Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

Hayvan çalışmaları yanı sıra ilkeleri laboratuvar hayvan bakım (Ulusal Sağlık Enstitüleri yayını derleyen 8, 2011) Alman mevzuatı tarafından yönetilen kuralları takip edildi. Toplum hayvan bakımı ofisinden (Landesamt für Natur, Umwelt und Verbraucherschutz Nordrhein-Westfalen, Recklinghausen, Almanya) resmi izni verilir.
1. hayvanlar
<ol><li>(25-30 kg ağırlıklı) dişi Alman landrace domuz açık kafeslerde yer alan kullanın.</li>
	<li>Grup (argon ve helyum) başına 5 hayvanlar kullanın.</li>
	<li>En az bir hafta önce deneyler için çevreye parkenizin hayvanlar izin. Hızlı hayvanlar su ücretsiz erişim ile ameliyat öncesi 24 h için.</li>
</ol>2. anestezi
<ol><li>Ketamin (15 mg/kg vücut ağırlığı [BW]), xylazine (10 mg/kg BW) ve atropin (0.1 mg/kg BW) bir kas içi enjeksiyon hayvanlarla 10 dk önce anestezi indüksiyon premedicate.</li>
	<li>Periferik venöz erişim bir 22'lik kanül yerleştirme bir kulak ven içine tarafından kurulmuştur.</li>
	<li>Genel anestezi propofol 2 mg/kg vücut ağırlığı damardan enjeksiyon tarafından ikna etmek.</li>
	<li>Hayvan sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve bir boyuna cilt kesi şah oluk subkutan doku künt hazırlanması ile yerleştirme damar 2 cm. uzunluğunda üzerinden performans sağlar. Kanül, sonra Seldinger tel yerleştirin.</li>
	<li>Kanül geri çekmek ve kılavuz tel üzerinden 14 Fr. kateter takın. Kılavuzu geri çek. Kateter uzantısı için bağlanmak ve bir kayış veya dikiş kateter bağlayacaktın.</li>
	<li>Dilini ve düz Laringoskop ekleyin. Laringoskop ucu gırtlak kapağını çekmek için kullanın. Ses tellerini tüpten yerleştirin. Manşet altında glottis yerleştirin ve şişirmek.</li>
	<li>20-26 nefes/dak ve 10 ml/kg gelgit hacmi % 40 oksijen ile son gelgit kısmi karbon dioksit gerilimi 36 ve 42 mm Hg arasında tutmak için havalandırın.</li>
	<li>Anestezi isoflurane, 1-%1,5 konsantrasyon ve fentanil, 3-4 µg/kg/h bir konsantrasyon ile koruyun.</li>
	<li>Zil'ın laktat çözüm 4 mL/kg ilk bir oranda tedarik/s ve sonra laparotomi sürekli infüzyon hızı 8 mL/kg artırmak/s.</li>
</ol>3. cerrahi ve plazma koagülasyon
<ol><li>Hayvan standart bir cerrahi tablo bir sırtüstü pozisyonda yerleştirin.</li>
	<li>Standart cerrahi dezenfektan uygulayarak cilt dezenfekte (2-Propanol 45 g/100 g, 1-Propanol 10 g / 100g, Biphenyl-2-ol 0.2 g/100 g) için 3 kere cerrahi bir bez ile.</li>
	<li>Geniş orta hat laparatomi xiphoid işleminden bir neşter ile pubis için gerçekleştirin ve cerrahi ekartör yükleyin.</li>
	<li>Plazma koagülasyon cihazı yeniden açın, bağlı olarak kullanılan taşıyıcı gaz argon veya helyum gaz şişesi açmak. Gaz akışı için 3 L/dak Select koagülasyon aygıt çıkış gücü istediğiniz gibi ayarlayın. Not: Her iki asil gazlar, Argon veya helyum, plazma koagülasyon için kullanılabilir. Koagülasyon etkileri karşılaştırılabilir. Başvuru7 Ayrıntılar için bkz:.</li>
	<li>Plazma koagülasyon üzerinde karaciğer sol lob yukarıda açıklanan7olarak gerçekleştirin. Bir titanyum kalıp (kare diyafram 1 x 1 cm2) koagülasyon bölgesi standart hale getirmek için kullanın. Koyulaştırmak için 5 bir sonda mesafe 1 cm ile s. Farklı güç ayarları ile coagulations coagulations 5 mm (Şekil 1) arasında kısa bir mesafe ile yan yana gerçekleştirilebilir.</li>
	<li>Karaciğer hasat için tüm bağları bağlantıları karaciğere bölün. İzole ve portal ven ve ortak safra kanalını uzun bölümlerini bırakarak üstün duodenal kivrimi yukarıda hepatik Transpediküler bölün. Yukarıda ve aşağıda karaciğer caval ven bölmek ve organ almak.</li>
	<li>Karaciğer hasat sonrası, domuzlar 0,16 g/kg BW Fentobarbital damardan yönetimi tarafından euthanized.</li>
	<li>Patlama basınç deneyler için sol mediyal karaciğer lob yarısı ile keskin makas çıkarabileceğim. Plazma kesme koagüle yüzey (100W çıkış gücü) veya fibrin dolgu macunu (Şekil 2) ile kesme yüzeyi mühür.</li>
</ol>4. mikro ölçüm
Not: Lazer Doppler spektroskopisi doku Doppler kayması eritrositler hareketi tarafından neden ölçme yoluyla kan akışını belirleyebilirsiniz. Lazer sinyal hareketli eritrositler numarası ile karşılıklı olarak ilişkilendirir. Lazer Doppler spektroskopisi klinik kullanımda (örneğin nakli tıp) ve oldu birden çok kez15doğrulanmış.
<ol><li>Lazer Doppler akış ölçer ve spektrofotometre geçiş yapar. Düz bir sonda kullanın.</li>
	<li>Temel ölçü birimlerinin akışı ve hız için al. Kaydetmek veya değerleri not edin.</li>
	<li>Koagülasyon altında 3.5 açıklandığı gibi gerçekleştirin.</li>
	<li>Koagülasyon siteleri ve ölçü akışı ve hız düz sonda bir yer. Yine, kaydetmek veya değerleri not edin.</li>
	<li>Coagulator aygıt için tüm güç ayarlarını yineleyin.</li>
</ol>5. sıcaklık ölçümü
<ol><li>(Termografik kamera, dizüstü bilgisayar ve kızılötesi termometre) sistemde geçin ve ölçümler gerçekleştirmeden önce en az 1 h için çalışmasına izin.</li>
	<li>Odak ayarlamak ve koagülasyon sitede termografik kamera çerçeve görüntüleyin. Kızılötesi dizileri 20 büyük bir sıcaklık çözünürlük ile 1024 x 768 piksel çözünürlük kayma ile tespit mK. Göz önünde bu Koagülasyon ve çevreleyen doku — ısı transferi tarafından etkilenen — görünüm ortasında yer alır. Not: Bu en iyi bir uzaysal çözünürlük için mümkün olduğunca çok sayıda piksel çerçeve içermelidir.</li>
	<li>Termografik kamera 2 dk süre ile karaciğer yüzeyinde plazma coagulator ile kayıt koagülasyon işlemi.</li>
	<li>Görüntü sıralarıyla termografi analiz yazılımı analiz: bölgeleri ilgi tanımlamak. Not: Yazılım zaman içinde karşılık gelen ortalama sıcaklığı sahası hesaplar.</li>
</ol>6. koagülasyon derinlik ölçümü
<ol><li>Sol mediyal karaciğer lob keskin makas ile hasat.</li>
	<li>Koagülasyon siteleri 1 cm kalınlık ile tüketim. İçin daha fazla alay 3 mm kalınlığında boyuna bölümler halinde kesin.</li>
	<li>Düzeltme doku örnekleri gecede tarafsız % 10 ile 4 ° C'de formalin arabelleğe alınmış. Parafin erime noktası üzerinden 2 ° C ısı ve dilimleri embed. İşlem gecede.</li>
	<li>Hematoksilen eozin boyama gerçekleştirmek.<ol>
<li>Deparaffinize ve doku daha sonra 2'de daldırma tarafından hidrat x ksilen, % 100 etanol (alkol), % 95 alkol, %70 alkol, deiyonize H2O 2 dk için.</li>
		<li>Meyer'ın hematoksilen çözüm 3 dk ile doku örneği leke.</li>
		<li>Şimdi 5 min için musluk suyundaki durulayın.</li>
		<li>Eozin çözüm 3 dk dokuyla leke.</li>
		<li>2 x EtOH %95 ve o zaman ksilen 3 dk her durulayın. Standart Montaj orta ile bağlayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sistem (düşsel bilgisayar yazılımı mikroskop bağlı fotoğraf makinesinde) geçin. 40 X büyütme ile tüm bölümleri görüntüleyin.</li>
	<li>Bir nesne mikrometre görüntüsünü 40 X büyütme oranında al. Hedefleri penceresinde yapılan düğmesine basın. Manuel Kalibrasyon seçin. 100 µm. mm, iletişim kutusunda Enter 0,1 mikrometre görüntü üzerinde bir çizgi çizin ve OK tuşuna basın.</li>
	<li>Uzunluğu görünümünde seçin > analiz denetimleri > ek açıklamaları ve ölçümler pencere. Koagülasyon kenar boşluğuna fare ile karaciğer yüzeyden ölçmek. Verme veya sonuç not edin. Aynı slaytta yer alan başka bir yere ölçüm yineleyin. Not: Koagülasyon derinliği kolayca normal hepatosit kordonlar ve nekroz küçülmüş sitoplazma, pyknotic çekirdeği ve kanama bölgeler bölge arasında keskin farkla normal karaciğer dokusundan farklı.</li>
	<li>Dışarı iki ölçüm ortalamasını hesaplamak.</li>
</ol>7. patlama basınç ölçüm
<ol><li>Anahtarı (otomatik pompalar, basınç ölçer) üstünde belgili tanımlık sistem. Karaciğer örnekleri adım 3.7 göre hazırlayın. Not: bir 3-yol-stopcock yolu ile bağlı iki paralel pompa kullanın. 1500 mm Hg maksimal baskısı ile tek bir pompa alınamıyor.</li>
	<li>Portal ven, ortak hepatik arter ve safra kanalını haptic Transpediküler makasla izole etmek. Portal ven overholt forseps ile kelepçe ve monofil dikiş 4-0 ile ligate. Ortak hepatik arter overholt forseps klamp ve monofil dikiş 4-0 ile ligate.</li>
	<li>Ch-16 kateter ortak safra kanalını yerleştirin ve 2-0 ipek sütür ile ligate. Kateter otomatik pompalar bağlanmak, 3'lü stopcock olan basınç ölçer (Şekil 3) yükleyin.</li>
	<li>Serum perfüzyon şırıngaya doldur.</li>
	<li>Otomatik pompalar 99 mL/h teslimat oranı ile başlayın.</li>
	<li>Karaciğer kesme yüzeyi ve basınç ölçer patlama basınç kaçağı ve kayıt için izleyin. Not: sızıntı daha kolay tanınması için patent mavi serum (2 mL patent mavi + 18 mL serum fizyolojik) eklenebilir. Patlama basınç basınç ölçer üzerinde basınç kaybı saat fark tarafından gözlemlemek kolaydır.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Link, W. J., Incropera, F. P., Glover, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+plasma+scalpel:+comparison+of+tissue+damage+and+wound+healing+with+electrosurgical+and+steel+scalpels.">A plasma scalpel: comparison of tissue damage and wound healing with electrosurgical and steel scalpels.</a> ArchSurg. 111, 392-397 (1976).</li><li>Kwon, A. H., Inui, H., Kamiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+laparoscopic+haemostasis+using+an+argon+beam+coagulator+for+blunt+traumatic+splenic+injury.">Successful laparoscopic haemostasis using an argon beam coagulator for blunt traumatic splenic injury.</a> EurJSurg. 167, 316-318 (2001).</li><li>Frilling, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effectiveness+of+a+new+carrier-bound+fibrin+sealant+versus+argon+beamer+as+haemostatic+agent+during+liver+resection:+a+randomised+prospective+trial.">Effectiveness of a new carrier-bound fibrin sealant versus argon beamer as haemostatic agent during liver resection: a randomised prospective trial.</a> Langenbecks ArchSurg. 390, 114-120 (2005).</li><li>Raiser, J., Zenker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Argon+plasma+coagulation+for+open+surgical+and+endoscopic+applications:+state+of+the+art.">Argon plasma coagulation for open surgical and endoscopic applications: state of the art.</a> J Phys Appl Phys. 39 (16), 3520-3523 (2006).</li><li>Farin, G., Grund, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technology+of+argon+plasma+coagulation+with+particular+regard+to+endoscopic+applications.">Technology of argon plasma coagulation with particular regard to endoscopic applications.</a> EndoscSurgAllied Technol. 2, 71-77 (1994).</li><li>Grund, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Argon+plasma+coagulation+(APC):+ballyhoo+or+breakthrough?.">Argon plasma coagulation (APC): ballyhoo or breakthrough?.</a> Endoscopy. 29, 196-198 (1997).</li><li>Glowka, T. R., Standop, J., Paschenda, P., Czaplik, M., Kalff, J. C., Tolba, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Argon+and+helium+plasma+coagulation+of+porcine+liver+tissue.">Argon and helium plasma coagulation of porcine liver tissue.</a> J Int Med Res. , (2017).</li><li>Dowling, R. D., Ochoa, J., Yousem, S. A., Peitzman, A., Udekwu, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Argon+beam+coagulation+is+superior+to+conventional+techniques+in+repair+of+experimental+splenic+injury.">Argon beam coagulation is superior to conventional techniques in repair of experimental splenic injury.</a> JTrauma. 31, 717-720 (1991).</li><li>Go, P. M., Goodman, G. R., Bruhn, E. W., Hunter, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+argon+beam+coagulator+provides+rapid+hemostasis+of+experimental+hepatic+and+splenic+hemorrhage+in+anticoagulated+dogs.">The argon beam coagulator provides rapid hemostasis of experimental hepatic and splenic hemorrhage in anticoagulated dogs.</a> JTrauma. 31, 1294-1300 (1991).</li><li>Brand, C. U., Blum, A., Schlegel, A., Farin, G., Garbe, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+argon+plasma+coagulation+in+skin+surgery.">Application of argon plasma coagulation in skin surgery.</a> Dermatology. 197, 152-157 (1998).</li><li>Carus, T., Rackebrandt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collateral+tissue+damage+by+several+types+of+coagulation+(monopolar,+bipolar,+cold+plasma+and+ultrasonic)+in+a+minimally+invasive,+perfused+liver+model.">Collateral tissue damage by several types of coagulation (monopolar, bipolar, cold plasma and ultrasonic) in a minimally invasive, perfused liver model.</a> ISRNSurg. , 518924 (2011).</li><li>Bludau, M., Vallbohmer, D., Gutschow, C., Holscher, A. H., Schroder, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurement+of+gastric+mucosal+microcirculation+using+a+combined+laser+Doppler+flowmeter+and+spectrophotometer.">Quantitative measurement of gastric mucosal microcirculation using a combined laser Doppler flowmeter and spectrophotometer.</a> DisEsophagus. , (2008).</li><li>Beckert, S., Witte, M. B., Konigsrainer, A., Coerper, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+the+Micro-Lightguide+O2C+for+the+quantification+of+tissue+ischemia+in+diabetic+foot+ulcers.">The impact of the Micro-Lightguide O2C for the quantification of tissue ischemia in diabetic foot ulcers.</a> Diabetes Care. 27, 2863-2867 (2004).</li><li>Erdogan, D., de Graaf, W., van Gulik, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adhesive+strength+of+fibrinogen-coated+collagen+patch+or+liquid+fibrin+sealant+in+an+experimental+liver+resection+model+in+pigs.">Adhesive strength of fibrinogen-coated collagen patch or liquid fibrin sealant in an experimental liver resection model in pigs.</a> Eur Surg Res Eur Chir Forsch Rech Chir Eur. 41 (3), 298-302 (2008).</li><li>Knobloch, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcirculation+of+the+sternum+following+harvesting+of+the+left+internal+mammary+artery.">Microcirculation of the sternum following harvesting of the left internal mammary artery.</a> ThoracCardiovascSurg. 51, 255-259 (2003).</li><li>Kanzler, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendation+for+severity+assessment+following+liver+resection+and+liver+transplantation+in+rats:+Part+I.">Recommendation for severity assessment following liver resection and liver transplantation in rats: Part I.</a> Lab Anim. 50 (6), 459-467 (2016).</li><li>Pehb&#246;ck, D., Dietrich, H., Klima, G., Paal, P., Lindner, K. H., Wenzel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+in+swine+optimizing+a+laboratory+model+to+optimize+translational+research.">Anesthesia in swine optimizing a laboratory model to optimize translational research.</a> Anaesthesist. 64 (1), 65-70 (2015).</li><li>Nykonenko, A., V&#225;vra, P., Zon&#269;a, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomic+Peculiarities+of+Pig+and+Human+Liver.">Anatomic Peculiarities of Pig and Human Liver.</a> Exp Clin Transplant Off J Middle East Soc Organ Transplant. 15 (1), 21-26 (2017).</li><li>Fechner, G., von Pezold, J., Luzar, O., Hauser, S., Tolba, R. H., M&#252;ller, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+spectrometry+(O2C+device)+of+intraoperative+microperfusion+predicts+organ+function+after+kidney+transplantation:+a+pilot+study.">Modified spectrometry (O2C device) of intraoperative microperfusion predicts organ function after kidney transplantation: a pilot study.</a> Transplant Proc. 41 (9), 3575-3579 (2009).</li><li>Patterson, E. J., Scudamore, C. H., Owen, D. A., Nagy, A. G., Buczkowski, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiofrequency+ablation+of+porcine+liver+in+vivo:+effects+of+blood+flow+and+treatment+time+on+lesion+size.">Radiofrequency ablation of porcine liver in vivo: effects of blood flow and treatment time on lesion size.</a> AnnSurg. 227, 559-565 (1998).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Kemirgen modelleri karaciğer ameliyatı için uzun süre16için kurulur. Yine de, büyük hayvan modeller belirli avantajlar sunuyor: mikrocerrahi hiçbir ekipman gibi insanlar için standart operatif ekipman uygulanabilir, cerrahi teknik klinik kullanım için karşılaştırılabilir ve standart klinik değerlendirme yöntemleri-ebilmek var olmak gerekli deneyler için transfer. Örneğin, standart klinik kan testleri için özel laboratuvar test yöntemleri (Şekil 10) gerek kalmadan yapılabilir.
Onların fizyolojisi çok insan17benzeyen domuz kardiyorespiratuvar araştırma için uygun Laboratuvar hayvanları şunlardır. Boyutu, gelen bir segmental yapısı ve histoloji benzerlik nedeniyle domuzlar da standart Laboratuvar hayvanlarının deneysel karaciğer ameliyatı18için vardır. Plazma koagülasyon domuz modelinde nedeniyle faydaları (benzerlik insan fizyolojisi ve standart klinik donanım değerlendirilmesi)7değerlendirilmiştir. Ameliyat tekniklerinin aksine anesthesiologic yönetimi kolayca yaygınlaştırılması olamaz. Özellikle hava yolu yönetimi zor17olabilir. Glottis kesici mesafe çok uzun ve anatomi orotracheal entübasyon için deneyimsiz araştırmacı zorlaştırır insanlar farklıdır. Buna ek olarak, kurtarma stratejileri (örneğin trakeostomi) mevcut olması gerekir maskesi havalandırma domuzlarda, neredeyse mümkün değildir.
Plazma koagülasyon benzer sonuçlar elde etmek için araştırmacı kesinlikle sonda mesafe ve pıhtılaşma süresi standartlaştırmak için dikkat almalısınız. O sonda mesafe Bakımı nispeten kolay olmakla birlikte, bir kronometre 5 saymak için kullanılabilir koagülasyon s. Plazma koagülasyon karaciğer yüzeyinde açıklanan tekniği plazma koagülasyon karaciğer vivo içinde7temel etkileri üzerinde temel araştırma kullanılmıştır. Domuz anestezi, ameliyat ve plazma koagülasyon yukarıda açıklanan teknikleri de büyük hepatik rezeksiyon incelemek ve bundan sonra sızdırmazlık kesme yüzeyi farklı teknikler karşılaştırmak için kullanılabilir.
Lazer Doppler akış ölçer ve spektrofotometre mikro ölçümler için bir standart klinik aracı19 ve dolaşım doğrudan organ parankimi üzerinde değerlendirilmesi için son derece yararlı olduğu ortaya çıktı. Kan akımı ve kan akım hızı değerleri olmayan invasivity avantajı ile hesaplanır. Doppler ölçümleri koagülasyon için objektif bir parametre ile ilişkili olabilir bu yüzden mikro parametreler yalnızca dolaylı koagülasyon etkisinin önlemlerdir. Bizim deneylerde histolojik koagülasyon derinlik korelasyon için kullanılır.
Bir eksiklik sıcaklık ölçüm plazma ışınını sıcaklığını her iki aygıtın üst eşiğin olduğundan koagülasyon sırasında plazma ışınını sıcaklığını ölçmek için yetersizlik olduğunu. Kızılötesi termometre termografik kamera Kur daha karmaşıktır, ancak daha hassas veri sağlar, ancak uygulamak kolaydır. Temel sıcaklık olmadan koagülasyon (domuz vücut sıcaklığı ~38.5 ° C17) beklenenden daha düşük vücut ısısı laparotomi yıkıcı etkilerini gösteren. Ölçülen sıcaklık sırasında ve sonrasında koagülasyon, karaciğer mükemmel perfüzyon gösteren artırmaz. Bu termal çalmak etkisi karaciğer radyo frekansı ablasyon20bilinir. Patlama basınç yönetim yapılan safra kanalını sistem yerine hepatik gemiler için basit bir nedeni: (fibrin dolgu macunları için olduğu gibi) daha büyük gemiler imzalamaya plazma coagulators için imkansız. Daha büyük gemiler rezeksiyon sırasında bakmaksızın iken her iki araçlarının ikincil hemostaz rezeke organ kesme yüzeyi kapatın. Patlama basınç deneylerimiz biraz bildirilen tekniği14' e göre modifiye edilmiştir. Kuruluş nedenlerle explanted organ patlama basıncı ölçülür. Bu kurallar kan basıncı dışarı etkileri ile ilgili ve çok daha derin kullanım veya In-vivo organları uygulamak daha kolaydır. Deneyler bu nedenle, farklılık gösterebilir basınç değerleri periosteum /In-vivo ölçümleri nedeniyle değişmiş karaciğer (genellikle yüksek basınç explanted organ) yapısı. Yukarıda açıklanan veri bloğu baskı tekniği de gerçekleştirilen In-vivoolabilir.

Argon plazma koagülasyon (APC) için üç yıl1,2' den daha fazla karın cerrahisinde bir yaygın olarak kullanılan alettir. Karaciğer mühürleyerek büyük hepatectomy daha sonra kanama3önlemek için yüzey kestikten sonra sekonder hemostaz başarı için standart bir tekniktir. Plazma koagülasyon iyonize gaz bir yay ile elektrik enerjisi teslim Radyofrekans elektrokoter özel bir şeklidir. Monopolar Elektrotermik hemostaz sağlayarak, bu aygıtlar teknik için doku4sopa elektrot önleme avantajına sahiptir. İyonize gaz ışın en düşük elektriksel direnç alanına otomatik olarak yönlendirilir ve direnç henüz kurumuş diğer bölgelerine kuruma nedeniyle doğduğunda uzakta etkinleşir. Bu bir üniforma sınırlı derinlik koagülasyon5,6üretir. Koagülasyon etkisi etkileyen faktörlerdir belgili tanımlık harekete geçirmek zaman, koagülasyon aygıt ve doku sonda mesafe güç ayarı. Helyum plazma koagülasyon7için kullanılabilir başka bir taşıyıcı gaz var. Histolojik ve fonksiyonel bulgular3,8,9, deneysel çalışmalar üzerine vitro araştırmalar10 odaklanmış iken yerine üzerine konsantre klinik sonuçlar son klinik çalışmalar veya izole organ periosteum11üzerinde deneyler.
Büyük bir hayvan modelinde standart insan domuzlar üzerinde kullanýlýyor klinik uygulama yakın plazma koagülasyon etkileri çalışmanın temel Protokolü sağlar: mikro lazer Doppler Flowmetre tarafından değerlendirildi noninvazif ve spektrofotometre, bu gösterge12,13standart bir klinik araçtır. Sıcaklık değişiklikleri koagülasyon sırasında bir kızılötesi termometre ve termografik kamera ile izlenir. Koagülasyon derinliği histolojik hematoksilen/eozin doku örnekleri hasat sonrası bölümleri lekeli ölçülür. Sekonder hemostaz için diğer araçlar ile karşılaştırma için patlama basınç deneyler yapılmaktadır. Yukarıda açıklanan teknikleri14aksine, Bunlar kan basıncı dışlamak için explanted organları yapılır ile ilgili etkileri. Yerel etkileri plazma koagülasyon açıklanan soruşturma ek olarak, standart kan testleri de domuz modelinde üstlenilen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="824">
	<tbody>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Xylazine 20 mg/mL</td>
			<td style="width:184px;">Vetoquinol GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Xylapan</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Ketamine 100 mg/mL</td>
			<td style="width:184px;">Ceva GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Ceva Ketamine Injection</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Atropine 100 mg / 10 mL</td>
			<td style="width:184px;">Dr. Franz K&#246;hler Chemie GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Atropinsulfat K&#246;hler 100mg Amp.</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;">Propofol</td>
			<td style="width:184px;">Fresenius Kabi GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Propofol 1% MCT Fresenius</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;">Fentanyl</td>
			<td style="width:184px;">KG Rotexmedica GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Fentanyl 0,5mg Rotexmedica</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:184px;">Abbot GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Forene 100% (V/V) 250 mL</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;">Ringer&#39;s lactate solution</td>
			<td style="width:184px;">Baxter Deutschland GmbH</td>
			<td style="width:192px;"></td>
			<td style="width:232px;">sodium 131mmol/l, potassium 5 mmol/l, calcium 2 mmol/l, cloride 111 mmol/l, lactate 29 mmol/l</td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Surgical disinfactant</td>
			<td style="width:184px;">Sch&#252;lke &#38; Mayr GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Kodan Tinktur forte gef&#228;rbt 1l 104804</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Motorized microscope</td>
			<td style="width:184px;">Nikon Instruments Europe</td>
			<td style="width:192px;">Eclipse TE2000-E</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Microscope camera</td>
			<td style="width:184px;">Nikon Instruments Europe</td>
			<td style="width:192px;">Digitalsight DS-Qi1Mc</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Imaging software</td>
			<td style="width:184px;">Nikon Instruments Europe</td>
			<td style="width:192px;">NIS elements Vers. 4.40</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Plasma coagulator</td>
			<td style="width:184px;">S&#246;ring GmbH</td>
			<td style="width:192px;">CPC-1000</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Argon gas</td>
			<td style="width:184px;">Linde AG</td>
			<td style="width:192px;">Argon 4.8&#160;</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Helium gas</td>
			<td style="width:184px;">Linde AG</td>
			<td style="width:192px;">Helium 4.8</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">O2C</td>
			<td style="width:184px;">LEA Medizintechnik GmbH</td>
			<td style="width:192px;">O2C Version 1212</td>
			<td style="width:232px;">with LF-2 or LF-3 probe</td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;">Infrared thermometer</td>
			<td style="width:184px;">Voltcraft</td>
			<td>VOLTCRAFT IR 260-8S</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Thermographic camera</td>
			<td>InfraTec GmbH</td>
			<td>VarioCAM HD head 820</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Thermographic analysis sofrtware</td>
			<td>InfraTec GmbH</td>
			<td style="width:192px;">IRBIS 3</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Mayer&#39;s Hematoxylin solution</td>
			<td></td>
			<td style="width:192px;">Merck 1.09249</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Eosin solution</td>
			<td style="width:184px;">VWR International GmbH</td>
			<td style="width:192px;">Merck 1.09844</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Rollerpump Masterflex L/S easy Load</td>
			<td style="width:184px;">Cole-Parmer Instrument Company</td>
			<td style="width:192px;">model 7518-10</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Perfusorpump</td>
			<td style="width:184px;">B. Braun Melsungen AG</td>
			<td style="width:192px;">Perfusor secura FT</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Digital pressure meter</td>
			<td style="width:184px;">Greisinger electronic</td>
			<td style="width:192px;">GMH 3161</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Perfusorsyringe, 50 mL</td>
			<td style="width:184px;">B. Braun Melsungen AG</td>
			<td style="width:192px;">REF 8728810 F</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Perfusor line, Type IV Standard, PVC Luer lock</td>
			<td style="width:184px;">B. Braun Melsungen AG</td>
			<td style="width:192px;">REF 8722960</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">3-Way stopcock, Dicofix C35C</td>
			<td style="width:184px;">B. Braun Melsungen AG</td>
			<td style="width:192px;">REF 16494 C</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Silk 2-0. 3 metric</td>
			<td style="width:184px;">Resorba</td>
			<td style="width:192px;">REF H5F</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">Vicryl 4-0 Sutupak</td>
			<td style="width:184px;">Ethicon</td>
			<td>V1224H</td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:47px;width:216px;">NaCl 0.9 %</td>
			<td style="width:184px;">B. Braun Melsungen AG</td>
			<td style="width:192px;"></td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of plasma coagulation on liver tissue in a large animal model in vivo

Plazma koagülasyon elektrokoter biçimi olarak yıllardır karaciğer ameliyatta kanama daha sonraki bir aşamada önlemek için büyük hepatectomy sonra geniş karaciğer kesme yüzeyi mühürlemek için kullanılır. Plazma koagülasyon karaciğer dokusu üzerinde tam etkileri sadece kötü incelenir. Bizim domuz modelinde, koagülasyon etkileri yakın klinik uygulama incelenebilir. Bir kombine lazer Doppler akış ölçer ve spektrofotometre belgeleri mikro koagülasyon 8 mm doku derinlikte sırasında noninvazif,-mek şartıyla hemostaz öznel klinik izlenim ötesinde ölçülebilir vukuf değiştirir. Koagülasyon sitesi sıcaklığında bir kızılötesi termometre rahip ve post Koagülasyon ve termografik kamera ile koagülasyon sırasında değerlendirilir, gaz ışın sıcaklık ölçüm aygıtları üst eşik nedeniyle mümkün değildir. Koagülasyon derinliği mikroskobik hematoksilen eozin/bölümler kalibrasyon sonra lekeli bir nesne mikrometre ile ölçülür ve güç ayarı-koagülasyon derinlik ilişkisi hakkında tam bir bilgi verir. Bir plazma coagulator büyük kan damarları imzalamaya mümkün değil gibi sızdırmazlık etkisi safra kanalları üzerinde incelenir. Patlama basınç deneylerde yürütülen dışarı explanted organlarda kan basıncı dışarı kural etkileri ile ilgili.

Mikro: Hemostazın plazma koagülasyon takip için tanı cihazı kullanan mikro değişikliklerden göstermiş olabilir. Kılcal kan akışı (rasgele birimleri (AU) görüntülenir) azalır 142.7 ± 76,08 bir temel değerinden AU 57.78 ± 49.57 48,5 ± 7.26 25 W aygıt çıkış gücü AU AU 50 W ve 5,04 ± 1,31 AU 100 W (Şekil 4).
Sıcaklığı: Koagülasyon siteleri sıcaklığında termografik kamera (Şekil 5) ile ölçüldü. Sadece önemsiz sıcaklık değişiklikleri bir kızılötesi termometre ile belgelenmiştir. Bir temel sıcaklık 32.42 ± gösterdi 2,27 ° C. 25 W ile koagülasyon sonra sıcaklık oldu 33.33 ± 1.81 ° C. Koagülasyon 50 W lazer ile vermiştir 31.17 ± sıcaklığını 2.13 ° C. 100 W maksimum güç ayarıyla birlikte koagülasyon sonra sıcaklık çoğunlukla değişmeden 30.17 ± 3.19 ° C (Şekil 6).
Koagülasyon derinliği: Plazma koagülasyon nekrozu yüzeysel bir bölge ile yapabilirsiniz oluşturur normal karaciğer parankimi (Şekil 7) kolayca ayırt edici olması. Nekroz derinliği birden çok bölüm ölçülebilir ve plazma coagulator yükselen güç seviyeleri ile değil tamamen doğrusal bir artış gösterir. Helyum plazma koagülasyon, koagülasyon derinliğidir 230.2 ± 57.83µm 25W adlı, 314.6 ± 87.39 µm 50 W, 75W adlı 292.2 ± 45.65 µm ve 412.9 ± 160.9 µm, 100 W aygıt çıkış gücü (Şekil 8). Cihazın çıkış gücü serbestçe seçilebilir ve koagülasyon derinlik7ile pozitif korelasyon açmadı.
Patlama basıncı: Patlama basınç ölçümleri explanted sol mediyal karaciğer lob gösterir kesilmiş yüzeyinde hiçbir fark helyum (1254±578.7 mmHg) veya argon (1003 ± 554.4 mmHg) plazma koagülasyon (Şekil 9) sonra yürütülen. Veri bloğu baskılar fibrin dolgu macunları7 ' ye kıyasla daha düşük ama klinik kullanım için uygun gibi görünüyor.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig1.jpg"> Şekil 1: argon plazma koagülasyon sonra sol mediyal karaciğer LOB. Sol mediyal karaciğer lob sekiz koagülasyon sitelerinde (üst soldan sağa yukarıdan aşağıya doğru: 10 W, W, W, W, W, 50 W, 75 W, 100 W 30 25 20 15). Kalıp ile standart koagülasyon ölçüde. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig2.jpg"> Şekil 2: patlama basınç ölçümleri için karaciğer nakli hazırlanması. Karaciğer lob yarısı rezeke ve karaciğer kesme yüzeyi fibrin dolgu macunu ile kilitlendi. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig3.jpg"> Şekil 3: patlama basınç ölçümleri için donatım. Otomatik pompa (şırınga serum dolu) ve basınç ölçer ile 3-yol-stopcock bağlı. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig4.jpg"> Şekil 4: mikro değişiklikleri. Önce değişiklikleri kan akışı (rasgele birimi olarak görüntülenir) ve 25 W argon plazma koagülasyon sonra 100 W aygıt ve 50 W çıkıș gücü (n = 3-6). * P= < 0,05, 1 yönlü ANOVA. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig5.jpg"> Şekil 5: koagülasyon siteleri sıcaklıkta ölçülen ile termografik kamera. Örnek resim helyum plazma koagülasyon 40W aygıt çıkış gücü ile sırasında termografik kamera ile. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig6.jpg"> Şekil 6: koagülasyon siteleri sıcaklıkta ölçülen bir kızılötesi termometre ile. Koagülasyon siteleri sıcaklıkta ölçülen bir kızılötesi termometre ile önce ve sonra argon plazma koagülasyon (n = 3-6). <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig7.jpg"> Şekil 7: yüzeysel nekroz helyum plazma koagülasyon takip bölgenin. Hematoksilen eozin karaciğer Bölüm 40 X büyütme, lekeli. Nekroz bölgenin bir kayıp hepatosit kordon mimarisinin hücreleri küçülmüş sitoplazma ve kanama bölgeleri gösterir. Oklar, koagülasyon iki farklı yerlerde derinliğini gösterir. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig8.jpg"> Şekil 8: helyum plazma koagülasyon takip koagülasyon derinlik. Farklı güç seviyeleri derinlikte koagülasyon (25W, 50W, 75W ve 100W, n = 6). * P= < 0,05, *** P= < 0.001, 1 yönlü ANOVA. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig8large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig9.jpg"> Şekil 9: patlama basıncı. Basınç ölçümleri argon veya helyum plazma koagülasyon takip kesim karaciğer yüzeyinde patlıyor. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig9large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57355/57355fig10.jpg"> Şekil 10: kan testi sonuçları. Klinik Biyokimya ve kan gazı sonuçları daha önce gösterilen ve aşağıdaki argon plazma koagülasyon parametreleri seçili. Koagülasyon sitesinde yerel değişiklikler için sınırlı plazma koagülasyon etkilerini gösteren herhangi bir önemli değişiklik oluşur. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/57355/57355fig10large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo at JoVE.com

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Burada deneysel olarak karaciğer dokusu içinde vivoplazma koagülasyon değerlendirmek için bir protokol mevcut. Bir domuz modelinde mikro lazer Doppler tarafından incelenir, koagülasyon derinlik histolojik olarak ölçülür, koagülasyon sitesini kızılötesi termometre ve termografik kamera ve kanal etkisi sızdırmazlık sıcaklıkta patlama basıncı ile belgelenen deneyler.

Plazma koagülasyon büyük hayvan modeli Vivo içinde karaciğer dokusu üzerinde değerlendirilmesi

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

assessment-plasma-coagulation-on-liver-tissue-large-animal-model

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

8.8K Görüntüleme.  University of Bonn. Burada deneysel olarak karaciğer dokusu içinde vivoplazma koagülasyon değerlendirmek için bir protokol mevcut. Bir domuz modelinde mikro lazer Doppler tarafından incelenir, koagülasyon derinlik histolojik olarak ölçülür, koagülasyon sitesini kızılötesi termometre ve termografik kamera ve kanal etkisi sızdırmazlık sıcaklıkta patlama basıncı ile belgelenen deneyler.

Video: Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

An Isolated Working Heart System for Large Animal Models

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart model, have been invaluable tools for studying cardiovascular function and disease1-15. Although the Langendorff heart preparation can be used for any mammalian heart, most studies involving this apparatus use small animal models (e.g., mouse, rat, and rabbit) due to the increased complexity of systems for larger mammals1,3,11. One major difficulty is ensuring a constant coronary perfusion pressure over a range of different heart sizes &#8211; a key component of any experiment utilizing this device1,11. By replacing the classic hydrostatic afterload column with a centrifugal pump, the Langendorff working heart apparatus described below allows for easy adjustment and tight regulation of perfusion pressures, meaning the same set-up can be used for various species or heart sizes. Furthermore, this configuration can also seamlessly switch between constant pressure or constant flow during reperfusion, depending on the user&#8217;s preferences. The open nature of this setup, despite making temperature regulation more difficult than other designs, allows for easy collection of effluent and ventricular pressure-volume data.

Most studies involving the Langendorff apparatus use small animal models due to the increased complexity of systems for larger mammals. We describe a Langendorff system for large animal models that allows for use across a range of species, including humans, and relatively easy data acquisition.

Büyük Hayvan Modelleri için bir İzole Çalışma Kalp Sistemi

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart ...

Tıp

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

İnsan Tümör ksenogratflarının gelen Fare Hücrelerinin tükenmesi Anlamlı Hedef Hücre Alt Analizi geliştirir

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Assessment of Child Anthropometry in a Large Epidemiologic Study

A high proportion of children have overweight and obesity in the United States and other countries. Accurate assessment of anthropometry is essential to understand health effects of child growth and adiposity. Gold standard methods of measuring adiposity, such as dual X-ray absorptiometry (DXA), may not be feasible in large field studies. Research staff can, however, complete anthropometric measurements, such as body circumferences and skinfold measurements, using inexpensive portable equipment. In this protocol we detail how to obtain manual anthropometric measurements from children, including standing and sitting height, weight, waist circumference, hip circumference, mid-upper arm circumference, triceps skinfold thickness, and subscapular skinfold thickness, and procedures to assess the quality of these measurements. To demonstrate accuracy of these measurements, among 1,110 school-aged children in the pre-birth cohort Project Viva we calculated Spearman correlation coefficients comparing manual anthropometric measurements with a gold standard measure of body fat, DXA fat mass1. To address reliability, we evaluate intra-rater technical error of measurement at a quality control session conducted on adult female volunteers.

In epidemiologic studies of children, well-trained research staff can accurately and precisely assess weight, height, sitting height, skinfold thicknesses, and body circumferences.

Büyük Bir Epidemiyolojik Çalışması Çocuk Antropometri Değerlendirilmesi

A high proportion of children have overweight and obesity in the United States and other countries. Accurate assessment of anthropometry is essential to ...

Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic options have significant risk of failure and substantial morbidity.
Use of bone vascularized composite allotransplantation (VCA) would offer both a close match of resected bone size and shape and the healing and remodeling potential of living bone. At present, life-long drug immunosuppression (IS) is required. Organ toxicity, opportunistic infection and neoplasm risks are of concern to treat such non-lethal indications.
We have previously demonstrated that bone and joint VCA viability may be maintained in rats and rabbits without the need of long-term-immunosuppression by implantation of recipient derived vessels within the VCA. It generates an autogenous, neoangiogenic circulation with measurable flow and active bone remodeling, requiring only 2 weeks of IS. As small animals differ from man substantially in anatomy, bone physiology and immunology, we have developed a porcine bone VCA model to evaluate this technique before clinical application is undertaken. Miniature swine are currently widely used for allotransplantation research, given their immunologic, anatomic, physiologic and size similarities to man. Here, we describe a new porcine orthotopic tibial bone VCA model to test the role of autogenous surgical angiogenesis to maintain VCA viability.
The model reconstructs segmental tibial bone defects using size- and shape-matched allogeneic tibial bone segments, transplanted across a major swine leukocyte antigen (SLA) mismatch in Yucatan miniature swine. Nutrient vessel repair and implantation of recipient derived autogenous vessels into the medullary canal of allogeneic tibial bone segments is performed in combination with simultaneous short-term IS. This permits a neoangiogenic autogenous circulation to develop from the implanted tissue, maintaining flow through the allogeneic nutrient vessels for a short time. Once established, the new autogenous circulation maintains bone viability following cessation of drug therapy and subsequent nutrient vessel thrombosis.

Currently any kind of vascularized composite allotransplantation depends on long-term-immunosuppression, difficult to support for non-life-critical indications. We present a new porcine tibial VCA model that can be used to study bone VCA and demonstrate the use of surgical angiogenesis to maintain bone viability without the need of long-term immune-modulation.

Domuz Tibial Allotransplantation cerrahi angiogenez: bileşik Allotransplantation Model yeni bir büyük hayvan kemik skarların

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic ...

Invasive Hemodynamic Monitoring of Aortic and Pulmonary Artery Hemodynamics in a Large Animal Model of ARDS

One of the leading causes of morbidity and mortality in patients with heart failure is right ventricular (RV) dysfunction, especially if it is due to pulmonary hypertension. For a better understanding and treatment of this disease, precise hemodynamic monitoring of left and right ventricular parameters is important. For this reason, it is essential to establish experimental pig models of cardiac hemodynamics and measurements for research purpose. 
This article shows the induction of ARDS by using oleic acid (OA) and consequent right ventricular dysfunction, as well as the instrumentation of the pigs and the data acquisition process that is needed to assess hemodynamic parameters. To achieve right ventricular dysfunction, we used oleic acid (OA) to cause ARDS and accompanied this with pulmonary artery hypertension (PAH). With this model of PAH and consecutive right ventricular dysfunction, many hemodynamic parameters can be measured, and right ventricular volume load can be detected. 
All vital parameters, including respiratory rate (RR), heart rate (HR) and body temperature were recorded throughout the whole experiment. Hemodynamic parameters including femoral artery pressure (FAP), aortic pressure (AP), right ventricular pressure (peak systolic, end systolic and end diastolic right ventricular pressure), central venous pressure (CVP), pulmonary artery pressure (PAP) and left arterial pressure (LAP) were measured as well as perfusion parameters including ascending aortic flow (AAF) and pulmonary artery flow (PAF). Hemodynamic measurements were performed using transcardiopulmonary thermodilution to provide cardiac output (CO). Furthermore, the PiCCO2 system (Pulse Contour Cardiac Output System 2) was used to receive parameters such as stroke volume variance (SVV), pulse pressure variance (PPV), as well as extravascular lung water (EVLW) and global end-diastolic volume (GEDV). Our monitoring procedure is suitable for detecting right ventricular dysfunction and monitoring hemodynamic findings before and after volume administration.

We present a protocol of creating right ventricular dysfunction in a pig model by inducing ARDS. We demonstrate invasive monitoring of left and right ventricular cardiac output using flow probes around the aorta and the pulmonary artery, as well as blood pressure measurements in the aorta and pulmonary artery.

Aort ve pulmoner arter hemodinami ARDS, büyük bir hayvan modeli invaziv hemodinamik izleme

One of the leading causes of morbidity and mortality in patients with heart failure is right ventricular (RV) dysfunction, especially if it is due to ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been introduced as a method to evaluate and modify organ function. NEVLP has many advantages in comparison to hypothermic and subnormothermic perfusion including reduced preservation injury, restoration of normal organ function under physiologic conditions, assessment of organ performance, and as a platform for organ repair, remodeling, and modification. Both murine and porcine NEVLP models have been described. We demonstrate a rat model of NEVLP and use this model to show one of its important applications &#8212; the use of a therapeutic molecule added to liver perfusate. Catalase is an endogenous reactive oxygen species (ROS) scavenger and has been demonstrated to decrease ischemia-reperfusion in the eye, brain, and lung. Pegylation has been shown to target catalase to the endothelium. Here, we added pegylated-catalase (PEG-CAT) to the base perfusate and demonstrated its ability to mitigate liver preservation injury. An advantage of our rodent NEVLP model is that it is inexpensive in comparison to larger animal models. A limitation of this study is that it does not currently include post-perfusion liver transplantation. Therefore, prediction of the function of the organ post-transplantation cannot be made with certainty. However, the rat liver transplant model is well established and certainly could be used in conjunction with this model. In conclusion, we have demonstrated an inexpensive, simple, easily replicable NEVLP model using rats. Applications of this model can include testing novel perfusates and perfusate additives, testing software designed for organ evaluation, and experiments designed to repair organs.

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant liver donor shortage, and criteria for liver donors have been expanded. Normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been developed to evaluate and modify organ function. This study demonstrates a rat model of NEVLP and tests the ability of pegylated-catalase, to mitigate liver preservation injury.

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

Ferrik klorid kaynaklı köpek karotid arter trombozu: Bir büyük hayvan modeli vasküler yaralanma

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

In Vitro Model of Coronary Angiogenesis

Here, we describe an in vitro culture assay to study coronary angiogenesis. Coronary vessels feed the heart muscle and are of clinical importance. Defects in these vessels represent severe health risks such as in atherosclerosis, which can lead to myocardial infarctions and heart failures in patients. Consequently, coronary artery disease is one of the leading causes of death worldwide. Despite its clinical importance, relatively little progress has been made on how to regenerate damaged coronary arteries. Nevertheless, recent progress has been made in understanding the cellular origin and differentiation pathways of coronary vessel development. The advent of tools and technologies that allow researchers to fluorescently label progenitor cells, follow their fate, and visualize progenies in vivo have been instrumental in understanding coronary vessel development. In vivo studies are valuable, but have limitations in terms of speed, accessibility, and flexibility in experimental design. Alternatively, accurate in vitro models of coronary angiogenesis can circumvent these limitations and allow researchers to interrogate important biological questions with speed and flexibility. The lack of appropriate in vitro model systems may have hindered the progress in understanding the cellular and molecular mechanisms of coronary vessel growth. Here, we describe an in vitro culture system to grow coronary vessels from the sinus venosus (SV) and endocardium (Endo), the two progenitor tissues from which many of the coronary vessels arise. We also confirmed that the cultures accurately recapitulate some of the known in vivo mechanisms. For instance, we show that the angiogenic sprouts in culture from SV downregulate COUP-TFII expression similar to what is observed in vivo. In addition, we show that VEGF-A, a well-known angiogenic factor in vivo, robustly stimulates angiogenesis from both the SV and Endo cultures. Collectively, we have devised an accurate in vitro culture model to study coronary angiogenesis.

In vitro models of coronary angiogenesis can be utilized for the discovery of the cellular and molecular mechanisms of coronary angiogenesis. In vitro explant cultures of sinus venosus and endocardium tissues show robust growth in response to VEGF-A and display a similar pattern of COUP-TFII expression as in vivo.

Koroner Anjiyogenezin In Vitro Modeli

Here, we describe an in vitro culture assay to study coronary angiogenesis. Coronary vessels feed the heart muscle and are of clinical importance. Defects ...

Using a Chemical Biopsy for Graft Quality Assessment

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated with an increased survival rate and greater quality of patient&#8217;s life when compared to conventional dialysis. Regrettably, transplantology suffers from a lack of reliable methods for organ quality assessment. Standard diagnostic techniques are limited to macroscopic appearance inspection or invasive tissue biopsy, which do not provide comprehensive information about the graft. The proposed protocol aims to introduce solid phase microextraction (SPME) as an ideal analytical method for comprehensive metabolomics and lipidomic analysis of all low molecular compounds present in kidneys allocated for transplantation. The small size of the SPME probe enables performance of a chemical biopsy, which enables extraction of metabolites directly from the organ without any tissue collection. The minimum invasiveness of the method permits execution of multiple analyses over time: directly after organ harvesting, during its preservation, and immediately after revascularization at the recipient&#8217;s body. It is hypothesized that the combination of this novel sampling method with a high-resolution mass spectrometer will allow for discrimination of a set of characteristic compounds that could serve as biological markers of graft quality and indicators of possible development of organ dysfunction.

The protocol presents utilization of the chemical biopsy approach followed by comprehensive metabolomic and lipidomic analysis for quality assessment of kidney grafts allocated for transplantation.

Greft Kalite Değerlendirmesi için Kimyasal Biyopsi Kullanımı

Kidney transplantation is a life-saving treatment for a large number of people with end-stage renal dysfunction worldwide. The procedure is associated ...