Modifiye Bergström Tekniği İnsan İskelet Kası Biyopsi Prosedürleri

The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Perkütan biyopsi tekniği araştırmacılar ve klinisyenler iskelet kas dokusu örnekleri toplamak sağlar. Tekniği, güvenli ve son derece etkilidir. Bu video insan deneklerin vastus lateralis iskelet kası doku örnekleri elde etmek için modifiye edilmiş bir Bergström iğne kullanılarak perkütan biyopsi tekniği açıklar. Bergström iğne uzak ucunda bir kesme bıçağı ile ucun kenarındaki küçük bir açıklık ("pencere ') ve bir iç trokar olan bir dış kanül oluşur. Lokal anestezi ve aseptik koşullar altında, iğne cilt, deri altı dokusu, ve ön panodaki bir kesi ile iskelet kas içine ilerletilir. Daha sonra, emme iç trokar için uygulanır, böylece kesme ya da iskelet kası dokusu örneği tamamlamak dış trokar iskelet kası dokusu emme ile dış kanülün penceresine çekilir, geri çekilir ve iç trokar hızla kapanır . İğne 90 ° döndürülür60 ve bir kesim yapılır. Bu işlem, üç kez daha tekrarlanabilir. Bu, birden çok kesim tekniği, genellikle sağlıklı kişilerde 100-200 mg veya daha fazla bir örneğini üreten sırasında ve hemen öncesinde yapılabilir ve egzersiz veya diğer müdahale nöbetinden sonra. Kesi sitenin biyopsi sonrası soyunma ardından, denekler genellikle hemen günlük yaşam aktivitelerini devam ve tam 48-72 saat içinde şiddetli fiziksel aktiviteye katılabilirsiniz. Konular fasiyalarında kesiden kas herniasyonu riskini azaltmak için 48 saat boyunca ağır direnç egzersiz kaçınmalısınız.

Perkütan ya da 'yarı-açık' biyopsi tekniği insan hasta ve araştırma konuları iskelet kası doku örneklerinin elde etmek için kullanılır. Duchenne (1806-1875) perkütan biyopsi ¹ ile doğanlarda iskelet kası elde etmek için bir trokar ile bir iğne oluşturmak için ilk olarak yatırılmaktadır. 1960 yılında, Bergström Duchenne ^2-4 tarif edilene benzer bir perkütan biyopsi iğne tanıttı. Yirmi yıl sonra, Evans ve diğ. Bergström ⁵ iğnenin kesme trokardan emme uygulanarak değiştirilmiş tekniği. Bu modifikasyon, ^{5-kat, 6,7} doku 3 verimini arttırmak ve klinik ve araştırma ortamlarında biyomedikal kullanılır. Bu teknik vardır ve miyopatilerin tanı ve iskelet kas yapısı ve fonksiyonu anlayışımızı geliştirmek için devam edecektir.

Perkütan kas biyopsi tekniği straightfo olduğunurward. Doğru yapıldığı zaman, aseptik teknikle ödün vermeden, ilişkili riskler minimumdur. Kas biyopsisi araştırma projeleri için bir araştırma aracı olarak kabul edilir. Bazı akademik kurumlar kas biyopsisi almak için, doğrudan hekim gözetimi ile, bir doktora ile fakülte araştırmacılar eğitimli izin ve diğerleri tekniği gerçekleştirmek için bir kurul sertifikalı hekim gerektirir. ASU biyopsi takımı başarıyla son 13 yılda ^8-15 sırasında 1.600 kas biyopsileri yürüttü. Bu videonun amacı, insan deneklerin vastus lateralis iskelet kası doku örnekleri elde etmek için modifiye Bergström iğne perkütan kas biyopsi tekniği ⁵ tanımlamaktır.

Açıklandığı gibi iskelet kası prosedür Appalachian State Üniversitesi Kurumsal Değerlendirme Kurulu kuralları takip.

NOT: ekibi operatör (Ph.D. veya biyopsi tekniği eğitimli MD), ve en az bir oluşur, ancak ideal, üç veya daha fazla teknisyenleri. Operatör iletken ve iskelet kas biyopsi tüm yönleriyle denetlemekten sorumludur. Bir teknisyen (teknisyeni # 1) kas ekstraksiyon tüm yönleri ile operatöre yardımcı için hemen sorumludur. Bu "steril olmayan eller" olarak steril bir şırınga ile emme uygulanmasını içerir. İkinci bir teknisyene (teknisyeni # 2) deneğin korkusunu en aza indirmek için prosedür sırasında konu ve masajlar öznenin karşısında bacak ile görüşmesinde yürütmektedir. Üçüncü teknisyeni (3 teknisyeni #) kullanımı ve iskelet kası örnek işlemekten sorumludur. Mansap analitik önlemler kaç addit dikteuğratarak teknisyenleri iskelet kası örneği hazırlanması / gelişmesi için gereklidir.

1. Konu Hazırlık

1. , Toplayın hazırlamak ve kas biyopsi (Tablo 1) için belirtilen malzemeleri düzenlemek. Dekontamine ve Bergström iğnesini (dış ve iç kanül trokar) ve standart uygulamalara göre ¹⁶ pistonu sterilize edin.
2. Konu ile onam formunu inceleyin. Appalachian State Üniversitesi'nde kullanılan formu Katılacak Rıza iskelet kası biyopsisi kısmı çevrimiçi ek 1'de verilmiştir.
   1. Prosedürün olası riskler, cilt hazırlığı, anestezi uygulaması, tipik duyumlara odaklanarak kas biyopsi prosedürünün genel yönleri hakkında konuya konuşun. Dikkatli formu katılın ve çalışma tasarımı ve prosedürleri anlaşıldığını onaylamak için onu imzalamak için Rıza okumak için konuyu söyleyin.
3. S doğrulayınubject alerjik olmayan için "___ Caine" tipi ilaçlar (örneğin lidokain).
4. Maruz uyluk ile bir yastıklı masaya sırtüstü yatmak konuyu söyleyin. Kişinin bacak altında plastik altlık ile iki atılabilir emici levhaları tarafından yerleştirin. Böylece kısaltılmış pozisyonda Vastus lateralis yerleştirerek, topuk altında küçük bir havlu rulo gibi diz tamamen genişletilmiş olduğundan (yüksek ~ 1 cm) ile rahat bir şekilde bacak yerleştirin.
5. Operatör biyopsi Alanı görselleştirilebilir ve böylece kısa süreli maruz uyluk kas büzülmesi için konusu talimat yazıldı. Not: Vastus sadece fasya lata (illiotibial bant), patella üst ve büyük trokanter ⁷ arasındaki mesafenin yaklaşık üçte birine anterior olan biyopsi siteyi lateralis.
6. Sadece aşağıdaki operatör işareti (~ 0.5 cm) ince bir nokta kalıcı bir kalem ile kesi site var.
7. Operatör Pinc tarafından yaklaşık Deri kıvrım kalınlığı belirlemek mıskinfold hing.
8. Operatör var ve teknisyenler sabun ve ılık su ile ellerini yıkamak ve tek kullanımlık eldivenler yok.
9. Operatör (Clippers yoluyla) biyopsi site çevresinde ~ bir bölgeden 15 cm x 15 cm saç kaldırmak var. Biyopsi sitesinden saç kırpma işlemi sırasında kesi girmesini ve kapanış sırasında saçları önler ve epilasyon bant kapanışları ve cilt (3.4 bakınız) arasında daha iyi temas sağlar: Not.
10. Operatör çubukla alan sterilize sahip topikal bir antiseptik ile önceden ıslatılır, (örneğin iyot / kabuklu deniz ürünleri alerjisi konular için povidon-iyot veya klorheksidin glukonat gibi). Merkezinde başlar ve kesik alanının dış kenarına doğru eş merkezli daireler halinde çalışır. En azından, yeni bir ön-batırılmış bez ile iki kez daha her zaman tekrarlayın.

2. Biyopsi Prosedürü

1. Operatör, atılabilir eldivenler kaldırmak sabun ve ılık su ile ellerinizi yıkayın ve steril cerrahi gl don varaseptik teknikle Oves.
2. Teknisyen # 1 sunacağım operatöre steril fenestre örtüye sahip. Aseptik teknik kullanılarak, operatör var steril bir alan sağlamak için biyopsi sitesi üzerinden örtüyü yerleştirin.
3. Teknisyen 1. mevcut olması, operatör, aseptik teknikle, korurken, bir 21 G iğne ile donatılmış 5 mL'lik bir şırınga. Alkollü bir bezle lidokain şişenin üst temizleyin.
   1. Operatör hemen lidokain 5 ml çekilme var. Şırınga, 21 G iğne çıkarın ve bir kavuz kabın içine iğne atın.
   2. Aseptik teknik korurken teknisyen # 1 sunacağım 1-½ inç 25 G iğne ile operatör var. Operatör yerde şırınga üzerine 1-½ inç iğne ve şırınga hava kabarcıkları tahliye.
4. Kesi sitede teknisyen 1. sprey etil klorür (~ cilt üzerinde silinmez mürekkep işaretinin üzerinde 0.5 cm) sahip cilt görünene kadar "blanch."
   1. HaOperatör çapında bir "kabarcık" 2-4 mm üretmek için lidokain 100 ~ ile ul sızmak sonra, dermis içine deriye yaklaşık yatay iğneyi iğne aspire, ve A.Ş..
      1. Iğne bir kan damarı yerleştirilmiş olmadığını onaylamak için (biraz şırınga pistonu geri çekme) operatörü aspirat iğne var. Kan şırınga görünüyorsa, iğneyi çekilme kavuz konteyner içinde atmak ve 2.3 tekrar başlar.
      2. , Operatör unun, deri altı doku içine iğne sahip iğne havalandırın, ve daha sonra bir kabarcık oluşturmak üzere lidokain ~ 1 ml doku infiltrasyonu. Kabarcık yatışmış sonra, fasya yüzeyel durdurma, dikey kesi yeri içine lidokain yüklü şırınga 1-½ inç iğne takın. Not: konu (bir arı sokması benzer) lidokain ilk enjeksiyondan sonra hafif bir anlık batma hissi hissedebilirsiniz.
   2. Operat emin olunBu ^17-19 myotoxic olduğu veya lidocoine ile kas etkilemez.
   3. Operatör aspirat iğne var ve kalçasından iğne geri çekilirken daha sonra yavaş yavaş lidokain kalan 4 ml enjekte edilir. Enjeksiyon sitesi üzerinden steril gazlı bez yerleştirin ve lokal anestezik etkisi sürerken konu dinlenmek için izin verir.
5. Aseptik teknik korurken 2-3 dakika sonra, operatör neşteri teknisyen 1. hediyem var.
   1. Hafifçe alanı anestezi doğrulamak için neşter ucu ile biyopsi siteyi soruşturma operatör var. Gerekirse, kesi yeri içine lidokain başka bir 3-4 ml enjekte 2.4.1.2 bkz.
6. Operatör femur deri ve derialtı dokularda (~ mürekkep işaretinin üzerinde 2-3 mm) paralel aracılığıyla düz 1 cm kesi yapmak zorunda.
   1. Operatör kas içine fasya yoluyla bir kesi yapmak için neşter derin yerleştirin var. Her yönde bir kere yapmanız . Not: konu kas içine neşter bıçak keser eğer derin kesimli bir sancı ya da baskı hissedebilirsiniz.
   2. Teknisyen 2. sahip konuşma konuyu meşgul ve ters bacak masaj.
7. Operatör yerde kesi ve biyopsi sitesi üzerinden steril gazlı bez liberal bir miktar var ve kanamayı azaltmak için kesi doğrudan basınç uygulayın.
   1. Teknisyen 1. atılabilir 60 ml şırınga ve 30 cm uzatma boru (Şekil 1) 3-yollu metal stopkok bağlamak var.
   2. Teknisyen 1. uzatma tüpünün serbest ucuna şevli hortum konnektörünün bir ucunu sıkıca arasında ~ 15-18 mm olan bir 200 ul pipet büyük ucuna şevli hortum konnektörünün diğer ucunu yazıldı ucu kesilmiş.

jpg "width =" 500 "/>
Şekil 1. Bergström iğne. (A) Bergström iğne (5 mm), (a) bir dış kanül ve (b) iç trokar oluşan, ilgili bileşenleri (c) piston, (d) 15-18 mm kesim ~ 200 ul bir pipet içermektedir , (e) konik plastik konektör, (f) 3-yollu metal musluk, (g) 30 cm uzatma tüpü, ve (h) tek 60 ml şırınga. (B) Bergström iğne (5 mm) ve ilgili bileşenleri monte. ( C) geri Bergström iğne (5 mm) iç trokar yaklaşık 1 cm dış kanülün penceresi açılır.

9. Kanama yatışmış sonra, teknisyen 1. sterilize otoklav keseyi açmak ve aseptik teknik korurken operatöre 5 mm biyopsi iğnesi ve iç trokarı (Şekil 1) sunmak var.
   1. Operatör iğneyi (dış kanül ve iç trokarı) monte var, uyum ve kayma hareketini kontrol edin.
   2. Operatör var sıkıca dönmesini iç trokarı önlemek için iki elinizle iğne düzeneğini (dış kanül ve iç trokar) tutun. Teknisyen 1. sıkıca hafif aşağıya doğru bir döndürme hareketiyle biyopsi iğnesi iç trokar kısmının üstünde içine kesilmiş pipet yerleştirin var. Operatörünüze veya biyopsi iğne, sadece pipet değmeyecek teknisyen 1. olun.
   3. Operatör kesiden dokuya biyopsi iğne tanıtmak var. Biyopsi iğne ucu ile fasya olarak kesi (kazanılmış bir "hissediyorum") bulun. İğne, kas içine ilerleyen bir zemine doğru iğne aşağı hemen ardından pano ve açı geçen iğneyi. Not: Konular fasya yoluyla kesi biyopsi iğne ucu ile bulunur ve iğne kas içine ilerletilir gibi bazı hafif rahatsızlık (örneğin, "derin basınç," ya da hafif kramp hissi) karşılaşabilirsiniz.
      1. "rahat" Kalmak için teknisyen 2. talimat konuyu var ve operatör kas içine iğne ilerleyen iken kendi uyluk kaslarını değil.
   4. Biyopsi iğnesi konuma getirildikten sonra, tek 60 ml şırınga açmak için kullanıcı teknisyen sinyal 1. sahiptir.
      1. Teknisyen 1. hızla biyopsi iğnesi içinde emme oluşturmak için 40-50 cc işaretine açık tek 60 ml şırınga çekin var.
      2. Operatör kas içinde dış trokar konumunu korurken, dış kanül penceresini açmak için dışarı yaklaşık 1 cm iç trokarı çekin var. Operatör hızla (klip) kesilmiş ve kas örnek toplamak için iç trokarı kapatın var. Emme serbest bırakmak için operatör sinyal teknisyen # 1 var.
      3. Teknisyen 1. emme serbest bırakmak için odasına stopcock açmak mı.
      4. Operatör var biyopsi iğnesi 90 ° döndürmek ve işlemi tekrarlayın. Gerekirse, operatör repea sahip(4 klip toplam) 3x rotasyon prosedürü t.
   5. Fasya veya cilt yakalamak için dikkatli olmak, uyluk biyopsi iğne çıkarırken operatör steril gazlı bez ile kesi yeri doğrudan karşı baskı uygulamak var. Önemli bir direnç hissedilirse iç trokarın bir kıvırma hareketi uygularken, yeniden kesti.
   6. Uyluktan biyopsi iğnesinin çıkarılması üzerine görsel doku yeterli miktarda toplanmış, tahmin etmek için dış kanülün lümen incelemek için, operatör arka 1 cm iç trokarı çekmelidir.
      1. Operatör elden # 1 tekniklere biyopsi iğne var. Aseptik teknik O teknisyen 1. sağlamak korumak için sadece iğne değil, operatör dokunur. Teknisyen # 1 elden 3. tekniklere biyopsi iğne var.
   7. Teknisyen # 3 sökün biyopsi iğne doku var.
      1. Teknisyen 3. kullanacağım pistonu (Şekil 1) ve ince uçlu forseps bir çift vartüm kas dokusu, iç ve dış kanül trokar kaldırılır emin olmak için.
      2. Teknisyen 3. hızlı kas dokusunun yeterli miktarda toplanmış onaylamak ve bir buz-soğuk diseksiyon blokta örnekleri yer için örnek tartılır yazıldı.
   8. Teknisyen 3. dikkatle kas örneklerinde görünür bağ dokusu ve yağ teşrih var. Teknisyen 3. alt analizlere göre depolama için kas numuneleri hazırlamak var. Örneğin, hemen kriyotüpe içinde örnekleri yer ve sıvı azot içinde dondurma ek, montaj ve RNaz inhibitörü, vb kriyotüpe histoloji, ya da bir yer için dondurmak
   9. Gerekirse aseptik teknik korurken, ikinci sterilize biyopsi iğnesi ile işlemi tekrarlayın.

   3. Kapanış

   1. Operatör steril gazlı bez ve 10-15 dakika süreyle bir buz paketi ile biyopsi siteye doğrudan basınç uygulayın var.
   2. Hemostaz sağlandıktan sonra, operatör kullanımı alkol pr varep pedler kesi etrafındaki alandan kurutulmuş kan kaldırmak için.
   3. Teknisyen # 1 sunacağım operatöre topikal cerrahi yapıştırıcı ve uygulayıcının bir tüp var. Operatör aplikatör ucu veya borunun üst değmeden cerrahi yapışkan ve aplikatör tüpü monte yazıldı.
   4. Öte yandan ile kuru kesiğin üst üzerinde cerrahi yapışkan tek bir tabaka uygulanırken, operatörün bir eliyle kesik kapatıldı çekmelidir. Yapıştırıcı tedavileri (~ 90 sn) sonra, kesi bant closuresperpendicular geçerlidir. Alternatif olarak, iki steril 4-0 sütür ile kesiğin kapatılması.
   5. Operatör kesi yeri 3-4 2 "x 2" non-steril gazlı bez koyarak doğrudan basınç uygulamak ve öz-yapışan yapışkanlı şal ile güvenli var.
   6. Operatör sözlü konuyu ve uygun yara bakımı, normal ve anormal tepkiler üzerine yazılı talimatlar ve takip eden 1 ila 4 gün boyunca etkinlik ilkelerine uygun (çevrimiçi Herhangi yüzeylerin bakın sağlamasıpplement 2).

Yukarıda tarif edildiği gibi kas biyopsisi hızlı ve düzenli olarak iskelet kası dokusu örnekleri toplamak için araştırmacı sağlar. Sağlıklı, atletik kişilerde tipik verim 3-4 klipler ile tek geçişte 200 mg veya daha fazladır. Prosedürü kesi için hazırlık harcanan çoğu 15-20 dakika alır. Egzersize dayalı çalışmalarda, kas örnekleri genelde kurtarma sırasında toplanan bir ya da iki numune ile, öncesi ve sonrası egzersiz alınır. Bu tasarım sayesinde, post-egzersiz saç (karşı) uyluk kısaltıldı ve egzersiz öncesi uyluk prosedürü için hazırlanan edilirken kesi sitesi önceden işaretlenmiş ince bir nokta kalıcı bir kalem ile olduğunu. Bunu yapmak kas biyopsi ²⁰ sırasında veya uzun süreli egzersiz nöbetinden sonra 8-10 dk alınmasını sağlar. Egzersizin kısa dönemleri araştıran Alternatif olarak, (örneğin, 30 dakika ya da daha az) bir kesi (ler) steril sargı ile kaplı, egzersiz öncesinde yapılan ve sıkın olabilired cerrahi bant ile, böylece, biyopsi örnek egzersiz bir butik tamamladıktan sonra hızla (10 saniye ^{21 22} dk 4) alınması sağlanabiliyor. Prosedürün göreli çabukluk öncesinde, sırasında hücresel ve moleküler olayları yakalamak için araştırmacı sağlar ve egzersiz nöbetinden sonra, bir beslenme müdahale etkileşim etkisini test etmek.

ASU İnsan Performans Laboratuvarı kas dokusu biyopsi örneklerinde verileri kullanılarak çeşitli spor beslenme temelli bildiri yayınladı. ASU araştırma grubu yapılmış önemli bilimsel keşifler şunlardır:

IL-1β gen ifadesi, IL-6, IL-8 ve TNF-α çalışan 3 saat sonra deneyimli dayanıklılık atletlerden elde edilen iskelet kası dokusunda artar. Karbonhidrat alımı (60 gram / ​​saat), iskelet kası glikojen tükenmesi ⁸ (Şekil 2) üzerinde herhangi bir etkiye sahip olmasına rağmen, IL-6 ve IL-8 mRNA düzeyleri azalır.

= "Jove_content"> bir 2-saatlik yoğun ağırlık çalışma nöbeti, IL-6, IL-8, IL-1β kas dokusu sitokin mRNA artış ve 30 deneyimli ağırlık kaldırıcılar TNF-α (örneğin, yüksek, aşağıdaki çalışma ile aynı sitokinler) . Kas dokusu mRNA ekspresyonunda artış büyük ama plazma sitokin düzeylerinde büyük bir artış olmadan karşılık gelen. Karbonhidrat alımı kas doku sitokin mRNA ifadesinde ⁹ değişimin desen etkilemedi.

Plazma IL-6, 15 eğitimli zayıflatılmış bisiklet karbonhidrat yenmesi, plasebo ile karşılaştırıldığında, ancak, IL-8, TNF-α mRNA ekspresyonu bisiklet ¹¹ 2.5 saat sonrasında, kas dokusu glikojen azalması ya da IL-6 üzerinde bir etkisi vardı.

Kuersetin, (3 hafta için 1,000 mg / gün), kas dokusu, NF-KB, bir COX-2, IL-1β, IL-6, IL-8, veya TNF-α mRNA egzersizle oluşan artışlar değiştirmemiştir 40 eğitimli bisiklet sindiriminin sentezleme plasebo ile karşılaştırıldığında, ^15.

Insan iskelet kası dokusu biyopsi elde edilen Şekil 2. Veri. Randomize, plasebo (n = 16), crossover çalışmada erkek dayanıklılık sporcuları kontrollü% 70 VO _2max 3 saat boyunca koşu bandı üzerinde koştu ve bir% 6 karbonhidrat içeceği ya da bir plasebo tüketilen 1 L / saat ⁸ oranında içecek. İskelet kas dokusu, biyopsiler derhal bir buz-soğuk diseksiyon blok üzerine yerleştirilmiş öncesi ve sonrası egzersiz, alındı ​​ve görünür bağ dokusu ve yağ dikkatli bir biçimde çıkartıldı. Biyopsi Numune daha sonra sıvı azot içinde dondurulmuş, bir dondurarak saklama viali içine yerleştirilmiş depolanmıştır -8 Analizi. (A) Karbonhidrat alımından kadar 0 ° C iskelet kas glikojen tükenmesi (p = 0.246, etkileşim etkisi) etkilememiştir. Bununla birlikte, karbonhidrat yenmesi sırasıyla (B), iskelet kas dokusu, interlökin (IL) -6 mRNA seviyeleri ve (C), iskelet kası dokusu IL-8 mRNA seviyeleri (sırasıyla p = 0.071 ve p = 0.063, ortak etkisi, artışını azaltmak eğiliminde ) ^8.

Tablo 1. Kas Biyopsi Malzemeler Listesi.

Bu video ASU İnsan Performansı Laboratuarı kullanılan iskelet kas biyopsi bir adım-adım özetini sağlar. Küçük değişikliklerle bu prosedür, son 13 yılda yaklaşık 1.600 kas biyopsileri toplamak için kullanılır olmuştur. Kas biyopsi örnekleri önemli araştırma bulgularından yola çıkılarak, spor beslenme temelli araştırmalarda önemli veriler sağlamıştır.

Modifiye Bergström iskelet kas biyopsi tekniği yaparken farkında olmak çok önemli teknikler vardır. Birincisi ve en önemlisi, biyopsi ekip prosedürünün tüm aşamalarında sıkı aseptik teknik korumak gerekir. Kesi yeri [1.4] yerini zaman Vastus lateralis'ten, sözleşmeli, biyopsi sırasında rahat bir durumda olacağını daha ön ve proksimal olduğuna dikkat etmek önemlidir. Çalışma prosedürleri aynı uyluk ek biyopsiler gerektiriyorsa, ilk kesi sitesi biraz dis olmalıüçte biri noktasında [1.4] karasal; her bir müteakip biyopsi önceki birine 2-3 cm proksimal. Ölçme yaklaşık deri kıvrım kalınlığı [1.6] fasya yüzeysel doku miktarını, adım 2.3.2, 2.4.1, 2.6, 2.6.1 için önemli bir saptamada tahmin etmek operatörü yardımcıları ve 2.11.The operatör öğrenmek gerekir derialtı dokusu ve fasya [2.4.1] arasındaki direnç değişikliği seziyorum. Lokal anestezi uygulanırken iskelet kas dokusunda doğrudan temasını en aza indirerek ^17-19 lokal anestezik [2.4.2] myotoxic iken, bu anlamda yeterince altı dokusu sızmak için operatöre sağlayarak kas biyopsi kalitesini sağlayacaktır. Derialtı dokusu ile kesme yaparken, direniş bu değişimin bir anlamda fasya [2.6] derinliğinin bir göstergesi ile operatöre sağlayacaktır. Operatör neşter deri ve kesi göreceli konumuna göre ne kadar derin bir zihinsel not yapmak gerekirfasiyalarında [2.6.1]. Bu fasiyal kesi için sondalama operatör tarafından harcanan zaman miktarını azaltmak ve biyopsi iğne pencere kas tamamen belirlemede operatöre yardımcı olacaktır. Dış kanülün tüm pencere (Şekil 1), kas dokularını içinde olmalıdır. Bu kolay görsel inceleme ile doğrulanmıştır çok zayıf kişiler ile, ancak bu önemli bir subkutan dokuda olan hastalarda sağlamak için daha zordur. Şırınga açık çekildiğinde Teknisyen # 1 uygulanan emme derecesini ölçmek için öğrenmek gerekir [2.12.1]. Düşük emme pipet ucu-biyopsi iğnesi kavşak veya kas içine biyopsi iğnesi eksik penetrasyon zayıf bir birlik gösterebilir. Her iki senaryo tekrar biyopsi kas dokusu yeterli miktarda elde etmek için gerekli olacaktır olasılığını artırır. Emme b zaman tecrübesi ile, teknisyen # 1 de hissettim direnç derecesine göre kırpılmış doku miktarını tahmin etmelidiruygulanan eing. Bu bilgiler operatör iletilmelidir. Benzer şekilde, operatör iç trokarı [2.12.2] kapatırken yapılan kesim "hissediyorum" dayalı kırpılmış doku miktarını tahmin edebilirsiniz. Teknisyen 1. şırınga [2.12.2] ile emme oluşturduktan sonra operatör hızla kas klip gerekir. Maksimum emme noktasında kas dokusunu Kırpma dokusu verimi artıracaktır. Biyopsi iğnesinin bir tek geçiş ile birden çok küçük bir yöntem doku yeterli miktarda çalışma için elde edilir temin eder ve biyopsi iğnesi fasya kesikten kas içine sokulur sayısını azaltarak konusu rahatsızlık minimize [ 2.12.4]. Steril gazlı bez [2.13] ile karşı baskı uygulamak için kendi ücretsiz elini kullanırken operatör yavaş, döndürme hareketiyle kesi biyopsi iğne kaldırmak gerekir. Bu getting biyopsi iğne pencere önlemeye yardımcı olacaktır fasiyal ve dermal üzerine "kapattı"kararlara. Direnç hissi iğne geri kas yoluyla tamamlanmamış bir kesim gösterebilir ederken. Tamamlanmamış bir kesme şüphelenildiğinde, operatör biyopsi iğnesi çıkarılması durdurmak ve iç trokar 4-5 mm açılarak, geri kalan lifleri ve recut Trokar iç kapalı bir hafif dönme hareketi uygulamalıdır. Son olarak, biyopsi iğne çıkarıldıktan sonra, bazı konular hemostaz [3.1] elde etmek için daha uzun bir süre gerektirebilir, 10-15 dakika boyunca kesi yeri için soğuk kompres uygulayın. Hemostaz sağlandıktan sonra, dikkatlice alkol hazırlık yastıkları ile kesi etrafındaki alanı temizlemek ve cerrahi yapıştırıcı [3.2-3.4] uygulamadan önce cildin kurumasını sağlayın. Bu teknikler cilde sopa dermal kesi ve yapışkan bandajlar etkinliğini kapatmak için cerrahi yapıştırıcı kullanmanın faydalarını maksimize edecek. Cerrahi yapışkan bant kapakları ve dikişler üzerinde birçok avantajı vardır. Konular proce hemen sonra saat süreyle kuvvetli egzersiz yapabilirsinizkesi kanama olmadan dure. Cerrahi, yapışkan bir kaldırılmasını gerektirmez, enfeksiyon olasılığına karşı fiziksel bir engel teşkil etmektedir, ve yara izi en aza indirir.

Kas biyopsisi nispeten güvenli, minimal invaziv ve bir ayaktan prosedür olarak biyomedikal araştırma ortamlarında yapılabilir. Birçok konu yaşam normal günlük faaliyetlerini yürütmek için kendi yeteneği az değişiklik rapor. Prosedürden şişlik ağrı ve tam 5 ila 7 gün içinde çözümlenir. Birkaç advers olaylar (hem yerel cilt enfeksiyonları vardı, yaklaşık 2 1,600 dışarı) ASU İnsan Performansı Laboratuvarı'nda yapılan çalışmalarda katılan denekler bildirilmiştir. Bu insidans hızı diğer yayınlanmış raporlara benzer. Bergström ³ çok düşük bir spontan rezorbe kas içi hematom insidansı, ve arteriyel kanamayı durdurmak için cerrahi müdahale gerektiren 5.000 'den fazla biyopsisi sadece bir olgu bildirilmiştir. Henneßey ve diğ. Bergstrom teknik tadil edilmiş bir vakum kullanarak, 83 üzerinden 2 biyopsileri ağrı ve rahatsızlık nedeniyle öznenin günlük aktiviteleri bir bozulmaya yol açtığını bildirmişlerdir. Bu olaylardan biri bir ekimoz nedeniyle oldu, her ikisi de olaylar 7 gün ⁶ içinde çözülmesi. Tarnopolsky ve diğ. Emme modifiye Bergström tekniği ile çok düşük bir komplikasyon oranı (erişkinlerde ve çocuklarda ⁷ 13,914 biyopsisi 22 komplikasyonlar) rapor. Komplikasyonlar (5 olgu) lokal deri enfeksiyonu (8 olgu), arteriyel kanaması (2 olgu), ekimoz / hematom (2 olgu), ağrı> 3 gün (5 olgu) için devam eden ve biyopsi için küçük bir alan yerel bir uyuşma distalinden dahil ^7.

Modifiye Bergström kas biyopsi tekniği az zaman kısıtlamaları empoze ederken, bir çalışma sırasında toplanan verilerin kalitesini yükseltir. Yara yeri önceden hazırlandığı zaman prosedür hızla tek pas tamamlanabilir3-4 klip s doku tipik olarak 100-200 mg elde edilmiştir ve birden çok biyopsiler tek bir oturum sırasında, bir denekten alınan edilebilir. Bu teknikle toplanan kas örnekleri inflamasyon ve oksidatif stres fiber yazarak, kas hasarı, yakıt substrat mağazalar, mitokondriyal biogenezinin ve solunum, enzim aktivitesi, metabolitleri vardiya, protein sentezi, gen ifadesi de dahil olmak sonuç önlemler, geniş bir dizi için kullanılabilir , ve sayısız diğerleri.

Vastus lateralis gelen kas biyopsi örneğinin alınması, diğer aday kaslar (örneğin, biseps, deltoid, gastroknemius, tibialis anterior, triseps brachi, ve soleus kasları) daha fazla avantaj sunar. Vastus lateralis'ten en sık örneklenmiş kas ve normatif histolojik, biyokimyasal geniş bir miktardır, ve moleküler biyoloji veri bulgularını ve gözlemlerini karşılaştırmak için araştırmacı ve klinisyen için var. İkinci olarak, vastus alanı burada inci lateralisyapılır yonlarının nispeten büyük ve büyük kan damarları veya bölgeyi kaplayan sinirleri yoktur. Bu nedenle, belirli bir test süresi boyunca aynı kas birden kesikler her 2-3 cm aralıklı, gen ifadesi ²⁴ travma nedenli değişikliklerini önlemek için, yapılmalıdır. Ayrı kesiler yoluyla aynı kasın birden biyopsilerin görünüşte egzersiz ^24,25 stres duyarlı genlerin transkripsiyonel cevabı değiştirmez. İkinci bir biyopsi birkaç saat sonra ²⁴ aynı kesikten alınır Ancak, bazı genlerin ekspresyonu, etkilenebilir. Son olarak, denekler kas biyopsisi vastus lateralis elde edildiğinde az rahatsızlık ile egzersiz 2-3 saat meşgul edebiliyoruz. Birçok konular hafif bir kontüzyon için biyopsi sonrası rahatsızlık karşılaştırın. Bu sonrası çalışma örnekleri için daha önce çok az maruz yükü ^3,8,11,26 elde edilmesini sağlar.

Özetle, yöntem içinmodifiye Bergström tekniği kullanılarak insan iskelet kası biyopsisi numune alma tarif edilmiştir. Bu kas biyopsisi nispeten güvenli olduğunu ve birden aşağı hücresel ve moleküler deneyleri için yeterli iskelet kas dokusunda ile araştırmacı sağlar. Prosedür orta, araştırmacı öncesi elde etmek için izin hızlı tamamlanmış edilebilir ve egzersiz sonrası (ya da diğer müdahale) biyopsi örnekleri.

The authors have no conflicts of interest.

Herhangi bir fon ilan etmek.