Yazarlar Tom Patterson ve analitik teknolojileri takım Dow AgroSciences onların laboratuvar olanakları kullanımı için ve onların rehberlik için teşekkür etmek istiyorum. Bu eser kısmen Kellogg şirket ve Dow AgroSciences gelen hediyeler ve USDA Hatch hibe yoluyla finanse edildi, hüseyin-802-354 Ödülü. Öğrenci destek CJBW için Illinois ayırt edici Bursu ve William B. ve Nancy L. Ambrose dostluk kırpma bilimlerde tarafından sağlandı.

1. pişmiş Mısır ezmesi üretmek
<ol><li>15 L düdüklü tencere bir elektrikli ocağın üzerinde konserve yerleştirin.</li>
	<li>Musluk suyu 1 litre 100 ° C'ye konserve düdüklü tencere ve ısı ekleme</li>
	<li>Su ısıtır iken, 100 g örnek endüstriyel dökülüyor İrmik veya dökülüyor kum malzeme (%12 nem içeriği, ıslak olarak)7 1 quart konserve kavanoza yerleştirin. Not: Bu çalışmanın temsilcisi sonuçları Macke ve ark. tarafından üretilen dökülüyor kum malzemeleri temel alır 9 -laboratuvar ölçekli kullanımı Rausch'la vd tarafından özetlenen freze Protokolü Kuru 7
</li>
	<li>200 mL distile su, 2 gr tuz, 6 g toz beyaz şeker ve 2 g sıvı malt özü oluşan bir şeker-tuz çözüm ekleyin. Not: birden fazla örnekleri örnekleri sayısı konserve düdüklü tencere boyutuna bağlıdır, ancak bir kerede çözümlenebilir.</li>
	<li>Çözüm bir cam çubuk karıştırarak kullanarak dökülüyor kum malzeme ile karıştırın.</li>
	<li>Konserve düdüklü tencere suya sonra kaynatın dokunun su 1 litre ekleyin konserve düdüklü tencere suya soğumaya başlar.</li>
	<li>Öyle ki onlar eşit uzaklıkta birbirinden ve konserve düdüklü tencere duvarından konserve kavanoz konserve düdüklü tencere yerleştirin.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig1.jpg"> Şekil 1: düdüklü tencere konserve kavanoz konserve yerleştirme. Canning kavanoz bir başka ve hatta yemek sağlamak ve kavanoz konserve için zarar görmemesi için konserve düdüklü tencere taraftan eşit uzaklıkta yer almalıdır. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="8"><li>Su haddeleme çıban ulaşmak izin. Konserve düdüklü tencere kapağını bir yer.</li>
	<li>Büyük dökülüyor İrmik veya 15 psi dökülüyor kum malzemenin bir h. izin ver için serin ve tamamen açmadan önce vakuma konserve düdüklü tencere yemek.</li>
	<li>Kapağı konserve ısıya dayanıklı eldivenler kullanarak düdüklü kaldırın.</li>
	<li>Konserve kavanoz konserve maşa kullanarak düdüklü kaldırın. Kavanoz ısıya dayanıklı bir yüzeye yerleştirin. Not: Elde edilen ara ürün bu noktada irmik pişirilir.</li>
	<li>Dökülüyor kum malzemesi olarak kullanıyorsanız Rausch'la vd tarafından belirtilen iletişim kuralı kullanılarak üretilen 7 , Kaldır Sigara endosperm malzeme pişirme sonra bir spatula ile. Endüstriyel dökülüyor irmik kullanıyorsanız, bu adımı atlayın.</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig2.jpg"> Şekil 2: endosperm malzeme kaldırılması. (bir) pişmiş kum örnek başına pişirme sırasında arttı endosperm malzeme kaldırma önce. (b) pişmiş kum örnek endosperm malzeme çıkarıldıktan sonra. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="13"><li>Pişmiş Mısır ezmesi (işlenmiş örnek) başına 30 g tartmak tekne ve kuru için 12 h 65 ° c fırında yerleştirin. Kurutma sonra pişmiş kum örnek bir kahve değirmeni kullanarak ince bir toz için eziyet ve fenolik analiz için serin kuru bir yerde saklayın.</li>
</ol>2. pişmiş Mısır ezmesi üretmek
<ol><li>
Kalan pişmiş Mısır ezmesi bir folyo kaplı fırın tepsisine yerleştirin.
	<ol>
<li>Üretilen iş geliştirmek için iki örnek aynı anda pişirin. Bunu yapmak için üzerinde bir fırın tepsisine iki folyo tekne oluşturun. Bu örnek arasında çapraz bulaşma olasılığını ortadan kaldırır.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig3.jpg"> Şekil 3: sac pişirme üzerinde pişmiş Mısır ezmesi yerleşimini. İki farklı pişmiş kum örnek bireysel folyo tekneler pişirme önce bir fırın tepsisindeki yerleştirilir. Tekne fotoğraf yeşil bant ile etiketlenir. Bu iletişim kuralı daha fazla işlem hacmi artarken aynı zamanda sağlanması çapraz bulaşma gerçekleşmedi. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="2"><li>
Önceden ısıtılmış konveksiyon fırın 107.2 ° c (225 ° F) 50 min için bir de iki örnek içeren pişirme çanağı yerleştirin.
	<ol>
<li>Örnekleri bile pişirme sağlamak için pişirme 25 dk sonra karıştırın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>50 dk süre sonunda ilk iki örnekleri içeren pişirme çanağı kaldırmak ve, oda sıcaklığında 30 dakika soğumasını bekleyin.</li>
	<li>Soğutma süresi sonunda, pişmiş Mısır ezmesi ara ürün üzerinden 30 g örnek al. Bu örnek bir tartmak tekne için 12 h 65 ° c fırında yerleştirin. Kuruduktan sonra pişmiş kum örnek bir kahve değirmeni ve mağaza için fitokimyasal analizi ile ince bir toz için eziyet.</li>
</ol>3. son tost Cornflake ürün üretmek
<ol><li>
Pişmiş Mısır ezmesi tortilla basın yoluyla rulo.
	<ol>
<li>İrmik folyo kaplı pişirme çanağı üzerinden pişmiş kalan kaldırmak ve bunlar üzerinde bir parça parşömen kağıt yaklaşık 1 m uzunluğu yerleştirin. Not: iş çıkarma yeteneğini artırmak için bu parşömen kağıt length-wise bir kese kat yararlıdır. Bu örnek takip çalışırken aşamasında kayıp miktarını en aza indirir.</li>
		<li>Yavaş yavaş pişmiş kum örnek birlikte çantada tortilla basın yoluyla besleme. Basında parmak pinching önlemek dikkatli olun.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig4.jpg"> Şekil 4: parşömen kağıt torba. (bir) parşömen kağıt boyuna katlanmış. (b) içinde belgili tanımlık kese uzun, açık tarafına katlanmış. (c) uzun yan üzerinden tekrar 10 ° açıyla katlanır. (d) içinde belgili tanımlık kese kısa, açık tarafına katlanmış. Bu tortilla basın yoluyla beslenen kese tarafında olacak. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="2"><li>Alınmış irmik 2.5 cm x 2,5 cm (12) kareler içine pişmiş kesti. Kesim/rulo hamur parşömen kağıt üzerinden puan için bir pizza kesici gibi bir araç kullanın.</li>
</ol><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig5.jpg"> Şekil 5. Pul hamur rulo kesme. Rulo hamur parşömen kağıt attı. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="3"><li>
Parşömen kağıt açmak ve haddelenmiş, kesmek, irmik, oda sıcaklığında 12 h için kuru pişmiş izin vermek.
	<ol>
<li>Kadar (genellikle 24 veya daha fazla) birden fazla örnekleri kızartma için hazır iş çıkarma yeteneğini artırmak için kurutulmuş örnek bir ağırlık folyo kaplı tekne oda sıcaklığında saklayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Önceden bir konveksiyon fırın 204.4 ° c (400 ° F) ısı. Kurutulmuş untoasted pul örnek lastiğim tepsisine yerleştirin. Böylece en az örnek örtüşen oluşur örnek yayıldı. Bu bile toasting sağlar.</li>
	<li>Yer uygun elde kadar 60-90 s fırında örnek renk (bkz. Şekil 6).</li>
</ol><img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig6.jpg"> Şekil 6: düzeltmek son tost Mısır gevreği rengini. Mısır gevreği resmin sol tarafında uygun süreyi için tost. Mısır gevreği resmin sağ tarafında uzun süre tost. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol start="6"><li>Yaklaşık 5 dakika oda sıcaklığında soğumaya örnek sağlar. Bu son tost cornflake verir.</li>
	<li>Tost cornflake örnek bir kahve değirmeni kullanarak ince bir toz grind.</li>
</ol>4. fitokimyasal ve istatistiksel analizler
Not: Bağlı olarak tam faiz ve araştırmacılar için kullanılabilir Labaratuar donanımları fitokimyasal analitik bu protokollerin değişebilir.
<ol><li>White dress no bra-Wilmsmeyer vd. ana hatlarıyla gibi bir protokol kullanarak fitokimyasal içerik belirlemek 3 iletişim kuralları'nda sağlanan tüm güvenlik prosedürleri takip edin.</li>
	<li>Uygun istatistiksel modeli kullanarak veri analiz. Not: Bu örnek veriler bölünmüş Arsa bütün Arsa birim alanı hangi Tahıl hasat arsa ve zamanın akışı birim işleme sahne oldu neredeydi bir RCBD kullanarak analiz edildi. Analizleri karışık PROC SAS (sürümü 9,3) yapılmıştır ve rakamlar R. üretildi</li>
</ol>

<ol>
	<li>United States Department of Agriculture. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> National Agricultural Statistics Service. , (2017).</li><li>USDA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ERS. , (2017).</li><li>Butts-Wilmsmeyer, C. J., Mumm, R. H., Bohn, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentration+of+Beneficial+Phytochemicals+in+Harvested+Grain+of+U.S.+Yellow+Dent+Maize+(Zea+mays+L.)+Germplasm.">Concentration of Beneficial Phytochemicals in Harvested Grain of U.S. Yellow Dent Maize (Zea mays L.) Germplasm.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 65 (38), 8311-8318 (2017).</li><li>Butts-Wilmsmeyer, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+phenolic+acid+content+in+maize+during+food+product+processing.">Changes in phenolic acid content in maize during food product processing.</a> Journal of Agricultural and Food. , (2018).</li><li>Dewanto, V., Wu, X. Z., Liu, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processed+sweet+corn+has+higher+antioxidant+activity.">Processed sweet corn has higher antioxidant activity.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (17), 4959-4964 (2002).</li><li>Fast, R. B., Caldwell, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breakfast+cereals+and+how+they+are+made.">Breakfast cereals and how they are made.</a> Breakfast cereals and how they are made. , (2000).</li><li>Rausch, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+measurement+of+yield+and+composition+of+dry-milled+corn+fractions+using+a+shortened,+single-stage+tempering+procedure.">Laboratory measurement of yield and composition of dry-milled corn fractions using a shortened, single-stage tempering procedure.</a> Cereal Chemistry. 86 (4), 434-438 (2009).</li><li>Kandhola, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Processing and Genetic Effects on Resistant Starch in Corn Flakes. , (2015).</li><li>Macke, J. A., Bohn, M. O., Rausch, K. D., Mumm, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+factors+underlying+dry-milling+efficiency+and+flaking-grit+yield+examined+in+us+maize+germplasm.">Genetic factors underlying dry-milling efficiency and flaking-grit yield examined in us maize germplasm.</a> Crop Science. 56 (5), 2516-2526 (2016).</li><li>Somavat, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+lab+scale+corn+dry+milling+protocol+generating+commercial+sized+flaking+grits+for+quick+estimation+of+coproduct+yield+and+composition.">A new lab scale corn dry milling protocol generating commercial sized flaking grits for quick estimation of coproduct yield and composition.</a> Industrial Crops and Products. 109, 92-100 (2017).</li><li>Adam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bioavailability+of+ferulic+acid+is+governed+primarily+by+the+food+matrix+rather+than+its+metabolism+in+intestine+and+liver+in+rats.">The bioavailability of ferulic acid is governed primarily by the food matrix rather than its metabolism in intestine and liver in rats.</a> Journal of Nutrition. 132 (7), 1962-1968 (2002).</li><li>Rumpagapom, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Structural Features of Cereal Bran Arabinoxylans Related to Colon Fermentation Rate. , (2011).</li><li>Wong, J. M. W., de Souza, R., Kendall, C. W. C., Emam, A., Jenkins, D. J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonic+health:+Fermentation+and+short+chain+fatty+acids.">Colonic health: Fermentation and short chain fatty acids.</a> Journal of Clinical Gastroenterology. 40 (3), 235-243 (2006).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

İşlem boyunca Mısır tabanlı gıda ürünlerinin besin içeriği kazanç bileşenleri ve termal stres5,10kaldırılması nedeniyle olası değişikliklerdir. Ancak, tam olarak nasıl etkilediğini işleme çeşitli besin nispeten küçük ayrıntı bu protokolü4,8gelişimi önce Okulu'nu. Ayrıca, çoğu laboratuvar işleme protokolleri büyük ölçekli nedeniyle, bu kez da duyu ve beslenme özellikleri Mısır tahıl8genetik temeli çalışmaya imkansız olmuştur. Burada, beslenme ve duyusal özellikleri Mısır Gıda ürün işleme boyunca çalışmak için bir microscale laboratuvar yöntemi mevcut.
Bu iletişim kuralı örnekleme dökülüyor kum aşamasında, pişirme, pişirme sonra sonra kesme kuvvetleri, çalışırken yükseltme sırasında karşılaşılan sonra gerçekleşmesi izin. Böylece, hasat Mısır tahıl ek analizi ile ilk aşamada substrat ve beslenme ile ilgili kompozisyon değişiklikleri aydınlatmak için işleme de son gıda ürün ve aracı aşamaları olarak çözümleme protokolü kolaylaştırır. Bu anahtar özellik Protokolü'nün de bu belirli analizleri için kullanmak için hangi analitik kimya iletişim kurallarını seçmek araştırmacı etkinleştirme sırasında işleme boyunca çözümlenmesi beslenme ve duyusal özellikleri sağlar. Başka bir önemli özelliği bu iletişim kuralı, bu microscale protokolünün etkinliği olduğunu. İlk olarak, bu protokol ayarı (Tablo 3) ıslah tesisinde uygun olan küçük bir örnek kullanır. Bir kg tahıl büyük dökülüyor kum bileşenlerinin yaklaşık 0,3 kg ve kabaca üçte biri üretilen bileşenlerinin işleme için ihtiyaç vardı büyük dökülüyor kum üretmek eğilimi. İkinci olarak, bu iletişim kuralı çok daha büyük örnek boyutları6gerekli önceki iletişim kuralı daha etkilidir günde yaklaşık 16 örnekleri laboratuvar işlenmesi için izin.
Bu iletişim kuralı kolayca diğer işlenmiş Mısır Gıda ürünleri taklit etmek için değiştirilmiş olabilir. Örneğin, büyük dökülüyor Mısır ezmesi yemek hazır kahvaltı gevrekleri9yanı sıra çeşitli aperatif gıdaların üretiminde kullanılır. Bu Aperatif yiyeceklerin üretimi için laboratuvar Protokolü foreseeably pişirme kez düzeltmeleri veya pişirme süreleri ve pişirme çözümleri için ayarlamalar dahil olabilir. Bu iletişim kuralının adapte bir sürümünü çalışma diğer tahıl ve onların anılan sıraya göre işlenmiş ürünler için kullanılan olabilir mümkündür. İşlenmiş tahıl ürünleri çoğunlukla pişirme, pişirme veya burada sunulan iletişim kuralının adapte bir sürümünü kullanarak taklit işleme aşamalarında toasting içerir.
Bu protokol önemli bir sınırlama olduğunu çok az durdurma noktası olan, bir işleme adımının başladıktan sonra yani , o ve sonraki adımları olması gerekir (Tablo 3) tamamlandı. Pişmiş Mısır ezmesi dökülüyor irmik gelen üretimden sonra bir tek durdurma nokta yoktur. Sadece gerekirse, pişmiş Mısır ezmesi olabilir (Örneğin kapalı bir konserve kavanoz) kapalı bir kap içinde yerleştirilir ve en az iki gün boyunca buzdolabında. Ancak, daha uzun süreler için pişmiş Mısır ezmesi depolama örnek değiştirmek için çıktı. Ayrıca, pişirme başladıktan sonra orada hiçbir durdurma noktaları kadar pişmiş kum hamur yuvarlandı, kesmek, kurutulmuş ve sonra.
Sonuç
İle bu örnek sonuç (bkz: white dress no bra-Wilmsmeyer vd. besin içeriği işlem boyunca takip edilebilir gösterdi 4 daha fazla bilgi için). Ayrıca, anahtar işlem aşamaları beslenme değişiklikleri oluştuğu tespit edilmiştir. Ayrıca, bu işlem protokolü için gereken küçük örnek boyut birden çok melez bitki yetiştirme programı kapsamında çalışma etkinleştirilmiş. Bu melez kullanarak, melez grubunu bağlı çözünmez ferulic asit ve işlem boyunca p-kumarik asit yüksek konsantrasyonda tutulan tespit. Bu özellikler son tost cornflakes prebiyotik potansiyelinin önemli göstergeleridir. 11 , 12 , 13 bu sonuçları doğrudan bitki yetiştiricileri için geliştirilmiş prebiyotik potansiyel üreme nüfusu işlenmiş Mısır ürünleri kurmak yardımcı olmak için kullanılabilir.
Bu işlem protokolü önemli avantajlarından yapılabilir besin analizleri sınırlamaz biridir. Bir fitokimyasal protokol tahıl analizi için varsa, o zaman bu işlenmiş ürünleri incelemek için kullanılabilir. Bu işlem protokolü laboratuvar ölçekli gıda işleme ve bağımsız olarak yapılacak besin analizleri sağladığından, Ayrıca, birden çok fitokimyasallar okudu olabilir. Fitokimyasal içerik çalışma analitik protokollerde küçük örnek boyutları, ancak, laboratuvar ölçekli işlem protokolü kullanılarak oluşturulan ara ve son işleme ürünleri az miktarda nedeniyle kullanmanız gerekir.

Mısır (Zea mays L.) Amerika Birleşik Devletleri1en çok ekili hububat üründür. 2016 yılında 71.12 milyar kg (2.8 milyar kile) Mısır insan tüketimi2Mısır Amerikan diyet önemini gösteren, sadık. Mısır tahıl büyük faydalar nispeten ucuz bir üründür, ama aynı zamanda fenolik, doymamış yağ asitleri ve protein3gibi yararlı fitokimyasallar içerir biridir. Bu nedenle, Mısır-esaslı gıda ürünleri insanlar için yararlı fitokimyasallar nispeten ucuz kaynakları olabilir.
Ancak, Mısır insan tüketimi önce işlenmelidir. Sonuç olarak, işleme faaliyetleri kez final işlenmiş gıda ürün4besin değerini etkisi. Örneğin, Aperatif yiyecek ve yemek hazır kahvaltılık tahıllar (Yani, soğuk) tahıl üretimi sırasında mısır çekirdekleri büyük dökülüyor irmik üretmek için öğütülür kurudu. Kuru öğütme sırasında kepek ve mikrop fiziksel olarak, sadece endosperm malzeme kaldırılır bırakarak. Beri birçok fitokimyasallar ağırlıklı olarak kepek ya da mikrop içinde bulunan (Örneğin, fenolik ve doymamış yağ asitleri, sırasıyla), bu işlenmiş gıda ürün4besin değerini önemli bir azalma neden olabilir. Bunun tersi olarak, aşağı akım işleme adımlarını besin değerini artırabilir. Örneğin, pişirme, pişirme veya toasting birçok Gıda ürün işleme teknikleri içerir. Bu aşamaları sırasında karşılaşılan termal gerilmeler yararlı fitokimyasallar5bioavailability artırabilir.
Bir gıda bilim ve insan beslenmesi perspektif, bunu bilmek nasıl işleme işlenmiş gıda ürünleri, aynı zamanda, foreseeably, nasıl işleme parametrelerini için ayarlamalar diğer duyu etkisi olabilir sadece besin değerini etkiler ilginç olabilir nitelikleri, renk, doku ve tat gibi. İşlem boyunca izlenecek böyle nitelikleri sağlayan bir protokol Mısır çeşitleri son işlenmiş Mısır Gıda ürün geliştirilmesi için seçmek için kullanılabilir. Geçmişte bu tür özellikleri analiz büyük engeller iki ölçek ve kullanılabilir protokolleri-den geçerek idi. Örneğin, kahvaltılık laboratuvar analiz için üretimi sırasında hızlı ve Caldwell6 büyük dökülüyor irmik 45,4 kg kullanımını önerdi. Büyük dökülüyor irmik bu kitle çok büyük dökülüyor İrmik veya programları ıslah tesisinde tipik küçük arsa alan denemeler gelen üretilen büyük dökülüyor kum malzemeler7 miktarı aşıyor. Böylece, işlenmiş gıda ürünleri için bir microscale Laboratuvarı protokol gelişimi (1) bitki yetiştiricileri Mısır çeşitleri (2) işlemciler ve gıda işlemcileri için önemli olan beslenme ve duyusal özellikler için geliştirmeye olanak verebilir verimli bir şekilde tasarım ve sınama alternatif işleme stratejileri.
Bu makale, bir yüksek-den geçerek değişiklik Protokolü büyük dökülüyor kum malzemelerden tost Mısır gevreği üretmek için kullanılan Kandohla8 ' de açıklanan işleme microscale açıklar. Biz bu işleme protokol değişikliği bağlı çözünmez ferulic asit ve Mısır p-kumarik asit çalışırdım bir örnek deney sonuçlarını mevcut. (1) nasıl yemek hazır kahvaltılık tahıllar, hangi işleme aşamalarında (2) bu değişiklikleri oluştu, üretim sırasında Mısır fenolik asit içeriği değiştirildi herhangi bir bizim deneysel (3) olup olmadığını belirlemek için bizim hedefleri belirli bu çalışmada idi melez farklı bu protokolü beslenme özellikleri verimli analizi için yüksek üretilen iş analitik kimya iletişim kuralları ile birleştiğinde gerilmeler işleme için cevap verdi. Bu iletişim kuralı da diğer işlenmiş Mısır Gıda ürünleri veya diğer tahıl üretilen işlenmiş gıda ürünleri üretimi taklit edecek şekilde ayarlanabilir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1480">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:259px;">Canning pressure cooker</td>
			<td style="width:315px;">Wisconsin Aluminum Foundry Co.</td>
			<td style="width:108px;">Model 921</td>
			<td style="width:799px;">Any can be used, but it should be large enough to accommodate multiple canning jars</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Single burner or large hot plate</td>
			<td>Waring Professional</td>
			<td>Model SB30</td>
			<td>Any can be used, but it should be large enough so that canning pressure cooker can securely be placed on burner or hot plate</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">1 quart wide mouth canning jars</td>
			<td>Ball</td>
			<td>1440096258</td>
			<td>Any can be used, but they should be wide mouthed quart jars</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">1 L Beaker</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-841-104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Stir plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>6796420D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Magnetic stir bar</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-513-67</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">1 L Graduated cylinder</td>
			<td>Kimble</td>
			<td>20027500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Spatula</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>552145280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hot pads</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>556501140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scale</td>
			<td>Any</td>
			<td>NA</td>
			<td>Mettler Toledo Model MS105DU or Similar</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Weigh boats</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>08-732-113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sugar</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>9259244</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Salt</td>
			<td>Morton (Purchased at Wal-Mart)</td>
			<td>9244849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Liquid malt extract</td>
			<td>By the Cup (Purchased on Amazon)</td>
			<td>NA</td>
			<td>https://www.amazon.com/Barley-Malt-Extract-Syrup-Bottle/dp/B01N4SK72C</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Labeling tape&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Permanent marker</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>55529894</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Convection oven</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>1598495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Baking pan (usually included with oven)</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>1598495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cooking foil</td>
			<td>Wal-Mart</td>
			<td>564264789</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tortilla press</td>
			<td>E&#38;A Hotel &#38; Restaurant Equipment and Supplies</td>
			<td>CTM-2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Parchment paper</td>
			<td>Reynolds (Purchased at Wal-Mart)</td>
			<td>551219672</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Pizza cutter</td>
			<td>Farberware (Purchased at Wal-Mart)</td>
			<td>&#160;553012200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cooling racks</td>
			<td>Flytt (Purchased on Amazon)</td>
			<td>NA</td>
			<td>https://www.amazon.com/dp/B075HQY627/ref=sspa_dk_detail_7?psc=1&#38;pd_rd_i=B075HQY627&#38;pd_rd_wg=WaJol&#38;pd_rd_r=SF07KCHMP753WAPG6ED4&#38;pd_rd_w=2BOwf</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">SAS Version 9.4</td>
			<td>SAS Institute</td>
			<td>Version 9.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">R</td>
			<td>R Foundation for Statistical Computing</td>
			<td>Version 3.4.0</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-throughput, microscale protocol for the analysis of processing parameters and nutritional qualities in maize (zea mays l.)

Mısır, Amerika Birleşik Devletleri ve dünya çapında bir önemli tahıl üründür. Ancak, Mısır tahıl insan tüketimi önce işlenmelidir. Ayrıca, tam tahıl kompozisyon ve işleme özellikleri Mısır melez arasında değişir ve nihai işlenmiş ürün kalitesini etkileyebilir. Bu nedenle, Mısır sağlıklı işlenmiş gıda ürünleri üretmek için işleme parametreleri belirli Pangenez tahıl kompozisyon ve işleme özellikleri bu farklılıkları için hesap grupları için en iyi duruma getirmek bilmek gereklidir. Bu daha iyi bir final işlenmiş gıda ürünün besin kalitesi ne kadar güncel işleme teknikleri etkisi anlayış içerir. Burada, hem işleme boru hattı üzerinden büyük dökülüyor irmik Mısır gevreği üretmek için taklit eder ve aynı anda birden fazla tahıl örnekleri işleme için izin verir bir microscale iletişim kuralını açıklar. Dökülüyor irmik, ara işlenmiş ürünler, ya da nihai işlenmiş ürün yanı sıra Mısır tahıl kendisi, yüksek üretilen iş analitik boru hattı bir parçası olarak besin içeriği için analiz edilebilir. Bu yordamı bir Mısır ıslah araştırma programına birleşme için özel olarak geliştirilmiş ve diğer tahıl ürünleri için değiştirilebilir. Biz bağlı çözünmez ferulic asit ve Mısır p-kumarik asit içeriği analiz için bir örnek sağlar. Örnekleri beş farklı işleme aşamalarında alınmıştır. Örnekleme sırasında işleme, işleme tekniği özel bir Mısır ıslah programı bağlamında kullanılabilir microscale birden fazla aşamalarında yer alabilir ve bizim örnekte, beslenme içeriğin çoğu, kayıp göstermek Gıda ürün işleme sırasında.

Bu iletişim kuralı bir işlenmiş Mısır gıda ürünü örnekleme ve beslenme analizi için büyük Mısır ezmesi dökülüyor ve nihai ürün için işleme ara aşamalardan devam başlayarak Mısır gevreği, izin. Bu iletişim kuralı Rausch'la vd tarafından özetlenen protokolü ile birleştiğinde Hibrid tahıl örneklerinden dökülüyor kum bileşenleri üretmek için 7 . Böylece, besin içeriği hakkında bilgi tam tahıl kum dökülüyor kum, kum, pişmiş pişmiş ve tost cornflake işleme aşamalarında sunulmaktadır büyük analiz hibrid örnekleri. Değerlendirme altında hibrid çiçekleri ne olursa olsun, en bağlı çözünmez ferulic asit ve p-kumarik asit kuru öğütme sırasında (Şekil 7) kaldırıldı. Başka bir azalma bağlı çözünmez ferulic asit ve p-kumarik asit pişirme sırasında oluştu. Çözünmez bağlı ferulic asit ve p-kumarik asit içeriği pişirme sırasında gözlenen azalma büyük dökülüyor kum malzeme kaldı endosperm malzeme az miktarda kaldırılması nedeniyle olabilir. Özgürlük kontrastlı çok derecesi ferulic asit ve p-kumarik asit içeriği işleme, hibrid (Tablo 1) ne olursa olsun kalanı boyunca sabit kalmıştır belirtti.
Ayrıca, melez çeşitlerin bağlı çözünmez ferulic asit içeriği ve p-kumarik asit içeriği açısından ilk sıralamasını melezlerin sıralaması (Tablo 2 ve Şekil 8) son işleme aşamada göstergesidir değildi. Başka bir deyişle, tüm çekirdek ilk içeriğinde en çözünmez bağlı ferulic asit veya işlem sonunda p-kumarik asit hangi hibrid sahip gösterge değildi. Böylece, işlenmiş gıda ürünlerinin besin özellikleri altta yatan genetik özellikleri çalışma için microscale süreçleri Mısır tahıl çalışmak için kullanılması gerekir.
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig7.jpg"> Şekil 7: çözünmez bağlı fenolik asit içerik işleme boyunca değişikliği. (bir) değişiklik bağlı çözünmez ferulic asit içerik işleme boyunca. (b) değişiklik çözünmez bağlı p-kumarik asit içerik işleme boyunca. WK: Tüm çekirdek, FG: dökülüyor Grit, CG: kum, BG pişmiş: kum, için pişmiş: tost Cornflake. Farklı renk noktaları farklı melez temsil eder. Şekil başlangıçta white dress no bra-Wilmsmeyer ve ark. ' ek bilgi yayınlanan 4 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57809/57809fig8.jpg"> Şekil 8: hibrid işleme sahne etkileşimin etkileşim arsa. (bir) etkileşim Arsa bağlı çözünmez ferulic asit içeriği için. (b) etkileşim Arsa çözünmez bağlı p-kumarik asit içeriği için. Kesişen çizgiler ne bağlı çözünmez ferulic asit ne de çözünmez bağlı p-kumarik asit içeriği son tost cornflake bunlardan ilk içeriğine dayalı tahmin edilebilir olduğunu anlamına gelen bir değişim sırası etkileşim gösterir fitokimyasallar tüm çekirdek. WK: Tüm çekirdek, FG: kum, için dökülüyor: tost Cornflake. Şekil başlangıçta white dress no bra-Wilmsmeyer ve ark. ' ek bilgi yayınlanan 4 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57809/57809fig8large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2" style="text-align: center;">Ferulic asit</td>
			<td colspan="2" style="text-align: center;">p-kumarik asit</td>
		</tr>
<tr>
<td>Melez</td>
			<td style="text-align: center;">F-değer</td>
			<td style="text-align: center;">p-değeri</td>
			<td style="text-align: center;">F-değer</td>
			<td style="text-align: center;">p-değeri</td>
		</tr>
<tr>
<td>B73xMO17</td>
			<td style="text-align: center;">0,07</td>
			<td style="text-align: center;">0,93</td>
			<td style="text-align: center;">0,34</td>
			<td style="text-align: center;">0,72</td>
		</tr>
<tr>
<td>B73xPHG47</td>
			<td style="text-align: center;">0,02</td>
			<td style="text-align: center;">0,98</td>
			<td style="text-align: center;">0,61</td>
			<td style="text-align: center;">0,55</td>
		</tr>
<tr>
<td>LH1xMO17</td>
			<td style="text-align: center;">0,08</td>
			<td style="text-align: center;">0,93</td>
			<td style="text-align: center;">0,14</td>
			<td style="text-align: center;">0,87</td>
		</tr>
<tr>
<td>PHJ40xLH123HT</td>
			<td style="text-align: center;">0,32</td>
			<td style="text-align: center;">0,73</td>
			<td style="text-align: center;">0,74</td>
			<td style="text-align: center;">0.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>PH207xPHG47</td>
			<td style="text-align: center;">0,15</td>
			<td style="text-align: center;">0.86</td>
			<td style="text-align: center;">0,24</td>
			<td style="text-align: center;">0,79</td>
		</tr>
<tr>
<td>PHJ40xMO17</td>
			<td style="text-align: center;">0,01</td>
			<td style="text-align: center;">0,99</td>
			<td style="text-align: center;">0.31</td>
			<td style="text-align: center;">0,74</td>
		</tr>
<tr>
<td>PHG39xPHZ51</td>
			<td style="text-align: center;">0,06</td>
			<td style="text-align: center;">0,94</td>
			<td style="text-align: center;">0,07</td>
			<td style="text-align: center;">0,93</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1: Özgürlük kontrastlı bağlı çözünmez fenolik asit içeriği farklılığı pişmiş irmik test çoklu derecesi irmik pişmiş ve Mısır gevreği tost.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2" style="text-align: center;">Ferulic asit</td>
			<td colspan="2" style="text-align: center;">p-kumarik asit</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td style="text-align: center;">F-değer</td>
			<td style="text-align: center;">p-değeri</td>
			<td style="text-align: center;">F-değer</td>
			<td style="text-align: center;">p-değeri</td>
		</tr>
<tr>
<td>Melez</td>
			<td style="text-align: center;">7.15</td>
			<td style="text-align: center;">0,001</td>
			<td style="text-align: center;">8,7</td>
			<td style="text-align: center;">< 0,001</td>
		</tr>
<tr>
<td>Lezzolarla</td>
			<td style="text-align: center;">4,07</td>
			<td style="text-align: center;">0,007</td>
			<td style="text-align: center;">6.57</td>
			<td style="text-align: center;">< 0,001</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">Not: Tüm yıl-tarafından-genotip-tarafından-işleme sahne intereactions sigara-α anlamlıdır 0,05 =.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 2: Genotip işleme sahne etkileşim önemi.
<table align="center" border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td style="text-align: center;">İletişim kuralı adım</td>
			<td style="text-align: center;">Kritik bilgi</td>
			<td style="text-align: center;">Sorun giderme</td>
			<td style="text-align: center;">Yüksek üretilen iş önerileri</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">1.2 ve 1,6</td>
			<td style="text-align: center;">Bu iki adımı kaplin konserve kavanoz bozmadan ısıtmalı su sağlar.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
			<td style="text-align: center;">Konserve kavanoz eklenmesi önce yarım su ısıtma verimi artırır.</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">1.4</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
			<td style="text-align: center;">Malzemeler önceden ölçmek.  Belirli miktar için bir kavanoz, yani birim veya malzemeleri 1.4.2 adımda kullanılan kavanoz sayısına göre gerekli kitle çarpma. Konserve kavanoz arasında eşit olarak elde edilen karışımı bölün.</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">1.4 Not</td>
			<td style="text-align: center;">Kavanoz düdüklü tencere veya birbirlerine konserve kenarına dokunmak izin vermez. Onlar kıracak ve örnek-ecek yitmek.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">1.9 ve 1,10</td>
			<td style="text-align: center;">Su önce yemek haddeleme kaynaması ulaştırılması gerekmektedir.</td>
			<td style="text-align: center;">Mısır ezmesi iyice bir h sonra pişmiş değil, o zaman basınç sağlamak için Ağırlık 15 psi için kuruldu ve su tam çıban konserve düdüklü tencere kapağı yerleştirilir ve Zamanlayıcı ayarlamadan önce ulaşıyor kontrol edin.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">1,13</td>
			<td style="text-align: center;">Pişirme sırasında yukarı yüzen endosperm malzeme çıkarmak.  Bu örnekte bırakılırsa herhangi bir fitokimyasal sonuçları çarpık.</td>
			<td style="text-align: center;">Endosperm malzeme yukarı pişirme sırasında artış yok değil, daha sonra irmik thorougly yemek değil.  Adım 1.9 ve 1,10 ile ilgili bilgi bakın.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">1.15, 2.4 ve 3.7</td>
			<td style="text-align: center;">Örnek bir ince toz için eziyet.</td>
			<td style="text-align: center;">Fitokimyasal Analizi çalışmak gibi görünüyorsa, öyle ki bir büyük yüzey alanı solventler için maruz örnek ince bir toz toprağa olmuştur emin olun.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">2.1</td>
			<td style="text-align: center;">Örnekleri birbirlerine dokunmak izin vermez.  Onlar çapraz-kirlenmiş olacak.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
			<td style="text-align: center;">İki örnek aynı anda bireysel folyo tekneler için pişirme bir sayfada yanında yapım onları pişirin.</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">2.2.1</td>
			<td style="text-align: center;">Örnek bile pişirme sağlamak için 25 dk sonra karıştırın.</td>
			<td style="text-align: center;">Örnek eşit pişmiş ortaya çıkmazsa, daha sık aralıklarla (örneğin her 15 dk) karıştırın.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">3.1</td>
			<td style="text-align: center;">Pişmiş kum hamur bir parşömen kağıt çanta içinde yerleştirin.  Bu örnek basarak sırasında kaybolmaz sağlar.</td>
			<td style="text-align: center;">Örnek parşömen kağıt torba sonunda dışarı yağmaya başladı, daha uzun kese olun. Bulduğumuz o 1 m yeterli olduğu ortaya çıktı.</td>
			<td style="text-align: center;">NA</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">3.2</td>
			<td style="text-align: center;">Parşömen kağıt çanta kapalı bırakın.</td>
			<td style="text-align: center;">Kesme Aracı parşömen kağıt keser, sıkıcı bir araç kullanın.</td>
			<td style="text-align: center;">Bir pizza kesici karelere pişmiş Mısır ezmesi kesme için en iyi araç olduğunu ortaya koymuştur.  Biz bu aracı kullanarak parşömen kağıdı kesin değil, ama pişmiş Mısır ezmesi hala çok hızlı bir şekilde kareler halinde kesmeye başardık.</td>
		</tr>
<tr>
<td style="text-align: center;">3.5</td>
			<td style="text-align: center;">Renk ile çok rahat olmak ve çok uzun süre tost değil.</td>
			<td style="text-align: center;">Örnek çok karanlık hale gelirse, tost için kullanılan süreyi azaltmak.</td>
			<td style="text-align: center;">Birden çok örnekleri kızartma için hazır olana birden fazla kurutulmuş fırın kum örnekleri bireysel folyo kaplı tartmak tekneler içinde saklayın.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 3: Kritik adımlar, sorun giderme adımları ve önerileri.

Watch this Scientific Journal Video about High-throughput, Microscale Protocol for the Analysis of Processing Parameters and Nutritional Qualities in Maize Zea mays L. at JoVE.com

High-throughput, Microscale Protocol for the Analysis of Processing Parameters and Nutritional Qualities in Maize Zea mays L.

Burada, bir microscale Protokolü işleme tahıl örnekleri için ve bu microscale yaklaşım yüksek üretilen iş analitik ardışık düzene dahil etmek için mevcut. Bu bir Şu anda kullanılabilir iletişim kurallarını daha yüksek üretilen iş uyarlamasıdır.

Yüksek işlem hacmi, analiz işleme parametrelerini ve Mısır (Zea mays L.) beslenme nitelikleri için Microscale Protokolü

Maize is an important grain crop in the United States and worldwide. However, maize grain must be processed prior to human consumption. Furthermore, whole ...

high-throughput-microscale-protocol-for-analysis-processing

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

High-throughput, Microscale Protocol for the Analysis of Processing Parameters and Nutritional Qualities in Maize (Zea mays L.)

6.8K Görüntüleme.  University of Illinois at Urbana-Champaign. Burada, bir microscale Protokolü işleme tahıl örnekleri için ve bu microscale yaklaşım yüksek üretilen iş analitik ardışık düzene dahil etmek için mevcut. Bu bir Şu anda kullanılabilir iletişim kurallarını daha yüksek üretilen iş uyarlamasıdır.

Video: High-throughput, Microscale Protocol for the Analysis of Processing Parameters and Nutritional Qualities in Maize Zea mays L.

Determination of Microbial Extracellular Enzyme Activity in Waters, Soils, and Sediments using High Throughput Microplate Assays

Much of the nutrient cycling and carbon processing in natural environments occurs through the activity of extracellular enzymes released by microorganisms. Thus, measurement of the activity of these extracellular enzymes can give insights into the rates of ecosystem level processes, such as organic matter decomposition or nitrogen and phosphorus mineralization. Assays of extracellular enzyme activity in environmental samples typically involve exposing the samples to artificial colorimetric or fluorometric substrates and tracking the rate of substrate hydrolysis. Here we describe microplate based methods for these procedures that allow the analysis of large numbers of samples within a short time frame. Samples are allowed to react with artificial substrates within 96-well microplates or deep well microplate blocks, and enzyme activity is subsequently determined by absorption or fluorescence of the resulting end product using a typical microplate reader or fluorometer. Such high throughput procedures not only facilitate comparisons between spatially separate sites or ecosystems, but also substantially reduce the cost of such assays by reducing overall reagent volumes needed per sample.

Microplate based procedures are described for the colorimetric or fluorometric analysis of extracellular enzyme activity. These procedures allow for the rapid assay of such activity in large numbers of environmental samples within a manageable time frame.

Yüksek Verimli Mikroplate Tahliller kullanarak Waters, Topraklar ve tortulları Mikrobiyal Ekstrasellüler Enzim Aktivitesi Belirlenmesi

Much of the nutrient cycling and carbon  processing in natural environments occurs through the activity of extracellular  enzymes released by ...

Çevre

High-throughput Fluorometric Measurement of Potential Soil Extracellular Enzyme Activities

Microbes in soils and other environments produce extracellular enzymes to depolymerize and hydrolyze organic macromolecules so that they can be assimilated for energy and nutrients. Measuring soil microbial enzyme activity is crucial in understanding soil ecosystem functional dynamics. The general concept of the fluorescence enzyme assay is that synthetic C-, N-, or P-rich substrates bound with a fluorescent dye are added to soil samples. When intact, the labeled substrates do not fluoresce. Enzyme activity is measured as the increase in fluorescence as the fluorescent dyes are cleaved from their substrates, which allows them to fluoresce. Enzyme measurements can be expressed in units of molarity or activity. To perform this assay, soil slurries are prepared by combining soil with a pH buffer. The pH buffer (typically a 50 mM sodium acetate or 50 mM Tris buffer), is chosen for the buffer&#39;s particular acid dissociation constant (pKa) to best match the soil sample pH. The soil slurries are inoculated with a nonlimiting amount of fluorescently labeled (i.e. C-, N-, or P-rich) substrate. Using soil slurries in the assay serves to minimize limitations on enzyme and substrate diffusion. Therefore, this assay controls for differences in substrate limitation, diffusion rates, and soil pH conditions; thus detecting potential enzyme activity rates as a function of the difference in enzyme concentrations (per sample).
Fluorescence enzyme assays are typically more sensitive than spectrophotometric (i.e. colorimetric) assays,&#160;but can suffer from interference caused by impurities and the instability of many fluorescent compounds when exposed to light; so caution is required when handling fluorescent substrates. Likewise, this method only assesses potential enzyme activities under laboratory conditions when substrates are not limiting. Caution should be used when interpreting the data representing cross-site comparisons with differing temperatures or soil types, as in situ soil type and temperature can influence enzyme kinetics.

To measure potential rates of soil extracellular enzyme activities, synthetic substrates that are bound to a fluorescent dye are added to soil samples. Enzyme activity is measured as the fluorescent dye is released from the substrate by an enzyme-catalyzed reaction, where higher fluorescence indicates more substrate degradation.

Potansiyel Toprak Ekstrasellüler Enzim Aktivitelerinin Yüksek verim Florimetrik Ölçme

Microbes in soils and other environments produce extracellular enzymes to depolymerize and hydrolyze organic macromolecules so that they can be ...

Optimized Negative Staining: a High-throughput Protocol for Examining Small and Asymmetric Protein Structure by Electron Microscopy

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of natural proteins have a molecular mass between 40 - 200 kDa1,2, a robust and high-throughput method with a nanometer resolution capability is needed. Negative staining (NS) electron microscopy (EM) is an easy, rapid, and qualitative approach which has frequently been used in research laboratories to examine protein structure and protein-protein interactions. Unfortunately, conventional NS protocols often generate structural artifacts on proteins, especially with lipoproteins that usually form presenting rouleaux artifacts. By using images of lipoproteins from cryo-electron microscopy (cryo-EM) as a standard, the key parameters in NS specimen preparation conditions were recently screened and reported as the optimized NS protocol (OpNS), a modified conventional NS protocol 3 . Artifacts like rouleaux can be greatly limited by OpNS, additionally providing high contrast along with reasonably high&#8208;resolution (near 1 nm) images of small and asymmetric proteins. These high-resolution and high contrast images are even favorable for an individual protein (a single object, no average) 3D reconstruction, such as a 160 kDa antibody, through the method of electron tomography4,5. Moreover, OpNS can be a high&#8208;throughput tool to examine hundreds of samples of small proteins. For example, the previously published mechanism of 53 kDa cholesteryl ester transfer protein (CETP) involved the screening and imaging of hundreds of samples 6. Considering cryo-EM rarely successfully images proteins less than 200 kDa has yet to publish any study involving screening over one hundred sample conditions, it is fair to call OpNS a high-throughput method for studying small proteins. Hopefully the OpNS protocol presented here can be a useful tool to push the boundaries of EM and accelerate EM studies into small protein structure, dynamics and mechanisms.

More than half of proteins are small proteins (molecular mass &#60;200 kDa) that are challenging for both electron microscope imaging and three-dimensional reconstructions. Optimized negative staining is a robust and high-throughput protocol to obtain high contrast and relatively high resolution (~1 nm) images of small asymmetric proteins or complexes under different physiological conditions.

Optimize Negatif Boyama: Elektron Mikroskobu ile Küçük ve Asimetrik Protein Yapısı incelenmesi için Yüksek verim Protokolü

Structural determination of proteins is rather challenging for proteins with molecular masses between 40 - 200 kDa. Considering that more than half of ...

Semi-High Throughput Screening for Potential Drought-tolerance in Lettuce (Lactuca sativa) Germplasm Collections

This protocol describes a method by which a large collection of the leafy green vegetable lettuce (Lactuca sativa L.) germplasm was screened for likely drought-tolerance traits. Fresh water availability for agricultural use is a growing concern across the United States as well as many regions of the world. Short-term drought events along with regulatory intervention in the regulation of water availability coupled with the looming threat of long-term climate shifts that may lead to reduced precipitation in many important agricultural regions has increased the need to hasten the development of crops adapted for improved water use efficiency in order to maintain or expand production in the coming years. This protocol is not meant as a step-by-step guide to identifying at either the physiological or molecular level drought-tolerance traits in lettuce, but rather is a method developed and refined through the screening of thousands of different lettuce varieties. The nature of this screen is based in part on the streamlined measurements focusing on only three water-stress indicators: leaf relative water content, wilt, and differential plant growth following drought-stress. The purpose of rapidly screening a large germplasm collection is to narrow the candidate pool to a point in which more intensive physiological, molecular, and genetic methods can be applied to identify specific drought-tolerant traits in either the lab or field. Candidates can also be directly incorporated into breeding programs as a source of drought-tolerance traits.

Semi-High Throughput Screening for Potential Drought-tolerance in Lettuce Lactuca sativa Germplasm Collections

This protocol was developed to screen a large germplasm collection of the leafy vegetable lettuce (Lactuca sativa L.) for drought-tolerance, in order to identify a small candidate pool of lettuce for use in physiological, molecular, and genetic studies to identify underlying drought-tolerance traits along with breeding programs.

Marul Potansiyel Kuraklığa tolerans Yarı-Yüksek Verim Tarama (<em&gt; Lactuca sativa</em&gt;) Germplazm Koleksiyonlar

This protocol describes a method by which a large collection of the leafy green vegetable lettuce (Lactuca sativa L.) germplasm was screened for likely ...

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. Unfortunately, traditional benthic larval sampling methods, such as the dip-net, can be time-consuming and expensive. An alternative protocol involves collection of Chironomidae surface-floating pupal exuviae (SFPE). Chironomidae is a species-rich family of flies (Diptera) whose immature stages typically occur in aquatic habitats. Adult chironomids emerge from the water, leaving their pupal skins, or exuviae, floating on the water&#8217;s surface. Exuviae often accumulate along banks or behind obstructions by action of the wind or water current, where they can be collected to assess chironomid diversity and richness. Chironomids can be used as important biological indicators, since some species are more tolerant to pollution than others. Therefore, the relative abundance and species composition of collected SFPE reflect changes in water quality. Here, methods associated with field collection, laboratory processing, slide mounting, and identification of chironomid SFPE are described in detail. Advantages of the SFPE method include minimal disturbance at a sampling area, efficient and economical sample collection and laboratory processing, ease of identification, applicability in nearly all aquatic environments, and a potentially more sensitive measure of ecosystem stress. Limitations include the inability to determine larval microhabitat use and inability to identify pupal exuviae to species if they have not been associated with adult males.

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrates are often used to monitor and assess water quality. An efficient protocol involves collections of Chironomidae surface-floating pupal exuviae (SFPE). Here, techniques for field collection, laboratory processing, slide mounting, and identification of Chironomidae SFPE are described.

Chironomidae (Diptera) kullanılması Yüzey Yüzer Su Organları bir Rapid Bioassessment Protokolü Pupa Exuviae

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of scientific publications address microplastic pollution of the sea surface. The protocol below describes the methodology for sampling, sample preparation, separation and chemical identification of microplastic particles. A manta net fixed on an &#187;A frame&#171; attached to the side of the vessel was used for sampling. Microplastic particles caught in the cod end of the net were separated from samples by visual identification and use of stereomicroscopes. Particles were analyzed for their size using an image analysis program and for their chemical structure using ATR-FTIR and micro FTIR spectroscopy. The described protocol is in line with recommendations for microplastics monitoring published by the Marine Strategy Framework Directive (MSFD) Technical Subgroup on Marine Litter. This written protocol with video guide will support the work of researchers that deal with microplastics monitoring all over the world.

The protocol below describes the methodology for: microplastics sampling on the sea surface, separation of microplastic and chemical identification of particles. This protocol is in line with the recommendations for microplastics monitoring published by the MSFD Technical Subgroup on Marine Litter.

Deniz Yüzey ve Numune Analizi Microplastics Örnekleme Protokolü

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of ...

Extraction of Organochlorine Pesticides from Plastic Pellets and Plastic Type Analysis

Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment during manufacturing and transport. Because of their environmental persistence, they are widely distributed in the oceans and on beaches all over the world. They can act as a vector of potentially toxic organic compounds (e.g., polychlorinated biphenyls) and might consequently negatively affect marine organisms. Their possible impacts along the food chain are not yet well understood. In order to assess the hazards associated with the occurrence of plastic pellets in the marine environment, it is necessary to develop methodologies that allow for rapid determination of associated organic contaminant levels. The present protocol describes the different steps required for sampling resin pellets, analyzing adsorbed organochlorine pesticides (OCPs) and identifying the plastic type. The focus is on the extraction of OCPs from plastic pellets by means of a pressurized fluid extractor (PFE) and on the polymer chemical analysis applying Fourier Transform-InfraRed (FT-IR) spectroscopy. The developed methodology focuses on 11 OCPs and related compounds, including dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) and its two main metabolites, lindane and two production isomers, as well as the two biologically active isomers of technical endosulfan. This protocol constitutes a simple and rapid alternative to existing methodology for evaluating the concentration of organic contaminants adsorbed on plastic pieces.

Microplastics act as vector of potentially toxic organic contaminants with unpredictable effects. This protocol describes an alternative methodology for assessing the levels of organochlorine pesticides adsorbed on plastic pellets and identifying the polymer chemical structure. The focus is on pressurized fluid extraction and attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectroscopy.

Plastik Peletlerden Organochlorine Pestisitlerin Çıkarılması ve Plastik Tipi Analizi

Plastic resin pellets, categorized as microplastics (&#8804;5 mm in diameter), are small granules that can be unintentionally released to the environment ...

Dispersion of Nanomaterials in Aqueous Media: Towards Protocol Optimization

The sonication process is commonly used for de-agglomerating and dispersing nanomaterials in aqueous based media, necessary to improve homogeneity and stability of the suspension. In this study, a systematic step-wise approach is carried out to identify optimal sonication conditions in order to achieve a stable dispersion. This approach has been adopted and shown to be suitable for several nanomaterials (cerium oxide, zinc oxide, and carbon nanotubes) dispersed in deionized (DI) water. However, with any change in either the nanomaterial type or dispersing medium, there needs to be optimization of the basic protocol by adjusting various factors such as sonication time, power, and sonicator type as well as temperature rise during the process. The approach records the dispersion process in detail. This is necessary to identify the time points as well as other above-mentioned conditions during the sonication process in which there may be undesirable changes, such as damage to the particle surface thus affecting surface properties. Our goal is to offer a harmonized approach that can control the quality of the final, produced dispersion. Such a guideline is instrumental in ensuring dispersion quality repeatability in the nanoscience community, particularly in the field of nanotoxicology.

Here, we present a step-wise protocol for the dispersion of nanomaterials in aqueous media with real-time characterization to identify the optimal sonication conditions, intensity, and duration for improved stability and uniformity of nanoparticle dispersions without impacting the sample integrity.

Nanomalzemeler sulu ortamda dağılımı: doğru iletişim kuralı en iyi duruma getirme

The sonication process is commonly used for de-agglomerating and dispersing nanomaterials in aqueous based media, necessary to improve homogeneity and ...

A 3-dimensional (3D)-printed Template for High Throughput Zebrafish Embryo Arraying

The zebrafish is a globally recognized fresh water organism frequently used in developmental biology, environmental toxicology, and human disease related research fields. Thanks to its unique features, including large fecundity, embryo translucency, rapid and simultaneous development, etc., zebrafish embryos are often used for large scale toxicity assessment of chemicals and drug/compound screening. A typical screening procedure involves adult zebrafish spawning, embryos selection, and arraying the embryos into multi-well plates. From there, embryos are subjected to exposure and the toxicity of chemical, or the effectiveness of the drugs/compounds can be evaluated relatively quickly based on phenotypic observations. Among these processes, embryos arraying is one of the most time-consuming and labor-intensive steps that limits the throughput level. In this protocol, we present an innovative approach that makes use of a 3D-printed arraying template coupled with vacuum manipulation to speed up this laborious step. The protocol herein describes the overall design of the arraying template, a detailed experimental setup and step-by-step procedure, followed by representative results. When implemented, this approach should prove beneficial in a variety of research applications using zebrafish embryos as testing subjects.

A 3-dimensional 3D-printed Template for High Throughput Zebrafish Embryo Arraying

Here, we present a protocol to design and fabricate a zebrafish embryo arraying template, followed by a detailed procedure on the use of such template for high throughput zebrafish embryo arraying into a 96-well plate.

3 boyutlu (3D)-yüksek işlem hacmi zebra balığı diziliyor embriyo için şablon basılı

The zebrafish is a globally recognized fresh water organism frequently used in developmental biology, environmental toxicology, and human disease related ...

Isolation and Analysis of Microbial Communities in Soil, Rhizosphere, and Roots in Perennial Grass Experiments

Plant and soil microbiome studies are becoming increasingly important for understanding the roles microorganisms play in agricultural productivity. The purpose of this manuscript is to provide detail on how to rapidly sample soil, rhizosphere, and endosphere of replicated field trials and analyze changes that may occur in the microbial communities due to sample type, treatment, and plant genotype. The experiment used to demonstrate these methods consists of replicated field plots containing two, pure, warm-season grasses (Panicum virgatum and Andropogon gerardii) and a low-diversity grass mixture (A. gerardii, Sorghastrum nutans, and Bouteloua curtipendula). Briefly, plants are excavated, a variety of roots are cut and placed in phosphate buffer, and then shaken to collect the rhizosphere. Roots are brought to the laboratory on ice and surface sterilized with bleach and ethanol (EtOH). The rhizosphere is filtered and concentrated by centrifugation. Excavated soil from around the root ball is placed into plastic bags and brought to the lab where a small amount of soil is taken for DNA extractions. DNA is extracted from roots, soil, and rhizosphere and then amplified with primers for the V4 region of the 16S rRNA gene. Amplicons are sequenced, then analyzed with open access bioinformatics tools. These methods allow researchers to test how the microbial community diversity and composition varies due to sample type, treatment, and plant genotype. Using these methods along with statistical models, the representative results demonstrate there are significant differences in microbial communities of roots, rhizosphere, and soil. Methods presented here provide a complete set of steps for how to collect field samples, isolate, extract, quantify, amplify, and sequence DNA, and analyze microbial community diversity and composition in replicated field trials.

Excavation of plant roots from the field as well as processing of samples into endosphere, rhizosphere, and soil are described in detail, including DNA extraction and data analysis methods. This paper is designed to enable other laboratories to use these techniques for the study of soil, endosphere, and rhizosphere microbiomes.

Yalıtım ve mikrobiyal topluluklarda toprak, rizosferde ve kökleri çok yıllık çim deneylerde Analizi

Plant and soil microbiome studies are becoming increasingly important for understanding the roles microorganisms play in agricultural productivity. The ...