Bu eser Kore Ulusal Araştırma Vakfı (UÇK) hibeler (2013R1A2A2A05004314, 2012R1A1A2043747), Kore Hükümeti tarafından finanse edilen Kore Sağlık Teknoloji Ar-Ge Projesi, Sağlık ve Refah (A121994) ve IBS-R020-D1 Bakanlığı&#39;ndan bir hibe ile desteklenmiştir.

Not: Kan sağlıklı bireylerden alınmış ve bir kan toplama tüpü içinde toplanmıştır. Yazılı bilgilendirilmiş olur Tüm gönüllülerden elde edilmiştir. TiO2 NF Mat 1. Fabrikasyon <ol><li> Ön-madde 22 solüsyonuna hazırlanması <ol><li> Etanol (% 99.9, 3 mi) ve buzlu asetik asit (3 mi) içindeki bir karışımına titan tetraizopropoksit (TTIP), 1.5 g çözülür ve bir manyetik karıştırıcı ile 30 dakika boyunca oda sıcaklığında çözelti (25 ° C) karıştırılır. </li><li> etanol (% 99.9) 3.64 g polivinil pirolidon (PVP) ağırlık bakımından% 11 çözülür ve bir sıcak levha manyetik karıştırıcı kullanılarak 1 saat boyunca 65 ° C&#39;da, çözelti karıştırılır. </li><li> Birleştirin ve bir sıcak levha manyetik bir karıştırıcı ile 4 saat 65 ° C sıcaklıkta iki çözüm karıştırın. </li></ol></li><li> elektrospinning <ol><li> 200 um iç Diame bir paslanmaz çelik iğne bağlı bir şırınga içine hazırlanan çözelti yükter. dalgıç çıkardıktan sonra şırıngaya doğrudan çözüm dökün. </li><li> yüksek DC voltajı (15 kV) topraklanmış alt-tabaka üzerine yerleştirilmiş bir silisyum üzerinde 10 dakika süre ile 0.3 ml / st bir akış oranında (2 cm x 2 cm) sürekli solüsyonun verilmesini. Elektrospinning sırasında iğne ve 10 cm topraklı alt-tabaka arasındaki mesafeyi ayarlamak. </li></ol></li><li> NF mat kalsinasyon <ol><li> Bir fırın içinde NF koruyucu serin ve yüksek vakum koşullarında (5 x 10 -5 torr) altında 3 ° C / dk&#39;lık bir rampa oranında 500 ° C&#39;ye kadar sıcaklık kadar değişebilmektedir. </li><li> 3 saat 500 ° C sıcaklık muhafaza edin. fırın içinde oda sıcaklığında (25 ° C) örneklerinin sıcaklık soğutun. </li></ol></li></ol> Bir Santrifüj mikroakışkan Disc içine TiO 2. Entegrasyon 2 NF Mat <ol><li> Bir diskin Fabrikasyon <ol><li> 3D tasarım yazılımı (örneğin, Sol kullanınidWorks veya) benzer diskin her katmanın odaları, kanal, ya da vanaları tasvir. Kod üreten yazılım (örn EdgeCAM veya benzeri) kullanarak bilgisayar nümerik kontrol (CNC) kod tasarım dosyalarını dönüştürün. Talimatlara göre yazılımları kullanın manuel 23,24 Not:. Bu cihazda kullanılan tipik kanal boyutları x 0.3 mm (genişlik x derinlik) 1,0 mm&#39;dir. </li><li> (CNC freze makinesinin çalışma yazılımını açın, örneğin., DeskCNC veya benzeri) ve işletim yazılımı, CNC kodu yüklemek ve sırasıyla aşağıdaki tıklatın: &quot;AUTO&quot; -&gt; &quot;G KODU AÇIK&quot; -&gt; oluşturulan CNC kodu seçin. </li><li> CNC freze PC plakasını: Disk tabakası için üst tabaka ve 5 mm PC plakaları için 1 mm PC tabak kullanın. &quot;BAŞLAT&quot; butonuna tıklayarak diskin her katmanı kesmek için CNC freze makinesi çalıştırın. </li></ol></li><li> Diske TiO2 NF mat Transferi<ol><li> bir silikon alt-tabaka ve 40 uL (tridekaflor-1,1,2,2-tetrahydrooctyl), 30 dakika boyunca vakum altında bir vakum odasına -1-trichlorosilane ihtiva eden küçük bir Petri tabağına yerleştirin. fluorosilane buharlaşmakta ve alt tabaka üzerine kaplanmış olur. </li><li> Bir vakum odası 1 oranında ve gazını: 10 bir sertleştirici madde ile birlikte polidimetilsiloksan (PDMS) ön-polimer karıştırın. Spin-kat 60 saniye boyunca 650 rpm&#39;de bir silikon yüzeye PDMS. </li><li> 10 dakika yapışkan bir duruma ulaşmak için 65 ° C sıcaklıkta bir fırın içinde, silikon alt-tabaka üzerine kaplanmış PDMS Cure. Not: Kür süresi çevre koşullarına bağlı olarak değişebilir, ve yapışma kuvveti reometresi kullanılarak yapışma testi ile test edilebilir. </li><li> Bir cımbız kullanarak PDMS kaplı silikon üzerine elektrospinning ve kalsinasyon tarafından hazırlanan TiO2 NF mat aktarın. Daha sonra el (cam slayt, örneğin.) Düz bir nesneyle transfer TiO2 NF mat bir konformal baskı uygulamak ve nesneyi çıkartın. koymak4 saat 65 ° C ya da 1 saat boyunca 80 ° C&#39;de bir fırında Bu örnek tamamen PDMS tabakasını sertleştirmek için. </li><li> 20 ul PDMS / sertleştirici karışımı kullanılarak disk kaplayın bağlanma reaksiyonu odaları (10: 1), bir yapışkan tabaka olarak işlev yapar diske TiO2 NF mat takmak için. </li><li> PDMS katmanda TiO2 NF mat, etanol (% 99.9), 50 ul koyun, 6 mm çapında bir zımba deliği olan NF mat kesilmiş ve 20 ul ile kaplanmış bağlanma reaksiyonu odalarına TiO2 NF mat kesim transfer önceki adımda PDMS. NOT: Bu adımda, etanol Si substrat kesilmiş TiO2 NF mat ayırmak için yararlı olacaktır. </li><li> 1 saat tam PDMS tedavi etmek için 4 saat boyunca ya da 80 ° C &#39;de 65 ° C&#39; de fırında TiO2 NF MAT entegre disk inkübe edin. </li></ol></li><li> Diskte TiO2 NF mat yüzey modifikasyonu <ol><li> PEtanol (3-glisidoksipropil) metildietoksi silan (GPDES) onarılması% 1 h / h çözeltisi (% 99.9). </li><li> 140 W, 180 saniye boyunca 50 sccm oksijen akışı oksijen plazma ile TiO2 NF mat entegre disk davranın. Her bir nano mat GPDES çözeltisi 100 ul koyun ve 2 saat oda sıcaklığında (25 ° C) inkübe edilir. </li><li> Bir yıkama şişesi kullanılarak etanol (% 99.9) dağıtım yoluyla yüzeyler kısaca yıkayın, ardından diski tersini ve temiz karşı mendil lekeleme tamamen etanol çıkarın. 1 saat boyunca 80 ° C&#39;de tedavi. Yukarıda belirtildiği gibi, fiziksel olarak adsorbe edilmiş ve bağlanmamış GPDES molekülleri uzaklaştırmak için, aynı şekilde, etanol (% 99.9) ile iki kez yıkanır. </li><li> Kuru vakum altında, bir azot akımı ile kurutma. NOT: Disk kullanılıncaya kadar RT (25 ° C) kapalı bir kapta saklanabilir. </li></ol></li><li> Yüzey üzerindeki antikorların immobilizasyonu <ol><li> antikorlarla 200 ug / ml &#39;lik bir solüsyonu (monoklonal fare anti yapmakİnsan hsCRP ya da bir fosfat tamponlu tuzlu su (PBS), tampon (pH 7.4) sahip antikorlar seyreltilmesiyle monoklonal fare anti-cTnI). bir mikropipet kullanarak bir diskin her NF hasır üzerine çözeltinin 5 ul koyun. antikorlar hakkında daha fazla bilgi için malzeme listesine bakın. </li><li> nemli bir oda içinde diskleri tutmak ve 4 saat 37 ° C&#39;de inkübe edin. % 0.1 BSA-PBS tamponuyla NF MAT kaplanmış antikorları yıkayın. bir mikropipet kullanarak yıkama tamponu 100 ul ile odasını doldurmak, aspire veya boşaltma yoluyla tampon kaldırmak. Son olarak, diski ters çevirin ve temiz bir mendil karşı kurulayın ve ardından diski monte edin. </li></ol></li><li> disk montaj <ol><li> Bir paket program (örn AutoCAD veya benzeri) kullanılarak, çift taraflı yapışkan bant ile disk tasarımı çizin. Kesme plotter CAD tasarım yükleyin. </li><li> kesim plotter kullanarak çift taraflı yapışkan bant kesti. çift ​​yapışkan bant bir koruma tabakası soyulabilir ve i takmakDisk tabakanın üzerine t. diğer koruma katmanı soyulabilir ve disk katman üzerinde üst tabaka ekleyin. </li><li> presleme makinesinde ön monte disk yerleştirin ve tam her valf, kanal ve odaları bağlamak için her katmanda hizalama işaretleri kullanarak üst / yapışkan / disk katmanı hizalamak. presleme makinesi kullanılarak konformal basınç uygulayın. </li></ol></li></ol> 3. İmmunoassay <ol><li> Mikropipet kullanılarak% 1 BSA-PBS tamponuyla odaları doldurun ve 1 saat 37 ° C&#39;de inkübe diski. bir mikropipet kullanarak aspirasyon ile tamponu çıkarın. reaksiyona girmemiş siteleri engellemek için bir diskin proteinin spesifik olmayan adsorpsiyon azaltmak için bu adım gerçekleştirin. </li><li> doldurma ve bir mikropipet kullanılarak odaları aspire% 0.1 BSA-PBS ile iki kez yıkanır. NOT: Bu aşamada, disk, kullanılana kadar 4 ° C &#39;de muhafaza edilebilir. </li><li> Bir micropipett kullanarak disk üzerinde CRP tespiti için antijen-çivili tam kan ya da CRP serbest serum yük 10 ule. Kalibrasyon grafikler yapmak için, 100 ng / ml, 1 ug / ml CRP konsantrasyonları kullanır; ve cTnl 10 ug / ml ila 100 ng / ml olmuştur. Not: uM aralığında genellikle tam kan içinde daha yüksek CRP seviyeleri nedeniyle, CRP içermeyen serumu cihazın düşük algılama sınırı göstermek için kullanılmıştır. </li><li> kırmızı kan hücreleri ayırmak için 60 saniye boyunca 3600 rpm (391 xg) diski Spin. </li><li> Açık valf lazer ışınlama ile 1. ve aktarım 3 sn 2,400 rpm&#39;de diski iplik HRP ile konjuge antikorları tespit 8 ul içeren odasına süpernatant plazma 4 ul. Not:. Valf harekete ve disk işlemi görselleştirilmesi için genel işlemler önceki raporunda ayrıntılı olarak anlatılmıştır 21 </li><li> Protein ve tespit antikorlarının bağlanma için, 5 saniye süreyle bir karıştırma modu (15Hz s-1, 15 °) uygulanır. </li><li> Valf # 2 ve bağlanma reaksiyonu odasına aşama 6&#39;da elde edilen karışım transferi (2400 rpm3 sn). Daha sonra, karışım ve TiO2 UF bağlayıcı antikorlar arasında bir immunoreaksiyonunu elde etmek için 20 dakika boyunca bir karıştırma modu (60 Hz s-1, 2 °) uygulanır. ve reaksiyon açık valf 3. sonra atık haznesi (2400 rpm, 10 sn) rezidüel karışımı aktarın. </li><li> Valf 4. açılması ve disk (2400 rpm, 4 sn) iplik bağlama reaksiyon odasına yıkama tamponu (600 ul) aktarın. Ardından odasında TiO2 UF&#39;lerini yıkamak için 120 saniye boyunca bir karıştırma modu (30 Hz s -1, 30 °) uygulanır. </li><li> Adım 3.8 aynı durumu takip ederek iki kez daha TiO2 UF&#39;lerini yıkayın ve 20 saniye boyunca 2400 rpm&#39;de diski iplik tamamen kalıntı yıkama tamponu çıkarın. Ardından, vana 5. kapatın. </li><li> Kemilüminesan reaksiyon için, kapak 6 ve eğirme açarak bağlanma reaksiyonu odasına kemilüminesan substrat çözeltisi aktarıldıktan sonra 1 dakika boyunca bir karıştırma modu (30 Hz s-1, 2 °) uygulanırdaha sonra 10 saniye boyunca 2400 rpm&#39;de disk. </li><li> Valf 7. açılması ve 10 saniye boyunca 2400 rpm&#39;de diski iplik algılama odalarına tepki substrat çözüm aktarın. </li><li> Bir photomultiplier tüp (PMT) modülü donanımlı algılama sistemi kullanarak tepki gösterdi substrat çözeltisinden kemilüminesans sinyalleri ölçün. NOT: step motor, optik-bileşenler, çeviri aşamaları ve piyasada mevcut PMT: algılama sistemi aşağıdaki parçaları kullanarak özel inşa edilmiş bir makinedir. optomechanical parçalar ve step motor cihazı tutmak için monte edilir ve motor diski döndürebilirsiniz. algılama optik-parça sabit PMT tarafından gerçekleştirilir ve bu cihazın algılama odası üzerinde yer almaktadır. adım motor manipüle ederek, algılama odaları sağ PMT algılama bölgesi altında hizalanır. </li></ol>

<ol>
	<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomaterials+for+Ultrasensitive+Protein+Detection.">Nanomaterials for Ultrasensitive Protein Detection.</a> Adv. Mater. 25 (28), 3802-3819 (2013).</li><li>Hu, W., Li, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanomaterial-based+advanced+immunoassays.">Nanomaterial-based advanced immunoassays.</a> Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 3 (2), 119-133 (2011).</li><li>Yang-Kyu, C., Chang-Hoon, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicon+Nanowire+Biosensor+for+Cancer+Markers.">Silicon Nanowire Biosensor for Cancer Markers.</a> Biosensors and Cancer. , 164-183 (2012).</li><li>Baltazar, R., Vistas, C. R., Ferreira, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biosensing+Applications+Using+Nanoparticles.">Biosensing Applications Using Nanoparticles.</a> Nanocomposite Particles for Bio-Applications. , 265-282 (2011).</li><li>Roy, P., Berger, S., Schmuki, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TiO2+Nanotubes:+Synthesis+and+Applications.">TiO2 Nanotubes: Synthesis and Applications.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 50 (13), 2904-2939 (2011).</li><li>Yang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofibrous+Membranes:+A+Novel+Solid+Substrate+for+Microfluidic+Immunoassays+for+HIV.">Electrospun Nanofibrous Membranes: A Novel Solid Substrate for Microfluidic Immunoassays for HIV.</a> Adv. Mater. 20 (24), 4770-4775 (2008).</li><li>Chantasirichot, S., Ishihara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+phospholipid+polymer+substrate+for+enhanced+performance+in+immunoassay+system.">Electrospun phospholipid polymer substrate for enhanced performance in immunoassay system.</a> Biosens. Bioelectron. 38 (1), 209-214 (2012).</li><li>Zhang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+TiO2+Nanofiber-Based+Cell+Capture+Assay+for+Detecting+Circulating+Tumor+Cells+from+Colorectal+and+Gastric+Cancer+Patients.">Electrospun TiO2 Nanofiber-Based Cell Capture Assay for Detecting Circulating Tumor Cells from Colorectal and Gastric Cancer Patients.</a> Adv. Mater. 24 (20), 2756-2760 (2012).</li><li>Ali, M. A., Mondal, K., Singh, C., Dhar Malhotra, B., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-epidermal+growth+factor+receptor+conjugated+mesoporous+zinc+oxide+nanofibers+for+breast+cancer+diagnostics.">Anti-epidermal growth factor receptor conjugated mesoporous zinc oxide nanofibers for breast cancer diagnostics.</a> Nanoscale. 7 (16), 7234-7245 (2015).</li><li>Mondal, K., Ali, M. A., Agrawal, V. V., Malhotra, B. D., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Sensitive+Biofunctionalized+Mesoporous+Electrospun+TiO2+Nanofiber+Based+Interface+for+Biosensing.">Highly Sensitive Biofunctionalized Mesoporous Electrospun TiO2 Nanofiber Based Interface for Biosensing.</a> ACS Appl. Mater. Interfaces. 6 (4), 2516-2527 (2014).</li><li>Tu, W., Dong, Y., Lei, J., Ju, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-Potential+Photoelectrochemical+Biosensing+Using+Porphyrin-Functionalized+TiO2+Nanoparticles.">Low-Potential Photoelectrochemical Biosensing Using Porphyrin-Functionalized TiO2 Nanoparticles.</a> Anal. Chem. 82 (20), 8711-8716 (2010).</li><li>Liu, S., Chen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coadsorption+of+Horseradish+Peroxidase+with+Thionine+on+TiO2+Nanotubes+for+Biosensing.">Coadsorption of Horseradish Peroxidase with Thionine on TiO2 Nanotubes for Biosensing.</a> Langmuir. 21 (18), 8409-8413 (2005).</li><li>Portan, D. V., Kroustalli, A. A., Deligianni, D. D., Papanicolaou, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+biocompatibility+between+TiO2+nanotubes+layer+and+human+osteoblasts.">On the biocompatibility between TiO2 nanotubes layer and human osteoblasts.</a> J.Biomed.Mater.Res. Part A. 100 (10), 2546-2553 (2012).</li><li>Dettin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Covalent+surface+modification+of+titanium+oxide+with+different+adhesive+peptides:+Surface+characterization+and+osteoblast-like+cell+adhesion.">Covalent surface modification of titanium oxide with different adhesive peptides: Surface characterization and osteoblast-like cell adhesion.</a> J. Biomed. Mater. Res. Part A. 90 (1), 35-45 (2009).</li><li>Kim, W. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Protein+Immobilization+Efficiency+on+a+TiO2+Surface+Modified+with+a+Hydroxyl+Functional+Group.">Enhanced Protein Immobilization Efficiency on a TiO2 Surface Modified with a Hydroxyl Functional Group.</a> Langmuir. 25 (19), 11692-11697 (2009).</li><li>Son, K. J., Ahn, S. H., Kim, J. H., Koh, W. -. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graft+Copolymer-Templated+Mesoporous+TiO2+Films+Micropatterned+with+Poly(ethylene+glycol)+Hydrogel:+Novel+Platform+for+Highly+Sensitive+Protein+Microarrays.">Graft Copolymer-Templated Mesoporous TiO2 Films Micropatterned with Poly(ethylene glycol) Hydrogel: Novel Platform for Highly Sensitive Protein Microarrays.</a> ACS Appl. Mater. Interfaces. 3 (2), 573-581 (2011).</li><li>Kar, P., Pandey, A., Greer, J. J., Shankar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrahigh+sensitivity+assays+for+human+cardiac+troponin+I+using+TiO2+nanotube+arrays.">Ultrahigh sensitivity assays for human cardiac troponin I using TiO2 nanotube arrays.</a> Lab Chip. 12 (4), 821-828 (2012).</li><li>Agarwal, S., Wendorff, J. H., Greiner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+electrospinning+technique+for+biomedical+applications.">Use of electrospinning technique for biomedical applications.</a> Polymer. 49 (26), 5603-5621 (2008).</li><li>Ding, B., Wang, M., Wang, X., Yu, J., Sun, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+nanomaterials+for+ultrasensitive+sensors.">Electrospun nanomaterials for ultrasensitive sensors.</a> Mater. Today. 13 (11), 16-27 (2010).</li><li>Liu, Y., Yang, D., Yu, T., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+electrospun+nanofibrous+PVDF+membranes+into+a+microfluidic+chip+assembled+by+PDMS+and+scotch+tape+for+immunoassays.">Incorporation of electrospun nanofibrous PVDF membranes into a microfluidic chip assembled by PDMS and scotch tape for immunoassays.</a> ELECTROPHORESIS. 30 (18), 3269-3275 (2009).</li><li>Lee, W. S., Sunkara, V., Han, J. -. R., Park, Y. -. S., Cho, Y. -. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+TiO2+nanofiber+integrated+lab-on-a-disc+for+ultrasensitive+protein+detection+from+whole+blood.">Electrospun TiO2 nanofiber integrated lab-on-a-disc for ultrasensitive protein detection from whole blood.</a> Lab Chip. 15 (2), 478-485 (2015).</li><li>Li, D., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+Titania+Nanofibers+by+Electrospinning.">Fabrication of Titania Nanofibers by Electrospinning.</a> Nano Lett. 3 (4), 555-560 (2003).</li><li>Lombard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> SolidWorks 2013 BIBLE. , (2013).</li><li>Tickoo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> EdgeCAM 11.0 for Manufacturers. , (2007).</li><li>Zhu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+adhesion+of+interconnected+TiO2+nanofiber+network+on+conductive+substrate+and+its+application+in+polymer+photovoltaic+devices.">Improved adhesion of interconnected TiO2 nanofiber network on conductive substrate and its application in polymer photovoltaic devices.</a> Appl. Phys. Lett. 93 (1), 013102 (2008).</li><li>Song, M. Y., Ahn, Y. R., Jo, S. M., Kim, D. Y., Ahn, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TiO2+single-crystalline+nanorod+electrode+for+quasi-solid-state+dye-sensitized+solar+cells.">TiO2 single-crystalline nanorod electrode for quasi-solid-state dye-sensitized solar cells.</a> Appl. Phys. Lett. 87 (11), 113113 (2005).</li><li>Katsuhiro, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospinning+processed+nanofibrous+TiO2+membranes+for+photovoltaic+applications.">Electrospinning processed nanofibrous TiO2 membranes for photovoltaic applications.</a> Nanotechnology. 17 (4), 1026-1031 (2006).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

TiO2 NF entegre disk üzerinde deney kan çok düşük hacimde, düşük fazla proteinler arasında derece hassas saptanması için hızlı, ucuz ve kullanışlı bir yöntemdir. Bu teknik, küçük örnek hacimlerini (10 ul) kullanılarak avantajı vardır ve aynı anda birden fazla numune analiz için elverişlidir. Bu bir çoklayıcı immunoassay cihazı olarak büyük bir potansiyel sunmaktadır. Cihaz, geleneksel ELISA gereklidir plazma ayrılması gibi örnek ön-işlem aşamaları gerekli değildir ilave bir avantajı vardır. Ayrıca, cihaz sayesinde önceden tasarlanmış odaları, kanal ve vanaları bütün immunoassay prosedürleri (örneğin, karıştırma, yıkama, bağlayıcı vb) otomatik olarak gerçekleştirebilirsiniz. Yapıştırıcılar kullanarak yerine freze ve manuel montaj Ayrıca, ticari disk üretim yöntemleri kullanılarak (örneğin, enjeksiyon kalıplama, UV / ultrasonik / ısıl bağlama), analize cihaz imalattan gelen tüm prosedürü olabilirOtomatik. Ayrıca burada sunulan transfer baskı metodu ince yapışkan PDMS tabaka kullanılarak alt-tabakanın hedef donörden electrospun NF basit ve kolay bir transferi gösterir. Genel olarak, kalsinasyon işleminden sonra elde edilen TiO2 UF&#39;ler kırılgandır ve kolayca zayıf yapışma topraklı substrattan sıyırın. 25 dolayı karakteristik kırılganlık, diğer cihazlarla TiO2 NF paspaslar entegre zordur. Bu sorunu çözmek için, pek çok yöntem bildirilmiştir. Örneğin, sıcak pres 26 ve solvent buharı 27 teknikleri kalsinasyon işleminden önce TiO2 NF&#39;ler paspas ve hedef yüzey arasındaki yapışma artışı gösterdi. Bu yöntemler yapışmayı artmasına rağmen, TiO2 NF paspaslar, yüksek mekanik basınç sağlam değildi ya da çözücü ilgili teknikler sırasında uygulanan. Bundan başka, çünkü kalsinasyon aşamasının, TiO2 entegrasyonu &lt;/ Sub&gt; bu yöntemleri kullanarak NF paspaslar sadece sınırlı hedef yüzeyler için uygulanabilir. Bildiğimiz kadarıyla, bu hatta transferden sonra UF&#39;lere yeni özelliklerini koruyarak, termoplastik yapılmış bir cihaza üzerinde NF paspaslar transfer baskı göstermek için ilk tekniktir. Cihazın daha iyi performans için, yüksek kaliteli UF&#39;lerin imalat ve ön kür koşullarının optimizasyonu arzu edilir. protokolü de belirtildiği gibi, zaman, çevre koşullarına bağlı olarak değişebilir ön-vulkanizasyon için gerekli olan; Bu nedenle, ön sertleştirme koşulları yapışma testi kullanılarak yapışma kuvvetini ölçerek optimize edilmesi bulunmaktadır. Ayrıca, protokol burada sunulan, bir disk üzerinde tam otomatik ELISA işlemi için usta kılavuzları sunar. Protokol sadece diskin imalat hem de tam kan ayırma, ölçme, karıştırma, yıkama ve algılama dahil olmak üzere ELISA için gerekli olan bütün işlemler, otomasyonunu getirmektedir.Her adım Dönüş hızı, karıştırma sıklığı ve çalışma süresi ile optimize edilmiştir. Bu işlem kılavuzunda dayanarak, bir disk üzerinde yüklü reaktifler tek motoru kullanılarak transfer edilebilir. Cihaz kan çok düşük hacmi ile mükemmel algılama hassasiyetini gerçekleştirilen bu yana, hastalığın erken bir aşamada biyobelirteçlerini tarama ile teşhis uygulamaları için mükemmel bir potansiyel sunmaktadır. Cihaz spesifik antikorların varlığına bağlı olarak herhangi bir biyobelirteç tespit etmek için etkin olacak. TiO2 NF paspaslar ile cihaz son derece bağlı paspaslar geniş yüzey alanına hassasiyeti gelişmiş başararak rağmen, bu tekniğin kalan meydan tek tip NF paspaslar seri üretimine olabilir. ELISA hassasiyeti güçlü nano mat yüzey alanı tarafından etkilendiği için, yüksek bir yüzey alanına hem de seri üretim farklı gruplar halinde, bir tekrar üretilebilir ve düzgün bir yüzey alanı sadece elde etmek için kritiktir. </p&gt; Sonuç olarak, son derece hassas bir protein tespit edilmesi için bir cihazdan bir kırılgan NF mat entegre için basit bir yöntem gösterilmiştir. Bu, aşağıdaki gibi yöntemin avantajları şunlardır: 1) daha önce electrospun TiO2 UF&#39;ler iletken ve termal olarak kararlı yüzeylerde hazırlanabilir; Burada, bunlar iletken olmayan ve plastik malzemeler dahil herhangi bir alt-tabaka üzerine transfer edilebilir olduğunu göstermiştir; 2) TiO2 NF paspaslar basınca dayanıklı ve bağlı PDMS tabakasının yüksek yapışma gücüne yıkama adımları sırasında stabil kalabilir; 3) biyo-tahliller için nispeten yüksek bir yüzey alanı sağlar; ve 4) antikorları, kovalent bağlı NFS bozulmamış yüzey özelliklerine TiO2 UF bağlı olabilir. Bu teknik, farklı uygulamalar için cihazlara nanofibröz malzeme entegrasyonu için büyük bir potansiyel kullanılmak zorundadır.

Hastalık tanısı için çeşitli platformlar 1,2 gibi nanotellerin, 3 nanopartiküller, 4 nanotüpler, 5 ve nano (NF&#39;ler) 6-8 olarak nano ölçekli malzemelere dayanan geliştirilmiştir. Bu nano kendi benzersiz fizikokimyasal özellikleri nedeniyle son derece hassas biyoanalizlere için yeni teknolojilerin tasarımı mükemmel umutları sunuyoruz. Örneğin, gözenekli bir çinko oksit nanolifler meme kanseri biyobelirteçlerinin femto-mol hassas bir şekilde tespit kullanılmaktadır. 9. Son zamanlarda, kimyasal stabilitesini göz önüne biyoanalitik edecektir 10 araştırılmıştır (TiO2) titanyum dioksit esaslı sol-jel, 11 ihmal edilebilir protein denatürasyonu 12 ve ek olarak biyouyumluluk. 13, TiO2 yüzeyi üzerindeki hidroksil grupları kimyasal modifikasyon biyomoleküllerin kovalent bağlanmasını kolaylaştırır. 14,15 Desenli TiO2 thin, filmler 16 veya TiO2 17 yüzey alanını arttırarak, bir hedef proteinin algılama hassasiyetini artırmak için kullanılmıştır nanotüpler, Ancak, üretim süreci oldukça karmaşık ve pahalı ekipman gerektirir. Öte yandan, electrospun NF&#39;ler basit ve düşük maliyetli üretim süreci yanı sıra nedeniyle yüksek yüzey alanı dikkatini alıyorsanız, 18,19 henüz electrospun TiO2 NF mat kırılgan ya da gevşek özelliği işlemek için zorlaştırır ve mikroakışkan cihazlar ile entegre. 6,20 nedenle, TiO2 NF paspaslar nadiren biyoanalitik uygulamalarda sert yıkama koşulları gerektiren özellikle kullanılmıştır. Bu çalışmada, bu sınırlılıkların üstesinden gelmek için, ince bir polidimetilsiloksan (PDMS) yapışkan tabaka kullanarak, herhangi bir hedef alt-tabakanın yüzeyi üzerine, NF halılar electrospun aktarmak için yeni bir teknoloji geliştirilmiştir. furthermore, başarılı polikarbonat (PC) yapılan bir santrifüj mikroakışkan cihaz üzerine electrospun TiO NF paspaslar 2 entegrasyonunu gösterdi. Bu cihazı kullanarak, C-reaktif protein, hassas bir yüksek tam otomatik ve entegre (CRP) ve kardiyak troponin I (cTnl) tam kan sadece 10 uL, 30 dakika içinde elde edilmiştir. 21 nedeniyle birleştirilebilir UF ve merkezkaç platformun özelliklerinin avantajları, deney alt saptama sınırı 100 ng / ml (~ 12:08) 1 ug / ml (~ 8 FM) den altı mertebe geniş bir dinamik aralık sergilemiştir CRP ve 37 pg / ml (~ 01:05) içindeki bir saptama sınırı 100 ng / ml (~ 4 nM), 10 pg / ml (~ 12:04) bir dinamik aralık için 0.8 ug / ml (~ 6 FM) ve cTnI için. Bu tespit limitleri ~ 300 ve 20 Hangi kat bunlara karşılık gelen geleneksel ELISA sonuçlarına göre daha düşük. Bu teknik, uygun antikorlar ile, herhangi bir hedef proteinlerin tespiti için uygulanabilir. Genel olarak, bu cihaz coörneğin, tam kan 10 ul; biyolojik numunelerin çok küçük miktarlarda bile büyük bir hassasiyetle hedef proteinlerin nadir miktarlarda algılayabilir beri uld in vitro diagnostik ve biyokimyasal tahliller büyük katkı. Biz sadece bu çalışmada ELISA kullanılarak serum protein algılama gösterdi rağmen, mikroakışkan cihazlar ile electrospun UF&#39;lerin transferi ve entegrasyon teknolojisi daha geniş yüksek algılama hassasiyeti için büyük bir yüzey alanı gerektiren diğer biyokimyasal reaksiyonlarda uygulanabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Si wafer</td>
			<td>LG SILTRON</td>
			<td>Polished Wafer, test grade</td>
			<td>Dia. (mm) = 150, orientation = &#60;100&#62;, dopant = boron, RES(Ohm-cm) = 1 - 30, thickness (&#956;m) = 650 - 700</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate (PC)&#160;</td>
			<td>Daedong Plastic</td>
			<td>PCS#6900</td>
			<td>Thickness (mm) = 1 and 5&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Titanium tetraisopropoxide, 98%,</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>205273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinylpyrrolidone, Mw = 1,300,000</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>437190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>320099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anhydrous ethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>459836</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tridecafluoro-1,1,2,2-tetrahydrooctyl)-1-trichlorosilane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>448931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDMS and curing agent</td>
			<td>Dow Corning</td>
			<td>SYLGARD 184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GPDES</td>
			<td>Gelest Inc</td>
			<td>SIG5832.0&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>J T Baker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FE-SEM</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova NanoSEM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray photoelectron spectroscopy</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>K-alpha</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D modeling machine</td>
			<td>M&#38;I CNC Lab, Korea</td>
			<td></td>
			<td>CNC milling machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wax-dispensing machine</td>
			<td>Hanra Precision Eng. Co. Ltd., Korea</td>
			<td></td>
			<td>Customized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-sided adhesive tape</td>
			<td>FLEXcon, USA</td>
			<td>DFM 200 clear 150 POLY H-9 V-95</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cutting plotter</td>
			<td>Graphtec Corporation, Japan</td>
			<td>Graphtec CE3000-60 MK2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spin coater</td>
			<td>MIDAS</td>
			<td>SPIN-3000D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Furnace (calcination)</td>
			<td>R. D. WEBB COMPANY</td>
			<td>WEBB 99</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rheometer (Tack test)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>Haake MARS&#160;III - ORM Package</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen plasma system</td>
			<td>FEMTO</td>
			<td>CUTE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monoclonal mouse antihuman hsCRP</td>
			<td>Hytest Ltd., Finland</td>
			<td>4C28</td>
			<td>(clone # C5)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monoclonal mouse anti-cTnI</td>
			<td>Hytest Ltd., Finland</td>
			<td>4T21</td>
			<td>(clone # 19C7)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP conjugated goat polyclonal anti-hsCRP</td>
			<td>Abcam plc., MA</td>
			<td>ab19175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP conjugated mouse monoclonal anti-cTnI</td>
			<td>Abcam plc., MA</td>
			<td>ab24460</td>
			<td>(clone # 16A11)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hsCRP</td>
			<td>Abcam plc., MA</td>
			<td>ab111647</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cTnI</td>
			<td>Fitzgerald, MA</td>
			<td>30-AT43</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Amresco Inc</td>
			<td>E404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood collection tubes</td>
			<td>BD vacutainer</td>
			<td>367844</td>
			<td>K2 EDTA 7.2 mg plus blood 
			collection tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperSignal ELISA femto</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>37074</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modular multilabel plate reader</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Envision 2104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disc operating machine</td>
			<td>Hanra Precision Eng. Co. Ltd., Korea</td>
			<td></td>
			<td>Customized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photomultiplier tube (PMT)</td>
			<td>Hamamatsu Photonics</td>
			<td>H1189-210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoCAD</td>
			<td>AutoDesk</td>
			<td>Version 2012</td>
			<td>Design software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SolidWorks 3D CAD software&#160;</td>
			<td>SOLIDWORKS Corp.</td>
			<td>Version 2013</td>
			<td>3D Design software,</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Edgecam</td>
			<td>Vero software</td>
			<td>version 2009.01.06928</td>
			<td>Code generating software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeskCNC</td>
			<td>Carken Co.</td>
			<td>version 2.0.2.18</td>
			<td>CNC milling machine software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fully automated centrifugal microfluidic device for ultrasensitive protein detection from whole blood

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a promising method to detect small amount of proteins in biological samples. The devices providing a platform for reduced sample volume and assay time as well as full automation are required for potential use in point-of-care-diagnostics. Recently, we have demonstrated ultrasensitive detection of serum proteins, C-reactive protein (CRP) and cardiac troponin I (cTnI), utilizing a lab-on-a-disc composed of TiO2 nanofibrous (NF) mats. It showed a large dynamic range with femto molar (fM) detection sensitivity, from a small volume of whole blood in 30 min. The device consists of several components for blood separation, metering, mixing, and washing that are automated for improved sensitivity from low sample volumes. Here, in the video demonstration, we show the experimental protocols and know-how for the fabrication of NFs as well as the disc, their integration and the operation in the following order: processes for preparing TiO2 NF mat; transfer-printing of TiO2 NF mat onto the disc; surface modification for immune-reactions, disc assembly and operation; on-disc detection and representative results for immunoassay. Use of this device enables multiplexed analysis with minimal consumption of samples and reagents. Given the advantages, the device should find use in a wide variety of applications, and prove beneficial in facilitating the analysis of low abundant proteins.

Bu protokol, yüksek hassasiyet hazırlanan ile tam kandan protein tespiti için tam otomatik santrifüj mikroakışkan cihaz kullanarak. TiO2 NF paspaslar Elektrospinning ve kalsinasyon işlemleri ile hazırlanmıştır. Bu akış hızı, voltaj ve eğirme süresi gibi koşullar, Elektrospinning, arzu edilen çapta, morfoloji ve kalınlığı UF&#39;lerini imal etmek için optimize edilmiştir. koşulları optimize değildi zaman, oluşan UF&#39;lerden kalitesi kötü. Özellikle, UF&#39;ler düşük voltaj (5 kV) polimer çözeltisinden dışarı bükülmüş değildi ve gerilim yüksek iken (&gt; 20 kV) kırıldı. Benzer şekilde, eğirme zaman uygun yoğunluk, çok seyrek değil (1 dakika) veya çok yoğun (30 dk) ile UF&#39;lere imalatı için kritik oldu. Ayrıca, yüksek akış oranları nedeniyle kordon oluşmasını önlemek için, akış hızı manipüle edilmiştir. Bu nedenle, bir 15 kV uygulanan voltaj, 10 dakika electrospinning süresi ve 0.3 mi saatlik bir akış oranı <sup&gt; -1 morfolojisi ve elde edilen UF kalınlığı (Şekil 1) göre, NF üretimi için en uygun koşulları kullanılmıştır. TiO2 NF MAT başarıyla silanize silikon alt-tabaka ve 65 ° C&#39;de bir fırında önceden tedavi ile ilgili spin kaplama PDMS ile hazırlandı bir yapışkan PDMS tabaka kullanarak hedef alt tabaka üzerine transfer edildi. Ön kür PDMS katmanı için zaman, yapışma kuvveti kontrol yapışma testi (Şekil 2A) kullanılarak optimize edilmiştir. Şekil 2B nanolif eki zaman kür etkisini göstermektedir. PDMS 3 dakika boyunca ısıtıldı ise PDMS henüz vulkanize olmamış ve bir sıvı olarak kalır ve NFS PDMS tabakası içine gömülü var gibi, hiç bir yapışma kuvveti vardır. 30 dakika boyunca ısıtıldığında PDMS sertleşir ve yapışkan özelliği kaybeder ve NF&#39;ler üzerinde takılı değil gibi, yapışma kuvveti çok zayıftır. PDMS fo ısıtıldığındar 10 dk, PDMS güçlü yapışma kuvveti gösterdi ve UF&#39;ler kuvvetle bağlanmıştır. sonuçlarından, güçlü bir bağlantı için PDMS ön sertleştirme için optimal süre 10 dakika olduğu sonucuna varılmıştır. Disk montaj sonrası, immunoassay Tablo 1&#39;de listelenen disk çalıştırma süreçlerinin bir dizi takip ederek TiO2 NF mat entegre disk üzerinde yürütülmüştür. Bilinmeyen örneklerde CRP ve cTnI konsantrasyonlarının belirlenmesi için, her biri için kalibrasyon grafikleri çizerek yapılmıştır CRP veya cTnl konsantrasyonuna karşı nispi ışık birimleri (RLU) (Şekil 3). Şekil 3A ve 3B&#39;de, disk üzerinde deney sonuçları, sırasıyla CRP ve cTnI&#39;yi için 96 oyuklu bir plaka üzerinde, geleneksel ELISA ile karşılaştırılmıştır. deneyler, bir disk üzerindeki cTnI 0.8 CRP için pg / ml (~ 6 FM) ve 37 ug / ml (1:05) bir saptama sınırı ile geniş bir lineer dinamik aralığı sergilemiştirCRP için yaklaşık 300 kat daha yüksek ve bunların ilgili geleneksel ELISA sonuçları (824 ug / ml, cTnI 32 pM 286 pg / ml, CRP, 14:03) ile karşılaştırıldığında cTnI 20 kat daha yüksektir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54143/54143fig1.jpg" /> Şekil elektro koşulları 1. optimizasyonu. Her koşulda SEM görüntüleri oluşan UF morfoloji göstermektedir. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54143/54143fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/54143/54143fig2.jpg" /> Yapışkan PDMS katman ve transfer TiO2 NF mat SEM görüntüleri Şekil 2. Tack testi. (A) yapıştırıcı Yapışma kuvvetiZaman birkaç uzunlukları, (B), farklı zaman uzunlukları için tedavi PDMS takılı nano SEM görüntüleri için önceden vulkanize PDMS tabaka. Bu rakam Ref modifiye edilmiştir. 21. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54143/54143fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/54143/54143fig3.jpg" /> On-a-disk laboratuar ve 96 oyuklu bir plaka kullanılarak CRP ve cTnI tespiti için Şekil 3. Kalibrasyon grafikleri. CRP saptanması CRP içermeyen serumu (A) tutturuldu ve cTnl yürütülmüştür tam kan (B) &#39;de bir artış gösterdi. Hata çubukları, en az üç bağımsız ölçümün standart sapma gösterir. Saptama sınırı (LOD) cTnI&#39;nın spike olmayan CRP içermeyen serum veya tam kan ölçülen negatif kontrol verilerinin standart sapmanın 3 kez hesaplanmıştırCRP ve cTnl sırasıyla. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/54143/54143fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Spin No </td><td> Hızı (rpm) </td><td> Vana No </td><td> Süresi (sn) </td><td colspan="4"> operasyon </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 3600 </td><td></td><td> 60 </td><td colspan="4"> kan ayırma </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 2400 </td><td> 1 </td><td> 3 </td><td colspan="4"> Açık vana HRP ile konjüge edilmiş antikorları tespit 8 ul ihtiva eden bölme içine plazma aktarmak </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 15Hz, 15 ° </td><td></td><td> 5 </td><td colspan="4"> Plazma ve tespit antikorları karıştırın </td></tr><tr><td> 4. &lt;/ Td&gt; <td> 2400 </td><td> 2 </td><td> 3 </td><td colspan="4"> Açık vana bağlayıcı reaksiyon haznesine karışımı aktarmak </td></tr><tr><td> 5 </td><td> 60 Hz, 2 ° </td><td></td><td> 1.200 </td><td colspan="4"> TiO2 NF mat ve plazma tespit antikorlar karışımı yakalama antikorları mix </td></tr><tr><td> 6 </td><td> 2400 </td><td> 3 </td><td> 10 </td><td colspan="4"> açık valf karışımı kaldırmak için </td></tr><tr><td> 7 </td><td> 2400 </td><td> 4 </td><td> 4 </td><td colspan="4"> Açık vana yıkama tamponu aktarmak </td></tr><tr><td> 8 </td><td> 30 Hz, 30 ° </td><td></td><td> 120 </td><td colspan="4"> yıkama tamponu karıştırmak ve TiO2 NF mat yıkama </td></tr><tr><td> 9 </td><td> 2400 </td><td></td><td> 4 </td><td colspan="4"> Transfer yıkama tamponu </td></tr><tr><td> 10 </td><td> 30 Hz, 30 ° </td><td></td><td> 120 </td><td colaçıklık = &quot;4&quot;&gt; yıkama tamponu karıştırmak ve yıkama TiO2 NF mat </td></tr><tr><td> 11 </td><td> 2400 </td><td></td><td> 4 </td><td colspan="4"> Transfer yıkama tamponu </td></tr><tr><td> 12 </td><td> 30 Hz, 30 ° </td><td></td><td> 120 </td><td colspan="4"> yıkama tamponu karıştırmak ve TiO2 NF mat yıkama </td></tr><tr><td> 13 </td><td> 2400 </td><td></td><td> 4 </td><td colspan="4"> Transfer yıkama tamponu </td></tr><tr><td> 14 </td><td> 30 Hz, 30 ° </td><td></td><td> 120 </td><td colspan="4"> yıkama tamponu karıştırmak ve TiO2 NF mat yıkama </td></tr><tr><td> 15 </td><td> 2400 </td><td></td><td> 20 </td><td colspan="4"> Kalan yıkama tamponu çıkarmak </td></tr><tr><td> 16 </td><td></td><td> 5 </td><td></td><td colspan="4"> yakın valf </td></tr><tr><td> 17 </td><td> 2400 </td><td> 6 </td><td> 10 </td><td colspan="4"> açık valve ve kemilüminesan substrat aktarmak </td></tr><tr><td> 18 </td><td> 30 Hz, 2 ° </td><td></td><td> 60 </td><td colspan="4"> substrat ve TiO2 NF mat immunoreagents mix </td></tr><tr><td> 19 </td><td> 2400 </td><td> 7 </td><td> 10 </td><td colspan="4"> valf açılır ve tespit bölmesinin sokularak substrat aktarmak </td></tr><tr><td colspan="3"> Toplam zaman </td><td> ~ 30 dakika </td><td colspan="4"></td></tr></tbody></table> Bir diskte immunoassay Tablo 1. Çalışma programı. Bu tablo Ref modifiye edilmiştir. 21.

Watch this Scientific Journal Video about Fully Automated Centrifugal Microfluidic Device for Ultrasensitive Protein Detection from Whole Blood at JoVE.com

Fully Automated Centrifugal Microfluidic Device for Ultrasensitive Protein Detection from Whole Blood

Tüm Blood adlı ultrasensitive Protein Algılama için Tam Otomatik Santrifüj mikroakışkan Cihazı

This protocol demonstrates how to achieve femto molar detection sensitivity of proteins in 10 &#181;L of whole blood within 30 min. This can be achieved by using electrospun nanofibrous mats integrated in a lab-on-a-disc, which offers high surface area as well as effective mixing and washing for enhanced signal-to-noise ratio.

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a promising method to detect small amount of proteins in biological samples. The devices providing a platform ...

fully-automated-centrifugal-microfluidic-device-for-ultrasensitive

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Bioengineering

10.4K Görüntüleme.  School of Life Sciences, Ulsan National Institute of Science and Technology (UNIST), UNIST-gil 50, Ulsan, Republic of Korea. This protocol demonstrates how to achieve femto molar detection sensitivity of proteins in 10 µL of whole blood within 30 min. This can be achieved by using electrospun nanofibrous mats integrated in a lab-on-a-disc, which offers high surface area as well as effective mixing and washing for enhanced signal-to-noise ratio.

Video: Fully Automated Centrifugal Microfluidic Device for Ultrasensitive Protein Detection from Whole Blood

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

We have developed a microfluidic device that mimics the delivery and systemic clearance of drugs to heterogeneous three-dimensional tumor tissues in vitro. Nutrients delivered by vasculature fail to reach all parts of tumors, giving rise to heterogeneous microenvironments consisting of viable, quiescent and necrotic cell types. Many cancer drugs fail to effectively penetrate and treat all types of cells because of this heterogeneity. Monolayers of cancer cells do not mimic this heterogeneity, making it difficult to test cancer drugs with a suitable in vitro model. Our microfluidic devices were fabricated out of PDMS using soft lithography. Multicellular tumor spheroids, formed by the hanging drop method, were inserted and constrained into rectangular chambers on the device and maintained with continuous medium perfusion on one side. The rectangular shape of chambers on the device created linear gradients within tissue. Fluorescent stains were used to quantify the variability in apoptosis within tissue. Tumors on the device were treated with the fluorescent chemotherapeutic drug doxorubicin, time-lapse microscopy was used to monitor its diffusion into tissue, and the effective diffusion coefficient was estimated. The hanging drop method allowed quick formation of uniform spheroids from several cancer cell lines. The device enabled growth of spheroids for up to 3 days. Cells in proximity of flowing medium were minimally apoptotic and those far from the channel were more apoptotic, thereby accurately mimicking regions in tumors adjacent to blood vessels. The estimated value of the doxorubicin diffusion coefficient agreed with a previously reported value in human breast cancer. Because the penetration and retention of drugs in solid tumors affects their efficacy, we believe that this device is an important tool in understanding the behavior of drugs, and developing new cancer therapeutics.

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

We present the procedure for fabrication and operation of a microfluidic device that recreates heterogeneous tumor microenvironments in vitro. The variability in apoptosis within tumor tissue was quantified using fluorescent stains and the effective diffusion coefficient of the chemotherapeutic drug doxorubicin into tumor tissue was evaluated.

Bir Tümör Mikroçevre yeniden oluşturmak için mikroakışkan Cihazı<em&gt; In vitro</em

We have developed a microfluidic device that mimics the delivery and systemic clearance of drugs to heterogeneous three-dimensional tumor tissues in ...

Biyomühendislik

Fluorescence detection methods for microfluidic droplet platforms

The development of microfluidic platforms for performing chemistry and biology has in large part been driven by a range of potential benefits that accompany system miniaturisation. Advantages include the ability to efficiently process nano- to femoto- liter volumes of sample, facile integration of functional components, an intrinsic predisposition towards large-scale multiplexing, enhanced analytical throughput, improved control and reduced instrumental footprints.1
In recent years much interest has focussed on the development of droplet-based (or segmented flow) microfluidic systems and their potential as platforms in high-throughput experimentation.2-4 Here water-in-oil emulsions are made to spontaneously form in microfluidic channels as a result of capillary instabilities between the two immiscible phases. Importantly, microdroplets of precisely defined volumes and compositions can be generated at frequencies of several kHz. Furthermore, by encapsulating reagents of interest within isolated compartments separated by a continuous immiscible phase, both sample cross-talk and dispersion (diffusion- and Taylor-based) can be eliminated, which leads to minimal cross-contamination and the ability to time analytical processes with great accuracy. Additionally, since there is no contact between the contents of the droplets and the channel walls (which are wetted by the continuous phase) absorption and loss of reagents on the channel walls is prevented.
Once droplets of this kind have been generated and processed, it is necessary to extract the required analytical information. In this respect the detection method of choice should be rapid, provide high-sensitivity and low limits of detection, be applicable to a range of molecular species, be non-destructive and be able to be integrated with microfluidic devices in a facile manner. To address this need we have developed a suite of experimental tools and protocols that enable the extraction of large amounts of photophysical information from small-volume environments, and are applicable to the analysis of a wide range of physical, chemical and biological parameters. Herein two examples of these methods are presented and applied to the detection of single cells and the mapping of mixing processes inside picoliter-volume droplets. We report the entire experimental process including microfluidic chip fabrication, the optical setup and the process of droplet generation and detection.

Droplet-based microfluidic platforms are promising candidates for high throughput experimentation since they are able to generate picoliter, self-compartmentalized vessels inexpensively at kHz rates. Through integration with fast, sensitive and high resolution fluorescence spectroscopic methods, the large amounts of information generated within these systems can be efficiently extracted, harnessed and utilized.

Mikroakışkan damlacık platformları için Floresan algılama yöntemleri

The development of microfluidic platforms for performing chemistry and biology has in large part been driven by a range of potential benefits that ...

Microfluidic Mixers for Studying Protein Folding

The process by which a protein folds into its native conformation is highly relevant to biology and human health yet still poorly understood. One reason for this is that folding takes place over a wide range of timescales, from nanoseconds to seconds or longer, depending on the protein1. Conventional stopped-flow mixers have allowed measurement of folding kinetics starting at about 1 ms. We have recently developed a microfluidic mixer that dilutes denaturant ~100-fold in ~8 &mu;s2. Unlike a stopped-flow mixer, this mixer operates in the laminar flow regime in which turbulence does not occur. The absence of turbulence allows precise numeric simulation of all flows within the mixer with excellent agreement to experiment3-4.
Laminar flow is achieved for Reynolds numbers Re &le;100. For aqueous solutions, this requires micron scale geometries. We use a hard substrate, such as silicon or fused silica, to make channels 5-10 &mu;m wide and 10 &mu;m deep (See Figure 1). The smallest dimensions, at the entrance to the mixing region, are on the order of 1 &mu;m in size. The chip is sealed with a thin glass or fused silica coverslip for optical access. Typical total linear flow rates are ~1 m/s, yielding Re~10, but the protein consumption is only ~0.5 nL/s or 1.8 &mu;L/hr. Protein concentration depends on the detection method: For tryptophan fluorescence the typical concentration is 100 &mu;M (for 1 Trp/protein) and for FRET the typical concentration is ~100 nM.
The folding process is initiated by rapid dilution of denaturant from 6 M to 0.06 M guanidine hydrochloride. The protein in high denaturant flows down a central channel and is met on either side at the mixing region by buffer without denaturant moving ~100 times faster (see Figure 2). This geometry causes rapid constriction of the protein flow into a narrow jet ~100 nm wide. Diffusion of the light denaturant molecules is very rapid, while diffusion of the heavy protein molecules is much slower, diffusing less than 1 &mu;m in 1 ms. The difference in diffusion constant of the denaturant and the protein results in rapid dilution of the denaturant from the protein stream, reducing the effective concentration of the denaturant around the protein. The protein jet flows at a constant rate down the observation channel and fluorescence of the protein during folding can be observed using a scanning confocal microscope5.

In this work we explain the fabrication and use of a microfluidic mixer capable of mixing two solutions in ~8 &mu;s. We also demonstrate the use of these mixers with spectroscopic detection using UV fluorescence and fluorescence resonance energy transfer (FRET).

Protein Katlama Öğrenmenin mikroakışkan Mikserler

The process by which a protein folds into its native conformation is highly relevant to biology and human health yet still poorly understood. One reason ...

A Microfluidic Device for Studying Multiple Distinct Strains

The study of cell responses to environmental changes poses many experimental challenges: cells need to be imaged under changing conditions, often in a comparative manner. Multiwell plates are routinely used to compare many different strains or cell lines, but allow limited control over the environment dynamics. Microfluidic devices, on the other hand, allow exquisite dynamic control over the surrounding conditions, but it is challenging to image and distinguish more than a few strains in them. Here we describe a method to easily and rapidly manufacture a microfluidic device capable of applying dynamically changing conditions to multiple distinct yeast strains in one channel. The device is designed and manufactured by simple means without the need for soft lithography. It is composed of a Y-shaped flow channel attached to a second layer harboring microwells. The strains are placed in separate microwells, and imaged under the exact same dynamic conditions. We demonstrate the use of the device for measuring protein localization responses to pulses of nutrient changes in different yeast strains.

We present a simple method to produce microfluidic devices capable of applying similar dynamic conditions to multiple distinct strains, without the need for a clean room or soft lithography.

Birden Farklı Suşlarının incelenmesi için bir mikroakışkan Cihazı

The study of cell responses to environmental changes poses many experimental challenges: cells need to be imaged under changing conditions, often in a ...

Microfluidic Platform for Measuring Neutrophil Chemotaxis from Unprocessed Whole Blood

Neutrophils play an essential role in protection against infections and their numbers in the blood are frequently measured in the clinic. Higher neutrophil counts in the blood are usually an indicator of ongoing infections, while low neutrophil counts are a warning sign for higher risks for infections. To accomplish their functions, neutrophils also have to be able to move effectively from the blood where they spend most of their life, into tissues, where infections occur. Consequently, any defects in the ability of neutrophils to migrate can increase the risks for infections, even when neutrophils are present in appropriate numbers in the blood. However, measuring neutrophil migration ability in the clinic is a challenging task, which is time consuming, requires large volume of blood, and expert knowledge. To address these limitations, we designed a robust microfluidic assays for neutrophil migration, which requires a single droplet of unprocessed blood, circumvents the need for neutrophil separation, and is easy to quantify on a simple microscope. In this assay, neutrophils migrate directly from the blood droplet, through small channels, towards the source of chemoattractant. To prevent the granular flow of red blood cells through the same channels, we implemented mechanical filters with right angle turns that selectively block the advance of red blood cells. We validated the assay by comparing neutrophil migration from blood droplets collected from finger prick and venous blood. We also compared these whole blood (WB) sources with neutrophil migration from samples of purified neutrophils and found consistent speed and directionality between the three sources. This microfluidic platform will enable the study of human neutrophil migration in the clinic and the research setting to help advance our understanding of neutrophil functions in health and disease.

This protocol details an assay designed to measure human neutrophil chemotaxis from one droplet of whole blood with robust reproducibility. This approach circumvents the need for neutrophil separation and requires only a few minutes of assay preparation time. The microfluidic chip enables the repeated measure of neutrophil chemotaxis over time in infants or small mammals, where sample volume is limited.

İşlenmemiş kandan Nötrofil Kemotaksis Ölçüm mikroakışkan Platformu

Neutrophils play an essential role in protection against infections and their numbers in the blood are frequently measured in the clinic. Higher ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in porous media are relevant to several industrial and environmental processes such as wastewater treatment and CO2 sequestration. We used Pseudomonas fluorescens, a Gram-negative aerobic bacterium, to investigate biofilm formation in a microfluidic device that mimics porous media. The microfluidic device consists of an array of micro-posts, which were fabricated using soft-lithography. Subsequently, biofilm formation in these devices with flow was investigated and we demonstrate the formation of filamentous biofilms known as streamers in our device. The detailed protocols for fabrication and assembly of microfluidic device are provided here along with the bacterial culture protocols. Detailed procedures for experimentation with the microfluidic device are also presented along with representative results.

Protocols for the study of biofilm formation in a microfluidic device that mimics porous media are discussed. The microfluidic device consists of an array of micro-pillars and biofilm formation by Pseudomonas fluorescens in this device is investigated.

Mikro-ayağı ile bir mikroakışkan Aygıt Biyofilm Çıtası Formasyonu Protokolü

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Controlled Microfluidic Environment for Dynamic Investigation of Red Blood Cell Aggregation

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white blood cells and platelets that are suspended in blood plasma. Due to the abundance of the RBCs (40% to 45% of the blood volume), their behavior dictates the rheological behavior of blood especially in the microcirculation. At very low shear rates, RBCs are seen to assemble and form entities called aggregates, which causes the non-Newtonian behavior of blood. It is important to understand the conditions of the aggregates formation to comprehend the blood rheology in microcirculation. The protocol described here details the experimental procedure to determine quantitatively the RBC aggregates in microcirculation under constant shear rate, based on image processing. For this purpose, RBC-suspensions are tested and analyzed in 120 x 60 &#181;m poly-dimethyl-siloxane (PDMS) microchannels. The RBC-suspensions are entrained using a second fluid in order to obtain a linear velocity profile within the blood layer and thus achieve a wide range of constant shear rates. The shear rate is determined using a micro Particle Image Velocimetry (&#181;PIV) system, while RBC aggregates are visualized using a high speed camera. The videos captured of the RBC aggregates are analyzed using image processing techniques in order to determine the aggregate sizes based on the images intensities.

The protocol described details an experimental procedure to quantify Red Blood Cell (RBC) aggregates under a controlled and constant shear rate, based on image processing techniques. The goal of this protocol is to relate RBC aggregate sizes to the corresponding shear rate in a controlled microfluidic environment.

Kırmızı Kan Hücresi Toplama Dinamik Soruşturma Kontrollü mikroakışkan Çevre

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white ...

Analyzing Mixing Inhomogeneity in a Microfluidic Device by Microscale Schlieren Technique

In this paper, we introduce the use of microscale schlieren technique to measure mixing inhomogeneity in a microfluidic device. The microscale schlieren system is constructed from a Hoffman modulation contrast microscope, which provides easy access to the rear focal plane of the objective lens, by removing the slit plate and replacing the modulator with a knife-edge. The working principle of microscale schlieren technique relies on detecting light deflection caused by variation of refractive index1-3. The deflected light either escapes or is obstructed by the knife-edge to produce a bright or a dark band, respectively. If the refractive index of the mixture varies linearly with its composition, the local change in light intensity in the image plane is proportional to the concentration gradient normal to the optical axis. The micro-schlieren image gives a two-dimensional projection of the disturbed light produced by three-dimensional inhomogeneity.
To accomplish quantitative analysis, we describe a calibration procedure that mixes two fluids in a T-microchannel. We carry out a numerical simulation to obtain the concentration gradient in the T-microchannel that correlates closely with the corresponding micro-schlieren image. By comparison, a relationship between the grayscale readouts of the micro-schlieren image and the concentration gradients presented in a microfluidic device is established. Using this relationship, we are able to analyze the mixing inhomogeneity from associate micro-schlieren image and demonstrate the capability of microscale schlieren technique with measurements in a microfluidic oscillator4. For optically transparent fluids, microscale schlieren technique is an attractive diagnostic tool to provide instantaneous full-field information that retains the three-dimensional features of the mixing process.

Herein, we describe a procedure that employs microscale schlieren technique to measure mixing inhomogeneity in a microfluidic device. Through calibration, distribution of concentration gradient can be derived from the micro-schlieren image.

Mikro Schlieren Tekniği ile bir mikroakışkan Aygıt karıştırma homojen Analizi

In this paper, we introduce the use of microscale schlieren technique to measure mixing inhomogeneity in a microfluidic device. The microscale schlieren ...

Multi-step Variable Height Photolithography for Valved Multilayer Microfluidic Devices

Microfluidic systems have enabled powerful new approaches to high-throughput biochemical and biological analysis. However, there remains a barrier to entry for non-specialists who would benefit greatly from the ability to develop their own microfluidic devices to address research questions. Particularly lacking has been the open dissemination of protocols related to photolithography, a key step in the development of a replica mold for the manufacture of polydimethylsiloxane (PDMS) devices. While the fabrication of single height silicon masters has been explored extensively in literature, fabrication steps for more complicated photolithography features necessary for many interesting device functionalities (such as feature rounding to make valve structures, multi-height single-mold patterning, or high aspect ratio definition) are often not explicitly outlined. 
Here, we provide a complete protocol for making multilayer microfluidic devices with valves and complex multi-height geometries, tunable for any application. These fabrication procedures are presented in the context of a microfluidic hydrogel bead synthesizer and demonstrate the production of droplets containing polyethylene glycol (PEG diacrylate) and a photoinitiator that can be polymerized into solid beads. This protocol and accompanying discussion provide a foundation of design principles and fabrication methods that enables development of a wide variety of microfluidic devices. The details included here should allow non-specialists to design and fabricate novel devices, thereby bringing a host of recently developed technologies to their most exciting applications in biological laboratories.

Multilayer microfluidic devices often involve the fabrication of master molds with complex geometries for functionality. This article presents a complete protocol for multi-step photolithography with valves and variable height features tunable to any application. As a demonstration, we fabricate a microfluidic droplet generator capable of producing hydrogel beads.

Ventilli Katmanlı mikroakışkan Cihazlar için çok adımlı Değişken Yükseklik Fotolitografi

Microfluidic systems have enabled powerful new approaches to high-throughput biochemical and biological analysis. However, there remains a barrier to ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to spatially fractionate the sample based on a biological property of interest. For the resultant spatial distribution to be used as the assay readout, microfluidic devices are often subjected to microscopic analysis requiring complex instrumentation with higher cost and reduced portability. To address this limitation, we have developed an integrated electronic sensing technology for multiplexed detection of particles at different locations on a microfluidic chip. Our technology, called Microfluidic CODES, combines Resistive Pulse Sensing with Code Division Multiple Access to compress 2D spatial information into a 1D electrical signal. In this paper, we present a practical demonstration of the Microfluidic CODES technology to detect and size cultured cancer cells distributed over multiple microfluidic channels. As validated by the high-speed microscopy, our technology can accurately analyze dense cell populations all electronically without the need for an external instrument. As such, the Microfluidic CODES can potentially enable low-cost integrated lab-on-a-chip devices that are well suited for the point-of-care testing of biological samples.

We demonstrate a microfluidic platform with an integrated surface electrode network that combines resistive pulse sensing (RPS) with code division multiple access (CDMA), to multiplex detection and sizing of particles in multiple microfluidic channels.

Parçacıkların Mekansal Takip için Çoklanmış Elektronik Algılama ile mikroakışkan Platformu

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...