The authors would like to thank Dr George Balanos for his assistance in the flow-mediated dilatation technique.

NOT: protokol Dudley Grubu NHS Foundation Trust İnsan Araştırmaları Etik Kurulu&#39;ndan yönergeleri takip eder. Sabit aydınlatma ve gürültü olmaması ile, - (22 o C 21), sıcaklık kontrollü bir laboratuarda tüm tarif edilen teknikler yapın. Gıda, içecek, sigara ve test öncesinde egzersiz 12 saat kaçınmaya değerlendirmelerini geçiren bireyler değildir. Uygun olduğunda en az 12 saat boyunca vazoaktif ilaçlar kesintisi. İyontoforez ile 1. Lazer Doppler Görüntüleme <ol><li> Lazer Doppler Imager (LDI) açın ve tarayıcı otomatik olarak yaklaşık 30 dakika boyunca stabilize sağlar. LDI yazılımını başlatın ve &#39;Ölçüm&#39; tıklayın (yazılımın ana ekran sonra gösterilecektir). Ana ekranda, pencerenin üst kısmında bulunan görev çubuğunda &#39;Ionto Protokolü&#39; seçeneğini seçin. </li><li> Manuel protokolü girmek (bizim laboratuvarda kullanılan protokol 13 s toplam içerirTarama 2&#39;den set İyontoforetik ilaç dağıtımı için elektrik akımı ile kutular), 30 uA bir gerilimde 11 taramak için. Bir başlangıç ​​olarak ayarla tarama 1 hiçbir elektrik akımı ile tarama ve hiçbir elektrik akımı ile de kurtarma taramaları gibi 12 &amp; 13 tarayın. Ayarları onaylamak ve ana ekrana dönmek için Tamam &#39;ı tıklatın. </li><li> Onların önkol rahat, sağlam yastık 90 derece dinlenme ile bir yarı-yatar sandalyede dinlenmek için katılımcı isteyin ve önkol altında siyah bir mat yerleştirin. NOT: mat çevre dokulara arka plan yüzeyleri tarafından oluşturulan eser ölçümleri sınırlamak için yardımcı olur. Hiçbir hareket ve ilgili eserler olduğunu böylece katılımcıların yastık sıkıca sarılı kol önemlidir. </li><li> Iyontoforez denetleyiciye her akrilik odasının karşısında sonunda kablolu fişleri. Iyontoforez kontrol cihazı anot bağlantısına% 1 asetilkolin (Ach) içindeki bir 2.5 mi dozunu ihtiva eden bölmeyi geç içerir ve ikinci bölmeyi bağlamakkatot bağlantısına% 1 sodyum-nitroprusid 2.5 mi doz (SNP). % 0.5 tuzlu su çözeltisi kullanılarak oda içinde her iki ajanı karıştırılır. Çift taraflı yapışkan pedleri kullanarak katılımcının sağ ön kol ön yüzüne iki bölmeyi bağlayın. </li><li> Sıvı sızmasını önlemek için 32 mm kapak ile odaları örtün. </li><li> Taramaya başlamadan önce, ana ekranın sol üst köşesinde yer alan &#39;Tarayıcı Ayarları&#39; penceresini açın. &#39;Video ve Mesafe&#39; sekmesini seçin ve katılımcılar önkol gelen tarayıcı kafasının mesafeyi ölçmek için &#39;otomatik mesafe&#39; fonksiyonunu seçiniz. <ol><li> Otomatik mesafe ölçümü tamamlanmasının ardından, &#39;Resim Tarama&#39; sekmesini seçin ve pencerenin sağ alt köşesindeki &#39;Mark&#39; butonuna tıklayarak taranacak alanı belirlemek. Gerekirse, elle &#39;Tarama Alanı &amp; içine tarama alanının büyüklüğü girerek ilgi bölgenin boyutunu değiştirmek# 8217; Pencerenin üst kısmında bölüm. Ilgi bölgesi iyontoforez odalarının her birinin çapı olan ve cilt kan akışının değişkenliği sınırlamak için yeterince büyük olduğundan emin olun. </li></ol></li><li> Değerlendirmenin tamamlanmasının ardından, veri dosyasını kaydedin. Perfüzyon ölçümleri gerçekleştirmek için LDI görüntü analiz yazılımı kullanarak veri dosyasını açın. <ol><li> Ana yazılım penceresinde &#39;Görüntü Yorum tıklayın ve analiz edilecek görüntü dosyasını açın. </li><li> Her odanın dış çapları etrafında bir ilgi bölgeyi işaretlemek için yazılımı kullanın. Bu odaları mevcut olan alana doğru oturacak şekilde ilgi bölgeyi ayarlayın. Ardından &#39;istatistikleri&#39; simgesi ve her bölme için medyan perfüzyon birimleri içeren bir sütun görüntülenir tıklayın. Her bölme için, son 12 tarama herbirinden esas çizgi perfüzyon birimi, aynı zamanda, en yüksek perfüzyon birimi edin. NOT: Bu analiz yöntemiLaboratuvarımızda özel; Ancak, diğer yöntemler LDI tarama elde edilen verileri ifade etmek için kullanılabilir. Kapsamlı bir inceleme için Roustit ve Cracowski 12 yönergelerine bakın. </li></ol></li><li> ACh ve SNP yanıt perfüzyon yüzde değişim hesaplamak için, daha sonra çarpın 100 ile bazal perfüzyon ile bazal pik perfüzyon perfüzyon, çıkartma, bölme ve. NOT: Bizim laboratuvarda, başlangıca perfüzyon göreceli değişiklikler ACh (% 7) ve SNP (% 6) varyasyon iyi içi gözlemci katsayısı göstermiştir. </li></ol> 2. Akış aracılı dilatasyon ve Glyceryl trinitrate-aracılı dilatasyon <ol><li> Vasküler görüntü analizi (VIA) yazılımı içeren Doppler ultrasonografi makine ve ağ PC açın. NOT: VIA yazılımı (saniyede 25 kare) canlı bir görüntü yakalar ve ultrason makinesi tarafından tespit edilen damar çapına bilgilerin yanı sıra damar sınırları kalitesi sağlar. OtOnun yazılım paketleri ek özellikler ve ayarları içerebilir mevcuttur. Belirli yazılımlar için çalışma kılavuzları danışmanız tavsiye edilir. </li><li> Yarı-yatar koltukta dinlenmek ve kalp ile yan ama seviyeye dışarı rahat bir yastık üzerine kol yerleştirmek için katılımcı isteyin. Katılımcının bileğine kan basıncı kolluğu yerleştirin. NOT: Hasta ölçüm sırasında hareket eserler önlemek için mümkün olduğunca hala kolunu tutmak için sorulmalıdır. </li><li> Stereotaktik kelepçe içine ultrason makineden doğrusal dizi dönüştürücüyü Güvenli ve ultrason dönüştürücü sabit bir pozisyonda kalacak şekilde Wingnuts kullanarak kelepçeyi sıkın. NOT: kelepçe, kan damarı bulunur kez ultrason dönüştürücü sabit kalması sağlayacaktır. </li><li> Ultrason makinesinde, &#39;Menü&#39; içine gidin ve 5 MHz tarama frekansını ayarlamak ve derinliğini optimize (önerilen derinlik ayarıUltrason makinede 3,5 cm) ve kazanç ayarları. Geminin yakın ve uzak duvara simetrik parlaklık olmasını sağlamak için kazanç ayarlarını yapın. </li><li> Doğrusal dizi dönüştürücüyü kullanarak, genellikle 2-10 cm boyuna tarama düzleminde Antekübital fossa üzerinde bulunan brakiyal arter bulun. Bu aşamada görüntü kalitesini netleştirmek için herhangi bir ayarlamaları yapın. Arter tespit yardımcı olmak için, pulsatil arteriyel kan akımını göstermek yardımcı ve sürekli venöz kan akımı ayırt etmek renkli Doppler açın. Yatay ekran boyunca brakiyal arter görüntüle; teknenin lümeni temsil hatları arasında açık bir alan ile ayrılmış iki katı paralel çizgiler olarak görünmelidir. </li><li> VIA yazılımı otomatik olarak, damar çapı kayıt tespit ve arterin anterior ve posterior duvarları izlemek için ilgi önceden belirlenmiş bir bölgeyi işaretlemek için imleci kullanmak için izin vermek için. NOT: ilgi bölgenin boyutu olabilirartan veya ana yazılım ekranında bulunan &#39;x&#39; ve &#39;y&#39; düğmelerini kullanarak azalmıştır. </li><li> VIA yazılım ve görüntü 2 dakika süreyle arter üzerinde &#39;Başlat&#39; ı tıklatın. Bunu takiben, basın VIA yazılımı &#39;Inflate&#39; ve aynı anda 5 dakika boyunca baskıları suprasystolic (genellikle yukarıda 220 mmHg) bileğine yerleştirilen kan basıncı kolluğu şişirmek. NOT: bilek manşet amacı el kan akışını tıkamak için. </li><li> 5 dakika sonra, sağlıklı bir kap içinde, NO dolayımlı damar genişlemesini uyarmak, reaktif hiperemi uyarılması için, kan basıncı manşonunu söndürün. NOT: Tepe dilatasyon manşet deflasyon aşağıdaki kadar 180 sn oluşabilir, bu yüzden kaf yayımlanmasından sonra 3 dakika boyunca damar çapları kayıt devam edilmesi önerilmektedir. </li><li> Bir 10 dakika dinlenme döneminin ardından, doğrusal dizi dönüştürücüyü kullanarak brakiyal arter yeniden bulmak ve aynı şekilde 2 dk temel çapı okuma kayıtAdım 2.7 olarak. </li><li> Sonra onların dil altında 500 mg dilaltı gliseril-trinitrat (GTN) tablet yerleştirin ve bir 5 dakika daha brakiyal arter çapını ölçmek için devam etmek katılımcı isteyin. Bu dönemden sonra, GTN tablet kaldırmak ve ilaca herhangi bir yan etkisi deneyimi yok emin olmak için katılımcı izlemek için katılımcı isteyin. </li><li> Veri çevrimdışı tüm analizi yürütmek. Yirmi beş veri noktaları değerlendirmenin her saniye için kullanılabilir; Microsoft Excel&#39;de bir saniyelik çağlardan bu verileri daraltmak. Bir dijital sinyal analizi paketi veri ihracat ve ortalama filtre hareketli bir 3 sn filtre. </li><li> Önce kaf-enflasyon verileri 120 sn temel çapı kurmak. Görme temel bölgeyi incelemek ve eserler hariç. Taban çapı elde etmek için geriye kalan taban bölgeleri ortalamasını. </li><li> Akım aracılı dilatasyon (FMD) analizi için, otomatik olarak yazılan cuff- tarama yazılımı kullanındeflasyon tepe dilatasyon için bölge ve görsel muayene için bu zirveye işaretlemek için imleci kullanın. Zirve misidentified olmuşsa, zirve sonra tespit edilebileceği içinde daha sınırlı bölgeyi seçmek için imleci kullanın. Pik çapı olarak pik değerini kaydedin. </li><li> GTN veriler için, ilaç uygulama 5 dakika takip eden bölgede en yüksek dilatasyon arama dışında FMD ile kullanılana benzer bir prosedür, kabul eder. </li><li> FMD ve% GTN% hesaplamak için, bazal çapı başlangıç ​​tepe çapı çapı, çıkartma, bölme ve daha sonra 100 ile çarpın. NOT: Laboratuvarımızda, varyasyon içi gözlemci katsayısı FMD için% 11, ve GTN için% 12. </li></ol> 3. Karotis İntima-media kalınlığı <ol><li> Bir yatakta rahat yalan katılımcıdan, ve boyun destek sunmak için başının altına yastık koyun. </li><li> Doppler ultrason neden elektrokardiyogram (EKG) bağlayın ve sonra p üzerine ekleyebilirsinizatient uzuvlar. Sadece temel bir EKG izlemesi gereklidir, bu yüzden sağ ve sol kolları uygun potansiyel yerleştirin ve sol ayak bileğinde. </li><li> Ve kazanç ayarları - derinlik &#39;menüsünden&#39; kaydırma ve 10 MHz&#39;de tarama frekansı ayarlayarak ve optimize ederek ultrason makinesi hazırlayın (4 cm tavsiye derinlik ayarı 3). Geminin yakın ve uzak duvara simetrik parlaklık olmasını sağlamak için kazanç ayarlarını yapın. </li><li> Sola hafifçe başını eğmek için katılımcı isteyin ve doğrusal dizi dönüştürücüyü kullanarak, herhangi bir plak varlığını tespit etmek boyuna tarama uçağı kullanan tüm bölümler (ortak, iç ve dış karotis arter) boyunca sağ karotis arter tarayın. Plak herhangi bir kanıt göstermek görüntüleri kaydedin. Bu iç ve dış karotid arterler içine çatallanan karotis arter gösterdiği gibi, kap içinde bir çatallanma noktası için bakmak, arter belirlemenize yardımcı olmak için. </li><li> Ölçüm o içinf karotis intima-media kalınlığı (cIMT), plak ücretsiz ve karotis ampul 1 cm proksimal karotis arter bir bölümünün en az 3 fotoğraf elde. Bu diyastol ventriküler karşılık ve gelin hangi gemi kayma gerilmesi en az miktarda altında olduğu gibi EKG&#39;de R dalgasının zirvesinde tüm görüntüleri ulaşmak. </li><li> Tekrar sol karotis arter 3.4 ve 3.5 adımları. Bu ölçüm için hafifçe sağa başını eğmek için katılımcı isteyin. </li><li> Yakın ve uzak duvarların net görüntüler elde yardımcı olmak için, dikkatle damar ultrason ışınına dik olduğundan emin olmak için değerlendirme sırasında ultrason probu manipüle. Kurnazca prob proksimal-to-uzak açı (topuk-ayak hareketi) uygulanan basınca küçük ayarlamalar ile birlikte dönüştürücünün tilt ve döndürme değiştirerek bunu başarmak. </li><li> Görüntülerin yürütmek analizi vasküler Boun tespit etmek Arter Ölçüm Yazılımı (AMS) kullanarak çevrimdışıpignoli çizgilerine göre dary. Görüntüyü yükleyin analiz ve sonra imleci kullanarak, plak içermeyen geminin bir bölümündeki ilgi bir bölge oluşturmak için. Tıklayın yazılımı &#39;tespit&#39; ve cIMT ve lümen çapı için ekranda görüntülenen değerleri kaydedin. Doğru okumaları sadece uzak duvardan elde edilebilir, böylece yakınındaki duvara okumaları görmezden: NOT. </li><li> Sağ ve sol ayrı ayrı karotid arterlerde ortalama CIMT vermek için bu ortalama daha sonra her tarafı için üç ölçüm alın ve. Ayrıca genel CIMT vermek için her iki taraftan CIMT ortalama. NOT: Laboratuvarımızda bu tekniğin varyasyon içi gözlemci katsayısı% 9&#39;dur. </li><li> El imleci kullanarak plak dışarı işaretleyerek aynı yazılımı kullanarak herhangi bir plak ölçümü yapın. AMS üzerinde &#39;sınıflandırmak&#39; düğmesini tıklayın otomatik olarak rüptür için duyarlılık göre plak ve sınıf ekojenisitesini hesaplamak için. Tıklayın&quot;Plak Özellikleri&quot; penceresinde bu bilgileri görmek için. </li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Bu makale, periferik damar yapılabilir vasküler fonksiyon ve morfolojisinin çok sayıda farklı değerlendirme yöntemini göstermektedir. Her değerlendirme ateroskleroz farklı aşamalar hakkında bilgi sağlar ve farklı vasküler topraklarının damar profilini karakterize yardımcı olur. Biz daha önce mikrovasküler endotel fonksiyonu CVD 39 artmış riski romatoid artrit hastalarının nüfusu büyük damar endotel fonksiyonu bağımsız olduğunu bildirdi. Ayrıca, vasküler fonksiyon ve morfolojisi değerlendirmeler hastaların aynı grupta ve KVH 40,41 olan hastalarda da birbirinden bağımsız olduğunu. Bu bulgular, işlevi, farklı vasküler alanların 38, endotel hücrelerinin yapısı heterojen olarak morfolojik fonksiyonel değişiklikler ilerlemesi için olası bir zaman gecikmesi ile açıklanabilirkap içinde anormallikler. Hashimoto ve arkadaşları 42 tarafından yapılan bir çalışma ateroskleroz ile birkaç katılımcı FMD değerleri ancak normal cIMT değerleri azalmış olduğunu ortaya çıkardı. Bu bulgular çeşitli yöntemler kullanarak subklinik aterosklerozun bu sınav CVD küresel etkilerini deşifre etmek önemlidir düşündürmektedir. Sağlıkta ve hastalıkta mikrovasküler önemi tıbbi literatürde giderek artan ilgi kazanıyor. mikrodamarlar zararlı uyaranlara 43 hasar için onlara önemli hedefleri yapma, büyük damarlar çok daha büyük yüzey alanı oluşturur. Bu mikrodamarlar lezyon oluşumu 43 giden büyük damarların endotel sızmak inflamatuar aracıların temel kaynağı olabileceği öne sürülmüştür. Tip II diyabetlilerde, mikrovasküler hastalık genellikle romatoid arthri gibi KVH riski diğer toplumlarda büyük damar hastalığı 44 öncesinde vetis, CVD riskini azaltmak müdahaleler büyük damar endotel fonksiyonunu 45,46 mikrovasküler geliştirmek, ama değil. Topluca, bu bulgular mikrovasküler fonksiyonunun incelenmesi ateroskleroz başlatmak karmaşık mekanizmalar anlamada yardımcı olabileceğini düşündürmektedir. Bu çalışmada, mikrovasküler endotel fonksiyonunun değerlendirilmesi, vazoaktif ajanların iyontoforez ile LDI kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Birkaç diğer değerlendirmeler kapilaroskopi ve venöz oklüzyon pletismografisi dahil mikrovasküler fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılabilir. İkinci zaman alıcı ve bağlı içi brakiyal vazoaktif ajanların 1 yönetimine invaziv bazı protokollerde olduğu Bununla birlikte, eski değerlendirme, yalnızca mikrovasküler morfolojisi hakkında bilgi sağlar. Bunun aksine, LDI olmayan invas tatbik edilmektedir vazoaktif ajanların yanıt olarak deri kan damarlarının mikrovasküler perfüzyon ölçmek için basit, zaman etkili bir yaklaşım sunarively. cilt kan akımının ölçülmesi nedeniyle kurulu görüntü CVD 12 ile erişilebilirlik ve güçlü bir korelasyon kolaylığı için literatürde yaygın kabul görmüştür. Ayrıca, bu tür lazer Doppler flowmetre gibi diğer Doppler teknikleri üzerinde LDI avantajı, aynı anda belirli bir bölgede birden fazla puan tarayabilirsiniz olduğunu ve etkileyen her ikisi de hücresel hareket eserler ve cilt kan akımının mekansal farklılıklar, hesaba nedenle olabilir geminin 47,48 perfüzyon. Iyontoforez bariz avantajlara rağmen, bu iyontoforez o akım kaynaklı vazodilatasyon (CIV) özellikle katotta vazoaktif ajanların etkilerini yanıltabilecek dikkat etmek önemlidir. ilaç verilmesi için araç seçimi CIV 18 sınırlandırılmasında etkili (bu protokolde kullanılan gibi),% 0.5 sodyum klorid ile, bu etkiyi azaltmak için yardımcı olabilir. Ayrıca, büyük çaplı odaları ve düşük elektrik cur kullanımı(Mevcut protokolde kullanılan) kiralar tüm CIV 18 azaltmaya yardımcı olur. Bir kontrol sitesinin kullanımı da 12 tavsiye edilmiştir. Biyolojik ve davranışsal faktörler de tekniğin güvenilirliği ve tekrarlanabilirliği etkileyebilir. Örneğin, sirkadiyen varyasyon ve sigara mikrovasküler endotel işlev 49,50 etkilemeye gösterilmiştir. Sıkı kayıt koşulları doğru sonuçlar elde etmek için uyulması gereken ve protokolleri 12 tasarlarken kurulan kurallar takip edilmelidir. FMD ve GTN-aracılı dilatasyon ölçümü büyük kan damarlarında endotel disfonksiyonu hakkında bilgi sağlar, ve non-invaziv damar araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. FMD tekniği YOK biyoyararlanım üzerine vekil bilgi sağlar ve farklı klinik popülasyonlarda 7-9 kardiyak olayların yararlı bir prognostik göstergedir. Bu çalışmada, protokol faktörlerinin çoğu için hesap sundu kiNO dolayımlı damar genişlemesi 25 yeterli uyarılması için gereklidir. Örneğin, tıkayıcı manşet ultrason probu ile uzak yerleştirildi ve bileğin 27 civarında, iskemi süresi 5 dk 26 ve yeterli zaman reaktif hiperemi 28 aşağıdaki &#39;gerçek&#39; pik çapı kaydetmek için izin verildi. Otomatik kenar algılama yazılımı damar çapı ve nabız dalga hızı sinyali aynı anda kayıt izin vermedi ne yazık ki, protokol kayma gerilmesi profilinin karakterizasyonu içermiyordu. kayma gerilmesi hesaplanması FMD 26 doğru ölçümü ayrılmaz bir parçasıdır ve mümkün, damar araştırma grupları bu tür ölçümler yapılmasına izin veren yazılım kullanımı nerede, tavsiye. FMD ve GTN-aracılı dilatasyon değerlendirmeler vasküler çapı küçük değişiklikler gibi, aynı zamanda çevresel ve biyolojik değişimler 24 yatkındır canBüyük FMD / GTN tepkiler. 5 mm bir çapa sahip bir arter arter çapı 0.5 mm değişikliği - Örneğin, sağlıklı kişiden için tipik Şap değerleri 0.25 tekabül 5-10% 51 arasında değişir. Arteriyel çapı böyle küçük değişiklikler göz önüne alındığında, çok dikkat ölçümü etkileyebilecek teknik ve biyolojik faktörlere dikkat edilmelidir. Nitekim, FMD gibi 55 sigara sempatik aktivasyon 52, uyku yoksunluğu 53, kafein tüketimi 54, gibi biyolojik ve davranışsal faktörlerin çeşitli etkilenebilir, antioksidan tedavisi 56 ve günün 57 saati. Bu duruma göre, bu oluşturulan kılavuzlar 24,25 bilgileri kullanılarak bu faktörlerin kontrol edilmesi önemlidir. Gelişmiş ancak subklinik aterosklerozun Değerlendirme CIMT kullanılarak yapıldı. tekniği, çeşitli klinik popülasyonlarda kullanılan ve arteriyel st büyük ayrıntı sağlar olmuşturörneğin manyetik rezonans görüntüleme 34 gibi daha karmaşık teknikler ile karşılaştırıldığında kezlerinin. Diğer vasküler teknikler gibi, cIMT ölçüm ölçümünü etkileyen teknik faktörlerin dikkatli bir değerlendirme gerektirir. Genellikle, cIMT karotis arter uzak duvarında plak serbest bölgelerde yapılmalıdır. FMD, cIMT ölçümü benzer yüksek çözünürlüklü ultrasonografi ile ve çok yüksek kullanıcı bağlıdır gerçekleştirilir. 84% 59 - FMD için 1 iken,% 18.3 58 - 2.4 varyasyon (CofV) aralık katsayısı bildirdi. Bununla birlikte, her iki teknik de kontrollü dış faktörlerle yetkili ultrasonographers tarafından gerçekleştirilen zaman bile, yüksek CofV 58,60,61 devam etmektedir. Bunun bir nedeni, damar sınırların analizi manuel yöntemler 60,61 ile gerçekleştirilmektedir olduğunu olabilir. Böyle bir analiz gibi ultraso gelen sahte sınırları, gürültü gibi görüntüleme eserler olarak güvenilirliğini azaltabilirund sinyal, ve gemilerin bozulma görüntüsünün 22 yorumlanmasını etkileyebilir. Sürekli otomatik kenar algılama yazılımı son gelişmeler büyük ölçüde damar duvar sınırları 21,22 tespiti düzeldi. AMS CIMT tespit etmek için kullanılan iken bu çalışmada, VIA yazılım, brakiyal arter çapını ölçmek için kullanılmıştır. Bu yazılımın kullanımı büyük ölçüde operatör bağımlılığını azaltır, henüz AMS durumunda, operatör kontrolü bir miktar görüntü kalitesi 62 düşük olabilir durumlarda hala mevcuttur. Kenar algılama yazılımını otomatik kullanmak Laboratuvarlar genellikle böylece sonuçların doğruluğunu sağlamak amacıyla damar sınırların otomatik ölçümü dahil tüm vasküler araştırma laboratuvarlarında amacı olmalıdır, düşük CofV 58,63,64 sahip olma eğilimindedir. Aynı zamanda çalışma sonuçlarını yayınlarken belirli protokoller için uyarlık çalışmalarının sonuçlarını rapor etmek iyi bir uygulamadır. <p cvasküler fonksiyon değerlendirmeleri rutin klinik araştırmalarda kullanılan rağmen lass = &quot;jove_content&quot;&gt;, teknik bir sınırlama iyontoforez ve FMD ile LDI için normatif değerleri yok olmasıdır. Sağlıklı yaş ve cinsiyet uyumlu kontrol grupları deneysel grubu ile bulguları karşılaştırmak için incelendiğinde bu nedenle önemlidir. Bu teknikler CVD 6-9 kanıtı olan nüfusun çeşitli kötü prognoz ile ilişkilendirmek olsa, böyle miyokard enfarktüsü ve inme gibi kötü endotel fonksiyonu ve olumsuz kardiyovasküler sonuçları arasındaki ilişkiyi inceleyen çalışmaların bir eksiklik hala var. Daha fazla prospektif çalışmalar bu endişeleri gidermek için gereklidir. Başka bir sınırlama değerlendirmelerini gerçekleştirmek ve analiz yürütmek için insan operatörlerin kullanımı. Bu önyargı potansiyel kaynağı tanıttı; Bununla birlikte, bu sonuç operatör kör ya da okuyucu operatöründen farklı sağlayarak sınırlandırılabilir. OTüm veriler sürekli olarak analiz edilir, böylece okuyucu, veri analizi için bir standartlaştırılmış protokol izlenmiş sağlamak için de önemlidir. Özetle, mevcut elyazması başarıyla mikrodamarlarda ve büyük damar endotel fonksiyonu değerlendirmelerini yanı sıra periferik dolaşım damar morfolojisi gerçekleştirmek için gerekli metodolojik adımlar hakkında ayrıntılı bilgi sağlar. Birlikte kullanıldığında, değerlendirmeler ateroskleroz farklı aşamalarında küresel bilgi sağlar. Bu tekniklerin potansiyel tanı rolünü inceleyen daha fazla prospektif çalışmalara gereksinim duyulmaktadır.

endotel damar iç astar ve vazoaktif birçok proseste düzenlenmesi yoluyla damar homeostazının muhafaza içinde yer almaktadır. Bu süreçlere bozulması ateroskleroz gemi yatkınlık ve kardiyovasküler hastalık (CVD) 1 riskini artırabilir. Periferik endotel fonksiyonu damar duvarında 2 erken anormalliklerin iyi bir göstergedir. Ayrıca, periferik endotel fonksiyonu ölçümleri koroner endotel fonksiyonunu 3-5 yansıtmak gösterilmiştir, ve gibi kardiyovasküler hastalık 6-9 iyi belirleyicileri olarak kabul edilmektedir. Bu ateroskleroz artık geniş bir sistemik bozukluk 10 olarak takdir olduğu göz önüne alındığında belki de şaşırtıcı değildir. Periferik endotel fonksiyonu değerlendirmeler genellikle endotel göstergesi bekletici yanıt bir zayıflama ile, belirli bir uyarana geminin vazodilatör yanıtı ölçmekişlev bozukluğu, 11 farklı vasküler yatak ölçülebilir. Kap içinde gelişmiş yapısal değişiklikleri değerlendirmeler intima-media kalınlığı ultrason muayenesi ile karakterize edilebilir. Mikrosirkülasyondaki, lazer Doppler flowmetre (LDF) ve vazodilatör agonistlerinin iyontoforez Lazer Doppler görüntüleme (LDI) mikrovasküler perfüzyon 12 faydalı bilgiler sağlayabilir. Her iki teknikler, kırmızı kan hücreleri hareket dağınık ışık tarafından oluşturulan Doppler kayması ölçmek. Perfüzyon ortalama eritrosit hız ve konsantrasyonunu yansıtan kan akımı ile, kan akışı yerine kan akışı (ml / dak) olarak temsil edilir. Kan akışı ölçümü, doğrusal gerçek kan akışı 13 ile ilişkilidir. LDF aksine, LDI böylece deri kan akımının heterojenite için muhasebe ve tekniğin tekrarlanabilirliği artan geniş bir alana tarayabilir, çünkü LDI değerlendirilmesi, LDF karşısında önemli avantajlar sunuyor12. LDI sırasında kan akışını artırmak için, uyarıcı, zayıf bir elektrik akımı 14 deri içine, sırasıyla endotele bağımlı ve endotel bağımsız fonksiyonunu değerlendirmek vazodilatör agonistleri olarak asetilkolin (Ach) ve sodyum nitroprusid (SNP) ait iyontoforez yolu ile sağlanır. Bir kez deri yoluyla ACh damar genişletici nitrik oksit (NO) açığa hücre muskarinik reseptörleri endotel bağlanır. SNP kullanımı doğrudan maksimum geminin vazodilatasyona ve düz kas bütünlüğü 15 incelenmesi için izin düz kas hücre reseptörlerini harekete geçirir. ACh gibi Siklooksijenaz aracılı yollar 12 gibi olmayan YOK yollar uyarabilir olarak ACh-aracılı dilatasyon, HAYIR tüm içerir konusunda bazı belirsizlikler vardır. Yine de, daha önce ACh ve SNP yanıtları CVD 16 artmış riski olan hasta popülasyonlarında engelli olduğunu bildirdi ve bu egzersiz müdahaleler YOK b artırmak için bilinenioactivity da LDI 17 ile ACh aracılı kan akışı artırmak. Cilt mikrodamarlara maddeler taşınması için araç genellikle sodyum klorür veya deiyonize su 18,19 sayılabilir. Kan basıncı çalışma süresini değişebilir nerede 12 (yani, egzersiz ya da anti-hipertansif tedavi sırasında) arter basıncı bölü akı bir ürünü, çalışmalarda kullanılan - mikrovasküler endotel fonksiyonu kutanöz vasküler iletkenliği ile farklı yaklaşımlar kullanılarak belirlenebilir. Başka yaygın olarak kullanılan ölçüm, kan akı için eğri altında kalan alan hesaplamak veya başlangıca akı yüzde artışı ifade etmektir. Bu verileri sunmak için kurulan kurallar olduğunu not etmek önemlidir, ancak müfettişlerin iyi tekrarlanabilirlik gösteren bir yaklaşım kullanmak gerekir. Büyük damarlarda, akım aracılı dilatasyon (FMD) ve gliserol-trinitratın aracılı dilatasyon (GTN) tayini için yapılırs endotel bağımlı ve endotel bağımsız fonksiyon sırasıyla 20. Şap tipik olarak bir manşon 5 dakika boyunca kan akışını tıkamak için kullanılan kol arter içinde gerçekleştirilir; manşet serbest geminin kesme-stres aracılı dilatasyon sonuçlanan brakiyal arterden kan akımı (reaktif hiperemi) ani bir artışa neden olur. Bazal ve post-kaf serbest çapı damar çapı sonraki değerlendirmeler geminin ultrason görüntüleme ile ölçülebilir olan manuel veya otomatik kenar 20 algılama yazılımını 21,22 kullanılarak yapılan. GTN kullanımı vazodilatasyona anormallikler endotel hücreleri 23 bir düz kas hücre bütünlüğü kaybı veya NO engelli salınımına bağlı olup olmadığını belirlemenize yardımcı olur. FMD ve GTN temel çapına sonrası uyaran damar çapı göreli artış yüzdesi olarak ifade edilir. Şap doğru değerlendirme bir dizi gerektirirÇalışma protokolü 24,25 önemli hususlar. manşet tıkanıklığı süresi dikkatle zamanlı olmalıdır; Olmayan NO uzun manşet tıkanıklığı sonuçları dilatasyon 26 aracılı ise manşet tıkanıklığı 5 dk NO aracılı dilatasyon için yeterlidir. Prob üst kol ve proksimali- manşet yerleştirme sadece kısmen YOK 27 uyarır oysa Benzer şekilde, ultrason probu gelen bileği ve distale etrafında kapatıcı manşet yerleştirme ağırlıklı, NO aracılı dilatasyon çağırır. % 40 28 - 25 ile FMD hafife olabilir manşet deflasyon sonraki ilk 60 saniye içinde tepe çapı ölçümü gibi zaman uzunca bir süre boyunca manşet deflasyon aşağıdaki pik dilatasyon, ölçmek için de önemlidir. Gerçekten de, 180 saniye bir süre en tepe değerleri, ilk 120 saniyede 28 içinde meydana gelen gerçek tepe çapı yakalama yeterli olması muhtemeldir. FMD için uyarıcı içerenNO 29 serbest bırakmak için özel endotel reseptörleri aktive kesme stresi üretimini s. Ancak, kesme stres de HAYIR 26 yolaklarıyla gelen uyarılmış kayma gerilmesi uyaran vazodilatasyon yansıttığını esastır hale (vazokonstriksiyonu neden olabilir bazıları) birkaç diğer vazoaktif faktörler 30 aktive edebilir. Ayrıca kayma gerilmesi yeterli bir önlem olarak görev kayma hızı (hız / çap) hesaplanması ile, şap sırasında kayma gerilmesi uyaran hesaba önemli, ama ille de zirve akışını yansıtan 31 değil. Son fizyolojik öneriler ultrason sistemleri dubleks modunda 25 nabız dalga hızı ve aktif B-mod görüntüleme ölçümünü izin verdiğinizde kayma gerilmesi profili daima karakterize edilmesi gerektiğini göstermektedir. B-mod ultrason kullanılarak karotis arterlerin değerlendirilmesi karotis intima-media kalınlığı (cIMT) hakkında bilgi vermek, ve ilk describ oldu olabilirpignoli ve arkadaşları 32 tarafından 1986 yılında ed. CIMT Değerlendirilmesi kabın intimasına düz kas hücrelerinin çoğalmasını gösterir ve erken ateroskleroz 33 klinik olaylar için yararlı bir belirleyicisidir. Karotis ultrason genellikle 34 (manyetik rezonans görüntüleme ya da radyografik değerlendirmeler gibi) benzer teknikler daha arter yapısı iyi tahmin edebilirsiniz. Buna ek olarak, yaşlanma, hipertansiyon ve dislipidemi 35 de dahil olmak üzere, klasik kardiyovasküler risk faktörlerinin bir dizi cIMT ilişkilendirir. Karotid arter duvarları değişiklikler genellikle kap 36 içinde iltihabı teşvik eden hiçbir biyo bir azalma ile başlatılır. her site benzer kardiyovasküler olayları 37 tahmin edebileceği gibi karotid arter, internal karotid arter ve karotid çatallanma noktaları, CIMT belirlemek için kullanılabilir. Bu yazıda, microvascula değerlendirilmesi üzerine detaylı metodoloji sağlamakr endotel fonksiyonu (iyontoforez ile LDI), büyük damar endotel fonksiyonu (FMD ve GTN) ve vasküler morfolojisi (cIMT). Ateroskleroz endotel disfonksiyonu ile başlar ve geniş arterlerde fokal aterosklerotik lezyonların ile biten bir çok-aşamalı süreçtir. Yukarıdaki değerlendirmeler seçilmesindeki mantık onlar ateroskleroz farklı aşamalarını yansıtan ve damar 38 heterojen doğası hesaba yardımcı olmasıdır. Ayrıca, daha önce KVH riski yüksek hasta popülasyonunda, mikrovasküler endotel fonksiyonu büyük damar endotel fonksiyonu 39 bağımsız olduğunu göstermiştir, ve fonksiyonel değerlendirmeler damar 40 yapısal değerlendirmeler bağımsız idi. Bu nedenle, damar küresel değerlendirmeler ateroskleroz farklı aşamalarında deşifre yardımcı olabilir.

<table><tbody><tr><td>Laser Doppler Imager</td><td>Moor Instruments, Devon, UK</td><td>moorLDI2</td><td></td></tr><tr><td>Iontophoresis Controller</td><td>Moor Instruments, Devon, UK</td><td>MIC2</td><td></td></tr><tr><td>Miochol-E 20 mg</td><td>Novartis UK</td><td>Prescribed by physician</td><td>Acetylcholine for endothelium-dependent function</td></tr><tr><td>Nitroprussiat Fides 50 mg</td><td>Rottapharm Spain</td><td>Prescribed by physician</td><td>Sodium nitroprusside for endothelium-independent function</td></tr><tr><td>Doppler Ultrasound</td><td>Siemens PLC, Camberley UK</td><td>Accuson Antares</td><td></td></tr><tr><td>Glyceryl Trinitrate 500 mcg</td><td>Alpharma, Barnstaple, UK</td><td>Prescribed by physician</td><td></td></tr></tbody></table>

a methodological approach to non-invasive assessments of vascular function and morphology

The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis. Damage to the endothelium may predispose the vessel to atherosclerosis and increase the risk for cardiovascular disease. Assessments of peripheral endothelial function are good indicators of early abnormalities in the vascular wall and correlate well with assessments of coronary endothelial function. The present manuscript details the important methodological steps necessary for the assessment of microvascular endothelial function using laser Doppler imaging with iontophoresis, large vessel endothelial function using flow-mediated dilatation, and carotid atherosclerosis using carotid artery ultrasound. A discussion on the methodological considerations for each of the techniques is also presented, and recommendations are made for future research.

İyontoforez ile Lazer Doppler Görüntüleme CVD sağlıklı bir orta yaşlı kadın ücretsiz lazer Doppler görüntüleme taramaları aşağıdaki medyan kan akı birimleri Şekil 1&#39;de gösterilmiştir. ACh ve SNP hem medyan kan akışında belirgin bir artış oldu. Bazal kan akı ACh için 48 perfüzyon üniteleri ve SNP için 67 perfüzyon adet oldu. ACh yanıt Tepe kan akı 455 perfüzyon adet oldu, ve SNP 446 perfüzyon birimleri için. Bu sırasıyla ACh ve SNP için (başlangıca göre) perfüzyon bir 831 ve% 566 artış% verdi. Resim değerler, çevresel faktörlerle birlikte cilt kan akışı incelemek için kullanılan ekipman yüksek bağlıdır. Akış-aracılı dilatasyon ve Glyceryl trinitrate-aracılı dilatasyon Şekil CVD 2 görüntüler sağlıklı genç erkekten FMD ve GTN değerlendirmeleri için başlangıç ​​ve tepe çapları ücretsiz.brakiyal arter çapı temel FMD ve GTN değerlendirmeleri için 3.0 mm idi. GTN değerlendirilmesi için, sırasıyla, kan akışında bir 10 ve% 30 artışa tekabül eden başlangıç ​​göre 3,9 mm iken, şap test tepe çapı 3.3 mm idi. İntima-media kalınlığı karotid Şekil 3, sağlıklı bir bireyin sol karotid arteri gösterir. CIMT değerlerinin hesaplanması otomatik kenar algılama yazılımı kullanılarak yapılır. uzak duvar cIMT 0.83 ve geminin lümen çapı 7.71mm oldu. Aynı bireyde sağ karotis arter için sonuçlar lümen çapı cIMT için 0.87mm, 7.80mm ve vardı. Her iki taraftan da okuma ortalama zaman cIMT 0.85mm, ve lümen çapı 7.76mm oldu. <img alt="Şekil 1," src="/files/ftp_upload/52339/52339fig1highres.jpg" /> Şekil 1. Chan30 uA elektrik akımı yapıldı kullanılarak bazal kan akışını ölçmek için tarama Bir taban tamamlanmasından sonra iyontoforez ile lazer Doppler yanıt kan akı ges., ACh ve SNP iyontoforez ile 10 tarama (1-10 tarama). Iyontoforez ardından, 2 kurtarma taramaları yapıldı. ACh asetilkolin =; SNP sodyum nitroprussit =. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52339/52339fig2highres.jpg" /> Şekil 2. Akış-aracılı ve gliseril dilatasyon trinitratın-aracılı. Grafik temel çapı ve akış aracılı ve gliseroltrinitrar-aracılı dilatasyon uyaranlara uygulama şu tepe çapları belirgin bir artış gösterir. FMD akım aracılı dilatasyon =; GTN gliseroltrinitrar-aracılı dilatasyon =. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52339/52339fig3highres.jpg" /><brKarotis arter /&gt; Şekil 3. Ultrason taraması. Sol karotis arter bir ultrason taraması ilgi bir bölge gösterilir karotis ampul (çatallanma noktası). Den 1cm yerleştirilen <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/52339/52339fig3large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınız .</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology at JoVE.com

A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology

The present article describes the methodological considerations for several non-invasive assessments of vascular function and morphology that are commonly used in medical research to assess different stages of atherosclerosis.

Vasküler Fonksiyon ve Morfoloji Non-invaziv Değerlendirmelerine Bir Metodolojik Yaklaşım

The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis.  Damage to the endothelium may ...

a-methodological-approach-to-non-invasive-assessments-vascular

Research

JoVE Journal

Medicine

16.3K Görüntüleme.  Bangor University. The present article describes the methodological considerations for several non-invasive assessments of vascular function and morphology that are commonly used in medical research to assess different stages of atherosclerosis.

Video: A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology

Non-invasive Assessment of Microvascular and Endothelial Function

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of cardiovascular disease. Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. Percent capillary recruitment is assessed by dividing the increase in capillary density induced by postocclusive reactive hyperemia (postocclusive reactive hyperemia capillary density minus baseline capillary density), by the maximal capillary density (observed during passive venous occlusion). Percent perfused capillaries represents the proportion of all capillaries present that are perfused (functionally active), and is calculated by dividing postocclusive reactive hyperemia capillary density by the maximal capillary density. Both percent capillary recruitment and percent perfused capillaries reflect the number of functional capillaries. The forearm blood flow (FBF) technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function: The ratio FBFmax/FBFbase is computed as an estimate of vasodilation, by dividing the mean of the four FBFmax values by the mean of the four FBFbase values. Forearm vascular resistance at maximal vasodilation (FVRmax) is calculated as the mean arterial pressure (MAP) divided by FBFmax. Both the capillaroscopy and forearm techniques are readily acceptable to patients and can be learned quickly.
The microvascular and endothelial function measures obtained using the methodologies described in this paper may have future utility in clinical patient cardiovascular risk-reduction strategies. As we have published reports demonstrating that microvascular and endothelial dysfunction are found in initial stages of hypertension including prehypertension, microvascular and endothelial function measures may eventually aid in early identification, risk-stratification and prevention of end-stage vascular pathology, with its potentially fatal consequences.

Capillaroscopy is a non-invasive, relatively inexpensive methodology for directly visualizing the microcirculation. The forearm blood flow technique provides accepted non-invasive measures of endothelial function.

Mikrovasküler ve Endotel Fonksiyonu Noninvaziv Değerlendirilmesi

The authors have utilized capillaroscopy and forearm blood flow techniques to investigate the role of microvascular dysfunction in pathogenesis of ...

Tıp

Pulse Wave Velocity Testing in the Baltimore Longitudinal Study of Aging

Carotid-femoral pulse wave velocity is considered the gold standard for measurements of central arterial stiffness obtained through noninvasive methods1.&#160;Subjects are placed in the supine position and allowed to rest quietly for at least 10 min prior to the start of the exam. The proper cuff size is selected and a blood pressure is obtained using an oscillometric device. Once a resting blood pressure has been obtained, pressure waveforms are acquired from the right femoral and right common carotid arteries. The system then automatically calculates the pulse transit time between these two sites (using the carotid artery as a surrogate for the descending aorta). Body surface measurements are used to determine the distance traveled by the pulse wave between the two sampling sites. This distance is then divided by the pulse transit time resulting in the pulse wave velocity. The measurements are performed in triplicate and the average is used for analysis.

Pulse wave velocity (PWV) measurement assesses arterial stiffness by a tonometry-based system that measures the speed with which arterial pressure wave travels along the arterial tree, typically approximating the time that it takes this wave to travel from the descending aorta (using the carotid artery as a surrogate) to the femoral artery. Carotid-femoral PWV increases two- to threefold across the adult lifespan.

Yaşlanma Baltimore Longitudinal Wave Hız Testi Darbe

Carotid-femoral pulse wave velocity is considered the gold standard for measurements of central arterial stiffness obtained through noninvasive ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this is only partially explained by traditional CVD risk factors. Vascular dysfunction is an important non-traditional risk factor, characterized by vascular endothelial dysfunction (most commonly assessed as impaired endothelium-dependent dilation [EDD]) and stiffening of the large elastic arteries. While various techniques exist to assess EDD and large elastic artery stiffness, the most commonly used are brachial artery flow-mediated dilation (FMDBA) and aortic pulse-wave velocity (aPWV), respectively. Both of these noninvasive measures of vascular dysfunction are independent predictors of future cardiovascular events in patients with and without kidney disease. Patients with CKD demonstrate both impaired FMDBA, and increased aPWV. While the exact mechanisms by which vascular dysfunction develops in CKD are incompletely understood, increased oxidative stress and a subsequent reduction in nitric oxide (NO) bioavailability are important contributors. Cellular changes in oxidative stress can be assessed by collecting vascular endothelial cells from the antecubital vein and measuring protein expression of markers of oxidative stress using immunofluorescence. We provide here a discussion of these methods to measure FMDBA, aPWV, and vascular endothelial cell protein expression.

The degree of vascular dysfunction and contributing physiological mechanisms can be assessed in patients with chronic kidney disease by measuring brachial artery flow-mediated dilation, aortic pulse-wave velocity, and vascular endothelial cell protein expression.

Kronik Böbrek Hastalarında Vasküler Fonksiyon Değerlendirilmesi

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Ultrasound Assessment of Endothelial-Dependent Flow-Mediated Vasodilation of the Brachial Artery in Clinical Research

The vascular endothelium is a monolayer of cells that cover the interior of blood vessels and provide both structural and functional roles. The endothelium acts as a barrier, preventing leukocyte adhesion and aggregation, as well as controlling permeability to plasma components. Functionally, the endothelium affects vessel tone.
Endothelial dysfunction is an imbalance between the chemical species which regulate vessel tone, thombroresistance, cellular proliferation and mitosis. It is the first step in atherosclerosis and is associated with coronary artery disease, peripheral artery disease, heart failure, hypertension, and hyperlipidemia.
The first demonstration of endothelial dysfunction involved direct infusion of acetylcholine and quantitative coronary angiography. Acetylcholine binds to muscarinic receptors on the endothelial cell surface, leading to an increase of intracellular calcium and increased nitric oxide (NO) production. In subjects with an intact endothelium, vasodilation was observed while subjects with endothelial damage experienced paradoxical vasoconstriction.
There exists a non-invasive, in vivo method for measuring endothelial function in peripheral arteries using high-resolution B-mode ultrasound. The endothelial function of peripheral arteries is closely related to coronary artery function. This technique measures the percent diameter change in the brachial artery during a period of reactive hyperemia following limb ischemia.
This technique, known as endothelium-dependent, flow-mediated vasodilation (FMD) has value in clinical research settings. However, a number of physiological and technical issues can affect the accuracy of the results and appropriate guidelines for the technique have been published. Despite the guidelines, FMD remains heavily operator dependent and presents a steep learning curve. This article presents a standardized method for measuring FMD in the brachial artery on the upper arm and offers suggestions to reduce intra-operator variability.

Endothelial dysfunction is associated with numerous disease states and is predictive of adverse cardiovascular events in humans. Flow-mediated vasodilation (FMD) is a non-invasive ultrasound method of evaluating endothelial function. Methodological choices and operator experience may affect results. A systematic approach to FMD in human studies is discussed here.

Klinik Araştırmalarda Brakial Arter Ultrason değerlendirilmesi Endotel Bağımlı Akış Dolayımlı Vazodilatasyon

The vascular endothelium is a monolayer of cells that cover the interior of blood vessels and provide both structural and functional roles. The ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. It is hypothesized that pro-atherogenic mediators released from fat tissues particularly in association with central/visceral adiposity may promote pathogenic vascular changes locally and systemically, and the notion that cardiovascular disease may be the consequence of adipose tissue dysfunction continues to evolve. Here, we describe a unique method of videomicroscopy that involves analysis of vasodilator and vasoconstrictor responses of intact small human arterioles removed from the adipose depot of living human subjects. Videomicroscopy is used to examine functional properties of isolated microvessels in response to pharmacological or physiological stimuli using a pressured system that mimics in vivo conditions. The technique is a useful approach to gain understanding of the pathophysiology and molecular mechanisms that contribute to vascular dysfunction locally within the adipose tissue milieu. Moreover, abnormalities in the adipose tissue microvasculature have also been linked with systemic diseases. We applied this technique to examine depot-specific vascular responses in obese subjects. We assessed endothelium-dependent vasodilation to both increased flow and acetylcholine in adipose arterioles (50 - 350 &#181;m internal diameter, 2 - 3 mm in length) isolated from two different adipose depots during bariatric surgery from the same individual. We demonstrated that arterioles from visceral fat exhibit impaired endothelium-dependent vasodilation compared to vessels isolated from the subcutaneous depot. The findings suggest that the visceral microenvironment is associated with vascular endothelial dysfunction which may be relevant to clinical observation linking increased visceral adiposity to systemic disease mechanisms. The videomicroscopy technique can be used to examine vascular phenotypes from different fat depots as well as compare findings across individuals with different degrees of obesity and metabolic dysfunction. The method can also be used to examine vascular responses longitudinally in response to clinical interventions.

Videomicroscopy systems are used to examine functional properties of isolated adipose tissue arterioles in response to physiological and pharmacological stimuli. This technique can be used to examine microvascular phenotypes in different adipose tissue domains in obese humans.

İnsan yağ dokusu mikrovasküler işlevini kullanarak Videomicroscopy değerlendirilmesi

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Evaluation of Vascular Control Mechanisms Utilizing Video Microscopy of Isolated Resistance Arteries of Rats

This protocol describes the use of in vitro television microscopy to evaluate vascular function in isolated cerebral resistance arteries (and other vessels), and describes techniques for evaluating tissue perfusion using Laser Doppler Flowmetry (LDF) and microvessel density utilizing fluorescently labeled Griffonia simplicifolia (GS1) lectin. Current methods for studying isolated resistance arteries at transmural pressures encountered in vivo and in the absence of parenchymal cell influences provide a critical link between in vivo studies and information gained from molecular reductionist approaches that provide limited insight into integrative responses at the whole animal level. LDF and techniques to selectively identify arterioles and capillaries with fluorescently-labeled GS1 lectin provide practical solutions to enable investigators to extend the knowledge gained from studies of isolated resistance arteries. This paper describes the application of these techniques to gain fundamental knowledge of vascular physiology and pathology in the rat as a general experimental model, and in a variety of specialized genetically engineered &#34;designer&#34; rat strains that can provide important insight into the influence of specific genes on important vascular phenotypes. Utilizing these valuable experimental approaches in rat strains developed by selective breeding strategies and new technologies for producing gene knockout models in the rat, will expand the rigor of scientific premises developed in knockout mouse models and extend that knowledge to a more relevant animal model, with a well understood physiological background and suitability for physiological studies because of its larger size.

This manuscript describes in vitro video microscopy protocols for evaluating vascular function in rat cerebral resistance arteries. The manuscript also describes techniques for evaluating microvessel density with fluorescently labeled lectin and tissue perfusion using Laser Doppler Flowmetry.

Sıçan izole direnç arter Video mikroskobu kullanan vasküler kontrol mekanizmalarının değerlendirilmesi

This protocol describes the use of in vitro television microscopy to evaluate vascular function in isolated cerebral resistance arteries (and other ...

Quantitative MRI of Endothelial Permeability and (Dys)function in Atherosclerosis

Cardiovascular diseases are the leading causes of death worldwide. A permeable/leaky and dysfunctional endothelium is considered the earliest marker of vascular damage and thought to drive atherosclerosis. A method to identify these changes in vivo would be desirable in the clinic. Magnetic resonance imaging (MRI)-based tools and other technologies have enabled a profound understanding of the role of the endothelium in cardiovascular diseases and risk in vivo. There is, however, a need for reproducible and simple approaches for extracting quantifiable data reflective of endothelial damage from a single imaging study. A non-invasive, easy-to-implement, and quantitative MRI workflow was developed to acquire and analyze images that allow the quantification of two imaging biomarkers of arterial endothelial damage (leakiness/permeability and dysfunction). Here, the protocol describes the application of this method in the brachiocephalic artery of atherosclerotic ApoE-/- mice using a clinical MRI scanner. First, late gadolinium enhancement (LGE) and Modified Look-Locker Inversion Recovery (MOLLI) T1 mapping protocols to quantify endothelial leakage using an albumin-binding probe are described. Second, anatomic, and quantitative blood flow sequences to measure endothelial dysfunction, in response to acetylcholine are described. Importantly, the method outlined here allows the acquisition of high-spatial-resolution 3D images with large volumetric coverage enabling accurate segmentation of vessel wall structures to improve inter- and intra-observer variability and to increase reliability and reproducibility. Additionally, it provides quantitative data without the need for high-temporal resolution for complex kinetic modeling, making it model-independent and even allowing for imaging of highly mobile vessels (coronary arteries). Therefore, the approach simplifies and expedites data analysis. Finally, this method can be implemented on different scanners, can be extended to image different arterial beds, and is clinically applicable for use in humans. This method could be used to diagnose and treat patients with atherosclerosis by adopting a precision-medicine approach.

<meta charset="utf8"></head><body>Aterosklerozda Endotel Geçirgenliği ve Disfonksiyonunun Kantitatif MRG'si

We have developed an accurate, non-invasive, and easy-to-use method to quantify endothelial permeability and dysfunction in the arteries using Magnetic Resonance Imaging (MRI), named qMETRIC. This technique enables assessing vascular damage and cardiovascular risk associated with atherosclerosis in preclinical models and humans.

Aterosklerozda Endotel Geçirgenliği ve (Dis)fonksiyonunun Kantitatif MRG'si

Cardiovascular diseases are the leading causes of death worldwide. A permeable/leaky and dysfunctional endothelium is considered the earliest marker of ...

Biyomühendislik

Quantification of Vascular Parameters in Whole Mount Retinas of Mice with Non-Proliferative and Proliferative Retinopathies

Retinopathies are a heterogeneous group of diseases that affect the neurosensory tissue of the eye. They are characterized by neurodegeneration, gliosis&#160;and a progressive change in vascular function and structure. Although the onset of the retinopathies is characterized by subtle disturbances in visual perception, the modifications in the vascular plexus are the first signs detected by clinicians. The absence or presence of neovascularization determines whether the retinopathy is classified as either non-proliferative (NPDR) or proliferative (PDR). In this sense, several animal models tried to mimic specific vascular features of each stage to determine the underlying mechanisms involved in endothelium alterations, neuronal death and other events taking place in the retina. In this article, we will provide a complete description of the procedures required for the measurement of retinal vascular parameters in adults and early birth mice at postnatal day (P)17. We will detail the protocols to carry out retinal vascular staining with Isolectin GSA-IB4 in whole mounts for later microscopic visualization. Key steps for image processing with Image J Fiji software are also provided, therefore, the readers will be able to measure vessel density, diameter and tortuosity, vascular branching, as well as avascular and neovascular areas. These tools are highly helpful to evaluate and quantify vascular alterations in both non-proliferative and proliferative retinopathies.

This article describes a well-established and reproducible lectin stain assay for the whole mount retinal preparations and the protocols required for the quantitative measurement of vascular parameters frequently altered in proliferative and non-proliferative retinopathies.

Proliferatif Olmayan ve Proliferatif Retinopatilerle Farelerin Tüm Mount Retinalarında Vasküler Parametrelerin Nicelemesi

Retinopathies are a heterogeneous group of diseases that affect the neurosensory tissue of the eye. They are characterized by neurodegeneration, ...

Nörobilim

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic diseases. Endothelial dysfunction represents a major culprit for the reduced vasodilatation and enhanced vasoconstriction of arteries. Adipose (fat) tissues surrounding the arteries play important roles in the regulation of endothelium-dependent relaxation and/or contraction of the vascular smooth muscle cells. The cross-talks between the endothelium and perivascular adipose tissues can be assessed ex vivo using mounted blood vessels by a wire myography system. However, optimal settings should be established for arteries derived from animals of different species, ages, genetic backgrounds and/or pathophysiological conditions.

The protocol describes the use of wire myography to evaluate the transmural isometric tension of mesenteric arteries isolated from mice, with special consideration of the modulation by factors released from endothelial cells and perivascular adipose tissues.

Vasküler Fonksiyon ve Morfoloji Non-invaziv Değerlendirmelerine Bir Metodolojik Yaklaşım

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Mikrovasküler ve Endotel Fonksiyonu Noninvaziv Değerlendirilmesi

Yaşlanma Baltimore Longitudinal Wave Hız Testi Darbe

Kronik Böbrek Hastalarında Vasküler Fonksiyon Değerlendirilmesi

Klinik Araştırmalarda Brakial Arter Ultrason değerlendirilmesi Endotel Bağımlı Akış Dolayımlı Vazodilatasyon

İnsan yağ dokusu mikrovasküler işlevini kullanarak Videomicroscopy değerlendirilmesi

Sıçan izole direnç arter Video mikroskobu kullanan vasküler kontrol mekanizmalarının değerlendirilmesi

Aterosklerozda Endotel Geçirgenliği ve (Dis)fonksiyonunun Kantitatif MRG'si

Aterosklerozda Endotel Geçirgenliği ve (Dis)fonksiyonunun Kantitatif MRG'si

Proliferatif Olmayan ve Proliferatif Retinopatilerle Farelerin Tüm Mount Retinalarında Vasküler Parametrelerin Nicelemesi

Perivasküler Adipose dokularında modülasyon odaklı Izole mezenterik arterlerin kullanıldığı vasküler ton tepkisini değerlendirmek