Bu eser RT. için İsviçre kardiyovasküler Vakfı'nın hibe (N ° 32016) tarafından desteklenmiştir

erkek C57BL/6J fareler (10 hafta, 25-30g, n = 60) Bu protokol için kullanılır. Hayvanlar Fransızca Bakanlığı tarım ve yüksek öğretim ve araştırma tarafından formüle yönergelere uygun olarak insana ilişkin bakım almak ve tüm yordamları 24 Kasım 1986 uygun olarak Avrupa Topluluğu Konsey Yönergesi gerçekleştirilir () 86/609/EEC) ve Fransız yasaları. Protokol tarafından kabul edildi &#34; bölgesel Etik Komitesi hayvan deney CREMEAS için &#34; (#2016092816207606).
 1. cerrahi için hazırlık <ol><li>gıda (için ayrıntıları bakın malzemeler tablo) ile standart kafeslerde 12 h/12 h açık/koyu döngüsü üzerinde hayvan tesiste geldikten sonra bir hafta için fareler korumak ve su kullanılabilir reklam libitum.</li>
	<li>İşlem gününde fareler bireysel kafeslerde anestezi, indüksiyon öncesinde birkaç dakika hayvan için herhangi bir ek stres önlemek için yerleştirin. Ameliyattan önce gün tüm cerrahi aletler sterilize.</li>
	<li>İçi peritoneally ketamin (51.4 mg/kg) ve serum fizyolojik çözümde seyreltilmiş xylazine (3.3 mg/kg) karışımı tek bir doz enjekte (% 0.9 NaCl).</li>
	<li>Ayak geri çekilme refleks yokluğunda tarafından anestezi derinliği emin olun.</li>
	<li>Boyun ve göğüs hayvan satın alabileceğiniz bir ustura ile tıraş ve traş alanının % 70 alkol ile dezenfekte.</li>
	<li>Hayvan sırtüstü bir temiz cork çalışma defterinde yerleştirin ve pençeleri yapışkan bant ile düzeltmek.</li>
</ol> 2. Ameliyat <ol><li>steril cerrahi tekniğin yordamlarda kullanılan. Kendiliğinden nefes içinde hayvan, göğüs kemiği ( şekil 1) göstermek supra sternal çentik orta göğüs bir 11-bıçak bıçak ile bir boyuna servikal Ensizyon 10 mm gerçekleştirmek.</li>
	<li>Tiroid iğne bağı 4/0 monofilament polipropilen kalış dikiş Crile ahşap ile ileterek geri çekmek ve bu çalışma pedi için bant.</li>
	<li>Açık açık önceden trakeal kasları Trakea ortaya çıkarmak için mikro-cerrahi Forseps ile ayırın.</li>
	<li>Slayt hafifçe yumuşak uçlu kavisli Mikro cerrahi forseps kapalı jaws ile trakea ve göğüs kemiği arkasında.</li>
	<li>Tarafından dikkatle açılış ve kapanış düz uçlu eğri mikrocerrahi forseps çene altında önceden trakeal kasları ve plevra uzaklaşmaya göğüs kemiği arkasında bir künt diseksiyon gerçekleştirmek.</li>
	<li>Sağ supra-klavikular kasları düz uçlu düz Mikro cerrahi Forseps ile tutun ve hayvan göğsü yavaşça çekin.</li>
	<li>Kemik nipper göğüs kemiğinin altında alt çene slayt ve bir 3-4 mm üst kısmi yöntemdir ( Şekil 2) gerçekleştirin. Doğrudan alt kısmında biraz sola doğru mini yöntemdir.</li>
	<li>7/0 monofilament polipropilen kalış dikiş üzerinden içinde için dışında bir mikro-cerrahi iğne bağı kullanarak mini yöntemdir her tarafında ikinci interkostal uzayda geçmektedir. İnterkostal ve internal torasik damarları veya plevra için yaralanmayı önlemek için costo sternal açı yakın kal.</li>
	<li>7/0 monofilament polipropilen kalış dikiş her tarafında kullanarak göğüs kenarları yaymak ve bunları düzeltmek için çalışma pedi yapışkan bant ile.</li>
	<li>Yavaşça hareket bir kenara önceden trakeal kaslar, mediastinal yağlı ve yumuşak uçlu timus kullanarak eğri aort düşük güç büyütme (2-3 X) altında görselleştirmek için mikrocerrahi forseps ( şekil 3). Değil dokunma veya pnömotoraks gelişimini önlemek için parietal plevra zarar belirli kendine iyi bak.</li>
	<li>Aort altında yumuşak doku forseps ( şekil 4 A) bağlayarak açığa ve yavaşça onun jaws yayıldı. Aort altında yumuşak doku tünelde ikinci bağlama Forseps ile hafifçe açılış ve kapanış jaws yumuşak doku olarak hazırlayın.</li>
	<li>6/0 ipek ip göz sol aort altında tutulan ligasyon yardım ( şekil 4 B) boyunca dişli bir parçasını geçmek ve sağ el kökeni arasında düzenlenen forseps bağlayarak geri almak Şu innominate ve sol ortak Karotid arter ( şekil 5).</li>
	<li>5 mm uzunluğa 27'lik iğne kesmek ve Crile iğne bağı ile basarak her iki ucu künt. Düz uçlu düz Mikro cerrahi Forseps ile aort ( şekil 6) yanında körelmenin 27'lik iğne yerleştirin ve dikiş iğne ve aort damarı şu innominate ve sol ortak karotis arasında rahatça etrafında kravat iki bağlama forseps ( Şekil 7) kullanarak arterler. Rahatça dikişi bağlamak için bir ilk çift düğüm dört ek düğüm tarafından takip gerçekleştirin. Tüm deniz mili düz olduğundan emin olun.</li>
	<li>Sonra tüp ligasyonu, hızlı bir şekilde ama nazikçe 0.4 mm çap daralma elde etmek için iğne ve tekrarlanabilir enine 65-%70 aort daralma kaldırmak.</li>
	Hemostazın aort sternal kenarları ve önceden trakeal kaslar etrafında yumuşak doku <li>denetleyin. Her yerde kan sızmaya görülmektedir tekrar Emilebilen Kan durdurucu sargı gazlı bez koyun. 7/0 monofilament polipropilen kal sternal kenarları yaymak için kullanılan dikiş kaldır.</li>
	<li>Geçmek bir basit 6/0 monofilament polipropilen sütür ile bir mikro-cerrahi iğne bağı dışında için sol ikinci interkostal boşluk içinde ve o andan itibaren içinde için değil ikinci interkostal boşluk dışında. İnterkostal ve internal torasik damarları veya plevra için yaralanmayı önlemek için costo sternal açı yakın kal.</li>
	<li>Birlikte iğne bağı Crile ahşap ile 6/0 monofilament polipropilen sütür bağlayarak göğüs kenarları getirmek.</li>
	<li>Deri dikiş bir katmanda bir Crile ahşap ile iğne bağı çalıştıran bir 5/0 monofilament polipropilen ile yakın.</li>
	<li>Sham yordamı aynı daralma işlemi ama dikiş aort çevresinde ipe.</li>
</ol> 3. Ameliyat sonrası kurtarma <ol><li>hayvanlar çok yakından izlemek. fare için bireysel bir kafes aktarım ve yüzükoyun sígara yerleştirin.</li>
	<li>İzin ver bir ısınma ışık altında kadar tamamen kurtarmak için fareyi uyanık (az 1 anestezi inducing sonra h).</li>
	<li>Ameliyat sonrası analjezi için 0,1 mg/kg buprenorfin intraperitoneally enjekte. gösterildiği gibi ilk üç gün boyunca yineleyin Subkutan Enjeksiyon 0.1 mg/kg buprenorfin her 8 h.</li>
	<li>(Maksimum kafes 3 fare) ve en az 2 fareler kafesi başına standart kafeslerde işletilen fareler yer.</li>
</ol> 4. Kalp hasat <ol><li>fare ketamin bir çözüm ile analiz günü, ötenazi 300 mg/kg ve xylazine 20 mg/kg mayi enjeksiyonla serum içinde.</li>
	<li>İnferior vena kava kandan ilk hasat ve aynı hattı üzerinden 5 mL serum fizyolojik 2.6 mm EDTA çözeltisi enjekte.</li>
	<li>Kalp hasat, Kulakçık kaldırmak ve kalp (sol ve sağ ventrikül Kulakçık olmadan) ağırlık.</li>
	<li>Sola doğru ventr ayırmak.icle sol ventrikül bölümüne kalan septum ile. Her iki doku örnekleri tartmak ve onları sıvı azot içinde dondurma.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiac+cachexia.">Animal models of cardiac cachexia.</a> Int. J. Cardiol. 219 (15), 105-110 (2016).</li><li>Tarnavski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+surgical+models+in+cardiovascular+research.">Mouse surgical models in cardiovascular research.</a> Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).</li><li>Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., Ardehali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction:+a+model+to+study+heart+failure+in+small+animals.">Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals.</a> Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. , 164-169 (2014).</li><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure.+Development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present.</a> Circ. Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).</li><li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy.">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li><li>Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+response+to+pressure+overload+in+129S1/SvImJ+and+C57BL/6J+mice:+temporal-+and+background-dependent+development+of+concentric+left+ventricular+hypertrophy.">Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292 (5), 2119-2130 (2007).</li><li>Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+blood+pressure+and+morphological+traits+in+cardiovascular-related+organs+in+13+different+inbred+mouse+strains.">Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains.</a> J. Appl. Physiol. 97 (1), 369-376 (2004).</li><li>Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction+in+mice.">Transverse aortic constriction in mice.</a> J. Vis. Exp. (38), (2010).</li><li>Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+invasive+aortic+banding+in+mice:+effects+of+altered+cardiomyocyte+insulin+signaling+during+pressure+overload.">Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 285 (3), 1261-1269 (2003).</li><li>Faerber, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+heart+failure+by+minimally+invasive+aortic+constriction+in+mice:+Reduced+peroxisome+proliferator-activated+receptor+&#978;+coactivator+levels+and+mitochondrial+dysfunction.">Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: Reduced peroxisome proliferator-activated receptor &#978; coactivator levels and mitochondrial dysfunction.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (2), 492-500 (2011).</li><li>Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IKK-&#946;+inhibition+prevents+adaptive+left+ventricular+hypertrophy.">IKK-&#946; inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy.</a> J. Surg. Res. 178 (1), 105-109 (2012).</li><li>Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetic+mRNA+profiling+in+a+rat+model+of+left+ventricular+hypertrophy+reveals+early+expression+of+chemokines+and+their+receptors.">Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors.</a> PLoS ONE. 11 (8), 0161273 (2016).</li><li>Liao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+LV+hypertrophy+and+function+in+aortic-banded+mice:+necropsy+validation.">Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (5), 1703-1708 (2002).</li><li>Stansfield, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+model+to+independently+study+regression+of+ventricular+hypertrophy.">Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy.</a> J. Surg. Res. 142 (2), 387-393 (2007).</li><li>Beetz, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ablation+of+biglycan+attenuates+cardiac+hypertrophy+and+fibrosis+after+left+ventricular+pressure+overload.">Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 101, 145-155 (2016).</li></ol>

Yazarlar hiçbir ifşa etmek çıkar çatışması var.

Bu iletişim kuralının amacı farelerde minimal invaziv transvers aort daralma için cerrahi teknik bir adım adım örnek sunmaktır. Transvers aort daralma farelerde ayrıntılı teknik açıklama diğer yazarlar2,8tarafından bildirilmiştir. Ancak, bu müfettişler ameliyat entübasyon ve havalandırma hayvanların aşağıdaki. Entübasyon-havalandırma ek bir adım kullanımı karmaşıklık ve tüm prosedürü süresini artırır ve genel stres hayvan maruz kalmaktadır. Bu nedenlerden dolayı minimal invaziv transvers aort daralma kavramı biraz ilgi aldı. Farelerde minimal invaziv transvers aort daralma sol ventrikül hipertrofisi ve ilerlemesi için kalp yetmezliği9,10,11ikna etmek için kullanılır. Bu çalışmalar sol ventrikül hipertrofisi ve kalp yetmezliği genesis dahil yolları, ancak Cerrahi teknik9,10,11açıklaması odaklan.
Bu protokol için minimal invaziv TAC farelerde Basitleştirilmiş ve tekrarlanabilir tekniği ayrıntılarda rapor. Yetenekli bir cerrah daralma işlem 20 dakika içinde ve (olmadan sütür bağlama) sahte işlem 15 dakika içinde yapabilirsiniz. Bizim ilk teknik prova sırasında önemli bir araç, tüp ligasyonu yardım, çok düşük bir operatif mortalite % 1.7 izin giriş bulduk. Bu olumlu operatif mortalite % 4 tarafından Rockman rapor karşılaştırır et. al. 5, Liao tarafından %3.7 et al. 13 ve %2.7 Stansfield tarafından et al14. , Gözlem süresi kadar 28 gün için daha fazla, aynı zamanda bir çok düşük geç post-operatif mortalite % 1.7 gösterir. Yine, bu iyi tarafından Rockman rapor geç mortalite karşılaştırır et al (% 10)5, Liao et al (% 19)13 ya da Stansfield et al (% 2,6)14.
Aort altında geçiş tüm prosedürü en önemli adımdır. Bu adımın tekrarlanabilirlik Hu ve ev yapımı tel ile bir tuzak sonunda şu innominate ve sol ortak Karotid arter9arasında aort altında origin'i eskiden iş arkadaşları tarafından ne de konumlandırılmış Tarnavski tarafından açıklanmayan yapıldı. 7/0 ipek yakalamak için artan aort altında medial taraftan kıvrımlı pensler karşı tarafta dikiş at ve altında aort2taşıyın. Bizim teknikte kullanılan ligasyonu yardım aort yırtığını düşük riski ile standart ve tekrarlanabilir bir manevra sağlar.
Diğer belirleyici adım yordam için kravat verimli bir şekilde azaltmak için 27'lik iğne ve homojen aort Lümen üzerinde uygulanan gerilim olduğunu. Öncelikle, dikiş aort çevresinde düzgün ve tekrarlanabilir gerilim uygulayarak yardım bağlama forseps kullanın. Dikişi uygun yerleşimini kalp ve aort hasat sırasında doğrulanır. Andersen ve iş arkadaşlarınızla grup uygun yerleşimini Karotid arter Doppler sinyallerinin değerlendirilmesi önce ve sonra yerleşim aort grup11tarafından doğrulanmadı. Doppler hız oranı sağdan sola Karotid arter11iki katına zaman onların raporunda, yeterli bantlama kabul edildi. TAC verimliliğini tarafından indüklenen sol ventrikül hipertrofisi derecesini ölçmek seçtik bizim teknik olarak bantlı yordamı karşılaştırarak doğrulamak için sahte hayvanlar için karşılaştırıldığında, beri bu değil gerektiren yordamı herhangi bir artış süresi veya takıma giren anestezi hayvanlar. Bizim teknikte, sol ventrikül hipertrofisi ve bantlama uygun yerleşim derecesini deneme sonunda denetlenir. Bizim tekniği ile sol ventrikül hipertrofisi derecesini olumlu 3 hafta TAC fareler15dakika içinde takip diğer müfettişler tarafından rapor sonuçları ile karşılaştırır. Buna ek olarak, bizim şeritli hayvanlarda gözlenen vücut ağırlığı için kalp oranı düşük varyasyonu için kravat uygulanan gerilim düşük dalgalanma kanıtlıyor.
Sonuç olarak, entübasyon-havalandırma kaçınma bu protokol için sunulan bir güvenilir ve tekrarlanabilir model farelerde minimal invaziv TAC bizim tekniği sağlar. Bu model hayvanlar üzerinde koymak küresel zorlanma azaltır ve zaman ve maliyet tasarrufu için TAC entübasyon-havalandırma hayvanların kullanarak karşılaştırılır. Bu yordamı operatif ve geç mortalite oranları çok düşüktür ve bu teknik sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için seçim yöntemlerden birini farelerde olun.

Son yıl içinde kalp yetmezliği çalışmanın içinde gerçekleştirilmiştir canlı hayvan modelleri1. Kalp yetmezliği büyük hayvan modellerle karşılaştırıldığında, küçük hayvan modelleri çok sayıda potansiyel avantajları vardır. Konut ve bakım daha düşük maliyetlerle, küçük hayvan modelleri daha az karmaşık gerekli İmkanlar2nedeniyle daha fazla araştırmacılar için erişilebilir.
Fare kalp yetmezliği modelleri çoğu fare modelleri aynı avantajları sunmaktadır. Ayrıca için indirimli konut maliyeti3, fare modelleri ilgili transgenik ve nakavt (KO) suşlar kullanılabilirliğini yarar. Hücre türüne özgü, indüklenebilir KO veya transgenik stratejileri olasılığı fare kalp yetmezliği patogenezi okumaya ve yeni tedavi rejimleri3tanımlamak denemek için paha biçilmez bir araç olun.
Fare arasında kalp yetmezliği modellerinin4kullanılmakta, hangi ilk Rockman5 tarafından tanımlanmıştır aort enine daralma (TAC) basınç aşırı kaynaklı sol ventrikül hipertrofisi (SVH)1 üretmek için tercih edilen bir modeldir , 3. bu modelin en büyük avantajı stratifikasyon SVH2izin yeteneğidir, ventrikül yaptı, ancak yanıt TAC olarak remodeling farklı fare suşları arasında değişkendir. Özellikle, C57BL/6 fare hızlı LV genişleme diğer suşların4,6,7ile ortaya çıkmaz TAC sonra geliştirmek.
TAC nedenleri ile elde hipertansiyon ani başlangıçlı bir hızla SVH4gelişimi oransal nişan farmakolojik veya moleküler müdahalelerin etkinliğini incelemek için izin yaklaşık % 50 artış LV kütle 2 hafta içinde. TAC tarafından şiddetli hipertansiyon akut indüksiyon tam olarak ilerici sol ventrikül hipertrofisi çoğaltmak ve remodeling aortik stenoz veya arteriyel hipertansiyon klinik ortamda gözlenen. Yine de, bu modeli tanımlamak ve kalp yetmezliği4roman tedavi hedeflerini değiştirmek için birçok müfettişler tarafından kullanılır.
TAC farelerde gerçekleştirme SVH ve sonraki kalp yetmezliği2ikna etmek için kullanılan diğer teknikleri istenenden daha fazla cerrahi uzmanlık gerektirir. Çoğu yazarlar entübasyonda ve bu yordamı daha zorlu ve zaman alıcı yapar ve hayvan için cerrahi yük ekler hayvan2,8, havalandırma tarafından bu yordamı gerçekleştirin. Sadece birkaç müfettişler yaptıkları çalışmada cerrahi işlem9,10,11kısa başvuru ile minimal invaziv TAC kullanmışlardır.
Bu iletişim kuralının amacı adım adım tarif etmektir kritik yordamının aşamalarını vurgulayarak farelerde minimal invaziv transvers aort daralma Basitleştirilmiş ve kullanıcı dostu tekniği. Anahtar adımları takip ederek, bir kolayca bu teknik gerçekleştirebilirsiniz.

<table width="556">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:216px;height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td style="width:108px;">Olympus</td>
			<td style="width:171px;">SZX2-TR30</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Razor</td>
			<td>Rowenta</td>
			<td>Nomad TN3650FO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Sutures:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 7/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>BV-1X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 6/0</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>C0862061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Silk 6/0 ligature&#160;</td>
			<td>FST</td>
			<td>18020-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 4/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 5/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Drugs:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ketamin</td>
			<td>Merial</td>
			<td>Imalg&#232;ne 1000, LBM154AD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun 2%, KP09PPC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Buprenorphine</td>
			<td>Ceva</td>
			<td>Vetergesic, 072013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Instruments:&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bone nippers</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>16101-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ligation aid</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>18062-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tying forceps</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>18026-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Needle holder Crile-Wood</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>12003-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery forceps&#160;</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery forceps&#160;</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue forceps</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery needle holder</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>12076-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery scissors</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>91501-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Mayo scissors</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>14511-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">11-blade knife</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>10011-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">RNA extraction and qPCR:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TriReagent</td>
			<td>Euromedex</td>
			<td>TR-118-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rneasy Mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Qubit Fluorimetric RNA assay</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10034622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA 6000 Nano kit</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5067-1511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">High Capacity cDNA kit</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10400745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Master Mix</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10157154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman BNP primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01255770_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:216px;height:20px;">Taqman ANP primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01255747_g1&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman ACE primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00802048_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Col1a1 primers&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00801666_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman TGFb primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01178820_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Gapdh primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm99999915_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ABIPrism&#160; Thermocycler</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>7000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Software:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>Prism 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Animal food</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="width:216px;height:27px;">Complete diet for adult rats/mice</td>
			<td style="width:108px;">Safe</td>
			<td style="width:171px;">UB220610R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy

Transvers aort daralma (TAC) farelerde en sık kullanılan cerrahi teknikler basınç aşırı kaynaklı deneysel incelenmesi için kalp yetmezliği için sol ventrikül hipertrofisi (SVH) ve ilerlemesi biridir. Bildirilen araştırmalar çoğunluğu olarak, bu yordamı entübasyon ve havalandırma zorlu ve zaman alıcı işler ve hayvan için cerrahi yükü ekler hayvan ile gerçekleştirilir. Bu iletişim kuralının amacı olmadan entübasyon minimal invaziv TAC basitleştirilmiş bir teknik ve havalandırma farelerin tarif etmektir. Tekniğin önemli adımlar, amacıyla düşük mortalite ve SVH inducing içinde yüksek verim elde etmek için vurgulanmaktadır.
Erkek C57BL/6 fare (10 haftalık, 25-30 g, n = 60) ketamin ve xylazine karışımı tek bir mayi enjeksiyon ile anestezi. Bir nefes kendiliğinden hayvan 3-4 mm üst kısmi yöntemdir takip 6/0 ipek sütür ligasyonu yardım deliğinden dişli bir parçasını aort altında geçti ve körelmenin 27 lik bir iğne üzerinde bağlı. Sham işletilen hayvan aynı cerrahi hazırlık yapıldı ama aort daralma olmadan. SVH inducing içinde yordam etkinliğini kalp/beden ağırlık oranı önemli bir artış tarafından belgelendirilmiştir. Bu oran, 3, 7, 14 ve 28 gün ameliyat sonrası elde edilir (n = 6-10 her grup ve her zaman puan). Bizim tekniği kullanarak, 28 gün boyunca 7 gün üzerinden sahte hayvanlara göre Tac SVH görülmektedir. Operatif ve geç (28 gün içinde) Scotlan %1,7 çok düşük her ikisi de vardır.
Sonuç olarak, minimal invaziv TAC farelerde bizim düşük maliyetli tekniği çok düşük operatif ve ameliyat sonrası Scotlan taşır ve SVH inducing çok etkilidir. Operatif prosedür basitleştirir ve hayvan koymak zorlanma azaltır. Kolayca bu protokol için açıklanan kritik adımları izleyerek gerçekleştirilebilir.

Operatif ve geç kalma Operatif hayatta kalma çok yüksekti %98,3 (59 dışarı-in 60) için tüm diziyi mi (TAC ve sham çalışan hayvanlar). Sahte işlem için rendelenmiş bir fare kanayan bir komplikasyon nedeniyle sadece operatif ölüm oldu. %98,3 (59 58 dışarı) tarafından 28 gün gözlem süresi boyunca ameliyat sonrası hayatta kalma da mükemmeldi. Sadece geç ameliyat sonrası ölüm bir TAC fare muhtemelen kalp kökenli (D) 16, gününde meydana gelen.
Doğrulama tekniği Sunulan çok güvenilir ve tekrarlanabilir bir tekniktir. Şu innominate ve sol ortak Karotid arter arasında dikiş doğru yerleşimini TAC geçiren tüm hayvanlarda doku hasat sırasında teyit edildi.
Sol ventrikül hipertrofisi ikna etmek için teknik etkinliğinin belirlenmesi kalp ağırlık/beden ağırlık oranları (HW/BW, mg/g) 3, 7, 14 ve 28 gün ameliyat sonrası tarafından doğrulandı. HW Kulakçık olmadan sol ve sağ ventrikül ağırlığıdır. HW/BW oranı anlamlı bir artış içinde şeritli ameliyat sonrası D7 sham gruplarına göre (4.9±0.2 karşı 4.1±0.05 mg/g, P &#60; 0,01) açık ve önemli ölçüde daha yüksek D28 kadar kaldı (5.8±0.3 karşı 4.1±0.1 mg/g, P &#60; 0.0001) Ameliyat sonrası (şekil 8). HW/BW oranı gözlenen artış beri tüm gözlem sırasında TAC ve sham çalışan hayvanlar arasında karşılaştırılabilir kaldı sağ ventrikül/vücut ağırlık oranı sadece sol ventrikül/beden ağırlık oranı (Şekil 9A) bir artış nedeniyle oldu dönem (9 şekilB).
Ayrıca, sol ventrikül dokusunda kalp hipertrofisi biyolojik mRNA ifadesi yukarıda açıklanan12olarak ölçülür. D14, mRNA ifade brain natriüretik protein (BNP), Atriyal natriüretik protein (ANP), Anjiyotensin dönüştürücü enzim (ACE), kollajen 1a1, (Col1a1) ve dönüştürme büyüme faktörü β (TGFß), aort bantlı önemli ölçüde daha yüksek karşılaştırıldığında Sham çalışan hayvanlar (şekil 10). Bu nedenle, gözlenen sol ventrikül hipertrofisi bizim TAC tekniği verimliliğini doğrular.
Ortalama ve standart hata ortalama değerlerden karşılaştırıldığında TAC ve sham arasında tek yönlü ANOVA eşleştirilmiş veri karşılaştırma için Bonferroni'nın post-hoc testi ardından kullanarak gruplandırır.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig1.jpg"> 
Resim 1 : Kesi. Deri orta göğüs kemiği supra sternal çentik üzerinde 10 mm kazıma ve tiroid kalış dikiş ile geri çekildi. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig2.jpg"> 
Resim 2 : Kemik nipper. Bu araç için bir 3-4 mm üst kısmi üstün mini-yöntemdir kemik bir kısa ve hassas kesim sağlar. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig3.jpg"> 
Şekil 3 : Pozlama. 7/0 ile sternal kenarlarının retraksiyon izleyen dikiş, aort şu innominate kal ve sol ortak Karotid arter nefes borusu ile birlikte sunulur. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig4.jpg"> 
Şekil 4 : A. Tying forseps. Bu forseps nazik ve künt diseksiyon göğüs kemiği arkasında ve aort çevresinde gerçekleştirmek gereklidir. B. tüp ligasyonu yardım. Bu hassas ve Atravmatik geçit aort TAC ve sham çalışan fareler hem de altında fark için anahtar araçtır. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig5.jpg"> 
Şekil 5 : Aortik arch. altında geçiş 6/0 ipek ip bir parçasını ligasyonu yardımların kullanılması aort altında geçti ve şu innominate ve sol ortak Karotid arter arasında yerleştirilir. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig6.jpg"> 
Şekil 6 : Birleştirmesini için hazırlık. Kısa segment körelmenin 27'lik iğne 2-3 mm aort yerleştirilir. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig7.jpg"> 
Şekil 7 : Transvers aort daralma. İpek dikiş iğne ve aort bağlama forseps kullanarak şu innominate ve sol ortak Karotid arter arasında üzerinde bağlıdır. Düğüm daha iyi yapacak çünkü yerine polipropilen sütür ipek aort ligasyonu için tercih edilir. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig7large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig8.jpg"> 
Şekil 8 : Transvers aort daralma doğrulanmasını. Bizim minimal invaziv transvers aort daralma tarafından kalp hipertrofisi indüksiyon kalp ağırlık/beden ağırlık oranı şeritli (siyah çubuklar) içinde önemli artış işletilen sham (beyaz çubukları) fareler karşılaştırıldığında gösterilmiştir. Kalp hipertrofisi zaten ameliyattan sonra D7 var ve giderek D28 kadar zamanla artar (n = 6-10 başına grup. ** P &#60; 0,01, *** P &#60; 0,001, *** P &#60; 0.0001). Veri ± SEM (hata çubukları) demek gibi sunulmaktadır. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig8large.jpg" target="_blank">Savunma</a>se, bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için burayı tıklatın.
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig9v2.jpg"> 
Şekil 9 : Sol (A) ve (B) ventrikül sağ / vücut ağırlık oranı. Sağ ventrikül/vücut ağırlık oranı Tac (siyah çubuklar) sham işletilen (beyaz çubukları) hayvanlar için karşılaştırıldığında benzer kalırken gözlem süresi boyunca, sol ventrikül/beden ağırlık oranı artar. Bu sol ventrikül hipertrofisi sağ ventrikül yapılmaksızın onaylar ve bizim teknik doğrulanmasını güçlendirir (n = 6-10 başına grup. ** P &#60; 0,01, *** P &#60; 0,001, *** P &#60; 0.0001). Veri ± SEM (hata çubukları) demek gibi sunulmaktadır. <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig9v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig10.jpg"> 
Şekil 10 : BNP-mRNA ifade. beyin natriüretik protein (BNP), Atriyal natriüretik protein (ANP), Anjiyotensin dönüştürücü enzim (ACE), kollajen 1a1 mRNA ifade (Col1a1) ve dönüştürme büyüme faktörü β (TGFß), aort bantlı (siyah bar) kalp hipertrofisi için pozitif kontrol vs sham hayvanlar (beyaz çubuğu) (n = 6 grup başına) D14. İfade 2 olarak hesaplanan(-ΔCt) Kalibratör Gapdh referans gen mRNA düzeyini nerede. Veri ± SEM (hata çubukları) demek gibi sunulmaktadır. * P &#60; 0,05, ** P &#60; 0,01, *P &#60; 0,001 sham grubuna göre (t-test). <a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig10large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy at JoVE.com

Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

Bu iletişim kuralının amacı adım adım tarif etmektir minimal invaziv transvers aort daralma (TAC) farelerde tekniği. Entübasyon ve yaygın olarak kullanılan standart prosedür için zorunlu olan havalandırma ortadan kaldırılması, minimal invaziv TAC operatif prosedür basitleştirir ve hayvan koymak zorlanma azaltır.

Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure ...

technique-minimally-invasive-transverse-aortic-constriction-mice-for

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

24.1K Görüntüleme.  University of Zurich. Bu iletişim kuralının amacı adım adım tarif etmektir minimal invaziv transvers aort daralma (TAC) farelerde tekniği. Entübasyon ve yaygın olarak kullanılan standart prosedür için zorunlu olan havalandırma ortadan kaldırılması, minimal invaziv TAC operatif prosedür basitleştirir ve hayvan koymak zorlanma azaltır.

Video: Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart failure. Here, we describe a detailed surgical procedure for creating pressure overload and cardiac hypertrophy in rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. After anesthesia, the trachea is intubated by inserting a cannula through a half way incision made between two cartilage rings of trachea. Then a skin incision is made at the level of the second intercostal space on the left chest wall and muscle layers are cleared to locate the ascending portion of aorta. The ascending aorta is constricted to 50&#8211;60% of its original diameter by application of a small sized titanium clip. Following aortic constriction, the second and third ribs are approximated with prolene sutures. The tracheal cannula is removed once spontaneous breathing was re-established. The animal is allowed to recover on the heating pad by gradually lowering anesthesia. The intensity of pressure overload created by constriction of the ascending aorta is determined by recording the pressure gradient using trans-thoracic two dimensional Doppler-echocardiography. Overall this protocol is useful to study the remodeling events and contractile properties of the heart during the gradual onset and progression from compensated cardiac hypertrophy to heart failure stage.

We describe a stepwise procedure for creating pressure overload and left ventricular hypertrophy in Wistar rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. This model is extensively used for studying remodeling changes during cardiac hypertrophy and for identifying and evaluating strategies for regression of such changes.

Basınç Aşırı Kardiyak hipertrofi Modeli Oluşturma Ratlarda Aort daralma, Artan

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Tıp

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

Ekokardiyografik Imaging tarafından Enine Aort Konstrüksiyon Mouse Modeli Kardiyak Morfolojik Değerlendirilmesi ve Fonksiyonel Değişiklikler

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

Farelerde Minimal İnvaziv Enine Aort Konstrüksiyon

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an increased use of mouse models in orthopedic research was noted, most probably because mouse models offer a large number of genetically-modified strains and special antibodies for the analysis of molecular mechanisms of fracture healing. To control the biomechanical conditions, well-characterized osteosynthesis techniques are mandatory, also in mice. Here, we report on the design and use of a closed bone healing model to stabilize femur fractures in mice. The intramedullary screw, made of medical-grade stainless steel, provides through fracture compression an axial and rotational stability compared to the mostly used simple intramedullary pins, which show a complete lack of axial and rotational stability. The stability achieved by the intramedullary screw allows the analysis of endochondral healing. A large amount of callus tissue, received after stabilization with the screw, offers ideal conditions to harvest tissue for biochemical and molecular analyses. A further advantage of the use of the screw is the fact that the screw can be inserted into the femur with a minimally invasive technique without inducing damage to the soft tissue. In conclusion, the screw is a unique implant that can ideally be used in closed fracture healing models offering standardized biomechanical conditions.

This protocol describes a minimally invasive osteosynthesis technique using an intramedullary screw for standardized stabilization of femur fractures, which can be used to analyze endochondral bone healing in mice.

Endochondral standart biyomekanik koşullar altında farelerde şifa kırık çözümlemek için minimal invaziv bir Model

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to perform a partial thoracotomy to visualize the transverse aortic arch. However, the surgical trauma caused by the thoracotomy in open-chest models changes the respiratory physiology as the ribs are dissected and left unattached after chest closure. To prevent this, we established a minimally invasive, closed chest approach via lateral thoracotomy. Herein we approach the aortic arch via the 2nd intercostal space without entering the chest cavities, leaving the mouse with a less traumatic injury to recover from. We perform this operation using standard laboratory settings for open chest TAC procedures with equal survival rates. Apart from maintaining physiological breathing patterns due to the closed chest approach, the mice seem to benefit by showing rapid recovery, as the less invasive technique appears to facilitate a fast healing process and to reduce immune response after trauma.

Here, we present a protocol of Transverse Aortic constriction (TAC) via a lateral thoracotomy. This technique is a minimally invasive, closed chest surgical procedure aiming to simulate pressure overload and heart failure in mice utilizing standard TAC laboratory settings.

Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, mice undergo RR upon removal of the aortic constriction. In this paper, we describe a step-by-step procedure to perform a minimally invasive surgical aortic debanding in mice. Echocardiography was subsequently used to assess the degree of cardiac hypertrophy and dysfunction during LV remodeling and RR and to determine the best timing for aortic debanding. At the end of the protocol, terminal hemodynamic evaluation of the cardiac function was conducted, and samples were collected for histological studies. We showed that debanding is associated with surgical survival rates of 70-80%. Moreover, two weeks after debanding, the significant reduction of ventricular afterload triggers the regression of ventricular hypertrophy (~20%) and fibrosis (~26%), recovery of diastolic dysfunction as assessed by the normalization of left ventricular filling and end-diastolic pressures (E/e&#39;&#160;and LVEDP). Aortic debanding is a useful experimental model to study LV RR in rodents. The extent of myocardial recovery is variable between subjects, therefore, mimicking the diversity of RR that occurs in the clinical context, such as aortic valve replacement. We conclude that the aortic banding/debanding model represents a valuable tool to unravel novel insights into the mechanisms of RR, namely the regression of cardiac hypertrophy and the recovery of diastolic dysfunction.

Here we describe a step-by-step protocol of surgical aorta debanding in the well-established mice model of aortic-constriction. This procedure not only allows studying the mechanisms underlying the left ventricular reverse remodeling and regression of hypertrophy but also to test novel therapeutic options that might accelerate myocardial recovery.

Kemirgenlerde Aort Debanding tarafından Sol Ventrikül Ters Tadilatı Eğitimi

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

Farelerde Sağ Ventrikül Sistemi ve Hipoksiye Bağlı Pulmoner Arteriyel Hipertansiyon için İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

Rekonstrüktif Mikrocerrahide İskemi-Reperfüzyon Hasarı Nın İnceleştirilmesinde Klinik Öncesi Sıçan Modeli

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Evaluation of Capnography Sampling Line Compatibility and Accuracy when Used with a Portable Capnography Monitor

Capnography is commonly used to monitor patient&#8217;s ventilatory status. While sidestream capnography has been shown to provide a reliable assessment of end-tidal CO2 (ETCO2), its accuracy is commonly validated using commercial kits composed of a capnography monitor and its matching disposable nasal cannula sampling lines. The purpose of this study was to assess the compatibility and accuracy of cross-paired capnography sampling lines with a single portable bedside capnography monitor. A series of 4 bench tests were performed to evaluate the tensile strength, rise time, ETCO2 accuracy as a function of respiratory rate, and ETCO2 accuracy in the presence of supplemental O2. Each bench test was performed using specialized, validated equipment to allow for a full evaluation of sampling line performance. The 4 bench tests successfully differentiated between sampling lines from different commercial sources and suggested that due to increased rise time and decreased ETCO2 accuracy, not all nasal cannula sampling lines provide reliable clinical data when cross-paired with a commercial capnography monitor. Care should be taken to ensure that any cross-pairing of capnography monitors and disposable sampling lines is fully validated for use across respiratory rates and supplemental O2 flow rates commonly encountered in clinical settings.

The goal of this study was to evaluate the accuracy of capnography sampling lines used in conjunction with a portable bedside capnography monitor. Sampling lines from 7 manufacturers were evaluated for tensile strength, rise time, and ETCO2 accuracy as a function of respiratory rate or supplemental oxygen flow rate.

Taşınabilir Kapnografi Monitörü ile Kullanıldığında Kapnografi Örnekleme Hattı Uyumluluğunun ve Doğruluğunun Değerlendirilmesi

Capnography is commonly used to monitor patient&#8217;s ventilatory status. While sidestream capnography has been shown to provide a reliable assessment ...

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate cardiomyocyte hypertrophy and slow down progression to heart failure. For novices, however, the MHP model is usually quite difficult to establish because of the technical obstacles in ventilator operation, opening the chest repeatedly, and bleeding caused by debanding. To facilitate this model, to increase the surgical success rate and to reduce the incidence of bleeding, we switched to absorbable sutures for the first TAC combing with a ventilator-free technique. Using a 2-week absorbable suture, we demonstrated that this procedure could cause significant myocardial hypertrophy in 2 weeks; and 4 weeks after surgery, myocardial hypertrophy was almost completely regressed to the baseline. Using this protocol, the operators could master the MHP model easily with a lower operation mortality.

This protocol presents an improved method to obtain transient myocardial hypertrophy with absorbable suture, simulating left ventricular hypertrophy decrease after removing pressure overload. It could be valuable for the studies on myocardial hypertrophic preconditioning.