Использование ультра-высокой полевой МРТ малого грызунов Модели поликистоз почек для

The use of ultra-high field MRI as a non-invasive way to obtain phenotypic information of rodent models for polycystic kidney disease and to monitor interventions is described. Compared with the traditional histological approach, MRI images can be acquired in vivo, allowing for longitudinal follow-up.

Several in vivo pre-clinical studies in Polycystic Kidney Disease (PKD) utilize orthologous rodent models to identify and study the genetic and molecular mechanisms responsible for the disease, and are very convenient for rapid drug screening and testing of promising therapies. A limiting factor in these studies is often the lack of efficient non-invasive methods for sequentially analyzing the anatomical and functional changes in the kidney. Magnetic resonance imaging (MRI) is the current gold standard imaging technique to follow autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) patients, providing excellent soft tissue contrast and anatomic detail and allowing Total Kidney Volume (TKV) measurements.A major advantage of MRI in rodent models of PKD is the possibility for in vivo imaging allowing for longitudinal studies that use the same animal and therefore reducing the total number of animals required. In this manuscript, we will focus on using Ultra-high field (UHF) MRI to non-invasively acquire in vivo images of rodent models for PKD. The main goal of this work is to introduce the use of MRI as a tool for in vivo phenotypical characterization and drug monitoring in rodent models for PKD.

Поликистоз почек (ДОК) включает в себя группу моногенных заболеваний, характеризующихся развитием кист почек. Среди них аутосомно-доминантному поликистоз почек (ADPKD) и аутосомно-рецессивным-поликистоз почек (АРПКБП), которые представляют собой наиболее распространенные типы ^1,2. ADPKD, наиболее частая форма наследственных заболеваний почек кистозные, порождается мутаций в генах PKD1 или PKD2. Она характеризуется поздним началом, несколько двусторонних кист почек, сопровождающихся переменной экстра-кист почек, а также сердечно-сосудистых и мышечных скелетных аномалий. АРПКБП, большинство обычно влияющие новорожденных и детей младшего возраста, вызывается мутациями в PKHD1 и характеризуется увеличенными эхогенных почек и врожденные фиброза печени ^3.

Важно отметить, что ADPKD характеризуется неоднородностью, как в гене (генной) и мутации (аллельного) уровнях, что приводит к существенному рhenotypic изменчивость. Мутации в гене pKD1 связаны с тяжелой клинической картиной (многочисленные кисты, ранней диагностики, гипертонии, гематурии и), а также быстрый переход к терминальной стадии почечной болезни (20 лет раньше, чем у пациентов с мутациями PKD2) ^4. Тяжелая поликистоз печени (PLD) и сосудистые нарушения могут быть связаны с мутациями в обоих PKD1 и PKD2 ^5. Большинство почечных осложнений ADPKD возникают главным образом в результате расширения кисты вместе со связанными воспаления и фиброза. Развитие Киста начинает в утробе матери и продолжается в течение жизни пациента. Почки, как правило, поддерживать их почковидные формы, хотя они могли бы достичь более чем в 20 раз нормальный объем почек. Большая часть пациентов данного двустороннего распределения кист почек, но в некоторых исключительных случаях, киста может развиваться в одностороннем или асимметричным рисунком.

Основным ChallenGE для нефрологов следующие пациентов с ADPKD или реализации терапии является естественной истории болезни. В течение большей части его курса, функция почек остается нормальной и к тому времени, функция почек начинает снижаться, большинство из почек были заменены кист. При терапии осуществляется на более поздних стадиях, это менее вероятно, чтобы быть успешным, так как пациент может уже достигли точки невозврата в хронической болезни почек. В противоположность этому, при терапии начали на ранних стадиях, трудно определить ответ, основанный только на скорости клубочковой фильтрации. В результате, понятие объема почек в качестве маркера прогрессирования заболевания привлекли к себе внимание.

Консорциум по рентгенологическая картина исследований поликистозных заболевания почек (CRISP) исследования показали, что у пациентов с ADPKD увеличение объемов почек и кисты прямо коррелирует с ухудшением функции почек, подчеркивает потенциал общего объема почек (ТКВ), как вurrogate маркером прогрессирования заболевания ^6,7. Следовательно, TKV в настоящее время используется в качестве первичного или вторичного конечной точки в нескольких клинических испытаний ADPKD ^2,8,9.

Несколько мышиных моделей, включая спонтанные мутации и генной инженерии пролили свет на патогенез ДОК ^10,11. Модели pKD1 или PKD2 (мутации в любом pKD1 или PKD2) стали самыми популярными, так как они прекрасно имитируют человеческий болезнь. Кроме того, модели грызунов с мутациями в других, чем pKD1 или PKD2 генов генов были использованы в качестве экспериментальной платформы для выяснения путей, связанных с болезнью сигнализации. Кроме того, некоторые из этих моделей были использованы для тестирования потенциальных терапии. Тем не менее, ограничивающим фактором во многих исследованиях на грызунах для ДОК часто отсутствие эффективных неинвазивных методов последовательно проанализировать анатомические и функциональные изменения в почках.

Магнитный гesonance томография (МРТ) является методом визуализации тока золотой стандарт, чтобы следовать пациентов ADPKD, обеспечивая превосходную контрастность мягких тканей и анатомической детали, и позволяет измерения ТКВ. Даже если МРТ хорошо известны для анатомической визуализации в более крупных животных и человека, мелких грызунов изображений в естественных условиях влечет за собой дополнительные технические проблемы, где способность приобретать изображения с высоким разрешением могут ограничить свою полезность. С введением сверхвысокой области (УВЧ) МРТ (7-16.4 Т) и развитие сильных градиентов, теперь можно достичь выше сигнал-шум и пространственного разрешения изображений МРТ с диагностическим качеством, аналогичным получены у человека. Следовательно, использование UHF МРТ для визуализации в естественных условиях малых моделей грызунов на ДОК стал мощным инструментом для исследователей.

Перед началом любых процедур с живых животных, экспериментальные протоколы должны быть утверждены институциональной уходу и использованию животных комитета (IACUC).

1. Конфигурация сканера

1. Перед началом убедитесь, что нагреватель находится в положении ВЫКЛ.
2. Выберите мини-градиент изображения и 38 мм ВЧ катушки и мини-держатель изображений.
3. В центральное отверстие держателя установить переменную сборку температуры.

2. Подготовка животных

1. Для экспериментов МРТ, достижения оптимальных анестезии с помощью испаряется изофлуран. Для индукции анестезии, поместите животное в индукции камеры выложены абсорбирующего ткани. Регулировка расходомера в изофлуран испаритель до 2,0-2,5 л / мин, и изофлуран до 3% в кислороде.
2. Удалите бирку металла или другого металлического предмета на данном этапе. Применить ветеринар мазь на глаза животного, чтобы предотвратить сухость под наркозом.
3. После того, как животноедостиг хирургического самолет анестезии (то есть, потеря отмены рефлекса на носок щепотку), поместите животное на держателе с носом вставляется в носовой конус. Указан расход воздуха в анестезии зонда до 2,0-2,5 мл / мин и изофлуран концентрации 1,5-2,0% в кислороде. Анестезия будет доставлен через носовой конус во время процедуры. Периодически настроить ИФ концентрации в зависимости от возраста и веса животного, чтобы поддерживать интенсивность дыхания ~ 40 ударов в минуту.
4. Использование держателей животных, чтобы обеспечить животное на месте и предотвратить движение во время эксперимента МРТ. Вары Тип держателя животного в зависимости от области тела, которые будут проверяться.
   Примечание: Индивидуальные держатели лабораторных пластмасс (полипропилен, тефлон, полистирол, поликарбонат) могут быть сделаны, чтобы приспособить конкретную эксперимент и по размеру животных (от новорожденных мышей 160 г крысы).
5. Поместите ректального термометра в животном контролировать температуру тела животного. В ехрeriment, держать животное на 35-37 ° С, используя поток теплого воздуха. Регулировка температуры воздуха (30-38 ° С) и поток (1200-2000 л / ч) на основе обратной связи температуры тела животного.
6. Прикрепите датчик воздушного шара дыхания давления на живот животного контролировать частоту дыхания.
7. Безопасный животное в центре РФ катушку и осторожно размещать ВЧ катушки с животным в МРТ сканера.

3. МРТ Эксперимент

1. Настройка и соответствовать РФ катушку перед началом эксперименты, чтобы минимизировать ВЧ мощность используется и максимально соотношение сигнал-шум. Чтобы начать настройку соответствия /:
   1. Откройте инструмент управления спектрометр, нажав на значок инструментов.
   2. В инструменте управления спектрометр нажмите Acquisition → Колебание. Окно Acq / Реко откроет отображения качаний кривой.
   3. Кроме настраивайте настройки и соответствующие конденсаторы (используя настройку и соответствие стержней) в небольших шагов, пока отраженного власти РФсводится к минимуму. Цель состоит в том, чтобы увидеть кривую с минимумом на вертикальной оси, расположенной на нуль на горизонтальной оси.
   4. Когда калибровка катушки была успешно достигнута, нажмите кнопку Stop в окне Acq / Reco.
2. Приобретать разведчик изображения в трех взаимно перпендикулярных плоскостях, чтобы создать осевые, корональные и сагиттального изображения. Используйте быстрый последовательность изображений, таких как внутри Gate Быстрый Низкий угол снимка (IG-FLASH) приобрести разведчиков изображения ^12. Используйте разведчиков изображения, чтобы установить правильную геометрию для фактического изображения.
3. В зависимости от конкретных научно-исследовательских целей, выберите правильную последовательность и параметры изображения и начать сканирование с светофора. Это позволит откалибровать радиочастотный канал, прокладке магнит, установленный на несущей частоте резонанса-за воды и отрегулировать усиление приемника, все автоматически.
   1. Для анатомических исследований и Т2 взвешенных изображениях, приобретают в 2D мульти срезе или 3D-режиме. Чтобы сократить время эксперимента для данного пространственного разрешения, держать в поле-of вида (FOV) как можно меньше, но достаточно большой, чтобы избежать наматывается вокруг артефактов (2.56-3.2 см).
4. Держите цикл выбранной последовательности немного короче, чем цикл дыхания животных от правильного выбора времени повторения (TR) и / или количество кусочков. Это гарантирует, что данные, собранные в ходе периода затишья животных.
   1. Например, для брюшной изображений, держите скорость дыхания животного на ~ 30 ударов в минуту; что составляет около 2,000 мс на дыхании. Используйте Turbo быстрого сбора с Релаксация Enhancement (редко) последовательности и приобрести 11-19 корональных ломтиками, с TR / TE 1500/9 мс, редкие фактором 8 и (матрица 256 х 256, поле зрения 2,56 х 2,56 см, толщина среза 0,75 мм) ,
      Примечание: Регулируя TR 1500 мс, и держать частоту дыхания животного ~ 30 ударов в минуту (2000 мс в дыхании), мы гарантируем, что данные, собранные в ходе периода затишья животных.
5. Ведь приобретение образ был завершен, разместить отсканированное животноена нагретой площадку и не контролировать до амбулаторно. После выздоровления, вернуть животное в клетке и мониторинг по крайней мере, в течение 1 часа, прежде чем вернуться на объект животного.

В этой рукописи, мы стремимся, чтобы показать полезность УВЧ МРТ в качестве инструмента для в естественных условиях фенотипической характеристики или мониторинга наркотиков в моделях грызунов для ДОК и других заболеваниях почек. Все эксперименты были частью экспериментальных протоколов, утвержденных IACUC.

В естественных условиях фенотипирования малых моделей грызунов на ПКД с помощью УВЧ МРТ:

Все исследования проводились изображений на живых животных под наркозом изофлуран, с Bruker AVANCEIII-700 (16,4 т) вертикальной родила двух-канальный спектрометр многоядерный, оснащены мини и микро-изображений аксессуаров для в естественных условиях и в пробирке ЯМР-спектроскопии и микроскопии.

Живот:

Основным структурным изменением в ДОК является развитие киста и рост, которые ответственны за большинство почечных осложнений. Наиболее распространенным экстра-почечная проявление в ADPKD является наличие кист печени и Cможно найти в до 90% пострадавших взрослых ^13. Использование UHF МРТ, можно приобрести высокой четкости, анатомические брюшной изображения мелких грызунов ДОК, которые позволяют в естественных условиях оценки кистозных измерения объема фенотипа и почек Рисунок 1А -. D показывает несколько 2D T2 взвешенных анатомические брюшной изображений для различных моделей грызунов ППБ. Брюшной изображения были получены с помощью 38 мм Объем РФ катушку. МРТ совместимы держатель был использован для размещения животных вертикально вдоль магнитного поля. Датчик шар был использован для контроля дыхания. Дыхательная стробирования был выполнен. Затем, корональные, сагиттальной и осевая, разведчик изображения были получены для того, чтобы найти почки и прописать его геометрию. Турбо оперативного сбора с повышением релаксации (редко) последовательности, 11-19 корональные ломтиков с TR / TE 1500/9 мс, редкие фактором 8 (256 х матрица 256, FOV 2,56 х 2,56 см, толщина 0,75 мм ломтик) был использован для собирать анатомические изображения.

Сердечно-сосудистые осложнения остаются важной проблемой у пациентов с ADPKD, связано с увеличением заболеваемости и смертности ^14,15. Экспериментальная и клиническая МРТ позволяет точную и воспроизводимую оценку структуры и функции сердца ^16-18. МРТ обладает высокой временной и пространственной разрешающей, что позволяет оптимальную визуализацию и анализ небольшого размера, быстро бьющееся сердце грызуна. По этой причине, целесообразно использовать УВЧ МРТ приобрести сердечные изображений для расчета конечного диастолического объема (КДО) и объем конечного систолического (КСО), а также массы миокарда от последовательных Cines короткой оси, охватывающих весь сердце в нескольких моделях грызунов ППБ. Рисунок 2 показывает МРТ изображения миокарда мыши. Сердечные кинокамеры изображения приобрел с помощью внутри Ворота-Fast Low-угол выстрела (IG-FLASH) последовательность ¹⁹ (11 коротких срезов оси, TR / TE 3.5 / 1.45 мс, повторение 100, матрица 256 х 256, поле зрения 2,56 х 2,56 см, SLтолщина льда 1 мм).

Мозг:

Многие цилиопатий были связаны с пороками развития головного мозга среди других дефектов. За последние годы, МРТ стала золотым стандартом для неинвазивного визуализации мозга. В отличие от гистологических исследований, МРТ предлагает обнаружение изменений анатомических без подготовки артефактов, которые мешают нормальной экспертизы. Мы используем УВЧ МРТ для оценки мозга фенотип нескольких моделей мышей для PKD или других генов-модификаторов, связанных с болезнью. Рисунок 3 показывает анатомические изображения головного мозга мыши. Изображения были получены с помощью турбо РЕДКИЙ последовательность, 11-13 осевые ломтиками и 25-29 корональные срезы с TR / TE 1500/9 мс, редкие фактор 8, (матрица 256 х 256, поле зрения 2,56 х 2,56 см, толщина ломтика 0,75 мм) ,

В естественных условиях МРТ эмбрионов мыши внутри материнской матки:

Возможность сбора информации в естественных условиях около эмбриона номер, viabilстадии развития, а также оценить фенотипические различия эмбрионов ность,, имеет важное значение, особенно при изучении эффекта инактивации специфических сигнальных путей в сочетании с pKD1 или PKD2 специфических мутаций. При выполнении в естественных МРТ беременных женщин, можно обнаружить эмбриональную летальность и оценки для фенотипических аномалий, и когда присутствует, определить, в какой стадии эмбрионального они произошли. 4 показан пример, в котором детальное эмбриональных информация может быть получена из беременных самок с использованием в естественных условиях УВЧ МРТ. Брюшной изображения были получены, как описано выше для небеременных животных. Изофлюран может безопасно использоваться в беременных грызунов и анестезия достигается у небеременных животных ^20. По эмбрионального 13 день (E13), можно определить многие анатомические особенности, такие как зачатки конечностей, мозга, конечного мозга и сердца. От E14-15 в metanephros можно отметить, появляются ING в качестве яйцевидной структуры (1-1,5 мм в длину) с мозгового и коркового компонента ^21.

В естественных условиях прогрессирования заболевания или мониторинга лечения мелких грызунов моделей для ПКД с помощью УВЧ МРТ:

В дополнение к отличной анатомической детали, УВЧ МРТ позволяет для измерения ТКВ в моделях грызунов для ДОК. Как у пациентов, TKV может быть использован для мониторинга прогрессирования заболевания или оценки лекарственные вмешательства, прежде чем изменение функции почек может восприниматься. Кроме того, возможность визуализации новорожденных грызунов обеспечивает важную точку входа для исследований МРТ, в котором в период внутриутробного развития выполняемых вмешательств. Рисунок 5 показывает несколько 2D T2 взвешенных анатомические брюшной изображений для ФКК крысы исследования, используемых в качестве TKV конечной точки. Брюшной изображения были получены, как описано ранее.

res.jpg "ширина =" 467 "/>
Рисунок 1: Анатомический. Корональных МРТ брюшной для разных моделей грызунов ПКД (A) 19 месячного pKD1 ^{RC / RC} мыши, показывая почти полную замену почечной ткани кистами (стрелки), имитирующих типичные изменения в ADPKD, (B), 4 месяца PKD2 ^{- / ws25} мыши, показывая двусторонние кисты почек (стрелки) и остальные почечной паренхимы, и кист печени (наконечники стрел), (С) 4 месяца Pkhd1 ^{LSL / LSL} мыши, показывая фиброз печени и никаких кист в почках, и (D) 21 дней ФКК крысы показывая несколько двусторонних кисты почек (стрелки) в основном при кортико области и внешней мозга, и мягким желчных протоков расширение. Изображения показывают хорошую анатомическую деталь для фенотипической характеристики, с в плоскости разрешением 100 мкм / пиксель и толщина среза 750 мкм. ЗаметкаРазница между поликистозных почек (A, B и D) по сравнению с нормальными, появляющихся почек (C). Масштабные бары:. 10 мм Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 2: Сердечный морфологию и функцию. () Анатомическое изображение сердца мыши с короткой оси, последовательности IG-FLASH. (Б) Излагая эндокардиальных границы в конце диастолы (красный) позволяет вычислить конечного диастолического объема (EDV) для каждого среза. Такая же процедура может быть сделано для объема конечного систолического (ESV). Кроме того, инфаркт объем (красно-синий) может быть рассчитана для каждого среза от короткой оси, кинокамеры изображений ^22. (С ) длинной оси изображение показывает, что в целом КДО и КСО может быть получен путем добавления объема каждого среза, и дополнительно расчета ударного объема и фракции выброса. Масштабные бары:. 10 мм Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 3:. Анатомический визуализации мозга мыши с УВЧ МРТ (А) и (B), осевые, (С) и (D), корональные изображения мозга в модели ADPKD мыши, приобретенного в 2D T2 взвешенной турбо редкий последовательности. Изображение в плоскости разрешение 100 мкм / пиксель и толщина среза 750 мкм позволяет проанализировать валовую анатомию мозга. В (б) и (г) белые стрелки указывают на паутинной CysTS, найденные в районе четвертого желудочка. Масштабные бары:. 10 мм Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 4:.. Внутриутробное изображений эмбрионов мыши E14 T2 взвешенных турбо редкий изображений, полученных в материнской фронтальной плоскости (A) и (B) материнской осевой плоскости показывает 4 различных эмбрионов 1-4 эмбриона и B 1 и 4, и дополнительная эмбрион не видел в A. Верхние вкладыши, увеличенные изображения из эмбриона 1, дисплей эмбриона сагиттальной плоскости А, расположенной с головой, направленной вверх-вправо, спиной влево, и корональной плоскости эмбриона В. Изображение в плоскости разрешение 100 мкм / пиксель позволяет идентифицировать многих анатомических особенностей, таких как зачатки конечностей, мозга, конечного мозга, сердца и печени. Image масштабные линейки:. 10 мм Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 5: Анатомические. Корональных МРТ брюшной изображений в изучении ФКК крысы (- С) представляют контрольную группу (физиологический раствор обрабатывают). Изображения были получены из того же животного в P3, p10 и p21. (D - F) представляют собой группу лечения (1-деамино-8-D-аргинин-вазопрессин лечение). Изображения были получены из того же животного в тех же возрастов, как контроль. Масштабные бары: 10 мм.p_upload / 52757 / 52757fig5highres.jpg "цель =" _ пустое "> Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Эта рукопись показывает целесообразность использования UHF МРТ в качестве инструмента для в естественных условиях фенотипической характеристики или мониторинга наркотиков в моделях грызунов для ДОК.

Мы описываем эксперименты, выполненные на 16,4 T с широким отверстием высокого разрешения ЯМР-спектрометра Avance III оснащен микро и мини аксессуаров визуализации. Спектрометр был обусловлен сбора и обработки программного обеспечения TopSpin2.0PV контролируемой Paravision 5.1 ПО для обработки изображений. Потому что размер грызунов колеблется в продольных исследованиях, мы использовали мини аксессуары изображений с 38 мм катушкой РФ и мини-держатель изображений. Для контроля температуры животное мы использовали стандартный высокого разрешения v ariable т емпера тура у нит (ВТУ БВТ 3000 цифровой), руководствуясь TopSpin 2.0. Воздушный поток подается из нижней части зонда проходит через нагреватель, а затем с помощью термопары, который расположен непосредственно под наркозом грызунов. Термопарыконтролирует уровень мощности нагревателя непрерывно изменяя ее, чтобы поддерживать температуру воздуха в нужное положение.

Одним из основных преимуществ использования УВЧ МРТ для фенотипической характеристики моделях грызунов PKD является возможность для получения в естественных изображений, что позволяет продольных исследований, выполненных в том же животном. Преимущества продольных исследований включают снижение затрат на земледелие и изменчивости данных, а также анализ прогрессии или регрессии фенотипа в моделях с неполной penetrance.Another благо МРТ против обычного гистологии, что МРТ представить более реалистичную анатомию без усадки и деформации, присущей в гистологических срезах. Кроме того, МРТ позволяет для 3D реконструкции изображений.

В дополнение к отличной анатомической детали, МРТ позволяет для измерения ТКВ в естественных условиях. ТКВ могут быть использованы для мониторинга прогрессирования заболевания в течение долгого времени, и ослов наркотиков средишательства, прежде чем изменения в почечной функции возникает. Кроме того, возможность визуализации новорожденных грызунов обеспечивает важную точку входа для исследований, в которых выполняются в утробе вмешательства.

Несмотря на большие преимущества, изображения в естественных моделей грызунов на ДОК-прежнему сложной задачей. Это особенно верно для мышей и новорожденных крыс из-за их малого размера и более высокой дыхательной и частоты сердечных сокращений по сравнению с людьми. Использование UHF МРТ и сильных градиентов позволяет для более высоких отношений сигнал-шум и лучше пространственное разрешение изображений, но МРТ очень чувствительна к движению, и артефакты движения могут значительно снизить разрешение изображения, уменьшая выгоды от техники. Это особенно важно для визуализации органов брюшной полости, которая является большой интерес в ДОК. Задержку дыхания сканирует, а приобрела у человека, не представляется возможным без введения эндотрахеальной трубки (ET). Возможность управления наркозом животногодыхательных путей с ET выгодно в случае сердечной или дыхательной ареста; Однако, интубация грызуна требует высоких технических навыков и трудно освоить. Доставка летучими анестезии, такие как ИФ по номинальной маски легко и возможность выбора для большинства процедур МРТ ^23. Тем не менее, возможность гипоксии / асфиксии должны быть рассмотрены, если животное не правильно расположен под наркозом, и нет никакого контроля дыхательных путей в случае возникновения чрезвычайной ситуации. Таким образом, тщательный мониторинг частоты дыхания животного и респираторные целевые последовательности стало очень важно. Кроме того, для достижения оптимального анестезии и животных позиционирование является существенным для получения изображений с высоким разрешением на сканер. Как и для всех живых исследованиях на животных, особенно при использовании болезнь, неонатальные или старых животных, важно следить за жизненно важные параметры животного и поддерживать стабильную физиологическое состояние во время процедуры, чтобы обеспечить здоровье животного идолгосрочный успех.

Несмотря на свои проблемы, значительный прогресс был достигнут в УВЧ МРТ позволяет для детального фенотипической информации в малых моделей грызунов ДОК и становится мощным инструментом для фенотипирования в естественных условиях и лекарственного мониторинга. Внутриутробно изображений развивающихся эмбрионов позволит начале характеристики фенотип связаны с генетической мутацией и может выявить случаи нежизнеспособных эмбрионов. В естественных условиях МРТ имеет решающее значение для достижения максимального преимущества от грызунов моделей ДОК (или любой другой модели грызунов системы) и должен рассматриваться в любом экспериментального проектирования.

The authors have nothing to disclose.

We thank Drs. Xiaofang Wang and Katharina Hopp for their invaluable help with the animal models. This work has been supported by grants from the National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases, National Institutes of Health (DK090728, DK058816).