A sobrecarga de pressão do rato induzida remodelagem moderada e modelo de disfunção sistólica precoce é uma versão mais suave da sobrecarga de pressão de rato previamente criada induzida para o modelo de insuficiência cardíaca sistólica. O estudo que eu amo, estudo das vias envolvidas na iniciação e propagação da remodelagem cardíaca, especialmente no que diz respeito à remodelagem metabólica, disfunção do miocárdio e ciclismo de cálcio. Antes de iniciar o procedimento, ajuste uma ferramenta de ligadura de hemoclip vascular através de um pedaço de plástico de sete polegadas pré-cortado para modificar o clipe na área interna apropriada, dependendo do modelo de insuficiência cardíaca desejada.
Em seguida, confirme a falta de resposta ao reflexo fetal no rato anestesiado e raspe o cabelo sob a axila direita na área torácica lateral direita. Tape os membros do animal em uma placa de dissecção de plástico e entuba o animal com um angiocato de calibre 16. Inicie a ventilação mecânica com volumes de marés de dois mililitros a 50 ciclos por minuto e uma fração de oxigênio inspirado de 21%.
Um aumento simétrico na parede do peito deve ser observado a cada respiração. Posicione cuidadosamente o animal sobre o lado lateral esquerdo e dobre a cauda de forma em forma de U. Em seguida, grave suavemente a cauda na placa de plástico e desinfete a pele exposta com iodo povidone.
Usando um bisturi, faça incisões horizontais de pele de um a dois centímetros na área de axilla direita um centímetro abaixo da axila direita e disseca a camada muscular torácica até que a caixa torácica seja atingida. Faça uma toracotomia de um centímetro entre a segunda e a terceira costela e coloque um retrátil no peito na incisão antes de dissecar suavemente os dois lóbulos da glândula timo. Empurre os lóbulos para o lado e use um fórceps cinza curvo para dissecar cuidadosamente a aorta ascendente da veia cava superior.
Uma vez que a aorta ascendente tenha sido isolada, use os fórceps para levantar cuidadosamente o vaso e colocar o clipe vascular ao redor da aorta ascendente. Em seguida, use sutura de monofilamento 2-0 para fechar o tórax antes de suturar a camada muscular do peito através de sutura a fita vicríl A-3-0, e feche a pele por uma sutura de monofilamento de nylon 3-0. Para imagens ecocardiográficas, após a sedação, remova o cabelo do baú anterior do rato e estabilize o animal na posição supina em uma placa de dissecção plástica.
Adquira clipes de visão de eixo longo parasteronal 2D e um parasternal de eixo curto 2D ao nível do músculo papilar. Obtenha imagens do modo M a partir da visão curta do eixo parasteronal ao nível do músculo papilar para medir a espessura do septo ventricular esquerdo e posterior da parede em diastole e os diâmetros ventriculares finais e sistólicas finais. Adquira imagens de visão de eixo parasalente de modo 2D M ao nível do músculo papilar médio para servir como referência para obter medições confiáveis de ventrículos seriais e subsequentes.
Em seguida, obtenha imagens do modo M da visão do eixo parasténal longo ao nível da válvula aórtica para avaliar o diâmetro relativo do átrio de duas esquerdas e o sistole final. A caracterização dos fenótipos de insuficiência cardíaca que se desenvolvem de oito a 12 semanas após a ascensão da banda aórtica pode ser facilmente realizada via ecocardiografia. Os clipes de vídeo de ecocardiografia do eixo parasternal 2D e 2D curtos do eixo parasternal podem ser usados para medir o comprimento e a área do ventrículo esquerdo em diastole final e systole final em animais de insuficiência cardíaca sham e MOD.
Nesta visão de eixo parasternal curto 2D, o aumento da hipertrofia do ventrículo esquerdo e o fenótipo MOD podem ser observados em comparação com o aparecimento do ventrículo esquerdo na imagem de ecocardiografia falsa. Ventrículo esquerdo e volume diastólico no fenótipo mod insuficiência cardíaca geralmente varia entre 600 a 700 microliters com poucos animais que apresentam um volume diastólico final maior que 700 microliters. O ventrículo esquerdo e o volume sistólico no fenótipo MOD variam entre 120 e 160 microliters.
Nestes rastreamentos de loop de volume de pressão representativos da semana falsa três banding aórtico pós-descendente, MOD e animais de insuficiência cardíaca sistólica, a pressão máxima do ventrículo esquerdo na semana oito é aumentada dramaticamente em mod e animais de insuficiência cardíaca sistólica adorólicas em comparação com a semana três animais de banda aórtica pós-descendente. devido ao descompasso entre o crescimento do animal e a aorta e a estenose fixa criada na aorta ascendente. Além disso, a semana três animais pós-AAB são totalmente compensados em três semanas com uma diminuição no ventrículo esquerdo e volumes diastólicos e asséticos em comparação com animais falsos.
Note-se que o modelo de sobrecarga de pressão de ratos induzido à insuficiência cardíaca está associado a altas taxas de mortalidade e falha com apenas cerca de 20% dos ratos que passam por uma transição ascendente de banda aórtica para desenvolver o fenótipo de insuficiência cardíaca MOD. O mais importante a ser lembrado é caracterizar adequadamente o fenótipo dos animais pela ecocardiografia para estreitar as variações biológicas observadas entre os animais dentro do mesmo grupo. Em avaliação mais dinâmica usando cateter de loop de volume de pressão pode ser usado para avaliar relaxamento, disfunção contraída e rigidez miochardial.
