Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области поведенческой нейронауки о том, генетическая мутация или экологическая переменная может повлиять на социальное поведение или приобретение и сохранение спациальных воспоминаний. Основные преимущества этих методов являются то, что оба исследования могут быть просто построены с минимальными финансовыми инвестициями, и что ни протокол требует от животных, чтобы испытать экстремальные или стрессовые стимулы. Damsel в беде метод может обеспечить понимание мыши про-социального поведения, но он также может быть использован в качестве меры сопереживания в других организмов модели млекопитающих.
Перед началом процедуры тестирования лабиринта Барнса очистите все компоненты лабиринта водой и 70%этанолом. Когда компоненты высохнут, соберите лабиринт и случайным образом назначите каждую мышь в целевое отверстие для использования в течение всего периода тестирования. Отверстия могут быть помечены от одного до 20 на дне лабиринта или на внешней стороне периметра лабиринта, где они не видны из лабиринта.
Чтобы начать учебный тест, замените назначенный отверстие диска с 23 на 11 сантиметров черный ящик и использовать резинки и крючки, чтобы прочно прикрепить коробку к лабиринту. Затем поместите мышь на центр лабиринта Барнса под чашкой и позвольте мыши акклиматизироваться в течение 30 секунд. В конце периода акклиматизации, начать видеозапись и включить свет и ультразвуковой шумоизоляции.
Поднимите чашку через струнный механизм, чтобы избежать смещения первоначального заголовка животного и начать таймер за занавеской наблюдения. Отслеживайте движения животного на листе бумаги с помощью диаграммы лабиринта и используйте диаграмму для анализа стратегий поиска мыши, а также для определения количества отверстий, которые были исследованы в квадранте напротив цели. Когда мышь входит в целевое отверстие, накройте отверстие тяжелым непрозрачным связующим звеном и выключите ультразвуковой шумоизоляционный производитель.
Если мышь не вошла в цель через пять минут, загон животное в целевое отверстие. Затем позвольте мыши оставаться в целевой коробке в течение одной минуты спокойно, убедившись, что выключить ультразвуковой шум. Затем верните животное в клетку.
Когда все мыши были протестированы, вручную просмотрите их записи для отслеживания общего движения мыши, чтобы определить количество неправильных отверстий, исследованных до и после того, как цель найдена, а также количество отверстий от целевого отверстия до первого исследованного отверстия и любого заметного поведения ухода. Для исследовательского поведения Damsel в distress Testing поместите закрытую и пустую стресс-камеру в центр арены эмпатии и начните запись с подвесной камеры. Аккуратно поместите мышь-мужчину под чашку в левом нижнем углу на арене в течение 30 секунд.
Затем удалите чашку с помощью струнного механизма и позвольте мыши исследовать в течение 10 минут заботу, чтобы держаться подальше от поля зрения во время записи. В конце периода исследования, переместить мышь с арены в клетку проведения в течение пяти минут и остановиться и сохранить запись. Для социальной отзывчивости Damsel в distress Testing, аккуратно вручную удерживайте самку мыши и опустите мышь в удерживающая камеру.
Закройте открытый конец камеры позади мыши и подтвердите, что мышь не может развернуться. Начните запись с подвесной камеры и поместите удерживающих камер внутри в центре арены. Позвольте животному акклиматизироваться в течение 10 минут, заботясь о том, чтобы оставаться вне поля зрения.
Затем перенесите мышь-мужчину из зоны удерживания обратно на арену эмпатии в течение 10 секунд и позвольте мышке еще пять минут, чтобы исследовать арену, заботясь о том, чтобы оставаться вне поля зрения. В конце периода исследования остановитесь и сохраните видеофейс и верните обоих мышей в клетки. Затем замените кукурузные постельные принадлежности и продезинфицировать как арену, так и стресс-камеру 70%этанолом.
Чтобы проанализировать данные, откройте видео файл в соответствующем программном обеспечении отслеживания и поместите прозрачный лист над экраном. Очертите площадь арены маркером и разделите площадь арены на девять равных отсеков. Просмотрите видео данные за первые пять минут первоначальной исследовательской меры, записывающие количество пересекаемых отсеков, время, проведенное на центральной площади арены, количество эпизодов рытья и ухода, а также количество раз, когда мышь касалась пустой центральной удерживаемой камеры.
Затем просмотрите видео данные за пять минут измерения социальной отзывчивости сразу после того, как самец будет вновь введен в арену с захваченной самкой, записывающей те же данные, что и для первоначальной исследовательской меры, но добавляя отслеживание количества раз, когда мышонок коснулся носа с пойманной в ловушку самкой мыши. Когда Барнс Лабиринт обученных новорожденных работают как взрослые в одном долгосрочном испытании, этанол вводили мышей труднее вспомнить, где цель отверстие было расположено, чем солевой вводили контроль животных. Этанол обработанных мышей также изучить значительно больше отверстий в противоположном квадранте от цели, что свидетельствует о неспособности вспомнить правильное общее географическое положение и использовать последовательное отверстие для поиска отверстия в форме кольца моды, пока отверстие не найдено.
В модели Damsel in Distress более старые мыши пересекают больше квадратов, чем молодые мыши. В присутствии захваченных женщин, однако, мышей обоих возрастов тратить меньше времени на изучение арене. Несовершеннолетние самцы тратят больше времени на раскопки во время своего времени на арене в присутствии пойманной в ловушку самки мыши, чем когда только предлагая беспокойство или про-социальное поведение по отношению к пойманной в ловушку женщине.
В отличие от этого, мышей мужского пола коснуться трубки, содержащей захваченных женщин и инициировать захваченных женский контакт значительно чаще, как взрослые, чем в качестве несовершеннолетних. При попытке этой процедуры, важно помнить, чтобы сохранить условия постоянными между и в рамках испытаний, чтобы экологические переменные не путать результаты исследования. После первоначального использования этих поведенческих анализов, те же животные могут быть повторно протестированы в различных точках времени во время развития, чтобы ответить на вопросы о долгосрочной памяти и возможных изменений в социальном поведении.
