Quantifizierung globaler posttranslationaler Histonmodifikationen mittels intranukleärer Durchflusszytometrie in isolierten Mikroglia des Mausgehirns

Unsere Forschung zielt darauf ab, die grundlegenden regulatorischen Mechanismen zu verstehen, die die Genexpression im Gehirn steuern, und wir sind besonders daran interessiert zu verstehen, wie die Störung dieser Mechanismen zu neurologischen Entwicklungs- und neuropsychiatrischen Erkrankungen beiträgt. Wir konzentrieren uns darauf, zu verstehen, wie genetische und umweltbedingte Risikofaktoren zusammenwirken, um die Zellfunktion zu verändern und Verhaltensstörungen hervorzurufen. Dieses Protokoll umfasst Methoden für das Hochdurchsatz-Screening von Histonmodifikationen in isolierten Mikroglia, die es uns ermöglichen, Dutzende verschiedener epigenetischer Modifikationen zu screenen, bevor wir uns für die Hochdurchsatz-Sequenzierung und funktionelle Folgestudien entscheiden.

Unser Protokoll liefert Messungen der globalen Histo-Modifikationen, ähnlich wie in der westlichen Handlung. Unsere Technik ist jedoch sowohl schneller, benötigt weniger Eingabezellen, ist quantitativer und kann gemultiplext werden.