العمل تدعمها "الحكومة الفرنسية" (الوكالة الوطنية للبحوث، والوكالة الوطنية للمعلومات) من خلال برنامج "الاستثمار من أجل المستقبل" سيجناليفي لابيكس (مرجع ANR-11-لابكس-0028-01) ومن المنح إلى ك. د. و من الرابطة صب sur la البحوث السرطان، مؤسسة دي فرانس، وخطة Inserm السرطان. د. ب ف أ-تلقي والزمالات من لوس أنجليس من أجل مؤسسة "بحوث ميديكال" ومن مدينة نيس، على التوالي. في اتشوكارديوجراف ومحول تم التكرم المقدمة من شركة فيليبس. ونحن نشكر بوردر ألف وديشتر س.، M. كوتاجار-بوسيرت، لاندوار أ، مارتريس أ، بيانكارديني أ وفاغنر م. س. لمساعداتها التقنية الماهرة.

<ol>
	<li>Ormandy, E. H., Dale, J., Griffin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+engineering+of+animals:+ethical+issues,+including+welfare+concerns.">Genetic engineering of animals: ethical issues, including welfare concerns.</a> Can Vet J. 52 (5), 544-550 (2011).</li><li>Karl, T., Pabst, R., von H&#246;rsten, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotyping+of+mice+in+pharmacological+and+toxicological+research.">Behavioral phenotyping of mice in pharmacological and toxicological research.</a> Exp Toxicol Pathol. 55 (1), 69-83 (2003).</li><li>Phoon, C. K., Turnbull, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+Imaging+in+Mice.">Cardiovascular Imaging in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 6 (1), 15-38 (2016).</li><li>Wagner, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor+beta+stimulation+induces+rapid+cardiac+growth+and+angiogenesis+via+direct+activation+of+calcineurin.">Peroxisome proliferator-activated receptor beta stimulation induces rapid cardiac growth and angiogenesis via direct activation of calcineurin.</a> Cardiovasc Res. 83 (1), 61-71 (2009).</li><li>Wagner, K. D., Vukolic, A., Baudouy, D., Michiels, J. F., Wagner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+Conditional+Vascular-Specific+Overexpression+of+Peroxisome+Proliferator-Activated+Receptor+Beta/Delta+Leads+to+Rapid+Cardiac+Hypertrophy.">Inducible Conditional Vascular-Specific Overexpression of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor Beta/Delta Leads to Rapid Cardiac Hypertrophy.</a> PPAR Res. 2016, 7631085 (2016).</li><li>Ghanbarian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dnmt2/Trdmt1+as+Mediator+of+RNA+Polymerase+II+Transcriptional+Activity+in+Cardiac+Growth.">Dnmt2/Trdmt1 as Mediator of RNA Polymerase II Transcriptional Activity in Cardiac Growth.</a> PLoS One. 11 (6), e0156953 (2016).</li><li>Meguro, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclosporine+attenuates+pressure-overload+hypertrophy+in+mice+while+enhancing+susceptibility+to+decompensation+and+heart+failure.">Cyclosporine attenuates pressure-overload hypertrophy in mice while enhancing susceptibility to decompensation and heart failure.</a> Circ Res. 84 (6), 735-740 (1999).</li><li>de Ara&#250;jo, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regular+and+moderate+aerobic+training+before+allergic+asthma+induction+reduces+lung+inflammation+and+remodeling.">Regular and moderate aerobic training before allergic asthma induction reduces lung inflammation and remodeling.</a> Scand J Med Sci Sports. 26 (11), 1360-1372 (2016).</li><li>Benavides-Vallve, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+strategies+for+echocardiographic+evaluation+of+left+ventricular+function+in+a+mouse+model+of+long-term+myocardial+infarction.">New strategies for echocardiographic evaluation of left ventricular function in a mouse model of long-term myocardial infarction.</a> PLoS One. 7 (7), e41691 (2012).</li><li>Colazzo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+atrium+and+left+atrial+appendage+structure+and+function:+echocardiographic+and+morphologic+evaluation.">Murine left atrium and left atrial appendage structure and function: echocardiographic and morphologic evaluation.</a> PLoS One. 10 (4), e0125541 (2015).</li><li>Pachon, R. E., Scharf, B. A., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Best+anesthetics+for+assessing+left+ventricular+systolic+function+by+echocardiography+in+mice.">Best anesthetics for assessing left ventricular systolic function by echocardiography in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (12), H1525-H1529 (2015).</li><li>Gao, S., Ho, D., Vatner, D. E., Vatner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiography+in+Mice.">Echocardiography in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 71-83 (2011).</li><li>Mor-Avi, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+evolving+echocardiographic+techniques+for+the+quantitative+evaluation+of+cardiac+mechanics:+ASE/EAE+consensus+statement+on+methodology+and+indications+endorsed+by+the+Japanese+Society+of+Echocardiography.">Current and evolving echocardiographic techniques for the quantitative evaluation of cardiac mechanics: ASE/EAE consensus statement on methodology and indications endorsed by the Japanese Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 24 (3), 277-313 (2011).</li><li>Collins, K. A., Korcarz, C. E., Lang, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+echocardiography+for+the+phenotypic+assessment+of+genetically+altered+mice.">Use of echocardiography for the phenotypic assessment of genetically altered mice.</a> Physiol Genomics. 13 (3), 227-239 (2003).</li><li>Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+evaluation+of+ventricular+function+in+mice.">Echocardiographic evaluation of ventricular function in mice.</a> Echocardiography. 24 (1), 83-89 (2007).</li><li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice.">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 281 (5), H1938-H1945 (2001).</li><li>Moran, C. M., Thomson, A. J., Rog-Zielinska, E., Gray, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+echocardiography+in+the+assessment+of+cardiac+physiology+and+disease+in+preclinical+models.">High-resolution echocardiography in the assessment of cardiac physiology and disease in preclinical models.</a> Exp Physiol. 98 (3), 629-644 (2013).</li><li>Fayssoil, A., Tournoux, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+left+ventricular+function+in+mice+with+Doppler+echocardiography.">Analyzing left ventricular function in mice with Doppler echocardiography.</a> Heart Fail Rev. 18 (4), 511-516 (2013).</li><li>Schoensiegel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+throughput+echocardiography+in+conscious+mice:+training+and+primary+screens.">High throughput echocardiography in conscious mice: training and primary screens.</a> Ultraschall Med. 32, S124-S129 (2011).</li><li>Yariswamy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac-restricted+Overexpression+of+TRAF3+Interacting+Protein+2+(TRAF3IP2)+Results+in+Spontaneous+Development+of+Myocardial+Hypertrophy,+Fibrosis,+and+Dysfunction.">Cardiac-restricted Overexpression of TRAF3 Interacting Protein 2 (TRAF3IP2) Results in Spontaneous Development of Myocardial Hypertrophy, Fibrosis, and Dysfunction.</a> J Biol Chem. 291 (37), 19425-19436 (2016).</li><li>Jara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac-Specific+Disruption+of+GH+Receptor+Alters+Glucose+Homeostasis+While+Maintaining+Normal+Cardiac+Performance+in+Adult+Male+Mice.">Cardiac-Specific Disruption of GH Receptor Alters Glucose Homeostasis While Maintaining Normal Cardiac Performance in Adult Male Mice.</a> Endocrinology. 157 (5), 1929-1941 (2016).</li><li>Kerr, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stability+and+function+of+adult+vasculature+is+sustained+by+Akt/Jagged1+signalling+axis+in+endothelium.">Stability and function of adult vasculature is sustained by Akt/Jagged1 signalling axis in endothelium.</a> Nat Commun. 7, 10960 (2016).</li><li>Wagner, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+vessel+development+requires+activation+of+the+TrkB+neurotrophin+receptor+by+the+Wilms'+tumor+transcription+factor+Wt1.">Coronary vessel development requires activation of the TrkB neurotrophin receptor by the Wilms' tumor transcription factor Wt1.</a> Genes Dev. 19 (21), 2631-2642 (2005).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wilms'+tumour+suppressor+Wt1+is+a+major+regulator+of+tumour+angiogenesis+and+progression.">The Wilms' tumour suppressor Wt1 is a major regulator of tumour angiogenesis and progression.</a> Nat Commun. 5, 5852 (2014).</li><li>Yang, X. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+conscious+and+anesthetized+mice.">Echocardiographic assessment of cardiac function in conscious and anesthetized mice.</a> Am J Physiol. 277 (5 Pt 2), H1967-H1974 (1999).</li><li>Rottman, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+changes+in+ventricular+function+assessed+echocardiographically+in+conscious+and+anesthetized+mice.">Temporal changes in ventricular function assessed echocardiographically in conscious and anesthetized mice.</a> J Am Soc Echocardiogr. 16 (11), 1150-1157 (2003).</li><li>Qui&#241;ones, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+quantification+of+Doppler+echocardiography:+a+report+from+the+Doppler+Quantification+Task+Force+of+the+Nomenclature+and+Standards+Committee+of+the+American+Society+of+Echocardiography.">Recommendations for quantification of Doppler echocardiography: a report from the Doppler Quantification Task Force of the Nomenclature and Standards Committee of the American Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 15 (2), 167-184 (2002).</li><li>van Laake, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+of+cell+therapy+and+assessment+of+cardiac+function+using+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Monitoring of cell therapy and assessment of cardiac function using magnetic resonance imaging in a mouse model of myocardial infarction.</a> Nat Protoc. 2 (10), 2551-2567 (2007).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wilms'+tumor+suppressor+Wt1+is+expressed+in+the+coronary+vasculature+after+myocardial+infarction.">The Wilms' tumor suppressor Wt1 is expressed in the coronary vasculature after myocardial infarction.</a> FASEB J. 16 (9), 1117-1119 (2002).</li><li>Wagner, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+induction+and+inheritance+of+epigenetic+cardiac+hypertrophy+in+the+mouse.">RNA induction and inheritance of epigenetic cardiac hypertrophy in the mouse.</a> Dev Cell. 14 (6), 962-969 (2008).</li><li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NIH+Image+to+ImageJ:+25+years+of+image+analysis.">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).</li><li>Ruifrok, A. C., Johnston, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+histochemical+staining+by+color+deconvolution.">Quantification of histochemical staining by color deconvolution.</a> Anal Quant Cytol Histol. 23 (4), 291-299 (2001).</li><li>Lazzeroni, D., Rimoldi, O., Camici, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+Left+Ventricular+Hypertrophy+to+Dysfunction+and+Failure.">From Left Ventricular Hypertrophy to Dysfunction and Failure.</a> Circ J. 80 (3), 555-564 (2016).</li><li>Ismail, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistologic+labeling+of+murine+endothelium.">Immunohistologic labeling of murine endothelium.</a> Cardiovasc Pathol. 12 (2), 82-90 (2003).</li><li>Benton, R. L., Maddie, M. A., Minnillo, D. R., Hagg, T., Whittemore, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Griffonia+simplicifolia+isolectin+B4+identifies+a+specific+subpopulation+of+angiogenic+blood+vessels+following+contusive+spinal+cord+injury+in+the+adult+mouse.">Griffonia simplicifolia isolectin B4 identifies a specific subpopulation of angiogenic blood vessels following contusive spinal cord injury in the adult mouse.</a> J Comp Neurol. 507 (1), 1031-1052 (2008).</li><li>Ayoub, A. E., Salm, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+morphological+diversity+of+microglia+in+the+activated+hypothalamic+supraoptic+nucleus.">Increased morphological diversity of microglia in the activated hypothalamic supraoptic nucleus.</a> J Neurosci. 23 (21), 7759-7766 (2003).</li><li>Maddox, D. E., Shibata, S., Goldstein, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulated+macrophages+express+a+new+glycoprotein+receptor+reactive+with+Griffonia+simplicifolia+I-B4+isolectin.">Stimulated macrophages express a new glycoprotein receptor reactive with Griffonia simplicifolia I-B4 isolectin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 79 (1), 166-170 (1982).</li><li>dela Paz, N. G., D'Amore, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+versus+venous+endothelial+cells.">Arterial versus venous endothelial cells.</a> Cell Tissue Res. 335 (1), 5-16 (2009).</li></ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

وقد وضعت أساليب مختلفة لتقييم هيكل القلب ووظيفة في الفئران، بما في ذلك تخطيط صدى القلب وتعزيز التباين التصوير بالرنين المغناطيسي والصغرى الأشعة المقطعية والحيوانات الأليفة مسح. نظراً للفعالية من حيث التكلفة والبساطة، تخطيط صدى القلب هو الأسلوب الأكثر استخداماً للتحليل الوظيفي في الفئران11. بشكل عام، بسبب صغر حجم القلب وتواتر ارتفاع معدل ضربات القلب في الفئران، ومحولات الطاقة مع تردد &#62; ينبغي أن تستخدم 10 ميجاهرتز، على الرغم من أن قد تم الإبلاغ عن قياسات ناجحة مع 8 أو 9 ميجاهرتز محولات الطاقة4،7 . ما وظيفة القلب ارتباطاً وثيقا بدرجة حرارة الجسم وتردد القلب، من المهم أن تتحكم هذه المعلمات طوال فترة الدراسة. وضع الماوس على وسادة تدفئة أمر ضروري للحفاظ على درجة حرارة جسم الحيوان أنيسثيتيزيد المستمر. ومن الناحية المثالية، ينبغي أن تستخدم وسادة تدفئة التي تسيطر عليها مع تحقيق المستقيم ضبط درجة حرارة الجسم إلى 38 درجة مئوية. إذا لم يكن هذا متوفراً، يجب تعيين لوحة تدفئة من سنتين إلى ثلاث درجات فوق هذه القيمة. وينبغي تجنب التدفئة مصابيح، كما أنها تعقد مهمة للمحقق وخطر ارتفاع درجة حرارة الحيوانات.
للتحكم في معدل ضربات القلب ووظيفة القلب، نوع التخدير مهم جداً. تستخدم معظم الدراسات إيسوفلوراني، التخدير من السهل للحث على طريق الاستنشاق في دائرة للاستقراء (3% إيسوفلوراني)، ويمكن الحفاظ عليه عن طريق قناع استنشاق (1-2% إيسوفلوراني)، وهو فقط لمدة قصيرة. المواد الأخرى المستخدمة عادة هي بينتوباربيتال، 2,2,2-تريبروموثانول والكيتامين + xylazine يمزج11،12. المثير للدهشة، وقد ذكر إيسوفلوراني بخرق وظيفة القلب في القياسات مشخصين، وهذا التأثير كان أكثر وضوحاً في الكيتامين + xylazine المجموعة11. وعملت الكيتامين وحدها أفضل في هذه الدراسة11. غاو وآخرون. أفادت نتائج آخر استنساخه مع 2,2,2-تريبروموثانول12. وكانت النتائج في نفس النطاق إيسوفلوراني، 2,2,2-تريبروموثانول، وبينتوباربيتال12. أيضا، لم تكن معدلات القلب مختلفة في 2,2,2-تريبروموثانول وبينتوباربيتال تضم12. القلب وآخرون عن انخفاض معدلات القلب في الكيتامين + مجموعة xylazine مقارنة ب المجموعة 2,2,2-تريبروموثانول16. في تجاربنا استخدام سلالات مختلفة وراثيا الماوس والتخدير بينتوباربيتال، معدلات القلب متوسط يتراوح بين 350 و 450 نبضة في الدقيقة. ومع ذلك، تم طرد الكسور &#62; 80%، التي تتطابق مع القيم الموجودة في الحيوانات واعية11. قياسات مشخصين تحت خط الأساس تكون الشروط من لدينا مختبر4،5،6 في نفس النطاق ذكرت في أماكن أخرى11،12،14 ،،من1516،17،،من1819،20،21،22،26 . خلافا بينتوباربيتال، الكيتامين وإيسوفلوراني و 2,2,2-تريبروموثانول تتسم ببداية سريعة والانتعاش. وبالتالي، ينبغي أن يكون التوقيت بين التخدير والقياسات مشخصين نفسه بالنسبة لجميع الحيوانات في هذه الدراسة إلى تجنب درجات مختلفة من التعافي من التخدير. بينتوباربيتال أفعال تعد، ولكن له عيب نافذة علاجية صغيرة، مما يجعل من الضروري تعديل الجرعة أحكام فيما يتعلق بوزن الجسم. التخدير طويل الأمد باستخدام بينتوباربيتال لديه الميزة، يمكن أن يؤديها بعد القياسات مشخصين خط الأساس، والعمليات الجراحية دون الحاجة لإعادة حقن5. وينبغي تجنب التخدير المتكررة باستخدام بينتوباربيتال كما في تجربتنا، حقن بفاصل زمني أقل من أسبوع واحد أدت إلى ازدياد معدل الوفيات بعد العملية الجراحية.
عند إجراء تخطيط صدى القلب في الفئران مع &#62; محول طاقة 10 ميغاهرتز، نوعية الصور ينبغي أن تكون كافية لتحديد دالة LV عمومية. يجب أن تؤخذ عدة صور لكل الحيوانات للحد من فوز إلى فوز الاختلافات والتحف الحركة. ينبغي أن يطلب مشورة الخبراء من أطباء قلب مدربين أو أحد علماء ذوي الخبرة في ضربات القلب في الفئران في البداية لتقييم جودة الصور. حساب معظم ضربات القلب آلات EF من LV بأقطار داخلية باستخدام صيغة11،تيتشولز12. حتى عندما سهلة لقياس أبعاد LV، أنها تقدم تقييما ناقصة LV وحدات التخزين ومناطق لأن الوقف لا يتفق مع أي شكل هندسي مثالية ومبسطة. لا كسرى تقصير ولا الإخراج التي تم الحصول عليها بواسطة الصيغة تيتشولز fraction معلمة مثالية لتحديد وظيفة LV الهوس، وأنها على حد سواء يستند إلى افتراض هندسية ووصف contractility الجدران اثنين فقط. كسر قذفي المقررة مع الأسلوب ذات السطحين سيمبسون أن يكون أكثر دقة، ولكن هذا كان من المستحيل الحصول على كل الحيوان مع المعدات المستخدمة هنا.
بعد احتشاء عضلة القلب، واجهنا العديد من المشاكل ذات الصلة بالتصوير مشخصين. أولاً، جودة الصورة أعاق إلى حد كبير ندبة ثوراكوتومي. ثانيا، كانت الحيوانات أكثر حساسية للتخدير المتكررة. وأخيراً، قياسات الحجم ووظيفة LV م-المستندة إلى وضع تفترض أن الهندسة LV متجانسة. نتيجة لذلك، استخدام هذه الأرقام القياسية ليصبح أكثر إثارة للجدل حضور LV الجدار شذوذ الحركة بعد احتشاء عضلة القلب.
في أيدينا، يسمح باستخدام مجس 15-ميجاهرتز لتسجيل الصور دوبلر عرضية، ولكنها غير منتظمة،. ترددات أعلى بكثير من المطلوب لتحديد وظيفة LV الإقليمية أو القيام بضربات القلب احتشاء عضلة القلب على النقيض، يمكن الحصول عليه فقط مع المعدات مكرس للقوارض12.
نظراً لإمكانيات إضافية ودقة أعلى من تلك النظم الخاصة بمكافحة القوارض، واحدة ينبغي النظر في استخدامها في المستقبل. عيوب هي ارتفاع التكاليف والحاجة إلى مساحة مخصصة. سوف تكون هذه اتشوكارديوجرافس الراقية، ومخصصة لمكافحة القوارض مربحة فقط إذا ما يكفي الحيوانات قيد التحقيق وعدد الحرج من العلماء استخدام المعدات. تدريب خاص لهذه الآلات، يمكن استخدامها بالعلماء لا خبير في أمراض القلب. معدات تخطيط صدى القلب السريرية يوفر دقة محدودة، كما هو مذكور أعلاه. ومع ذلك، لا يزال بنجاح استخدامه في مختلف ل ذوي الخبرةأبوراتوريس11،12؛ يمكن استخدامها بسهولة من قبل العلماء المهرة وأطباء القلب؛ هو المحمول أكثر وأقل تطلبا على مساحة مخصصة؛ ونظرا للعدد الكبير من الآلات، ويتيح النظر في خيارات مختلفة لخفض التكاليف (مثل استئجار أو الحصول على المعدات التي ليست قيد الاستخدام السريري أو القيام بمشتريات السلبي).
لإجراء تحاليل نسيجية، النقطة الحرجة الأولى لتقليل الوقت بين عزل الجهاز وتثبيت الأنسجة. كما هو الحال في هذا البروتوكول، تستند معظم التحليلات المصبوغة والنسيجي المجهري الخفيفة المنقولة؛ تثبيت غمر أنسجة القلب في فورمول غير كافية. إذا كان المشروع ينصب أكثر على تلطيخ مجهرية الأسفار، ينبغي النظر تثبيت نضح الحيوانات تخديره لإزالة خلايا الدم الحمراء من الأنسجة، وإظهار صف السيارات مشرق.
لتجنب الاختلافات في تضمين البارافين، نستخدم جهاز تضمين الآلي. كما أن نقطة انصهار وصلابة تختلف بين العلامات تجارية بارافين، نوصي باستخدام نفس المورد طوال فترة الدراسة. ينبغي أن يجري تقطيع البارافين في كتل مبردة مسبقاً باستخدام مبضع روتاري. سمك الفرع يجب أن تبقى ثابتة. سمك الفرع 3-ميكرومتر يسمح التصور واضح لحدود غشاء في أقسام الهيماتوكسيلين ويوزين-ملطخة بالقلب، ومطلوبة من أجل القياس الدقيق لأقطار كارديوميوسيتي. كما شكل كارديوميوسيتيس غير منتظم، يجب إجراء القياسات على مستوى النواة. وغ تلطيخ يوفر وسيلة بديلة وصمة عار غشاء الخلية وسوف ينتج نفس قيم تلوين الهيماتوكسيلين ويوزين. قبل تحليل شكلي، واحدة ينبغي أن تحدد بوضوح أي جزء من القلب (أي البطين الأيمن أو الأيسر الحرة الجدار أو الحاجز) وسوف يقاس وما إذا كان يتم تحديد المقاطع العرضية كارديوميوسيتي في محور طويلة أو قصيرة. سبب عرضي، ودوامه، والاتجاه الطولي من كارديوميوسيتيس في القلب، فمن الممكن الحصول على نفس المقطع العرضي الطولي والعرضي المقاطع من كارديوميوسيتيس. ما إذا كان يتم قياس أقطار الطولي أو العرضي مسألة الاتفاقية، طالما يتم تحليل الخلايا على مستوى النواة.
في دراساتنا، لاحظنا اتفاقا بين أبعاد مشخصين ونسب وزن القلب للجسم كارديوميوسيتي أحجام4،،من56، ولكن لا قياسات نسيجية من حجم كارديوميوسيتي دائماً تتوافق مع قيم كسر قذفي. على سبيل المثال، نتائج ممارسة التدريب في زيادة أبعاد القلب، مع كسر قذفي الحفاظ عليها وزيادة كارديوميوسيتي أقطار. ومع ذلك، التليف قصور القلب يتسم بزيادة أبعاد القلب، مع كسر قذفي انخفاض وزيادة كارديوميوسيتي أقطار33. وعلاوة على ذلك، نحن مؤخرا أظهرت أن كثافة السفينة القلب زيادة سبب overexpression بطانية محددة من PPARβ لا يؤدي في تحسين وظيفة القلب في ظروف خط الأساس، ولا في تعزيز الانتعاش بعد احتشاء عضلة القلب5 .
إيمونوهيستوتشيميستري، من المهم لتشمل عناصر سلبية وأداء مختلف الخطوات الحظر المنصوص عليها في البروتوكول. الخطوة تعرية مستضد في البروتوكول محددة لجسم الأولية المستخدمة. للأجسام المضادة الأولية المختلفة، من الضروري تحديد عما إذا كانت المخازن المؤقتة لفضح pH منخفضة أو عالية ينتج أفضل إشارة. قد يتم استخدام تقنيات التثبيت مختلفة للكشف عن مستضد معين. على سبيل المثال، سجلت بيكام-1 وصف لتعمل بشكل أفضل على الأنسجة الثابتة الزنك، جزءا لا يتجزأ من البارافين، بينما يتطلب تثبيت نفس خطوات إضافية للحد من الخلفية ل جسم ثرومبومودولين34. وهكذا، نحن نستخدم التثبيت الفورمالين العادية، مما سمح بتمديد الدراسة إلى مجموعة متنوعة من المستضدات المختلفة. كثيرا ما يستخدم بديل بيكام-1 إيمونوستاينينج، إيسوليكتين B4 لتصور السفن. وإلى جانب نسبة من خلايا بطانية35، إيسوليكتين B4 تسميات أيضا إطلاق36 والضامة37. وعلاوة على ذلك، قد يتم استخدام مجموعة متنوعة من مولدات المضادات للتمييز بين خلايا بطانية الشرياني والوريدي38. طريقة أنيقة لتصور الوظيفية perfused السفن أو تحديد السفينة تنتشر أو الانحدار هي الحقن الوريدي يكتين إلى جانب الأسفار متبوعاً بتحليل كريوسيكتيونس24. ومع ذلك، هذا النهج إلى حد كبير يحد من إمكانيات للكشف عن المستضدات إضافية وإجراء تحليلات شكلي بسبب نوعية مختلفة كريوسيكشنز.
على المقاطع إيمونوستينيد حيث يتم تصور الإشارة مع الدأب، كثافة المنطقة يمكن الكمية تحديد استخدام البرمجيات ImageJ متاحة بحرية. بيد كالإشارة ليست خطية، ليس بالضبط تتوافق مع درجة تلطيخ بني على إلى مستوى التعبير البروتين.

وتتوفر مجموعة كبيرة ومتنوعة من نماذج الماوس المعدلة وراثيا، وعدد الدراسات الدوائية في الفئران عالية1،2. تخطيط صدى القلب، والتصوير بالرنين المغناطيسي هي النهج الشائع استخدامها لتوصيف وظيفة القلب ومورفولوجيا في هذه النماذج الماوس3المظهرية. وهدف البروتوكول المقدم تحليل وظيفة القلب ومورفولوجيا في الفئران الكبار. فهو يجمع بين مشخصين، النسيجي، وقياسات المناعي. فحص مشخصين يستخدم على نطاق واسع في الفئران4،5،،من67،،من89،10،11، 12. باشون et al. وحدد 11 205 الدراسات المنشورة في تداولو تعميم البحوثو المجلة الأمريكية الفسيولوجيا-القلب والدورة الدموية علم وظائف الأعضاءو أبحاث القلب والأوعية الدموية بين 2012 و 2015 أن ويستخدم فحص مشخصين في الحيوانات.
يتم استخدام تخطيط صدى القلب لتعريف تعمل القلب في الفئران المعدلة وراثيا5،6،،من1314،،من1516، 17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22، فضلا عن تحليل وظيفة القلب في تضخم المزمنة الناجمة عن الحمل الزائد، واحتشاء عضلة القلب الاسكيمية، ونماذج اعتلال عضلة القلب في الفئران (استعرض في12). تسمح معدات تحسين تخطيط صدى القلب لهذا الإجراء القياسي البطين الأيسر (LV) الانقباضي والانبساطي الأبعاد وتصوير دوبلر الأنسجة، شعاعية التباين احتشاء عضلة القلب، وتقييم وظيفة LV الإقليمية ومحمية التاجي 12-ومن الناحية المثالية، ينبغي إجراء دراسة مشخصين في الفئران واعية لتجنب الآثار السلبية للتخدير في تقلص وظيفة، مراقبة المنعكس اللاإرادي، ومعدل القلب11. ومع ذلك، يقتصر هذا النهج بشرط لتدريب الحيوانات؛ صعوبات في الحفاظ على درجة حرارة الجسم ثابتة؛ التحف الحركة؛ الإجهاد؛ ترددات عالية جداً في القلب؛ والحاجة إلى مالا يقل عن اثنين من المحققين لإجراء التجربة، لا سيما إذا كان يجري التحقيق في عدد كبير من الحيوانات. من المثير للاهتمام، أفادت دراسة أجريت مؤخرا لا توجد فروقات في معلمات مشخصين في الحيوانات المدربة وغير المدربة19. ونحن أداء قياسات مشخصين في تخديره من الفئران. التخدير مختلف البروتوكولات ستناقش أدناه.
على الرغم من أن الدقة القياسية تخطيط صدى القلب (&#62; 10 ميجاهرتز) هي كافية لتدبير LV الانقباضية وأبعاد االنقباضي ووظيفة القلب في الفئران الكبار، الطريقة محدودة في وصف الظواهر الهيكلية الكامنة وراء. وهكذا، أن نجمع بين القياسات في فيفو مع غذائها وتحاليل إيمونوهيستولوجيكال لقياس الكثافة القطر والسفينة كارديوميوسيتي، على سبيل المثال،. يمكن أيضا إجراء التحقيقات غذائها وإيمونوهيستولوجيكال الأخرى، مثل تحديد انتشار الأسلحة، ودراسة المبرمج، قياسات حجم احتشاء، تحديد التليف، والتعبير علامة محددة، على نفس النوع من معالجة الأنسجة ولكنها ليست موضوع هذا البروتوكول. ويوفر خليط في فيفو الفحص مشخصين بتحليلات النسيجي أفكاراً إضافية في التعديلات الهيكلية الكامنة. في خطوة إضافية، يمكن أن نكمل هذه القياسات مع التحقيقات الجزيئية وهيكلية فائقة. تحاليل نسيجية لا إكمال دراسة مشخصين بل أيضا أصبحت لا غنى عنها عندما حل ضربات القلب غير كافية. وهذا هو الحال خاصة في نماذج الفئران المعدلة وراثيا التي هي قاتلة الجنينية23،24.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Wheat germ agglutinin (WGA) conjugated tetramethylrhodamine</td>
			<td>Life Technologies, Molecular Probes</td>
			<td>W849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated Goat Anti-Rabbit IgG Antibody</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>BA-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avidin/Biotin Blocking Kit</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>SP-2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASTAIN Elite ABC HRP Kit (Peroxidase, Standard)</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>PK-6100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium with DAPI</td>
			<td>Vectorlabs</td>
			<td>H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SIGMAFAST 3,3&#39;-Diaminobenzidine tablets</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H1009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pecam-1 (CD31) antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab28364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound transmission gel, Gel Aquasonic 100</td>
			<td>Parker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Linear ultrasound probe, L15-7io</td>
			<td>Philips Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Echocardiograph, IE33 xMATRIX</td>
			<td>Philips Healthcare</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope, Leica DMi8</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Filterset DAPI</td>
			<td>Leica</td>
			<td>11525304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filterset TxR</td>
			<td>Leica</td>
			<td>11525310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera, SPOT RT3 Color Slider</td>
			<td>Spot Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging Software, SPOT 5.2 Advanced and Basic Software</td>
			<td>Spot Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging Computer</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14028-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14501-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10023-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11650-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent shaver</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>34-0243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cassettes for paraffin embedding</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4155F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>neutral buffered Formalin</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8727</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8733</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffine TEK III</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>automated embedding apparatus, Tissue-Tek VIP</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>6032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraffin-embedding station Tissue-Tek TEC 5</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>5229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome blades,Accu-Edge S35</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4685</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microscopy slides, Tissue-Tek</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>9533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cover slips, Tissue-Tek</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>9582</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium Tissue-Tek</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>1408</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>slide boxes</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>3958</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eosine solution</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hematoxyline solution</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>8711</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microtome, RM2125RT</td>
			<td>Leica</td>
			<td>720-1880 (VWR)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>water bath, Leica HI1210</td>
			<td>Leica</td>
			<td>720-0113(VWR)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>ACRO444220050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>734-0451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>staining glass dish</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MARI4220004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>staining jars</td>
			<td>VWR</td>
			<td>MARI4200005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Binder</td>
			<td>9010-0012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB and urea hydrogen peroxide tablets, SIGMAFAST 3,3&#8242;-Diaminobenzidine tablets</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (10X)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

echocardiographic and histological examination of cardiac morphology in the mouse

عدد متزايد من نماذج الماوس المعدلة وراثيا قد أصبحت متاحة في السنوات الأخيرة. وعلاوة على ذلك، العدد الدراسات الدوائية في الفئران مرتفع. توصيف المظهرية من هذه النماذج الماوس يتطلب أيضا دراسة وظيفة القلب ومورفولوجيا. تخطيط صدى القلب، والتصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي) هي الأساليب المستخدمة شيوعاً لتوصيف وظيفة القلب ومورفولوجيا في الفئران. مشخصين والتصوير بالرنين المغناطيسي المعدات المتخصصة لاستخدامها في القوارض الصغيرة مكلفة وتتطلب مساحة مخصصة. ويصف هذا البروتوكول قياسات القلب في الفئران باستخدام نظام مشخصين سريرية مع تحقيق الأوعية الدموية بشرية 15 ميغاهيرتز. وتجري القياسات على تخديره من الفئران الكبار. ثلاثة على الأقل من تسلسل الصور وتسجل وتحليلها لكل الحيوانات في وضع M في عرض قصير-محور باراستيرنال. بعد ذلك، يتم إجراء الفحص النسيجي القلب، ويتم تحديد أقطار كارديوميوسيتي على الهيماتوكسيلين-agglutinin ويوزين-أو جنين القمح (WGA)-الملون مقاطع البارافين. وتبلغ كثافة السفينة مورفوميتريكالي العزم بعد إيمونوستينينج بيكم-1. البروتوكول قد تم تطبيقها بنجاح على الدراسات الدوائية ومختلفة الوراثية الحيوانية نماذج تحت ظروف خط الأساس، وكذلك بعد تجريبي احتشاء عضلة القلب بربط دائم (الشريان التاجي تنازلي الأمامي الأيسر الفتى). في تجربتنا، مشخصين التحقيق يقتصر على الحيوانات تخديره وعملياً في الفئران الكبار وزنها على الأقل 25 غراما.

في الشكل 1، تثبت تسجيلات مشخصين الممثل فائدة تخطيط صدى القلب لتحديد تعمل القلب في الفئران المعدلة وراثيا. يمكن بسهولة التعرف على الفرق بين ماوس مع وظيفة القلب العادي (الشكل 1A) وحيوان مع البطين الأيسر المتوسعة وانخفاض وظيفة LV (الشكل 1B). ويبين الشكل 2 مقارنة كارديوميوسيتي قياسات القطر في الحيوانات دون (الشكل 2A) ومع تضخم القلب (الشكل 2) استخدام البارافين الهيماتوكسيلين ويوزين-ملطخة بقلب المقاطع وقياسات مقاطع طولية لانسجة القلب. يوضح الشكل 3 قياس أقطار عرضية كارديوميوسيتي استخدام مقاطع البارافين وغ الملون من قلوب لمراقبة الحيوانات مع تضخم القلب (الشكل 3B) والفئران (الشكل 3A). ويصور الشكل 4 فائدة immunohistochemistry بيكام-1 (DAB تلطيخ الركازة، براون) من أقسام القلب لتحديد كثافة السفينة من أنسجة القلب العادي (الشكل 4A) وقلوبنا مع زيادة الأوعية (الشكل 4B ).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55843/55843fig1.jpg"> 
الشكل 1: الدقة القياسية تخطيط صدى القلب (&#62; 10 ميجاهرتز) لإبعاد مقياس LV الانقباضي والانبساطي ووظيفة القلب في الفئران مع تضخم القلب المتوسعة بعد احتشاء عضلة القلب مقابل مراقبة الحيوانات. تسجيلات مشخصين الممثل من الفئران العادية وصحية (A) والحيوانات مع تمدد LV وانخفاض وظيفة LV بعد احتشاء عضلة القلب (Tie2-CreERT2؛ PPARβ/δ + تاموكسيفين الفئران)5 (ب). كما يرد لفاو ولفيد، ولفبو. تمثل أشرطة بيضاء الانقباضي والانبساطي قياس النقاط. أنها تتوافق مع المؤشر النقاط المحددة للقياسات وموضحة في الخطوة 1، 12 من البروتوكول. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55843/55843fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55843/55843fig2.jpg"> 
رقم 2: الهيماتوكسيلين ويوزين-ملطخة بأقسام لقياس أقطار كارديوميوسيتي في خلايا مقطعة طوليا من الفئران مع متسعة القلب تضخم ومراقبة الحيوانات. صور الممثل من أقطار كارديوميوسيتي في الفئران مع أحجام كارديوميوسيتي العادي (A) والحيوانات مع كارديوميوسيتي زيادة أحجام (Tie2-CreERT2؛ PPARβ/δ + تاموكسيفين الفئران)5 (ب). خطوط سوداء تشير إلى أقطار المقاسة. يتم تمثيل القيم لكل قياس. تغيير حجم أشرطة = 50 ميكرومتر. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55843/55843fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55843/55843fig3.jpg"> 
الشكل 3: مقاطع وغ الملون لقياس أقطار كارديوميوسيتي عرضية في أجزاء من أنسجة القلب من الفئران مع تضخم القلب المتوسعة مقابل السيطرة على الحيوانات- صور الممثلة لأقطار كارديوميوسيتي في الفئران بالحجم العادي كارديوميوسيتي (A) والحيوانات مع كارديوميوسيتي زيادة أحجام (Tie2-CreERT2؛ PPARβ/δ + تاموكسيفين الفئران)5 (ب). وقد كونتيرستينيد نوى مع DAPI. خطوط بيضاء تشير إلى أقطار يقاس على مستوى الأنوية (أزرق). يتم تمثيل القيم لكل قياس. تغيير حجم أشرطة = 50 ميكرومتر. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55843/55843fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55843/55843fig4.jpg"> 
الشكل 4: مقاطع إيمونولابيليد بيكم-1 تحليل كثافة السفينة القلب في مكافحة الفئران والحيوانات مع زيادة الأوعية. الصور التمثيلية للسفينة وسم الفئران مع كثافة الأوعية الدموية العادية (أ) والحيوانات مع زيادة الأوعية الدموية (Tie2-CreERT2؛ PPARβ/δ + تاموكسيفين الفئران)5 (ب). وقد كونتيرستينيد نوى مع الهيماتوكسيلين. الأسهم تشير إلى السفن بيكم-1-إيجابية. تغيير حجم أشرطة = 50 ميكرومتر. <a href="https://ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/55843/55843fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>

Watch this Scientific Journal Video about Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse at JoVE.com

Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

كثيرا ما يستخدم الفحص مشخصين في الفئران. وقد وضعت أجهزة الموجات فوق الصوتية ذات الدقة العالية باهظة الثمن لهذا الغرض. ويصف هذا البروتوكول إجراء مشخصين بأسعار معقولة جنبا إلى جنب مع تحليل شكلي نسيجية لتحديد مورفولوجيا القلب.

دراسة مورفولوجيا القلب مشخصين وغذائها في الماوس

An increasing number of genetically modified mouse models has become available in recent years. Moreover, the number of pharmacological studies performed ...

echocardiographic-histological-examination-cardiac-morphology

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

21.2K Views.  CNRS, INSERM, iBV. كثيرا ما يستخدم الفحص مشخصين في الفئران. وقد وضعت أجهزة الموجات فوق الصوتية ذات الدقة العالية باهظة الثمن لهذا الغرض. ويصف هذا البروتوكول إجراء مشخصين بأسعار معقولة جنبا إلى جنب مع تحليل شكلي نسيجية لتحديد مورفولوجيا القلب.

Video: Echocardiographic and Histological Examination of Cardiac Morphology in the Mouse

Assessment of Cardiac Function and Myocardial Morphology Using Small Animal Look-locker Inversion Recovery (SALLI) MRI in Rats

Small animal magnetic resonance imaging is an important tool to study cardiac function and changes in myocardial tissue. The high heart rates of small animals (200 to 600 beats/min) have previously limited the role of CMR imaging. Small animal Look-Locker inversion recovery (SALLI) is a T1 mapping sequence for small animals to overcome this problem 1. T1 maps provide quantitative information about tissue alterations and contrast agent kinetics. It is also possible to detect diffuse myocardial processes such as interstitial fibrosis or edema 1-6. Furthermore, from a single set of image data, it is possible to examine heart function and myocardial scarring by generating cine and inversion recovery-prepared late gadolinium enhancement-type MR images 1.
	The presented video shows step-by-step the procedures to perform small animal CMR imaging. Here it is presented with a healthy Sprague-Dawley rat, however naturally it can be extended to different cardiac small animal models.

Assessment of Cardiac Function and Myocardial Morphology Using Small Animal Look-locker Inversion Recovery SALLI MRI in Rats

Contrast enhanced cardiac magnetic resonance (CMR) imaging allows comprehensive in vivo assessment of the heart in small animal models of cardiovascular disease. Here we detail the procedures to perform CMR imaging, reconstruction and analysis using Small Animal Lock-Locker Inversion Recovery (SALLI) in rats.

تقييم وظيفة القلب والصرف عضلة القلب عن طريق الحيوانات الصغيرة نظرة خزانة الاسترداد عكس (صلي) التصوير بالرنين المغناطيسي في الجرذان

Small animal magnetic resonance  imaging is an important tool to study cardiac function and changes in myocardial  tissue. The high heart rates of small ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

الجوانب الفنية للناسور أبهري أجوفي ماوس

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Echocardiographic Assessment of the Right Heart in Mice

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential therapies. Given the expense and time involved in creating animal models of disease, it is critical that researchers have tools to accurately assess phenotypic expression of disease. Right ventricular dysfunction is the major manifestation of pulmonary hypertension. Echocardiography is the mainstay of the noninvasive assessment of right ventricular function in rodent models and has the advantage of clear translation to humans in whom the same tool is used. Published echocardiography protocols in murine models of PAH are lacking.
In this article, we describe a protocol for assessing RV and pulmonary vascular function in a mouse model of PAH with a dominant negative BMPRII mutation; however, this protocol is applicable to any diseases affecting the pulmonary vasculature or right heart. We provide a detailed description of animal preparation, image acquisition and hemodynamic calculation of stroke volume, cardiac output and an estimate of pulmonary artery pressure.

This article provides a protocol for the echocardiographic assessment of right ventricular size and pulmonary hypertension in mice. Applications include phenotype determination and serial assessment in transgenic and toxin-induced mouse models of cardiomyopathy and pulmonary vascular disease.

تقييم تخطيط صدى القلب من القلب الحق في الفئران

Transgenic and toxic models of pulmonary arterial hypertension (PAH) are widely used to study the pathophysiology of PAH and to investigate potential ...

Visualization of Streptococcus pneumoniae within Cardiac Microlesions and Subsequent Cardiac Remodeling

During bacteremia Streptococcus pneumoniae can translocate across the vascular endothelium into the myocardium and form discrete bacteria-filled microscopic lesions (microlesions) that are remarkable due to the absence of infiltrating immune cells. Due to their release of cardiotoxic products, S. pneumoniae within microlesions are thought to contribute to the heart failure that is frequently observed during fulminate invasive pneumococcal disease in adults. Herein is demonstrated a protocol for experimental mouse infection that leads to reproducible cardiac microlesion formation within 30 hr. Instruction is provided on microlesion identification in hematoxylin &#38; eosin stained heart sections and the morphological distinctions between early and late microlesions are highlighted. Instruction is provided on a protocol for verification of S. pneumoniae within microlesions using antibodies against pneumococcal capsular polysaccharide and immunofluorescent microscopy. Last, a protocol for antibiotic intervention that rescues infected mice and for the detection and assessment of scar formation in the hearts of convalescent mice is provided. Together, these protocols will facilitate the investigation of the molecular mechanisms underlying pneumococcal cardiac invasion, cardiomyocyte death, cardiac remodeling as a result of exposure to S. pneumoniae, and the immune response to the pneumococci in the heart.

Visualization of Streptococcus pneumoniae within Cardiac Microlesions and Subsequent Cardiac Remodeling

Streptococcus pneumoniae forms discrete non-purulent microscopic lesions in the heart. Outlined is the protocol for a murine model of cardiac microlesion formation. Instruction is provided on microlesion visualization using microscopy, discrimination between early and late microlesions, and methods to detect cardiac remodeling in hearts of convalescent animals.

التصور<em&gt; العقدية الرئوية</em&gt; داخل القلب Microlesions وإعادة عرض القلب لاحقا

During bacteremia Streptococcus pneumoniae can translocate across the vascular endothelium into the myocardium and form discrete bacteria-filled ...

Do's and Don'ts in the Preparation of Muscle Cryosections for Histological Analysis

Histological evaluation of muscle biopsies has served as an indispensable tool in the understanding of the development and progression of pathology of neuromuscular disorders. However, in order to do so, proper care needs to be taken when excising and preserving tissues to achieve optimal staining. One method of tissue preservation involves fixing tissues in formaldehyde and then embedding them with paraffin wax. This method preserves morphology well and allows for long-term storage at RT but is cumbersome and requires handling of toxic chemicals. Further, formaldehyde fixation results in antigen cross-linking, which necessitates antigen retrieval protocols for effective immunostaining. On the contrary, frozen sectioning does not require fixation and thus retains biological antigen conformation. This method also provides a distinct advantage in quick turn around time, making it especially useful in situations needing quick histological evaluation like intraoperative surgical biopsies. Here we describe the most effective method of preparing muscle biopsies for visualization with different histological and immunological stains.

Here we demonstrate the most efficient methods for freezing, embedding, cryosectioning, and staining of muscle biopsies to avoid freezing artifacts.

ما يفعل وما يترك في إعداد العضلات Cryosections للتحليل النسيجي

Histological evaluation of muscle biopsies has served as an indispensable tool in the understanding of the development and progression of pathology of ...

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

تقييم القلب المورفولوجية والوظيفية التغييرات في الفأر نموذج من مستعرض الأورطي انقباض بواسطة تخطيط صدى القلب التصوير

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at the 12 codon (Ptf1acre/+;LSL-KrasG12D/+) mouse strain as a model of human pancreatic cancer. The goal of our current studies is to identify novel metabolic biomarkers of pancreatic cancer progression. We have performed metabolic profiling of urine, feces, blood, and pancreas tissue extracts, as well as histological analyses of the pancreas to stage the cancer progression. The mouse pancreas is not a well-defined solid organ like in humans, but rather is a diffusely distributed soft tissue that is not easily identified by individuals unfamiliar with mouse internal anatomy or by individuals that have little or no experience performing mouse organ dissections. The purpose of this article is to provide a detailed step-wise visual demonstration to guide novices in the removal of the mouse pancreas by dissection. This article should be especially valuable to students and investigators new to research that requires harvesting of the mouse pancreas by dissection for metabolic profiling or histological analyses.

This video article provides a detailed demonstration of the procedures required to successfully remove the pancreas from a mouse by dissection for histological analysis and metabolic profiling.

تشريح البنكرياس الماوس للتحليل النسيجي والتنميط الأيضية

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Cardiac Magnetic Resonance Imaging at 7 Tesla

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher magnetic field strengths and potentially provides improved signal contrast and spatial resolution. While promising results have been achieved, ultra-high field CMR is challenging due to energy deposition constraints and physical phenomena such as transmission field non-uniformities and magnetic field inhomogeneities. In addition, the magneto-hydrodynamic effect renders the synchronization of the data acquisition with the cardiac motion difficult. The challenges are currently addressed by explorations into novel magnetic resonance technology. If all impediments can be overcome, ultra-high field CMR may generate new opportunities for functional CMR, myocardial tissue characterization, microstructure imaging or metabolic imaging. Recognizing this potential, we show that multi-channel radio frequency (RF) coil technology tailored for CMR at 7 Tesla together with higher order B0 shimming and a backup signal for cardiac triggering facilitates high fidelity functional CMR. With the proposed setup, cardiac chamber quantification can be accomplished in examination times similar to those achieved at lower field strengths. To share this experience and to support the dissemination of this expertise, this work describes our setup and protocol tailored for functional CMR at 7 Tesla.

The sensitivity gain inherent to ultrahigh field magnetic resonance holds promise for high spatial resolution imaging of the heart. Here, we describe a protocol customized for functional cardiovascular magnetic resonance (CMR) at 7 Tesla using an advanced multi-channel radio-frequency coil, magnetic field shimming and a triggering concept.

القلب التصوير بالرنين المغناطيسي في 7 تسلا

CMR at an ultra-high field (magnetic field strength B0&#160;&#8805; 7 Tesla) benefits from the signal-to-noise ratio (SNR) advantage inherent at higher ...

Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV diastolic function is rarely quantified in experimental studies. This might be due to technical difficulties in the visualization of the RV in the apical four-chamber view in rodents. Here we describe two positions facilitating the visualization of the apical four-chamber view in mice to assess the RV diastolic function.
The apical four-chamber view is enabled by tilting the mouse fixation platform to the left and caudally (LeCa) or to the right and cranially (RiCr). Both positions provide images of comparable quality. The results of the RV diastolic function obtained from two positions are not significantly different. Both positions are comparably easy to perform. This protocol can be incorporated into published protocols and enables detailed investigations of the RV function.

Here we describe and compare two positions for obtaining the apical four-chamber view in mice. These positions enable the quantification of the right ventricular function, provide comparable results, and can be used interchangeably.

قياس صدى القلب للمعلمات الانبساطيالبطينية اليمنى في الماوس

Diastolic dysfunction is a prominent feature of right ventricular (RV) remodeling associated with conditions of pressure overload. However, the RV ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to that of humans and that of other large animal models such as dogs and pigs. However, the rabbit model has the additional advantage of lower maintenance costs compared to other large animal models. The longitudinal evaluation of cardiac function using echocardiography, when appropriately implemented, is a useful methodology for preclinical assessment of novel therapies for heart failure with reduced ejection fraction (e.g. cardiac regeneration). The correct use of this non-invasive tool requires the implementation of a standardized examination protocol following international guidelines. Here we describe, step by step, a detailed protocol supervised by veterinary cardiologists for performing echocardiography in the rabbit model, and demonstrate how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

Here we describe, step by step, a detailed protocol for performing echocardiography in the rabbit model. We show how to correctly obtain the different echocardiographic views and imaging planes, as well as the different imaging modes available in a clinical echocardiography system routinely used in human and veterinary patients.

فحص صدى القلب عبر الصدر في نموذج الأرنب

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...