Расщепленная сетчатка как усовершенствованный плоский препарат для исследования нейронов внутреннего ядерного слоя сетчатки позвоночных

Наша группа интересуется нейронными схемами и синаптическими механизмами, лежащими в основе зрительной обработки в сетчатке. Лаборатория Морганса исследует молекулярные механизмы адаптации к свету в биполярных клетках, а лаборатория Сивьера интересуется тем, как внутренние нейроны сетчатки способствуют функционированию ганглиозных клеток. Доступ к нейронам межъядерного слоя во всей сетчатке является сложной задачей как для анатомических, так и для физиологических исследований.

Нейроны межъядерного слоя доступны в вертикальных секциях, но в поле зрения их очень мало. Кроме того, нарезка разрывает боковые отростки и соединения, которые могут повлиять на физиологические исследования. Удаление фоторецепторов в технике расщепления сетчатки значительно улучшает диффузию антител во внутреннюю сетчатку, что делает иммуномечение внутренних мишеней сетчатки более чем в 20 раз быстрее по сравнению с традиционной цельной сетчаткой.

Расщепленная сетчатка также значительно улучшает доступ к нейронам межъядерного слоя во время электрофизиологии патч-зажима. Метод расщепления сетчатки откроет двери для новых подходов и ускорит темп наших экспериментов. Например, мы планируем использовать эту методику для изучения входов биполярных клеток в ганглиозные клетки меланопсина путем экспрессии каналродопсина в биполярных клетках.