التثبيت وطريقة التشغيل لتدليك البطن في الفئران T2DM

تقدم هذه الدراسة جهاز تدليك للبطن للفئران يكرر التدليك اليدوي مع تقليل الإجهاد وتلف الأنسجة. يخفض الجهاز بشكل كبير مستويات الجلوكوز في الدم ، ويحسن التمثيل الغذائي للدهون ، ويعزز حساسية الأنسولين في فئران السكري من النوع 2 ، مما يوفر نهجا علاجيا واعدا وغير جراحي مع إمكانات سريرية.

داء السكري من النوع 2 (T2DM) هو قضية صحية عامة عالمية سريعة النمو، وتؤثر على أكثر من 500 مليون شخص في جميع أنحاء العالم. على الرغم من أن تدليك البطن أظهر فوائد محتملة في إدارة T2DM ، إلا أن فعاليته لا تزال غير واضحة ، لا سيما في الدراسات التي أجريت على ، حيث تعقد تحديات مثل امتثال والحاجة إلى التحكم الدقيق في الضغط التنفيذ. لمواجهة هذه التحديات ، تقدم هذه الدراسة جهازا جديدا لمحاكاة تدليك البطن مصمم خصيصا للفئران. يوفر هذا الجهاز حلا عمليا لإجراء تدخلات تدليك البطن بطريقة خاضعة للرقابة مع تقليل الإجهاد وتلف الأنسجة للحيوانات. إنه يقيد أطراف الفئران بشكل آمن ، مما يسمح لها بالبقاء واعية أثناء التدليك ، ويوفر تحكما دقيقا في كل من ضغط وتكرار التدليك المطبق على البطن. تفتح قدرة الجهاز على محاكاة تدليك البطن اليدوي بدقة إمكانيات جديدة للدراسات التجريبية لتقييم آثاره على T2DM. الهدف الأساسي من هذا البروتوكول هو التحقيق في تأثير تدليك البطن على علامات T2DM الرئيسية مثل مستويات الجلوكوز في الدم واستقلاب الدهون وحساسية الأنسولين في الفئران. من خلال توفير طريقة موثوقة وقابلة للتكرار لتدليك البطن ، يمكن لهذا الجهاز تقديم رؤى قيمة حول إمكاناته كتدخل علاجي غير جراحي ل T2DM. قد تساهم نتائج هذا البحث في تطوير الاستراتيجيات السريرية للوقاية من مرض السكري وعلاجه ، لا سيما في تعزيز فهم العلاجات التقليدية مثل تدليك البطن في الممارسة الطبية الحديثة.

داء السكري من النوع 2 (T2DM) هو مرض مزمن يتميز بمقاومة الأنسولين وخلل في خلايا β البنكرياس. إنها مشكلة صحية عامة على مستوى البلاد ، مع زيادة سريعة في حالات الإصابة في جميع أنحاء^{العالم 1}. وفقا للتقرير العالمي لعبء أمراض التمثيل الغذائي ، يعاني أكثر من 500 مليون شخص على مستوى العالم من مرض السكري ، مع أكثر من 90٪ منهم يعانون من T2DM². يعد تدليك البطن تدخلا مهما لعلاج T2DM. أظهرت مجموعة كبيرة من الأبحاث أن تدليك البطن يمكن أن يحسن بشكل كبير مستويات الجلوكوز في الدم ، ونوعية الحياة ، وتكوين ميكروبات الأمعاء ، ومنتجاتها الأيضية في مرضى T2DM ، وبالتالي تعزيز حساسية الأنسولين^3،4،5. بالإضافة إلى ذلك ، يعزز تدليك البطن التمعج المعدي المعوي ، ويحسن وظيفة الجهاز الهضمي ، ويقلل من ركود الجهاز الهضمي ، ويحسن امتصاص العناصر الغذائية واستقلاب الجلوكوز^6،7،8. على الرغم من الإمكانات التي يحسن من خلالها تدليك البطن نتائج T2DM ، إلا أنه لم يتم استكشافها بالكامل. على وجه التحديد ، ثبت أن تدليك البطن يحسن حساسية الأنسولين واستقلاب الجلوكوز عن طريق تعديل مسارات التمثيل الغذائي مثل مسار إشارات الأنسولين ، ولكن العمليات الفسيولوجية الدقيقة ليست مفهومة تماما بعد. تهدف هذه الدراسة إلى سد هذه الفجوة من خلال تقديم رؤى ميكانيكية أكثر تفصيلا حول كيف يمكن لتدليك البطن تحسين T2DM في النماذج الحيوانية.

الهدف الأساسي من هذه الدراسة هو تصميم وتطوير طريقة موحدة وقابلة للتكرار لدراسة آثار تدليك البطن على T2DM باستخدام جهاز مبتكر مصمم خصيصا للفئران. يهدف هذا الجهاز إلى توفير تحكم دقيق في معلمات التدليك ، مثل الضغط والتردد ، مع تقليل إجهاد وضمان الامتثال لرعاية.

ومع ذلك ، فإن إجراء تدليك البطن على النماذج الحيوانية ، وخاصة الفئران ، يمثل العديد من التحديات. تواجه طرق البحث الحالية تحديات ، بما في ذلك تطبيق التدليك غير المتسق ، وصعوبة الحفاظ على ضغط وتكرار موحدين ، وضمان امتثال أثناء التدخل. تعيق هذه القيود قابلية التكاثر وتؤدي إلى تباين في النتائج ، مما يؤكد الحاجة إلى تقنية أكثر فعالية وموثوقية. التجارب على ضرورية للإجابة على هذا السؤال. لتدليك البطن في ، من الضروري الحفاظ على ضغط وتردد معينين. ومع ذلك ، من الناحية العملية ، ليس من السهل أن تمتثل للتعليمات وتبقى في الموضع المطلوب داخل الجهاز ، لأنها نشطة بشكل طبيعي. من الصعب أيضا ضمان ضغط وسرعة ثابتين أثناء التدخل ، مما يجعل من الصعب تحقيق الاستقرار المطلوب لتقنيات تدليك البطن. لذلك ، لا يزال إجراء تدخلات تدليك البطن على الفئران والجرذان والنماذج الحيوانية الأخرى يمثل تحديا كبيرا في البحث. علاوة على ذلك ، يجب أن تعالج التجارب على القضايا المتعلقة برفاهية ، مثل تخفيف التوتر والقلق ، وتقليل الألم ، وتحسين الظروف العامة. غالبا ما تكون الطرق الحالية ، مثل تدليك ما بعد التخدير أو ضبط النفس اليدوي ، كثيفة العمالة ، أو تقدم تحيزا تجريبيا ، أو تفشل في تكرار الظروف الفسيولوجية الطبيعية في الواعية. تضمنت الحلول السابقة نماذج تدليك بطن الفئران^9،10،11. للتغلب على هذه القيود ، نقدم جهاز تدليك البطن الجديد للفئران. في هذه الدراسة ، نقدم جهاز تدليك البطن الجديد المصمم للتغلب على هذه القيود. بالمقارنة مع التقنيات التقليدية ، يوفر هذا الجهاز مزايا كبيرة ، بما في ذلك التشغيل المستقر ، والتحكم الدقيق في معلمات التدليك ، وتقليل إجهاد ، وتحسين قابلية التكاثر. بالإضافة إلى ذلك ، يعزز تصميمه الفعال من حيث التكلفة إمكانية الوصول للتطبيقات الأوسع في أبحاث أمراض التمثيل الغذائي. من خلال دمج الهندسة الحديثة مع الأساليب العلاجية التقليدية ، يملأ هذا الجهاز فجوة حرجة في المنهجيات التجريبية غير الغازية ل T2DM.

يساهم هذا النهج في مجموعة أوسع من الأدبيات حول التقنيات العلاجية غير الغازية ل T2DM ، لا سيما تلك المشتقة من الطب الصيني التقليدي (TCM) ، والذي يؤكد على التأثيرات التنظيمية لتدليك البطن على وظائف الجهاز الهضمي والتمثيل الغذائي. قد يجد الباحثون هذه الطريقة مناسبة بشكل خاص للدراسات حول التدخلات غير الدوائية ل T2DM واضطرابات التمثيل الغذائي الأخرى. من خلال معالجة التحديات التجريبية الرئيسية ، توفر هذه الطريقة أساسا لتطوير البحوث السريرية والتحويلية في هذا المجال.

تمت الموافقة على جميع التجارب على من قبل لجنة رعاية واستخدامه بجامعة نانجينغ للطب الصيني (رقم الموافقة: 202409A033). هنا ، تم اختيار 24 فأرا من الذكور الأصحاء C57BL / 6J من الدرجة SPF ، تتراوح أعمارهم بين 8 أسابيع ووزنهم 22 جم ± 2 جرام. تم إيواء الفئران تحت دورة ضوء / ظلام لمدة 12 ساعة عند درجة حرارة 20-22 درجة مئوية وبرطوبة نسبية تتراوح بين 45٪ و 50٪. كان للحيوانات حرية الوصول إلى الطعام والماء.

1. إنشاء نموذج الماوس T2DM

1. إطعام الفئران طعام قياسي لمدة أسبوع واحد للتكيف مع البيئة الجديدة في منشأة. بعد أسبوع واحد ، قسم بشكل عشوائي 24 فأرا C57BL / 6J مقسمة إلى المجموعة الضابطة (6 فئران) ومجموعة نموذج T2DM (18 فأرا) باستخدام جدول أرقام عشوائي. امنح المجموعة الضابطة طعاما قياسيا منقا، بينما تتلقى مجموعة نموذج T2DM نظاما غذائيا غنيا بالدهون. استمر في النظام الغذائي لمدة 6 أشهر.
2. راقب شرب الفئران وأكلها ووزن الجسم وجلوكوز الدم الصائم وجلوكوز الدم العشوائي طوال هذه الفترة. إذا تجاوزت قراءتان متتاليتان لجلوكوز الدم 7.8 ملي مولار / لتر ، فقم بإجراء اختبار تحمل الأنسولين (ITT). ضع في اعتبارك قيمة المنطقة الواقعة تحت المنحنى (AUC) أكبر من 35 كنموذج T2DM ناجح.
3. ابدأ التدخل بمجرد استقرار نموذج T2DM.

2. تجميع وعلاج الفئران

1. بعد نمذجة T2DM الناجحة ، قم بتعيين الفئران T2DM بشكل عشوائي لإحدى المجموعات التالية باستخدام جدول أرقام عشوائي لضمان الاختيار غير المتحيز: المجموعة النموذجية ، ومجموعة الميتفورمين ، ومجموعة تدليك البطن ، مع ستة فئران في كل مجموعة.
2. عدم إجراء أي تدخل في المجموعة الضابطة. استخدم جدول الأرقام العشوائية لتعيين كل فأر لإحدى المجموعات التجريبية ، مما يضمن أن المجموعات كانت قابلة للمقارنة من حيث وزن الجسم الأولي ومستويات الجلوكوز لتقليل التحيز في المهمة.
3. قم بإطعام المجموعة النموذجية بنظام غذائي غني بالدهون طوال التجربة وقم بإعطاء 0.2 مل من المحلول الملحي الفسيولوجي عن طريق التزقيم يوميا ، 1 مرة في اليوم ، 6 أيام في الأسبوع ، لمدة 8 أسابيع.
4. قم بإطعام مجموعة الميتفورمين بنظام غذائي غني بالدهون طوال التجربة. أقراص الميتفورمين المطحونة وتذوب لإعطاء التزقيم مرة واحدة يوميا بمعدل 200 ملغ/كغ/يوم، مخفف إلى 0.2 مل مع محلول ملحي فسيولوجي. قم بإدارة هذا 1x في اليوم ، 6 أيام في الأسبوع ، لمدة 8 أسابيع.
5. بالنسبة لمجموعة تدليك البطن ، قم بإطعام نظام غذائي غني بالدهون طوال التجربة. قم بتزقيم الفئران ب 0.2 مل من المحلول الملحي الفسيولوجي يوميا. قم بتدليك البطن مرة واحدة بعد 5 دقائق من إعطاء الدواء. قم بإجراء تدخل تدليك البطن 6 مرات في الأسبوع في وقت محدد ، مع يوم راحة واحد ، لمدة 8 أسابيع متواصلة.
   1. قم بإصلاح الفئران باستخدام مصفاة القوارض محلية الصنع وفضح بطنها مع التأكد من بقائها هادئة لتدليك البطن.
   2. إشارة إلى خريطة نقطة الوخز بالإبر للفئران لتحديد نقطتي Shenque و Tianshu. استخدم المسافة من Shenque إلى Tianshu كنصف قطر وقم بإجراء تدليك دوراني في اتجاه عقارب الساعة لمدة 30 دقيقة بمعدل 100-120 مرة في الدقيقة. كان نطاق الضغط المطبق أثناء التدخل 0.1-0.3 نيوتن / سم. اضبط الضغط على المستوى الذي يمكن أن تتحمله الفئران مع الحفاظ على الهدوء والمراقبة باستخدام نظام اختبار ضغط FPS.

3. تحضير جهاز تدريب تدليك البطن

1. قم بإعداد لوح بولي بروبلين بسمك 1 مم لإنشاء لوحة تثبيت ، وتشكيلها على شكل نصف دائرة نصف قطرها 4.5 سم من جانب و 3 سم على الجانب الآخر. عندما تتكشف ، فإنها تشكل شكل شبه منحرف بقاعدة علوية 8 سم ، وقاعدة سفلية 10 سم ، وأطوال جانبية 10 سم. استخدم لوحة شفافة لمراقبة تثبيت الماوس كما هو موضح في الشكل 1A-C.
2. اعتمادا على حجم الفئران ، قم بعمل أربعة ثقوب طويلة في لوحة التثبيت ، كما هو موضح في الشكل 1 أ.
3. قم بإعداد قماش غير منسوج ناعم ومتين ، وقم بتقطيعه إلى شكل بيضاوي الشكل للمركز مع أربعة شرائط مستقيمة ممدودة في الزوايا لتكون بمثابة نسيج التثبيت. تأكد من أن الشرائط الطويلة المستقيمة يمكن أن تمر عبر الثقوب الأربعة الممدودة في اللوحة. بناء على حجم الماوس ، قم بقص أربعة ثقوب مستديرة في شرائط القماش للسماح لأطراف الماوس بالمرور ، كما هو موضح في الشكل 1 ب.
4. حدد مستشعر فيلم حساس للضغط بناء على حجم بطن الماوس وقم بتوصيل طبقة الضغط بجزء من نسيج التثبيت المقابل لبطن الماوس. قم بتوصيل الفيلم بجهاز مراقبة الضغط ، كما هو موضح في الشكل 1 د.

4. إجراء تدليك البطن

1. قم بتمرير الشرائط الأربعة الطويلة من نسيج التثبيت من خلال الفتحات الموجودة في لوحة التثبيت ، مما يؤدي إلى إنشاء ممر يمكن للماوس المرور من خلاله بسهولة.
2. ضع الماوس على الجانب الذي يبلغ نصف قطره 4.5 سم ، باستخدام غريزة الحفر لتشجيعه على التحرك نحو الجانب الذي يبلغ نصف قطره 3 سم ، كما هو موضح في الشكل 2 أ.
3. راقب موضع الماوس من الجزء الخلفي من لوحة التثبيت الشفافة. عندما يصل الماوس إلى الموضع المناسب ، قم بإحكام ربط شرائط القماش الأربعة لربط الماوس بالجزء المركزي من نسيج التثبيت. اربط الشرائط في عقدة لتأمين الماوس.
4. اقلب لوحة التثبيت واستخدم الملقط لسحب أطراف الماوس من 4 ثقوب مستديرة لقطعة قماش التثبيت لإصلاح الماوس بشكل أكبر ، كما هو موضح في الشكل 2 ب.
5. أمسك اللوحة بيد واحدة ، مع وضع جهاز الماوس الثابت في راحة اليد لوضع الفأر ضعيفا. قم بتدليك البطن على بطن الفأر بالإبهام. أثناء الإجراء ، راقب عن كثب القيم الموجودة على جهاز مراقبة الضغط للتأكد من أن القوة المطبقة على مستشعر فيلم الضغط على بطن الفأر تظل ثابتة وموحدة ، كما هو موضح في الشكل 2C - D.
   1. إذا ظهر أنف الفأر وشفتيه باللون الأرجواني أثناء تدليك البطن ، فقد يشير ذلك إلى أن نسيج التثبيت ضيق جدا ، مما يتسبب في الحرمان من الأكسجين. في مثل هذه الحالات ، أوقف الإجراء على الفور ، وقم بفك شرائط القماش ، وحرر الماوس للتعافي من نقص الأكسجين.
   2. أثناء تدليك البطن ، قد يتغوط الفأر أو يتبول بشكل متكرر ، وهي استجابة طبيعية لتدليك البطن. قم بإجراء التنظيف الفوري.
6. بعد 20 دقيقة من تدليك البطن ، قم بفك العقد الموجودة على شرائط القماش ، مما يسمح للفأر بتحرير نفسه من جهاز التثبيت.
7. بعد أن يتكيف الماوس مع تدليك البطن ، يجب أن تستمر العملية بهدوء ، مع الحد الأدنى من المعاناة. إذا كان الماوس يعاني بشكل مفرط ، فتحقق من الجهاز بحثا عن مشكلات ، مثل لوحة التثبيت المكسورة أو قماش التثبيت الضيق للغاية. راقب باستمرار راحة الماوس وعلاماته الحيوية طوال العملية.
8. قم بوزن وإجراء قراءات الجلوكوز في الدم بعد الانتهاء من التجربة.

وفقا للخطة المذكورة أعلاه ، تم إبقاء بطن الفئران ثابتا في مكانه ، وسمح الوضع الثابت نسبيا للفئران بالحفاظ على وضعية مستقرة. تدليك البطن بتردد ثابت ، تم التحكم في ضغط ومدة التدليك ضمن نطاق يمكن التحكم فيه. يشبه هذا النهج تدليك البطن التقليدي في الطب^{الصيني 12}. باتباع خطة التدخل هذه ، يمكن تمديد وقت التدخل بشكل مناسب ، مما يساعد الفئران على التكيف مع التدريب ، ويخفف من انزعاجها ، ويساهم في توحيد الإجراء التجريبي ، وبالتالي تحسين الكفاءة التجريبية.

تأثير تدليك البطن على نسبة الجلوكوز في الدم ووزن الجسم في الفئران T2DM
بالمقارنة مع المجموعة الفارغة ، تمت زيادة مستويات جلوكوز الدم الصائم (FBG) وجلوكوز الدم العشوائي (RBG) ووزن جسم الفئران في المجموعة النموذجية بشكل كبير ، كما هو موضح في الشكل 3 ، مما يشير إلى أن نموذج T2DM قد تم إنشاؤه بنجاح. بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، تم تقليل مستويات FBG و RBG للفئران في مجموعات تدليك البطن والميتفورمين ، كما هو موضح في الشكل 3 أ - ب. لم يكن هناك فرق كبير بينهما ، مما يشير إلى أن كلا من الميتفورمين وتدليك البطن كانا فعالين في تقليل وزن الجسم وارتفاع مستوى الجلوكوز في الدم في نموذج مرض السكري. علاوة على ذلك، أدى كلا التدخلين إلى تحسين وزن جسم الفئران، والذي قد يكون مرتبطا بتحسينها في التحكم في غلوكوز الدم. تشير هذه النتائج إلى أن استراتيجية تدليك البطن التي يوفرها هذا البروتوكول لها تأثيرات مماثلة للميتفورمين في تنظيم مستويات الجلوكوز في الدم في الفئران T2DM.

تأثير تدليك البطن على التمثيل الغذائي للدهون في الفئران T2DM
من حيث التمثيل الغذائي للدهون ، مقارنة بالمجموعة الفارغة ، ارتفعت مستويات الكوليسترول الكلي (TC) والبروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL) والدهون الثلاثية (TG) للفئران في المجموعة النموذجية ، كما هو موضح في الشكل 4A و C و D ، وتم تقليل مستوى البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL) بشكل كبير ، كما هو موضح في الشكل 4 ب. بعد تدليك البطن ، انخفضت مستويات TC و LDL و TG لدى الفئران بشكل كبير ، كما هو موضح في الشكل 4A و C و D. في المقابل ، تم زيادة مستوى HDL ، كما هو موضح في الشكل 4 ب ، مع عدم وجود فرق كبير عن مجموعة الميتفورمين. هذا يؤكد أن تدليك البطن له تأثير إيجابي مماثل للميتفورمين في تحسين عملية التمثيل الغذائي للدهون.

تأثير تدليك البطن على مسار إشارات الأنسولين في الفئران T2DM
بالمقارنة مع المجموعة الفارغة ، انخفضت مستويات التعبير عن IRS-1 و IRS-2 و PI3K و AKT و GLUT4 mRNA في أنسجة الكبد للفئران في المجموعة النموذجية بشكل ملحوظ (ص < 0.01) ، كما هو موضح في الشكل 5. تم جمع عينات أنسجة الكبد في نهاية فترة التدخل التي استمرت 8 أسابيع ، وبعد ذلك تم استخراج الحمض النووي الريبي باستخدام كاشف TRIzol وتحليله باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR). زادت مستويات التعبير عن PI3K و AKT و GLUT4 mRNA في الفئران التي عولجت بتدليك البطن والميتفورمين بشكل ملحوظ (ص < 0.01 ، ص < 0.05). كان الفرق بين مجموعات تدليك البطن والميتفورمين ضئيلا (ص > 0.05) ، كما هو موضح في الشكل 5C-E. تشير هذه النتائج إلى أن كلا من تدخلات تدليك البطن والميتفورمين تعزز بشكل فعال إشارات الأنسولين عن طريق زيادة التعبير عن الجينات الرئيسية في مسار إشارات الأنسولين ، مثل PI3K و AKT و GLUT4 ، والتي تلعب أدوارا حاسمة في استقلاب الجلوكوز وحساسية الأنسولين. تشير هذه النتائج إلى أن تدليك البطن له تأثير علاجي على T2DM مقارنة بالميتفورمين ، على الأرجح عن طريق تحسين حساسية الأنسولين وتعزيز توازن الجلوكوز من خلال آليات جزيئية مماثلة. لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية بين مجموعات تدليك البطن والميتفورمين تشير إلى أن تدليك البطن يمكن أن يكون بديلا قابلا للتطبيق أو نهجا مكملا للميتفورمين في إدارة T2DM. تكمن أهمية هذه النتائج في قدرتها على توفير نظرة ثاقبة للعلاجات غير الدوائية لمرض السكري التي تعدل مسارات إشارات الأنسولين.

الشكل 1: تحضير أجهزة التدريب على تدليك البطن. (أ) يتم تشكيل صفيحة بولي بروبيلين بسمك 1 مم على شكل شبه منحرف مع فتحات للتثبيت ، ويتم قطع القماش الناعم غير المنسوج ليناسب ، مع أربعة ثقوب لأطراف الفأر. يتم وضع مستشعر غشاء الضغط على القماش فوق بطن الماوس وتوصيله بجهاز مراقبة الضغط. (ب) يظهر التجميع المكتمل للجهاز المنظر الأمامي للوحة الثابتة. (ج) بعد اكتمال التجميع ، يوضح الرسم البياني النتيجة النهائية للجهاز مع العرض العكسي للوحة الثابتة. (د) عرض التأثير بعد شد قطعة قماش التثبيت المستخدمة لتثبيت الفئران. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2: إجراء تدليك البطن في الفئران. (أ) ضع الفأر على الجانب بنصف قطر 4.5 سم وحرك الفأر إلى الجانب بنصف قطره 3 سم باستخدام عادة حفر الفأر. (ب) علاوة على ذلك ، قم بمعالجة أطراف الفأر لسحبها من الفتحات الأربعة لقطعة قماش التثبيت لإصلاح الماوس. (ج) يمسك المشغل اللوحة بيد واحدة ويضع جهاز تثبيت الماوس في راحة اليد بحيث يكون الفأر ضعيفا. (د) يمكن استخدام إبهام اليد الأخرى لتدليك بطن الفأر. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 3: آثار تدليك البطن على مستويات الجلوكوز في الدم ووزن الجسم في الفئران T2DM. (أ) مقارنة مستويات جلوكوز الدم الصائم (FBG) في الفئران T2DM بعد 8 أسابيع من التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ب) مقارنة مستويات مؤشر مقاومة الأنسولين (IRI) في الفئران T2DM بعد 8 أسابيع من التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ج) مقارنة التغيرات في وزن الجسم في الفئران المصابة ب T2DM خلال فترة التدخل التي استمرت 8 أسابيع (ن = 6 لكل مجموعة). تم أخذ القياسات في خط الأساس وبعد 8 أسابيع من التدخل. تمثل أشرطة الخطأ الخطأ المعياري للمتوسط (SEM). تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام ANOVA أحادي الاتجاه متبوعا باختبار Tukey اللاحق. *ص < 0.05 ، ** ص < 0.01 ، *** ص <0.001 تشير إلى اختلافات معنوية بين المجموعات. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 4: تأثير تدليك البطن على استقلاب الدهون في الفئران T2DM. (أ) مقارنة مستويات الكوليسترول الضار بين مجموعات التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ب) مقارنة مستويات البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL) في كل مجموعة بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ج) مقارنة مستويات الكوليسترول الكلي (TC) في الفئران بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (د) مقارنة مستويات الدهون الثلاثية (TG) في الفئران T2DM بعد 3 أسابيع من التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). تم أخذ القياسات بعد 3 أسابيع من التدخل. تمثل أشرطة الخطأ الخطأ المعياري للمتوسط (SEM). تم تحديد الدلالة الإحصائية باستخدام ANOVA أحادي الاتجاه متبوعا باختبار Tukey اللاحق. *ص < 0.05 ، ** ص <0.01 ، *** ص < 0.001 تشير إلى اختلافات ذات دلالة إحصائية بين المجموعات. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 5: مسارات إشارات الأنسولين في فئران T2DM. (أ) مقارنة مستويات تعبير IRS-1 mRNA عبر مجموعات مختلفة بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ب) مقارنة مستويات تعبير IRS-2 mRNA في كل مجموعة بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ج) مقارنة مستويات تعبير PI3K mRNA في الفئران بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (د) مقارنة مستويات تعبير AKT mRNA في كل مجموعة بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). (ه) مقارنة مستويات تعبير GLUT4 mRNA في الفئران بعد التدخل (ن = 6 لكل مجموعة). تم جمع العينات في نهاية التدخل الذي استمر 8 أسابيع. تمثل أشرطة الخطأ الخطأ المعياري للمتوسط (SEM). تم تقييم الدلالة الإحصائية باستخدام ANOVA أحادي الاتجاه متبوعا باختبار Tukey اللاحق. *يمثل < p 0.05 و ** p < 0.01 و ***p < 0.001 اختلافات معنوية بين المجموعات. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

تدليك البطن هو تقنية أساسية تمثيلية في تدليك الطب الصيني التقليدي (TCM) ، ويتم تطبيقه على نطاق واسع في الوقاية السريرية والعلاج من أمراض الجهاز المختلفة ، وخاصة في تنظيم ورعاية الطحال والجهاز الهضمي^{في المعدة 13،14،15}. يؤثر تدليك البطن بشكل مباشر على سطح جسم الإنسان ، ويغطي معظم نقاط الوخز بالإبر في البطن ، بما في ذلك Zhongwan (CV12) و Liangmen (ST21) و Shenque (CV8) و Tianshu (ST25) و Guanyuan (CV4) و Qihai (CV6). لا تحفز هذه التقنية نقاط الوخز بالإبر البطنية السطحية فحسب ، بل تخترق أيضا بعمق لتحفيز الأعضاء الداخلية ، وتحسين وظيفة التمثيل الغذائي للجسم من خلال التلاعب المنتظم واللطيف والثابت والاختراق⁴.

في هذه الدراسة ، تم تصميم جهاز محاكاة جديد لتدليك البطن في الفئران التجريبية. يتكون هذا الجهاز من لوحة تثبيت شفافة ونسيج تثبيت مرن ومستشعرات ضغط قادرة على محاكاة قوة وإيقاع التدليك اليدوي مع تجنب الإجهاد غير الضروري وتلف الأنسجة للفئران التجريبية. فيما يتعلق بالبروتوكولات التجريبية الحالية لتدليك البطن ، مثل طرق تدليك البطن التقليدية أو تدليك البطن بعد التخدير ، على الرغم من سهولة التشغيل ، إلا أن هذه الطرق لا يمكنها محاكاة الاستجابات الفسيولوجية الفعلية بشكل كامل في الفئران في حالة^{غيبوبة 15}. طريقة أخرى ، تتضمن رفع الفئران لتدليك البطن ، قد تحفز تحفيزا إضافيا للعمود الفقري للفأر ، مما يجعل من الصعب التحكم في عوامل فردية ، مما يؤدي إلى التحيز التجريبي. استندت هذه الملاحظة إلى تجاربنا التجريبية ، حيث واجهنا صعوبات في الحفاظ على ظروف متسقة أثناء التدخل. بالمقارنة ، يسمح الجهاز المصمم في هذه الدراسة بظروف أكثر تحكما وقابلية للتكرار واستقرارا ، مما يوفر مزايا واضحة من حيث الفعالية من حيث التكلفة والتكاثر.

تتضمن الخطوة الحاسمة في هذا البروتوكول تثبيت الفئران على حامل ، مما يضمن إمكانية الوصول إلى البطن للتدليك مع الحفاظ على الحد الأدنى من الحركة. يتم تسهيل التحكم الدقيق في التردد والضغط المطبق من خلال مستشعرات الضغط التي توفر مراقبة القوة في الوقت الفعلي. يعد التدريب التكيفي للفئران جانبا مهما آخر من جوانب البروتوكول ، لأنه يسمح للفئران بالتأقلم مع العملية على مدار عدة جلسات ، مما يقلل من الانزعاج ويقلل من استجابات التوتر. بعد مرحلة التدريب هذه ، يمكن للفئران تحمل تدليك البطن لمدة 30 دقيقة يوميا ، وهو عامل حاسم في ضمان موثوقية واستقرار التجربة. تضمن هذه العملية أن تتكيف دون إجهاد لا داعي له ، وهو أمر ضروري لسلامة النتائج.

أظهرت الدراسات الحديثة أن تدليك البطن له تأثيرات تنظيمية متعددة على مرض السكري من النوع 2 (T2DM) ، بما في ذلك خفض مستويات الجلوكوز في الدم وتحسين التمثيل الغذائي للدهون^5،12،17. في هذه الدراسة ، أظهرت الفئران في مجموعة تدليك البطن انخفاضا كبيرا في مستويات جلوكوز الدم أثناء الصيام (FBG) ومستويات جلوكوز الدم العشوائية (RBG). علاوة على ذلك ، تحسنت مؤشرات التمثيل الغذائي للدهون في مجموعة تدليك البطن بشكل ملحوظ ، مع انخفاض مستويات الكوليسترول الكلي (TC) والبروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL) والدهون الثلاثية (TG) بشكل كبير. في المقابل ، زادت مستويات البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL) بشكل كبير. تكشف هذه النتائج عن قيمة التدخل المحتملة لتدليك البطن لأمراض التمثيل الغذائي وتوفر توجيهات جديدة للعلاج الشامل ل T2DM.

يكشف الاستكشاف الأعمق للآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه التحسينات أن تدليك البطن يعدل مسار إشارات الأنسولين ، وتحديدا عن طريق تنظيم التعبير عن الجينات الرئيسية المشاركة في استقلاب الجلوكوز ، بما في ذلك PI3K و AKT و GLUT4. هذه الجينات جزء لا يتجزأ من مسار إشارات الأنسولين ، وهو المسؤول عن تنظيم امتصاص الجلوكوز وحساسية الأنسولين. يعزز تنظيم PI3K و AKT تنشيط جزيئات الإشارات النهائية ، مما يعزز امتصاص الجلوكوز وتخزينه في الأنسجة مثل العضلات والأنسجة الدهنية. وفي الوقت نفسه ، فإن التعبير المتزايد عن GLUT4 يسهل نقل الجلوكوز بشكل أكبر إلى الخلايا ، مما يحسن توازن الجلوكوز بشكل عام. من المحتمل أن تساهم هذه التغييرات الجزيئية في التحسينات الملحوظة في استقلاب الجلوكوز وحساسية الأنسولين ، مما يوفر نظرة ثاقبة للتأثيرات العلاجية المحتملة لتدليك البطن في إدارة T2DM.

ومع ذلك ، لا يزال الإجراء التجريبي لهذا البروتوكول يتطلب تدريبا تقنيا للباحثين ، لا سيما في تعريف الفئران بالجهاز ، الأمر الذي يتطلب ممارسة متكررة لضمان أن الفئران تعاني من الحد الأدنى من الانزعاج أثناء العملية. نقطة أخرى مهمة للدراسات المستقبلية هي تحسين قوة التدليك وتواتره لفهم تأثيرهما على النتائج التجريبية بشكل أفضل. تستند النتائج الحالية إلى نموذج الفأر ، ويعد التحقق من الصحة من خلال التجارب والتجارب السريرية الأكثر شمولا على أمرا ضروريا لتأكيد قابلية التطبيق والفعالية الأوسع لهذه الطريقة.

بالنظر إلى المستقبل ، فإن هذا البروتوكول له العديد من التطبيقات المحتملة ، لا سيما في دراسة أمراض التمثيل الغذائي مثل مرض السكري والسمنة وحتى بعض حالات الجهاز الهضمي. إن الطبيعة غير الغازية لهذه التقنية تجعلها بديلا جذابا للطرق الأكثر توغلا ، حيث تقدم نهجا جديدا للدراسات السريرية أو التدخلات العلاجية المحتملة. يمكن أيضا تكييف الجهاز للاستخدام في النماذج الحيوانية الأخرى ، مما يسمح بتطبيق أوسع في الإعدادات التجريبية. علاوة على ذلك ، يمكن أن يلعب هذا الجهاز والبروتوكول دورا مهما في تحديث علاجات الطب الصيني التقليدي ، مما يوفر منصة علمية لاستكشاف الآليات الكامنة وراء آثارها على أمراض التمثيل الغذائي والحالات الصحية الأخرى.

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

وقد تم دعم هذا العمل من خلال الدفعة الثانية من مشاريع البحث العلمي الخاصة للقاعدة الوطنية للبحوث السريرية للطب الصيني التقليدي (JDZX2015127 ، ومقرها مستشفى مقاطعة آنهوي للطب الصيني).