Субклавский прокол вены как альтернативный метод сбора образцов крови у крыс. После общей анестезии поместите крыс в положение лежа и стерилизовать инфраклавикулярное пространство с 75%этанола. Определите превосходную стерна фоссу перед проколом.
Найдите место прокола, хвостовую часть внешней одной трети области ключицы в той же стороне. Направление иглы было расположено к верхней стернальной яме и должно быть почти параллельно ключице, просто задней к ней. После сбора крови нажмите на место прокола в течение одной-двух минут, чтобы остановить кровотечение.
Сбор крови с достаточным объемом всегда необходим в экспериментах на животных. Сбор крови из вены крыс является популярным и менее напряженным, чем некоторые агрессивные методы, такие как ретро орбитального сплетения образца сбора. Однако этот метод ограничен успешной работой.
Здесь мы представляем наш метод сбора крови с желаемым объемом крови из подклавианской вены. Наши результаты показывают, что этот метод является безопасным и практичным, и может быть рассмотрен в случае, если анализ крови из хвостовой вены не удалось. Для начала приготовьте клейкую ленту, эпилятор, 75%этанол, трубку для сбора крови, двухточий пятими миллилитровый шприц, бритву для волос, электронную шкалу, гепарин и физиологический солевой раствор.
Домашние крысы в стандартных условиях, с бесплатным доступом к пище и питьевой воде, содержались в клетках площадью 530 квадратных сантиметров с деревянными постельными принадлежностями для бритья. Индуцировать общую анестезию у всех животных через внутриперитонеаную инъекцию перед проколом. Поместите крысу в положение лежа, зафиксните задние конечности в удобном положении и зафиксните верхние конечности параллельно телу, рядом со стволом.
Очистите обе стороны инфраклавикулярного пространства, чтобы удалить мех и любую видимую грязь. Протрите шею и грудную кожу 75%этанолом, и держать область чистой и сухой с марлей. Обе стороны подклавской вены пригодны для прокола, и здесь мы выбираем правую сторону для прокола.
Определите расположение и направление правой ключицы с помощью большого пальца левой руки оператора и аккуратно найдите превосходную стерна фоссу указательным пальцем. Промыть наш шприц с 10 единиц на миллилитр гепарин раствор. Найдите место прокола, найдите пятимиллиметровый хвост к внешней одной трети правой ключицы.
Аккуратно переместите шприц в кожу места прокола. Как только игла попадает в инфраклавикулярную кожу, нанесите активное давление через правую руку оператора. Направление иглы расположено к верхней стернальной яме, и должно быть почти параллельно ключице, просто задней к ней.
Как правило, подклавианская вена может быть достигнута путем вставки иглы около двух миллиметров в этом направлении. Как только игла попадает в вену, кровь попадает в шприц под активным давлением. Затем необходимо поддерживать активное давление до тех пор, пока не будет нарисован надлежащий объем крови.
После сбора крови, удалить прокол иглы, и нажмите на место прокола в течение одной-двух минут, чтобы остановить кровотечение. Обратите внимание: давление должно быть очень нежным, чтобы предотвратить удушье. Передача образца крови в антикоагулялированную вакуумную трубку с ЭДТА и центрифугой при 1600G в течение 10 минут для сбора плазмы.
Аспирировать супернатант для повторной очистки трубки и хранить при температуре минус 18 градусов по Цельсию. Для сравнения успеха между квалифицированными операторами и новичками, 20 SD крыс были разделены на две группы случайным образом. Результаты показывают, что через правую подклавианскую вену, девять крыс в квалифицированной группе и восемь крыс в группе начинающих удалось, соответственно.
Затем сбор крови у оставшихся трех крыс удалось через левую сторону. Уровень успеха между этими двумя группами не имел существенной разницы. В этих двух группах курс времени несколько отличался.
Никаких серьезных осложнений, таких как пневмоторакс, гемопневмоторакс, и кровоизлияние произошло во время или после операции. Все животные выжили после взятия проб крови. Чтобы продемонстрировать трудности обучения процедуре прокола, мы далее сравнили количество снятия между квалифицированными и начинающими группами.
Как показано во второй таблице, среднее число снятия средств в квалифицированной группе несколько меньше, чем у начинающих, однако статистической значимости нет. В заключение, наши результаты показывают, что стратегия прокола подклавианской вены для сбора крови безопасна и осуществима у крыс. Этот метод ценен, особенно в тех случаях, когда требуется большое количество крови.
Этот метод может быть оптимальной альтернативой, если обычный анализ крови не удается.
