Exame de piroptose por citometria de fluxo

O objetivo de nossa equipe de pesquisa é determinar se as células aviárias sofrem piroptose semelhante à das células de mamíferos. Além disso, pretendemos determinar a piroptose por meios mais precisos e fáceis. Muitos genes em espécies aviárias diferem significativamente daqueles em mamíferos, dificultando o uso de reagentes comumente empregados em estudos de células de mamíferos para pesquisa de morte celular aviária.

Assim, a pesquisa sobre a morte de células aviárias é muito mais difícil do que em células humanas ou murinas. Utilizamos os poros característicos da membrana plasmática em células piroptóticas formadas por fragmentos N-terminais de gasdermina para desenvolver uma estratégia baseada em citometria de fluxo para a determinação da piroptose. Por essa nova abordagem, observamos a ocorrência de piroptose induzida por doença infecciosa da bursal em células aviárias.

Em contraste com métodos anteriores, como western blot ou análise AFM, nosso protocolo é capaz de quantificar com precisão a porcentagem de células piroptóticas por dois parâmetros simultaneamente, a formação de poros da membrana plasmática e a ruptura da membrana plasmática, facilitando diferenciar células com piroptose de outras formas de morte celular.