Method Article
During murine myocardial ischemia/reperfusion surgery, correct placement of the occluding ligature is typically confirmed by visible observation of myocardial pallor. Herein, a method of electrocardiographically confirming ischemia and reperfusion, to supplement observed myocardial pallor, is demonstrated in male C57Bl/6 mice.
Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality worldwide. In humans, a pathologic occlusion forms in a coronary artery and reperfusion of that occluded artery is considered essential to maintain viability of the myocardium at risk. Although essential for myocardial recovery, reperfusion of the ischemic myocardium creates its own tissue injury. The physiologic response and healing of an ischemia/reperfusion injury is different from a chronic occlusion injury. Myocardial ischemia/reperfusion injury is gaining recognition as a clinically relevant model for myocardial infarction studies. For this reason, parallel animal models of ischemia/reperfusion are vital in advancing the knowledge base regarding myocardial injury. Typically, ischemia of the mouse heart after left anterior descending (LAD) coronary artery occlusion is confirmed by visible pallor of the myocardium below the occlusion (ligature). However, this offers only a subjective way of confirming correct or consistent ligature placement, as there are multiple major arteries that could cause pallor in different myocardial regions. A method of recording electrocardiographic changes to assess correct ligature placement and resultant ischemia as well as reperfusion, to supplement observed myocardial pallor, would help yield consistent infarct sizes in mouse models. In turn, this would help decrease the number of mice used. Additionally, electrocardiographic changes can continue to be recorded non-invasively in a time-dependent fashion after the surgery. This article will demonstrate a method of electrocardiographically confirming myocardial ischemia and reperfusion in real time.
Herzkrankheit bleibt die führende Todesursache weltweit 1,2. Nicht nur ist der linke Ventrikel (LV) die kräftigste Kammer, verantwortlich für das Blut vom Herzen zu den gesamten Körper pumpt 3, es ist eine gemeinsame Herzverletzungsstelle nach einem Myokardinfarkt 4. Die linksventrikuläre Absterben von Gewebe führt oft zu systolischen Herzinsuffizienz. Tiermodelle von Herzkrankheiten sind unerlässlich für die Förderung der biomedizinischen Forschung kardiovaskulär. Die C57Bl / 6-Stamm von Mäusen eine beliebte Wahl für Tiermodellen haben aufgrund ihrer schnellen Brutzeit, geringe Kosten und Leichtigkeit in genetischen Veränderungen. Die meisten chirurgischen murine Modelle für die Untersuchung von Herzkrankheiten beinhalten Okklusion des LAD Ast der linken Koronararterie. Die LAD wird manchmal mit der linken stumpfen Rand 5,6. Die LAD liefert Blut in den linken Ventrikel vorderen und anterolateralen Wände. LAD Okklusion Studien sind bei der Induktion anterioren Infarkten gerichtet, manchmal int Verlängerungo den unteren und seitlichen Wandbereiche 7.
Zwei Modelle, die häufig für Myokardinfarkt Studien verwendet werden, umfassen chronische Verstopfung Myokardinfarkt und myokardiale Ischämie / Reperfusion. Die chronische Verstopfung wird durch chirurgisch um Vernähen und permanent den Blutfluss durch die LAD zu blockieren. Die Ischämie / Reperfusion wird viel auf die gleiche Weise erstellt nur mit einer vorübergehenden, in der Regel 30 bis 60 min, ischämische Periode. transiente Ischämie, die okkludierende Naht Krawatten um den LAD und einer kleinen PE-Rohr 10 zu erreichen, die parallel zu der LAD an der epikardialen Oberfläche des Herzens platziert ist, von einer Reperfusionsperiode gefolgt, wo der Schlauch und Okkludieren Naht entfernt und Blut um erneut Fluss durch die Arterie und in das Myokard erlaubt. Die Ischämie / Reperfusion der Operation wurde klinisch relevant aufgrund der Natur von Reperfusionsverletzung parallel zu der Behandlung von menschlichen Infarkte zu sein als die prom umfasstpt koronare Angioplastie und Stent-Implantation der Arterie oder koronaren Bypass. Typischerweise wird während dieser Operationen, Ischämie des LV in einem Maus-Herz wird durch sichtbare Blässe der myokardialen Wand bestätigt. Allerdings, indem einfach die Operationen auf einem Elektrokardiogramm (EKG) Pad unter ständiger Überwachung Bedingungen durchgeführt wird, sichtbare Veränderungen können in der EKG-Kurve beobachtet werden, wodurch Ischämie und Reperfusion der Maus Myokard bestätigt.
Obwohl das murine heart für das menschliche Herz in vieler Hinsicht ähnlich ist, einschließlich der vier Kammern Struktur, haben die Herzen auch Unterschiede. Ein offensichtlicher Unterschied ist die durchschnittliche Ruheherzfrequenz von erwachsenen Mäusen ist von 600 bis 700 Schlägen pro Minute (bpm) , während die von erwachsenen Menschen ist ~ 60-100 bpm 8,9. Zusätzlich bei Mäusen die Repolarisation Wellen, J und T, verschmelzen oft mit der Depolarisation QRS-Komplex eine klare ST-Segment schwierig macht , 10 zu erkennen. Um den Prozess der electrocardiographicall erschwereny Myokardischämie bestätigt, es ist die Höhe der T-Welle ist und der ST-Segment , das als Marker für die Diagnose von Ischämie und Myokardinfarkt Verletzungen bei Menschen verwendet werden, bezeichnet klinisch als ST e levation m yocardial i nfarction oder STEMI. Einer der wichtigsten Unterschiede zwischen humanen und murinen Wellenformen ist, daß S-Welle unmittelbar folgt ein J-Welle sein, die direkt in eine negative T-Welle überträgt. Während akuter myokardialer Ischämie in Mäusen , die Amplitude der S-Welle ab , und wird durch eine abnormale J-Welle und eine invertierte T-Welle 11 direkt folgt. Die T-Welle scheint nicht , 11 einen wesentlichen Teil der Repolarisation in Mäusen zu repräsentieren. Trotz Nomenklatur und Maus gegen menschliche Unterschiede, EKG-Bestätigung von murinen myokardialen Ischämie und Reperfusion ist nach wie vor möglich und relativ einfach. Aus Gründen der Vereinfachung Wellenform Auslegung wird das Segment zwischen der SJT bezeichnet als ST-SEGMnt hier.
STEMI - Richtlinien im Jahr 2013 veröffentlicht , einen Patienten Tür-zu-Ballon Zeit von weniger als 90 min 12 .Dies bedeutet , wird empfohlen , dass der Zeitrahmen , von der Identifizierung der Koronararterienokklusion des Patienten , bis die Arterie wieder geöffnet wird , sollte weniger als 90 min betragen. Das schlagende Herz arbeitet ständig und hat daher einen hohen oxidativen Stoffwechsel und ein hohes Maß an Sauerstoffverbrauch 3. Um dies zu schaffen, ist ein Netzwerk von Kapillaren an jedem Myozyten - 3 erhältlich. Es dauert nur ein Herz ein paar Takte seiner Sauerstoff- und Nährstoffversorgung zu erschöpfen. In einem 90 Minuten-Fenster wird eine ischämische Herzregion in einem menschlichen Empfang von zwischen 5.400 und 9.000 Herz blockiert wurden im Wert von sauerstoffreichem Blut schlägt. Im selben 90 Minuten Fenster, wäre eine Maus 54.000 bis 63.000 Herzschläge haben. Versuchszeitpunkte für murine Ischämie / Reperfusionsverletzung liegen typischerweise zwischen 30 und 60 min.
Die Bedeutung der Entwicklungeine ergänzende Methode ing myokardialen Ischämie und Reperfusion in einem Mausmodell der Bestätigung hat tiefgreifende Auswirkungen auf die Konsistenz und Reproduzierbarkeit der Daten in myokardialen Ischämie / Reperfusion-Studien. Die derzeitige Praxis der optisch das Herz für eine Veränderung der Gewebefarbe zu beobachten ist nicht ausreichend, als Stand-alone-Diagnose. Zusätzlich wird der Reperfusion nach Entfernen des Schlauchs und Naht nicht garantiert. Obwohl die Arterie ist nicht mehr abgebunden, kann die Arterie während des Verfahrens nachhaltig geschädigt haben und unmöglich werden kann reperfuse. Es wäre vorteilhaft, eine Aufzeichnung von Veränderungen im Elektrokardiogramm zu haben Reperfusion, um zu bestätigen, anstatt sich auf Beobachtungen der myokardialen Blässe und rubor (rote Farbe). Herzen, die dann schnell markiert werden nicht die Marker der Ischämie / Reperfusion Verletzungen zeigen kann, und eine Entscheidung darüber, wie die Ermittler gehen kann gemacht werden.
Schließlich ändert sich im gesamten th von der Basislinie eine Aufzeichnung der EKG-Einrichtunge ischämischen und Reperfusions-Perioden ermöglicht Ermittler das Herz nach der ersten Operation zu überwachen, um fortzufahren. Die Ermittler derzeit aus den Augen Herz verlieren, sobald die Operation beendet ist. EKG ist eine einfache Möglichkeit, Einblick in die Veränderungen in den Myokard Stunden nach der Operation zu Tage auftreten, zu gewinnen. EKG zu den Zeitpunkten aufgezeichnet nach der Operation späten Entwicklung Q-Wellen anzeigt, fortgesetzt oder eine Verschlechterung Absterben von Gewebe offenbaren könnte. Allerdings effektiv Gage neue oder sich verschlechternde Elektrokardiographie-Marker, muss ein Basis-EKG zum Vergleich zur Verfügung stehen.
Dieses Protokoll wird zeigen, wie man sich vorbereiten, zu erhalten, und das EKG interpretieren Ischämie und Reperfusion der Maus Herz mit 8 bestätigen - 12 Wochen alten männlichen C57BL / 6-Mäuse.
Alle chirurgischen Eingriffe an Tieren durchgeführt , sollte mit Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren 13 oder einer anderen geeigneten ethischen Richtlinien entsprechend durchgeführt werden. Protokolle sollten von der Tierschutzausschusses bei der entsprechenden Institution, bevor Sie fortfahren genehmigt werden.
1. Vorbereitung für die EKG
HINWEIS: Bevor Sie beginnen, don persönliche Schutzausrüstung einschließlich der Handschuhe, Brillen und einem sauberen Laborkittel oder Einweg-Kleid.
2. Der Erwerb der EKG
3. Chirurgische Verfahren und Aufnahme-EKG
4. Bestätigung der Reperfusion EKG Verwendung
Eine normale Maus - ECG ist in Figur 2 mit alphabetischen Markierungen für elektrische Ereignisse P, Q, R, S, J und T. P angezeigt ist die anfängliche Vorhofdepolarisation. QRS ist die Welle der Depolarisation über den Ventrikeln. J ist eine frühe Repolarisation und T heterogenen Repolarisation stellt auch als Recovery - 11 bekannt. Es ist zu beachten , dass viele Labors verwenden Sie nicht die J-Welle Nomenklatur und stattdessen beziehen sich auf die SJT-Segment wie das ST-Segment 10,15-17. Hier, Ergebnisse und Analysen repräsentativ sind und aus der Basis Laborbeobachtungen von 40 Mäusen. Die meisten Mäuse zeigten ähnliche Wellenformverläufe über den Verlauf der Operation. Die Mäuse, die nicht ähnliche Wellenformen aufweisen, wurden zur weiteren Analyse gekennzeichnet und wurden nicht infarzierten Tiere betrachtet. Ähnliche Ergebnisse wurden auch Wellenform von Jong et al. 15 berichtet.
Murine Herzen suffering aus regionalen Ischämie aufgrund LAD Okklusion typischerweise erhöhte Amplitude der R-Wellen zeigen sowie hyper Peaking der durch eventuelle Erhöhung des ST-Segments gefolgt JT-Segment Abbildung 3 das erste Anzeichen einer akuten myokardialen Ischämie zeigt. hyper Peaking der T-Welle. Wie in dieser Figur zu sehen ist, hat sich die T-Welle, die von Ausgangsbedingungen in der Amplitude erhöht. Dies ist jedoch noch nicht ST-Strecken-Hebung, weil die S-Welle immer noch tief und negativ projiziert, wie es auf der Basiswellenform tut.
Baseline - EKG - Konfiguration zeigt eine negativ Projizieren S-Welle (Abbildung 2). Im Laufe der Zeit werden EKG-Veränderungen festgestellt. Das ST-Segment als das Segment zwischen dem Ende der S-Welle und dem Beginn der T-Welle definiert. Das ST-Segment ist klar, beim Menschen. Aufgrund der hohen Herzfrequenz, wird dieses Segment in Mäusen und eine zusätzliche, frühe Repolarisation "J Welle" September fusioniertearates die S- und T-Wellen. Daher ist die Höhe der S-Welle auf den isoelektrischen Linie oder höher ist als die murine Version von ST-Segment-Erhöhung berücksichtigt werden. In 4 ist das Fortschreiten der Ischämie zu frühen Infarkt kann durch ST-Strecken - Hebung zu sehen. Hier ist die S-Welle wird bei erhöhter Amplitude anzeigt, oberhalb des isoelektrischen Linie. Die J-Welle wird auch erhöht, insbesondere , wenn auf das Basiswellenform im Vergleich (Bild 2). Daher wird das ST-Segment erhöht die Verletzungs / infarction 10 anzeigt.
Abbildung 5 folgt dem Verlauf einer Maus von der Basislinie den ganzen Weg durch Reperfusion. Die erste Wellenform zeigt einen normalen Sinusrhythmus, die der aufgezeichneten Basislinie war. Die zweite Wellenform zeigt das EKG-1 min nach der Ligatur gebunden war und die Arterie wurde verstopften. Der rote Kreis auf dieser Linie gibt hyper T-Wellen-Wert angibt. Wenn verglichen with "Baseline", es ist klar, dass die T-Welle angehoben wird. Die dritte Wellenform zeigt die komplette ST-Strecken-Hebung in der 5-Minuten-Zeitpunkt. In der "1 min Ischämie" Bild wurde die S-Welle Projizieren noch negativ, die isoelektrische Linie verläuft. bei 5 min jedoch der S Anteil des Komplexes nicht so weit negativ, wie es sollte erreichen, bevor die J- und fortschreitend in die T-Wellen. Dies wird als ST-Hebungs beschrieben, da das Segment zwischen der S- und T-Wellen, die von der isoelektrischen Linie angehoben wird. Ein weiterer elektro Marker der regionalen Ischämie Aufweitung des QT-Intervalls 16, der vom Beginn des QRS - Komplexes erstreckt und dauert bis zum Ende der T-Welle. Bei 20 min der Ischämie wurde das QT-Intervall verbreitert und die ST-Segment ist nach wie vor erhöht. Nach 45 Minuten der Ischämie, weitete sich das QT-Intervall bleibt und das ST-Segment bleibt erhöht.
Reperfusion des Herzmuskels, die hatwar im EKG führen zurück zu den Ausgangsbedingungen in einer Maus Rückkehr ischämischen für 30 Minuten oder weniger sollte. Preda und Burlacu wurde eine Korrelation zwischen murinen Veränderungen im Elektrokardiogramm, ischämische Zeit, und der Infarkt Schwere 17. Es wurde beobachtet, dass ischämische Perioden von 30 Minuten nicht permanent EKG-Veränderungen verursachte während ischämischen Perioden von 1 Stunde Dauer EKG-Veränderungen verursachte. Darüber hinaus hatte der Reperfusion der verstopften Arterie nach 24 Stunden der Ischämie keine Bergungs Wirkung 17. Normalerweise kann Q-Wellen als leicht nach unten Projektion identifiziert werden, kurz bevor die Depolarisation QRS-Komplex. Signifikante oder pathologischer Q-Wellen können kurz nach Beginn der myokardiale Ischämie zu entwickeln , wie erhebliche Muskel Tod in 10 beginnt zu setzen. Signifikante Q-Wellen als mindestens 1/3 der Höhe des entsprechenden R-Welle oder durch ihre verlängerte Zeit definiert, was zu einer großen Q-Welle. Die wesentlichen Q-Welle ergibt sich aus einer Region von toten Myokard Ablenken Electrical Ströme weg von der Elektrode 7. Nach 5 min Reperfusion, Nachweis von tiefen, signifikante Q-Wellen beginnen zu erscheinen (Figur 5). Darüber hinaus gibt die T-Welle auf den isoelektrischen Linie (Abbildung 5). Nach 30 min Reperfusion, bleiben die negativen Q-Wellen und zeigen wahrscheinlich dauerhaften Schäden. Zu diesem Zeitpunkt sind die Q-Wellen breit und tief, und zeigen an, dass der sterbende Herzgewebe um den beschädigten Bereich elektrische Ströme ablenkt (Abbildung 5).
Nach der kontinuierlichen Ischämie führt das Fortschreiten zu Verletzung und Infarkt zu einer verbesserten negativen T-Wellen - Vorsprung (5, 30 min Reperfusion, zweiter roter Kreis). Diese verbesserte T-Wellen - Projektion aufgrund eines echten Infarkt wird in der Regel permanent 7 sein. Der zweite roten Kreis in der 30 min Reperfusion Wellenform zeigt , was erscheint eine invertierte T-Welle (5) zu sein. Wenn der 5 and 30 min T-Wellen werden im Vergleich ist es klar, dass die T-Welle negativer projiziert. Dies, zusammen mit den signifikanten Q-Wellen liefert den Beweis für die dauerhafte Gewebeschäden dieses Herz. Es sollte beachtet werden, dass inhalierte Isofluran Anästhesie Herzfrequenz verringert, und erhöht somit QT-Intervalle. Allerdings Amplitude der Erholung T-Wellen bleibt unberührt 18.
Die genannten Veränderungen können quantitativ in Bezug auf die Spannung zu analysieren. 6 zeigt Abbildung , die eine sehr große Menge an Daten liefern physiologischen Daten als CSV - Datei exportieren. EKG-Werte (Amplituden) bei Fraktionen-of-Millisekunden-Raten Neben dem Angebot dort können Optionen sein, mit anderen Daten von respirations umfassen, Temperatursonden, Blutdruckmanschetten usw., wenn dies gewünscht wird. Diese quantitativen Daten können grafisch dargestellt werden , wie in Abbildung 7 dargestellt. Grafische Darstellung einer Reihe von Wellenformen von P-Welle zu P-Welle hilft ein EKG zu visualisierenKonfiguration Trend. Die Zeitdauer von 500 ms ist ein guter Zeitrahmen sichtbar zu machen, da jede weniger Zeit nicht in genügend Wellenformen und jede zusätzliche Zeit erscheinen die Grafik machen führen kann unübersichtlich und elektrophysiologischen Vorgängen verpasst werden kann oder schwierig, wenn sie auf einem Standard-Computer-Monitor betrachtet zu erkennen .
Abb . 1: Die richtige Platzierung der Maus auf EKG - Pad Diese Maus wird in Rückenlage positioniert. Jedes einzelne der Pfoten-Maus auf die entsprechenden Elektroden auf dem Oberflächen - EKG - Pad abgeklebt werden. Bitte hier klicken , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 2: Normal Murine BasisEKG - Kurve. Die normale Maus - Basis - EKG wird mit den Buchstaben beschriftet P, Q, R, S, J und T , die verwendet werden , im Herzen elektrische Ereignisse zu beschreiben. Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 3:. T-Wellen - Elevation auch als hyper T-Welle oder Peaking bekannt. Die T-Welle wird verstärkt und höher als die Basislinien - T-Welle (Abbildung 2). Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 4:. ST-Segment Elevation Diese Zahl displays ST-Strecken - Hebung , die als ST-Segment beobachtet werden kann , ist höher als der isoelektrische Punkt. Bitte hier klicken , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 5:. Typische EKG - Veränderungen im Laufe einer Ischämie / Reperfusion Chirurgie Diese Zahl folgt eine Maus über die Dauer der myokardialen Ischämie / Reperfusion Chirurgie. Die erste Wellenform zeigt einen normalen Sinusrhythmus, der die aufgezeichneten Basislinie (Baseline) war. Die zweite Wellenform (1 min Ischämie) zeigt die Wellenform 1 min nach der Ligatur gebunden war und die Arterie wurde verstopften. Der rote Kreis auf dieser Linie zeigt hyper T-Wellen-Wert angibt. Der rote Kreis auf der dritten Wellenform (5 min Ischemia) zeigt das komplette ST-Strecken-Hebung. Der rote Kreis auf dem fou rth Wellenform (20 min Ischämie) zeigt eine verbreiterte QT-Intervall und die S-Welle wird noch erhöht. Der rote Kreis auf dem fünften Wellenform (45 min Ischemia) Displays erweitert QT-Segment und erhöhten ST-Segment. Die sechste Wellenform (1 min Reperfusion) zeigt keine signifikanten Veränderungen im Vergleich zu 45 min Ischämie roten Kreis auf der siebten Wellenform (5 min Reperfusion) zeigt tiefe, bedeutende Q-Wellenform. Der erste roten Kreis in der achten Wellenform (30 min Reperfusion) zeigt signifikante Q-Wellen, während der zweite rote Kreis zeigt mögliche T-Wellen - Erweiterung. Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abbildung 6:. Physiologische Daten Dieses Bild zeigt die physiologischen Daten , wie sie als CSV - Datei in eine Tabelle exportiert wird.ref = "https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54814/54814fig6large.jpg" target = "_ blank"> Bitte hier klicken, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Abb . 7: grafisch darzustellenden mV Werte Der Graph in dieser Figur angezeigt zeigt mV Werte von drei aufeinanderfolgenden und vollständigen Wellenformen der physiologischen Daten Datei (Abbildung 6). Der Graph ist eine einfache Liniendiagramm Punkte aus der physiologischen Daten - Datei. Bitte klicken Sie hier , um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Mit EKG-Veränderungen als eine ergänzende Methode für myokardiale Ischämie und Reperfusion bestätigt die genaue Platzierung des verdeck Ligatur gewährleistet. Die Genauigkeit der Ligatur Platzierung ist entscheidend für die Datenvariabilität unter den Tieren zu reduzieren. Die LAD in einem Maus-Herz ist eine schwierige Arterie zu visualisieren. Daher kann mit Veränderungen im Elektrokardiogramm visuelle Blässe Ergänzung wird dazu beitragen, die korrekte Platzierung der Ligatur und daraus resultierende Gewebeschäden gewährleisten.
Da die EKG-Pad eine nicht-invasive Ansicht des Herzens bietet, können mehrere EKGs im Verlauf der Studie erhalten werden. Dies kann helfen, ein besseres Verständnis der kardialen Veränderungen erzielen, die während und nach der Operation auftreten. Es ist entscheidend, um eine Grundlinie ECG zu verwenden, zum Vergleich nach dem chirurgischen Eingriff zu erhalten. Später Bühne Absterben von Gewebe und sogar ventrikulären Aneurysmas kann durch Ablenkungen von elektrophysiologischen Signale und EKG-Konfigurationsänderungen beobachtet werden. Dies kann Einblickin die Progression der Herzinsuffizienz.
Die Vorteile der EKG-Mess echokardiographischen Maschine umfassen die gleichzeitige Messung von strukturellen und funktionalen Parameter des Herzens vor oder nach der Ischämie / Reperfusion Operation. Die Grenzen des Systems zur Aufzeichnung EKG sind die hohen Kosten für eine Echokardiographie Maschine zu kaufen. Allerdings, wenn die Experimente konstant EKG-Überwachung über mehrere Tage benötigen, gibt es eine Vielzahl von Geräten zur Verfügung für die EKG-Aufzeichnung, einschließlich Remote-telemetrischer EKG-Geräte mit entsprechender Software, die so programmiert werden können, um Wellenformen in verschiedenen Zeitintervallen erfassen und zu analysieren. Jedoch erfordern viele der EKG-Telemetrieeinheiten eine Implantationsverfahren oder spezielle Habitate. Zusätzlich viele alternative Elektroden Optionen bestehen einschließlich Elektrodenclips und Nadeln. Ischämie / Reperfusion Chirurgie über Thorakotomie ist ein hoch-invasives Verfahren. Die Vorteile der Verwendung der EKG-Pad mit einer Echokardiographie macHine umfassen nicht-invasive Verfahren ohne Drähte an das Tier während der Operation und ohne zusätzliche chirurgische Verfahren verbunden. Allerdings sollten die Ermittler die beste Ausrüstung für ihre Labor- und Versuchs Bedürfnisse bestimmen.
Wie bereits erwähnt, nimmt Isofluran Anästhesie Herzfrequenz. Zusätzlich kann Isofluran über die Aktivierung von K ATP -Kanäle kardioprotektiven und somit die Infarktgröße zu reduzieren, wie in 19 Hunden gefunden. Allgemeine Anästhesie bei Mäusen kann mit injizierbaren Narkotika induziert werden. Inhalationsanästhesie ist eine größere Sicherheit, insbesondere für das Verfahren verlängert. Jedoch erfordert Inhalationsanästhesie komplexe und teure Ausrüstung wie Präzision Verdampfern und Flowmeter, spezifische Atemsysteme und effiziente Fängersysteme, um die Verschmutzung zu verhindern. Die Nachteile von injizierbaren Anästhetika umfassen Schwierigkeiten bei der eine anfängliche Dosis der Wahl keine Chance, genau die Tiefe der verlängerten ane Modulationsthesia, verlängerte Erholung usw. Die Wahl der Anästhesie muss entsprechend der Länge des Verfahrens und Ziel der 20 - Studie angepasst werden.
Mit EKG als ergänzende Methode für bei Mäusen Ischämie / Reperfusion bestätigt wird dazu beitragen, die Konsistenz und Reproduzierbarkeit von Infarkten verbessern, sondern auch die Möglichkeit für zukünftige Anwendungen der Technik öffnet sich durch quantitative Trends zu etablieren. Die Ermittler können ähnliche EKG-Konfigurationen innerhalb bestimmter Versuchsgruppen feststellen. Zum Beispiel kann eine genetisch veränderte Tiergruppe zeigen ungewöhnlich breite QT-Intervalle nach der Operation, wenn mit dem Wildtyp verglichen. Dieser informative Daten verpasst worden wäre, wenn die Ermittler myokardialen Farbänderungen als einzige Bestätigung der Ischämie und Reperfusion verwenden. Für vergleichende Untersuchungen zwischen Wildtyp und transgenen Mäusen, Überlegungen zu den Lambeth Konventionen Richtlinien können auch in Bezug auf Alter, Geschlecht wertvoll sein, vor allem, Verblindung und Randomisierung von Tieren 21.
Abschließend bietet zusätzliche Bestätigung der myokardialen Ischämie / Reperfusion mehrere Vorteile. EKG als ergänzende Technik kann die Konsistenz in der Chirurgie helfen etablieren. Dies kann dazu beitragen, die Zahl der Tiere zu verringern verwendet, während höhere Qualität der Daten bereitstellt. Es ermöglicht auch Ermittler Herzschädigung, Absterben von Gewebe und / oder Umbau nicht-invasiv über die Zeit zu überwachen. Schließlich bietet mit EKG als Bestätigung der myokardialen Ischämie / Reperfusion die Möglichkeit, quantitative elektro Trends zu etablieren.
The authors have nothing to disclose.
This work was supported by Merit Review awards (BX002332 and BX000640) from the Biomedical Laboratory Research and Development Service of the Veterans Affairs Office of Research and Development, National Institutes of Health (R15HL129140), and funds from Institutional Research and Improvement account. The project is supported in part by the National Institutes of Health grant C06RR0306551.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Vevo 1100 | Fujifilm Visual Sonics | Echocardiography Machine | |
Mouse Handling Plate | Fujifilm Visual Sonics | Heated ECG plate | |
Signa-Gel | Highly Conductive Multi- | ||
Electrode Gel | Parker | 15-25 | Purpose Electrolyte |
Transpore Medical Tape | 3M | 1527-0 | |
PI-Spray II | Pharmaceutical Innovations | NDC 36-2013-25 | Cleaning agent for ECG plate |
C57Bl6 Mice | The Jackson Laboratory | 000664 | Male, 8 - 12 wk |
IsoThesia-Isoflurane | Henry Schein | NDC 1169-0500-1 | |
Excel | Microsoft | ||
Systane Nighttime Lubricant Eye Ointment | Alcon | 65050935 | |
7-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | 640.O32 | |
5-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | K809.O32 | |
Surgical Scissors | ROBOZ | RS-5881 | |
Forceps | Fine Science Tools | 11052-10 | |
Gauze | Bio Nuclear Diagnostics Inc | DIS-022B | |
Needle Holder | Fine Science Tools | 12565-14 | |
Buprenex CIII | Patterson Veterinary | 0-891-9756 | Buprenorphine Hydrochloride Analgesic |
Betadine | Purdue Products | 67618-150-08 | |
Nair | Church and Dwight Co. | NRSL-22339-05 |
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