CRPS I'in altında yatan mekanizma hala belirsizliğini koruyor. CRPS'yi taklit eden bir preklinik hayvan modelinin oluşturulması CRPS I.The rat CPIP modelinin altında yatan mekanizmaları keşfetmek için çok önemli olacaktır. Model ininden sonra kalıcı termal ve mekanik hipersensitiviteler takip eder.
Sodyum fenobarbital ile tüm sıçanlar anestezi ile başlayın. Fareler düzgün kendi arka pençe veya kuyruk forceps ile pinching tarafından anestezi olduğundan emin olun. Ve veteriner merhemini gözlere yerleştirin.
İşlem sırasında fareyi 37 derece ısıtılmış ped üzerinde tutun. Gliserol ile sağ arka pençe ve ayak bileği yağlamak. Daha sonra bir nitril 70 durometre O halkasını bir nokta beş mililitrelik tüpün daha büyük tarafına kaydırın ve snap kapağı kesilmiş.
Dikkatle alt ulaşana kadar içi boş tüp içine arka pençe ekleyin. Yavaş yavaş ayak bileği eklemi yakın sağ arka bacak için tüp O halkaslayt. Ve üç saat orada bırak.
Iskemi neden olmamalıdır kırık bir O halkası dışında, sıçanların sahte gruba aynı tedavi uygulayın. Üç saat sonra, O halkasını kesin ve kıç recumbency korumak için yeterli bilinç yeniden kazanAna kadar sıçan izlemek. Anesteziden tamamen iyileşene kadar fareyi diğer farelerin yerine yerleştirmeyin.
Bir örgü zemin üzerinde şeffaf bir pleksiglas odasına sıçan yerleştirin ve herhangi bir davranış testi önce 30 dakika boyunca çevreye sıçan alışkanlık. Mekanik allodynia için sıçan test etmek için von frey filamentler kullanın. Arka patinin orta plantar yüzeyine dikey olarak uygulayarak orta filamentten teste başlayın.
Filamenti beş saniyeye kadar bükmek için uygun kuvvet uygulayın. Pençean ani bir geri çekilme, nosifif bir davranış olarak kabul edilir. Mekanik allodynia testini üçüncü, iki, bir ve her gün 13.
Eşik ve yüzde 50 pençe çekilme eşiği hesaplamak için dickson yöntemi test etmek için aşağı test yöntemi uygulayın. Termal hiperaljezi için test etmek için, doğrudan arka pençe 50 watt ampul yayılan ışık ışını nişan layarak hargreaves yöntemini kullanın. Aşırı yaralanmaları önlemek için kesme eşiği olarak 20 saniye ayarlayarak pençe çekilmesi gecikmesini ölçün.
Her arka pençe için beş dakikalık aralıklarla her testi üç kez tekrarlayın ve pençe çekilmesi gecikmesi olarak ortalamayı alın. Termal hiperaljezi testini üçüncü, iki, bir ve her gün 13. Kapsaisin indüklenen akut nositif davranışı test etmek için, DMSO ile 200 milimolar kapsaisin stok çözeltisini hazırlayın ve enjeksiyon için PBS'de 1'den 100'e kadar seyreltin.
Kapsaisin cilt, gözler ve solunum eklem tahrişine neden olabilir bir reaktif, . Kapsaisin solüsyonu hazırlarken maske ve gözlük takmak önemlidir. Sonra bir mililitre şırınga bağlı bir 30 gauge iğne kullanarak arka pençe içine kapsaisin veya bir araç 50 mikrolitre enjekte.
Enjeksiyondan sonra 10 dakika boyunca bir video kamera kullanarak enjekte edilen pençeyi yalama, ısırma veya fırlatma gibi nosfensive davranışı kaydedin. Modelin kurulmasından sonra 15 dakika, 24 saat, 48 saat ve 72 saat pençe çapındaki artışı ölçerek arka pati ödemini değerlendirin. Ayak bileğiüzerinde O halka yerleştirdikten sonra, ipsilateral arka pençe deri siyanoz gösterdi, doku hipoksi bir göstergesidir.
O halkası kestikten sonra, pençe kan ile doldurmaya başladı ve güçlü şişlik gösterdi, yoğun hiperemi gösteren. Şişlik yavaş yavaş azaldı ve işlemden 48 saat sonra normale döndü. Modelin kurulmasından bir gün sonra, CPIP grubunun ipsilateral arka pençesi gözlem süresinin 13 gün boyunca devam eden bariz mekanik allodynia sergiledi.
CPIP grubunun kontralateral arka pençede de 13 gün boyunca mekanik hiperaljezi sergilendi. Termal hiperaljezi ölçüldüğünde, CPIP sıçanlarının çift taraflı arka pençeleri, sahte grup sıçanlara kıyasla zararlı termal uyaranlara yanıt olarak çekilme gecikmesüresini önemli ölçüde azaltmıştır. İpsilateral arka patinin termal hiperaljezisi gözlem süresinin sonuna kadar devam ederken, kontralateral arka patinin termal hiperaljezisi yedi gün sürdü.
Sham ve CPIP grupları kapsaisin enjeksiyonu ile nosifif davranış açısından test edildi. Bir araca enjekte edildiğinde, sahte grup hafif bir nosfensive yanıt gösterdi ve CPIP grubu önemli ölçüde daha yüksek bir yanıt gösterdi. Daha da önemlisi, CPIP sıçanlar sham grubuna göre kapsaisin enjeksiyonu için önemli ölçüde daha yüksek tepkiler gösterdi, Hangi CPIP sıçanlar crps ile insan hastalara benzer bir fenomen sergilemek düşündürmektedir I.By bu işlem, sıçanlar önce ve model kurulması sırasında anestezi edilir.
Iskemi ve Human CRPS I tarafından kurulan bu protokolde tanımlanan CPIP sıçan modeli simitance gibi. Bu modellerin aileleri, CRPS i hakkında daha fazla mekanizma araştırılabilir.
