この仕事にしたスイスの心血管系財団の助成金 (N ° 32016) 支えられ

男性 c57bl/6 j マウス (10 週間、25 ~ 30 g、n = 60)、このプロトコルで使用されます。動物は、農学部と高等教育と研究のフランスの省によって策定されたガイドラインに準拠して人道的なケアを受けるし、1986 年 11 月 24 日の欧州共同体理事会指令に従ってすべてのプロシージャを実行 (86/609/EEC) およびフランスの法律。プロトコルによって承認された、&#34; 地域倫理委員会動物実験 CREMEAS &#34; (#2016092816207606).
 1 です手術に備えて <ol><li>12/12 h ダーク/ライト サイクル (詳細資料の表を参照) のための食糧との標準的なケージで飼養施設到着後 1 週間のマウスを維持し、水の利用可能な 広告。自由.</li>
	<li>操作の日にマウス個々 のケージ、麻酔導入前に数分動物に追加のストレスを避けるために。手術の前日すべて手術器具を滅菌します</li>。
	<li>腹腔内ベンゼン ケタミン (51.4 mg/kg) およびキシラジン (3.3 mg/kg) 食塩水で希釈し混合物の単回投与を注入 (0.9 %nacl).</li>
	<li>つま先リトリート反射の不在によって麻酔の深さを確認してください</li>。
	<li>首と動物の胸を市販のカミソリで剃るし、剃毛エリア 70% アルコールで消毒します</li>。
	<li>動物を配置するには、臥位きれいなコルク作業パッドと粘着テープで足を修正します</li>。
</ol> 2。手術 <ol><li>無菌手技が手順全体で使用されます。自発的に呼吸で動物、胸骨 ( 図 1) を公開するために中間の胸にスープラ胸骨切痕から 11 刃ナイフで縦正中頸部切開 10 mm 以上を実行します</li>。
	<li>Crile 木 4/0 モノフィラメント ポリプロピレン宿泊縫合針ホルダーを渡すことによって、甲状腺を撤回し、作業パッドをテープします</li>。
	<li>気管を明らかにするマイクロ手術用鉗子でにべもなくあらかじめ気管の筋肉を区切ります</li>。
	<li>優しく滑らかな先端スライド閉じた顎を持つマイクロ手術用鉗子の湾曲した気管上、胸骨の後ろにします</li>。
	<li>によって慎重に滑らかな先端カーブタイプ顕微鏡鉗子の顎の開閉を実施済み気管の筋肉の下と、胸膜を離れて移動する胸骨の後ろに鈍的切離</li>。
	<li>滑らかな先端ストレート マイクロ手術鉗子で右スープラ鎖骨の筋肉を持ち、動物の優しく胸を引き出します</li>。
	<li>は、胸骨下骨ニッパーの下の顎をスライドさせ、3-4 mm の上部の部分胸骨切開 ( 図 2) を実行します。左に向かって少しミニ胸骨の下の部分を直接します</li>。
	<li>は、マイクロ手術針ホルダーを使用してミニ胸骨の両側に第 2 肋間スペースを 7/0 モノフィラメント ポリプロピレン宿泊縫合から内部に外を通過します。肋間と内部胸部血管または胸膜への損傷を避けるために肋骨胸骨角の近くに滞在します</li>。
	<li>両側 7/0 モノフィラメント宿泊ポリプロピレン縫合糸を使用して胸骨端を広げるし、粘着テープで作業台に固定します</li>。
	<li>ゆっくりの移動は、さておきあらかじめ気管筋、縦隔脂肪と低倍率 (2-3 X) 下大動脈弓を可視化する顕微鏡下に鉗子胸腺が滑らかな先端を使用して ( 図 3)。触れたり気胸の開発を防ぐために壁側胸膜を損傷しないよう注意します</li>。
	<li>は、鉗子 ( 図 4 A) を結ぶことによって大動脈のアーチの下の軟部組織を公開し、その顎を優しく 。優しく軟部組織の中の顎の開閉により 2 番目の抱き合わせ鉗子で大動脈のアーチの下の軟部組織にトンネルを準備します</li>。
	<li>は、大動脈弓の下で左の手にて結紮援助 ( 図 4 B) の目に通して 6/0 絹糸を結紮のセグメントを渡すし、鉗子の起源の間右手で開催を結ぶことによってそれを取得右の腕、左総頚動脈 ( 図 5).</li>
	<li>は 27 ゲージの針を 5 mm の長さにカット、Crile 針ホルダーとそれらを押すことによって両端を鈍らせます。滑らかな先端ストレート マイクロ手術鉗子で大動脈弓 ( 図 6) の横にある鈍い 27 ゲージ針を置き、針と右腕と左総頸動脈の間に大動脈の周りにぴったりと縫合糸を結ぶ( 図 7) 2 つの抱き合わせ鉗子を用いた動脈。ぴったりと縫合糸を結ぶ、4 つ追加ノットに続いて初期の二重結び目を実行します。すべての結び目がフラットであることを確認してください</li>。
	<li>, 退院後すぐにでもやさしく 0.4 mm 径の狭小化を達成するために針と削除再現横 65-70% 大動脈狭窄</li>。
	<li>は、胸骨端とあらかじめ気管の筋肉、大動脈弓周囲軟部組織の止血を確認します。吸収性止血ガーゼを入れてどこに血の滲みが観察されます。7/0 モノフィラメントポリプロピレン滞在胸骨端を広めるために使用される縫合糸削除します</li>。
	<li>は左第 2 肋間スペースの中に外からマイクロ手術針ホルダーに簡単な 6/0 モノフィラメント ポリプロピレン縫合を通過し、内部から右側第 2 肋間スペースの外に、です。肋間と内部胸部血管または胸膜への損傷を避けるために肋骨胸骨角の近くに滞在します</li>。
	<li>エッジをもたらす一緒に胸骨 Crile 木 6/0 モノフィラメント ポリプロピレン縫合糸を結ぶことによって針ホルダー</li>。
	<li>針ホルダー Crile 木と 1 つの層で縫合を実行 5/0 モノフィラメントポリプロピレンと皮膚を閉じます</li>。
	<li>同一の偽の手順を実行大動脈周囲縫合糸を結ぶことがなく、収縮操作します</li>。
</ol> 3。手術後の回復 <ol><li>動物を非常に密接に監視します個々 のケージにマウスを移動し、腹臥位。</li>。
	<li>許可まで完全に温暖化の光の下で回復するマウス覚醒 (麻酔を誘導した後 1 h 未満).</li>
	<li>術後鎮痛に対するブプレノルフィン 0.1 mg/kg を腹腔内注入します示されるように最初の 3 日のブプレノルフィンすべての 8 h の 0.1 mg/kg の皮下注射を繰り返します。</li>。
	<li>標準ケージ (檻あたり最大 3 マウス) とケージあたり最低 2 マウス操作マウスを配置します</li>。
</ol> 4。心の収穫 <ol><li>分析の日、ケタミンの溶液でマウスを安楽死させる 300 mg/kg とキシラジン 20 mg/kg 腹腔内投与による生理食塩水中で</li>。
	<li>下大静脈から血液をまず収穫し、同じラインを生理食塩水で 2.6 mm EDTA 溶液 5 mL を注入します</li>。
	<li>心を収穫、心房を削除および重量の心臓 (心房なし左と右心室).</li>
	<li>は右の ventr から左側を分離します。残りの左心室部分に隔壁を持つ icle。両方の組織のサンプルの重量を量るし、液体窒素で凍結します</li>。
</ol>

<ol>
	<li>Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiac+cachexia.">Animal models of cardiac cachexia.</a> Int. J. Cardiol. 219 (15), 105-110 (2016).</li><li>Tarnavski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+surgical+models+in+cardiovascular+research.">Mouse surgical models in cardiovascular research.</a> Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).</li><li>Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., Ardehali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction:+a+model+to+study+heart+failure+in+small+animals.">Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals.</a> Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. , 164-169 (2014).</li><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure.+Development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present.</a> Circ. Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).</li><li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy.">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li><li>Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+response+to+pressure+overload+in+129S1/SvImJ+and+C57BL/6J+mice:+temporal-+and+background-dependent+development+of+concentric+left+ventricular+hypertrophy.">Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292 (5), 2119-2130 (2007).</li><li>Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+blood+pressure+and+morphological+traits+in+cardiovascular-related+organs+in+13+different+inbred+mouse+strains.">Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains.</a> J. Appl. Physiol. 97 (1), 369-376 (2004).</li><li>Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+aortic+constriction+in+mice.">Transverse aortic constriction in mice.</a> J. Vis. Exp. (38), (2010).</li><li>Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+invasive+aortic+banding+in+mice:+effects+of+altered+cardiomyocyte+insulin+signaling+during+pressure+overload.">Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 285 (3), 1261-1269 (2003).</li><li>Faerber, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+heart+failure+by+minimally+invasive+aortic+constriction+in+mice:+Reduced+peroxisome+proliferator-activated+receptor+&#978;+coactivator+levels+and+mitochondrial+dysfunction.">Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: Reduced peroxisome proliferator-activated receptor &#978; coactivator levels and mitochondrial dysfunction.</a> J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (2), 492-500 (2011).</li><li>Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IKK-&#946;+inhibition+prevents+adaptive+left+ventricular+hypertrophy.">IKK-&#946; inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy.</a> J. Surg. Res. 178 (1), 105-109 (2012).</li><li>Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetic+mRNA+profiling+in+a+rat+model+of+left+ventricular+hypertrophy+reveals+early+expression+of+chemokines+and+their+receptors.">Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors.</a> PLoS ONE. 11 (8), 0161273 (2016).</li><li>Liao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+assessment+of+LV+hypertrophy+and+function+in+aortic-banded+mice:+necropsy+validation.">Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (5), 1703-1708 (2002).</li><li>Stansfield, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+model+to+independently+study+regression+of+ventricular+hypertrophy.">Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy.</a> J. Surg. Res. 142 (2), 387-393 (2007).</li><li>Beetz, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ablation+of+biglycan+attenuates+cardiac+hypertrophy+and+fibrosis+after+left+ventricular+pressure+overload.">Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 101, 145-155 (2016).</li></ol>

著者はある利益相反を開示します。

このプロトコルの目的は、マウスにおける低侵襲の横方向の大動脈狭窄に対する手技の順を追って図を提示することです。マウスで横方向の大動脈狭窄の詳細な技術的な説明は、他の著者2,8によって報告されています。ただし、これらの調査官は、手術を行う次の挿管や動物の換気。挿管換気の追加手順の使用が増加の複雑さと全体のプロシージャの持続期間および動物の世界のストレスにさらされています。これらの理由から、低侵襲の横方向の大動脈狭窄の概念は、いくつかの注目を受けています。マウスにおける低侵襲横大動脈狭窄、左心室肥大と心不全9,10,11にその進行を誘導するために使用されます。これらの研究は、手術手技9,10,11の説明ではなく左心室肥大と心不全の成因に関与する経路に集中します。
このプロトコル マウスにおける低侵襲の TAC の簡体字で再現可能な手法の詳細に行った。熟練した外科医は、20 分で収縮操作と 15 分 (縫合糸を結ぶ) せずシャムの操作を行うことができます。私たちの最初の技術的な証拠の中に、重要な手段、結紮援助 1.7% の非常に低い手術死亡率を許可されての導入を分かった。これはロックマンによって報告される 4% の手術死亡率に遜色 et。アル。5、遼 3.7% の et al.13 Stansfield 2.7% の et al14。さらに、観察期間を 28 日に、また 1.7% の非常に低い後期術後死亡率を示しています。再び、これはロックマンによって報告された後期の死亡によく比較 et al (10%)5遼らアル(19%)13または Stansfield et al (2.6%)14。
大動脈のアーチの下の通路は、全体の手順の最も重要なステップです。Tarnavski は位置によって胡と大動脈下右腕と左一般的な頚動脈の9起源の間を通過するその最後にスネアと自家製のワイヤーを使用した同僚もこの手順の再現性の記載がない、7/0 シルクをキャッチする大動脈の下内側からカーブタイプ鉗子反対側に縫合し、大動脈2の下に移動します。私たちの技術で使用される結紮援助大動脈涙の低リスクで標準化され、再現可能な操縦をことができます。
プロシージャのもう一つの決定的な一歩は効率的に減らすために 27 g 針とゆく大動脈弓のルーメンを超えるネクタイに適用テンションです。まず、我々 は大動脈弓周囲縫合に制服で再現可能な張力を適用するを助ける抱き合わせの鉗子を使用します。縫合糸の適切な配置は、心臓と大動脈弓の収穫の際に検証されます。アンデルセンと同僚は、大動脈バンド11の配置の前後両方に頚動脈のドップラー信号の評価によるバンドの適切な配置を確認しました。彼らの報告にドップラー速度比が右から左の頸動脈11に膨らんだら、十分なバンディングは受け入れられました。誘導左室肥大の程度によって TAC の効率を測定するしました当社は技術に縞模様の手順を検証するために偽の動物と比較して、以来それを必要としないプロシージャの任意の増加の期間または動物の麻酔を補足。当社は技術に左心室肥大とバンディングの適切な配置の程度は、実験の終わりにチェックされます。本手法による左室肥大の程度はマウス15で TAC の後 3 週間で他の研究者によって報告されている結果と遜色ないです。さらに、私たちの縞模様の動物にみられる体重心の比の低い変動を証明ネクタイに適用される張力の変動が小さい。
結論としては、このプロトコルに提示されている挿管換気の回避をマウスで低侵襲の TAC の我々 の技術が信頼性と再現性のあるモデルを提供します。このモデルは動物の世界的な負担を軽減し、動物の挿管換気併用 TAC に比べて時間とコストを節約。このプロシージャの手術と後半の死亡率は非常に低く、マウスで左心室肥大の誘導のための選択の方法のいずれかこの手法を作る。

過去年にわたって心不全の研究で実施されている実行可能な動物モデル1。小動物モデル心不全の大動物モデルと比較して、多数の潜在的な利点があります。住宅とメンテナンス コストの削減の横にある小さな動物モデルはより少なく複雑な設備を必要な2のための多くの研究者にアクセス可能です。
マウスモデル心不全ラットのモデルと同じ利点の多くを提供しています。さらに減少住宅コスト3、マウス モデルの恩恵を関連するトランスジェニック、ノックアウト (KO) の系統の可用性。携帯型固有の誘導 KO や遺伝子組換え戦略の可能性はマウスに心不全の病態を研究し、新規化学療法3を識別しようとする非常に貴重なツールを確認します。
マウスの中の心不全モデルは現在4を使用、最初のロックマン5で記述された横大動脈狭窄 (TAC) は圧力の過負荷による左心室の肥大 (LVH)1を生成する推奨モデル,3。 このモデルの最大の利点は LVH2の階層を許可する能力、左室が TAC に対応改造が異なるマウス系統間で変数。特に、c57bl/6 マウスは他系統4,6,7では発生可能性があります TAC 後急速な左心室拡張を開発します。
TAC の原因で高血圧症の突然の発症を約 50% 量の増加 LV 2 週間以内に急速に変調 LVH4の開発を目指して、薬理学的または分子の介入のアクティビティを確認することができます。TAC によって重篤な高血圧症の急性の誘導は進歩的な左室肥大を再現して丁度と大動脈弁狭窄症または高血圧症の臨床で観察された改造します。それにもかかわらず、多くの研究者がこのモデルを使用して、識別し、心不全4における新たな治療標的を変更します。
マウスでタックを実行すると、LVH とその後心不全2を誘導するために使用される他の技術のために必要なより大きい外科の専門知識が必要です。ほとんどの著者は、挿、換気、動物2,8, この手順より厳しい、時間がかかるし、動物の手術の負担を追加してこの手順を実行します。いくつか捜査官だけは、手術9,10,11を簡単に参照を研究で低侵襲の TAC を使用しています。
このプロトコルの目的は、ステップバイ ステップを説明するプロシージャの重要な段階を強調表示、マウスにおける低侵襲横大動脈狭窄の簡易で使いやすいテクニックです。これらのキーの手順を実行このテクニックを簡単に実行できます 1 つ。

<table width="556">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:216px;height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td style="width:108px;">Olympus</td>
			<td style="width:171px;">SZX2-TR30</td>
			<td style="width:63px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Razor</td>
			<td>Rowenta</td>
			<td>Nomad TN3650FO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Sutures:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 7/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>BV-1X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 6/0</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>C0862061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Silk 6/0 ligature&#160;</td>
			<td>FST</td>
			<td>18020-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 4/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polypropylene 5/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Z303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Drugs:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ketamin</td>
			<td>Merial</td>
			<td>Imalg&#232;ne 1000, LBM154AD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun 2%, KP09PPC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Buprenorphine</td>
			<td>Ceva</td>
			<td>Vetergesic, 072013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Instruments:&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Bone nippers</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>16101-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ligation aid</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>18062-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tying forceps</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>18026-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Needle holder Crile-Wood</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>12003-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery forceps&#160;</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery forceps&#160;</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue forceps</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>11021-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery needle holder</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>12076-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microsurgery scissors</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>91501-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Mayo scissors</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>14511-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">11-blade knife</td>
			<td>Fine Surgical Tools</td>
			<td>10011-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">RNA extraction and qPCR:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TriReagent</td>
			<td>Euromedex</td>
			<td>TR-118-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rneasy Mini kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Qubit Fluorimetric RNA assay</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10034622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA 6000 Nano kit</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5067-1511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">High Capacity cDNA kit</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10400745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Master Mix</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10157154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman BNP primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01255770_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:216px;height:20px;">Taqman ANP primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01255747_g1&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman ACE primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00802048_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Col1a1 primers&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm00801666_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman TGFb primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm01178820_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman Gapdh primers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Mm99999915_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ABIPrism&#160; Thermocycler</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>7000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Software:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>Prism 7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="width:495px;height:20px;">Animal food</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="width:216px;height:27px;">Complete diet for adult rats/mice</td>
			<td style="width:108px;">Safe</td>
			<td style="width:171px;">UB220610R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technique of minimally invasive transverse aortic constriction in mice for induction of left ventricular hypertrophy

マウスの横の大動脈狭窄 (TAC) は、心不全、心室の肥大 (LVH) とその進行を左オーバー ロードによる圧力の実験調査のため最もよく使用される手技のひとつです。報告された調査の大半は、この手順を実行して、挿管と厳しい、時間のかかるレンダリングし、動物に外科的負担に追加動物の換気。このプロトコルの目的は、挿管することがなく低侵襲の TAC の簡略化手法とマウスの換気を記述することです。技術の重要なステップは、死亡率は低い、LVH の誘導で高効率を達成するために強調されます。
男性の c57bl/6 マウス (10 週齢, 25-30 g, n = 60) ケタミン ・ キシラジンの混合物の腹腔内注射の麻酔をかけられました。自発的に呼吸動物 3-4 mm 上部部分の胸骨を次 6/0 絹糸結紮援助の目に通してのセグメントは大動脈弓の下を通過し、鈍化 27 ゲージ針を結んだ。動物の偽手術を受けた同じ手術の準備なく大動脈狭窄。LVH を誘導の手順の有効性は、心/体重比の大幅な増加によって立証されています。術後後 3、7、14、28 日でこの比率が得られた (n = 6-10 各グループと各時点)。私たちの技術を使用して、LVH は 28 日目から 7 日目から偽の動物と比較して TAC で観察されます。手術と後半 (28 日間) 死亡率がともに 1.7% で非常に低い。
結論としては、マウスにおける低侵襲の TAC の本のコスト効果の高い手法は非常に低い手術と術後の死亡率を運ぶ、LVH を誘導する効率が高い。それは手術の手順を簡素化し、動物の負担を軽減します。このプロトコルで説明する重要な手順に従うことによって簡単に実行できます。

手術と後半の生存 手術の生存率は非常に高かった (TAC と sham 動物) シリーズ全体の 98.3% (59 のうち 60)。のみ手術死はかんな偽操作のマウスで出血合併症が原因でした。28 日の観察期間中に術後生存率もすばらしい, 98.3% (59 のうち 58) だった後半のみ術後死は心臓由来の可能性がある日 (D) 16、TAC マウスで発生しました。
技術の検証 紹介したテクニックは、非常に信頼性が高く、再現性の高いです。TAC を受けているすべての動物の組織の収穫時期に、右の腕、左総頚動脈間の縫合の正しい配置を確認しました。
心重量/体重比 (HW/BW、mg/g) 3、7、14、28 日後手術での決定によって左心室肥大を誘導する手法の有効性が検証されました。HW は、アトリアなし左と右心室の重量であります。術後 D7 から偽グループと比較して縞状に HW/BW 比率が大幅に増加 (4.9±0.2対4.1±0.05 mg/g、P &#60; 0.01) と D28 まで有意に高く残った (5.8±0.3対4.1±0.1 mg/g、P &#60; 0.0001)手術後 (図 8)。HW/体重比の上昇は全体の観察の間に TAC と sham 動物間で同等に残った右心室/本体重量比からのみ左心室/本体重量比 (図 9A) の上昇のためだった。期間 (図 9B)。
さらに、前述の12として心臓肥大症のバイオ マーカーの発現を左心室組織で測定した.D14、脳ナトリウム利尿蛋白質 (BNP)、心房性ナトリウム利尿蛋白質 (ANP)、アンジオテンシン変換酵素 (ACE) コラーゲン 1a1 の mRNA 発現で (Col1a1) と比較すると大動脈の縞で有意に高値だった成長因子 β (β) を変換sham 動物 (図 10)。したがって、観測された左室肥大は、私たち TAC 手法の有効性を検証します。
平均値と平均値の標準誤差と比較した TAC 偽ボンフェローニの事後テスト対データの比較のために続いて一方通行 ANOVA を使用してグループ化します。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig1.jpg"> 
図 1: 切開します。 皮膚を切開半ばに胸骨にスープラ胸骨切痕から 10 mm 以上、滞在の縫合糸で、甲状腺が取り消されます。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig2.jpg"> 
図 2: 骨ニッパー 。 3-4 mm 上部部分優れたミニ-胸骨の骨で短いと正確なカットができます。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig3.jpg"> 
図 3: 露出します。 7/0 と胸骨端の撤回、次は縫合、大動脈弓、右無名でいて左総頚動脈と気管が公開されます。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig4.jpg"> 
図 4: A. 結ぶ鉗子。これらの鉗子は胸骨の背景および大動脈弓周囲優しくて鈍解離を実行する必要があります。B. 結紮援助します。これは TAC と sham 群で大動脈弓の下で繊細な非外科的通路に向けた重要な手段です。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig5.jpg"> 
図 5: 大動脈のアーチの下で通路 6/0 絹糸を結紮のセグメントは結紮の援助を使用して大動脈のアーチの下渡され、右の腕、左総頚動脈間に配置。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig6.jpg"> 
図 6: 結紮のための準備。 短いセグメント鈍化 27 ゲージ針の 2-3 mm は大動脈アーチ上に配置します。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig6large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig7.jpg"> 
図 7: 横方向の大動脈狭窄。 シルク縫合糸は針と抱き合わせ鉗子を用いた右腕左右共通の頚動脈と大動脈弓に関連付けられています。ポリプロピレン縫合糸の代わりに絹は、結び目が保持されるより大動脈結紮に適しています。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig7large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig8.jpg"> 
図 8: 横方向の大動脈狭窄の検証します。 私たちの低侵襲の横の大動脈狭窄による心肥大誘導バンド (黒いバー) で心臓重量/体重比で大幅に増加偽運営 (白棒) マウスと比較すると明らかです。心臓の肥大はすでに手術後 D7 で存在と D28 まで時間をかけて徐々 に増加 (n = グループあたり 6-10 * * P &#60; 0.01 * * * P &#60; 0.001、* * * P &#60; 0.0001)。データは、± SEM (誤差の範囲) を意味するように示されます。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig8large.jpg" target="_blank">嘆願</a>se は、この図の拡大版を表示するのにはここをクリックします。
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig9v2.jpg"> 
図 9: 左 (A) と (B) 心室/車体重量比。 観察期間中に左心室/本体重量比増加右心室/本体重量比で TAC (黒いバー) 偽手術 (白棒) 動物と比較して同様のまま。これは右心室で変更なし左心室肥大を確認し、提案手法の検証を強化 (n = グループあたり 6-10 * * P &#60; 0.01 * * * P &#60; 0.001、* * * P &#60; 0.0001)。データは、± SEM (誤差の範囲) を意味するように示されます。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig9v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56231/56231fig10.jpg"> 
図 10: BNP mRNA 発現。 脳ナトリウム利尿蛋白質 (BNP)、心房性ナトリウム利尿蛋白質 (ANP)、アンジオテンシン変換酵素 (ACE) コラーゲン 1a1 の mRNA の発現 (Col1a1) 大動脈の縞 (黒いバー) で心臓の肥大のため肯定的な制御を成長因子 β (β) を変換するには、vs 偽の動物 (白いバー) (n = グループあたり 6) D14 で。式が 2 として計算される(-ΔCt)キャリブレータが参照の Gapdh 遺伝子の mRNA レベル。データは、 ± SEM (誤差の範囲) を意味するように示されます。* P &#60; 0.05 * * P &#60; 0.01、 *P &#60; 偽のグループと比較して 0.001 (t-テスト)。<a href="//ecsource-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/56231/56231fig10large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

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Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

このプロトコルの目的は、段階的に説明するマウスにおける低侵襲横大動脈狭窄 (TAC) の技術。挿管や一般的に使用される標準的な手順に必要な換気の除去、TAC の低侵襲手術を簡素化し、動物の負担を軽減します。

左室肥大の誘導マウスにおける低侵襲の横大動脈狭窄のテクニック

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure ...

technique-minimally-invasive-transverse-aortic-constriction-mice-for

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

24.1K ビュー.  University of Zurich. このプロトコルの目的は、段階的に説明するマウスにおける低侵襲横大動脈狭窄 (TAC) の技術。挿管や一般的に使用される標準的な手順に必要な換気の除去、TAC の低侵襲手術を簡素化し、動物の負担を軽減します。

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Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart failure. Here, we describe a detailed surgical procedure for creating pressure overload and cardiac hypertrophy in rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. After anesthesia, the trachea is intubated by inserting a cannula through a half way incision made between two cartilage rings of trachea. Then a skin incision is made at the level of the second intercostal space on the left chest wall and muscle layers are cleared to locate the ascending portion of aorta. The ascending aorta is constricted to 50&#8211;60% of its original diameter by application of a small sized titanium clip. Following aortic constriction, the second and third ribs are approximated with prolene sutures. The tracheal cannula is removed once spontaneous breathing was re-established. The animal is allowed to recover on the heating pad by gradually lowering anesthesia. The intensity of pressure overload created by constriction of the ascending aorta is determined by recording the pressure gradient using trans-thoracic two dimensional Doppler-echocardiography. Overall this protocol is useful to study the remodeling events and contractile properties of the heart during the gradual onset and progression from compensated cardiac hypertrophy to heart failure stage.

We describe a stepwise procedure for creating pressure overload and left ventricular hypertrophy in Wistar rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. This model is extensively used for studying remodeling changes during cardiac hypertrophy and for identifying and evaluating strategies for regression of such changes.

圧負荷心肥大モデルの作成のためのラットの大動脈狭窄昇順

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

医学

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

心臓形態学的および心エコーイメージングによって横大動脈狭窄のマウスモデルにおける機能の変更の評価

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

マウスにおける低侵襲横大動脈狭窄

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an increased use of mouse models in orthopedic research was noted, most probably because mouse models offer a large number of genetically-modified strains and special antibodies for the analysis of molecular mechanisms of fracture healing. To control the biomechanical conditions, well-characterized osteosynthesis techniques are mandatory, also in mice. Here, we report on the design and use of a closed bone healing model to stabilize femur fractures in mice. The intramedullary screw, made of medical-grade stainless steel, provides through fracture compression an axial and rotational stability compared to the mostly used simple intramedullary pins, which show a complete lack of axial and rotational stability. The stability achieved by the intramedullary screw allows the analysis of endochondral healing. A large amount of callus tissue, received after stabilization with the screw, offers ideal conditions to harvest tissue for biochemical and molecular analyses. A further advantage of the use of the screw is the fact that the screw can be inserted into the femur with a minimally invasive technique without inducing damage to the soft tissue. In conclusion, the screw is a unique implant that can ideally be used in closed fracture healing models offering standardized biomechanical conditions.

This protocol describes a minimally invasive osteosynthesis technique using an intramedullary screw for standardized stabilization of femur fractures, which can be used to analyze endochondral bone healing in mice.

癒しの標準化された生体力学的条件下でマウスの軟骨破壊を分析する低侵襲モデル

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to perform a partial thoracotomy to visualize the transverse aortic arch. However, the surgical trauma caused by the thoracotomy in open-chest models changes the respiratory physiology as the ribs are dissected and left unattached after chest closure. To prevent this, we established a minimally invasive, closed chest approach via lateral thoracotomy. Herein we approach the aortic arch via the 2nd intercostal space without entering the chest cavities, leaving the mouse with a less traumatic injury to recover from. We perform this operation using standard laboratory settings for open chest TAC procedures with equal survival rates. Apart from maintaining physiological breathing patterns due to the closed chest approach, the mice seem to benefit by showing rapid recovery, as the less invasive technique appears to facilitate a fast healing process and to reduce immune response after trauma.

Here, we present a protocol of Transverse Aortic constriction (TAC) via a lateral thoracotomy. This technique is a minimally invasive, closed chest surgical procedure aiming to simulate pressure overload and heart failure in mice utilizing standard TAC laboratory settings.

マウスで横方向の大動脈狭窄を誘導するために閉じて胸モデル

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, mice undergo RR upon removal of the aortic constriction. In this paper, we describe a step-by-step procedure to perform a minimally invasive surgical aortic debanding in mice. Echocardiography was subsequently used to assess the degree of cardiac hypertrophy and dysfunction during LV remodeling and RR and to determine the best timing for aortic debanding. At the end of the protocol, terminal hemodynamic evaluation of the cardiac function was conducted, and samples were collected for histological studies. We showed that debanding is associated with surgical survival rates of 70-80%. Moreover, two weeks after debanding, the significant reduction of ventricular afterload triggers the regression of ventricular hypertrophy (~20%) and fibrosis (~26%), recovery of diastolic dysfunction as assessed by the normalization of left ventricular filling and end-diastolic pressures (E/e&#39;&#160;and LVEDP). Aortic debanding is a useful experimental model to study LV RR in rodents. The extent of myocardial recovery is variable between subjects, therefore, mimicking the diversity of RR that occurs in the clinical context, such as aortic valve replacement. We conclude that the aortic banding/debanding model represents a valuable tool to unravel novel insights into the mechanisms of RR, namely the regression of cardiac hypertrophy and the recovery of diastolic dysfunction.

Here we describe a step-by-step protocol of surgical aorta debanding in the well-established mice model of aortic-constriction. This procedure not only allows studying the mechanisms underlying the left ventricular reverse remodeling and regression of hypertrophy but also to test novel therapeutic options that might accelerate myocardial recovery.

げっ歯類における大動脈デベンディングによる左心室逆改造の研究

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. However, the evaluation of right ventricular pressure (RVP) and pulmonary artery pressure (PAP) remains technically challenging in mice. RVP and PAP are more difficult to measure than left ventricular pressure because of the anatomical differences between the left and right heart systems. In this paper, we describe a stable right heart hemodynamic measurement method and its validation using healthy and PAH mice. This method is based on open-chest surgery and mechanical ventilation support. It is a complicated procedure compared to closed chest procedures. While a well-trained surgeon is required for this surgery, the advantage of this procedure is that it can generate both RVP and PAP parameters at the same time, so it is a preferable procedure for the evaluation of PAH models.

Here, we present a protocol to perform an invasive hemodynamic assessment of the right ventricle and pulmonary artery in mice using an open-chest surgery approach.

マウスにおける右心室系と低酸素誘発性肺動脈高血圧に対する侵襲的血行力学的評価

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

再建微小外科における虚血再灌流損傷の研究のための前臨床ラットモデル

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Evaluation of Capnography Sampling Line Compatibility and Accuracy when Used with a Portable Capnography Monitor

Capnography is commonly used to monitor patient&#8217;s ventilatory status. While sidestream capnography has been shown to provide a reliable assessment of end-tidal CO2 (ETCO2), its accuracy is commonly validated using commercial kits composed of a capnography monitor and its matching disposable nasal cannula sampling lines. The purpose of this study was to assess the compatibility and accuracy of cross-paired capnography sampling lines with a single portable bedside capnography monitor. A series of 4 bench tests were performed to evaluate the tensile strength, rise time, ETCO2 accuracy as a function of respiratory rate, and ETCO2 accuracy in the presence of supplemental O2. Each bench test was performed using specialized, validated equipment to allow for a full evaluation of sampling line performance. The 4 bench tests successfully differentiated between sampling lines from different commercial sources and suggested that due to increased rise time and decreased ETCO2 accuracy, not all nasal cannula sampling lines provide reliable clinical data when cross-paired with a commercial capnography monitor. Care should be taken to ensure that any cross-pairing of capnography monitors and disposable sampling lines is fully validated for use across respiratory rates and supplemental O2 flow rates commonly encountered in clinical settings.

The goal of this study was to evaluate the accuracy of capnography sampling lines used in conjunction with a portable bedside capnography monitor. Sampling lines from 7 manufacturers were evaluated for tensile strength, rise time, and ETCO2 accuracy as a function of respiratory rate or supplemental oxygen flow rate.

ポータブル・キャプノグラフィー・モニターで使用した場合の、キャポグラフィー・サンプリング・ラインの適合性と精度の評価

Capnography is commonly used to monitor patient&#8217;s ventilatory status. While sidestream capnography has been shown to provide a reliable assessment ...

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate cardiomyocyte hypertrophy and slow down progression to heart failure. For novices, however, the MHP model is usually quite difficult to establish because of the technical obstacles in ventilator operation, opening the chest repeatedly, and bleeding caused by debanding. To facilitate this model, to increase the surgical success rate and to reduce the incidence of bleeding, we switched to absorbable sutures for the first TAC combing with a ventilator-free technique. Using a 2-week absorbable suture, we demonstrated that this procedure could cause significant myocardial hypertrophy in 2 weeks; and 4 weeks after surgery, myocardial hypertrophy was almost completely regressed to the baseline. Using this protocol, the operators could master the MHP model easily with a lower operation mortality.

This protocol presents an improved method to obtain transient myocardial hypertrophy with absorbable suture, simulating left ventricular hypertrophy decrease after removing pressure overload. It could be valuable for the studies on myocardial hypertrophic preconditioning.