Este trabalho foi financiado por um Wellcome Trust/real sociedade Henry Dale Fellowship (098400/Z/Z/12), um Conselho de pesquisa médica (MRC) conceder MC-UP-1201/1, Wellcome Trust e Gatsby Charitable Foundation SWC Fellowship (para tuberculose), MRC PhD Studentship (D.E. e RV) e uma bolsa de doutoramento de Fonds Boehringer Ingelheim (para RV). Agradecemos a Kostas Betsios para o software de aquisição de dados, o LMB mecânicos e elétricos oficinas para construção da arena experimental de programação.

Todos os experimentos foram realizados sob o ato de UK animais (procedimentos científicos) de 1986 (70/7652 PPL) após a aprovação ética local.
1. criação de aparato comportamental
Nota: O principal componente do aparato comportamental é uma variante da Barnes labirinto13 consiste em uma plataforma circular acrílica (92 cm de diâmetro) branca com 20 equidistantes, 5 cm de diâmetro, orifícios circulares, localizado radialmente, 5 cm da borda da plataforma . 19 delas são para ser fechada com tampa de plástico preta (5 mm de profundidade), enquanto o restante buraco leva a um abrigo de Perspex preto (dimensões 15 x 5,8 x 4,7 cm) que os ratos podem facilmente entrar e sair. A área central da arena consiste em uma plataforma circular fixa (22 cm de diâmetro) e a periferia é montada sobre um quadro que permite mais de 360 graus de rotação através de um motor de passo controlado por computador. A plataforma é elevada a 45 cm do chão para evitar que os ratos descer. Veja o desenho esquemático na Figura 1.
<ol><li>Anexar sugestões de visual para a periferia da plataforma (2D ou 3D símbolos com diferentes formas, cores e padrões), pelo menos a 2 cm da borda para evitar ratos de alcançá-los. Nota: Exemplos de indicações visuais são simples quadrados azuis de 262 cm2ou círculos (diâmetro de 15,5 cm) cheios de listras diagonais de roxas.</li>
	<li>Adicione ~ 2 g do fundamento da gaiola do rato de casa no interior do abrigo para servir como uma sugestão de local olfativa. Opcionalmente, posicione uma luz emitida por diodo (LED) na entrada do abrigo para fornecer uma indicação de marco visual local.</li>
	<li>Para isolar o mouse externo, indicações visuais distais, montar uma parede cilíndrica ou octogonal, estendendo-se 40 cm acima e 15 cm abaixo da superfície da plataforma, em torno da arena, posicionada a 10 cm de distância da borda da plataforma.</li>
	<li>Posicione um altofalante de ultra-som 50 cm acima do centro da plataforma, para fornecer estímulos auditivos aversive.</li>
	<li>Coloque uma tela translúcida 64 cm acima da arena para trás-projeto sobrecarga aversive estímulos visuais usando um projetor.</li>
	<li>O fornecido pelo projector acenderá o aparato comportamental; calibrá-lo para que haja 5-10 lx no centro da superfície da plataforma. Coloque luzes infra-vermelhas e uma câmera infravermelha acima da plataforma, com um filtro de passa-tempo (> 700 nm) para evitar tremulação de projetor no vídeo adquirido.</li>
	<li>Controle a posição do mouse on-line, usando um algoritmo apropriado ou software disponível comercialmente. Para controlar os ratos pretos em uma arena de branca, uma operação simples de limiarização seguida pelo cálculo do centroide da máscara é apropriada.</li>
	<li>Idealmente, coloque o aparelho comportamental dentro de uma caixa de som - e à prova de luz, para evitar que sinais externos que afetam a experiência.</li>
</ol>2. fornecimento de estímulos intrinsecamente contrário
Nota: Os estímulos descritos abaixo podem ser gerados com uma vasta gama de pacotes de software diferentes, incluindo o LabVIEW e Matlab.
<ol><li>Estímulo visual<ol>
<li>Projeto dos estímulos para a tela posicionado 64 cm acima da arena. O estímulo é composto por um círculo escuro linearmente em expansão em um fundo cinza22 (contraste Weber =-0.98, luminância = 7,95 cd/m2). Nota: O círculo padrão idealmente deve ser centralizado diretamente acima da posição do mouse, subtending num ângulo visual de 2,6 ° pelo aparecimento e expande-se linearmente em 224 ° /s mais de 200 ms para 47,4 °, no qual permanece por 250 ms antes de deslocamento.</li>
		<li>Quando entregar o estímulo visual, centralizá-la acima do mouse. Isto pode ser conseguido esperando até que o mouse passa por uma região previamente definida na arena, ou rastreamento da posição do mouse on-line e usando as coordenadas de localização para definir o centro do círculo. Nota: Embora sugerimos projetando o estímulo visual diretamente acima do rato, comportamentos defensivos podem também ser provocados se projeta-se o mesmo estímulo à frente o mouse (enquanto ainda paralela ao chão). Em nossa experiência, este é o caso, pelo menos até 30 cm à frente da posição do mouse.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Estímulo auditivo<ol>
<li>Desencadear um estímulo que consiste de um comboio de três frequência modulada acima-varreduras de 17 a 20 kHz23 mais de 3 s, durando 9 s no total. O nível de pressão sonora (SPL), medido no nível da plataforma, deve ser em um intervalo entre 73 e 78 dB.</li>
		<li>Ligar uma placa de som e um amplificador ao altifalante ultra-som posicionado acima da arena para entregar o estímulo auditivo.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. animais:
<ol><li>Use Camundongos C57BL/6J masculinos ou femininos, entre 6 e 24 semanas de idade. Manter que os animais em uma luz h 12 ciclo com livre acesso a comida e água.</li>
	<li>Certifique-se de que os ratos são único abrigado pelo menos 72 h antes do ensaio comportamental e teste-os durante a fase de luz da luz do ciclo. Nota: Nós achamos que o comportamento exploratório de base dos ratos alojados em single é mais comparável em animais do que em ratos alojados em grupo. Além disso, animais com implantes cirúrgicos para gravação de atividade neural ou manipulação frequentemente precisam ser único abrigado, e, portanto, pode ser benéfico ter conjuntos de dados do controle nas mesmas condições de habitação.</li>
</ol>4. padrão ensaio comportamental:
<ol><li>Meticulosamente, limpe a superfície da plataforma com 70% de etanol ou ácido acético para remover indesejadas sugestões olfactory. Lave o abrigo com água e lave-o com etanol a 70%, após o qual ele deve ser lavado com água novamente para diminuir o odor de etanol.</li>
	<li>Seque bem tanto a plataforma e o abrigo, como o mouse pode evitar entrar no abrigo se está molhado.</li>
	<li>Randomize a localização do abrigo na plataforma para cada julgamento, rodando a plataforma antes do experimento. O local de abrigo será ancorado na arena, mas será rotacionado em relação ao compartimento do aparato comportamental.</li>
	<li>Trazer o rato para a sala de experiências em sua casa-gaiola e coloque a gaiola em cima da plataforma do teste por um período de aclimatação de 10 min.</li>
	<li>Remover o rato de sua casa-gaiola e evitar recuperando pela cauda: Copa-lo ou deixá-lo subir um item de enriquecimento que pode ser levantado. Pegar ratos pela cauda foi mostrar para aumentar os níveis de ansiedade e assim pode afetar as respostas comportamentais para ameaça24.</li>
	<li>Delicadamente, coloque o mouse no centro da arena e começar a aquisição de vídeo.</li>
	<li>Permita, por um período de habituação de 7 min, durante o qual nenhum estímulo contrário é apresentado. Certifique-se de que o mouse tem tempo suficiente para encontrar e entrar no abrigo pelo menos uma vez. Considerá-la como uma entrada se todos os quatro membros estão dentro do abrigo. 7 min deve ser suficiente para a maioria dos ratos encontrar e entrar no abrigo, mas caso isso não aconteça, prorrogar o período de habituação por períodos adicionais de 5 min até que tenha verificada pelo menos uma entrada.</li>
	<li>Acionar a entrega do estímulo contrário (auditivo ou visual) ou manualmente, observando o feed de vídeo ao vivo, ou automaticamente pelo rastreamento da posição do animal on-line e pré-definir uma região de interesse na arena para desencadear o estímulo-entrega uma vez que o animal chega-lo. O estímulo visual é normalmente entregue diretamente acima do animal usando o vídeo on-line rastreamento coordenadas.</li>
	<li>Para obter mais do que uma reação de fuga na mesma sessão, deixe o mouse abandonar voluntariamente o abrigo. Se o mouse não escapou com êxito para o abrigo após o último estímulo contrário, espere pelo menos 60 s antes de apresentar outro estímulo.</li>
	<li>Depois que terminar o ensaio, devolver o animal para sua casa-gaiola. No caso, são necessários mais ensaios do mouse mesmo, espere pelo menos 48 h antes de refazer o teste.</li>
	<li>Limpe a plataforma e o abrigo, conforme descrito na etapa 4.1 e 4.2 antes de testar o próximo animal.</li>
</ol>Nota: As etapas 5, 6 e 7 são variações independentes do ensaio padrão comportamental e cada um pode ser realizado individualmente.
5. «estratégia de navegação» ensaio comportamental:
Nota: O objetivo deste teste é determinar que cues mouses usam para orientar o comportamento de fuga. Neste ensaio, a parte externa móvel da plataforma é girada, enquanto o mouse está no centro da arena fixa, que desloca radialmente o abrigo, as sugestões olfactory, localizadas no interior do abrigo e indicações visuais proximais anexadas à plataforma. Se o mouse está seguindo qualquer uma das dicas que têm sido giradas para navegar para o abrigo, ele escapará corretamente para o novo local do abrigo, mas se ele usa quaisquer outras sugestões que permaneceram no lugar, navegará até o local de abrigo anterior.
<ol><li>Execute as etapas 4.1 a 4.8 do padrão ensaio comportamental descrito acima, provocando pelo menos uma resposta de voo para ser usado como linha de base.</li>
	<li>Deixe o mouse ativamente sair do abrigo e esperar por ele para navegar até a parte central da plataforma. Coloque um pequeno prato com fundamento no centro para incentivar a exploração e manter o animal na plataforma central suficientemente longo para permitir a rotação da parte externa da plataforma. Adicione o prato e roupa de cama enquanto o mouse está dentro do abrigo e após a fuga bem sucedida, que precede a rotação da plataforma. Se o rato não entrar o abrigo durante a resposta de fuga, espere por ele para entrar voluntariamente o abrigo e em seguida, adicione o prato e roupa de cama.</li>
	<li>Use o motor de passo para girar a plataforma pelo menos 36 graus (2 furos) e imediatamente use um estímulo sensorial para eliciar uma resposta de fuga. É possível que a rotação aciona um alarme e nem inicia uma resposta de fuga. Nota: A partir de nossa experiência, ~ 55% dos ratos será executado fora da plataforma central (sem rotação) enquanto a parte externa ainda está a rodar, e estes ensaios devem ser excluídos da análise.</li>
	<li>Limpe a plataforma e abrigo e retornar o mouse para sua casa-gaiola, conforme descrito na etapa 4.10 e 4.11.</li>
</ol>6. «ambiente dinâmico' ensaio comportamental:
Nota: Este ensaio destina-se para avaliar como os ratos se adaptar seus comportamentos defensivos para mudanças súbitas no ambiente. Nesses experimentos, após obter resposta de pelo menos uma fuga, o local do abrigo é alterado e o mouse está autorizado a visitá-lo uma vez antes de uma fuga subsequente resposta é disparada. Se o mouse perfeitamente atualiza a nova localização do abrigo e calcula a ausência de abrigo no seu local anterior, ela deve escapar para o novo local. Caso contrário, ou não memorizou o novo local do abrigo ou ele memorizou os dois locais, mas prefere fugir para o outro.
<ol><li>Execute este ensaio depois passos 4.1 a 4.8 descrito acima, provocando pelo menos uma resposta de voo como um controle.</li>
	<li>Uma vez que o mouse voluntariamente sai do abrigo, remover o abrigo e coloque-o novamente em um novo buraco no extremo oposto da plataforma.</li>
	<li>Permitir que o mouse para explorar o ambiente até que entra o abrigo na sua nova localização.</li>
	<li>Quando o mouse sai do abrigo, presente com um estímulo contrário voluntariamente e observar sua resposta.</li>
	<li>Use o estímulo auditivo para este experimento por causa de sua longa duração, como sob a ameaça prolongada, animais podem executar respostas adicionais fuga para outros locais se eles não conseguem encontrar o abrigo em primeiro lugar.</li>
	<li>Limpe a plataforma e abrigo e retornar o mouse para sua casa-gaiola, conforme descrito nas etapas 4.10 e 4.11.</li>
</ol>7. «sem abrigo» ensaio comportamental:
Nota: O objectivo deste teste é entender como a ausência de um abrigo no ambiente afeta a expressão de comportamentos defensivos.
<ol><li>Conecte todos os 20 buracos. Neste experimento, há nenhum abrigo disponível na arena.</li>
	<li>Após a limpeza e secagem da plataforma (etapas 4.1 e 4.2), realizar etapas 4.4-4.6.</li>
	<li>Permita um período de habituação de 7 min.</li>
	<li>Apresentar o estímulo visual e observar a resposta defensiva. A falta de um abrigo promove o comportamento congelar, dura geralmente para a duração do estímulo visual. Use um ponto lentamente em expansão (ex. um círculo que subtende um ângulo visual de 2,6 ° pelo aparecimento e expande-se linearmente em 11,2 ° /s sobre 4 s para 47,4 °, no qual permanece por 1 s antes de deslocamento) para facilitar a observação de congelação respostas.</li>
	<li>Se mais de uma resposta por rato for necessária, use um estímulo inter intervalo pelo menos 60 s.</li>
	<li>Depois de obter o número necessário de respostas na ausência do abrigo, introduzir o abrigo sob um dos furos e deixe o mouse explorar o ambiente pelo menos 5 min. 5 min será tempo suficiente para a maioria dos ratos localizar e inserir o abrigo recém-introduzidos , mas caso isso não aconteça, alargar este período adicional 5 min blocos até pelo menos uma entrada é verificada.</li>
	<li>Repita as etapas de 4.8 e 4.9 e observar as respostas de fuga realizadas na presença de um abrigo no ambiente.</li>
	<li>Limpe a plataforma e abrigo e retornar o mouse para sua casa-gaiola, conforme descrito nas etapas 4.10 e 4.11.</li>
</ol>8. os dados análise:
Nota: Cada uma das etapas de análise de dados a seguir pode ser executada independentemente.
<ol><li>Respostas de fuga podem ser facilmente identificadas como uma aceleração súbita após a apresentação de um estímulo contrário. Quantificar a latência de fuga como o tempo entre a apresentação do estímulo e o início de um movimento de rotação de cabeça direcionado para o alvo da fuga ou o início do movimento de aceleração, o que vier primeiro.</li>
	<li>Congelamento de respostas pode ser caracterizado por total imobilidade do animal exceto respirando movimentos25, duradoura, pelo menos 0,5 s7. Medi a latência para congelar como o tempo entre a apresentação do estímulo contrário e o início do período de imobilidade.</li>
	<li>Para cada resposta de fuga, quantificar a linearidade da trajectória de voo calculando a razão entre a distância entre o rato e o abrigo e o deslocamento real durante o voo.</li>
	<li>Para cada resposta de fuga, calcule a precisão, medindo a distância entre onde o animal dirigido seu voo para o buraco e o buraco, levando para o abrigo. Uma vez que existem 20 furos, cada buraco fora do alvo representa um decréscimo de 10% na exatidão (ex., 2 furos fora do alvo podem ser expressa como 80% de precisão)</li>
	<li>Para o ensaio comportamental 'estratégia de navegação', quantificar a exatidão da resposta em relação ao local de abrigo antes da rotação da plataforma. Uma precisão média que não é significativamente diferente da precisão da pre-rotação indica que o animal não esteja utilizando qualquer uma das indicações sensoriais que foram giradas para navegar para o destino de fuga.</li>
	<li>Para o ensaio de 'ambiente dinâmico' comportamental, classifica cada resposta de fuga suscitou como sendo dirigido para o novo ou o antigo local de abrigo, ou para nenhum deles. Avalie como o padrão evolui ao longo as iterações dos comportamentos defensivos eliciadas.</li>
	<li>Para o ensaio comportamental 'sem abrigo', comparar a velocidade do mouse, após a apresentação do estímulo visual contrário na presença e na ausência de um abrigo e calcular a latência para o início da resposta defensiva. Além disso, calcule a probabilidade de desencadear uma resposta de congelamento em resposta ao estímulo para cada situação.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Eaton, R. C., Bombardieri, R. A., Meyer, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mauthner-initiated+startle+response+in+teleost+fish.">The Mauthner-initiated startle response in teleost fish.</a> J Exp Biol. 66 (1), 65-81 (1977).</li><li>Vale, R., Evans, D. A., Branco, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Spatial+Learning+Controls+Instinctive+Defensive+Behavior+in+Mice.">Rapid Spatial Learning Controls Instinctive Defensive Behavior in Mice.</a> Curr Biol. 27 (9), 1342-1349 (2017).</li><li>Blanchard, R. J., Flannelly, K. J., Blanchard, D. 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W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DBA/2+and+C57BL/6+mice+differ+in+contextual+fear+but+not+auditory+fear+conditioning.">DBA/2 and C57BL/6 mice differ in contextual fear but not auditory fear conditioning.</a> Behavioral neuroscience. 108 (4), 810 (1994).</li><li>Paul, C. M., Magda, G., Abel, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+memory:+Theoretical+basis+and+comparative+review+on+experimental+methods+in+rodents.">Spatial memory: Theoretical basis and comparative review on experimental methods in rodents.</a> Behav Brain Res. 203 (2), 151-164 (2009).</li></ol>

A maioria dos dados incluídos na seção de resultados é um subconjunto dos dados apresentados no Vale et. al 2017.

Os ensaios que descrevemos aqui são tecnicamente simples de executar, e com excepção da plataforma experimentos de rotação, pode ser implementado facilmente em um labirinto de Barnes padrão. No entanto, algumas complicações podem surgir: por um lado, o rato pode parecer com medo de entrar no abrigo, que pode ser devido ao abrigo de não ser suficientemente limpos ou secas. Por outro lado, o mouse pode ficar dentro do abrigo por longos períodos de tempo. É crítico para estas experiências que os animais são nunca removidos do abrigo manualmente, como isso pode perturbar a integração do caminho, bem como a angústia dos animais e mudar sua resposta à ameaça. Sugerimos que encerra o experimento após 90 min e refazer o teste após 48 h se necessário. Uma outra consideração prática relevante é que quando o mouse investiga a borda da plataforma, não pode detectar estímulos visuais se sua cabeça é dobrada sobre a borda, e, portanto, é recomendável reter os estímulos em tais situações. Além disso, os ratos podem saltar fora da plataforma em raras ocasiões. Sugerimos que terminando o experimento e refazer o teste após 48 h. ratos que ativamente deixar a plataforma uma vez poderão fazê-lo novamente no futuro e podem ter que ser excluídos do estudo. Finalmente, de nossa experiência, a maioria dos ratos responderá ao estímulo visual (34/36 ratos). No entanto, se os ratos não mostram qualquer tipo de resposta ao estímulo visual (um alarme, um voo ou uma resposta de congelamento), eles devem ser excluídos do estudo.
Um aspecto importante a considerar é que o controle de sinais sensoriais normalmente é um problema em ensaios de memória espacial, como muitas vezes é difícil de eliminar todas as possíveis fontes de contaminação pistas. Nossa configuração experimental reduz visuais externas, em torno do labirinto com uma parede, e é colocado dentro de um armário de amortecimento-som para isolamento acústico. Para minimizar as sugestões olfactory, recomendamos limpar cuidadosamente a afinação com 70% de etanol ou ácido acético entre experiências.
Nosso ensaio comportamental adiciona métodos anteriores para estudar navegação espacial26 usando comportamentos defensivos instintivos para sondar a memória espacial e com foco em cenários etológicos. Uma diferença fundamental entre os procedimentos descritos aqui e o teste padrão do BM é a falta de sessões de treinamento. Em nossos ensaios, o período de habituação garante que o mouse visita o abrigo pelo menos uma vez e, frequentemente, muitas vezes mais, que temos demonstrado anteriormente para ser suficientes para memorizar o abrigo local2. Acreditamos que uma razão importante para a elevada taxa de sucesso e precisão em encontrar o abrigo apesar da falta de treinamento nunca passivamente é deslocar o animal durante o experimento, tornando assim a integração do caminho uma estratégia viável de navegação. No entanto notamos que nosso ensaio lida com memória formada e avaliados durante uma única sessão, e que nós não testamos para memória de longo prazo da localização do abrigo, que geralmente é o objetivo do padrão BM experiências. Finalmente, usando estímulos intrinsecamente contrário discretos ao invés do fã comumente usado ou buzz para a duração da sessão, nosso ensaio fornece controle experimental muito bom em dois comportamentos que podem usar estratégias diferentes de navegação: forrageamento e fuga de abrigo-dirigido. Acreditamos que o uso destes ensaios em combinação com técnicas da moderna neurociência para gravação e manipulação de atividade neural pode fornecer insights importantes sobre circuitos neurais como calcular o comportamento.

Comportamentos defensivos instintivos são amplamente considerados hardwired-respostas aos estímulos, tais como o movimento de C-início em peixes e anfíbios, que move o animal longe de uma fonte de ameaça1. No entanto, comportamentos defensivos podem ser mais adaptáveis se flexìvel levam em conta as informações sobre o ambiente atual. Um exemplo de tal flexibilidade é o interruptor de fuga para congelamento mostrado por roedores quando confrontado com a ameaça, dependendo do conhecimento prévio sobre a presença ou ausência de um abrigo no ambiente2,3. Outros exemplos de flexibilidade em comportamentos inatas incluem adapta o limiar de início de voo ou escapar de velocidade dependendo da distância entre uma presa e seu abrigo4, distância anteriores e a ameaça de5,6, experiência 11 , 12, bem como selecionando diferentes estratégias defensivas, dependendo das propriedades sensoriais do estímulo aversive7, ou mesmo suprimir o comportamento defensivo face a concorrentes motivações como fome8, 9,10. A dependência de seleção de ação no conhecimento adquirido sobre as características espaciais do ambiente faz instintivos comportamentos defensivos em camundongos um poderoso modelo para o estudo objetivo seleção, memória espacial e navegação. Aqui, descrevemos a adaptação de uma tarefa comportamental comumente usada, a memória espacial de labirinto (BM) de Barnes do ensaio13, para determinar a influência do ambiente espacial na seleção de ação defensiva em ratos e suas estratégias de navegação quando fugindo em direção um abrigo.
O labirinto de Barnes padrão usado para estudar a memória espacial e aprendizagem em ratos consiste em uma plataforma de diâmetro circular ~ 90 cm com 20 furos igualmente espaçados, dos quais 19 estão fechadas, e um leva a um abrigo subterrâneo que ratos procuram a fim de evitar o campo aberto ambiente da plataforma. Estímulos aversive fracos (campainha, luz brilhante, ventilador) são frequentemente usados continuamente durante todo o ensaio para tornar o ambiente contrário e assim promover a entrada para o abrigo de14. No ensaio mais comumente usados15,16, o animal tem um julgamento de habituação onde pauta-se para o abrigo manualmente pelo experimentador imediatamente após ser posicionado na plataforma. Isto é seguido por um período de aquisição de 4 dias, onde cada dia que o mouse é permitido navegar livremente no labirinto por 3 min, após o qual novamente manualmente pauta-se para o abrigo se não alcançar, durante o período de exploração. A última fase do ensaio é uma sonda de julgamento sobre o 5º dia (embora uma memória a longo prazo de sete dias julgamento é também comumente realizada) quando o animal explora o labirinto com todos os buracos fechados. Aprendizagem e a longo prazo de memória são quantificados pelo tempo gasto para encontrar o abrigo e pokes nos buracos errados durante o período de aquisição e quando passei perto do furo de abrigo fechado no julgamento de sonda. Resultados típicos mostram uma diminuição do número de erros e latência para alcançar o abrigo durante a aquisição e uma proporção acima-oportunidade de tempo gasto no quadrante contendo o buraco fechado alvo da sonda experimental15.
Enquanto diversas variantes do ensaio BM têm sido descritas anteriormente17,18,19, o paradigma que descrevemos aqui tem três mudanças fundamentais de ensaio padrão. Primeiro, o animal é deixado para explorar o labirinto e encontrar o abrigo por conta própria, e teste é feito na mesma sessão, logo após o abrigo foi encontrado, durante os períodos onde o animal está envolvido em comportamento exploratório. Embora essa configuração não testar a memória de longo prazo, do local de abrigo, ele é projetado para ser um cenário naturalista que imita a exploração do novo território, sob a ameaça de predação. Além disso, permite testes de como animais se adaptar às mudanças agudas no ambiente, tais como mudanças bruscas na paisagem. Em segundo lugar, um aspecto fundamental do nosso ensaio é que o experimentador nunca força o animal dentro ou fora do abrigo, que pode desorientar o animal e excluir caminho integração20 como uma estratégia de navegação viável21. Integração do caminho é uma estratégia de navegação que utiliza sinais de auto-movimento, como pistas proprioceptivas e vestibulares, decorrentes da integração da saída do motor, para atualizar a posição atual do animal e navegar para um objetivo, que não é possível se o animal é deslocado passivamente pelo experimentador. Em terceiro lugar, usamos intrinsecamente contrário visual22 e estímulos auditivos23 para eliciar a fuga para o abrigo, que é facilmente distinguido do comportamento de forrageamento em curso e permite a avaliação e quantificação das estratégias específicas de navegação usado durante a defesa de ameaças iminentes. Propomos que este ensaio será útil para dissecar o papel da memória espacial na seleção e implementação de comportamentos defensivos, e mais geralmente para o mais amplo estudo de navegação objetivo-dirigido e a curto prazo memória espacial. Os protocolos descritos aqui foram introduzidos por Vale et al. em 2017, a que nos referimos aos leitores para mais na discussão de profundidade sobre a justificativa para as experiências e resultados.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="775">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">Infrared iluminators TV6700</td>
			<td style="width:175px;">Abus</td>
			<td style="width:149px;">-</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">DLP projector Infocus IN3126</td>
			<td>Infocus</td>
			<td>0001740992-00000001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">Ultrasound speaker Pettersson L60</td>
			<td style="width:175px;">Pettersson Elektronik</td>
			<td style="width:149px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">Amplifier QTX PRO240</td>
			<td style="width:175px;">QTX</td>
			<td style="width:149px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">Soundcard Xonar D2</td>
			<td style="width:175px;">Asus</td>
			<td>90-YAA021-1UAN00Z</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">HP Z840 desktop</td>
			<td style="width:175px;">HP</td>
			<td style="width:149px;">F5G73AV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100 micron drafting film</td>
			<td style="width:175px;">Xerox</td>
			<td style="width:149px;">3R98145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:285px;">Near infrared camera: Basler acA1300-60gmNIR</td>
			<td style="width:175px;">Basler</td>
			<td>106202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">National Instruments BNC-2110&#160;</td>
			<td style="width:175px;">National instruments</td>
			<td>777643-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:285px;">LabVIEW 2015 64-bit</td>
			<td style="width:175px;">National instruments</td>
			<td style="width:149px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:285px;">Custom made Barnes maze</td>
			<td style="width:175px;">MRC Laboratory of Molecular Biology mechanical workshop</td>
			<td style="width:149px;">-</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a behavioral assay for investigating the role of spatial memory during instinctive defense in mice

Evolução selecionou um repertório de comportamentos defensivos que são essenciais para a sobrevivência em todas as espécies animais. Esses comportamentos são muitas vezes ações estereotipadas que suscitou em resposta a estímulos sensoriais intrinsecamente contrário, mas seu sucesso requer flexibilidade suficiente para adaptar a diferentes ambientes espaciais, que podem mudar rapidamente. Aqui, descrevemos um ensaio comportamental para avaliar a influência do conhecimento espacial em comportamentos defensivos em camundongos. Adaptámos o ensaio de memória espacial de labirinto Barnes amplamente usado para investigar como os ratos navegam para um abrigo durante respostas de fuga aos estímulos sensoriais intrinsecamente contrário em um ambiente de romance, e como eles se adaptam às mudanças agudas no ambiente. Este novo ensaio é uma paradigma Etológica que não requer treinamento e explora os padrões de exploração natural e estratégias de navegação em camundongos. Propomos que o conjunto de protocolos descritos aqui são um meio poderoso de estudo dos comportamentos objetivo direcionado e acionadas por estímulo de navegação, que deve ser de interesse para ambos os campos de comportamentos instintivos e memória espacial.

Os ratos expostos a estímulos auditivos ou visuais iniciaram respostas de fuga rápida com latências curtas entre o início da estimulação e o início do voo. A latência média de escapar o estímulo visual foi 202 ± 16 ms (n = 51 respostas de 26 animais) e significativamente mais para estimulação auditiva: 510 ± 61 ms (n = 36 respostas de 15 animais, p< 0,0001 teste t entre visual e auditivo estimulação; Figura 2A) (passo 8.1). Respostas de fuga foram direcionadas com precisão para o abrigo (quer dizer precisão para estímulo visual: 97,2 ± 1,4% e 95,0 ± 1,4% para estímulo auditivo, não significativamente diferente entre os dois tipos de estímulos, p = 0.1655 t-teste; Figura 2B) (etapa 8,4), e as trajetórias de voo estavam perto de uma linha reta (proporção média de deslocamento com distância-abrigo para estímulo visual 107,3 ± 1,3% e 113.9 ± 1,5% para estímulo auditivo; A Figura 2) (passo 8.3). Observando uma curta latência do estímulo é importante distinguir evocada por estímulo do comportamento de homing executa, e a alta linearidade da trajetória do voo demonstra que a resposta de fuga tem o objetivo de alcançar o abrigo e não simplesmente se afastando desde o estímulo.
Apresentação de estímulo após a rotação da parte externa do labirinto enquanto o rato estava parado na plataforma central (intervalo = média de 36° - 90°, 56°) com êxito suscitou respostas de fuga (passo 5). Todos os ratos fugiram para o local anterior do abrigo, sem diminuição na precisão ou linearidade da trajetória de voo em comparação com os ensaios antes de rotação. A precisão média, medida em referência a posição original do abrigo, foi 96,3 ± 1,3% antes da rotação (n = 25 respostas de 8 ratos) e até mesmo um pouco maior após a rotação (100 ± 0%, p = 0,009 teste t entre pré e pós a rotação). A linearidade média em relação a localização original do abrigo foi 109.4 ± 5,0% pre-rotação (25 respostas de 8 ratos) e 109,1 ± 2,1%, pós-rotação (n = 8 respostas dos 8 ratos), p = 0.957 t-teste entre pré e pós-rotação, Figura 3A e B). Estes resultados demonstram que proximal visuais não são utilizados para orientar o voo para o abrigo (passos 8.3-8.5).
Mudar a localização do abrigo, depois de suscitar uma resposta de fuga bem sucedida (etapa 6) resultou em ratos a visitar o novo local de abrigo logo após a mudança (tempo médio para visitar o novo abrigo = 33,1 s, gama = s 4-82). Nos processos sequenciais de estimulação sonora produziram um aumento gradual da probabilidade de escapar para o novo local (44,4% no primeiro julgamento), atingindo 100% em todos os animais pelo quinto julgamento (n = 9 animais, Figura 3). Estes experimentos sonda a dinâmica de atualização da memória de local de abrigo para se adaptar às mudanças no ambiente (etapa 8,6).
Após um período de aclimatação de 7 min para o labirinto com sem abrigo (passo 7), a apresentação de um estímulo de tempo visual s 5 produzido comportamento congelar, ao invés de fuga (congelamento probabilidade = 95,2%, média de tempo de congelamento = 7,9 ± 2,7 s, n = 7 animais). Introdução posterior de um abrigo na mesma sessão e a apresentação do estímulo visual tempo suscitou escapar respostas confiável, mostrando que os ratos com flexibilidade podem trocar estratégias defensivas, dependendo da presença de refúgio (Figura 3D) ( etapas 8.1 e 8.7).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56988/56988fig1.jpg"> Figura 1: esquemático da arena comportamental. Desenho dos componentes principais da arena comportamental, visto de cima (à direita) e do lado (à esquerda). Uma grande fração da plataforma pode ser girada, incluindo o abrigo e indicações visuais anexadas. Olheiras na vista top são os buracos que o abrigo pode ser anexado a, que são todos idênticos (um exemplo de local de abrigo é indicado). A arena inteira está contida em um gabinete de amortecimento de som. <a href="/files/ftp_upload/56988/56988fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56988/56988fig2.jpg"> Figura 2: respostas de fuga são rápidos e precisos comportamentos meta-direcionado. (A) a latência para o início da fuga desde o início da estimulação visual ou auditivo. (B) a precisão da navegação para o abrigo durante a fuga, medida tal que o valor é 100% se o rato corre diretamente para o abrigo e 10% menos para cada buraco longe do abrigo (EG., 80% se o buraco alcançado primeiro foi dois furos longe de uma correta). (C) deslocamento do mouse durante fuga plotada contra a distância linear entre a posição inicial do animal e o local de destino, mostrando que o voo está perto de linear. Caixa e bigodes mostram dados de percentil 10-90, e os restantes pontos de dados são mostrados como círculos. Os gráficos de cor vermelha são dados de estimulação auditiva (n = 36 respostas de 15 animais) e preto são de estimulação visual (n = 51 respostas de 26 animais). <a href="/files/ftp_upload/56988/56988fig2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56988/56988fig3.jpg"> Figura 3: ratos não usar pistas visuais proximais ou sugestões relacionados ao abrigo para orientar respostas de fuga. (A) enredo de deslocamento como na Figura 2, para as respostas pré e pós-rotação da plataforma. (B) a precisão da navegação durante fuga em condições pré e pós-rotação. Precisão pós-rotação é medida em referência a localização inicial do abrigo e mostra que os ratos navegar de volta para o local original do abrigo em vez da nova posição. (C) fração de respostas de fuga, direcionadas para o novo local de abrigo, plotado contra número de estimulação. Após a apresentação deth 5 do estímulo, todos os animais escapar diretamente para o novo local de abrigo (n = 9 animais). (D) significa velocidade do outro lado os animais em resposta a estímulos visuais, com um abrigo disponível (vermelho) ou ausente (azul), mostrando a fuga e congelamento respostas, respectivamente. Velocidade foi normalizada para a linha de base e alinhada ao tempo de reação (definido como também o início de um voo ou resposta de congelamento, linha tracejada). Áreas sombreadas mostram SEM. (n = 7 animais). Para 2A e 2B, a caixa e bigodes mostrar dados de percentil 10-90, e os restantes pontos de dados são mostrados como círculos. Os gráficos de cor vermelha são dados de estimulação auditiva antes de rotação da plataforma (n = 25 respostas de 8 animais) e azul são de respostas depois de girar a plataforma (n = 8 respostas de 8 animais). <a href="/files/ftp_upload/56988/56988fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

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A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

Um ensaio comportamental para investigar o papel da memória espacial durante uma defesa instintiva em ratos

Este protocolo descreve um ensaio comportamental, com base no teste de labirinto de Barnes, para estudar como instintiva defensiva ações são modificadas pelo conhecimento do ambiente espacial.

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

a-behavioral-assay-for-investigating-role-spatial-memory-during

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

9.4K visualizações.  UCL Sainsbury Wellcome Centre for Neural Circuits and Behaviour. Este protocolo descreve um ensaio comportamental, com base no teste de labirinto de Barnes, para estudar como instintiva defensiva ações são modificadas pelo conhecimento do ambiente espacial.

Vídeo: A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate drug-seeking behavior and prompt relapse in abstinent drug users. We have developed a procedure to study the behavioral and neural processes that mediate the impact of context on alcohol-seeking behavior in rats. Following acclimation to the taste and pharmacological effects of 15% ethanol in the home cage, male Long-Evans rats receive Pavlovian discrimination training (PDT) in conditioning chambers. In each daily (Mon-Fri) PDT session, 16 trials each of two different 10 sec auditory conditioned stimuli occur. During one stimulus, the CS+, 0.2 ml of 15% ethanol is delivered into a fluid port for oral consumption. The second stimulus, the CS-, is not paired with ethanol. Across sessions, entries into the fluid port during the CS+ increase, whereas entries during the CS- stabilize at a lower level, indicating that a predictive association between the CS+ and ethanol is acquired. During PDT each chamber is equipped with a specific configuration of visual, olfactory and tactile contextual stimuli. Following PDT, extinction training is conducted in the same chamber that is now equipped with a different configuration of contextual stimuli. The CS+ and CS- are presented as before, but ethanol is withheld, which causes a gradual decline in port entries during the CS+. At test, rats are placed back into the PDT context and presented with the CS+ and CS- as before, but without ethanol. This manipulation triggers a robust and selective increase in the number of port entries made during the alcohol predictive CS+, with no change in responding during the CS-. This effect, referred to as context-induced renewal, illustrates the powerful capacity of contexts associated with alcohol consumption to stimulate alcohol-seeking behavior in response to Pavlovian alcohol cues.

A procedure to study the capacity of an alcohol associated environmental context to trigger the renewal of alcohol-seeking behavior in rats is described.

Um procedimento para Observar Renovação induzida por Contexto de pavloviano condicionado Comportamento Álcool-seeking em Ratos

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Comportamento

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

O Double-H labirinto: um teste comportamental robusto para Aprendizado e Memória em roedores

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris Water Maze Teste: Otimização para Mouse e Strain Testing Ambiente

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article describes a rodent version of the PVT&#8212;termed the &#34;rPVT&#34;&#8212;that measures similar aspects of attention (i.e., performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention). Data are presented that demonstrate both the short- and long-term usefulness of the rPVT when employed with laboratory rats. Rats easily learn the rPVT, and learning to perform the basic procedure takes less than two weeks of training. Once acquired, rat performances in the rPVT show a high degree of similarity to these same performance measures in the human PVT, including similarities in, lapses in attention, reaction times, vigilance decrements across session time (i.e., the human &#34;time-on-task&#34; effects), and the response-stimulus interval (RSI) effect described for humans. Thus the rPVT can be an extremely valuable tool for assessing the effects of a wide range of variables on sustained attention quite similar to human PVT performances, and thus can be useful for developing novel treatments for neurobehavioral dysfunctions.

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

A rat version of the human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is described that measures aspects of attention similar to those measured with the human PVT, including aspects of human vigilance such as performance accuracy, motor speed, premature responding, and lapses in attention.

O psicomotora Teste Rodent Vigilância (rPVT): um método para avaliar Neurobehavioral Desempenho em ratos e camundongos

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Assessing Working Memory in Children: The Comprehensive Assessment Battery for Children &#8211; Working Memory (CABC-WM)

The Comprehensive Assessment Battery for Children - Working Memory (CABC-WM) is a computer-based battery designed to assess different components of working memory in young school-age children. Working memory deficits have been identified in children with language-based learning disabilities, including dyslexia1,2 and language impairment3,4, but it is not clear whether these children exhibit deficits in subcomponents of working memory, such as visuospatial or phonological working memory. The CABC-WM is administered on a desktop computer with a touchscreen interface and was specifically developed to be engaging and motivating for children. Although the long-term goal of the CABC-WM is to provide individualized working memory profiles in children, the present study focuses on the initial success and utility of the CABC-WM for measuring central executive, visuospatial, phonological loop, and binding constructs in children with typical development. Immediate next steps are to administer the CABC-WM to children with specific language impairment, dyslexia, and comorbid specific language impairment and dyslexia.

Working memory predicts a significant amount of variance for a variety of cognitive tasks, including speaking, reading, and writing. However, few tools are available to assess working memory in children. We present an innovative, computer-based battery that comprehensively assesses different components of working memory in school-age children.

Avaliando memória de trabalho em crianças: a bateria de avaliação abrangente para crianças - Memória de trabalho (CABC-WM)

The Comprehensive Assessment Battery for Children - Working Memory (CABC-WM) is a computer-based battery designed to assess different components of ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is fairly simple and can be completed over 3 days: habituation day, training day, and testing day. During training, the mouse is allowed to explore 2 identical objects. On test day, one of the training objects is replaced with a novel object. Because mice have an innate preference for novelty, if the mouse recognizes the familiar object, it will spend most of its time at the novel object. Due to this innate preference, there is no need for positive or negative reinforcement or long training schedules. Additionally, the ORT can also be modified for numerous applications. The retention interval can be shortened to examine short-term memory, or lengthened to probe long-term memory. Pharmacological intervention can be used at various times prior to training, after training, or prior to recall to investigate different phases of learning (i.e., acquisition, early or late consolidation, or recall). Overall, the ORT is a relatively low-stress, efficient test for memory in mice, and is appropriate for the detection of neuropsychological changes following pharmacological, biological, or genetic manipulations.

The object recognition test (ORT) is a simple and efficient assay for evaluating learning and memory in mice. The methodology is described below.

Teste de reconhecimento de objeto romance para a investigação da aprendizagem e memória em ratos

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

The (Spatial) Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

The memory game paradigm is a behavioral procedure to explore the relationship between language, spatial memory, and object knowledge. Using two different versions of the paradigm, spatial language use and memory for object location are tested under different, experimentally manipulated conditions. This allows us to tease apart proposed models explaining the influence of object knowledge on spatial language (e.g., spatial demonstratives), and spatial memory, as well as understanding the parameters that affect demonstrative choice and spatial memory more broadly. Key to the development of the method was the need to collect data on language use (e.g., spatial demonstratives: &#34;this/that&#34;) and spatial memory data under strictly controlled conditions, while retaining a degree of ecological validity. The language version (section 3.1) of the memory game tests how conditions affect language use. Participants refer verbally to objects placed at different locations (e.g., using spatial demonstratives: &#34;this/that red circle&#34;). Different parameters can be experimentally manipulated: the distance from the participant, the position of a conspecific, and for example whether the participant owns, knows, or sees the object while referring to it. The same parameters can be manipulated in the memory version of the memory game (section 3.2). This version tests the effects of the different conditions on object-location memory. Following object placement, participants get 10 seconds to memorize the object&#39;s location. After the object and location cues are removed, participants verbally direct the experimenter to move a stick to indicate where the object was. The difference between the memorized and the actual location shows the direction and strength of the memory error, allowing comparisons between the influences of the respective parameters.

The Spatial Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

We present a protocol to explore the relationship between spatial language production, spatial memory, and object knowledge. The procedure allows experimental manipulation of, and control over, conditions of object knowledge, language at instruction, and physical location, thus teasing apart cognitive and linguistic models describing interactions between these variables.

O jogo de memória (espacial): Testar a relação entre linguagem espacial, objeto de conhecimento e cognição espacial

The memory game paradigm is a behavioral procedure to explore the relationship between language, spatial memory, and object knowledge. Using two different ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by many patients prompts the need to develop new therapeutic alternatives and to better understand the etiology of the disorder. Pre-clinical models with translational merits are rudimentary for this task. Here we present a protocol for the unpredictable chronic mild stress (UCMS) method in mice. In this protocol, adolescent mice are chronically exposed to interchanging unpredictable mild stressors. Resembling the pathogenesis of depression in humans, stress exposure during the sensitive period of mice adolescence instigates a depressive-like phenotype evident in adulthood. UCMS can be used for screenings of antidepressants on the variety of depressive-like behaviors and neuromolecular indices. Among the more prominent tests to assess depressive-like behavior in rodents is the sucrose preference test (SPT), which reflects anhedonia (core symptom of depression). The SPT will also be presented in this protocol. The ability of UCMS to induce anhedonia, instigate long-term behavioral deficits and enable reversal of these deficits via chronic (but not acute) treatment with antidepressants strengthens the protocol&#39;s validity compared to other animal protocols for inducing depressive-like behaviors.

Here we present the unpredictable chronic mild stress protocol in mice. This protocol induces a long-term depressive-like phenotype and enables to assess the efficacy of putative antidepressants in reversing the behavioral and neuromolecular depressive-like deficits.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents synthetic and/or natural materials (such as twine, tissue, cotton, paper, and hay) as a gauge of their overall well-being and as an ancillary assessment to predict the possible decline in cognition. Typically, changes in nesting behaviors, such as failure to create a nest, indicate a change in health or welfare. In addition, nesting behavior is sensitive to many environmental and physiological challenges, as well as many genetic mutations underlying pathological disease states. The following protocol describes a nesting behavior paradigm that explores the usage of four types of nesting material. In addition, the protocol utilizes intraclass correlations to demonstrate that inter-rater reliability is higher when nests are constructed out of shredded paper compared to other common nesting materials such as cotton squares, paper twists, and soft cob bedding. The chosen methodology and statistical considerations (i.e., intraclass correlation) for this assay may be of interest for those conducting experiments assessing the quality of living of mice.&#160;

Here, we present a protocol to quantify nest building behavior in mice, which is known to be impaired in several neurological disorders and diseases. This protocol examines the utility of four materials and offers the opportunity to quantify the rater agreement in scoring, improving the validity and reliability of the assay.

Comportamento do edifício ninho como um indicador precoce de déficits comportamentais em camundongos

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents ...

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal model of epilepsy, we generated pilocarpine-treated chronic epileptic mice. We present a protocol for three different behavioral tests using these epileptic mice: novel object location (NL), novel object recognition (NO), and pattern separation (PS) tests to evaluate learning and memory for places, objects, and contexts, respectively. We explain how to set the behavioral apparatus and provide experimental procedures for the NL, NO, and PS tests following an open field test that measures the animals&#8217; basal locomotor activities. We also describe the technical advantages of the NL, NO, and PS tests with respect to other behavioral tests for assessing memory function in epileptic mice. Finally, we discuss possible causes and solutions for epileptic mice failing to make 30 s of good contact with the objects during the familiarization sessions, which is a critical step for successful memory tests. Thus, this protocol provides detailed information about how to assess epilepsy-associated memory impairments using mice. The NL, NO, and PS tests are simple, efficient assays that are appropriate for the evaluation of different kinds of memory in epileptic mice.

This article presents experimental procedures for assessing memory impairments in pilocarpine-induced epileptic mice. This protocol can be used to study the pathophysiologic mechanisms of epilepsy-associated cognitive decline, which is one of the most common comorbidities in epilepsy.

Avaliação da função de memória em camundongos epilépticos induzidos por pilocarpina

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...