Burada mikro-bilgisayartomografi görüntüleme yöntemi ile uzay uçuşu ndan sonra küresel oküler yapının değerlendirilmesi için bir yöntem öneriyoruz. Paragravity ve radyasyona maruz kalma içeren uzay uçuşu ortamı, sıvı kaymaları da dahil olmak üzere insan fizyolojisinde benzersiz değişikliklere neden olur. Bu sıvı kaymaları yüksek intrakranial basınca yol ve uzay uçuşu ilişkili nöro-oküler sendromun önemli bir nedeni olarak atfedilmiştir.
SANS fizyolojik etkisi gözün birden fazla bileşeni etkiler ve optik disk ödemi içerir, küre düzleştirici, koroidal ve retina kıvrımları, hiperopik ve kırılma hata kaymaları, ve sinir lif ilerki tabakası infracts. SANS'in fizyolojik özellikleri iyi belgelenmiş olsa da, SANS'i yönlendiren mekanizmalar hala tam olarak anlaşılamamıştır. SANS'ı daha iyi anlamak için kemirgen modelleri non-invaziv görüntüleme teknikleri için kullanılmaktadır.
Bu tekniklerden biri, fareler kadar küçük hayvanlardaki anatomik yapıların ve patolojik süreçlerin değerlendirilmesinde başarıyla kullanılan mikro-BT'dir. Mikro-BT mikro boyutlu bir çözünürlük elde edebilirsiniz, ve bir kontrast ajan ile kombinasyonu sayesinde, yumuşak dokular için iyi bir kontrast sağlayabilir. Mikro-BT, brüt anatomi, ışık mikroskobu ve histoloji incelemesi gibi geleneksel yöntemlere göre örneklerin geometrik profiline ve yapılar arasındaki mekansal ilişkilere zarar vermemek için açık bir avantaj sağlar.
Mevcut çalışmamızda, fareler Uzay Ortamı'nın retinanın mikro yapısını ölçerek oküler hasara neden olup olmadığını belirlemek için Uluslararası Uzay İstasyonu'nda 35 gün boyunca uzay ortamına maruz kalmışlardır. Burada Mikro-BT analizi için nasıl örnekler hazırladığımızı gösterdik. Fareler kullanıldı ve gözler 38 artı veya eksi dört saat içinde aşağı sıçrama sonra.
Gözler enükleated edildi, ve sol gözler 24 saat boyunca yüzde dört paraformaldehit ve fosfat tamponlar tuzlu sabit edildi. Fiksasyondan sonra gözler etanolle susuz kaldı. Sabit numunenin daha fazla ve ani bir büzülmesini önlemek için, dereceli bir etanoik çözelti serisi kullanılmıştır.
İlk olarak, numuneler bir saat boyunca %50 etanol aktarıldı ve daha sonra bir saat için konsantrasyonları artan, 70, 80, 90, 96, ve 100%sonra, gözler altı gün boyunca hacim fosfolipid asit başına% 10 ağırlık ile boyandı. Son olarak, numuneler mutlak etanolle yıkandı ve daha sonra tarama için mutlak etanol dolu tek tek iki değirmen plastik kaplara yerleştirildi. Tarama sırasında numuneyi stabilize etmek için bir pamuk ped de eklendi.
Daha sonra, örnek retina hasarı değerlendirmek için bir masaüstü x-Ray Micro-CT sistemi SkyScan 1272 tarayıcı içine yerleştirildi. Tarama için SkyScan 1272 yazılımını kullandık. Yazılımı açtıktan sonra, örneğimizi çerçeveye ortaladık.
Protokolümüzde, hiçbir filtre kullanmayın ve piksel boyutunu dört mikrona çıkaracak matrisi ayarlıyoruz. Mikro konumlandırma, numunenin çerçevede ortalanmış olmasını sağlamak için kullanılır. Daha sonra, numunemizdeki kontrast maddeyi en üst düzeye çıkarmak ve makineyi kalibre etmek için parametreleri kontrol ediyoruz.
Kalibrasyonu gerçekleştirmek için, örneği tarayıcıdan kaldırıyoruz ve tarama parametrelerini ayarlıyoruz. Kalibrasyon sırasında, düz dolgulu düzeltme de kontrol edilir. Kalibrasyonlardan sonra numune tarama odasına yeniden yerleştirilir.
Taramadan önce örnek dosyalar adlandırılmış. Tarama parametreleri aşağıdaki gibidir, döndürme adımı 0.4, kareler dört, rasgele hareket 30, piksel boyutu 4 mikron olarak ayarlanmış olup olmadığını çift kontrol edin. Sonra tbmm başlatılır.
Taramadan sonra, NRecon örneği yeniden oluşturmak için kullanılır. İlk olarak, tarama dan dosyaları açın ve ham tarama görüntüleri görüntülemek. Histogramın sıçramasını eğrinin içine sığacak şekilde ayarlıyoruz.
Sonra, Kiriş sertleştirme objesi için düzeltiyoruz. Sonra yumuşatıcı objeyi ayarlıyoruz. Son olarak, halka artifakı azaltma için düzeltin.
Tüm düzeltmelerden sonra, numunelerimizin ilgi alanımıza uyduğunu doğruladık. O zaman yeniden yapılanmaya başlayabiliriz. DataViewer yazılımını, her üç alanda yeniden oluşturulan görüntüleri görselleştirmek için kullanırız.
Analiz için CTAn yazılımı kullanılır. Yeniden yapılandırılan görüntüler yazılıma yüklenir. Optik sinir analiz için ilgi bölgesiortadan kaldırmak için kullanılmıştır.
Hesaplama yaparak, analiz için tüm ölçümleri gerçekleştirmek için ilgi bölgesinin orta dilimini kullandık. Alanın doğrusal ölçümünü hesaplamak için üç tekrarlanan ölçüm yapıldı. Oküler dokular, retina, RPE, koroid ve Mikro-BT analizlerimiz için aşağıdaki ölçümler yapıldı ve Mikro-BT analizlerimiz, yer kontrollerine göre uzay uçuşu örneklerinde retina, RPE ve koroid tabakasının kesit alanlarının önemli ölçüde daha düşük olduğunu gösterdi.
Mikro-BT herhangi bir manipülasyon olmadan değişikliklerin boyutunu hesaplamak için verimli ve tahribatsız teknikler sağlar. Kontrast maddeyi kullanarak, mikro-CT görüntülerinin kalitesini artırır, bu da numunenin yapısı olmadan yeniden yapılanmanın başarılı net grafik görüntüsünü elde etmemize yardımcı olur. Ayrıca, orijinal verilerde dijital olarak, bu nedenle erişilebilirlik ve bulguların tekrarlanabilirlik artış gösterir.
Ayrıca, temel amaç, üç boyutlu ölçümler kullanmak kabul edilebilir, ancak brüt üç boyutlu yapının segmentasyonu tüm numunenin belirli anahat sağlamak için yararlı olabilir. Sonuçlarımız, uzay uçuşu koşullarının, özellikle de yerçekimsel değişikliklerin gözde akut ve kısa süreli tepkiye yol açabileceğini göstermektedir. Ayrıca, birçok normal ve patolojik dokuların incelenmesinde başarıyla kullanıldığından, gelecekteki çalışmalar, Mikro-BT görüntüleme özelliklerinden yararlanan diğer analizleri gerçekleştirmek için hacimsel verileri kullanmalıdır.
