使用高效液相色谱定量分析小鼠眼部和非眼部组织中的膳食维生素 A 代谢物

我们的实验室研究了两种关键的维生素 A 转运蛋白 STRA6 和 Rbpr2。这些膜蛋白有助于血液中维生素 A 的摄入到眼睛和肝脏等组织中。通过 HPLC，我们可以通过在转基因小鼠中制备全身维生素 A 谱来研究这些转运蛋白的生理功能。

我们领域使用的另一种技术是表面等离子体共振，SPR，它根据自己的喜好检查蛋白质的结合亲和力和动力学，我们已经应用 SPR 来研究 RBP4 视黄醇结合复合物 STRA6 或 Rbpr2 之间的结合。这种方法目前的一个挑战是样品通量。溶剂蒸发步骤是该方案中的主要瓶颈，未来的研究人员应该尝试干燥方法，例如氮气排污蒸发，与真空蒸发相比，这些方法具有更大的通量。

我们已经确定了 Rbpr2 通过其在肝脏中的功能在维持全身维生素 A 稳态中的重要促进剂的作用。转基因小鼠中 Rbpr2 表达的破坏导致所有检查的全身组织中维生素 A 水平的显着破坏，通过 HPLC 定量。基于 HPLC 的维生素 A 检测中的大多数其他方案都使用反向方法，通常不允许类视黄醇异构体单独分离。

我们的正常面部方案允许分离视黄醛和视黄醛异构体，使我们能够创建详细的维生素 A 谱，鉴于维生素 A 光异构化在光转导级联反应中的重要性，这一点至关重要。