Bu çalışmada mali esas olarak Lundbeck Vakfı tarafından desteklenmiştir.
Ayrıca, Knud og Edith Eriksens Mindefond, Søster og Verner Lipperts düşkün, Fonden desteklenen Lægevidenskabens hissediyorum ve Aage og til Johanne Louis Hansens Fond bu çalışma.

Tüm konular sınav önce onların yazılı izin vermek zorundadır ve kayıt Protokolü uygun yerel etik İnceleme board(s) tarafından onaylanması gerekir. Tüm yöntem tanımlamak burada bölgesel bilimsel etik kurul ve Danca veri koruma ajansı tarafından kabul edildi.
Not: Yazılımın bir parçası olan ''TRONDNF'' kayıt Protokolü ile kayıtları yapılır (malzemeler tablo bakınız). İki kutuplu bir uyarıcı, 50 Hz gürültü giderici, bir amplifikatör ve bir analog-dijital (A/D) yönetim kurulu kullanılan diğer ekipman olduğunu (da salık vermek geribildirim electromyogram (EMG) faaliyet için bir ses amplifikatör olduğunu ve bir kısma kutu sırasında ses kesmek için elektriksel stimülasyon). 2 cm. Firezeli birim numarasını tahmin MScan yöntemi tarafından üç aşama içerir: 1) 2) CMAP tarama kayıt ve 3) MScan yazılımı ile sonuçlarını çözümleme hazırlanması (gelince sinir uyarılabilirlik çalışmalar), konu. Aşağıda açıklanan kayıt yazılım ve kullandığımız araçlar için özel bir yöntemdir (bkz. Tablo reçetesi); Bunlar diğer yazılım ve donanım için adapte gerekir.
1. konu hazırlanması
<ol><li>Onlar araştırılır hastalık grubu dışındaki sinir sistemi bozuklukları (özellikle nöropati ve karpal tünel sendromu), herhangi bir tarihi yok emin olmak için konular ekran.</li>
	<li>Konu üzerinde detaylı olarak muayene ve yazılı isteği hakkında talimat.<ol>
<li>Konu kaydı başladığında, gücü yavaş yavaş kademeli bir düşüş tarafından takip en fazla artmış ve sınava yaklaşık 5-6 dk bilgilendirmek.</li>
		<li>Konu el ve parmak bir gıdıklama hissi yaşayacaksınız açıklamak.</li>
		<li>Konu çok fazla rahatsızlık hissediyor konu güç kayıt sırasında herhangi bir anda hemen kapatabilirsiniz olduğunu bilgilendiriniz.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Konu'temiz s el ve cilt ile önkol hazırlık jel ve alkol.</li>
	<li>Etkin kayıt elektrot abductor pollicis brevis kas ve referans elektrot başparmak (Şekil 1) metakarpofaringeal eklem üzerindeki üzerine getirin.</li>
	<li>Bir yere elektrot El patolojisi üzerinde yerleştirin.</li>
	<li>Bu elektrotlar öncesi amplifikatör (Şekil 1) bağlayın.</li>
	<li>Birlikte gürültü ve eserlerin gönüllü hareketi (Şekil 1) nedeniyle ortadan kaldırmak için parmak teyp.</li>
	<li>Cilt sıcaklığı 32 ° C ve 36 ° C arasında ısınma bir lamba ile koruyun.</li>
</ol>2. kayıt CMAP tarama
Not: Aşağıda açıklanan tüm Yazılım yazılım ve kullandığımız araçlar için özel eylemlerdir (bkz. Tablo reçetesi); Bunlar diğer yazılım ve donanım için adapte gerekir.
<ol><li>Yarı otomatik bilgisayarlı sistem başlamak.</li>
	<li>'MScan-R' kayıt Protokolü 'kayıt Protokolü Seç' formundan seçin.</li>
	<li>Ön amfi ve uyarıcı için varsayılan ayarları kabul edin.</li>
	<li>'Kayıt parametrelerini seçin' formundaki 2 veya 3 harfli operatör önek 'Çıkış dosyası' kutusuna girin, sonra '''' Tamam düğmesini tıklatın.</li>
	<li>Program Raw EMG giriş görüntülediğinde, her iki 'MScan parametreleri' (tarama adım, interstimulus aralığı ve uyarıcı genişlik) el ile seçin veya varsayılan parametreleri kabul eder: uyarıcı genişliğini 0.2ms, tarama adım % 0,2 ve interstimulus aralığı 0,5 tıklayın s. '''' Tamam ya da devam etmek için '''' Escape tuşuna basın. Not: Varsayılan parametreleri bu çalışmada kabul edildi. Filtre ayarları vardı 3 Hz-3 kHz.</li>
	<li>En düşük eşik site bulmak için bir yer üstünde belgili tanımlık kol bileği, medyan sinir repositionable bipolar uyarıcı elektrot. Stimülasyon başlatmak için Tamam'ı tıklatın '''' .</li>
	<li>Sonraki ekranda uyarıcı (başlangıçta % 15 maksimum çıkış) ve EMG yanıt mesajı; En düşük eşik (yani en büyük yanıt) bir site bulmak için elektrot pozisyonunu ayarlayýn. Kayıt elektrotları konumunu CMAP şeklinde mümkünse tek bir tepe ile diphasic sağlamak ayarlayın. Gerekirse, uyarıcı gücü ile 'Ekle' belirleyin ve '' Delete tuşları. Ardından ''. devam etmek için Tamam''
</li>
	<li>'Değiştirilen' yanıt 'pencere' içinde yanıt, yatay kırmızı çizgiyle gösterilen ölçülür, ile görüntülenir. Kısa yeşil hat (taban çizgisi gösterir) pencere önce uyarıcı obje ve yanıt arasında düz bir çizgi olduğunu doğrulayın. Gerekiyorsa, Eğer pencere başlangıç farenin sağ düğmesini iç karartıcı, imleç sağa sürükleyin ve sonra pencere son düğmesini serbest bırakın. Not: CMAP en yüksek yükseklik satır taban çizgisinden yukarı tepeye kadar pencere içinde ölçülür ve dikey mavi çizgiyle gösterilir. "" Devam etmek için Tamam'ı tıklatın.</li>
	<li>Repositionable elektrot katot elektrot uyarıcı polarizable olmayan bir yapıştırıcı ile değiştirin ve bir anot 2 cm uzağından medyan sinir boyunca yer; alt izleme şimdi yüksek kazanç EMG gösterir. Konu spontan aktivite en aza indirmek kendi el için en rahat pozisyon bulmak için teşvik ediyoruz. "" Devam etmek için Tamam'ı tıklatın.</li>
	<li>Uyarıcı yoğunluğu el ile geçerli uyarıcı için CMAP maksimal genliği seviyesinden olana '''' INSERT tuşuna basarak artırmak; İlk olarak, % 3 adımlarla uyarıcı yoğunluğu ve sonra ince ayar için kullanım adımları % 1 artırın.</li>
	<li>CMAP tarama başlatmak için '''' OK butonunu tıklatmadan önce pencere ve tepe ölçümü denetleme.</li>
	<li>20 supramaximal bizi canlı tutan (ön taramaları) yanıtlar kaydedilir sonra uyaran şiddeti otomatik olarak artık kadar fark edilebilir bir motor yanıt sonra 20 insert daha fazla bir dizi supramaximal stimülasyon üzerinden küçük adımda azalır olduğunu unutmayın (sonrası taramalar) kaydedilir. Not: Veri' 'CMAP tarama veya y ekseni ve uyarıcı yoğunluğu x ekseni üzerinde motor yanıt genliği ile detaylı uyarıcı tepki eğrisi çizilir. Motor üniteleri, ALS, olduğu gibi sınırlı sayıda olan hastalarda basamaklı görünüm (resim 2) eğrisi geliştirir, ancak sağlıklı bireylerde bu S şeklinde bir eğri oluşturur.</li>
	<li>Kısma kutusundan elde geribildirim ek olarak, sol taraftaki orta panelinde konunun rahat ise kontrol etmek mümkün olduğuna dikkat edin. (Sol üst panelde ve sol alt panel, uyarıcı yoğunluğu (eşik) azalma değiştirilmiş) CMAP bakın. CMAP tarama sağ tarafında izleyin.</li>
	<li>Kaydı tekrar tarama gerekli olmadığı sürece ''Tamam'' düğmesini tıklatarak sağ alt köşede ve verileri kaydet bitir. Not: tamamlarken 'Efsaneler ve ölçekleme' formunda tüm soru işaretlerini değiştirmek için gerekli.</li>
</ol>3. MScan analizler
Not: Aşağıda açıklanan tüm Yazılım yazılım ve kullandığımız araçlar için özel eylemlerdir (bkz. Tablo reçetesi); Bunlar diğer yazılım ve donanım için adapte gerekir.
<ol><li>
Manken CMAP inceden inceye gözden geçirmek için uygun
	<ol>
<li>Kayıt çevrimdışı, başlangıç analiz programı analiz ve'ı tıklatın '''' ok seçmek için analiz. için son kaydý
</li>
		<li>Tıkırtı üstünde " 'MScan QZD uygun dosya'' '''' MScanFit menüsünden seçin. Not: Bunun yerine birini seçebilirsiniz "uygun MScan MEM dosya". Bu alo CMAP Tarama Ekipmanları burada kullanılan farklı ile kaydedildi diye "uygun MScan dat (mA mV) dosya" seçilebilir. DAT dosyası oluşturmak nasıl altına bakın.</li>
		<li>Programın ilk ön bir model oluşturur ve daha sonra uygun en iyi duruma getirmek için gider gözlemlemek. Kullanıcı araya girmeden 'İyileştirme' kutusundaki çok renkli ilerleme çubuğunu tamamlamak ve '''' Stop düğmesi gri renkte olana gereklidir.</li>
		<li>Ön modeli yamaç ve varyans tarama ardışık parçaları üzerinde elde bir modelinin ilk tahmin sağlar. Orijinal inceden inceye gözden geçirmek (siyah) Not ve modelde (macenta) üretilen bir tarama yan yana üzerindeki. Model ve model gelişmeler metin ekranda izleyin ve alternatif görüntüler. Not: Alternatif görüntüler herhangi bir zamanda seçilebilir 'çizilecek veri', seçeneklere göre zaman 'Olarak arsa genlikleri' ve 'türü Arsa' kutuları.</li>
		<li>Kaydedilen CMAP Sığdır simüle kaydedilen CMAP inceden inceye gözden geçirmek ve16arasındaki farkı en aza indirmek için seri ayarlamalar yaparak geliştirmek için en iyileştirme gerçekleştirir. Not: Bu Art arda, daha önce ayrıntılı15' te açıklandığı gibi ön modeli ile başlayan birkaç en iyi duruma getirmeleri çalıştırır. Optimizasyon birimlerinin sayısı artarsa, ilk optimizasyonu birimlerinin sayısı azaltılmış, ikinci deneme daha az birimleri ile bir model olarak başlatılır, ancak daha sonra tarama uygun sonraki girişimi ile daha fazla birim, bir model oluşturarak başlar. Eğer tüm inşaat, en iyi duruma getirme yordamı üzerinde tarama uygun birimlerinin sayısı en iyi sıfır.</li>
		<li>En iyi duruma getirme yordamı çalıştırırken, en iyi duruma getirme paneli de çok renkli ilerleme çubuğu gösterir dikkat edin.</li>
		<li>En iyi duruma getirme süreci takip etmek ''Arsa türü" kutusunda, yani, kontur araziler, hata v N birimleri, model birimleri, toplu genlik farklı çizim seçeneklerini kullanın. Not: En iyi duruma getirme işlemi sırasında modelindeki değişiklikler sürekli en son modeline göre güncelleştirilir ve model gelişmeler farklı çizim seçeneklerini ve metin ekranda takip olabilir.<ol>
<li>Kontur haritaları<ol>
<li>Puan bulanıklık ve x-y dağıtımları15dakika sonra fark dayalı bir hata puanı oluşturma modeli doğruluğunu değerlendirmek için kontur haritaları kullanmaktadır. Seç "fark" ve "dağılımı harita'' görüntüler kaydedilen ve model arasındaki farkları görmek için CMAP bir kontur harita tarar. En iyi duruma getirme işlemi en aza indirmek için çalışır bu farklılıklardır. Not: 'Kontur haritaları' belirli bir uyarana verilen yanıtta elde etme olasılık yoğunluğu sağlar. Özgün ve modellenmiş dağılımı harita arasındaki farkı hata puanı bağlıdır ve bu 'fark' seçeneği üst panel ve '' dağılımı Arsa Arsa türü panelinde seçerek görüntülenir. Kırmızı çizgiler, orijinal tarama noktaları büyük bir yoğunluk vardı ve yeşil çizgiler daha fazla puan olarak modellenmiş tarama gösterir gösteriyor. En büyük hataları bulunursa uyarıcı yoğunluklarda fark Arsa üst gösterir.</li>
			</ol>
</li>
			<li>Hata v N birimleri<ol>
<li>Günlük-günlük 'hata v N birimleri' Arsa seçerek en iyi duruma getirme yordamı izleyin. En iyi duruma getirme yordamı her aşaması çubukların '' en iyi duruma getirme panelinde karşılık gelen farklı bir renkte çizilir.</li>
			</ol>
</li>
			<li>Model birimleri<ol>
<li>Bu ne demek CMAP genlik modelindeki farklı aksonlar alımı tarafından yapılan görmek için kullanın; üst kısmında en yüksek genlikleri ve eşik dağıtımları bireysel motor üniteleri gösterilir.</li>
			</ol>
</li>
			<li>Toplu genlik<ol>
<li>Birimler, eşik yerine boyut artan sırasına göre çizilen unutmayın. Kırmızı eğri toplu genliği gösterirken toplu birim numarasını siyah eğrisi çizer.</li>
			</ol>
</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>En iyi duruma getirme işlemi tamamlandığında 'MScanFit metin ekranda' Çözümleme sonuçlarını görüntüleyin. Kullanılabilir MScan parametreleri, yani, sayısı birimleri, medyan genlik, en büyük birimi boyutu metin ekranda gösterilir.</li>
	<li>"Model daha fazla analizleri MEM dosyasına kaydetmek için 'uyum MEM dosyaya kaydet' kutusunda Tamam'' düğmesini tıklatın.</li>
</ol>4. CMAP tarama MUNE kullanarak. DAT dosyaları
Not: Yazılım bir alternatif ve ücretsiz sürümü diğer ekipmanlar tarafından kaydedilen CMAP tarar analizi sağlar.
<ol><li>Çözümlenmesi için CMAP tarama içeren a.DAT dosyasını oluşturur. Not: Bu bir anne ve başka bir sütundaki mV CMAP genlik uyarıcı yoğunluğu ile standart bir 2 sütun biçiminde bir metin dosyası olması gerekir.</li>
	<li>Uygun bir oluşturur. DAT dosyası iki sütun bir elektronik tablo dosyasından bir metin düzenleme yazılımı kopyalayarak ve sonra uzantısı olarak belirleme. DAT yerine. TXT.<ol>
<li>Tüm diğer adımları daha önce açıklandığı gibi MScan analiz, tek başına programı başlatıp seçerek sonra gerçekleştirmek. DAT dosyası.</li>
	</ol>
</li>
	<li>University College London FTP sitesinde freeware program, manuel ve örnek verileri bulmak (ana bilgisayar: 144.82.46.62, Kullanıcı adı: QtracW, şifre: Hg32wK5e).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sherrington, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=REMARKS+ON+THE+FOREGOING+LETTER.">REMARKS ON THE FOREGOING LETTER.</a> Can. Med. Assoc. J. 20, 66-67 (1929).</li><li>Gooch, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+unit+number+estimation:+a+technology+and+literature+review.">Motor unit number estimation: a technology and literature review.</a> Muscle Nerve. 50, 884-893 (2014).</li><li>McComas, A. J., Fawcett, P. R., Campbell, M. J., Sica, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+estimation+of+the+number+of+motor+units+within+a+human+muscle.">Electrophysiological estimation of the number of motor units within a human muscle.</a> J Neurol Neurosur Ps. 34, 121-131 (1971).</li><li>Oge, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+unit+number+estimation+in+transected+peripheral+nerves.">Motor unit number estimation in transected peripheral nerves.</a> Neurol Res. 32, 1072-1076 (2010).</li><li>Doherty, T. J., Brown, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+estimated+numbers+and+relative+sizes+of+thenar+motor+units+as+selected+by+multiple+point+stimulation+in+young+and+older+adults.">The estimated numbers and relative sizes of thenar motor units as selected by multiple point stimulation in young and older adults.</a> Muscle Nerve. 16, 355-366 (1993).</li><li>Bromberg, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+unit+estimation:+reproducibility+of+the+spike-triggered+averaging+technique+in+normal+and+ALS+subjects.">Motor unit estimation: reproducibility of the spike-triggered averaging technique in normal and ALS subjects.</a> Muscle Nerve. 16, 466-471 (1993).</li><li>Lomen-Hoerth, C., Slawnych, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statistical+motor+unit+number+estimation:+from+theory+to+practice.">Statistical motor unit number estimation: from theory to practice.</a> Muscle Nerve. 28, 263-272 (2003).</li><li>Unlusoy Acar, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decline+of+compound+muscle+action+potentials+and+statistical+MUNEs+during+Wallerian+degeneration.">Decline of compound muscle action potentials and statistical MUNEs during Wallerian degeneration.</a> Neurophysiol. Clin. 44, 257-265 (2014).</li><li>Henderson, R. D., Ridall, P. G., Hutchinson, N. M., Pettitt, A. N., McCombe, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bayesian+statistical+MUNE+method.">Bayesian statistical MUNE method.</a> Muscle Nerve. 36, 206-213 (2007).</li><li>Ridall, P. G., Pettitt, A. N., Henderson, R. D., McCombe, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+unit+number+estimation--a+Bayesian+approach.">Motor unit number estimation--a Bayesian approach.</a> Biometrics. 62, 1235-1250 (2006).</li><li>Nandedkar, S. D., Nandedkar, D. S., Barkhaus, P. E., Stalberg, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+unit+number+index+(MUNIX).">Motor unit number index (MUNIX).</a> IEEE Trans. Biomed. Eng. 51, 2209-2211 (2004).</li><li>Neuwirth, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+Unit+Number+Index+(MUNIX):+a+novel+neurophysiological+marker+for+neuromuscular+disorders;+test-retest+reliability+in+healthy+volunteers.">Motor Unit Number Index (MUNIX): a novel neurophysiological marker for neuromuscular disorders; test-retest reliability in healthy volunteers.</a> Clin. Neurophysiol. 122, 1867-1872 (2011).</li><li>Jacobsen, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility,+and+sensitivity+to+motor+unit+loss+in+amyotrophic+lateral+sclerosis,+of+a+novel+MUNE+method:+MScanFit+MUNE.">Reproducibility, and sensitivity to motor unit loss in amyotrophic lateral sclerosis, of a novel MUNE method: MScanFit MUNE.</a> Clin neurophysiol. 128, 1380-1388 (2017).</li><li>Maathuis, E. M., Drenthen, J., Visser, G. H., Blok, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproducibility+of+the+CMAP+scan.">Reproducibility of the CMAP scan.</a> J. Electromyogr. Kinesiol. 21, 433-437 (2011).</li><li>Sleutjes, B. T. H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CMAP+scan+discontinuities:+automated+detection+and+relation+to+motor+unit+loss.">CMAP scan discontinuities: automated detection and relation to motor unit loss.</a> Clin Neurophysiol. 125, 388-395 (2014).</li><li>Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+motor+unit+numbers+from+a+CMAP+scan.">Estimating motor unit numbers from a CMAP scan.</a> Muscle Nerve. 53, 889-896 (2016).</li><li>DeLong, E. R., DeLong, D. M., Clarke-Pearson, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+the+areas+under+two+or+more+correlated+receiver+operating+characteristic+curves:+a+nonparametric+approach.">Comparing the areas under two or more correlated receiver operating characteristic curves: a nonparametric approach.</a> Biometrics. 44, 837-845 (1988).</li><li>Hanley, J. A., McNeil, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+comparing+the+areas+under+receiver+operating+characteristic+curves+derived+from+the+same+cases.">A method of comparing the areas under receiver operating characteristic curves derived from the same cases.</a> Radiology. 148, 839-843 (1983).</li><li>Farschtschi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+action+potential+scans+and+ultrasound+imaging+in+neurofibromatosis+type+2+:+CMAP+Scans+and+Nerve+Imaging+in+NF2.">Muscle action potential scans and ultrasound imaging in neurofibromatosis type 2 : CMAP Scans and Nerve Imaging in NF2.</a> Muscle Nerve. 55, 350-358 (2017).</li></ol>

Çıkar çatışması: HB Bu çalışmada kullanılan onun Qtrac yazılım satış için UCL telif alır. Diğer yazarlar hiçbir potansiyel çıkar çatışmaları var. Tüm yazarlar final makale onayladı.

Protokol içindeki kritik adımlar: MScan son derece otomatik bir işlemdir, ancak tüm EMG yöntemleri gibi ile tutarlı sonuçlar elde etmek için özen gösterilmelidir. Hazırlık aşamasında CMAP tarama sırasında spontan aktivite veya hareket eserler CMAP sahte varyans tanıtmak ve ön model nesil yıkmak çünkü gevşeme, elde etmek önemlidir.
Değişiklikler ve sorun giderme: Bulduğumuz parmak ve işitsel EMG geribildirim iyi bacak konumu bulmanıza yardımcı olmak için kullanımı kayıt bazı varyans önlemek yardımcı olur.
Teknik sınırlamaları: CMAP tarama noktaları sınırlı sayıda ve yanıtları ve modelleme Stokastik doğası nedeniyle, bir adet tam olarak aynı sayıda aynı kayıt her analiz sonra bulmak bekleyemezsin. Hatta ideal kayıtları ile kaçınılmaz16MUNE değerleri yaklaşık % 7 mutlak bir hatadır. Belirsizlik sonuçlarında bu derece kullanılan hızlı uygun yordamı ile kaçınılmazdır. Başka bir MScan proksimal kas kuadriseps kemiği ve deltoideus gibi uygun olmadığını kısıtlamasıdır. Şimdiye kadar sadece abductor pollicis brevis kas kullanılan13,19oldu ama diğer distal kaslarda, üst ve alt ekstremitelerde, anterior tibial kas dahil olmak üzere MScan inandığımız her ikisi de başarılı bir şekilde uygulanabilir. Birkaç supramaximal uyaranlara nahoş olabilir, ama biz muayene tamamlanamadı herhangi bir konuda deneyimim olmadı.
Bir daha fazla sınırlama kullanır burada açıklandığı şekilde kayıt yöntemi uzmanlaşmış yazılım ve test etme donanımları sinir uyarılabilirlik ilişkili, dünya çapında 100 bölümlerinde kullanılabilir mevcut. Bu, ancak, diğer ekipmanlar ile oluşturulan CMAP inceden inceye gözden geçirmek a freeware bilgisayar programı uygulamak mümkündür. Doğrusal CMAP taramaları kullandıysanız, biz adım boyu bizim kayıtları kullanılan % 0,2 aşmayacak tavsiye ederim. Motor birim eşikleri var varyasyon katsayısı yaklaşık % 2 ve % 0,2 adımları her birim hakkında yeterli bilgi sağlamak için gereklidir.
Önemi ile ilgili mevcut Yöntemler: MScan dikkate alır bir yöntem olduğunu çoğu diğer MUNE yöntemleri buldum sınırlamaları. Mükemmel içi ve arası rater tekrarlanabilirlik bulduk ve içi Oylayıcısı tekrarlanabilirlik deneyimli ve olmayan deneyimli gözlemciler arasında farklı değil. 13, alıntı bizim yeni çalışma farklı kayıtları aynı konular genel CV %12,3 olumlu CVs için MPS MUNE %24,7 ve %21,5 Munix için ile karşılaştırıldığında MScan için oldu. Bu tekrarlanabilirlik bir gelişme ölçümleri değişkenlik Meydanı ile artması beklenmektedir algılamak için gereken hasta sayısı beri gibi ALS, nörodejeneratif hastalıklar için olası tedaviler değerlendirmede önemli olabilir. Alıcı operatör özelliği (ROC) eğrileri kullanılarak sağlıklı denetimlerden ALS hastalarında ayrım yapma MScan biraz ayrımcılık, yani biraz daha yüksek bir alan eğri altındaki en iyisi (AUC 0.930 =) MPS MUNE (0.899) ve her ikisi de daha ayrımcılık Munix (0.831) ve CMAP genlik (0.831) çok önemli ölçüde daha iyi. Ayrıca, MScan kayıtları (~ 6 dk) gerçekleştirmek için hızlı bir yöntemdir. Analizi aynı zamanda hızlı ve daha az 5 dakika sürer.
Gelecekteki uygulamalar: Sonuç olarak, MScan, klinik tanı ve takip nöromuskuler bozuklukların ALS gibi uygulanmak üzere potansiyeli olabilir bir yöntemdir. Daha fazla çalışmalar diğer hasta grupları ve büyük gruplar, garanti altındadır. MScan uygulamada farklı kas çalışmaları da yapılmalıdır.

Motor sistemi hareketi bireysel bir motor sinir lifi aktive kas lifleri ile birlikte başvurduğu, motor biriminde bağımlı ve motor birim numarasını ön boynuz hücreleri veya bir tek kas1innerve akson sayısı. Denervation ve reinnervation işlemleri sırasında ikincil çimlenme tarafından kaybolur aksonlar rolü sağlıklı aksonlar kazanır. Bu nedenle, bileşik kas aksiyon potansiyeli (CMAP) genlik motor birim kayıp hakkında gerekli bilgileri vermek değil. CMAP genlik sadece motor üniteleri % 50'den fazla kayıp olduğunda düşmeye başlayabilir. Benzer şekilde, anormal spontan aktivite veya motor birim potansiyel (MUP) değişiklikleri büyüklüğü denervation derecesi ile ilişkili değil.
Genel olarak, basit, doğrudan motor birim sayısı ölçülerini sağlar hiçbir elektrofizyolojik tekniği vardır. Bunun yerine, motor birim sayısı (MUNE) tahmini alt motor nöron kaybı2değerlendirmek için kullanılır. İlk yöntem, artımlı stimülasyon 1971 yılında McComas3tarafından tanıtıldı MUNE uygulanması beri birkaç MUNE yöntem geliştirilmiştir. Pek çok yöntem birkaç motor birim yüzeye kaydedilen potansiyeller (sMUP) ölçme ve ortalama sMUP genlik tarafından maksimal CMAP bölen dayalı olmuştur. Tür yöntemler artımlı stimülasyon4, birden çok nokta stimülasyon (MPS)5ve ortalama6spike tetiklemeli içerir. Diğer MUNE yöntemleri bir uyarıcı7,8,9,10yanıt olarak bir motor birim firing olasılıkçı niteliğine göre istatistiksel teknikleri kullandık. Bu değişkenlik anlamına gelir motor üniteleri farklı bileşimleri kovuyor CMAP yanıt boyutunu değişkenlik yol açar. Motor birimi numarası (Munix) daha yakın sMUP11,12ortalama boyutunu tahmin etmek için gönüllü Kasılmalar sırasında kaydedilen yüzey girişim desenleri kullanan yöntem tanıttı dizinidir.
MUNE yöntemlerin tüm öznellik, varlığı gibi bir veya daha fazla sınırlamalar mutlak CMAP genlik, birimleri, uzun zaman yeterli üniteleri örnekleme yapmak için gerekli veya sonuçları analiz etmek için gerekli uzun zaman seçim önyargı bağımlılığı muzdarip. Yeni bir MUNE yöntemi son zamanlarda geliştirilmiştir, 'CMAP Tara MUNE' (MScan), bu sınırlamalar13üstesinden gelmek için. Bu yöntem bir detaylı uyarıcı-tepki eğrisi veya CMAP tarama14,15ile ölçülen CMAP için tüm birimler katkısını hesabı alarak birim seçimde içsel sorunları engeller. O da bir benzer, model-montaj yöntemi9,10, genişletilmiş analiz süresini yeni algoritmalar16kullanarak önler. Bir son çalışmada, tekrarlanabilirlik, MScan motor birim sayısını tahmin etmek içinde iki daha geleneksel yöntemlerden daha, MPS MUNE ve Munix13daha iyiydi. Ayrıca, MScan motor birim kaybı MPS MUNE ve Munix daha önceki aşamalarında amyotrofik Lateral skleroz (ALS) gösterebilirim. MScan MPS MUNE daha hızlı ve derecede hızlı aynı derecede Munix13.
Bu kağıt MScan metodoloji ayrıntılı olarak açıklar. Ayrıca daha önce raporlanmış içi ve arası rater tekrarlanabilirlik MScan, ALS ve Yöntem planlı bir çalışma için uygun olacağını yargılamaya okuyucu sağlayan sağlıklı kontrol konuları13, hastalarda özetler.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>QtracW software</td>
			<td>Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London)&#160;&#160;</td>
			<td>QtracW</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MScanFit</td>
			<td>Digitimer Ltd (copyright Institute of Neurology, University College, London)&#160;&#160;</td>
			<td>QtracW</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DS5 bipolar stimulator</td>
			<td>Digitimer Ltd&#160;</td>
			<td>DS5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D440 amplifier&#160;</td>
			<td>Digitimer Ltd&#160;</td>
			<td>D440-2 (2 channel) or D440-4 (4 channel)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HumBug Noise Eliminator</td>
			<td>Digitimer Ltd&#160;</td>
			<td>Humbug</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analogue-to-digital (A/D) board&#160;&#160;</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>NI-6221&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cmap scan mune (mscan) - a novel motor unit number estimation (mune) method

Motor birim numarası Tahmini (MUNE), için diğer yöntemleri bileşik gibi kas aksiyon potansiyeli (CMAP) tarama MUNE (MScan) bir kas işleyen motor birim sayısını tahmin etmek için bir non-invaziv electrophysiologic yöntemidir. MUNE neuropathies ve neuronopathies değerlendirilmesi için önemli bir araçtır. En MUNE yöntemleri kullanılan aksine MScan bir kas motor üniteleri detaylı uyarıcı-tepki eğrisi modeline yaklaştırarak değerlendiriyor veya CMAP inceden inceye gözden geçirmek. Böylece birimleri küçük bir örnek extrapolating dayalı tüm MUNE yöntemleri doğasında önyargı kaçınır. Gibi farklı genlikleri, eşikleri ve eşik variabilities motor üniteleri 'Bayesian MUNE,' MScan analiz çalışmaları bir model uygun tarafından yapılmış, ama uygun yöntem birkaç saat yerine beş dakika içinde oldukça farklı ve tamamlanmış değildir. MScan devre dışı analiz iki aşamada çalışır: ilk olarak, ön manken yamaç ve varyans tarama noktalarından dayanarak oluşturulur ve ikinci olarak, bu model sonra uygun orijinal tarama arasında geliştirmek için tüm parametreleri ayarlayarak rafine ve modeli tarafından oluşturulan taramaları.
Bu yeni yöntem tekrarlanabilirlik için test edilmiş ve kayıt süresi 22 amyotrofik lateral skleroz (ALS) hastalar ve her test ile 20 sağlıklı kontrol iki kör hekimler tarafından iki kez tekrarladı. MScan gösterdi mükemmel içi ve arası rater tekrarlanabilirlik ICC değerleri ile > 0,98 ve 12.3 ± % 1.6 ortalama varyasyon katsayısı. Intra-Oylayıcısı tekrarlanabilirlik iki gözlemci arasında hiçbir fark vardı. Ortalama kayıt süresi olduğunu 6.27 ± 0,27 min.
Bu protokolü nasıl CMAP tarama kayıt ve MScan yazılım tahmini sayısını ve boyutlarını işleyen motor üniteleri türetmek için nasıl kullanılacağını açıklar. MScan tanı ve izleme hastalık ilerleme nöromüsküler hastalıklarda yararlı olabilir bir hızlı, kullanışlı ve tekrarlanabilir yöntemi var.

Son bir çalışmada, hangi MScan yöntemi iki kurulan teknikleri ile karşılaştırıldığında aşağıdaki sonuçlar elde edilmiştir: birden çok nokta stimülasyon MUNE (MPS) ve motor birim numarasını Dizin (Munix)13. Bu protokol için açıklanan tekniği ile mükemmel tekrarlanabilirlik ile tutarlı sonuçlar elde edilebilir sonuçlar gösterir. Yöntem ALS hastalarında hastalık bir önceki aşamada CMAP daha sağlıklı kontrol ayırabilir ve hızlı ve kolay13yaşında. Bu yöntem klinik kullanıma uygun olabileceğini düşündürmektedir.
Hasta ve sağlıklı kontrol: 168 MScan kayıtları toplam 22 hasta ve her ders için iki farklı gözlemciler tarafından iki kayıtları olan 20 sağlıklı bireylerde gerçekleştirilen. Motor üniteleri ortalama sayısı önemli ölçüde daha düşük (32,4, aralığı: 1 - 123,5) hastalarda sağlıklı kontrol (111.1, aralığı: 71.75 166.8), p = 1,2 × 10-6.
Tekrarlanabilirlik: Varyasyon (CV) MScan MUNE değerleri (ortalama ± SE) için Intra-Oylayıcısı değişkenlik katsayısı 8.6 ± % 1.6 ve arası Oylayıcısı değişkenliği için 9,7 ± % 1,3 oldu. Intra-Oylayıcısı değişkenlik arasında iki gözlemci benzer. Hasta ve sağlıklı kontrol ayrı ayrı analiz edildi, hastalar için CV değeri 14.7 ± % 2.7, sağlıklı kontrol için bu 9,6 ± % 1,3 ve hastalar ve kombine denetimler için %1,6 12.3 ± oldu oldu.
İçi korelasyon katsayıları (ICC): ICC değerleri her iki gözlemci için mükemmel Intra-Oylayıcısı anlaşması gösterdi. Gözlemci 1 arasında içi Oylayıcısı ICC değerleri fark yoktu (0.983, güven aralığı: 0.968 - 0.991) ve gözlemci 2 (0.985, güven aralığı: 0.972 - 0.992), ve ICC de gösterdi mükemmel arası Oylayıcısı Sözleşmesi (0.993, güven değerlere Aralığı: 0.987 - 0.996).
Duyarlılık ve özgüllük CMAP ve MScan: Şekil 3 ROC eğrisi içinde nasıl MScan ve CMAP genlik 22 ALS hastalarında 20 sağlıklı bir konu ayırt edebilirsiniz göstermektedir. MScan MUNE değer sağlıklı kontrol ve hastalar arasında ayrım için en iyi kesme 75.5 oldu. Bu %92.5 bir duyarlılık ve özgüllük %80,7 vermiştir. MScan MUNE karşılık gelen CMAP genlik ile karşılaştırıldığında ve ne kadar iyi hastalar ve sağlıklı konular arasında ayrım yapmak başardık bir önlem olarak (AUC) eğri altındaki alan tarafından değerlendirilir. MScan hangi CMAP genlik (0.845) anlamlı olarak daha yüksek bir AUC (0,903), vardı.
Kez kayıt: Sağlıklı kontrol için bu 6,48 ± hastalar için tüm kayıtlar için Ortalama kayıt süresi (ortalama ± SE) 6.08 ± 0,28 min, iken, 0.29 min, ve hastalar ve kombine denetimler için 6.27 ± oldu 0.20 min.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56805/56805fig1v2.jpg"> Şekil 1: resmini CMAP tarama MUNE (MScan) tuzak. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56805/56805fig1v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56805/56805fig2.jpg"> Resim 2: MScan kayıtları örnekleri: (A) sağlıklı bir konu, normal MScan (B) bir ALS hastası, orta motor üniteleri kaybı (C) bir ALS hastası ve (D) bir ALS hastası motor üniteleri <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56805/56805fig2large.jpg" target="_blank">lütfen ciddi kaybı ile bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayın .</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56805/56805fig3.jpg"> Şekil 3: ROC eğrisi (AUC) eğri altındaki alan MScan ve CMAP genliği karşılaştırarak. İki farklı yöntem analizleri için kullanılmıştır. Aynı konular her test. için kullanıldı aslında her iki yöntemleri yapılmış kullanımı PA DeLong17ve arkyöntemine başvurur. ve Pb Hanley ve MacNeil18yöntemine başvurur. <a href="https://cloudflare-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56805/56805fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about CMAP Scan MUNE MScan - A Novel Motor Unit Number Estimation MUNE Method at JoVE.com

CMAP Scan MUNE MScan - A Novel Motor Unit Number Estimation MUNE Method

Bu iletişim kuralı bir bileşik kas aksiyon potansiyeli detaylı uyarıcı-tepki eğrisi modeline yaklaştırarak bir kas işleyen motor birim sayısını tahmin etmek için yeni bir yöntem açıklanır. Bu hızlı ve kolay gerçekleştirmek ve analiz ve mükemmel tekrarlanabilirlik vardır.

CMAP tarama MUNE (MScan) - roman Motor birim numarası Tahmini (MUNE) yöntemi

Like other methods for motor unit number estimation (MUNE), compound muscle action potential (CMAP) scan MUNE (MScan) is a non-invasive electrophysiologic ...

cmap-scan-mune-mscan-a-novel-motor-unit-number-estimation-mune-method

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Neuroscience

CMAP Scan MUNE (MScan) - A Novel Motor Unit Number Estimation (MUNE) Method

12.2K Görüntüleme.  Aarhus University Hospital. Bu iletişim kuralı bir bileşik kas aksiyon potansiyeli detaylı uyarıcı-tepki eğrisi modeline yaklaştırarak bir kas işleyen motor birim sayısını tahmin etmek için yeni bir yöntem açıklanır. Bu hızlı ve kolay gerçekleştirmek ve analiz ve mükemmel tekrarlanabilirlik vardır.

Video: CMAP Scan MUNE MScan - A Novel Motor Unit Number Estimation MUNE Method

Novel Apparatus and Method for Drug Reinforcement

Animal models of reinforcement have proven to be useful for understanding the neurobiological mechanisms underlying drug addiction. Operant drug self-administration and conditioned place preference (CPP) procedures are expansively used in animal research to model various components of drug reinforcement, consumption, and addiction in humans. For this study, we used a novel approach to studying drug reinforcement in rats by combining traditional CPP and self-administration methodologies. We assembled an apparatus using two Med Associate operant chambers, sensory stimuli, and a Plexiglas-constructed neutral zone. These modifications allowed our experiments to encompass motivational aspects of drug intake through self-administration and drug-free assessment of drug/cue conditioning strength with the CPP test. In our experiments, rats self-administered cocaine (0.75 mg/kg/inj, i.v.) during either four (e.g., the "short-term") or eight (e.g., the "long-term") alternating-day sessions in an operant environment containing distinctive sensory cues (e.g., olfactory and visual). On the alternate days, in the other (differently-cued) operant environment, saline was available for self-infusion (0.1 ml, i.v.). Twenty-four hours after the last self-administration/cue-pairing session, a CPP test was conducted. Consistent with typical CPP findings, there was a significant preference for the chamber associated with cocaine self-administration. In addition, in animals undergoing the long-term experiment, a significant positive correlation between CPP magnitude and the number of cocaine-reinforced lever responses. In conclusion, this apparatus and approach is time and cost effective, can be used to examine a wide array of topics pertaining to drug abuse, and provides more flexibility in experimental design than CPP or self-administration methods alone.

Operant drug self-administration and conditioned place preference (CPP) procedures are expansively used in research to model various components of drug reinforcement, consumption, and addiction in humans. In this report, we combined traditional CPP and self-administration methods as a novel approach to studying drug reinforcement and addiction in rats.

İlaç Takviye için yeni cihaz ve Yöntem

Animal models of reinforcement have proven to be useful for understanding the neurobiological mechanisms underlying drug addiction.  Operant drug ...

Nörobilim

Presynaptic Dopamine Dynamics in Striatal Brain Slices with Fast-scan Cyclic Voltammetry

Extensive research has focused on the neurotransmitter dopamine because of its importance in the mechanism of action of drugs of abuse (e.g. cocaine and amphetamine), the role it plays in psychiatric illnesses (e.g. schizophrenia and Attention Deficit Hyperactivity Disorder), and its involvement in degenerative disorders like Parkinson's and Huntington's disease. Under normal physiological conditions, dopamine is known to regulate locomotor activity, cognition, learning, emotional affect, and neuroendocrine hormone secretion. One of the largest densities of dopamine neurons is within the striatum, which can be divided in two distinct neuroanatomical regions known as the nucleus accumbens and the caudate-putamen. The objective is to illustrate a general protocol for slice fast-scan cyclic voltammetry (FSCV) within the mouse striatum. FSCV is a well-defined electrochemical technique providing the opportunity to measure dopamine release and uptake in real time in discrete brain regions. Carbon fiber microelectrodes (diameter of ~ 7 &mu;m) are used in FSCV to detect dopamine oxidation. The analytical advantage of using FSCV to detect dopamine is its enhanced temporal resolution of 100 milliseconds and spatial resolution of less than ten microns, providing complementary information to in vivo microdialysis.

Using fast-scan cyclic voltammetry to measure electrically evoked presynaptic dopamine dynamics in striatal brain slices.

Hızlı tarama Cyclic Voltametri striatal Beyin Slices presinaptik dopamin Dinamiği

Extensive research has focused on the neurotransmitter dopamine because of its importance in the mechanism of action of drugs of abuse (e.g. cocaine and ...

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

Human primary muscle cells cultured aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of a nerve component, cell differentiation is limited and motor neuron stimulation is missing1. These limitations hamper the in vitro study of many neuromuscular diseases in cultured muscle cells. Importantly, the experimental constraints of monolayered, cultured muscle cells can be overcome by functional innervation of myofibers with spinal cord explants in co-cultures.
Here, we show the different steps required to achieve an efficient, proper innervation of human primary muscle cells, leading to complete differentiation and fiber contraction according to the method developed by Askanas2. To do so, muscle cells are co-cultured with spinal cord explants of rat embryos at ED 13.5, with the dorsal root ganglia still attached to the spinal cord slices. After a few days, the muscle fibers start to contract and eventually become cross-striated through innervation by functional neurites projecting from the spinal cord explants that connecting to the muscle cells. This structure can be maintained for many months, simply by regular exchange of the culture medium.
The applications of this invaluable tool are numerous, as it represents a functional model for multidisciplinary analyses of human muscle development and innervation. In fact, a complete de novo neuromuscular junction installation occurs in a culture dish, allowing an easy measurement of many parameters at each step, in a fundamental and physiological context.
Just to cite a few examples, genomic and/or proteomic studies can be performed directly on the co-cultures. Furthermore, pre- and post-synaptic effects can be specifically and separately assessed at the neuromuscular junction, because both components come from different species, rat and human, respectively. The nerve-muscle co-culture can also be performed with human muscle cells isolated from patients suffering from muscle or neuromuscular diseases3, and thus can be used as a screening tool for candidate drugs. Finally, no special equipment but a regular BSL2 facility is needed to reproduce a functional motor unit in a culture dish. This method thus is valuable for both the muscle as well as the neuromuscular research communities for physiological and mechanistic studies of neuromuscular function, in a normal and disease context.

Cultured muscle cells are an inadequate model to recapitulate innervated muscle in vivo. A functional motor unit can be reproduced in vitro by innervation of differentiated human primary muscle cells using rat embryo spinal cord explants. This article describes how co-cultures of spinal cord explants and muscle cells are established.

Kültür Bulaşık A Fonksiyonel Motor Birim: Omurilik Eksplantlarından ve Kas Hücrelerinin Co-kültür

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo

The spinal motoneuron has long been a good model system for studying neural function because it is a neuron of the central nervous system with the unique properties of (1) having readily identifiable targets (the muscle fibers) and therefore having a very well-known function (to control muscle contraction); (2) being the convergent target of many spinal and descending networks, hence the name of "final common pathway"; and (3) having a large soma which makes it possible to penetrate them with sharp intracellular electrodes. Furthermore, when studied in vivo, it is possible to record simultaneously the electrical activity of the motoneurons and the force developed by their muscle targets. Performing intracellular recordings of motoneurons in vivo therefore put the experimentalist in the unique position of being able to study, at the same time, all the compartments of the "motor unit" (the name given to the motoneuron, its axon, and the muscle fibers it innervates1): the inputs impinging on the motoneuron, the electrophysiological properties of the motoneuron, and the impact of these properties on the physiological function of the motoneurons, i.e. the force produced by its motor unit. However, this approach is very challenging because the preparation cannot be paralyzed and thus the mechanical stability for the intracellular recording is reduced. Thus, this kind of experiments has only been achieved in cats and in rats. However, the study of spinal motor systems could make a formidable leap if it was possible to perform similar experiments in normal and genetically modified mice.
For technical reasons, the study of the spinal networks in mice has mostly been limited to neonatal in vitro preparations, where the motoneurons and the spinal networks are immature, the motoneurons are separated from their targets, and when studied in slices, the motoneurons are separated from most of their inputs. Until recently, only a few groups had managed to perform intracellular recordings of motoneurons in vivo2-4 , including our team who published a new preparation which allowed us to obtain very stable recordings of motoneurons in vivo in adult mice5,6. However, these recordings were obtained in paralyzed animals, i.e. without the possibility to record the force output of these motoneurons. Here we present an extension of this original preparation in which we were able to obtain simultaneous recordings of the electrophysiological properties of the motoneurons and of the force developed by their motor unit. This is an important achievement, as it allows us to identify the different types of motoneurons based on their force profile, and thereby revealing their function. Coupled with genetic models disturbing spinal segmental circuitry7-9, or reproducting human disease10,11, we expect this technique to be an essential tool for the study of spinal motor system.

Simultaneous Intracellular Recording of a Lumbar Motoneuron and the Force Produced by its Motor Unit in the Adult Mouse In vivo

This new method permits the simultaneous intracellular recording of a single adult mouse motoneuron and the measurement of the force produced by its muscle fibers. The combined investigation of the electrical and mechanical properties of motor units in normal and genetically modified animals is a breakthrough for the study of the neuromuscular system.

Erişkin Fare yılında Motor Ünite tarafından üretilen bir Lomber Motonöron ve Kuvvet Eşzamanlı intrasellüler Kaydı<em&gt; In vivo</em

The  spinal motoneuron has long been a good model system for studying neural  function because it is a neuron of the central nervous system with the ...

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

In animals with large identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using intracellular techniques1,2,3,4. Recently, we developed a technique to extracellularly stimulate and record individual neurons in Aplysia californica5. We now describe a protocol for using this technique to uniquely identify and characterize motor neurons within a motor pool.
This extracellular technique has advantages. First, extracellular electrodes can stimulate and record neurons through the sheath5, so it does not need to be removed. Thus, neurons will be healthier in extracellular experiments than in intracellular ones. Second, if ganglia are rotated by appropriate pinning of the sheath, extracellular electrodes can access neurons on both sides of the ganglion, which makes it easier and more efficient to identify multiple neurons in the same preparation. Third, extracellular electrodes do not need to penetrate cells, and thus can be easily moved back and forth among neurons, causing less damage to them. This is especially useful when one tries to record multiple neurons during repeating motor patterns that may only persist for minutes. Fourth, extracellular electrodes are more flexible than intracellular ones during muscle movements. Intracellular electrodes may pull out and damage neurons during muscle contractions. In contrast, since extracellular electrodes are gently pressed onto the sheath above neurons, they usually stay above the same neuron during muscle contractions, and thus can be used in more intact preparations.
To uniquely identify motor neurons for a motor pool (in particular, the I1/I3 muscle in Aplysia) using extracellular electrodes, one can use features that do not require intracellular measurements as criteria: soma size and location, axonal projection, and muscle innervation4,6,7. For the particular motor pool used to illustrate the technique, we recorded from buccal nerves 2 and 3 to measure axonal projections, and measured the contraction forces of the I1/I3 muscle to determine the pattern of muscle innervation for the individual motor neurons.
We demonstrate the complete process of first identifying motor neurons using muscle innervation, then characterizing their timing during motor patterns, creating a simplified diagnostic method for rapid identification. The simplified and more rapid diagnostic method is superior for more intact preparations, e.g. in the suspended buccal mass preparation8 or in vivo9. This process can also be applied in other motor pools10,11,12 in Aplysia or in other animal systems2,3,13,14.

Extracellularly Identifying Motor Neurons for a Muscle Motor Pool in Aplysia californica

In animals with large identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using intracellular techniques1,2,3,4. Recently, we developed a technique to extracellularly stimulate and record individual neurons in Aplysia californica5. We now describe a protocol for using this technique to uniquely identify and characterize motor neurons within a motor pool.

Ekstraselüler bir kas Motor Pool için motor nöronlar belirlenmesi<em&gt; Aplysia&#39;nın californica</em

In animals with large  identified neurons (e.g. mollusks), analysis of motor pools is done using  intracellular techniques1,2,3,4. Recently,  we developed ...

A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish (Danio rerio) and the Quantification of Withdrawal

Anxiety testing in zebrafish is often studied in combination with the application of pharmacological substances. In these studies, fish are routinely netted and transported between home aquaria and dosing tanks. In order to enhance the ease of compound administration, a novel method for transferring fish between tanks for drug administration was developed. Inserts that are designed for spawning were used to transfer groups of fish into the drug solution, allowing accurate dosing of all fish in the group. This increases the precision and efficiency of dosing, which becomes very important in long schedules of repeated drug administration. We implemented this procedure for use in a study examining the behavior of zebrafish in the light/dark test after administering ethanol with differing 21 day schedules. In fish exposed to daily-moderate amounts of alcohol there was a significant difference in location preference after 2 days of withdrawal when compared to the control group. However, a significant difference in location preference in a group exposed to weekly-binge administration was not observed. 
This protocol can be generalized for use with all types of compounds that are water-soluble and may be used in any situation when the behavior of fish during or after long schedules of drug administration is being examined. The light/dark test is also a valuable method of assessing withdrawal-induced changes in anxiety.

A Novel Method of Drug Administration to Multiple Zebrafish Danio rerio and the Quantification of Withdrawal

A novel method for reducing variability when exposing fish to drugs is explained. Fish exposed to various patterns of ethanol exposure were found to have altered anxiety levels during withdrawal in a light/dark scototaxic assay.

Çoklu Zebra balığı için İlaç İdaresi Bir Roman Yöntemi (<em&gt; Danio rerio</em&gt;) Ve Çekilme Niceleme

Anxiety testing in zebrafish is often studied in combination with the application of pharmacological substances. In these studies, fish are routinely ...

Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such as epilepsy and neurodegenerative disorders. However, it is technically difficult to obtain EEG recordings in neonates as it requires specialized handling and great care. Here, we present a novel method to record EEG in neonatal rat pups (P8-P15). We designed a simple and reliable electrode using computer pin loci; it can be easily implanted into the skull of a rat pup to record high-quality EEG signals in the normal and epileptic brain. Pups were given an intraperitoneal (i.p.) injection of the neurotoxin kainic acid (KA) to induce epileptic seizures. The surgical implantation performed in this procedure is less expensive than other EEG procedures for neonates. This method allows one to record high-quality and stable EEG signals for more than 1 week. Furthermore, this procedure can also be applied to adult rats and mice to study epilepsy or other neurological disorders.

Here, we introduce a novel technique designed to record electroencephalography (EEG) in freely moving neonatal epileptic pups and describe its procedures, features, and applications. This method allows one to record EEG for more than 1 week.

Yeni Bir Yöntemi Kullanarak Serbest Dolaşan Yenidoğan Sıçanlarında EEG Kaydı

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such ...

A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila

Chronic Traumatic Encephalopathy (CTE) is an established neurodegenerative disease that is closely associated with exposure to repetitive mild Traumatic Brain Injury (mTBI). The mechanisms responsible for its complex pathological changes remain largely elusive, despite a recent consensus to define the neuropathological criteria. Here, we describe a novel method to develop a model of CTE in Drosophila melanogaster&#160;(Drosophila&#160;)&#160;in an attempt to identify the key genes and pathways that lead to the characteristic hyperphosphorylated tau accumulation and neuronal death in the brain. Adjustable-strength impacts to inflict mild closed injury are delivered directly to the fly head, subjecting the head to rapid acceleration and deceleration. Our method eliminates the potential problems inherent with other Drosophila mTBI models (e.g.,animal death might be induced by damage to other parts of the body or to internal organs). The less labor- and cost-intensive animal care, short life span, and extensive genetic tools make the fruit fly ideal to study CTE pathogenesis and make it possible to perform large-scale, genome-wide forward genetic and pharmacological screens. We anticipate that the ongoing characterization of the model will generate important mechanistic insights on disease prevention and therapeutic approaches.

A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila

Here, we describe a new approach to inflict closed-head traumatic brain injury in Drosophila melanogaster. Our method has the advantage of directly delivering repetitive impacts with adjustable strength to the head alone. Further exploration of the invertebrate system will help to illuminate the pathogenesis of chronic traumatic encephalopathy.

Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modelleyen Yeni Bir Yöntem<em&gt; Drosophila</em

Chronic Traumatic Encephalopathy (CTE) is an established neurodegenerative disease that is closely associated with exposure to repetitive mild Traumatic ...

Stereological Estimation of Dopaminergic Neuron Number in the Mouse Substantia Nigra Using the Optical Fractionator and Standard Microscopy Equipment

In pre-clinical Parkinson&#39;s disease research, analysis of the nigrostriatal tract, including quantification of dopaminergic neuron loss within the substantia nigra, is essential. To estimate the total dopaminergic neuron number, unbiased stereology using the optical fractionator method is currently considered the gold standard. Because the theory behind the optical fractionator method is complex and because stereology is difficult to achieve without specialized equipment, several commercially available complete stereology systems that include the necessary software do exist, purely for cell counting reasons. Since purchasing a specialized stereology setup is not always feasible, for many reasons, this report describes a method for the stereological estimation of dopaminergic neuronal cell counts using standard microscopy equipment, including a light microscope, a motorized object table (x, y, z plane) with imaging software, and a computer for analysis. A step-by-step explanation is given on how to perform stereological quantification using the optical fractionator method, and pre-programmed files for the calculation of estimated cell counts are provided. To assess the accuracy of this method, a comparison to data obtained from a commercially available stereology apparatus was performed. Comparable cell numbers were found using this protocol and the stereology device, thus demonstrating the precision of this protocol for unbiased stereology.

This work presents a step-by-step protocol for the unbiased stereological estimation of dopaminergic neuronal cell numbers in the mouse substantia nigra using standard microscopy equipment (i.e., a light microscope, a motorized object table (x, y, z plane), and public domain software for digital image analysis.

Optik Fractionator ve standart mikroskobu ekipmanlar kullanarak fare gözlemliyorum Nigra dopaminerjik nöron sayısının stereological tahmin

In pre-clinical Parkinson&#39;s disease research, analysis of the nigrostriatal tract, including quantification of dopaminergic neuron loss within the ...

Autoradiography as a Simple and Powerful Method for Visualization and Characterization of Pharmacological Targets

In vitro autoradiography aims to visualize the anatomical distribution of a protein of interest in tissue from experimental animals as well as humans. The method is based on the specific binding of a radioligand to its biological target. Therefore, frozen tissue sections are incubated with radioligand solution, and the binding to the target is subsequently localized by the detection of radioactive decay, for example, by using photosensitive film or phosphor imaging plates. Resulting digital autoradiograms display remarkable spatial resolution, which enables quantification and localization of radioligand binding in distinct anatomical structures. Moreover, quantification allows for the pharmacological characterization of ligand affinity by means of dissociation constants (Kd), inhibition constants (Ki) as well as the density of binding sites (Bmax) in selected tissues. Thus, the method provides information about both target localization and ligand selectivity. Here, the technique is exemplified with autoradiographic characterization of the high-affinity &#947;-hydroxybutyric acid (GHB) binding sites in mammalian brain tissue, with special emphasis on methodological considerations regarding the binding assay parameters, the choice of the radioligand and the detection method.

The method of autoradiography is routinely used to study binding of radioligands to tissue sections for determination of qualitative or quantitative pharmacology.

Görselleştirme ve farmakolojik hedefleri karakterizasyonu için basit ve güçlü yöntemi olarak autoradiography

In vitro autoradiography aims to visualize the anatomical distribution of a protein of interest in tissue from experimental animals as well as humans. The ...

CMAP tarama MUNE (MScan) - roman Motor birim numarası Tahmini (MUNE) yöntemi

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

İlaç Takviye için yeni cihaz ve Yöntem

Hızlı tarama Cyclic Voltametri striatal Beyin Slices presinaptik dopamin Dinamiği

Kültür Bulaşık A Fonksiyonel Motor Birim: Omurilik Eksplantlarından ve Kas Hücrelerinin Co-kültür

Erişkin Fare yılında Motor Ünite tarafından üretilen bir Lomber Motonöron ve Kuvvet Eşzamanlı intrasellüler Kaydı

Ekstraselüler bir kas Motor Pool için motor nöronlar belirlenmesi

Çoklu Zebra balığı için İlaç İdaresi Bir Roman Yöntemi (

Yeni Bir Yöntemi Kullanarak Serbest Dolaşan Yenidoğan Sıçanlarında EEG Kaydı

Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modelleyen Yeni Bir Yöntem

Optik Fractionator ve standart mikroskobu ekipmanlar kullanarak fare gözlemliyorum Nigra dopaminerjik nöron sayısının stereological tahmin

Görselleştirme ve farmakolojik hedefleri karakterizasyonu için basit ve güçlü yöntemi olarak autoradiography