Количественная оценка глобальных посттрансляционных модификаций гистонов с помощью внутриядерной проточной цитометрии в изолированной микроглии головного мозга мышей

Наше исследование направлено на понимание фундаментальных регуляторных механизмов, контролирующих экспрессию генов в мозге, и мы особенно заинтересованы в понимании того, как нарушение этих механизмов способствует развитию нервной системы и психоневрологическим состояниям. Мы фокусируемся на понимании того, как генетические факторы риска и факторы окружающей среды в совокупности изменяют клеточную функцию и вызывают поведенческие нарушения. Этот протокол включает в себя методы высокопроизводительного скрининга модификаций гистонов в изолированной микроглии, что позволяет нам провести скрининг десятков различных эпигенетических модификаций, прежде чем приступить к высокопроизводительному секвенированию и функциональным последующим исследованиям.

Наш протокол предоставляет меры глобальных гистомодификаций по аналогии с западным графиком. Тем не менее, наш метод быстрее, требует меньшего количества входных ячеек, является более количественным и может быть мультиплексирован.