Este trabalho foi parcialmente financiado por números de concessão JSPS KAKENHI 24700349, 24659093, 25293239, JP18H02536 e 17 K 07086, números de concessão MEXT KAKENHI 25110737 e 23110525, AMED Grant número JP18ek0109311 e o SENSHIN Medical Research Foundation e o Japão Fundação de pesquisa da epilepsia.

Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de uso de Tokyo Metropolitan Instituto de ciência médica e cuidado Animal. Pós-natal, 8 - 16 semanas os ratos são recomendados. Toda a tensão pura é aceitável para o experimento. Camundongos C57Bl/6 são mais resistentes a PTZ, Considerando que BALB/c e Swiss ratos albinos são mais sensíveis a PTZ. C57Bl/6 foram utilizados neste estudo. Vulnerabilidade de PTZ também depende da idade do rato. Em comparação aos mais jovens ratos, ratos mais velhos são mais refratários a PTZ35. O número de animais utilizados para este método pode variar, mas pelo menos 6 a 10 animais são necessários para cada condição.
1. preparação de PTZ
<ol><li>Dissolva 2 mg/mL PTZ em estéril 0,9% NaCl (p/v). Prepare PTZ no dia do uso.</li>
</ol>2. injeção de PTZ
<ol><li>Execute todas as experiências entre 09:00 e 12:00 (meio dia).</li>
	<li>Medir o peso do corpo do animal.</li>
	<li>Coloque o animal em uma câmara de observação para habituação.</li>
	<li>Durante o período de habituação (3 min), calcule o volume de solução PTZ para a injeção com base no peso do corpo do animal e a dose de injeção previamente determinada. Nota: por exemplo, quando é usada a 35mg/kg PTZ, 0,875 mg de PTZ é necessário para um rato pesando 25g (35 mg / kg x 0,025 kg = 0.875 mg). Portanto, deve ser injetada 437.5 μL de uma solução PTZ de 2 mg/mL (0.875 mg/2 mg / mL = 0,4375 mL). A dose de injeção de PTZ depende do genótipo do rato e tensão. Para camundongos C57BL/6 de tipo selvagem, recomenda-se uma dose de 30-35 mg PTZ/kg de peso corporal para o primeiro julgamento. Sensibilidade-PTZ depende o rato estirpes utilizadas36,37. A dose de injeção varia de acordo com a finalidade do experimento.</li>
	<li>Injete PTZ intraperitonealmente com uma seringa de 1 mL, conectada a uma agulha de calibre 27 ao quadrante esquerdo ou direito do abdômen do animal. Evite a injectar na linha.<ol>
<li>Evite injeções repetidas na mesma posição.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Observar comportamentos animais por 30 min após a administração de PTZ (figura 1A) e classificar e marcar o comportamento anormal, como mostrado abaixo. Se possível, manter os animais em observação por 24 h, ou pelo menos uma injeção de pós adicionais 6-10 h, especialmente quando o escore de severidade de apreensão atinge 3 ou acima.<ol>
<li>Observe quaisquer apreensões suaves ou mudanças comportamentais nos animais para além do período de observação de 30 min. Esta prolongada observação período pode dirigir um efeito particularmente importante e completo de um subconvulsive dose de PTZ na geração de crônicas não provocadas convulsões em epilepsia.</li>
		<li>Além disso, medida a duração de apreensão de cada apreensão observada como alterações na duração da convulsão referem-se a gravidade do ataque. Além disso, a latência para a primeira convulsão após a injeção de PTZ é outra medida importante para coletar. A latência, duração e frequência de apreensão de monitoramento é fundamental para qualquer estudos moleculares após um ataque.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Injete PTZ cada outro dia (figura 1A). O número de injeções varia de acordo com o objetivo do experimento. Estes são exemplos representativos.<ol>
<li>Para gerar animais completamente acendeu, uma vez que um animal experimenta um ataque com uma pontuação de 5 (tónico-clónica), termine a injeção nas três administrações adicionais. Neste caso, aumente a dose de injeção se o escore de apreensão não aumenta para três administrações consecutivas. Cada animal pode receber um número diferente e dose de injecções de PTZ.</li>
		<li>Fixa o número e a dose de injeção de PTZ em todas as condições para avaliar a vulnerabilidade de PTZ, incluindo avaliações de antidrogas epilepsia e estudos do fenótipo de camundongos geneticamente modificados. Dar a todos os animais o mesmo número de injeções de PTZ; recomenda-se um total de 8 a 12 injeções. Se um animal morre, a pontuação de ataque deve ser classificada com 6.</li>
		<li>Determinar a dose de injeção necessária para manter uma convulsão de alta pontuação (4 ou 5) para 10 ou mais injeções estudar as alterações histopatológicas que ocorrem ataques epilépticos. Neste caso, o número total de injeção deve variar de 25 a 30. Diminua a dose da injeção, se a pontuação de ataque atinge 5. Se a pontuação de ataque diminui para 3 ou mais baixo, aumente a dose de injeção.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. apreensão Pontuação
<ol><li>Observar os comportamentos animais e gravar os resultados.<ol>
<li>Classificar e marcar os comportamentos epilépticos como segue38,39 (figura 1B): 0: comportamento normal, nenhuma anormalidade. 1: imobilização, deitado de barriga. 2: cabeça acenando, facial, membro anterior ou membro posterior mioclonia. 3: mioclonia contínua de todo o corpo, Mioclônicas empurrões, rabo preso rigidamente. 4: criação, tônico apreensão, caindo de lado. 5: tônico-clônica, caindo nas suas costas, selvagem, correndo e pulando. 6: morte.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Altere os critérios comportamentais com base na Racine Pontuação40, dependendo das condições experimentais.</li>
</ol>4. após um ataque análise
<ol><li>Análise de Immunohistopathological<ol>
<li>Fixação de perfusão<ol>
<li>Preparação<ol>
<li>Dissolva o paraformaldeído 4% (p/v) (PFA) em tampão de fosfato 0,1 M (pH 7,4). Aquece a solução a cerca de 70 ° C com a adição de uma gota de 1 M de NaOH (aproximadamente 1 µ l de 1 M NaOH para 50 mL de solução de PFA).</li>
				<li>Preparar o gelado 4% PFA e tampão fosfato salino (PBS).</li>
				<li>Configure uma bomba peristáltica, com um tubo e agulha. Execute cerca de 20 mL de água através do tubo para limpar resíduos. Em seguida, coloque a extremidade aberta do tubo em PBS gelado.</li>
			</ol>
</li>
			<li>Transcardial perfusão e preparação do cérebro fixa<ol>
<li>Anestesia profundamente o mouse com etanol a 50% isoflurane/50% em um pequeno pote.</li>
				<li>Mantenha o mouse na posição supina fixando as pontas de suas patas dianteiras e os membros traseiros.</li>
				<li>Corte da linha mediana ventral do abdômen e expor o diafragma.</li>
				<li>Corte o diafragma ao longo da margem costal. Em seguida, corte ambas as partes laterais das costelas e corpo. Beliscar o processo xifoide pela pinça de bloqueio e evert a caixa torácica. Manter a posição do processo xifoide, fixando-o com uma agulha ou Beliscá-lo com pinça. Expor o coração.</li>
				<li>Insira a agulha no ventrículo esquerdo e fazer um corte no átrio direito com uma tesoura. Estar ciente para não empurrar a agulha longe demais para o coração, como ele pode furar uma parede interior.</li>
				<li>Iniciar um fluxo constante de PBS gelado através da agulha para lavar o sangue (aproximadamente 15-20 mL/min).</li>
				<li>Quando o sangue foi limpo do corpo, mova o tubo para uma solução de paraformaldeído 4% (cerca de 60 mL) sem a adição de bolhas. Em seguida, pare a perfusão.</li>
				<li>Cortar o pescoço traseiro e espinha e retire a pele da cabeça e a parte dorsal do crânio com tesoura de dissecação.</li>
				<li>Corte o osso pré-maxilar entre as órbitas oculares e remover completamente a porção dorsal do crânio.</li>
				<li>Criar um fosso entre o cérebro e o osso jugal do lado posterior e cortar os nervos trigêmeo e quiasma óptico em baixo do cérebro. Retire o cérebro cuidadosamente e colocá-lo em um frasco contendo 4% PFA. Fixe o cérebro a 4 ° C, durante 12-16 h.</li>
			</ol>
</li>
		</ol>
</li>
		<li>Preparação de fatia do cérebro<ol>
<li>Transferi o cérebro fixo de 20% sacarose/PBS até o cérebro afunda-se na solução para permitir a cryoprotection.</li>
			<li>Corte o cérebro fixo baseado na fatia necessária orientação e uma parte necessária do cérebro.</li>
			<li>Defina o cryomicrotome. Coloque a lâmina na posição e manter a fase de micrótomo em uma temperatura abaixo dos-20 ° C.</li>
			<li>Coloque o cérebro pré-cortados no palco e revestir o cérebro com 20% de sacarose/PBS. A solução de sacarose/PBS gradualmente irá congelar, cobrindo o cérebro no palco, até que o cérebro está completamente incorporado no congelado 20% sacarose/PBS.</li>
			<li>Corte o cérebro (30 µm de espessura) deslizando a lâmina através do tecido. Transfira as fatias em PBS e mantê-los em 4 ° C.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Imuno-histoquímica fluorescente<ol>
<li>Lave as fatias necessárias em 0,1% Triton X-100/PBS (PBST) durante 10 minutos, 3 vezes a temperatura ambiente (RT).</li>
			<li>Bloquear as fatias incubando-os em PBST com 2% cabra soro ou 5% albumina de soro bovino (BSA) para 1-2 h em RT</li>
			<li>Incubar as fatias em uma solução de anticorpos com a concentração adequada de anticorpo primário em PBST com 2% cabra soro ou 5% BSA para pernoites de 1 a 7 a 4 ° C.</li>
			<li>Lave as fatias em PBST durante 10 minutos, 3 vezes a RT</li>
			<li>Incube as fatias em uma solução de anticorpo secundário com a concentração adequada de anticorpo secundário em PBST por 1-2 h em RT, protegido de luz.</li>
			<li>Monte as fatias em lâminas de vidro e cubra com meio de montagem e cobertura de vidro.</li>
			<li>Observe as fatias com microscopia de fluorescência.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Teste da três-câmara<ol>
<li>Preparação<ol>
<li>Preparar pelo menos 2 2 - ratos de 129/Sv 6 meses de idade do mesmo sexo como os ratos de assunto para ser o "mouse estranho." Se habituar todos os ratos na gaiola antes da análise. Para cada sessão de treino, coloque o rato na gaiola e deixar o mouse por 15 min.</li>
			<li>Antes de cada fase de habituação com o mouse do assunto, limpe todo o aparelho e as duas gaiolas por limpar a superfície com etanol a 70%.</li>
			<li>Coloque as gaiolas vazias nos aposentos de aparato 3-câmara dois lado e abra as portas entre as câmaras.</li>
			<li>Para se habituar o mouse do assunto, colocar um rato do assunto na câmara de centro e permitir o mouse para mover-se livremente em todo o aparelho até que o mouse tem investigado as duas gaiolas, além de um adicional de 5 min. animais de assunto que podem ter medo da gaiola que não investigar a gaiola por 20 min e não deve ser usado para esta análise. Esses animais evitar a gaiola e raramente perto da gaiola.</li>
			<li>Depois que o animal move-se para a câmara de centro, feche as portas e deixe o mouse mover-se livremente na câmara centro por 5 min. Durante este período, colocar um dos 129/Sv ratos em uma gaiola para se habituar a gaiola.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Análise de sociabilidade<ol>
<li>Realizar esta análise imediatamente após o período de habituação do mouse assunto.</li>
			<li>Coloque a gaiola contendo um rato 129/Sv, denominado "gaiola de estranho 1", em uma das câmaras de lado e coloque a gaiola vazia, denominada "gaiola de objeto", na câmara do outro lado.</li>
			<li>Abra a porta e monitorar o comportamento do mouse assunto.</li>
			<li>Permitir que o mouse assunto mover-se livremente por 10 min e gravar os seguintes parâmetros comportamentais. Se o mouse do assunto tem medo do rato na gaiola 1 estranho, conforme indicado pelo mouse evitando a forasteiro 1 gaiola e permanecendo no canto de uma das câmaras, o animal não deve ser usado para a análise. a) o tempo gasto em cada câmara, a câmara 1 estranho, a câmara de objeto e câmara do centro. b) o tempo gasto investigando cada gaiola, a gaiola do estranho 1 e a gaiola de objeto. (O rato é classificado como a gaiola a investigar se o mouse está cheirando ou toughing o mouse ou gaiola) c) o número de entradas em cada câmara (opcional) d) total distância percorrida (opcional)</li>
			<li>Depois que o mouse se move para a câmara de centro, feche as portas.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Análise social novidade<ol>
<li>Realizar esta análise imediatamente após a análise da sociabilidade.</li>
			<li>Limpe as duas gaiolas com etanol a 70%.</li>
			<li>Coloque outro rato 129/Sv em uma das gaiolas, denominadas "Gaiola de estranho 2" e gaiola de lugar a 2 de estranho em uma das câmaras. Coloque o mouse estranho 1 na outra gaiola, denominada "gaiola estranho 1" e coloque a gaiola 1 estranho na outra câmara.</li>
			<li>Abra a porta e monitorar o comportamento do mouse assunto.</li>
			<li>Permitir que o mouse do assunto se mover livremente por 10 min e medir os mesmos parâmetros comportamentais descritos para a análise de sociabilidade. Nota: O mouse estranho 1 e 2 de estranho deve ser escolhido aleatoriamente. A câmara de estranho 1 e câmara de objeto, bem como o estranho 1 câmara e câmara estranho 2 devem ser determinados aleatoriamente.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Discriminação do medo contextual<ol>
<li>Condicionado<ol>
<li>Antes de cada tentativa de condicionamento, limpe o aparato experimental por limpar a superfície com etanol a 70%.</li>
			<li>Coloque um rato em um aparelho de condicionamento com condições específicas (forma de aparelho, cor da parede, material do piso, odor, iluminação e volume do ruído de fundo devem ser pre-determinadas). Por exemplo, o aparelho de condicionamento utilizado aqui foi um aparato quadrado com paredes claras do plexiglás, um piso de grade metálica, um odor de etanol, brilho de 100 lux e ruído de 65 dB de fundo branco.</li>
			<li>Condicionar o mouse pelo pé-choque com sincronismo pseudo-aleatório de choques elétricos de 0.1-mA por 2 s x 3 vezes ao longo de 5 min.</li>
			<li>Retorne o rato da gaiola para casa após condicionamento.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Avaliação de memória<ol>
<li>Antes de cada avaliação, limpe o aparato experimental por limpar a superfície com etanol a 70%.</li>
			<li>No dia seguinte seguir condicionado, posicione o mouse no interior do aparelho mesmo como condição de choque e medir o tempo de congelação ao longo de 5 min.</li>
			<li>Mais tarde no mesmo dia, coloque o mouse em um novo aparelho e medir o tempo de congelação durante uma avaliação de 5 min. Um aparelho triangular com paredes brancas do plexiglás, assoalho da placa, sem odor, brilho de 30 lux e ruído de 70 dB branco foi usado aqui.</li>
			<li>Compare o tempo de congelação entre a mesma condição e a condição de romance. Os ratos com uma capacidade de memória normal congelará mais nas mesmas condições do que na condição de romance. O congelamento é definida imobilidade do animal para mais de 2 s.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>

Os autores declaram não há conflitos de interesse.

Aqui, apresentamos um protocolo amplamente acessível para o estabelecimento de um modelo animal farmacológico de epilepsia. Mediada por PTZ inflamação química tem uma longa história e é um modelo comumente aceitado para o estudo da patologia celular e histopatologia de epilepsia41. O modelo de inflamação química da epilepsia tem sido avaliado anteriormente por Suzdak e Jansen, 199542. Indução de convulsão farmacológica, especialmente com PTZ, é um método fácil e simples para evocando convulsões graves. Alterações na dose injeção correlacionam com a severidade do ataque. Assim, é muito fácil identificar a dose adequada ao longo de vários ensaios alterar a dose PTZ e examinando o comportamento resultante.
Muitos pesquisadores têm tentado criar nocaute ou bater-em ratos como modelos de epilepsia e ter conseguido produzir ratos que apresentam convulsões espontâneas43,44. No entanto, indução farmacológica apreensão ainda é considerada um bom modelo para a epilepsia. Um outro método comum para indução de convulsão, além de modificação genética envolve implantar eletrodos no cérebro do animal e indução de convulsões mediada por eletrochoque. Este método é caro e difícil e exige habilidade cirúrgica para implante do eletrodo no locus preciso no cérebro5.
Química indução de convulsões permite a rápida investigação de epileptogenesis e droga anti-epiléptica triagem no baixo custo2,4. A frequência e gravidade das convulsões espontâneas e SE variam dependendo da droga utilizada. Pilocarpina e ácido Kainic são usados principalmente para provocar-SE e as convulsões espontâneas ou recorrente crônica subsequente45,46,47. Por outro lado, PTZ é usada tanto para promover SE quando administrado em uma dose alta e desenvolver quimicamente acendeu animais quando administrado em uma dose subconvulsive48,49. Além disso, os mecanismos de drogas convulsivas que induzem convulsões são bem conhecidos. Assim, bloquear o mecanismo necessário para induzir a apreensão pode ajudar a identificar a droga anti-epiléptica. Por outro lado, os modelos genéticos são obrigados a investigar os mecanismos que evocam epilépticas50. Depois que os mecanismos pelos quais são induzidas convulsões são elucidados, o rastreio da droga anti-epiléptica pode ser iniciado.
Nos resultados do representante mostrados aqui, comportamento animal foi observado por 30 min após a administração de PTZ. No entanto, como mencionado na seção de protocolo, comportamento animal é de preferência observado por 24h ou pelo menos de 6-10 h após a injeção de PTZ, especialmente quando o ataque marcar atinge 3 ou superior. Apesar de um animal, sistema de monitoramento pode ser necessário para observar o animal durante todo o dia, uma observação prolongada é fundamental para a obtenção de uma compreensão profunda da epilepsia. Além disso, a duração da convulsão e latência de apreensão são medidas úteis para recolher. Estas medidas são importantes quando relacionados alterações na latência e duração de apreensão com gravidade tempo e apreensão.
A histopatologia após um ataque de animais quimicamente acendeu foi investigada, especialmente no hipocampo. Convulsões repetitivas ou SE induzir fibra musgosa brotando de27,28, migração anormal do grânulo recém-nascido neurônios25,29, astrogliosis no hipocampo30e apoptose de neurônios piramidais 31 , 32. essas alterações histológicas no cérebro interrompem funções neurológicas em pacientes epilépticos. Por exemplo, a associação da epilepsia com transtornos do espectro do autismo (ASD) e deficiência intelectual (ID) é bem reconhecida51,52,53. Se ataques epilépticos induzem ASD e ID ou ASD e ID induzir sintomas epilépticos ainda é uma pergunta complicada. Estudos recentes têm mostrado que convulsões mediada por PTZ induzem deficiências social-cognitivo de ASD como54 e aprendizagem défices 55,56,57, como ID. Estes resultados indicam que a histopatologia mediada por epilepsia provoca a disfunção neuronal e transtornos psiquiátricos.
As alterações histológicas promovidas pela epilepsia demorar a desenvolver após a indução de convulsões. A este respeito, indução farmacológica apreensão é vantajosa porque os pesquisadores podem controlar o tempo, o número e a gravidade das convulsões em animais. Incluindo inflamação química, modelos animais de epileptogenesis vão continuar a promover a investigação de ambos o mecanismo de indução de epilepsia e distúrbios neurofisiológicos relacionados.

Epilepsia é uma doença neurológica crônica que se caracteriza por convulsões recorrentes e afeta aproximadamente 1% das pessoas. Os mecanismos subjacentes da geração epileptogenesis e apreensão em pacientes de epilepsia não podem ser totalmente esclarecidos em estudos clínicos. Portanto, um modelo animal adequado é necessário para o estudo da epilepsia1.
Uma variedade de modelos animais de epilepsia têm sido utilizados para investigar a fisiologia da epilepsia e para identificar a droga anti-epiléptica2,3. Entre estes modelos, indução farmacológica convulsão é um método comum usado para gerar um modelo animal para a investigação da patologia de epilepsia4. Este método é simples e barato. Inflamação mediada por eletrodo também é um método comumente usado, mas os custos deste procedimento são mais elevados, e o método requer habilidades cirúrgicas e elétricas para induzir convulsões repetitivas5.
Indução farmacológica também é vantajosa porque o calendário e o número de apreensões são facilmente controladas. Modelos de genética do rato que apresentam convulsões espontâneas também são usados no estudo da epilepsia. No entanto, prever quando e quantas vezes as convulsões surgem nesses modelos genéticos pode ser impossível6. Um sistema de monitoramento é necessário para observar o comportamento epiléptico de camundongos geneticamente modificados6.
Ácido Kainic, pilocarpina e mielinização (PTZ) são amplamente utilizados como indutora de apreensão de drogas7. O ácido Kainic é um agonista de receptores de glutamato, e pilocarpina ativa receptores colinérgicos. PTZ é um ácido gama aminobutírico (GABA)-um antagonista de receptor8. PTZ suprime a função de sinapses inibitórias, levando ao aumento da atividade neuronal. Este regulamento causa convulsões generalizadas em animais9. Uma única injeção de ácido kainic e Pilocarpina pode induzir convulsões agudas, especialmente estado de mal epiléptico (SE)10,11 e kainic ácido ou pilocarpina-mediada SE promove convulsões espontâneas e recorrentes crônicas12 , 13. gravações eletroencefalográficos (EEG) e análise do comportamento têm indicado que a espontâneas convulsões recorrentes são observadas um mês após uma única injeção de12,13. Uma única injeção de uma dose convulsiva de PTZ também induz convulsão aguda. No entanto, crônicas espontâneas convulsões após uma única injeção de PTZ são difíceis de promover. Administração crônica de PTZ é necessária para induzir convulsões repetitivas14. Em ambos os métodos, a geração de convulsões repetitivas é capaz de induzir a uma patologia mais semelhante da epilepsia humana do que a geração de crises agudas. No caso de PTZ, cada injeção evoca uma convulsão, e severidade de apreensão torna-se mais grave, de forma gradual, com cada injeção. Finalmente, uma única injeção de baixa dose PTZ induz uma severa convulsão tônico-clônica. Nesta fase, cada injeção evoca convulsões graves. Além disso, a duração e a latência de apreensão também mudam ao longo das injeções. A latência de convulsão tônico muitas vezes torna-se mais curta na última fase de acender15. Além disso, agravamento de convulsão é acompanhado por uma apreensão prolongada duração16. Investigar o mecanismo molecular que regula a gravidade do ataque, latência e duração é útil para triagem droga anti-epiléptica17,18,19.
As convulsões comumente são induzidas por uma única administração sistémica de PTZ, e a recuperação é muito rápida, dentro de 30 min4,5. Assim, o número de apreensões é mais controlável no modelo PTZ-gravetos. No entanto, monitorização de EEG indicou que picos generalizados podem ser vistos até 12 h após apreensão mediada por PTZ20. Portanto, animais de preferência devem permanecer em observação por 24 h após a convulsão tônico ou Mioclônicas21 para análise mais precisa dos mecanismos de inflamação.
A administração de fármacos antiepiléptico, como etossuximida, valproato, fenobarbital, vigabatrina e retigabine3, antes ou após a injeção de PTZ atenua o agravamento do ataque gravidade3,22, 23. Da mesma forma, ratos do KO que falta genes envolveram na exacerbação de apreensão, tais como matriz metaloproteinase-9,24, FGF-2225 e neuritin26, foram mostrados para expor a gravidade reduzida convulsão após múltiplas injecções de PTZ. Além disso, observar alterações histopatológicas após ataques epilépticos é possível com este método. Em pacientes com epilepsia do lobo temporal, existem alterações histológicas típicas no cérebro, tais como fibra musgosa brotando de27,28, grânulo anormal neurônio migração29, astrogliosis30celular neuronal morte no hipocampo31,32e esclerose hippocampal33. Alterações semelhantes são observadas em animais modelo epiléptica. Entre os métodos disponíveis, mediada por PTZ inflamação química é um método bom, Reproduzível e baixo custo para produzir um modelo animal de epilepsia. Em um modelo SE mediada por pilocarpina, controle de crises é difícil e muitos ratos morrem ou deixam de desenvolver-SE34. Em contraste, mortalidade e gravidade de apreensão são mais controláveis no modelo de PTZ. Além disso, PTZ é menos caro do que o ácido kainic, e habilidades na cirurgia de cérebro de rato não são necessárias para a administração de drogas.

<table><tbody><tr><td>Pentylenetetrazole</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6500</td><td></td></tr><tr><td>Sodium chloride</td><td>MANAC</td><td>7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>Mouse</td><td>CLEA Japan</td><td></td><td>C57Bl/6NJcl, postnatal 8 week, male</td></tr><tr><td>Syringe (1mL)</td><td>Terumo</td><td>SS-01T</td><td></td></tr><tr><td>Needle(27G x 3/4&quot;) (0.40 x 19 mm)</td><td>Terumo</td><td>NN-2719S</td><td></td></tr><tr><td>Weighing scale</td><td>Mettler</td><td>PE2000</td><td>This item is a discontinued product. Almost equivalent to FX-2000i with FXi-12-JA from A&amp;amp;D company.</td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148</td><td></td></tr><tr><td>Sodium hydroxide</td><td>nacalai tesque</td><td>31511-05</td><td></td></tr><tr><td>Peristatic pump</td><td>ATTO</td><td>SJ1211</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>nacalai tesque</td><td>30404-45</td><td></td></tr><tr><td>Microtome</td><td>Yamato</td><td>REM-700</td><td>This item is a discontinued product. Almost equivalent to REM-710</td></tr><tr><td>Microtome blade</td><td>Feather</td><td>S35</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X-100</td><td></td></tr><tr><td>anti-synaptoporin antibody</td><td>Synaptic systems</td><td>102 002</td><td></td></tr><tr><td>anti-ZnT3 antibody</td><td>Synaptic systems</td><td>197 002</td><td></td></tr><tr><td>anti-doublecortin</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-8066</td><td>This item is a discontinued product. We did not test equivalent product (sc-271390).</td></tr><tr><td>Contextual fear discrimination test apparatus</td><td>O&#039;hara</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Three chamber test apparatus</td><td>Muromachi</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

pentylenetetrazole-induced kindling mouse model

Mielinização (PTZ) é um antagonista dos receptores GABA-A. Uma injeção intraperitoneal de PTZ em um animal induz uma convulsão aguda, grave em uma dose alta, Considerando que injeções sequenciais de uma dose de subconvulsive têm sido utilizadas para o desenvolvimento da química kindling, um modelo de epilepsia. Uma única injeção de baixas doses de PTZ induz uma convulsão leve sem convulsão. No entanto, injeções de baixas doses repetitivas de PTZ diminuem o limiar para evocar um ataque convulsivo. Finalmente, administração contínua de baixa dose de PTZ induz uma severa convulsão tônico-clônica. Este método é simples e amplamente aplicável para investigar a fisiopatologia da epilepsia, que é definida como uma doença crônica que envolve ataques repetitivos. Este produto químico acender protocolo causa convulsões repetitivas em animais. Com este método, estimou-se a vulnerabilidade a ataques mediada por PTZ ou o grau de agravamento de crises epilépticas. Estas vantagens levaram à utilização desse método para triagem de droga anti-epiléptica e genes relacionados com epilepsia. Além disso, este método utilizou-se para investigar o dano neuronal após ataques epiléticos, porque as alterações histológicas observadas no cérebro de pacientes epilépticos também aparecem nos cérebros dos animais acendeu o produto químico. Assim, este protocolo é útil para produzir convenientemente modelos animais de epilepsia.

Injeção repetitiva de PTZ induz um aumento na severidade de apreensão. Seis camundongos C57BL/6 foram tratados com PTZ, e outro de 6 ratos foram tratados com soro fisiológico como um grupo de controle. A dose PTZ foi 35 mg/kg e 10 injeções foram administradas. A pontuação de ataque aumentado gradualmente com injeções de PTZ, Considerando que sem convulsões ou comportamentos anormais foram evocados por injeções de solução Salinas (Figura 2). ANOVA seguida pelo teste de Bonferroni mostrou diferença significativa entre o grupo de PTZ-tratados e o grupo tratados com solução salina.
Convulsão repetitiva promove formação aberrante ramo axonal (brotação de fibra musgosa) e migração anormal de células grânulo no hipocampo. Os ratos foram tratados com PTZ para 25 injeções (dose foi ajustado entre 24 mg/kg e 35 mg/kg, para manter a convulsão grave em camundongos sem induzir a morte causada por um ataque grave). O cérebro de rato foram fixado 3 semanas após a última injecção. Cérebros de controle foram corrigidos antes de injeções de PTZ. Fatias do cérebro foram immunostained com anti-synaptoporin (x 500) e anticorpos anti-ZnT3 (x 500) para observar o surgimento de fibra musgosa (Figura 3A) e com o anticorpo anti-doublecortin (x 200) para observar a migração anormal de células grânulo ( Figura 3A). Fibra musgosa brotando na camada de célula grânulo foi observada em fatias PTZ-tratada (Figura 3A). Células grânulo recem-nascido, que são imunorreativas para doublecortin, observaram-se dentro do hilo em fatias os PTZ-tratada (Figura 3A). A camada de células grânulo e Hilo, mostrado na Figura 3A é ilustrada na Figura 3B.
Convulsões repetitivas também afectar o comportamento normal de ratos. Doze camundongos C57BL/6 foram tratados com PTZ (35 mg/kg, 10 injeções), e outro 12 ratos foram tratados com soro fisiológico como um grupo de controle. Duas semanas após a última injecção, os ratos foram analisados em um teste de 3-câmara (Figura 4A) e o teste de discriminação de medo contextual (Figura 5A). Ratos tratados com PTZ mostraram sociabilidade normal (Figura 4B). Ratos passaram mais tempo na câmara 1 estranho que no objeto de câmara (salina: p = 0,003, PTZ: p = 0,027) e investigou a forasteiro 1 gaiola mais do que eles investigaram a gaiola de objeto (salina: p = 0,009, PTZ: p = 0,004). No entanto, ratos tratados com PTZ mostraram a novidade social anormal (Figura 4) indicativo de memória social prejudicada. Controle de ratos passava mais tempo na câmara 2 estranho no 1 estranho câmara e investigou a gaiola 2 estranho mais do que eles investigaram a gaiola 1 estranho, Considerando que os ratos acendeu não mostrou qualquer diferença significativa no tempo gasto nas câmaras ou tempo gasto investigando as gaiolas (tempo na câmara: salina: p = 0,006, PTZ: p = 0,126. Tempo a investigar: salina: p = 0,002, PTZ: p = 0,426). Ratos tratados com PTZ também mostraram memória prejudicada no teste de medo contextual (Figura 5B). Controlar os ratos mostraram um tempo de congelamento na condição de choque do que na condição de romance, Considerando que os ratos tratados com PTZ não mostrou qualquer diferença significativa no tempo de congelação (salina: p < 0,001, PTZ: p = 0,060). Realizaram-se testes t não pareados para análises estatísticas.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56573/56573fig1.jpg"> Figura 1: breve descrição do protocolo. (A) ilustração esquemática da inflamação mediada por PTZ. (B) ilustrações de comportamentos animais representativos para os escores de apreensão respectivos. <a href="/files/ftp_upload/56573/56573fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56573/56573fig2.jpg"> Figura 2: avaliação do comportamento convulsivo. O golo de apreensão média é indicados no gráfico. Seis ratos foram utilizados em cada Estado, e realizou-se uma série de injeções. Após cada injeção, as pontuações de apreensão foram monitoradas e marcou. Em comparação com injeções de solução Salinas, injeções de PTZ aumentaram significativamente gravidade de apreensão (p < 0,001: ANOVA de medidas repetidas). Cada Pontuação de convulsão é mostrada como a média ± SEM. <a href="/files/ftp_upload/56573/56573fig2large.jpg" target="_blank">clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56573/56573fig3.jpg"> Figura 3: fibra musgosa mediada por PTZ germinação e anormal a migração de células grânulo. (A) máximo projetou imagens de imuno-histoquímica do hilo, camada granulosa e camada molecular de fatias hippocampal dos ratos antes de acender (à esquerda) e depois acender (à direita). Anti-synaptoporin (topo) e anticorpos anti-ZnT3 (médio) foram usados para visualizar os axônios de neurônios do grânulo (fibras musgosas). O anticorpo anti-doublecortin foi usado para visualizar os neurônios recém-nascidos grânulo (parte inferior). Mediada por PTZ convulsões repetitivas induzem fibra musgosa brotando (setas) e migração anormal de células grânulo para o Hilo (setas). Barra de escala, 50 μm. A posição aproximada de cada imagem é indicada em (B). <a href="/files/ftp_upload/56573/56573fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56573/56573fig4.jpg"> Figura 4: comportamento social anormal mediada por PTZ. (A) ilustração esquemática do teste 3-câmara. (B) a quantidade média de tempo gasto em cada câmara e a quantidade média de tempo gasto investigando cada gaiola no teste de sociabilidade são mostrados. (C) a quantidade média de tempo gasto em cada câmara e a quantidade média de tempo gasto investigando cada gaiola no teste de novidade social são mostrados. Havia doze ratos em ambos os grupos PTZ e solução salina-tratados. Mediada por PTZ convulsões induzidas pelo comportamento social anormal (* * * p < 0,001, n.s. = não significativo). Todos os momentos são mostrados como a média ± SEM. <a href="/files/ftp_upload/56573/56573fig4large.jpg" target="_blank">clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56573/56573fig5.jpg"> Figura 5: deficiência de memória mediada por PTZ. (A) ilustração esquemática do teste de discriminação de medo contextual. (B) a percentagem média de tempo de congelação em cada condição são mostrados. Havia doze ratos em ambos os grupos PTZ e solução salina-tratados. O gráfico mostra a média ± SEM. <a href="/files/ftp_upload/56573/56573fig5large.jpg" target="_blank">clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>

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Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model

Este protocolo descreve um método de inflamação química com mielinização e fornece um modelo do rato da epilepsia. Este protocolo também pode ser usado para investigar a vulnerabilidade à indução de convulsões e patogênese após crises epilépticas em ratos.

Inflamação induzida pela mielinização Mouse modelo

Pentylenetetrazole (PTZ) is a GABA-A receptor antagonist. An intraperitoneal injection of PTZ into an animal induces an acute, severe seizure at a high ...

pentylenetetrazole-induced-kindling-mouse-model

Nanyang Technological University

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Pharmacotherapy of the Epilepsies

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32.6K visualizações.  Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science. Este protocolo descreve um método de inflamação química com mielinização e fornece um modelo do rato da epilepsia. Este protocolo também pode ser usado para investigar a vulnerabilidade à indução de convulsões e patogênese após crises epilépticas em ratos.

Vídeo: Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model

Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice

Studies of long-term potentiation of synaptic efficacy, an activity-dependent synaptic phenomenon having properties that make it attractive as a potential cellular mechanism underlying learning and information storage, have long been used to elucidate the physiology of various neuronal circuits in the hippocampus, amygdala, and other limbic and cortical structures. With this in mind, transgenic mouse models of neurological diseases represent useful platforms to conduct long-term&#160;potentiation (LTP) studies to develop a greater understanding of the role of genes in normal and abnormal synaptic communication in neuronal networks involved in learning, emotion and information processing. This article describes methodologies for reliably inducing LTP in the freely behaving mouse. These methodologies can be used in studies of transgenic and knockout freely&#160;behaving mouse models of neurodegenerative diseases.

Transgenic and knockout mouse models of neurological diseases are useful for studying the role of genes in normal and abnormal neurophysiology. This article describes methodologies which can be used to study long-term potentiation, a cellular mechanism which may underlie learning and memory, in transgenic and knockout freely&#160;behaving mouse models of neuropathology.

Potenciação de longo prazo da Via Perfurante-giro denteado Synapse em Livremente Comportando Ratos

Studies of long-term potentiation of synaptic efficacy, an activity-dependent synaptic phenomenon having properties that make it attractive as a potential ...

Comportamento

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little research to reveal the possible mechanisms behind these effects. To investigate the effect of acupuncture on epilepsy and sleep, several issues need to be addressed. The first is to identify the acupoints, which correspond between humans, rats, and mice. Furthermore, the depth of insertion of the acupuncture needle, the degree of needle twist in manual needle acupuncture, and the stimulation parameters for electroacupuncture (EA) need to be determined. To evaluate the effects of acupuncture on epilepsy and sleep, a feasible model of epilepsy in rodents is required. We administer pilocarpine into the left central nucleus of the amygdala (CeA) to simulate focal temporal lobe epilepsy (TLE) in rats. Intraperitoneal (IP) injection of pilocarpine induces generalized epilepsy and status epilepticus (SE) in rats. Five IP injections of pentylenetetrazol (PTZ) with a one-day interval between each injection successfully induces spontaneous generalized epilepsy in mice. Recordings of electrocorticograms (ECoGs), electromyograms (EMGs), brain temperature, and locomotor activity are used for sleep analysis in rats, while ECoGs, EMGs, and locomotor activity are employed for sleep analysis in mice. ECoG electrodes are implanted into the frontal, parietal, and contralateral occipital cortices, and a thermistor is implanted above the cerebral cortex by stereotactic surgery. EMG electrodes are implanted into the neck muscles, and an infrared detector determines locomotor activity. The criteria for categorizing vigilance stages, including wakefulness, rapid eye movement (REM) sleep, and non-REM (NREM) sleep are based on information from ECoGs, EMGs, brain temperature, and locomotor activity. Detailed classification criteria are stated in the text.

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms ECoGs and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

This paper demonstrates the performance of acupuncture, epilepsy models, and the analysis of sleep in rodents. The acupuncture procedure and the identification of acupoints are described. Pilocarpine or pentylenetetrazol (PTZ) is used to induce epilepsy. Electrocorticogram (ECoG), electromyogram (EMG), brain temperature, and locomotor activity recordings are employed for sleep analysis.

Manipulação de epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) e do sono em ratos e camundongos por Acupuntura

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...

Inducing Post-Traumatic Epilepsy in a Mouse Model of Repetitive Diffuse Traumatic Brain Injury

Traumatic brain injury (TBI) is a leading cause of acquired epilepsy. TBI can result in a focal or diffuse brain injury. Focal injury is a result of direct mechanical forces, sometimes penetrating through the cranium, creating a direct lesion in the brain tissue. These are visible during brain imaging as areas with contusion, laceration, and hemorrhage. Focal lesions induce neuronal death and glial scar formation and are present in 20%&minus;25% of all people who incur a TBI. However, in the majority of TBI cases, injury is caused by acceleration-deceleration forces and subsequent tissue shearing, resulting in nonfocal, diffuse damage. A subpopulation of TBI patients continues to develop post-traumatic epilepsy (PTE) after a latency period of months or years. Currently, it is impossible to predict which patients will develop PTE, and seizures in PTE patients are challenging to control, necessitating further research. Until recently, the field was limited to only two animal/rodent models with validated spontaneous post-traumatic seizures, both presenting with large focal lesions with massive tissue loss in the cortex and sometimes subcortical structures. In contrast to these approaches, it was determined that diffuse TBI induced using a modified weight drop model is sufficient to initiate development of spontaneous convulsive and non-convulsive seizures, even in the absence of focal lesions or tissue loss. Similar to human patients with acquired post-traumatic epilepsy, this model presents with a latency period after injury before seizure onset. In this protocol, the community will be provided with a new model of post-traumatic epilepsy, detailing how to induce diffuse non-lesional TBI followed by continuous long-term video-electroencephalographic animal monitoring over the course of several months. This protocol will detail animal handling, the weight drop procedure, the electrode placement for two acquisition systems, and the frequent challenges encountered during each of the steps of surgery, postoperative monitoring, and data acquisition.

This systematic protocol describes a new animal model of post-traumatic epilepsy after repetitive mild traumatic brain injury. The first part details steps for traumatic brain injury induction using a modified weight drop model. The second part provides instructions on the surgical approach for single- and multi-channel electroencephalographic data acquisition systems.

Induzir epilepsia pós-traumática em um modelo de camundongo de lesão cerebral traumática difusa repetitiva

Traumatic brain injury (TBI) is a leading cause of acquired epilepsy. TBI can result in a focal or diffuse brain injury. Focal injury is a result of ...

Preparation and Implantation of Electrodes for Electrically Kindling VGAT-Cre Mice to Generate a Model for Temporal Lobe Epilepsy

It was discovered that electrical kindling of VGAT-Cre mice led to the spontaneous motor and electrographic seizures. A recent paper focused on how unique VGAT-Cre mice were used in developing spontaneous recurring seizures (SRS) after kindling and a likely mechanism - insertion of Cre into the VGAT gene - disrupted its expression and reduced GABAergic tone. The present study extends these observations to a larger cohort of mice, focusing on key issues such as how long the SRS continues after kindling and the effect of the animal's sex and age. This report describes the protocols for the following key steps: making headsets with hippocampal depth electrodes for electrical stimulation and for reading the electroencephalogram; surgery to affix the headset securely on the mouse's skull so that it does not fall off; and key details of the electrical kindling protocol such as duration of the pulse, frequency of train, duration of train, and amount of current injected. The kindling protocol is robust in that it reliably leads to epilepsy in most VGAT-Cre mice, providing a new model to test for novel antiepileptogenic drugs.

This report describes the methods to generate a model of temporal lobe epilepsy based on the electrical kindling of transgenic VGAT-Cre mice. Kindled VGAT-Cre mice may be useful in determining what causes epilepsy and for screening novel therapies.

Preparação e implantação de eletrodos para kindling elétrico de camundongos VGAT-CRE para gerar um modelo para epilepsia do lobo temporal

It was discovered that electrical kindling of VGAT-Cre mice led to the spontaneous motor and electrographic seizures. A recent paper focused on how unique ...

Neurociência

Using a Bipolar Electrode to Create a Temporal Lobe Epilepsy Mouse Model by Electrical Kindling of the Amygdala

The amygdala is one of the most common origins of seizures, and the amygdala mouse model is essential for the illustration of epilepsy. However, few studies have described the experimental protocol in detail. This paper illustrates the whole process of amygdala electrical kindling epilepsy model making, with the introduction of a method of bipolar electrode fabrication. This electrode can both stimulate and record, reducing brain injury caused by implanting separate electrodes for stimulation and recording. For long-term electroencephalogram (EEG) recording purposes, slip rings were used to eliminate the record interruption caused by cable tangles and falling off.
After periodic stimulation (60 Hz, 1 s every 15 min) of the basolateral amygdala (AP: 1.67 mm, L: 2.7 mm, V: 4.9 mm) for 19.83 &plusmn; 5.742 times, full kindling was observed in six mice (defined as induction of three continuous grade V episodes classified by Racine's scale). An intracranial EEG was recorded throughout the entire kindling process, and an epileptic discharge in the amygdala lasting 20-70 s was observed after kindling. Therefore, this is a robust protocol for modeling epilepsy originating from the amygdala, and the method is suitable for revealing the role of the amygdala in temporal lobe epilepsy. This research contributes to future studies on the mechanisms of mesial temporal lobe epilepsy and novel antiepileptogenic drugs.

The amygdala plays a key role in temporal lobe epilepsy, which originates in and propagates from this structure. This article provides a detailed description of the fabrication of deep brain electrodes with both recording and stimulating functions. It introduces a model of medial temporal lobe epilepsy originating from the amygdala.

Usando um eletrodo bipolar para criar um modelo de rato com epilepsia do lobo temporal por acendimento elétrico da amígdala

The amygdala is one of the most common origins of seizures, and the amygdala mouse model is essential for the illustration of epilepsy. However, few ...

Handling-Induced Seizures in a Mouse Model

Source: Batot, G., et al. <a href="https://app-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/v/63673">A Model for Epilepsy of Infectious Etiology using Theiler&#39;s Murine Encephalomyelitis Virus.</a>&#160;J. Vis. Exp. (2022).
This video demonstrates the induction of handling-induced seizures in a mouse infected with Theiler&#39;s Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV). The infected mouse, which has hyperexcitable neurons, is exposed to external physical stimuli. This exposure causes stress, leading to abnormal electrical activity in the neurons, which results in seizures.

Source: Batot, G., et al. A Model for Epilepsy of Infectious Etiology using Theiler&#39;s Murine Encephalomyelitis Virus.&#160;J. Vis. Exp. (2022).
This ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuropathology

Epilepsy and Seizure Disorders

Triggering and Monitoring Heat-Induced Seizures in a Transgenic Mouse Model

Source: Das, A., et al. <a href="https://app-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/v/62846">A Behavioral Screen for Heat-Induced Seizures in Mouse Models of Epilepsy.</a> J. Vis. Exp. (2021)
This video demonstrates the procedure to induce heat-induced seizures in a transgenic mouse with epilepsy-related gene mutations by gradually increasing body temperature in a controlled chamber. This protocol is used to study seizure mechanisms and potential therapies for epilepsy.

Source: Das, A., et al. A Behavioral Screen for Heat-Induced Seizures in Mouse Models of Epilepsy. J. Vis. Exp. (2021)
This video demonstrates the ...

Establishing a Pentylenetetrazole-Induced Epileptic Seizure Model in Mice

Source: Shimada, T., et al. <a href="https://app-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/v/56573">Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model.</a> J. Vis. Exp. (2018).
This video demonstrates the process of inducing epilepsy in mice using pentylenetetrazole (PTZ) injections, a GABA-A receptor antagonist. Repeated intraperitoneal administration of PTZ progressively lowers the seizure threshold by inhibiting chloride ion influx, disrupting inhibitory neurotransmission, and leading to hyperexcitability in neurons that trigger seizures. This process results in kindling and the development of spontaneous seizures, mimicking chronic epilepsy.

Source: Shimada, T., et al. Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model. J. Vis. Exp. (2018).
This video demonstrates the process of inducing epilepsy ...

Systemic Pilocarpine Treatment: Mouse Model of Temporal Lobe Epilepsy

Source: Kim, J. E. and Cho, K. O. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/video/56831/the-pilocarpine-model-temporal-lobe-epilepsy-eeg-monitoring-using">The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice</a>. J. Vis. Exp. (2018).
This video presents the procedure for inducing status epilepticus (SE) in mice by systemic administration of pilocarpine to model temporal lobe epilepsy.

Tratamento com Pilocarpina Sistêmica: Modelo de Camundongo de Epilepsia do Lobo Temporal

Source: Kim, J. E. and Cho, K. O. The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice. J. Vis. Exp. ...

Biologia

Modelo de Roedores

Adulto

Technique to Induce Post-Traumatic Seizures in a Mouse Model via a Weight Drop Traumatic Injury

Source: Shandra, O. et al., <a href="https://app-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/v/60360">Inducing Post-Traumatic Epilepsy in a Mouse Model of Repetitive Diffuse Traumatic Brain Injury.</a> J. Vis. Exp. (2020)