The authors have no acknowledgements.

Bu protokoller, bizim kurumun insan araştırma etik komitesinin yönergeleri izleyin. 1. Geleneksel Kornea Kollajen CXL (C-CXL) Hastanın 1. Hazırlık <ol><li> 5 gün ameliyat öncesi,% 1 pilokarpin iki kez tedavi gözünde bir gün düşer koydu. </li><li> Operasyon odasında, aseptik koşullarda, onun / onun sırtında hasta yatıyor. </li><li> Topikal anestezi gibi oksibuprokain% 0.4 yönetin. </li><li> Göz ve iki kez antiseptik iyot ile göz çevresindeki deri temizleyin. </li><li> Gözü açık tutmak için bir kapak spekulumu kullanın. </li></ol> 2. Epitel Kaldırma <ol><li> Bir daire kornea işaretleyici ile korneanın merkezi 9.0 mm işaretleyin. </li><li> Künt spatula kullanarak mekanik debridman ile kornea epitel merkezi 7,0 9,0 mm çıkarın. </li></ol> 3. Riboflavin Uygulaması <ol><li> % 0.1 th% 20 Dextran&#39;ın ile riboflavin Uygula<html> e kornea 20 dakika boyunca her dakika. </li></ol> 4. UVA Işınlama <ol><li> 3 mW / cm2 (5.4 J / cm2 yüzey doz) ışınımda ve 30 dakika boyunca çalışma mesafesi, bir 5 cm &#39;de bir 370 nm dalga boyu UVA ışığı ile kornea ışın tedavisi. </li></ol><img alt="figür 1" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig1.jpg" /> Şekil 1:., C-cxl UVA ışıma kornea 3 mW / cm2 (5.4 J / cm2 yüzey doz) ışınımda ve 30 dakika boyunca 5 cm&#39;lik çalışma mesafesi bir 370 nm dalga boyu UVA ışığı ile ışınlandırılır. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="2"><li> Işınlama sırasında korneaya her 5 dakikada riboflavin damla uygulanır. </li><li> Işınlama sırasında, topikal anestezi (oksibuprokain% 0.4), gerekirse ilave edin. </li></ol>Cerrahi &quot;&gt; 5. Sonu <ol><li> Put antibiyotikli damlalar (tobramisin% 0.3) ve işletilen göz içine yapay gözyaşı (hyaluronate 0.18% düşer). </li><li> Re-epitelizasyon tamamlanana kadar ameliyat sonunda yumuşak bir bandaj kontakt lens yerleştirin. Yeniden epitelizasyon genellikle 3 gün sürer. </li><li> Parasetamol (500 mg), ve kodein (30 mg), 6 hap Günde olarak analjezikler öngörülmesi-. </li><li> Kornea reepitelizasyon sonra steroid topikal tedavi (topikal deksametazon 1 mg / ml) başlatmak ve 3-4 hafta devam eder. Ayrıca, 1 ay boyunca suni gözyaşları günde 4 kez kullanın. </li></ol> 2. Hızlandırılmış Kornea Kollajen CXL (A-CXL) Hastanın 1. Hazırlık <ol><li> 5 gün ameliyat öncesi,% 1 pilokarpin iki kez tedavi gözünde bir gün düşer koydu. </li><li> Operasyon odasında, aseptik koşullarda, onun / onun sırtında hasta yatıyor. </li><li> Topikal anestezi gibi oksibuprokain% 0.4 yönetin. </li><li> E temizleyinSiz ve iki kez antiseptik iyot ile göz çevresindeki deri. </li><li> Gözü açık tutmak için bir kapak spekulumu kullanın. </li></ol> 2. Epitel Kaldırma <ol><li> Bir daire kornea işaretleyici ile korneanın merkezi 9.0 mm işaretleyin </li><li> Künt spatula kullanarak mekanik debridman ile kornea epitel merkezi 7,0 9,0 mm çıkarın. </li></ol> 3. Riboflavin Uygulaması <ol><li> 10 dakika boyunca kornea üzerinde Dextran&#39;ın olmadan her 2 dakikada bir% 0.1 riboflavin uygulayın. </li></ol> 4. UVA Işınlama <ol><li> 30 mW / cm2 (5.4 J / cm2 yüzey dozu) ve 3 dakika boyunca 5 cm&#39;lik çalışma mesafesinde bir radyasyonunun bir 370 nm dalga boyu UVA ışığı ile kornea ışın tedavisi. </li><li> (Oxybuproca &amp; # 239;% 0.4 NE) Işınlama sırasında, topikal anestezi eklemek gerekirse. </li></ol> Cerrahi 5. Sonu <ol><li> Antibiyotikli damlalar (tobramisin% 0.3) ve yapay gözyaşları (hyaluronate 0 damla yerleştirin<html> Ameliyat göz içine 0,18%). </li><li> Re-epitelizasyon tamamlanana kadar ameliyat sonunda yumuşak bir bandaj kontakt lens yerleştirin. Yeniden epitelizasyon genellikle 3 gün sürer. </li><li> Parasetamol (500 mg), ve kodein (30 mg), 6 hap Günde olarak analjezikler öngörülmesi-. </li><li> Kornea reepitelizasyon sonra steroid topikal tedavi (topikal deksametazon 1 mg / ml) başlatmak ve 3-4 hafta devam eder. Ayrıca, 1 ay boyunca suni gözyaşları günde 4 kez kullanın. </li></ol> 3. İyontoforez (I-CXL) Hastanın 1. Hazırlık <ol><li> 5 gün ameliyat öncesi,% 1 pilokarpin iki kez tedavi gözünde bir gün düşer koydu. </li><li> Operasyon odasında, aseptik koşullarda, onun / onun sırtında hasta yatıyor. </li><li> Topikal anestezi gibi oksibuprokain% 0.4 yönetin. </li><li> Göz ve iki kez antiseptik iyot ile göz çevresindeki deri temizleyin. </li><li> Gözü açık tutmak için bir kapak spekulumu kullanın. </li></ol><html> _step &quot;&gt; 2. İyontoforez Cihazı yerleştirin. <ol><li> Operatif alan altında alnına yapışkan pasif elektrot uygulayın. </li><li> Açık göze, aktif elektrot, bir emme halkası uygulayın. Emme bırakmadan önce korneanın çevresine emme halkası ortalayın. </li></ol><img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/53119/53119fig2.jpg" /> Şekil 2. İyontoforez cihazı. Pasif elektrot ameliyat alanının altındaki alnına ve aktif elektrot, bir emme halkası üzerinde uygulanan açık göze uygulanır. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 3. Riboflavin Uygulaması <ol><li> 0,1 hypoosmolar% Dekstran olmayan riboflavin emme halka doldurun. </li></ol><html> jpg &quot;/&gt; I-CXL Şekil 3. Riboflavin uygulaması. Emme halkası Dextran&#39;ın olmadan hypoosmolar% 0.1 riboflavin ile doldurulur. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="2"><li> 0.2 mA elektrik akımı başlayın ve giderek 5 dakika (Şekil 4) toplam iyontoforez süre için 1,0 mA artar. </li></ol><img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/53119/53119fig4.jpg" /> Nüfuz riboflavin için Şekil 4. İyontoforez cihazı. Elektrik akımı başlangıçta 0,2 mA ve yavaş yavaş 1.0 mA yükselmiştir. Toplam iyontoforez süresi 5 dakikadır. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> ep &quot;&gt; 4. UVA Işınlama <ol><li> 10 mW / cm2 (5.4 J / cm2 yüzey dozu) ve 9 dakika boyunca 5 cm&#39;lik çalışma mesafesinde bir radyasyonunun bir 370 nm dalga boyu UVA ışığı ile kornea ışın tedavisi. </li><li> (Oxybuproca &amp; # 239;% 0.4 NE) Işınlama sırasında, topikal anestezi eklemek gerekirse. </li></ol> Cerrahi 5. Sonu <ol><li> Antibiyotik damla (tobramisin% 0.3) ve işletilen göz içine yapay gözyaşı (hyaluronate 0.18% düşer) yerleştirin. </li><li> Parasetamol (500 mg), ve kodein (30 mg), 6 hap Günde olarak analjezikler öngörülmesi-. </li><li> Ameliyattan sonra, steroidler ile topikal tedavi (topikal deksametazon 1mg / ml) başlatmak ve 3-4 hafta devam eder. Ayrıca, 1 ay boyunca suni gözyaşları günde 4 kez kullanın. </li></ol>

<ol>
	<li>Rabinowitz, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Keratoconus.">Keratoconus.</a> Surv Ophthalmol. 42 (4), 297-319 (1998).</li><li>Tuori, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunohistochemical+composition+of+corneal+basement+membrane+in+keratoconus.">The immunohistochemical composition of corneal basement membrane in keratoconus.</a> Curr Eye Res. 16 (8), 792-801 (1997).</li><li>Wollensak, G., Spoerl, E., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Riboflavin/ultraviolet-A-induced+collagen+cross-linking+for+the+treatment+of+keratoconus.">Riboflavin/ultraviolet-A-induced collagen cross-linking for the treatment of keratoconus.</a> Am J Ophthalmol. 135 (5), 620-627 (2003).</li><li>Raiskup-Wolf, F., Hoyer, A., Spoerl, E., Pillunat, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+cross-linking+with+riboflavin+and+ultraviolet-A+light+in+keratoconus:+long-term+results.">Collagen cross-linking with riboflavin and ultraviolet-A light in keratoconus: long-term results.</a> J Cataract Refract Surg. 34 (5), 796-801 (2008).</li><li>Vinciguerra, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=topographic,+tomographic,+and+aberrometric+analysis+of+keratoconic+eyes+undergoing+corneal+cross-linking.">topographic, tomographic, and aberrometric analysis of keratoconic eyes undergoing corneal cross-linking.</a> Ophthalmology. 116 (3), 369-378 (2009).</li><li>Caporossi, A., Mazzotta, C., Baiocchi, S., Caporossi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+results+of+riboflavin+ultraviolet-A+corneal+collagen+cross-linking+for+keratoconus+in+Italy:+the+Siena+eye+cross+study.">Long-term results of riboflavin ultraviolet-A corneal collagen cross-linking for keratoconus in Italy: the Siena eye cross study.</a> Am J Ophthalmol. 149 (4), 585-593 (2010).</li><li>Greenstein, S. A., Fry, K. L., Hersh, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+topography+indices+after+corneal+collagen+cross-linking+for+keratoconus+and+corneal+ectasia:+one-year+results.">Corneal topography indices after corneal collagen cross-linking for keratoconus and corneal ectasia: one-year results.</a> J Cataract Refract Surg. 37 (7), 1282-1290 (2011).</li><li>Ghanem, R. C., Santhiago, M. R., Berti, T., Netto, M. V., Ghanem, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topographic+corneal+wavefront,+and+refractive+outcomes+2+years+after+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus.">Topographic corneal wavefront, and refractive outcomes 2 years after collagen cross-linking for progressive keratoconus.</a> Cornea. 33 (1), 43-48 (2014).</li><li>Koller, T., Mrochen, M., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complication+and+failure+rates+after+corneal+cross-linking.">Complication and failure rates after corneal cross-linking.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (8), 1358-1362 (2009).</li><li>Rocha, K. M., Ramos-Esteban, J. C., Qian, Y., Herekar, S., Krueger, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+of+riboflavin-UVA+cross-linking+and+&#8220;flash-linking&#8221;+using+surface+wave+elastometry.">Comparative study of riboflavin-UVA cross-linking and &#8220;flash-linking&#8221; using surface wave elastometry.</a> J Refract Surg. 24 (7), 748-751 (2008).</li><li>Caporossi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+corneal+collagen+crosslinking+for+progressive+keratoconus:+24-month+clinical+results.">Transepithelial corneal collagen crosslinking for progressive keratoconus: 24-month clinical results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (8), 1157-1163 (2013).</li><li>Bikbova, G., Bikbov, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+corneal+collagen+cross-linking+by+iontophoresis+of+riboflavin.">Transepithelial corneal collagen cross-linking by iontophoresis of riboflavin.</a> Acta Ophthalmol. 92 (1), 30-34 (2014).</li><li>Efron, N., Hollingsworth, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+on+keratoconus+as+revealed+by+corneal+confocal+microscopy.">New perspectives on keratoconus as revealed by corneal confocal microscopy.</a> Clin Exp Optom. 91 (1), 34-55 (2008).</li><li>Patel, D. V., McGhee, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+the+corneal+sub-basal+nerve+plexus+in+keratoconus+by+in+vivo+laser+scanning+confocal+microscopy.">Mapping the corneal sub-basal nerve plexus in keratoconus by in vivo laser scanning confocal microscopy.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 47 (4), 1348-1351 (2006).</li><li>Ku, J. Y., Niederer, R. L., Patel, D. V., Sherwin, T., McGhee, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+scanning+in+vivo+confocal+analysis+of+keratocyte+density+in+keratoconus.">Laser scanning in vivo confocal analysis of keratocyte density in keratoconus.</a> Ophthalmology. 115 (5), 845-850 (2008).</li><li>Mazzotta, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+healing+after+riboflavin+ultraviolet-A+collagen+cross-linking+determined+by+confocal+laser+scanning+microscopy+in+vivo:+early+and+late+modifications.">Corneal healing after riboflavin ultraviolet-A collagen cross-linking determined by confocal laser scanning microscopy in vivo: early and late modifications.</a> Am J Ophthalmol. 146 (4), 527-533 (2008).</li><li>Seiler, T., Hafezi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+cross-linking-induced+stromal+demarcation+line.">Corneal cross-linking-induced stromal demarcation line.</a> Cornea. 25 (9), 1057-1059 (2006).</li><li>Doors, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+anterior+segment+optical+coherence+tomography+to+study+corneal+changes+after+collagen+cross-linking.">Use of anterior segment optical coherence tomography to study corneal changes after collagen cross-linking.</a> Am J Ophthalmol. 148 (6), 844-851 (2009).</li><li>Mazzotta, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+progressive+keratoconus+by+riboflavin-UVA-induced+cross-linking+of+corneal+collagen:+ultrastructural+analysis+by+Heidelberg+Retinal+Tomograph+II+in+vivo+confocal+microscopy+in+humans.">Treatment of progressive keratoconus by riboflavin-UVA-induced cross-linking of corneal collagen: ultrastructural analysis by Heidelberg Retinal Tomograph II in vivo confocal microscopy in humans.</a> Cornea. 26 (4), 390-397 (2007).</li><li>Kymionis, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+the+corneal+collagen+cross-linking+demarcation+line+using+confocal+microscopy+and+anterior+segment+optical+coherence+tomography+in+keratoconic+patients.">Correlation of the corneal collagen cross-linking demarcation line using confocal microscopy and anterior segment optical coherence tomography in keratoconic patients.</a> Am J Ophthalmol. 157 (1), 110-115 (2014).</li><li>Yam, J. C., Chan, C. W., Cheng, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+collagen+cross-linking+demarcation+line+depth+assessed+by+Visante+OCT+After+CXL+for+keratoconus+and+corneal+ectasia.">Corneal collagen cross-linking demarcation line depth assessed by Visante OCT After CXL for keratoconus and corneal ectasia.</a> J Refract Surg. 28 (7), 475-481 (2012).</li><li>Jordan, C., Patel, D. V., Abeysekera, N., McGhee, C. .. N. .. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+confocal+microscopy+analyses+of+corneal+microstructural+changes+in+a+prospective+study+of+collagen+cross-linking+in+keratoconus.">In vivo confocal microscopy analyses of corneal microstructural changes in a prospective study of collagen cross-linking in keratoconus.</a> Ophthalmology. 121 (2), 469-474 (2014).</li><li>Touboul, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+confocal+microscopy+following+conventional,+transepithelial,+and+accelerated+corneal+collagen+cross-linking+procedures+for+keratoconus.">Corneal confocal microscopy following conventional, transepithelial, and accelerated corneal collagen cross-linking procedures for keratoconus.</a> J Refract Surg. 28 (11), 769-776 (2012).</li><li>Bouheraoua, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+confocal+microscopy+following+three+different+protocols+of+corneal+collagen-crosslinking+in+keratoconus.">Optical coherence tomography and confocal microscopy following three different protocols of corneal collagen-crosslinking in keratoconus.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55 (11), 7601-7609 (2014).</li><li>Hafezi, F., Mrochen, M., Iseli, H. P., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+crosslinking+with+ultraviolet-A+and+hypoosmolar+riboflavin+solution+in+thin+corneas.">Collagen crosslinking with ultraviolet-A and hypoosmolar riboflavin solution in thin corneas.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (4), 621-624 (2009).</li><li>C&#305;nar, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+accelerated+and+conventional+corneal+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus.">Comparison of accelerated and conventional corneal collagen cross-linking for progressive keratoconus.</a> Cutan Ocul Toxicol. 33 (3), 218-222 (2013).</li><li>Cing&#252;, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+corneal+endothelial+changes+following+accelerated+collagen+cross-linking+for+the+treatment+of+progressive+keratoconus.">Transient corneal endothelial changes following accelerated collagen cross-linking for the treatment of progressive keratoconus.</a> Cutan Ocul Toxicol. 33 (2), 127-131 (2013).</li><li>Spoerl, E., Mrochen, M., Sliney, D., Trokel, S., Seiler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+UVA-riboflavin+cross-linking+of+the+cornea.">Safety of UVA-riboflavin cross-linking of the cornea.</a> Cornea. 26 (4), 385-389 (2007).</li><li>Gokhale, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+endothelial+damage+after+collagen+cross-linking+treatment.">Corneal endothelial damage after collagen cross-linking treatment.</a> Cornea. 30 (12), 1495-1498 (2011).</li><li>Rootman, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetics+and+safety+of+transcorneal+iontophoresis+of+tobramycin+in+the+rabbit.">Pharmacokinetics and safety of transcorneal iontophoresis of tobramycin in the rabbit.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 29 (9), 1397-1401 (1998).</li><li>Vinciguerra, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+iontophoresis+corneal+collagen+cross-linking+for+progressive+keratoconus:+initial+clinical+outcomes.">Transepithelial iontophoresis corneal collagen cross-linking for progressive keratoconus: initial clinical outcomes.</a> J Refract Surg. 30 (11), 746-753 (2014).</li><li>Caporossi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Riboflavin-UVA-induced+corneal+collagen+cross-linking+in+pediatric+patients.">Riboflavin-UVA-induced corneal collagen cross-linking in pediatric patients.</a> Cornea. 31 (3), 227-231 (2012).</li><li>Buzzonetti, L., Petrocelli, G., Valente, P., Larossi, G., Ardia, R., Petroni, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iontophoretic+transepithelial+corneal+cross-linking+to+halt+keratoconus+in+pediatric+cases:+15-month+follow-up.">Iontophoretic transepithelial corneal cross-linking to halt keratoconus in pediatric cases: 15-month follow-up.</a> Cornea. 34 (5), 512-515 (2015).</li><li>Baiocchi, S., Mazzotta, C., Cerretani, D., Caporossi, T., Caporossi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+crosslinking:+riboflavin+concentration+in+corneal+stroma+exposed+with+and+without+epithelium.">Corneal crosslinking: riboflavin concentration in corneal stroma exposed with and without epithelium.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (5), 893-899 (2009).</li><li>Wollensak, G., Iomdina, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+and+histological+changes+after+corneal+crosslinking+with+and+without+epithelial+debridement.">Biomechanical and histological changes after corneal crosslinking with and without epithelial debridement.</a> J Cataract Refract Surg. 35 (3), 540-546 (2009).</li><li>Soeters, N., Wisse, R. P., Godefrooij, D. A., Imhof, S. M., Tahzib, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transepithelial+versus+epithelium-off+corneal+cross-linking+for+the+treatment+of+progressive+keratoconus:+a+randomized+controlled+trial.">Transepithelial versus epithelium-off corneal cross-linking for the treatment of progressive keratoconus: a randomized controlled trial.</a> Am J Ophthalmol. 159 (5), 821-828 (2015).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

UVA ışınlama ve riboflavin kullanılarak CXL keratokonus ilerlemesini durdurma standart tedavi yöntemidir. Riboflavin UVA 3 ile ışınlanması kimyasal kovalent bağlar (çapraz bağlar) oluşturan bir ışığa olan. Kornea olarak, bu olay, kornea sertliğini arttırmak kolajen fibrilleri arasındaki çapraz bağlantılar oluşturur. Bu fenomen, tarif edilmiş olmasına rağmen, şimdiye kadar, kornea içi çapraz bağların doğrudan bir kanıt yoktur. Bununla birlikte, bazı çalışmalar, böylece C-cxl 3-8 etkinliğini gösteren işlem sonrası Kmax bir stabilizasyon bildirmişlerdir. Bu etkinlik çapraz bağlantıları veya kornea stroma diğer mikro değişiklikler nedeniyle olup olmadığı sorusu cevapsız kalmaktadır. CXL etkinliğinin dolaylı klinik sonuçlarından biri CXL sonra ay OCT ve IVCM 1 AS ile tespit kornea sınır hattıdır. Son zamanlarda, Kymionis ve ark. gösterdi hyperreflectance evaEkim acellular ve konfokal mikroskopi 20 görülen hücresel bölge arasındaki geçiş alanına karşılık GİBİ kullanarak luated. Böylece, OKT AS görülen kornea sınır hattı bir aselüler stroma altında ve normal bir yukarıda aktive keratositler ve fibroblastes bir bölgeye uygun olmalıdır. Bununla birlikte, Yam ve ortakları 21 görme keskinliği değişikliği ile 6 ay C-CXL sonra maksimum K-değerin CXL sınır hattının derinliği arasında bir korelasyon göstermek için başarısız oldu. CXL daha büyük bir miktar görme keskinliği ve keratometrik büyük azalma daha büyük bir geliştirme neden olabilir sorusu uzun postoperatif takipli çalışmalar konu olmaya devam etmektedir. IVCM üzerinde ortalama ön keratosit hücre yoğunluğu sayımı ile ilgili ek olarak, önemli bir azalma I-CXL 22-24 C-CXL ve A-CXL ile 12. ayda normalleşme, ilk 6 ayda gözlenen ve 6. aylarda oldu . Sonuç olarak, mikro kornea değişendeğişiklikler kullanılan kolajen çapraz bağlama protokolünün türüne bağlı olarak görünür. Bu sonuç ve kornea sınır çizgisi A-CXL veya I-CXL bu üç protokollerin gösterge ve etkinliğini tartışmak için bize izin verir sonra daha C-CXL sonra anlamlı derin göründü aslında. Geleneksel protokol zaten 6 yıldır 3-8 maksimum takibi ile etkinliğini ve güvenilirliğini kanıtlamıştır. Cı-cxl endotel hücreleri 25 korumak için, en az 400 um pakimetri gerektirir. Başlıca dezavantajları bekleme süresi (1 saat) ve epitel kaldırmak için zorunluluk ile ilgilidir. Nitekim, bu rahatsızlık ve ağrı hastaya ve enfeksiyöz keratit ve stromal pus 9 gibi çeşitli komplikasyonlara neden olabilir açar. Bununla birlikte, şu an için, bu protokol hala evrim agresif, özellikle ilerici keratokonus tedavisinde tavsiye edilir. Cı-cxl başlıca sakıncalarından biri inci olduğu göz önüne alındığında,Prosedürün e süresi hızlandırılmış protokol başlangıçta kornea 26 daha yüksek bir parlama sunarak çalışma süresini azaltmayı amaçladık. Ancak, 10 dakika kadar iliklerine zamanı azaltarak böylece gözlemlenen, yüzeysel kornea sınır hattına gelen, kornea içine riboflavin içi stroma penetrasyon sınırlayabilir. Hatta bildirilmemiştir eğer foton aynı sayıda fibriller dokunun olmasına rağmen, A-cxl 10 kat daha yüksek bir ışık şiddeti, endotel yaralanma 27 riskini 28 uzanır mümkündür. Bu bağlamda, bunun Önemli A-CXL için kullanılan riboflavin Dextran&#39;ın yokluğu yüksek radyasyonunun rağmen endotel hasarı yokluğunu açıklayabileceği remark. Gerçekten de, Dekstran prosedürü sırasında korneal incelme yol açar ve bu yüzden potansiyel endotel hasarı 29 bir ozmotik etkisi olduğu bilinmektedir. Sonuç olarak, hızlandırılmış CXL güvenli CXL yöntem olarak görünmektedir. Ayrıca, A-CXL protokol seems etkili olduğu; Gerçekten maksimum K-değeri 6 aylık takip sabit kaldı. Bununla birlikte, C-CXL için olduğu gibi, onun büyük sınırlama ağrısı ve sisin ve kornea enfeksiyonu 9 gibi potansiyel komplikasyonlara yol desepithelialization olduğunu. Touboul ve ark. A-CXL 23 ile tedavi edilen hastaların konfokal mikroskopi kullanılarak nitel bir çalışma yürütülmektedir. C-CXL, UVA-riboflavin sertleşme etkisi ile karşılaştırıldığında Nitekim, daha keratosit apoptoz ve artan stromal yansıtma ile korneanın ön 150-200 mikron en önemli görünüyordu. Bu bulgu, ince kornealar (350-400 um minimum kalınlık) olan hastalarda hızlandırılmış cxl yarar olabileceğini düşündürmektedir. Şu anda, Cı-cxl önce ince kornea şişmesine yol açan bir hipoosmolar riboflavin bu protokol de endotel hasarı 25 engellemek için en az 400 um pakimetri gerektirdiği için kullanılır. Bununla birlikte, cxl tercih edilebilir hızlandırılmışentially ince kornealar için keratokonus stabilize etmek daha hızlı ve daha az nüfuz tedavisi gibi gelecekte de kullanılır. Ancak, uzun vadeli çalışmalar kesin kornea biyomekanik üzerindeki etkisi ile sınır hattı derinliğini ilişkilendirmek için gereklidir. İyontoforez cxl son epitel debridman 12, bir elektrik akımı kuvvetleri 30. Uygulama kornea stroma nüfuz hipoosmolar riboflavin önlemek için geliştirilmiş bir transepitelyal protokolüdür. Vinciguerra ve arkadaşları prospektif bir çalışmada iyontoforez CXL uygulanan 20 gözlerini inceledi. Bunlar Kmax 1 yıl işlemden sonra stabil olduğunu göstermiştir. Ancak, sınır çizgisi takip sırasında 31 OCT AS açıkça ölçülebilir değildi. Benzer şekilde, bizim çalışmamızda, kornea sınır çizgisi Ekim pek hastada (% 46.5) yarısından daha az 214 mikron ortalama derinlikte görüldü GİBİ ile değerlendirildi. Ayrıca, konfokal mikroskopi daha az keratosit ap ortayaİki diğer protokoller sonrasında daha I-CXL sonra optosis ve artan stromal yansıtma. Gerçekten de, konfokal mikroskopi ve modifiye riboflavin (Ricrolin TE), Caporossi diğ. transepitelyal çapraz bağlanma başka bir protokol incelenmiştir. Iyontoforez gelince, onlar stromal keratositlerin apoptoz yüzeysel (140 mikron derinlik demek) ve dengesiz ön stroma 11 görüldüğü olduğunu bulmak. Ayrıca, onlar bu Epi-ON protokolü, genellikle hastalığın 32 daha agresif formları muzdarip pediatrik hastalarda uygulanması için dikkatli bir not ekleyerek, takipte 24 ay sonra keratokonus evrim sonuçlandı doğruladı. Gerçekten de, diğer transepitelyal protokoller için olduğu gibi, iyontoforez pediyatrik hastalarda 33 topografik endeksleri bir iyileşme sağlamak için görünmüyor. Etkinlik bu yokluğu yerinde 11,34-36 yılında epitel ile sınırlı riboflavin ve UVA penetrasyonu ile açıklanabilir. Gerçekten de, epitel bir fiziki hastalıkları olanriboflavin ve UVA penetrasyonu hem de cal bariyer, apoptoz derinliğini sınırlayan ve böylece kornea biyomekanik etkileri 11. Buna ek olarak, riboflavin eşzamanlı UV ışınlarına maruz kalma 28 sırasında photosensitizer ve UV engelleyici olarak hizmet vermektedir. Dolayısıyla diğer transepitelyal protokoller için olduğu gibi, iyontoforez sırasında yetersiz riboflavin nüfuz sadece prosedürün etkinliğini sınırlamak değil, aynı zamanda endotel hücre hasarı riskini artırmakla kalmayacak, düşünülebilir. Bununla birlikte, hiçbir endotel hücre kaybı henüz iyontoforez sonra olarak kaydedilmiştir. Son olarak, benzer Vinciguerra diğ., 31 bizim çalışmamızda, en yüksek K-değeri 6 ay I-CXL sonra istikrarlı çıktı. Ancak, bu yeni prosedür güvenilir kalır mı uzun takiplerde gelen görülecektir. Böylece, diğer Epi-ON protokolleri ile olduğu gibi, dikkatli iyontoforez kullanırken ihtiyaç olduğunu. Bununla birlikte, transepitelyal CXL için coşku potansiyeli azalma göz önüne alındığında, anlaşılabilir bir durumdurCXL komplikasyonlar. Epi-OFF CXL ile komplikasyonlar esas olarak geçici sisin 9 kaynaklanan vakaların yaklaşık% 1 oranında görülür. Ne yazık ki, bu sis bazen kornea yaraları bırakır. Sonuç olarak, şu anda, iyontoforez CXL pediatrik hastalarda dikkatle kullanılmalı ve çoğunlukla ince kornealar ve yavaş ilerleyen keratokonus hastalarında bu protokolü önereceğini inanıyorum. Sonuç, penetrasyon konusunda, geleneksel CXL protokolü ilerici keratokonus tedavisinde standart seçenek kalır. Hızlandırılmış CXL özellikle ince korneası tedavisi için, hızlı, etkili ve güvenli bir alternatif olarak görünmektedir. İyontoforez ön keratositlerin daha az zarar ve daha az görünür sınır hattı ile ilişkilidir ve böylece daha fazla basiret ile ele alınmalıdır.

Keratokonus genellikle kornea şeklinin değiştirilmesi ile sonuçlanan genel popülasyonda 1 2,000 içinde 1 bildirilen ikili ve ilerleyici korneal ektazi ve böylece görme 2 azaldı. Keratokonus erken ergenlik genellikle mevcut ve hastalık genellikle stabilize eğilimi zaman ilerleme hastanın yaşamı boyunca değişken olabilir, ancak yaşamın dördüncü on üçüncü dek ilerler. Keratokonus ilerlemesini durdurarak, çapraz bağlama erteleme veya önlemek keratoplasti amaçlamaktadır. Bugüne kadar, klinik çalışmalarda kanıtlanmış ilerici keratokonus tek etkili ve güvenli bir tedavi sertliğini arttırmak ve dolayısıyla keratokonus ilerlemesini durdurmak 3-8 amaçlayan geleneksel kornea kollajen çapraz bağlama (C-CXL) protokoldür. Çalışma süresini ve enfeksiyöz keratit veya stromal pus 9 olarak C-CXL diğer olası risk faktörlerini azaltmak amacıyla, birçok gelişmiş protokoller var isetanımlanmıştır. İlk olarak, hızlandırılmış cxl (A-cxl) &#39;de, UVA daha yüksek bir ışık şiddeti azaltılmış zaman üzerinde 10 kornea teslim edilir. İkincisi, epitel debridmanı için gerekliliğini önlemek için, transepitelyal yaklaşımlar kullanılmıştır. Geleneksel protokole 11 oranla Ne yazık ki, onlar başarıyı sınırlıdır. CXL sırasında kornea riboflavin teslimat için en son transepitelyal yöntemi iyontoforez (I-CXL), ancak bu tedavinin titiz değerlendirme henüz 12 yapılmamıştır. İyontoforez küçük bir elektrik akımı, bir doku içinde bir iyonize ilacın nüfuz etmesini artırmak için uygulandığı bir invasif olmayan bir tekniktir. Iyontoforez ile CXL olarak, riboflavin epitel içinden kornea nüfuz iyonize edilir. Vivo konfokal mikroskopi (IVCM) bu tür keratokonus 13 gibi hastalıklarda anormal kornealar hücresel değişiklikler vurgulayabilirsiniz kornea görüntüleme yöntemidir. Gerçekten de, IVCMalt taban sinir ağına yoğunluğu, belirli bir azalma ile Keratokonusta korneanın tüm katmanları değişiklikler gösterdi ve stromal 13-15 keratositlerde gelmiştir. Ayrıca, IVCM Cı-cxl sonrası 16 korneanın mikro analiz için son derece uygun olduğu kanıtlanmıştır. Kornea sınır çizgisi 300 mikron 17,18 derinlikte C-CXL sonra hiperreflektif (OKT AS) ön segment optik koherens tomografi görülen hat 1 ay olarak tarif edilir. IVCM aşağıdaki C-CXL 300 mikron derinliğinde kornea keratositlerin yokluğu da dahil olmak üzere kornea yapısal değişiklikler hakkında bilgi sağlar. Bu acellular bölgenin derinliği, yanı sıra korneal stroma içinde sınır hattının derinliği, OCT 1 AS de CXL tedavisine 19 ve kornea sınır hattı derinliği ölçümü etkin derinliği ile ilişkili görünmektedir OKT AS üzerinde ortaya CXL sonra ay verimli bir klinik olarak öne sürülmüştürcxl etkinliği 18 değerlendirilmesi için yöntem. Bu çalışmada OCT ve konfokal mikroskopi AS tarafından kornea stromal sınır çizgisinin ölçümü kullanılarak üç farklı (geleneksel, hızlandırılmış ve iyontoforez) kornea kollajen çapraz bağlanma protokollerin etkinliğini araştırmak. Biz ayrıca niceliksel üç tedavilerden sonra kornea mikro değişiklikleri analiz etmek IVCM kullanılır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Riboflavin&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Product number</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C-CXL</td>
			<td>Sooft SPA, Montegiorgio, Italy</td>
			<td>Ricrolin&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 468465-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A-CXL</td>
			<td>Avedro Inc, Waltham, Massachusetts</td>
			<td>VibeX&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 520-01863-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I-CXL</td>
			<td>Sooft SPA, Montegiorgio, Italy</td>
			<td>Ricrolin+&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 975481-6</td>
			<td>Passive electrode: PROTENS ELITE 4848LE/ Active electrode: IONTOFOR CXL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>UVA Machine</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-Vega</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>UVA: 3 mW/cm2 30 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KXL System</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>UVA: 30 mW/cm2 10 min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-Vega</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>UVA: 10 mW/cm2 9 min</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three different protocols of corneal collagen crosslinking in keratoconus: conventional, accelerated and iontophoresis

Keratokonus ikili ve ilerleyici korneal ektazi olduğunu. Ilerlemesini yavaşlatmak amacıyla, kornea kollajen çapraz bağlama (CXL) kısa etkili bir tedavi seçeneği olarak kullanıma girmiştir. Biyolojik ve kimyasal bilimleri, çapraz reaktif moleküller arasında oluşan yeni kimyasal bağlar anlamına gelir. Bu nedenle, kornea kollajen cxl amacı sentetik kornea stromada kolajen fibrilleri arasındaki çapraz bağların oluşumunu artırmaktır. Geleneksel CXL (C-CXL) protokolünün etkinliği zaten çeşitli klinik çalışmalarda gösterilmiştir olmasına rağmen, prosedür ve kornea epitel çıkarılması süresindeki iyileştirmeler yarar olabilir. Bu nedenle, iki yeni ve optimize cxl protokolleri tutarlı bir değerlendirme sağlamak üzere, üç tedavi cxl bir geçirmiş keratokonus hasta araştırılmıştır: iyontoforez (I-cxl), CXL (A-cxl), ve konvansiyonel CXL (hızlandırılmış C-CXL). A-CXL 6 süresi, daha hızlı CXL prosedürü uHala bir epitel çıkarılması da dahil olmak üzere on zaman yüksek UVA ışınımı şarkı ama. İyontoforez küçük bir elektrik akımı kornea boyunca riboflavin penetrasyonunu artırmak tatbik edildiği bir transepitelyal invasif olmayan bir tekniktir. (OKT AS) ve in vivo konfokal mikroskopi (IVCM) ön segment optik koherens tomografi kullanarak, tedavi penetrasyon derinliği konusunda, geleneksel CXL protokolü ilerici keratokonus tedavisinde standart olmaya devam sonucuna varıldı. Hızlandırılmış CXL ince korneası tedavisi için, hızlı, etkili ve güvenli bir alternatif gibi görünüyor. Iyontoforez kullanımı hala araştırılmaktadır ve daha dikkatli ele alınmalıdır.

<html> Kornea sınır çizgisi (73.6 SD) 301,6 um ortalama derinlikte vakaların% 92&#39;sinde OCT AS görünür oldu <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/53119/53119fig5.jpg" /> C-CXL sonra Şekil 5. Demarkasyon hattı. (OKT AS) Yüksek çözünürlüklü kornea ön segment optik koherens tomografi taraması, geleneksel kornea kollajen çapraz sonra 358 mikron (beyaz ok), 1 ay ortalama derinliği kornea stromal sınır hattını görüntülenmesi bağlama (Cı-cxl). Ölçek çubuğu 250 mikron. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 1 aydan Cı-cxl sonra A-cxl sonra 183,1 um (SD, 39.6) &#39;in bir derinliği, vakaların% 85.5 görüldü ise. yük / 53119 / 53119fig6.jpg &quot;/&gt; A-CXL sonra Şekil 6. Demarkasyon hattı. (OKT AS) Yüksek çözünürlüklü kornea ön segment optik koherens tomografi taraması hızlandırılmış kornea kollajen çapraz sonra 176 mikron (beyaz ok), 1 ay ortalama derinliği kornea stromal sınır hattını görüntülenmesi bağlama (A-cxl). Ölçek çubuğu:. 250 mikron <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig6large.jpg" target="_blank">bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> Son olarak, I-CXL sonra, kornea sınır çizgisi sadece 214 mikron (SD, 37.5) ortalama derinliği olguların% 46.5 görüldü. Ya C-CXL, A-CXL veya I-CXL aşağıdaki kornea sınır hattı derinliği fark (p &lt;0.001 ve p = 0.01) istatistiksel olarak anlamlı bulundu. Sınır çizgisi C-CXL ve I-CXL (p = 0.005) sonra daha A-CXL sonra anlamlı olarak daha sık mevcuttu. <img alt="Şekil 7," src="/files/ftp_upload/53119/53119fig7.jpg" /> I-CXL sonra Şekil 7. Demarkasyon hattı. (OKT AS) Yüksek çözünürlüklü kornea ön segment optik koherens tomografi 238,5 mm (beyaz ok), iyontoforez 1 ay sonra (I-CXL ortalama derinliği kornea stromal sınır hattını görüntülenmesi ). Ölçek çubuğu:. 250 mikron <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53119/53119fig7large.jpg" target="_blank">bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> Hiçbir intra veya ameliyat sonrası komplikasyonlar endotelyal hücre sayımı anlamlı farklılıklar içeren üç protokol, herhangi uygulanmasından sonra 6 ay içinde hasta takipleri tespit edildi. Dahası, maksimum K-değeri (Kmax) 6 aylık takip sonrası protokollerin her biri için sabit kalmıştır. <img alt="tablo 1" src="/files/ftp_upload/53119/53119tab1.jpg" /></p&gt; Tablo 1. Etkinlik ve CXL. Maksimum K-değeri (diyoptri, D) Evrim ve konvansiyonel (C-CXL) Aşağıdaki endotel yoğunluğu, her protokol güvenliği (A-CXL) ve iyontoforez (I-CXL) hızlandırılmış çapraz bağlama. Protokollerin her biri için, 1-3 aylık postoperatif dönemde, hücre dışı lacunae ve parçalanmış keratosit çekirdekleri ile ön stromal ödem IVCM gözlenmiştir. 6 ayda, keratosit çekirdekleri ile ön stroma repopulation görüldü ve iki diğer protokoller sonrasında daha I-CXL sonra büyüktü. Çapraz bağlı olan ve olmayan çapraz bağlı kornea stroma arasındaki sınır keratositler uzatılmış ve büyük hiper-yansıtıcı stromal bantları ile çevrili oldu bir bölge olarak görülmüştür. <img alt="Şekil 8" src="/files/ftp_upload/53119/53119fig8.jpg" /> CC sonra Şekil 8 .: Mikroyapı korneal değişikliklerXL geleneksel kollajen çapraz bağlama (C-CXL) 1 ay sonra elde edilen korneal stroma in vivo konfokal mikroskopi taramaları (IVCM):. Hiper-yansıtıcı sitoplazma (beyaz oklar) ve hücre dışı boşluklar (yıldız) ile ön stromal ödem gözlenir. Ölçek çubuğu: 50 mikron.

Watch this Scientific Journal Video about Three Different Protocols of Corneal Collagen Crosslinking in Keratoconus: Conventional, Accelerated and Iontophoresis at JoVE.com

Three Different Protocols of Corneal Collagen Crosslinking in Keratoconus: Conventional, Accelerated and Iontophoresis

Corneal collagen cross-linking (CXL) is the only conservative treatment currently available to halt keratoconus progression by improving the biomechanical rigidity of the corneal stroma. The aim of this manuscript is to highlight the methods of three different protocols of CXL: conventional CXL (C-CXL), accelerated CXL (A-CXL), and iontophoresis CXL (I-CXL).

Keratokonus Kornea Kollajen çapraz bağlama Üç Farklı Protokoller: Konvansiyonel, Hızlandırılmış ve İyontoforez

Keratoconus is a bilateral and progressive corneal ectasia. In order to slow down its progression, corneal collagen cross-linking (CXL) has recently been ...

three-different-protocols-corneal-collagen-crosslinking-keratoconus

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

19.8K Görüntüleme.  Quinze-Vingts National Ophthalmology Hospital. Corneal collagen cross-linking (CXL) is the only conservative treatment currently available to halt keratoconus progression by improving the biomechanical rigidity of the corneal stroma. The aim of this manuscript is to highlight the methods of three different protocols of CXL: conventional CXL (C-CXL), accelerated CXL (A-CXL), and iontophoresis CXL (I-CXL).

Video: Three Different Protocols of Corneal Collagen Crosslinking in Keratoconus: Conventional, Accelerated and Iontophoresis

Staining Protocols for Human Pancreatic Islets

Estimates of islet area and numbers and endocrine cell composition in the adult human pancreas vary from several hundred thousand to several million and beta mass ranges from 500 to 1500 mg 1-3. With this known heterogeneity, a standard processing and staining procedure was developed so that pancreatic regions were clearly defined and islets characterized using rigorous histopathology and immunolocalization examinations. 
Standardized procedures for processing human pancreas recovered from organ donors are described in part 1 of this series. The pancreas is processed into 3 main regions (head, body, tail) followed by transverse sections. Transverse sections from the pancreas head are further divided, as indicated based on size, and numbered alphabetically to denote subsections. This standardization allows for a complete cross sectional analysis of the head region including the uncinate region which contains islets composed primarily of pancreatic polypeptide cells to the tail region.
The current report comprises part 2 of this series and describes the procedures used for serial sectioning and histopathological characterization of the pancreatic paraffin sections with an emphasis on islet endocrine cells, replication, and T-cell infiltrates. Pathology of pancreatic sections is intended to characterize both exocrine, ductular, and endocrine components. The exocrine compartment is evaluated for the presence of pancreatitis (active or chronic), atrophy, fibrosis, and fat, as well as the duct system, particularly in relationship to the presence of pancreatic intraductal neoplasia4. Islets are evaluated for morphology, size, and density, endocrine cells, inflammation, fibrosis, amyloid, and the presence of replicating or apoptotic cells using H&amp;E and IHC stains. 
The final component described in part 2 is the provision of the stained slides as digitized whole slide images. The digitized slides are organized by case and pancreas region in an online pathology database creating a virtual biobank. Access to this online collection is currently provided to over 200 clinicians and scientists involved in type 1 diabetes research. The online database provides a means for rapid and complete data sharing and for investigators to select blocks for paraffin or frozen serial sections.

This video demonstrates procedures for characterization of human pancreatic islets using hematoxylin and eosin (H&E) and immunohistochemistry (IHC). Pancreatic sections from head, body, and tail regions are stained by both H&amp;E and IHC to determine islet endocrine composition (insulin, glucagon, and pancreatic polypeptide), cell replication (Ki67), and inflammatory infiltrates (H&E, CD3). The uncinate region is localized using IHC for pancreatic polypeptide.

İnsan Pankreas Adacıklar için boyama Protokoller

Estimates of islet area and numbers and endocrine cell composition in the adult human pancreas vary from several hundred thousand to several million and ...

Tıp

An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the cornea, which can be caused by trauma, keratoplasty or infectious disease, breaks down the so called &lsquo;angiogenic privilege' of the cornea and forms the basis of multiple visual pathologies that may even lead to blindness. Although there are several treatment options available, the fundamental medical need presented by corneal neovascular pathologies remains unmet. In order to develop safe, effective, and targeted therapies, a reliable model of corneal NV and pharmacological intervention is required. Here, we describe an alkali-burn injury corneal neovascularization model in the mouse. This protocol provides a method for the application of a controlled alkali-burn injury to the cornea, administration of a pharmacological compound of interest, and visualization of the result. This method could prove instrumental for studying the mechanisms and opportunities for intervention in corneal NV and other neovascular disorders.

Neovascularization (NV) of the cornea can complicate multiple visual pathologies. Utilizing a controlled, alkali-burn injury model, a quantifiable level of corneal NV can be produced for mechanistic study of corneal NV and evaluation of potential therapies for neovascular disorders.

Fare Kornea Neovaskülarizasyonunun bir Alkali-yanık Yaralanma Modeli

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the ...

A Rat Model of Ventricular Fibrillation and Resuscitation by Conventional Closed-chest Technique

A rat model of electrically-induced ventricular fibrillation followed by cardiac resuscitation using a closed chest technique that incorporates the basic components of cardiopulmonary resuscitation in humans is herein described. The model was developed in 1988 and has been used in approximately 70 peer-reviewed publications examining a myriad of resuscitation aspects including its physiology and pathophysiology, determinants of resuscitability, pharmacologic interventions, and even the effects of cell therapies. The model featured in this presentation includes: (1) vascular catheterization to measure aortic and right atrial pressures, to measure cardiac output by thermodilution, and to electrically induce ventricular fibrillation; and (2) tracheal intubation for positive pressure ventilation with oxygen enriched gas and assessment of the end-tidal CO2. A typical sequence of intervention entails: (1) electrical induction of ventricular fibrillation, (2) chest compression using a mechanical piston device concomitantly with positive pressure ventilation delivering oxygen-enriched gas, (3) electrical shocks to terminate ventricular fibrillation and reestablish cardiac activity, (4) assessment of post-resuscitation hemodynamic and metabolic function, and (5) assessment of survival and recovery of organ function. A robust inventory of measurements is available that includes &#8211; but is not limited to &#8211; hemodynamic, metabolic, and tissue measurements. The model has been highly effective in developing new resuscitation concepts and examining novel therapeutic interventions before their testing in larger and translationally more relevant animal models of cardiac arrest and resuscitation.

This article describes a rat model of electrically-induced ventricular fibrillation and resuscitation by chest compression, ventilation, and delivery of electrical shocks that simulates an episode of sudden cardiac arrest and conventional cardiopulmonary resuscitation. The model enables gathering insights on the pathophysiology of cardiac arrest and exploration of new resuscitation strategies.

Konvansiyonel Kapalı göğüs Tekniği ile Rat Ventriküler Fibrilasyon Modeli ve Resüsitasyon

A rat model of electrically-induced ventricular fibrillation followed by cardiac resuscitation using a closed chest technique that incorporates the basic ...

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in rodents, with detailed descriptions of the appropriate methods for anesthesia, the echocardiographic windows used, the imaging planes and probe orientations for image acquisition, the methods for data analysis, and the limitations of emerging technologies for the evaluation of cardiac and valvular function. Importantly, we also highlight several future areas of research in cardiac and heart valve imaging that may be leveraged to gain insights into the pathogenesis of valve disease in preclinical animal models. We propose that using a systematic approach to evaluating cardiac and heart valve function in mice can result in more robust and reproducible data, as well as facilitate the discovery of previously underappreciated phenotypes in genetically-altered and/or physiologically-stressed mice.

This protocol provides a detailed description of the echocardiographic approach for comprehensive phenotyping of heart and heart valve function in mice.

Farelerde Kalp Kapak Hastalıkları Kapsamlı Fenotipik Karakterizasyonu için ekokardiyografik Yaklaşımlar ve Protokoller

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Cardiac Magnetic Resonance for the Evaluation of Suspected Cardiac Thrombus: Conventional and Emerging Techniques

We present the conventional cardiac magnetic resonance (CMR) protocol for evaluating a suspected thrombus and highlight emerging techniques.&#160;The appearance of a mass on certain magnetic resonance (MR) sequences can help differentiate a thrombus from competing diagnoses such as a tumor. T1 and T2 signal characteristics of a thrombus are related to the evolution of hemoglobin properties. A thrombus typically does not enhance following contrast administration, which also helps differentiation from a tumor. We also highlight the emerging role of T1 mapping in the evaluation of a thrombus, which can add another level of support in diagnosis. Prior to any CMR exam, patient screening and interviews are critical to ensure safety and to optimize patient comfort. Effective communication during the exam between the technologist and the patient promotes proper breath holding technique and higher quality images. Volumetric post processing and structured reporting are helpful to ensure that the radiologist answers the ordering services&#39; question and communicates these results effectively. Optimal pre-MR safety evaluation, CMR exam execution, and post exam processing and reporting allow for delivery of high quality radiological service in the evaluation of a suspected cardiac thrombus.

The goal of this article is to describe how cardiac magnetic resonance can be used for the evaluation and diagnosis of a suspected cardiac thrombus. The method presented will describe data acquisition as well as the pre-procedure and post-procedure protocol.

Şüpheli kardiyak Trombülerin değerlendirilmesi için kardiyak manyetik rezonans: konvansiyonel ve gelişmekte olan teknikler

We present the conventional cardiac magnetic resonance (CMR) protocol for evaluating a suspected thrombus and highlight emerging techniques.&#160;The ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for experimental investigations as they are normally needed for transplantation. Endothelial cell cultures often do not translate well to in vivo situations. Due to the biostructural characteristics of non-human corneas, stromal swelling during cultivation induces substantial corneal endothelial cell loss, which makes it difficult to perform cultivation for an extended period of time. Deswelling agents such as dextran are used to counteract this response. However, they also cause significant endothelial cell loss. Therefore, an ex vivo organ culture model not requiring deswelling agents was established. Pig eyes from a local slaughterhouse were used to prepare split corneal buttons. After partial corneal trephination, the outer layers of the cornea (epithelium, bowman layer, parts of the stroma) were removed. This significantly reduces corneal endothelial cell loss induced by massive stromal swelling and Descemet&#39;s membrane folding throughout longer cultivation periods and improves general preservation of the endothelial cell layer. Subsequent complete corneal trephination was followed by the removal of the split corneal button from the remaining eye bulb and cultivation. Endothelial cell density was assessed at follow-up times of up to 15 days after preparation (i.e., days 1, 8, 15) using light microscopy. The preparation technique used allows a better preservation of the endothelial cell layer enabled by less stromal tissue swelling, which results in slow and linear decline rates in split corneal buttons comparable to human donor corneas. As this standardized organo-typically cultivated research model for the first time allows a stable cultivation for at least two weeks, it is a valuable alternative to human donor corneas for future investigations of various external factors with regards to their effects on the corneal endothelium.

Here, a step-by-step protocol for the preparation and cultivation of porcine split corneal buttons is presented. As this organo-typically cultivated organ culture model shows cell death rates within 15 days, comparable to human donor corneas, it represents the first model allowing long-term cultivation of non-human corneas without adding toxic dextran.

Split Korneal Düğmeleri Kullanarak Bir Domuz Korneal Endotel Organ Kültür Modeli

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Simultaneous Laryngopharyngeal and Conventional Esophageal pH Monitoring

In addition to typical reflux symptoms, many patients with gastroesophageal reflux disease (GERD) present with extraesophageal symptoms such as cough, hoarseness or asthma, which can be caused by laryngopharyngeal reflux (LPR). Due to their multifactorial origin, those symptoms can be a great diagnostic and therapeutic challenge. Esophageal pH-monitoring is commonly used to determine abnormal esophageal acid exposure and confirm the diagnosis of GERD. However, for better evaluation of acid exposure above the upper esophageal sphincter, a new laryngopharyngeal pH measurement system is now available and may lead to more reliable results in patients with predominantly extraesophageal symptoms. This article aims to present a standardized protocol for simultaneous pH measurement using esophageal and laryngopharyngeal pH probes in order to obtain acid exposure scores from both measurements.

Laryngopharyngeal pH monitoring has been specifically designed to measure acid exposure above the upper esophageal sphincter and complements diagnostic evaluation in patients that present with mainly extraesophageal reflux symptoms. Patients with suspected laryngopharyngeal reflux (LPR) were evaluated using distal esophageal and laryngopharyngeal pH testing simultaneously.

Eşzamanlı Laringofaringeal ve Konvansiyonel Özofagus pH İzleme

In addition to typical reflux symptoms, many patients with gastroesophageal reflux disease (GERD) present with extraesophageal symptoms such as cough, ...

Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, cirrhosis, and/or hepatocellular carcinoma. Liver transplantation is the clinically recommended procedure to improve and extend the life span of patients in advanced disease stages. However, only 10% of transplants are successful, with organ availability, presurgical and postsurgical procedures, and elevated costs directly correlated with that result. Extracellular matrix (ECM) scaffolds have emerged as an alternative for tissue restoration. Biocompatibility and graft acceptance are the main beneficial characteristics of those biomaterials. Although the capacity to restore the size and correct function of the liver has been evaluated in liver hepatectomy models, the use of scaffolds or some kind of support to replace the volume of the extirpated liver mass has not been assessed.
Partial hepatectomy was performed in a rat liver with the xenoimplantation of a collagen matrix scaffold (CMS) from a bovine condyle. Left liver lobe tissue was removed (approximately 40%), and an equal proportion of CMS was surgically implanted. Liver function tests were evaluated before and after the surgical procedure. After days 3, 14, and 21, the animals were euthanized, and macroscopic and histologic evaluations were performed. On days 3 and 14, adipose tissue was observed surrounding the CMS, with no clinical evidence of rejection or infection, as was vessel neoformation and CMS reabsorption at day 21. There was histologic evidence of an insignificant inflammation process and migration of adjacent cells to the CMS, observed with the hematoxylin and eosin (H&#38;E) and Masson&#39;s trichrome staining. The CMS was shown to perform well in liver tissue and could be a useful alternative for studying tissue regeneration and repair in chronic liver diseases.

Liver diseases are induced by many causes that promote fibrosis or cirrhosis. Transplantation is the only option for recovering health. However, given the scarcity of transplantable organs, alternatives must be explored. Our research proposes the implantation of collagen scaffolds in liver tissue from an animal model.

Karaciğer Rejenerasyon Stratejisi Olarak Üç Boyutlu Kollajen Matris İskele İmplantasyonu

Liver diseases are the leading cause of death worldwide. Excessive alcohol consumption, a high-fat diet, and hepatitis C virus infection promote fibrosis, ...