Характеристика модуляторов рецепторов, активируемых протеазой, с помощью анализа мобилизации кальция с использованием планшетного ридера

Наша лаборатория работает над тем, чтобы понять, как модуляция рецепторов, активированных протеазой, может подавлять воспаление. Мы разработали новый класс малых молекул под названием пармодулины, которые модулируют активность PAR1. Цель состоит в том, чтобы обнаружить пармодулины с улучшенными свойствами для потенциального использования в качестве кандидатов в лекарственные препараты, а также понять их механизм действия.

В доклинических исследованиях с нашими коллегами мы определили, что пармодулины могут быть особенно перспективными для лечения расстройств, вызванных тромбовоспалением, включая заболевания почек, печени и сердечно-сосудистые заболевания. Их механизм действия также может позволить разработать соединения с лучшим профилем безопасности, чем предыдущие PAR1, нацеленные на кандидаты в лекарственные препараты. Рецептор PAR1 важен для активации тромбоцитов, но его передача сигналов в эндотелиальных клетках также важна и актуальна при многочисленных патологиях.

Поэтому мы хотели разработать дешевый и удобный протокол для тестирования активности пармодулинов и культивируемых эндотелиальных клеток. Мы здесь, чтобы поделиться обновленным протоколом измерения мобилизации кальция, который использует стандартный считыватель пластин и не требует автоматизированного обработчика жидкостей. Он подходит для скрининга лигандов PAR1 в эндотелиальных клетках, но теоретически его можно использовать для измерения активности любых соединений, влияющих на мобилизацию кальция.