Четверная шахматная доска — это метод, который изучает все возможные комбинации, которые могут быть получены путем комбинирования четырех препаратов, и важно найти лечение для устойчивых микроорганизмов, в основном MDR или также известных как микроорганизмы с множественной лекарственной устойчивостью. Этот метод не является трудоемким и результаты могут быть получены на следующий день или после окончания инкубационного периода. В дополнение к этому, он может изучать все возможные комбинации, а не только специфические и очень ограниченные комбинации, которые могут быть получены путем комбинирования этих четырех препаратов и всего, и все это в одном эксперименте.
В дополнение к этому, этот метод может быть использован во многих дисциплинах, и не только в микробиологии и даже в микробиологии. Он может изучать все возможные комбинации различных противомикробных агентов, а не только антибактериальных агентов. В дополнение к микробиологической части, он может быть использован для изучения комбинаций между противораковыми препаратами, между растительными экстрактами и лекарствами, и даже между панелями молекулярно-эффективных молекулярных методов лечения.
Заготовку размещаем 4 96, хорошо поставляем тарелки рядом друг с другом для того, чтобы с помощью скотча образовать квадрат, склеиваем их дно скотчем. Повторите этот шаг для того, чтобы получить четыре панели, каждая из которых содержит четыре пластины, и назовите их «один», «два», «три» и «четыре». Добавьте 50 микролитров Мюллера.
Хинт и бульон в лунки между колонной 2 и колонной 11 в 1696 году, луночные пластины четырех панелей добавляют 200 микролитров бульона Мюллера-Хинтона в скважину Н 12, служащую отрицательным контролем. Ну и в 1696 лунки пластины из четырех панелей добавляют по одному 50 микролитров бульона Мюллера-Хинтона в лунки А и Н, по одному в качестве положительного контрольного колодца в 1696 лунках из четырех панелей препарат один цефотаксим серийного разведения в коническую пробирку по 15 мл. Стерильная дистиллированная вода.
Рассчитайте объем, подлежащий удалению из исходного раствора препарата, по формуле С один В один равен С два В два. Снять расчетный объем из 15 мл стерильной дистиллированной воды и добавить такой же объем исходного раствора препарата В коническую трубку пипетки по 50 микролитров приготовленного лекарственного раствора в каждую лунку в колонке 11 и колонке 12, кроме лунки Н 12, начать серийное разведение, сняв 50 микролитров из колонки 11 и поместив его в соответствующие лунки в колонке 10, Затем от 10 до второй колонки, где 50 микролитров, взятых из второй колонки, будут отброшены. Повторите последовательное разбавление для каждой из 1696 луночных пластин четырех панелей.
Препарат двумя амиками серийно разводят до конической пробирки по 10 мл. Стерильная дистиллированная вода. Рассчитайте объем, подлежащий удалению из стокового раствора препарата.
Выньте рассчитанный объем из 10 мл стерильной дистиллированной воды и добавьте такой же объем исходного раствора препарата в коническую пробирку. Возьмите отдельную пластину на 96 лунок, добавьте в лунки между розой G и B.In этой тарелкой сто микролитров стерильного бульона Мюллера-Хинтона, добавьте сто микролитров ранее приготовленного препарата. Второе, раствор в лунки ряда G. Разбавляйте последовательно от ряда G до ряда В, взяв по сто микролитров из каждой лунки в RO G. И, наконец, отбрасывая сто микролитров из лунок ряда В. Повторите эти шаги для того, чтобы приготовить восемь отдельных 96 луночных планшетов, перенесите препарат два на четыре панели пипеткой 50 микролитров препарата два из лунок между рядами G и B в Соответствующие лунки в каждой пластине в четырех панелях, одна приготовленная 96 луночная пластина содержит сто микролитров препарата два.
То есть достаточно для двух пластин в одной панели препарата. Три живых корейки в дополнение к четырем разным коническим трубкам на 14 мл стерильной дистиллированной воды. Рассчитайте объем, подлежащий удалению из стокового раствора препарата.
Из каждой пробирки извлеките расчетный объем из 14 мл стерильной дистиллированной воды и добавьте соответствующий объем препарата. После приготовления необходимых концентраций третьего препарата берут 50 микролитров и добавляют его в соответствующие лунки между рядами В и G и столбцами второй и 12 в соответствующей тарелке. В каждой панели, где С один соответствует четырем Р один пластинам и четыре панели С два соответствует четырем Р две пластины и четыре панели С3 соответствует четырем Р три пластины и четыре панели С четыре соответствуют четырем Р четыре пластины и четыре панели препарата четыре триметоприма сульфаметоксазола добавление в коническую пробирку добавляют 14 мл.
Стремитесь к дистиллированной воде. Рассчитайте объем, подлежащий удалению из стокового раствора препарата. Снимите расчетный объем из 14 мл стерильной дистиллированной воды из каждой пробирки и добавьте необходимый объем препарата.
После приготовления необходимых концентраций четвертого препарата берут 50 микролитров и добавляют его в соответствующие лунки между рядами В и G и столбцами второй и 12. На четырех пластинах в соответствующей панели, где C one соответствует панели One, C two соответствует панели 2, C3, соответствует панели 3, а C four соответствует панели 4. Приготовление и добавление бактериального посева равны I-E-S-B-L с использованием стерильного петлевого переноса.
Одна колония бактериального изолята равна ранее культивированному на планшете в два мл стерильного бульона Мюллера-Хинтона и вихре Проверьте мутность там, где она должна быть 0,5 Макфарланда с помощью плотности добавьте A TML стерильный бульон Мюллера Хинтона в стерильную чашку для мочи добавьте бактериальный инокулюм из 0,5 Макфарланда в чашку для мочи по формуле C один V один равен C два V два, где V один равен 800 микролитрам трубку пипетки 50 микролитров раствора инокулюма и в каждую лунку, кроме Н 12, в которой осуществляется контроль стерильности, хорошо инкубируют панели при температуре 37 градусов Цельсия в течение ночи. На этом рисунке изображена панель А единица. Цветные насаждения — это лунки, которые содержат рост бактерий, а черные стрелки представляют лунки на росте.
Нет интерфейса роста на первой пластине, второй и третьей пластинах. Мы видим, что в строке D, содержащей один более восьми МПК амикацина, в дополнение к нескольким суббактериям цефотаксима и левофлоксацина, в дополнение к одному более восьми МПК триметоприма сульфаметоксазола в четвертой пластине. Мы замечаем, что в квадранте, содержащем эту комбинацию, не наблюдается роста бактерий.
Это связано с тем, что в этой пластине у нас есть MIC левофлоксацина, который полностью подавляет рост. На рисунке 1 B представлена вторая панель. На этой панели мы видим, что ингибирование роста бактерий также наблюдается при РД, который содержит субики цефотаксима и левофлоксацина в дополнение к одному более восьми МПК амикацина и одному более чем четырем МПК триметоприма сульфаметоксазола.
На этом рисунке мы видим, что ингибирование роста бактерий наблюдается в строке C и строке D, содержащей несколько субмикрофонов цефотаксима и левофлоксацина, а также добавление к половине МПК триметоприма сульфаметоксазола, а также одного более четырех МПК амикацина в ряду C и одного более двух MIC амикацина в строке D Рисунок 1D представляет собой четвертую панель А. В этой панели мы имеем одну МПК триметоприма сульфаметоксазола в комбинации с несколькими концентрациями цефотаксима, амикацина и левофлоксацина. На этом рисунке мы видим, что рост бактерий полностью подавляется в квадранте, содержащем комбинацию, где это ингибирование является эффектом одного MIC триметоприма сульфаметоксазола в листе FIC, все в файле Excel.
В таблице будет указан итоговый звуковой ФИК, с интерпретацией полученного значения. В заключение следует отметить, что метод Q в шахматном порядке изучает все возможные комбинации между четырьмя препаратами в одном эксперименте. Результаты получаются на следующий день и интерпретируются простым и быстрым способом с помощью шаблона Excel.
