الكتاب أشكر روث Zelkha، MS، لمساعدتها السخية في مجال التصوير. وأيد هذا البحث من قبل برنامج السريرية التنمية العلماء جائزة K12EY021475 إلى ME، منح R01 EY024349-01A1 إلى ARD، الأساسية منحة EY01792 من المعهد الوطني للعيون، المعاهد الوطنية للصحة، ومنحة غير المقيد من البحوث للوقاية من العمى. ARD هو حاصل على جائزة التطوير المهني من البحوث للوقاية من العمى.

كافة الإجراءات التي أجريت على الحيوانات تتوافق مع جمعية البحوث في تصريحات الرؤية وطب العيون للاستخدام الحيواني في مجال البحوث الرؤية. استخدمت أربعة عشر أربع إلى الذكور / الإناث C57BL / 6J الفئران نوع البرية القديمة ستة أشهر: عشرة الفئران لنموذج الإصابة والأربعة الحيوانات التحكم (القرنيات المعافين). 1. إعداد الحيوان <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفأر مع حقنة داخل الصفاق من 100 ملغم / كغم من الكيتامين و 5 ملغم / كغم من خليط زيلازين. بعد التخدير اتخذت تأثير، قرصة أخمص القدمين إلى تأكيد عمق التخدير. يجب أن الحيوان لا تتفاعل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تفقد العين تحت المصباح الشقي قبل إجراء التجارب للتحقق من عدم وجود أي إصابة القرنية السابقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غرس بنسبة انخفاض قدرها 1٪ تتراكائين هيدروكلوريد على العين. بعد 60-90 ثانية، واختبار رد الفعل القرنية لتأكيد غياب الإحساس. بروباراكايين هيدروكلوريد 0.5٪ يمكن أن تستخدم بدلا من ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما فقدان الإحساس القرنية هيالمؤكد، ضع بلطف قطرة من 5٪ بوفيدون اليود على العين وعلى الشعر حول العين. تمحو الانخفاض بعد 1 دقيقة أو انتشاره على الشعر حول العين لمنع الشعر من التدخل في تلميح أداة. </li></ol> 2. كاشط ظهارة القرنية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ارتداء القفازات الجراحية وثوب. إعداد الأدوات اللازمة: لدغ الدورية معقمة وزوج من ملاقط معقمة. للتحكم بشكل أفضل، واستخدام الملقط عازمة. وضع الأدوات على ورقة معقمة أثناء العملية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام الملقط عازمة واستقرار العين عن طريق الاستيلاء على أغطية من جانب الأنف وproptosing بلطف العين. تجنب استخدام الكثير من الضغط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحت المجهر الجراحي، حلاقة 360 درجة في جميع أنحاء المنطقة الحوفي مرتين باستخدام لدغ الدورية العقيمة. يرحل حوف مع سرعة 5-6 ثانية في الجولة. ملاحظة: إن لدغ ديه سرعة ثابتة واحدة. ومع ذلك، من أجل أن تناوب على سرعة ثابتة، و&quot;الجوز نهاية&quot; يجب تشديد تماما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة ظهارة القرنية بأكملها من حوف إلى حوف مع لدغ الدورية. للحصول على نتائج أفضل، حرك أداة بطريقة دائرية وأنه عقد بالتوازي إلى حد ما على سطح القرنية للعمل مع الجانب الوحشي من طرفها. احرص على عدم جرح سدى من خلال عدم إعادة تنظيف المناطق حيث تم بالفعل إزالة ظهارة. لا تنطبق أي ضغط على العين. تنظيف رأس الفرشاة على النحو المطلوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غرس قطرة العقيمة المالحة الفوسفات مخزنة على القرنية وإزالة أي صفائح الظهارية منفصلة مع تنظيف الأنسجة اللينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حلق ظهارة المتبقية، إن وجدت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إيلاء الاهتمام لذيل الماوس أثناء الجراحة. ملاحظة: في حالة حدوث أي حركة، قد تلاشى عمق التخدير وهناك حاجة إلى مزيد الحقن. وينبغي أن يكون ثلث إلى ثلثي حجم حقن الأساسي كافية. لا جرعة زائدة الحيوان مع دواء مخدر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم جميع الأدوات قبل استخدامها على العين آخر. </li></ol> 3. تأكيد إزالة الظهارية كاملة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق قطرة من 1 ملغ / مل فلوريسئين الصوديوم على القرنية. تنظيف القرنية بعد 30 ثانية و فحصها تحت المجهر مع الكوبالت الأزرق مرشح للتحقق من الاستئصال الكامل للظهارة. ملاحظة: يتم تصور المناطق القرنية مع العيوب الظهارية باللون الأخضر. </li></ol> 4. بعد عملية العناية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان على بطانية التدفئة والحفاظ عليه في مكان آمن (على سبيل المثال، في قفصه)، في حين ظل الانتعاش. لا تبقي حيوان فاقد الوعي في الشركة من تلك اعية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق 1٪ الاريثروميسين مرهم للعين. وهذا أيضا منع جفاف العين. مواصلة تطبيق يوميا المضادات الحيوية لمدة أسبوع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضخ 0.1 ملغم / كغم البوبرينورفين تحت الجلد بعد العملية، ومرة ​​أخرى بعد 12 ساعة. مواصلة حقن مرتين يوميا لمدة يومين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الحيوانات ل30 - 45 دقيقة، حتى الشفاء التام من المخدر. ملاحظة: حركة خفيفة في عضلات التنفس على السطح البطني تشير العافية الحيوان في حين ظل الانتعاش. </li></ol>

<ol>
	<li>Afsharkhamseh, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stability+of+limbal+stem+cell+deficiency+after+mechanical+and+thermal+injuries+in+mice.">Stability of limbal stem cell deficiency after mechanical and thermal injuries in mice.</a> Exp. Eye Res. 145, 88-92 (2015).</li><li>Dor&#224;, N. J., Hill, R. E., Collinson, J. M., West, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+tracing+in+the+adult+mouse+corneal+epithelium+supports+the+limbal+epithelial+stem+cell+hypothesis+with+intermittent+periods+of+stem+cell+quiescence.">Lineage tracing in the adult mouse corneal epithelium supports the limbal epithelial stem cell hypothesis with intermittent periods of stem cell quiescence.</a> Stem Cell Res. 15 (3), 665-677 (2015).</li><li>Ahmad, S., Osei-Bempong, C., Dana, R., Jurkunas, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+culture+and+transplantation+of+human+limbal+stem+cells.">The culture and transplantation of human limbal stem cells.</a> J. Cell Physiol. 225 (1), 15-19 (2010).</li><li>Kolli, S., Ahmad, S., Lako, M., Figueiredo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+clinical+implementation+of+corneal+epithelial+stem+cell+therapy+for+treatment+of+unilateral+limbal+stem+cell+deficiency.">Successful clinical implementation of corneal epithelial stem cell therapy for treatment of unilateral limbal stem cell deficiency.</a> Stem Cells. 28 (3), 597-610 (2010).</li><li>Ahmad, S., Figueiredo, F., Lako, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+stem+cells:+characterization,+culture+and+transplantation.">Corneal epithelial stem cells: characterization, culture and transplantation.</a> Regen. Med. 1 (1), 29-44 (2006).</li><li>He, H., Yiu, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-based+therapy+for+treating+limbal+stem+cells+deficiency:+A+review+of+different+strategies.">Stem cell-based therapy for treating limbal stem cells deficiency: A review of different strategies.</a> Saudi J. Ophthalmol. 28 (3), 188-194 (2014).</li><li>Pal-Ghosh, S., Pajoohesh-Ganji, A., Tadvalkar, G., Stepp, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removal+of+the+basement+membrane+enhances+corneal+wound+healing.">Removal of the basement membrane enhances corneal wound healing.</a> Exp Eye Res. 93 (6), 927-936 (2011).</li><li>Stepp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wounding+the+cornea+to+learn+how+it+heals.">Wounding the cornea to learn how it heals.</a> Exp. Eye Res. 121, 178-193 (2014).</li><li>Amirjamshidi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limbal+fibroblast+conditioned+media:+a+non-invasive+treatment+for+limbal+stem+cell+deficiency.">Limbal fibroblast conditioned media: a non-invasive treatment for limbal stem cell deficiency.</a> Mol. Vis. 17, 658-666 (2011).</li><li>Li, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+AlgerBrush+II+rotating+burr+as+a+tool+for+inducing+ocular+surface+failure+in+the+New+Zealand+White+rabbit.">Evaluation of the AlgerBrush II rotating burr as a tool for inducing ocular surface failure in the New Zealand White rabbit.</a> Exp. Eye Res. 147, 1-11 (2016).</li><li>Ti, S. E., Anderson, D., Touhami, A., Kim, C., Tseng, S. C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+outcome+following+transplantation+of+ex+vivo+expanded+limbal+epithelium+on+amniotic+membrane+for+total+limbal+deficiency+in+rabbits.">Factors affecting outcome following transplantation of ex vivo expanded limbal epithelium on amniotic membrane for total limbal deficiency in rabbits.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 43 (8), 2584-2592 (2002).</li><li>Ma, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstruction+of+chemically+burned+rat+corneal+surface+by+bone+marrow-derived+human+mesenchymal+stem+cells.">Reconstruction of chemically burned rat corneal surface by bone marrow-derived human mesenchymal stem cells.</a> Stem Cells. 24 (2), 315-321 (2006).</li><li>Bu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+activated+omental+cells+on+rat+limbal+corneal+alkali+injury.">Effects of activated omental cells on rat limbal corneal alkali injury.</a> Exp. Eye Res. 121, 143-146 (2014).</li><li>Luengo Gimeno, F., Lavigne, V., Gatto, S., Croxatto, J. O., Correa, L., Gallo, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+corneal+stem-cell+transplantation+in+rabbits+with+severe+ocular+alkali+burns.">Advances in corneal stem-cell transplantation in rabbits with severe ocular alkali burns.</a> J. Cataract Refract. Surg. 33 (11), 1958-1965 (2007).</li><li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+limbal+stem+cell+deficiency+induced+by+topical+medication+with+the+preservative+benzalkonium+chloride.">A mouse model of limbal stem cell deficiency induced by topical medication with the preservative benzalkonium chloride.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 54 (9), 6314-6325 (2013).</li><li>Huang, A. J., Tseng, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+wound+healing+in+the+absence+of+limbal+epithelium.">Corneal epithelial wound healing in the absence of limbal epithelium.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 32 (1), 96-105 (1991).</li><li>Liu, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cornea-specific+expression+of+K12+keratin+during+mouse+development.">Cornea-specific expression of K12 keratin during mouse development.</a> Curr. Eye Res. 12 (11), 963-974 (1993).</li><li>Nakatsu, M. N., Gonz&#225;lez, S., Mei, H., Deng, S. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+limbal+mesenchymal+cells+support+the+growth+of+human+corneal+epithelial+stem/progenitor+cells.">Human limbal mesenchymal cells support the growth of human corneal epithelial stem/progenitor cells.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 55 (10), 6953-6959 (2014).</li><li>Pajoohesh-Ganji, A., Pal-Ghosh, S., Tadvalkar, G., Stepp, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+goblet+cells+and+their+niche:+implications+for+corneal+stem+cell+deficiency.">Corneal goblet cells and their niche: implications for corneal stem cell deficiency.</a> Stem Cells. 30 (9), 2032-2043 (2012).</li><li>McCloy, R. A., Rogers, S., Caldon, C. E., Lorca, T., Castro, A., Burgess, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+inhibition+of+Cdk1+in+G+2+phase+overrides+the+SAC+and+decouples+mitotic+events.">Partial inhibition of Cdk1 in G 2 phase overrides the SAC and decouples mitotic events.</a> Cell Cycle. 13, 1400-1412 (2014).</li></ol>

The authors declare that they have nothing to disclose.

توضح هذه المقالة تقنية استنساخه وبسيطة نسبيا لخلق نموذج الفأر من LSCD. هناك عدة جوانب هامة من هذا الطراز التي تستحق الملاحظة. أولا، نماذج خلافا التي تستخدم المواد الكيميائية 11، 12، وإصابة ينطوي في المقام الأول ظهارة السطحية (والغشاء القاعدي)، مع الحد الأدنى من الضرر للسدى القرنية الأساسي أو الهياكل داخل العين الأخرى. وبالتالي، ليس هناك سوى التهاب محدود وتندب، وكلاهما يمكن أن تعقيد الإجراءات وجعلها أكثر صعوبة لتقييم نتائج أي تدخلات تستهدف الخلايا الجذعية الحوفي. دراسة حديثة مثيرة للاهتمام التي كتبها لي وآخرون. 10، الذي يقارن بين استخدام لدغ الدورية مع مجموعات مختلفة من العلاجات الجراحية والكيميائية، كما وجدت لدغ ليكون أكثر أمنا وأكثر فعالية في خلق LSCD في الأرانب. ثانيا، نموذج يبدو أن تكون مستقرة لمدة لا تقل مدة تصل إلى ثلاثة أشهر 1. خلق هذا النموذج ينطوي على استخداملدغ الدورية، أداة غير مألوف للأطباء الذين يعملون مع القرنية، وكذلك لأولئك الذين لا يفعلون الدراسات الماوس جرح. ميزته على استخدام ملعقة حادة هي أن الإصابة أكثر اتساقا وقابلة للتكرار 1. لتدمير أفضل الخلايا الجذعية الحوفي، كان يعامل المنطقة الحوفي مرتين. واستنادا إلى الخبرة في العمل على عيون الماوس، وعلاج أكثر من جولتين غالبا ما يحك الأوعية الدموية الحوفي ويسبب النزيف. في حالة استخدام التقنية في الحيوانات الأخرى، يمكن تعديل هذه الخطوة تبعا لسماكة الظهارية القرنية. في هذه الدراسة، تم استخدام أداة الآلية مع لدغ طرف 0.5 ملم. نصائح لدغ في مختلف الأشكال والأحجام الأخرى وتتوفر أيضا، ويمكن استخدامها بدلا من ذلك، اعتمادا على مواصفات القرنية وعلى حجم العين. لي وآخرون. 10 ذكرت لدغ 2.5 ملم لتكون مناسبة لإزالة باستمرار القرنية الأرنب وظهائر الحوفي. للحصول على الأمثلتم حلق نتيجة، ظهائر الحوفي والقرنية بطريقة دائرية، وكان يستخدم الجانب الوحشي من لدغ. لمنع وبر من التدخل في تلميح أداة، انتشر انخفاض بوفيدون اليود على الشعر حول العين، بدلا من أن تمحى. يجب أن لا يتم تشغيل الأداة بشكل ثابت في بقعة واحدة، لأن هذا قد يسبب ثقب. علاج حوف بوتيرة بطيئة جدا يمكن أن يؤدي إلى نزيف. بسرعة ما يقرب من 6 ثانية في جولة هي مناسبة لC57BL / 6J الماوس العين. ومن الأهمية بمكان تجنب سدى عارية تنظيف إعادة، حيث سيؤدي ذلك إلى إحداث مزيد من الالتهاب وعتامة سدى. يجب أن لا يتم تطبيق الضغط على العين في حين الكشط ظهارة. بعد العملية، كانت ملطخة القرنية مع صبغة فلوريسئين للتأكد من إزالة الظهارية كاملة. ومن المهم لمنع جفاف العين خلال الانتعاش الحيوان. القيود هي أن هذا الأسلوب لا يمكن إزالة 100٪ من الخلايا الجذعية. بل هو أيضا إلى حد ما يعتمد المشغل ويتطلب ممارسة لإعطاء المشاركينالنتائج nsistent. عند دراسة النمط الظاهري الظهارية القرنية، جبل بأكمله تلطيخ هو أفضل وسيلة لتقييم نتائج هذا النموذج. وذلك لأنه يسمح للظهارة القرنية بأكملها ليتم تقييمها في وقت واحد، في حين المقاطع العرضية من شأنه أن يعطي فقط معلومات حول كل قسم معين. هذه التقنية يمكن السيطرة عليها يمكن أن تحدث LSCD في الفئران، وربما في غيرها من الحيوانات أيضا. ويوفر نموذج مناسب من LSCD لدراسة علاجات جديدة واكتشاف الجوانب الأوسع للالفيزيولوجيا المرضية المرض. مع بعض التعديلات، يمكن أن يكون مفيدا في دراسة القرنية التئام الجروح، والأوعية الدموية، وlymphangiogenesis كذلك.

مطلوب ظهارة القرنية للحفاظ على وضوح وسلامة القرنية. يتجدد باستمرار طوال الحياة عن طريق الخلايا الجذعية الظهارية المقيمين في واحد حوف منطقة ضيقة عند تقاطع القرنية والملتحمة. هذه الخلايا الجذعية الحوفي تجديد الذات تلعب دورا حاسما في تجديد ظهارة القرنية، سواء بشكل طبيعي وبعد الاصابة. ونضوب جزئي أو كامل من هذه الخلايا الجذعية يؤدي إلى تقرحات القرنية المتكررة، والألم، تندب القرنية واتساع الأوعية الدموية، وظهور الخلايا الكأسية، وإذا تركت دون علاج، والعمى القرنية. وتعرف هذه الحالة باسم الحوفي نقص الخلايا الجذعية (LSCD) ويمكن أن يكون مجهول السبب. وراثي. أو مكتسبة بسبب الإصابات الكيميائية أو الحرارية، وارتداء العدسات اللاصقة على المدى الطويل، والتهاب مزمن 1-6. البحث عن LSCD يتطلب نماذج حيوانية مناسبة أن يقلد ليس فقط المرض في البشر، ولكن لا يمكن استنساخه ومستدام، مع الأقلجبل إصابة الهياكل القرنية والعين الأخرى. هذا النموذج هو ضروري لتقييم العلاجات وتوضيح آليات المرض على المستوى الجزيئي والخلوي. كما هو موضح قبل 1، مع استخدام لدغ الدورية، يمكن للمرء بسهولة تطوير نموذج الفأر من LSCD الذي يضم مزايا المشار إليها، واستمرت لمدة ثلاثة أشهر على الأقل. الهدف من هذه الدراسة هو تقديم نموذج الفأر بسيطة، قابلة للتكرار، والمستدام للLSCD. لدغ الدورية هو أداة قوية التي تزيل بالتساوي الظهارة دون إصابة سدى الأساسي 1. وقد تم استخدامه للحث على تآكل القرنية المركزي 7 و 8 في الدراسات شفاء الجروح. لم تم الإبلاغ عن تقنية المعروض على خلق LSCD في الماوس قبل. سبق عرضه أساليب تجريف ظهارة مع نتيجة ملعقة حادة في أقل موحدة إصابة خاصة في حوف والنمط الظاهري أكثر متغير 1، 9، مع مزيد من استعادة سو طبيعية ظهارة القرنية 1. على عكس مكشطة حادة، ولدغ الدورية يزيل الغشاء القاعدي الظهارية، وكذلك 7 و 8 و 10. طرق ذكرت أخرى لقطع الخلايا الجذعية تنطوي على استخدام المواد الكيميائية، مثل هيدروكسيد الصوديوم، ن heptanol، وكلوريد البنزالكونيوم، والتي لا يمكن أن تحفز الإصابة غير المرغوب فيها للهياكل العين الكامنة، ولكن أيضا قد تؤدي إلى التهابا حادا وعتامة القرنية لاحقة أو الظهارية الحرشفية حؤول 11-15. لا يرتبط لدغ بالتناوب مع هذه المضاعفات الشديدة. إزالة جراحيا ظهارة الحوفي، وحدها أو مع استخدام المواد الكيميائية 10، 11، 16، هو أكثر صعوبة لأداء وليس الخيار الأفضل في الحيوانات مع عيون صغيرة وظهائر الحوفي رقيقة (مثل الفئران). وبالإضافة إلى ذلك، من المستغرب، limbectomy قد لا تزال تترك بعض من ظهارة الحوفي وراء 10. وهذا الاسلوب هو موضح أدناه، يؤدي إلى LSCD مع اتساع الأوعية الدمويةد conjunctivalization الذي يحاكي عرض LSCD الكامل في المرضى ويستمر لمدة ثلاثة أشهر على الأقل 1. وهي مناسبة لأولئك الذين يهدفون إلى دراسة LSCD أو جرح الفيزيولوجيا المرضية الشفاء، علم المناعة، والعلاجات المحتملة في الفئران. ربما، مع بعض التعديلات، وهذا الإجراء لا يمكن أن يؤديها في الفئران أو الأرانب 10. كما لدغ الدورية يزيل بكفاءة ظهارة، ويمكن استخدامها في أي بحث المتعلقة القرنية الطلائية الكشط / جرح وفي أي معاملة ذات الصلة أو دراسات البيولوجيا الجزيئية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1091">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:320px;">&#160;Rotating burr: AlgerBrush II rust ring remover&#160;</td>
			<td style="width:277px;">Rumex International Co, Clearwater, FL</td>
			<td style="width:144px;">&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 16-141</td>
			<td style="width:351px;">0.5 mm burr. Also available from other companies.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:320px;">&#160;Surgical microscope</td>
			<td style="width:277px;">Wild Heerbrugg, Switzerland</td>
			<td style="width:144px;">&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Wild M691</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:320px;">&#160;Digital camera</td>
			<td style="width:277px;">Nikon, Thailand</td>
			<td style="width:144px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:320px;">&#160;Nikon FS-2 slit lamp</td>
			<td style="width:277px;">Nikon, Japan</td>
			<td style="width:144px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:320px;">&#160;Polyclonal anti-CK12 antibody</td>
			<td style="width:277px;">Santa Cruz Blotechnology, CA,</td>
			<td style="width:144px;">&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; SC-17101</td>
			<td>1:100 concentration</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:320px;">&#160;Monoclonal anti-CK8 antibody</td>
			<td style="width:277px;">TROMA-I-s, Iowa City, IA</td>
			<td style="width:144px;">&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; AB_531826</td>
			<td>1:50 concentration</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple mechanical procedure to create limbal stem cell deficiency in mouse

الحوفي نقص الخلايا الجذعية (LSCD) هو حالة من عطل أو فقدان الخلايا الجذعية الظهارية الحوفي، وبعد ذلك يتم استبدال ظهارة القرنية مع الملتحمة. المرضى الذين يعانون من عيوب المتكررة القرنية، الألم والالتهاب، وفقدان الرؤية. سابقا، وقد وصفت نموذج الفئران من LSCD وبالمقارنة مع اثنين من نماذج أخرى. وكان الهدف هو إنتاج نموذج الفأر ثابت من LSCD أن كلا يحاكي النمط الظاهري في البشر وتستمر لفترة كافية لتجعل من الممكن لدراسة الفيزيولوجيا المرضية المرض وتقييم علاجات جديدة. هنا، يتم وصف هذه التقنية في مزيد من التفاصيل. وقد تم تصميم أداة الآلية مع لدغ الدورية لإزالة الصدأ حلقات من سطح القرنية أو لتسهيل السرير الظفرة في المرضى. وهو جهاز مناسبة لإنشاء نموذج LSCD المطلوب. وهي متوفرة بسهولة، وسهلة الاستخدام وأداة مع طرف على ما يرام التي تجعلها مناسبة للعمل على عيون صغيرة، كمافي الفئران. تطبيقه يمنع الصدمات النفسية التي لا داعي لها للعين وأنها لا تؤدي إلى إصابات غير المرغوب فيها، في كثير من الأحيان هو الحال مع نماذج إصابة الكيميائية. وعلى عكس مكشطة حادة، فإنه يزيل ظهارة مع الغشاء القاعدي. في هذا البروتوكول، ومتآكل المنطقة الحوفي مرتين، وبعد ذلك تم حلق ظهارة القرنية بأكملها من حوف إلى حوف. لتجنب الإصابة سدى، والحرص على عدم فرشاة سطح القرنية بمجرد إزالة ظهارة بالفعل.

في غضون شهر بعد أداء هذه التقنية، وضعت 100٪ من القرنيات اتساع الأوعية الدموية السطحية (الشكل 1A. تم التقاط الصور مع كاميرا متصلة المصباح الشقي تحت حقل مشرق والكوبالت مرشح الأزرق). في 18/20 (90٪) من العيون، وتشارك اتساع الأوعية الدموية على سطح القرنية كله (الشكل 1A). في 2/20 (10٪)، وقد لوحظ اتساع الأوعية الدموية في ثلاثة من أربعة أجزاء القرنية، لكنه لا يزال صلت إلى مركز القرنية. للتحقق من صحة تطوير LSCD، أجري كله جبل المناعية 1. هذه الخطوة ليست جزءا من البروتوكول، ويمكن تغييرها حسب الأهداف والمصالح. واعتبرت ثلاثة بدائل كمؤشرات للLSCD: غياب cytokeratin (CK) 12، وهي خيوط وسيط معين إلى وضعها الطبيعي الخلايا الظهارية القرنية 17، 18؛ ظهور CK8، وظهائر علامة بسيطة <sتصل&gt; 20 غير موجود على القرنية الطبيعية. وجود خلايا كأس على سطح القرنية. لتقييم النمط الظاهري الظهارية القرنية، تم تنفيذ المناعية مزدوج لCK12 وCK8 على عينات جبل بأكمله بعد ثلاثة أشهر من الإصابة، كما هو موضح سابقا 1 و 9. تم تقييم وجود خلية القدح بواسطة MUC5AC-كأس خلية محددة 1، 15، 19 45 أيام بعد إزالة الظهارية-المناعية الميوسين. ظهور الخلايا الكأسية يقلل في الوقت المناسب. للحصول على أفضل النتائج، من المهم لأداء تلطيخ أقل من شهرين بعد وقوع الضرر. العادية، القرنيات لم يصب صريح-CK12 علامة معينة من النضج الخلايا الظهارية القرنية 17، 18 -throughout سطح القرنية، لكنها تخلو من أي CK8 أو قدح الخلايا (MUC5AC) من جانب القرنية من عينات جبل بأكمله (الشكل 1B) . في مقارنة لعيون طبيعية والتعبير CK12 غائب تقريبا على injur<html> ص القرنيات نموذج، في حين أنها تظهر بشكل ملحوظ تلطيخ إيجابية لCK8 وكأس الخلايا (الشكل 1B). وتشير هذه الملاحظات تطوير LSCD. اذا كانت مهتمة في قياس النتائج المناعية، استخدام صورة-J لقياس حدة 20 الكثافة المناعية على الأصلي والصور دون تغيير من قبل المجهر المتخذة في إطار نفس الإعدادات. لفترة وجيزة، حدد جزء القرنية من جبل العينة كلها، وقياس كثافة متكاملة ومنطقة لتلك المنطقة، وحساب كثافة تصحيح لخلفية 20. وقدمت نسبة CK12 لكثافة CK8 سابقا في عدد أكبر من العينات 1. انخفاض نسبة بالمقارنة مع مجموعة المقارنة (القرنيات الطبيعية) وظهور الخلايا الكأسية على سطح القرنية تثبت تطوير LSCD. 658 / 54658fig1.jpg &quot;/&gt; الشكل 1: النمط الظاهري القرنية بعد إنشاء LSCD في الفئران. يظهر فحص المصباح الشقي أن جميع القرنيات تطوير بعض درجة من اتساع الأوعية الدموية من قبل شهر واحد (A، شريط الحجم: 0.5 ملم). والقرنية الطبيعية تعبر عن CK12 جميع أنحاء القرنية ولكن تخلو من أي CK8 أو الخلايا الكأسية (MUC5AC). CK12 غائب في نموذج LSCD، في حين تظهر CK8 وكأس الخلايا على القرنية (B، مقياس شريط: 200 ميكرون). <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54658/54658fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Mechanical Procedure to Create Limbal Stem Cell Deficiency in Mouse at JoVE.com

A Simple Mechanical Procedure to Create Limbal Stem Cell Deficiency in Mouse

تنص المادة التالية سهلة وتقنية استنساخه لخلق فعالية نموذج الفأر المستدام للالحوفي نقص الخلايا الجذعية (LSCD). هذا نموذج حيواني مفيد في اختبار ومقارنة فعالية من العلاجات لأمراض الخلايا الجذعية الحوفي.

إجراء ميكانيكي بسيط لإنشاء الحوفي نقص الخلايا الجذعية في الفأر

Limbal stem cell deficiency (LSCD) is a state of malfunction or loss of limbal epithelial stem cells, after which the corneal epithelium is replaced with ...

a-simple-mechanical-procedure-to-create-limbal-stem-cell-deficiency

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

8.3K Views.  University of Illinois at Chicago.  تنص المادة التالية سهلة وتقنية استنساخه لخلق فعالية نموذج الفأر المستدام للالحوفي نقص الخلايا الجذعية (LSCD). هذا نموذج حيواني مفيد في اختبار ومقارنة فعالية من العلاجات لأمراض الخلايا الجذعية الحوفي. 

Video: A Simple Mechanical Procedure to Create Limbal Stem Cell Deficiency in Mouse

A Mouse Model of in Utero Transplantation

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus. For example, in utero transplantation (IUT) of hematopoietic stem cells has been used to successfully treat patients with severe combined immunodeficiency.1,2 In several other conditions, however, IUT has been attempted without success.3 Given these mixed results, the availability of an efficient non-human model to study the biological sequelae of stem cell transplantation and gene therapy is critical to advance this field. We and others have used the mouse model of IUT to study factors affecting successful engraftment of in utero transplanted hematopoietic stem cells in both wild-type mice4-7 and those with genetic diseases.8,9 The fetal environment also offers considerable advantages for the success of in utero gene therapy. For example, the delivery of adenoviral10, adeno-associated viral10, retroviral11, and lentiviral vectors12,13 into the fetus has resulted in the transduction of multiple organs distant from the site of injection with long-term gene expression. in utero gene therapy may therefore be considered as a possible treatment strategy for single gene disorders such as muscular dystrophy or cystic fibrosis. Another potential advantage of IUT is the ability to induce immune tolerance to a specific antigen. As seen in mice with hemophilia, the introduction of Factor IX early in development results in tolerance to this protein.14 
In addition to its use in investigating potential human therapies, the mouse model of IUT can be a powerful tool to study basic questions in developmental and stem cell biology. For example, one can deliver various small molecules to induce or inhibit specific gene expression at defined gestational stages and manipulate developmental pathways. The impact of these alterations can be assessed at various timepoints after the initial transplantation. Furthermore, one can transplant pluripotent or lineage specific progenitor cells into the fetal environment to study stem cell differentiation in a non-irradiated and unperturbed host environment.
The mouse model of IUT has already provided numerous insights within the fields of immunology, and developmental and stem cell biology. In this video-based protocol, we describe a step-by-step approach to performing IUT in mouse fetuses and outline the critical steps and potential pitfalls of this technique.

A Mouse Model of in Utero Transplantation

The mouse model of in utero transplantation is a versatile tool that can be used to study the potential clinical applications of stem cell transplantation and gene therapy in the fetus. In this protocol, we present a general approach to performing this technique

نموذج الفأر من في الرحم زراعة

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus.  For example, in ...

Myo-mechanical Analysis of Isolated Skeletal Muscle

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force generation and fatigability in treated muscle. We describe a detailed approach to evaluating myo-mechanical properties in freshly explanted hindlimb muscle from the mouse. We describe the atraumatic harvest of mouse extensor digitorum longus muscle, mounting the muscle in a muscle strip myograph (Model 820MS; Danish Myo Technology), and the measurement of maximal twitch and tetanic tension, contraction time, and half-relaxation time, using a square pulse stimulator (Model S48; Grass Technologies). Using these measurements, we demonstrate the calculation of specific twitch and tetanic tension normalized to muscle cross-sectional area, the twitch-to-tetanic tension ratio, the force-frequency relationship curve and the low frequency fatigue curve 4. This analysis provides a method for quantitative comparison between therapeutic interventions in mouse models of muscle disease 1,2,3,5, as well as comparison of the effects of genetic modification on muscle function 6,7,8,9.

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for muscle disease, methods are needed to quantitate force generation and fatigability in treated muscle. We detail an approach to evaluating myo-mechanical properties in explanted mouse hindlimb muscle. This analysis provides a robust approach to quantitating the effects of genetic modification on muscle function, as well as comparison of therapies in mouse models of muscle disease.

ميو الميكانيكية وتحليل الهيكل العظمي والعضلات المعزولة

To assess the in vivo effects of therapeutic interventions for the treatment of muscle disease 1,2,3, quantitative methods are needed that measure force ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

A simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or expensive animal. One of the reasons that this is not done more routinely is that it is relatively difficult, despite there being several published studies that describe ways to achieve it. In this paper we demonstrate a procedure that eliminates one of the major hurdles associated with this intubation, that of visualizing the trachea during the entire time of intubation. The approach uses a 0.5 mm fiberoptic light source that serves as an introducer to direct the intubation cannula into the mouse trachea. We show that it is possible to use this procedure to measure lung mechanics in individual mice over a time course of at least several weeks. The technique can be set up with relatively little expense and expertise, and it can be routinely accomplished with relatively little training. This should make it possible for any laboratory to routinely carry out this intubation, thereby allowing longitudinal studies in individual mice, thereby minimizing the number of mice needed and increasing the statistical power by using each mouse as its own control.

This paper describes a striaghforward and efficient method of intubating mice for pulmonary function measurements or pulmonary instillation, that allows the mice to recover and be studied at later times. The procedure involves an inexpensive fiberoptic light source that directly illuminates the trachea.

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of microvasculature at the site of inflammation. Parabiotic partners share their circulating antigens and thus are free of adverse immune reaction. First described by Paul Bert in 18641, the parabiosis surgery was refined by Bunster and Meyer in 1933 to improve animal survival2. In the current protocol, two mice are surgically joined following a modification of the Bunster and Meyer technique. Animals are connected through the elbow and knee joints followed by attachment of the skin allowing firm support that prevents strain on the sutured skin. Herein, we describe in detail the parabiotic joining of a ubiquitous GFP expressing mouse to a wild type (WT) mouse. Two weeks after the procedure, the pair is separated and GFP positive cells can be detected by flow cytometric analysis in the blood circulation of the WT mouse. The blood chimerism allows one to examine the contribution of the circulating cells from one animal in the other.

Parabiotic joining of two organisms leads to the development of a shared circulatory system. In this protocol, we describe the surgical steps to form a parabiotic connection between a wild-type mouse and a constitutive GFP-expressing mouse.

تعايش التصاقي في الفئران: بروتوكول مفصل

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

A Surgical Procedure for Resecting the Mouse Rib: A Model for Large-Scale Long Bone Repair

This protocol introduces researchers to a new model for large-scale bone repair utilizing the mouse rib. The procedure details the following: preparation of the animal for surgery, opening the thoracic body wall, exposing the desired rib from the surrounding intercostal muscles, excising the desired section of rib without inducing a pneumothorax, and closing the incisions. Compared to the bones of the appendicular skeleton, the ribs are highly accessible. In addition, no internal or external fixator is necessary since the adjacent ribs provide a natural fixation. The surgery uses commercially available supplies, is straightforward to learn, and well-tolerated by the animal. The procedure can be carried out with or without removing the surrounding periosteum, and therefore the contribution of the periosteum to repair can be assessed. Results indicate that if the periosteum is retained, robust repair occurs in 1 - 2 months. We expect that use of this protocol will stimulate research into rib repair and that the findings will facilitate the development of new ways to stimulate bone repair in other locations around the body.

The overall goal of this procedure is to successfully resect a portion of bone from the rib of a mouse. The procedure was developed as a model to study large-scale long bone repair.

عملية جراحية لResecting الماوس الضلع: نموذج لواسعة النطاق إصلاح العظام الطويلة

This protocol introduces researchers to a new model for large-scale bone repair utilizing the mouse rib. The procedure details the following: preparation ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor initiation, metastasis and resistance to radio- and chemotherapy. Here we describe a specific methodology for culturing primary human pancreatic CSCs as tumor spheres in anchorage-independent conditions. Cells are grown in serum-free, non-adherent conditions in order to enrich for CSCs while their more differentiated progenies do not survive and proliferate during the initial phase following seeding of single cells. This assay can be used to estimate the percentage of CSCs present in a population of tumor cells. Both size (which can range from 35 to 250 micrometers) and number of tumor spheres formed represents CSC activity harbored in either bulk populations of cultured cancer cells or freshly harvested and digested tumors 1,2. Using this assay, we recently found that metformin selectively ablates pancreatic CSCs; a finding that was subsequently further corroborated by demonstrating diminished expression of pluripotency-associated genes/surface markers and reduced in vivo tumorigenicity of metformin-treated cells. As the final step for preclinical development we treated mice bearing established tumors with metformin and found significantly prolonged survival. Clinical studies testing the use of metformin in patients with PDAC are currently underway (e.g., NCT01210911, NCT01167738, and NCT01488552). Mechanistically, we found that metformin induces a fatal energy crisis in CSCs by enhancing reactive oxygen species (ROS) production and reducing mitochondrial transmembrane potential. In contrast, non-CSCs were not eliminated by metformin treatment, but rather underwent reversible cell cycle arrest. Therefore, our study serves as a successful example for the potential of in vitro sphere formation as a screening tool to identify compounds that potentially target CSCs, but this technique will require further in vitro and in vivo validation to eliminate false discoveries.

Pancreatic cancer stem cells (CSCs) can be expanded in vitro using the anchorage-independent sphere culture technique, which represents a powerful tool to study CSC biology and can serve as the first step to develop novel CSC-targeting therapies. Here the methodology for expanding, analyzing and targeting of pancreatic CSCs is provided.

دراسة سرطان البنكرياس الجذعية خصائص الخلايا لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

A Simple Device to Rapidly Prepare Whole Mounts of the Mouse Intestine

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe the use of a simple device to cut and &#8216;roll&#8217; mouse intestines to rapidly prepare whole mount preparations of superior and uniform quality to that which can be achieved by hand. The device comprises a base that holds 4 stainless steel rods and a top, which acts a cutting guide. The rods are inserted into the lumen of the small intestine [divided into thirds] and the colon. The rods and samples are then placed over a piece of filter paper or card into the holding slots in the base of the device. The top of the device is then positioned and serves as a cutting guide. The two angled sections in the center of the top piece are used to guide a knife or scalpel and cut the intestines longitudinally on the top of the rods. Once the intestinal sections have been cut, the top is removed and the card,&#160;tissue and rods gently removed from the device and placed on the bench. The rods are then gently rolled sideways to flatten and stick the intestinal segments onto the underlying piece of filter paper or card. The final preparation can then be examined or fixed and stored for later analysis. The preparations are invaluable for the study of intestinal changes in normal or genetically modified mouse models. The preparations have been used for the study and quantification of the effects of inflammation (colitis), damage, pre-cancerous lesions (aberrant crypt foci (ACFs) and mucin depleted foci (MDFs)) and polyps or tumors.

The use of a simple device to cut and &#8216;roll&#8217; mouse intestines to rapidly prepare whole mount preparations is described.

جهاز بسيط للتحضير السريع الجبال الجامعة للماوس الأمعاء

Preparing whole mounts of the mouse small intestine and colon for subsequent analysis or quantification can be time consuming and difficult. We describe ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

وحديثي الولادة ماوس الحبل الشوكي ضغط إصابة نموذج

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.

This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.

الوريد الإعتراض نموذج: نموذج مناسب لدراسة الالتفافية الكسب غير المشروع الإنفتاح

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

Intranasal Delivery of Therapeutic Stem Cells to Glioblastoma in a Mouse Model

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of therapeutic stem cells via the intranasal route is a recently discovered alternative strategy, with strong potential for clinical translation, due to its non-invasive nature compared to intracranial implantation or delivery via systemic routes. The lack of blood brain barrier further strengthens the therapeutic potential of stem cells undergoing intranasal brain entry. This article summarizes the essential techniques utilized in our studies and outlines the basic principles of intranasal strategy for stem cell delivery using a mouse model of intracranial glioma xenografts. We demonstrate the optimized procedures that generate consistent and reproducible results with specific predetermined experimental parameters and offer guidelines for streamlined work flow that ensure efficient execution and reliable experimental outcome. The article is designed to serve as a baseline for further experimental customization based on hypothesis, stem cell types, or tumor specifics.

Stem cells are promising therapeutic carriers to treat brain tumors due to their intrinsic tumor tropism. Non-invasive intranasal stem cell delivery bypasses the blood brain barrier and demonstrates strong potential for clinical translation. This article summarizes the basic principles of intranasal stem cell delivery in a mouse model of glioma.

داخل الأنف تسليم الخلايا الجذعية العلاجية إلى الورم الدبقي في نموذج الفأر

The intrinsic tropism towards brain malignancies renders stem cells as promising carriers of therapeutic agents against malignant tumors. The delivery of ...