degranulation Assays

Mast cells (MCs), as a part of the immune system, play a key role in defending the host against several pathogens and in the initiation of the allergic ...

Isolation and Culture of Bone Marrow-Derived Macrophages from Mice

Macrophages have important effector functions in homeostasis and inflammation. These cells are present in every tissue in the body and have the important ability to change their profile according to the stimuli present in the microenvironment. Cytokines can profoundly affect macrophage physiology, especially IFN-&#947; and interleukin 4, generating M1 and M2 types respectively. Because of the versatility of these cells, the production of a population of bone marrow-derived macrophages can be a basic step in many experimental models of cell biology. The aim of this protocol is to help researchers in the isolation and culture of macrophages derived from bone marrow progenitors. Bone marrow progenitors from pathogen-free C57BL/6 mice are transformed into macrophages upon exposure to macrophage colony-stimulating factor (M-CSF) that, in this protocol, is obtained from the supernatant of the murine fibroblast lineage L-929. After incubation, mature macrophages are available for use from the 7th to the 10th day. A single animal can be the source of approximately 2 x 107 macrophages. Therefore, it is an ideal protocol for obtaining large amounts of primary macrophages using basic methods of cell culture.

The present protocol describes the isolation and culture of bone marrow-derived macrophages from mice.

Isolierung und Kultivierung von Makrophagen aus dem Knochenmark aus Mäusen

Macrophages have important effector functions in homeostasis and inflammation. These cells are present in every tissue in the body and have the important ...

<meta charset="utf8"></head><body>Lentivirale Vektorvorbereitung für die in vivo Genmodulation

Lentiviral Vector Preparation for Efficient Gene and MicroRNA Modulation of Peritoneal Cavity Tissue&#45;Resident Macrophages In Vivo in Mice

Peritoneal tissue-resident macrophages have broad functions in the maintenance of homeostasis and are involved in pathologies within local and neighboring tissues. Their functions are dictated by microenvironmental cues; thus, it is essential to investigate their behavior in an in vivo physiological niche. Currently, specific peritoneal macrophage-targeting methodologies employ whole-mouse transgenic models. Here, a protocol for effective in vivo modulation of mRNA and small RNA species (e.g., microRNA) expression in peritoneal macrophages using lentivirus particles is described. Lentivirus preparations were made in HEK293T cells and purified on a single sucrose layer. In vivo validation of lentivirus effectivity following intraperitoneal injection revealed predominant infection of macrophages restricted to local tissue. Targeting of peritoneal macrophages was successful during homeostasis and thioglycolate-induced peritonitis. The limitations of the protocol, including low-level inflammation induced by intraperitoneal delivery of lentivirus and time restrictions for potential experiments, are discussed. Overall, this study presents a quick and accessible protocol for the rapid assessment of gene function in peritoneal macrophages in vivo.

<meta charset="utf8"></head><body>Autor im Rampenlicht: Erforschung des Makrophagen-Immunstoffwechsels durch lentivirale Vektor-vermittelte Genmanipulation

We demonstrate a step-by-step protocol for the investigation of gene function in peritoneal tissue-resident macrophages in vivo, using lentiviral vectors.

Lentivirale Vektorpräparation für die effiziente Gen- und microRNA-Modulation von geweberesidenten Makrophagen in der Bauchhöhle in vivo bei Mäusen

Peritoneal tissue-resident macrophages have broad functions in the maintenance of homeostasis and are involved in pathologies within local and neighboring ...

Isolation of Murine Intestinal Mesenchyme Resulting in a High Yield of Telocytes

The murine small intestine, or colon mesenchyme, is highly heterogenous, containing distinct cell types including blood and lymphatic endothelium, nerves, fibroblasts, myofibroblasts, smooth muscle cells, immune cells, and the recently identified cell type, telocytes. Telocytes are unique mesenchymal cells with long cytoplasmic processes, reaching a distance of tens to hundreds of microns from the cell body. Telocytes have recently emerged as an important intestinal stem cell niche component, providing Wnt proteins that are essential for stem and progenitor cell proliferation.
Although protocols on how to isolate mesenchyme from the mouse intestine are available, it is not clear whether these procedures allow the efficient isolation of telocytes. Isolating telocytes efficiently requires special protocol adjustments that would allow dissociation of the strong cell-cell contact between telocytes and neighboring cells without affecting their viability. Here, available intestinal mesenchyme isolation protocols were adjusted to support the successful isolation and culture of mesenchyme containing a relatively high yield of viable single-cell telocytes.
The obtained single-cell suspension can be analyzed by several techniques, such as immunostaining, cell sorting, imaging, and mRNA experiments. This protocol yields mesenchyme with sufficiently conserved antigenic and functional properties of telocytes, and can be used for several applications. For example, they can be used for co-culture with mouse- or human-derived organoids to support organoid growth with no growth factor supplementation, to better reflect the situation in the original tissue.

Here, we present a protocol to isolate murine intestinal mesenchyme, including telocytes. These can be used for several applications, such as co-culture with mouse or human-derived organoids, to support growth and better reflect the situation in the original tissue.

Isolierung des murinen intestinalen Mesenchyms, was zu einer hohen Ausbeute an Telozyten führt

The murine small intestine, or colon mesenchyme, is highly heterogenous, containing distinct cell types including blood and lymphatic endothelium, nerves, ...

Medizin

Whole Cell Electrophysiology of Primary Cultured Murine Enterochromaffin Cells

Enterochromaffin (EC) cells in the gastrointestinal (GI) epithelium constitute the largest subpopulation of enteroendocrine cells. As specialized sensory cells, EC cells sense luminal stimuli and convert them into serotonin (5-hyroxytryptamine, 5-HT) release events. However, the electrophysiology of these cells is poorly understood because they are difficult to culture and to identify. The method presented in this paper outlines primary EC cell cultures optimized for single cell electrophysiology. This protocol utilizes a transgenic cyan fluorescent protein (CFP) reporter to identify mouse EC cells in mixed primary cultures, advancing the approach to obtaining high-quality recordings of whole cell electrophysiology in voltage- and current-clamp modes.

Enterochromaffin (EC) cells comprise a small subset of gastrointestinal epithelial cells. EC cells are electrically excitable and release serotonin, yet difficulties in culturing and identifying EC cells have limited physiological studies. The method presented here establishes a primary culture model amenable to examination of single EC cells by electrophysiology.

Ganze Zelle Elektrophysiologie des primären kultivierten murinen Enterochromaffinen Zellen

Enterochromaffin (EC) cells in the gastrointestinal (GI) epithelium constitute the largest subpopulation of enteroendocrine cells. As specialized sensory ...

Isolierung von Maus Bauchhöhle Cells

Zusammenfassung

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Isolierung und Kultivierung von Makrophagen aus dem Knochenmark aus Mäusen

Lentivirale Vektorpräparation für die effiziente Gen- und microRNA-Modulation von geweberesidenten Makrophagen in der Bauchhöhle in vivo bei Mäusen

Lentivirale Vektorpräparation für die effiziente Gen- und microRNA-Modulation von geweberesidenten Makrophagen in der Bauchhöhle in vivo bei Mäusen

Lentivirale Vektorpräparation für die effiziente Gen- und microRNA-Modulation von geweberesidenten Makrophagen in der Bauchhöhle in vivo bei Mäusen

Isolierung des murinen intestinalen Mesenchyms, was zu einer hohen Ausbeute an Telozyten führt

Ganze Zelle Elektrophysiologie des primären kultivierten murinen Enterochromaffinen Zellen