This work is part of a CICYT research project (AGL 2010-22178) of the Spanish Ministry of Science and Technology. The authors are grateful to Nic Aldam and Kristi Prunty for the English revision of the manuscript.

O protocolo descrito a seguir para induzir CTA para culturas lenhosas segue as diretrizes de cuidados de animais da &quot;Universitat Autònoma de Barcelona&quot; (Bellaterra, Espanha) e é aprovado pelo Comitê de Ética do Animal e Experimentação Humana para ovinos e caprinos (CEEAH, referente ao 770 e 998, respectivamente). 1. Preparação de LiCl Dose <ol><li> Adicione a 25% w / v (peso / volume) de solução de LiCl em água destilada. Como alternativa, use água corrente limpa. O LiCl é extremamente higroscópico, portanto, é necessário tomar cuidado ao manusear o produto químico em pó. <ol><li> Pesar 250 g de LiCl e dissolvê-lo em água destilada (solução concentrada de LiCl). À medida que a reacção é exotérmica, esperar até que a solução foi devolvido para a temperatura ambiente antes de continuar. Verter a solução em um frasco volumétrico e adicionar água destilada a trazê-lo para 1.000 ml. </li></ol></li><li> Calcular o volume de solução para cada animal (indivíduodose). <ol><li> Pesar os animais para obter o seu peso corporal (PC) e calcular o mL de LiCl necessária para cada animal seguinte equação 1. A dose recomendada para a persistência a longo prazo é de 225 mg de LiCl / kg de peso corporal em ovelhas de 10 e 200 mg de LiCl / kg de peso corporal em caprinos 17. No entanto, outras doses utilizadas para pastagens são mostrados na Tabela 1. (Kg de peso corporal x dose de LiCl em g / kg de peso corporal) / concentração de LiCl em g / L = volume de LiCl (L) [Eq. 1] Por exemplo: Sheep = 60 kg BW; doses = 225 mg LiCl / kg BW; concentração da solução de LiCl = 250 g / L (60 kg x 0,225 g / kg) / 250 g / L = 0,054 L = 54 ml Cabra = 35 kg de peso corporal; doses = 200 mg LiCl / kg BW; concentração da solução de LiCl = 250 g / L (35 kg x 0,200 g / kg) / 250 g / L = 0,028 L = 28 ml </li></ol></li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> dose de LiCl </td><td> Mazorra et al. (2006) 19 </td&gt; <td> Burrit et al. (2013) 35 </td></tr><tr><td> Baixo </td><td> 100 </td><td> 125 </td></tr><tr><td> Médio </td><td> 150 </td><td> 150 </td></tr><tr><td> Alto </td><td> 225 </td><td> 175 </td></tr></tbody></table> Tabela 1:. LiCl gama de dosagem intervalo de doses LiCl (mg / kg de peso corporal, BW) utilizado por diferentes autores para induzir aversão alimentação. 2. Seleção Animal e Instalações <ol><li> Escolha adulto, animais não prenhes e secas, que nunca ter comido anteriormente a alimentação alvo. </li><li> Não induzir o CTA a mais de 20 animais ao mesmo tempo, para controlar melhor o seu comportamento. Inicialmente, apenas induzir CTA para 5 animais. </li><li> Atribuir os animais em um local onde a ingestão da ração alvo podem ser gravados individualmente. Alimentar os animais de uma vez por dia com uma dieta basal cobrindo todas as suas necessidades de nutrientes e proporcionar livre acesso a água e a mibloco neral. Assegurar uma ingestão de sal adequada para evitar o LiCl efeitos tóxicos, uma vez que as células do corpo pode usar Li em vez de Na 9. </li><li> Se as instalações são novas para os animais, dar-lhes uma semana de tempo de adaptação para se familiarizar com o ambiente ea dieta basal. </li></ol> 3. Aversão Indução <ol><li> Retirar a dieta basal na noite anterior (dia -1) e oferecer o alvo ad libitum alimentos para garantir que os animais comem a alimentação alvo avidamente no dia 12 seguinte. </li><li> No dia seguinte (dia 0), remover as sobras de manhã e oferecer 200 g de ração alvo para cada animal durante 30 min. Pesar as sobras posteriormente. </li><li> Se os animais consomem mais de 20-30 g, administrar o volume correspondente calculado de LiCl (ml calculada em 1.2) com uma seringa dosadora, logo que seja praticamente possível, sem esperar mais de 1 hora após o consumo. Se os animais consomem menos de 20-30 g, repetir o procedimento no dia seguinte. due ao seu comportamento de alimentação neofóbicas inata, os animais poderiam precisar de mais de um dia para começar a consumir o alimento alvo 10,17,25-27. </li><li> Após a administração LiCl, esperar 2 horas antes de oferecer a dieta basal. </li><li> A partir do dia 1 a 3, não oferecem os animais a alimentação alvo e verificá-las periodicamente para detectar qualquer possível sinal de doença grave, gravação de alimentação diária e ingestão de água (por peso ou por um check-list), frequência respiratória e comportamento animal. Eles poderiam apresentar cabeça caiu e as orelhas, a inatividade, diarréia, aumento da taxa de respiração e diminuição da ingestão de água e dieta durante os dias seguintes a administração LiCl 9-11,20,25. </li></ol> 4. Aversão Validação <ol><li> Nos dias 4, 5, 6 e 7 após a administração de LiCl, repita o passo 3.2. </li><li> Se os animais consomem &lt;10 g (ou &lt;4 bites) da alimentação de destino, considerar o limiar CTA established.The entre zero (sem consumo) e 10 g pode depender da circunstância dea planta alvo (tóxico ou não). </li><li> Se um animal consome&gt; 10 g, administrar uma nova dose LiCl e repita o passo 4.1. Se o animal continuar a consumir a planta alvo após a segunda dose, eliminá-lo a partir do grupo CTA. Facilitação social (por exemplo, mãe, irmãos e companheiros próximos) pode modificar o comportamento CTA em gado. Animais que foram evitadas a uma planta alvo consumi-lo facilmente de novo quando eles pastam com animais não-desviando 28. </li></ol> Gestão 5. Pasto Nota: A dose de LiCl utilizado para induzir CTA é completamente excretado em poucos dias, principalmente pela urina. <ol><li> Embora Li é amplamente distribuída na crosta terrestre, a fim de evitar qualquer possível contaminação no cultivo orgânico, aguarde 9-11 dias antes de mover os animais para o (tempo de desembaraço estabelecida com Li farmacocinética) cultura 11. </li><li> Certifique-se de que a cobertura do solo colheita é abundante e saborosa durante todo operíodo de pastoreio para impedir os animais de amostragem da alimentação de destino. Paste animais tratados separadamente de não-tratados. </li><li> Permitir que os animais a pastar num terreno delimitado de toda a superfície para obter um controlo uniforme da altura da grama. Delimitar o enredo usando cercas elétricas ou metálicas portáteis ou usando um pastor para pastar os animais entre linhas de culturas específicas. </li><li> Evite sobrepastoreio um terreno, retirando os animais antes de a cobertura do solo se torna escasso (altura grama de 5 cm) 29. </li></ol> 6. O restabelecimento da CTA <ol><li> Todos os anos, antes de permitir que os animais de voltar a pastar a cultura, repita o passo 4. </li></ol>

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	<li>Alonso, A. M., Guzm&#225;n, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evoluci&#242;n+comparada+de+la+sostenibilidad+agraria+en+el+olivar+ecol&#242;gico+y+convencional.">Evoluci&#242;n comparada de la sostenibilidad agraria en el olivar ecol&#242;gico y convencional.</a> Agroecol. 1, 63-73 (2006).</li><li>King, A. P., Berry, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vineyard+&#948;15N,+nitrogen+and+water+status+in+perennial+clover+and+bunch+grass+cover+crop+systems+of+California's+central+valley.">Vineyard &#948;15N, nitrogen and water status in perennial clover and bunch grass cover crop systems of California's central valley.</a> Agr. Ecosyst. Environ. 109 (3-4), 262-272 (2005).</li><li>Malik, R. K., Green, T. H., Brown, G. F., Mays, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+cover+crops+in+short+rotation+hardwood+plantations+to+control+erosion.">Use of cover crops in short rotation hardwood plantations to control erosion.</a> Biomass Bioenerg. 18 (6), 479-487 (2000).</li><li>Provenza, F. D., Balph, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+dietary+choice+in+livestock+on+rangelands+and+its+implications+for+management.">Development of dietary choice in livestock on rangelands and its implications for management.</a> J. Anim. Sci. 66 (9), 2356-2368 (1988).</li><li>Van Tien, D., Lynch, J. J., Hinch, G. N., Nolan, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Grass+odor+and+flavor+overcome+feed+neophobia+in+sheep.">Grass odor and flavor overcome feed neophobia in sheep.</a> Small Rumin. Res. 32 (3), 223-229 (1999).</li><li>Ralphs, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continued+food+aversion:+training+livestock+to+avoid+eating+poisonous+plants.">Continued food aversion: training livestock to avoid eating poisonous plants.</a> J. Range Manage. 45 (1), 46-51 (1992).</li><li>Ralphs, M. H., Provenza, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+food+aversions:+principles+and+practices,+with+special+reference+to+social+facilitation.">Conditioned food aversions: principles and practices, with special reference to social facilitation.</a> Proc. Nutr. Soc. 58 (4), 813-820 (1999).</li><li>Andrews, P. L. R., Horn, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signals+for+nausea+and+emesis:+Implications+for+models+of+upper+gastrointestinal+diseases.">Signals for nausea and emesis: Implications for models of upper gastrointestinal diseases.</a> Auton Neurosci. 125 (1-2), 100-115 (2006).</li><li>Timmer, R. T., Sands, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lithium+intoxication.">Lithium intoxication.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 10 (3), 666-674 (1999).</li><li>Manuelian, C. L., Albanell, E., Rovai, M., Salama, A. A. K., Caja, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+breed+and+lithium+chloride+dose+on+the+conditioned+aversion+to+olive+tree+leaves+(Olea+europaea+L.)+of+sheep.">Effect of breed and lithium chloride dose on the conditioned aversion to olive tree leaves (Olea europaea L.) of sheep.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 155, 42-48 (2014).</li><li>Manuelian, C. L., Albanell, E., Rovai, M., Caja, G., Guitart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+lithium+as+a+lithium+chloride+dose+suitable+for+conditioned+taste+aversion+in+lactating+goats+and+dry+sheep.">Kinetics of lithium as a lithium chloride dose suitable for conditioned taste aversion in lactating goats and dry sheep.</a> J Anim. Sci. 93 (2), 562-569 (2014).</li><li>Burritt, E. A., Provenza, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+Aversion+Learning:+Ability+of+Lambs+to+Distinguish+Safe+from+Harmful+Foods.">Food Aversion Learning: Ability of Lambs to Distinguish Safe from Harmful Foods.</a> J. Anim. Sci. 67 (7), 1732-1739 (1989).</li><li>Launchbaugh, K. L., Provenza, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+plants+practice+mimicry+to+avoid+grazing+by+mammalian+herbivores.">Can plants practice mimicry to avoid grazing by mammalian herbivores.</a> Oikos. 66, 501-504 (1993).</li><li>Burritt, E. A., Provenza, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+aversion+learning+in+sheep:+persistence+of+conditioned+taste+aversions+to+palatable+shrubs+(Cercocarpus+montanus+and+Amelanchier+alnifoli).">Food aversion learning in sheep: persistence of conditioned taste aversions to palatable shrubs (Cercocarpus montanus and Amelanchier alnifoli).</a> J. Anim. Sci. 68 (4), 1003-1007 (1990).</li><li>Barbosa, R. R., Pac&#236;fico da Silva, I., Soto-blanco, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+conditioned+taste+aversion+to+Mascagnia+rigida+in+goats.">Development of conditioned taste aversion to Mascagnia rigida in goats.</a> Pesq. Vet. Bras. 28 (12), 571-574 (2008).</li><li>Egber, A., Perevolotsky, A., Yonatan, R., Shlosberg, A., Belaich, M., Landau, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creating+aversion+to+giant+fennel+(Ferula+communis)+in+weaned+orphaned+lambs.">Creating aversion to giant fennel (Ferula communis) in weaned orphaned lambs.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 61 (1), 51-62 (1998).</li><li>Manuelian, C. L., Albanell, E., Salama, A. A. K., Caja, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+aversion+to+olive+tree+leaves+(Olea+europaea+L.)+in+goats+and+sheep.">Conditioned aversion to olive tree leaves (Olea europaea L.) in goats and sheep.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 128 (1-4), 45-49 (2010).</li><li>Du Toit, J. T., Provenza, F. D., Nastis, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+taste+aversions:+how+sick+must+a+ruminant+get+before+it+learns+about+toxicity+in+foods.">Conditioned taste aversions: how sick must a ruminant get before it learns about toxicity in foods.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 30 (1-2), 35-46 (1991).</li><li>Mazorra, C., Borges, G., Blanco, M., Borroto, A., Ruiz, R., Sorid, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influencia+de+la+dosis+de+cloruro+de+litio+en+la+conducta+de+ovinos+condicionados+que+pastorean+en+plantaciones+de+c&#236;tricos.">Influencia de la dosis de cloruro de litio en la conducta de ovinos condicionados que pastorean en plantaciones de c&#236;tricos.</a> Rev. Cub. Cienc. Agric. 40 (4), 425-431 (2006).</li><li>Ralphs, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lithium+residue+in+milk+from+doses+used+to+condition+taste+aversions+and+effects+on+nursing+calves.">Lithium residue in milk from doses used to condition taste aversions and effects on nursing calves.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 61 (4), 285-293 (1999).</li><li>Doran, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vines+and+ovines:+using+sheep+with+a+trained+aversion+to+grape+leaves+for+spring+vineyard+floor+management.">Vines and ovines: using sheep with a trained aversion to grape leaves for spring vineyard floor management.</a> Book of abstracts of the 60th Annual Meeting of the European Association for Animal Production. 15, 325 (2009).</li><li>Lane, M. A., Ralphs, M. H., Olsen, J. O., Provenza, F. D., Pfister, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+taste+aversion:+potential+for+reducing+cattle+loss+to+larkspur.">Conditioned taste aversion: potential for reducing cattle loss to larkspur.</a> J. Range Manage. 43 (2), 127-131 (1990).</li><li>Ralphs, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+aversions+to+larkspur+in+naive+and+native+cattle.">Persistence of aversions to larkspur in naive and native cattle.</a> J. Range Manage. 50 (4), 367-370 (1997).</li><li>Burritt, E. A., Provenza, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ability+of+lambs+to+learn+with+a+delay+between+food+ingestion+and+consequences+given+meals+containing+novel+and+familiar+foods.">Ability of lambs to learn with a delay between food ingestion and consequences given meals containing novel and familiar foods.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 32, 179-189 (1991).</li><li>Thorhallsdottir, A. G., Provenza, F. D., Balph, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food+aversion+learning+in+lambs+with+or+without+a+mother:+discrimination,+novelty+and+persistence.">Food aversion learning in lambs with or without a mother: discrimination, novelty and persistence.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 18 (3-4), 327-340 (1987).</li><li>Pfister, J. A., Astorga, J. B., Panter, K., Molyneux, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+locoweed+exposure+in+utero+and+as+a+neonate+does+not+disrupt+taste+aversion+learning+in+lambs.">Maternal locoweed exposure in utero and as a neonate does not disrupt taste aversion learning in lambs.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 36 (2-3), 159-167 (1993).</li><li>Villalba, J. J., Catanese, F., Provenza, F. D., Distel, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+early+experience+to+dietary+diversity,+acceptance+of+novel+flavors,+and+open+field+behavior+in+sheep.">Relationships between early experience to dietary diversity, acceptance of novel flavors, and open field behavior in sheep.</a> Physiol. Behav. 105 (2), 181-187 (2012).</li><li>Thorhallsdottir, A. G., Provenza, F. D., Balph, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+influences+on+conditioned+food+aversions+in+sheep.">Social influences on conditioned food aversions in sheep.</a> Appl. Anim. Behav. Sci. 25 (1-2), 45-50 (1990).</li><li>Manuelian, C. L., Albanell, E., Rovai, M., Salama, A. A. K., Caja, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+taste+aversion+generalization+by+aroma+in+sheep.">Conditioned taste aversion generalization by aroma in sheep.</a> J. Anim. Sci. 93, 497 (2015).</li><li>Manuelian, C. L., Albanell, E., Rovai, M., Salama, A. A. K., Caja, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+and+persistence+of+conditioned+aversion+to+grape+leaves+and+sprouts+for+grazing+sheep+in+vineyards.">Creation and persistence of conditioned aversion to grape leaves and sprouts for grazing sheep in vineyards.</a> J. Anim. Sci. 91, 497 (2013).</li><li>Manuelian, C. L., Albanell, E., Rovai, M., Salama, A. A. K., Caja, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+lithium+chloride+for+mid-term+conditioned+aversion+to+olive+tree+leaves+in+penned+and+grazing+goats.">Effect of lithium chloride for mid-term conditioned aversion to olive tree leaves in penned and grazing goats.</a> J. Anim. Sci. 90, 672 (2012).</li><li>Conover, M. R., Mason, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+Principles+Governing+Conditioned+Food+Aversions+Based+on+Deception.">Behavioral Principles Governing Conditioned Food Aversions Based on Deception.</a> Repellents in wildlife management: Proceedings of the Second DWRC Special Symposium. , 29-40 (1997).</li><li>Howery, L. D., Provenza, F. D., Ruyle, G. B., Jordan, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+do+animals+learn+it+rangeland+plants+are+toxic+or+nutritious.">How do animals learn it rangeland plants are toxic or nutritious.</a> Rangelands. 20 (6), 4-9 (1998).</li><li>Ralphs, M. H., Cheney, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+cattle+age,+lithium+chloride+dose+level,+and+food+type+in+the+retention+of+food+aversions.">Influence of cattle age, lithium chloride dose level, and food type in the retention of food aversions.</a> J. Anim. Sci. 71 (2), 373-379 (1993).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

O CTA é facilmente estabelecido em pequenos ruminantes, se a alimentação de alvo é uma planta, que o animal não tenha comido antes e não contém um nutriente insubstituíveis. Os animais têm uma associação de pós-ingestivo positiva com uma alimentação não-tóxico, a menos contato prévio faz com que seja difícil mudar a sua percepção do que 7,33 alimentação particular. A aversão condição gosto é produzido porque LiCl estimula o sistema emético produzir mal-estar ou desconforto gastrointestinal 34. Foi estabelecido que os animais consomem LiCl aumentou as taxas de respiração, mostrou cabeça e inclinação ouvido, ocasionalmente, eles ia chutar-se no estômago 25, e mostram diminuição da produção de leite 20 e ingestão de alimentos e água 11. No entanto, estes sinais foram superadas em alguns dias (2 a 4 dias) 11,20. O protocolo pode ser modificado ligeiramente de acordo com outros estudos CTA. Embora nós indicou que o LICL deve ser administrado imediatamente após o consumo do alimento para animais alvo, os animais foram capazes de associar a ingestão com a doença dentro do primeiro 4 h pós-administração 24. No entanto, é importante para oferecer a alimentação alvo sozinha e temporariamente separados (pelo menos 1 hora após a administração de 24) a partir de outros alimentos; tais como a dieta basal, para evitar a inter-CTA. Embora possamos escolher uma das doses indicadas na Tabela 1, temos que considerar que esses estudos não avaliaram a longo prazo CTA (&lt;1 ano), apenas a curto prazo (4 dias) 35 e médio prazo CTA (3 meses ) 19. O uso de animais adultos é recomendada devido ao jovem temperamento em pequenos ruminantes, que afetam negativamente a intensidade e persistência do CTA 4. Alguns aspectos importantes têm de ser consideradas para se obter um CTA bem sucedida. Embora a seringa dosadora é utilizada rotineiramente para desparasitação, a solução de LiCl tem de ser aplicada com um maior volume do que a demedicamentos anti-helmínticos (média de 40 ml / animal). É importante escolher o tamanho correto da seringa dosadora, manter a arma em bom estado (limpo e lubrificado) e cuidadosamente administrar ao animal. Para manter a aversão a longo prazo é também importante que a tampa verde é de alta qualidade e saboroso para os animais, a fim de evitar o consumo irregular da planta alvo. Ressalta-se que a aversão se torna mais fraco a cada vez que o animal amostras do alimento evitada sem sofrer consequências negativas 25,36. CTA pode ser difícil estabelecer em um rebanho de pequenos ruminantes se eles vivem em uma área onde a cultura predominante é a planta-alvo (por exemplo, vinhas, árvores de laranja). Uma das razões para isso é que o contato prévio com a planta alvo pode ocorrer quando os animais pastam ou são resíduos de poda alimentados no abrigo. A solução poderia ser a de trazer animais de outras regiões ou aumentar o estoque de reposição, sem contato com a planta alvo. <pclass = &quot;jove_content&quot;&gt; Nos últimos anos, os agricultores têm sido incentivados a implementar técnicas agrícolas mais sustentáveis ​​devido a exigências da sociedade. A metodologia CTA proposta alteraria o uso de cultivar ferramentas ou herbicidas para um sistema com pequenos animais de pasto. Um benefício adicional com pastagem pequenos ruminantes é um aumento da superfície de pastagem disponível desde as terras cultivadas foram proibidos de animais de pasto no passado. Misturar animais de pasto e produção de culturas permite aos agricultores obter um produto de maior valor, melhorando a qualidade do solo.

O uso de cobertura do solo nas entrelinhas da cultura lenhosas reduz a erosão e degradação do solo e aumenta a água, carbono orgânico e retenção de nitrogênio 1-3. Além disso, cobertura do solo mantém e aumenta a biodiversidade, apoiando o equilíbrio entre pragas de culturas e seus predadores naturais. Os agricultores tendem a eliminar ervas daninhas por aplicação de produtos agroquímicos ou usando uma máquina ceifeira; reduzindo assim a concorrência de nutrientes entre cultivos e cobertura verde. Uma forma rentável para controlar cobertura do solo seria o uso de pequena pastagem de ruminantes. Um benefício adicional de pastejo dos animais é a melhoria na saúde e fertilidade do solo. No entanto, os agricultores estão relutantes em implementar esta prática devido a pequenos ruminantes danificar as culturas através do consumo de folhas jovens e brotos. Para evitar danos às culturas potencial é útil para induzir a aversão ao sabor condicionado (CTA) em ovinos ou caprinos no rebanho ou manada. O CTA é facilmente estabelecida para new alimenta, devido ao comportamento de alimentação neofobia inata 4,5 de pequenos ruminantes, e porque os alimentadores familiares estão associados positivamente com a &quot;segurança aprendida&quot; estatuto que é mais difícil de mudar ou manipular 6. Os animais aprendem a rejeitar um determinado alimento específico (estímulo condicionado) devido ao seu efeito pós-ingestivo negativo (estímulo incondicionado). Para induzir CTA para centrais de paladar agradável e não-tóxicos, cloreto de lítio (LiCl; agente indutor) é administrado por via oral, após o animal consome a planta alvo. Enquanto há outros agentes indutores (por exemplo, apomorfina, ciclosphosphamide, tiabendazol), LiCl mostrou o CTA mais forte e mais persistente devido ao seu efeito sobre o sistema emético por estimulação da área de chemoreceptor zona de gatilho e desconforto gastrointestinal 7,8 com sinais leves de geral desconforto. De lítio (Li) é absorvido a partir do tracto gastrointestinal superior e distribuída no espaço da água corporal total 9. Os animais can tem um período de recuperação tão curto quanto dois dias 7,10,11. O LiCl pode ser administrada misturando-a com os alimentos 12,13, numa cápsula de gelatina 13,14 ou numa solução administrada por via oral por uma seringa dosadora 15-17. Embora solução de LiCl é cáustico, foi descrito nenhum ferimento na boca e esôfago. LiCl é utilizado na gama de 100 a 400 mg LiCl / kg de peso corporal (PC), com melhores resultados (CTA mais persistente), utilizando doses mais elevadas 16,18. No entanto, considerando os efeitos de dosagem conhecidos no sentido de diferentes espécies e raças, o efeito letal em alguns casos começam em 400 mg LiCl / kg BW. A dosagem recomendada para uma eficaz a longo prazo CTA começa em 200 mg / kg de peso corporal para caprinos e 225 mg / kg de peso corporal para ovinos 10,17,19. Li usado nestas dosagens é excretada nas primeiras 4 dias pós-administração, principalmente através da urina (92 ± 4%), seguido por fezes (6,5 ± 1,3%) e leite (2,8 ± 0,4%) 11. O completoperíodo de espera estimado para uma dose única de LiCl no plasma é de 9 e 11 dias para os ovinos e caprinos, respectivamente. Devido à mínima excreção Li no leite, CTA não pode ser naturalmente estabelecida na amamentação off-spring 11,20. Longo prazo persistência CTA em ovinos tem sido relatada em toda uma estação de pastoreio (3-4 meses) quando uma fonte de forragem alternativa estava disponível 14,21, sendo restabelecida a uma aversão quase completa com uma única dose LiCl na próxima pastoreio temporada (9 meses mais tarde) 14. Além disso, persistências CTA de 2 e 3 anos têm sido relatados em vacas sob condições de pastagem, sem a necessidade de doses de reforço, quando a alimentação de alvo é uma planta tóxica mas palatável 22,23. A opção de se considerar uma alternativa de alimentação é crítico para o animal para manter o CTA contra uma planta não-tóxico. Cada vez que o animal consome mais do que 10 g de a planta evitada sem resultar em di gastrintestinalscomfort, o CTA seria comprometida 24.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="598">
	<tbody>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Lithium Chloride PRS</td>
			<td style="width:71px;">Panreac</td>
			<td align="right" style="width:119px;">141392.1209</td>
			<td style="width:192px;">Different amounts of same product can be supplied by the same company.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Labelvage drencher 70 mL</td>
			<td style="width:71px;">Labelvage</td>
			<td align="right" style="width:119px;">240040</td>
			<td style="width:192px;">Similar product can be used (different brand or volume).</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

how to create conditioned taste aversion for grazing ground covers in woody crops with small ruminants

Conditioned taste aversion (CTA) is a learning behavior process where animals are trained to reject certain feed after gastrointestinal discomfort has been produced. Lithium chloride (LiCl) is the preferred agent used in livestock to induce CTA because it specifically stimulates the vomit center. In addition, LiCl is commercially available, and easy to prepare and administer using a drenching gun. Nevertheless, some factors have to be considered to obtain an effective long-lasting CTA, which allows small ruminants to graze during the cropping season. A key aspect is to use animals with no previous contact with the target plant (the plant chosen to be avoided; new feed). Due to their native neophobic feeding behavior, small ruminants can easily associate the negative feedback effects with the new feed, resulting in a strong and persistent CTA. The recommended doses are 200 and 225 mg LiCl/kg body weight (BW) for goats and sheep, respectively. To induce CTA, 100 g of the target plant should be individually offered for at least 30 min, and LiCl administered thereafter if the intake is greater than 10 g. Each time the animal eats the target plant without negative consequences, the CTA becomes weaker. Consequently, to minimize the risk of target plant consumption, it is essential to have sufficient palatable ground cover available. The presence of an alternative feed (of quality and quantity) prevents the accidental consumption of the target plant. A close monitoring of the flock is recommended to remove and re-dose any animal consuming more than 4 bites or 10 g of the target plant. At the beginning of each grazing season, check the CTA status of each animal before moving them to the crop.

Os resultados descritos abaixo foram obtidos por diversos estudos na CTA para culturas lenhosas em pequenos ruminantes realizados na Universitat Autònoma de Barcelona e eles fornecem evidência para estabelecer o protocolo proposto. As doses de 175 e 200 mg de LiCl / kg de peso corporal em cabras e 200 e 225 mg de LiCl / kg de peso corporal em ovelhas foram usadas com sucesso para induzir CTA contra culturas lenhosas com uma única administração, com a excepção de dois animais que não engolir completamente a administrada LiCl dosear 10,17 (Tabela 2). A maioria dos animais CTA mostrou caiu cabeças, sedentarismo e diminuição da ingestão da dieta basal o dia após a administração LiCl 10,11,17; no entanto, os animais superou esses sinais de desconforto gastrointestinal dentro de 2 dias 10,11. Para todas as doses utilizadas, o comportamento típico CTA observada foi de que os animais recusou-se a aproximar oalimentação caixas, cheirou o material vegetal e rejeitado para comer ou consumido &lt;10 g do alvo alimentar 10,17. Além disso, as diferenças entre as doses para cada espécie foram detectadas em relação a persistência a longo prazo e o número de animais que necessitam de uma dose de reforço de LiCl a curto prazo. Os animais que receberam a dose mais baixa (175 e 200 mg LiCl / kg BW para caprinos e ovinos, respectivamente) mostraram menor persistência CTA completo (ingestão da ração alvo &lt;10 g) e mais animais precisavam ser reforçados para fortalecer o CTA. Cabras que receberam a mesma dose LiCl (200 mg / kg de peso corporal) como ovelhas para induzir CTA de encontro às folhas de oliveira, mostrou uma persistência CTA mais completa 17. Por outro lado, o CTA persistência diferia por raça (Lacaune, Manchega e raças de ovinos Ripollesa) utilizando a 200 mg de LiCl / kg de peso corporal, mas não quando a dose de 225 mg de LiCl / kg de peso corporal foi utilizada 10. Apesar de uma dose única de LiCl um co induzidamplete CTA contra um romance de alimentação (ou seja, folhas de oliveira ou folhas de videira e couve), não foi suficiente para induzir CTA contra um feed familiares (ou seja, concentrar e feno). Ovelhas que receberam uma dose LiCl para induzir CTA contra concentrado só mostrou uma ligeira diminuição no consumo de ração alvo em comparação com o grupo controle, no dia seguinte (Figura 1). Além disso, a administração repetida de LiCl (até 3 doses em dias consecutivos) durante o período de aprendizagem não era eficaz para induzir CTA contra a alimentação familiarizados 30. O CTA induzida contra folhas de videira com um 225 mg de LiCl / kg de peso corporal de dose única foi completa (ingestão de &lt;10 g) durante o primeiro ano (Figura 2). No entanto, durante os 2 anos seguintes a dose aplicação re-foi necessário reforçar o CTA quando ovelhas retomada do consumo da ração alvo. O CTA tornou-se mais fraca quando o availa cobertura do solobilidade era escasso durante a estação de pastoreio. Um bando de 6 ovelhas CTA pastando (11 dias, 24 horas / dia) em um terreno vinhedo comercial (8,8 acres) com cobertura de grama cobertura reduzida do solo espontânea por 44 ± 4% (base seca), deixando no chão o mais fibrosa e menos peças nutritivas das plantas (Tabela 3) 31. Um rebanho de cabras 5 manteve um CTA eficaz (ingestão da ração alvo marcadamente menor do que o grupo controle) contra oliveiras através de 14 meses após a aversão foi induzida com um 200 mg LiCl / kg BW. Um ensaio pastagem de 30 min em um olival comercial (um terreno de 156 m 2 com cobertura de grama espontânea e 5 oliveiras) mostraram que as cabras CTA gastou 3,1% do tempo de julgamento de pastagem em contato com as oliveiras (comportamento de amostragem, cheirar ou contato não poderiam ser distinguidos no vídeo gravado), enquanto cabras de controle passou de 50,7% 32. Figura 1:. Familiar vs. alimentação Novel no CTA ingestão do alimento alvo após uma dose única LiCl (225 mg / kg de peso corporal, BW) para induzir CTA contra um familiar ou um avanço de romance no evitado (CTA) e controle ( C) ovelhas. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53887/53887fig1large.jpg" target="_blank">por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/53887/53887fig2.jpg" /> Figura 2:. Persistência CTA após a ingestão LiCl administração Grupo de folhas de videira durante o primeiro ano após a indução de aversão ao sabor condicionado (CTA). ( <img alt="Limpar Círculo" src="/files/ftp_upload/53887/clearcircle.jpg" /> , Controle Lacaune; <img alt="Círculo" src="/files/ftp_upload/53887/circle.jpg" /> , CTA Lacaune; <img alt="Limpar Triangle" src="/files/ftp_upload/53887/cleartriangle.jpg" /> , Controle Manchega; <img alt="trianlge" src="/files/ftp_upload/53887/triangle.jpg" /> , CTA Manchega). <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53887/53887fig2large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Espécies </td><td> N </td><td> dose de LiCl </td><td> alimentação alvo </td><td> Índice de sucesso,% 1 </td></tr><tr><td> Bode </td><td> 5 </td><td> 175 mg / kg de peso corporal </td><td> Oliveira </td><td> 100 (5/5) </td></tr><tr><td> Bode </td><td> 10 </td><td> 200 mg / kg de peso corporal </td><td> Oliveira </td><td> 90 (9/10) </td></tr><tr><td> ovelha </td><td> 20 </td><td> 200 mg / kg de peso corporal </td><td> Oliveira </td><td> 95 (19/20) </td></tr><tr><td> ovelha </td><td> 15 </td><td> 225 mg / kg de peso corporal </td><td>Oliveira </td><td> 100 (15/15) </td></tr><tr><td> ovelha </td><td> 44 </td><td> 225 mg / kg de peso corporal </td><td> parreira </td><td> 100 (44/44) </td></tr><tr><td colspan="5"> 1 Proporção de animais induzidos CTA com uma dose única LiCl. </td></tr></tbody></table> Tabela 2:. Índice de sucesso CTA Proporção de sucesso para induzir aversão ao sabor condicionado contra culturas lenhosas com doses únicas de 175, 200 e 225 mg LiCl / kg de peso corporal (BW) para caprinos e ovinos. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Item, % </td><td> antes de pastagem </td><td> Depois de pastagem </td><td> P-valor </td></tr><tr><td> Matéria seca </td><td> 28,6 ± 1,4 </td><td> 45,9 ± 5,8 </td><td> 0,066 </td></tr><tr><td> Proteína bruta </td><td> 11,4 ± 1,2 </td><td> 7,8 ± 0,5 </td><td&gt; 0,071 </td></tr><tr><td> fibra bruta </td><td> 29,5 ± 0,9 </td><td> 35,1 ± 1,5 </td><td> 0,046 </td></tr><tr><td> fibra em detergente neutro </td><td> 46,2 ± 4,4 </td><td> 57,6 ± 3,0 </td><td> 0,077 </td></tr><tr><td> fibra em detergente ácido </td><td> 28,0 ± 2,7 </td><td> 35,9 ± 2,5 </td><td> 0,041 </td></tr><tr><td> detergente ácido lignina </td><td> 4,2 ± 0,8 </td><td> 6,2 ± 1,1 </td><td> 0,075 </td></tr><tr><td> Cinza </td><td> 8,9 ± 0,3 </td><td> 9,1 ± 0,5 </td><td> 0,788 </td></tr></tbody></table> Tabela 3: Terra cobrir composição química composição química (com base na matéria seca) de cobertura do solo espontânea de um vinhedo comercial antes e após o pastejo por ovelhas evitadas..

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How to Create Conditioned Taste Aversion for Grazing Ground Covers in Woody Crops with Small Ruminants

Como criar aversão ao sabor condicionado para Grazing forrações em culturas lenhosas com Pequenos Ruminantes

Feeding behavior preferences in livestock can be modified to implement a grazing management plan in woody crops. Here, we present a protocol to show a lithium chloride dose after eating a new plant that induces conditioned taste aversion.

Conditioned taste aversion (CTA) is a learning behavior process where animals are trained to reject certain feed after gastrointestinal discomfort has ...

how-to-create-conditioned-taste-aversion-for-grazing-ground-covers

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Environment

7.2K visualizações.  Universitat Autònoma de Barcelona. Feeding behavior preferences in livestock can be modified to implement a grazing management plan in woody crops. Here, we present a protocol to show a lithium chloride dose after eating a new plant that induces conditioned taste aversion. 

Vídeo: How to Create Conditioned Taste Aversion for Grazing Ground Covers in Woody Crops with Small Ruminants

Surface Renewal: An Advanced Micrometeorological Method for Measuring and Processing Field-Scale Energy Flux Density Data

Advanced micrometeorological methods have become increasingly important in soil, crop, and environmental sciences. For many scientists without formal training in atmospheric science, these techniques are relatively inaccessible. Surface renewal and other flux measurement methods require an understanding of boundary layer meteorology and extensive training in instrumentation and multiple data management programs. To improve accessibility of these techniques, we describe the underlying theory of surface renewal measurements, demonstrate how to set up a field station for surface renewal with eddy covariance calibration, and utilize our open-source turnkey data logger program to perform flux data acquisition and processing. The new turnkey program returns to the user a simple data table with the corrected fluxes and quality control parameters, and eliminates the need for researchers to shuttle between multiple processing programs to obtain the final flux data. An example of data generated from these measurements demonstrates how crop water use is measured with this technique. The output information is useful to growers for making irrigation decisions in a variety of agricultural ecosystems. These stations are currently deployed in numerous field experiments by researchers in our group and the California Department of Water Resources in the following crops: rice, wine and raisin grape vineyards, alfalfa, almond, walnut, peach, lemon, avocado, and corn.

Surface renewal is a micrometeorological method that is being used increasingly to determine energy fluxes, but its technical complexity makes it inaccessible to a broad audience. We describe the steps needed to set up and calibrate a surface renewal field station, to acquire and process data, and to correctly interpret results.

Advanced micrometeorological methods have become  increasingly important in soil, crop, and environmental sciences.  For many scientists without formal ...

Ambiente

A Small Volume Procedure for Viral Concentration from Water

Small-scale concentration of viruses (sample volumes 1-10 L, here simulated with spiked 100 ml water samples) is an efficient, cost-effective way to identify optimal parameters for virus concentration. Viruses can be concentrated from water using filtration (electropositive, electronegative, glass wool or size exclusion), followed by secondary concentration with beef extract to release viruses from filter surfaces, and finally tertiary concentration resulting in a 5-30 ml volume virus concentrate. In order to identify optimal concentration procedures, two different electropositive filters were evaluated (a glass/cellulose filter [1MDS] and a nano-alumina/glass filter [NanoCeram]), as well as different secondary concentration techniques; the celite technique where three different celite particle sizes were evaluated (fine, medium and large) followed by comparing this technique with that of the established organic flocculation method. Various elution additives were also evaluated for their ability to enhance the release of adenovirus (AdV) particles from filter surfaces. Fine particle celite recovered similar levels of AdV40 and 41 to that of the established organic flocculation method when viral spikes were added during secondary concentration. The glass/cellulose filter recovered higher levels of both, AdV40 and 41, compared to that of a nano-alumina/glass fiber filter. Although not statistically significant, the addition of 0.1% sodium polyphosphate amended beef extract eluant recovered 10% more AdV particles compared to unamended beef extract.

An approach was developed for identifying optimal viral concentration conditions for small volume water samples using spikes of human adenovirus. The techniques described here are used to identify concentration parameters for other viral targets, and applied to large-scale viral concentration experimentation.

Um Procedimento volume pequeno para Concentração Viral da Água

Small-scale concentration of viruses (sample volumes 1-10 L, here simulated with spiked 100 ml water samples) is an efficient, cost-effective way to ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. The standardized sampling component of the method concentrates viruses that may be present in water by passage of a minimum specified volume of water through an electropositive cartridge filter. The minimum specified volumes for surface and finished/ground water are 300 L and 1,500 L, respectively. A major method limitation is the tendency for the filters to clog before meeting the sample volume requirement. Studies using two different, but equivalent, cartridge filter options showed that filter clogging was a problem with 10% of the samples with one of the filter types compared to 6% with the other filter type. Clogging tends to increase with turbidity, but cannot be predicted based on turbidity measurements only. From a cost standpoint one of the filter options is preferable over the other, but the water quality and experience with the water system to be sampled should be taken into consideration in making filter selections.

EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

EPA Método 1615. Medição de Enterovirus e Norovirus Ocorrência na água pela cultura e RT-qPCR. I. Recolha de amostras de vírus

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

A Technical Perspective in Modern Tree-ring Research - How to Overcome Dendroecological and Wood Anatomical Challenges

Dendroecological research uses information stored in tree rings to understand how single trees and even entire forest ecosystems responded to environmental changes and to finally reconstruct such changes. This is done by analyzing growth variations back in time and correlating various plant-specific parameters to (for example) temperature records. Integrating wood anatomical parameters in these analyses would strengthen reconstructions, even down to intra-annual resolution. We therefore present a protocol on how to sample, prepare, and analyze wooden specimen for common macroscopic analyses, but also for subsequent microscopic analyses. Furthermore we introduce a potential solution for analyzing digital images generated from common small and large specimens to support time-series analyses. The protocol presents the basic steps as they currently can be used. Beyond this, there is an ongoing need for the improvement of existing techniques, and development of new techniques, to record and quantify past and ongoing environmental processes. Traditional wood anatomical research needs to be expanded to include ecological information to this field of research. This would support dendro-scientists who intend to analyze new parameters and develop new methodologies to understand the short and long term effects of specific environmental factors on the anatomy of woody plants.

Here we present a protocol outlining how to sample wooden specimens for the overall assessment of their growth structures. Macro- and microscopic preparation and visualization techniques necessary to generate well-replicated and highly resolved wood anatomical and dendroecological dataset, are described are described.

Uma perspectiva técnica em Modern Tree-anel Research - Como superar dendroecologia e Madeira anatômicas Desafios

Dendroecological research uses information stored in tree rings to understand how single trees and even entire forest ecosystems responded to ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a standardized method for use in multiple analytical laboratories during monitoring period 3 of the Unregulated Contaminant Monitoring Rule. Herein we present the protocol for extraction of viral ribonucleic acid (RNA) from water sample concentrates and for quantitatively measuring enterovirus and norovirus concentrations using reverse transcription-quantitative PCR (RT-qPCR). Virus concentrations for the molecular assay are calculated in terms of genomic copies of viral RNA per liter based upon a standard curve. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. The method has been evaluated by examining virus recovery from ground and reagent grade waters seeded with poliovirus type 3 and murine norovirus as a surrogate for human noroviruses. Mean poliovirus recoveries were 20% in groundwaters and 44% in reagent grade water. Mean murine norovirus recoveries with the RT-qPCR assay were 30% in groundwaters and 4% in reagent grade water.

Here we present a procedure to quantify enterovirus and norovirus in environmental and drinking waters using reverse transcription-quantitative PCR. Mean virus recovery from groundwater with this standardized procedure from EPA Method 1615 was 20% for poliovirus and 30% for murine norovirus.

EPA Método 1615. Medição de Enterovirus e Norovirus Ocorrência na água por cultura e RT-qPCR. Parte III. Detecção de vírus por RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

A Simple Method for Automated Solid Phase Extraction of Water Samples for Immunological Analysis of Small Pollutants

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and enables to perform rapid, automated and simple SPE. The pre-concentrated solution is compatible with analysis by immunoassay, with a low organic solvent content. A method is described for the extraction and pre-concentration of natural hormone 17&#946;-estradiol in 100 ml water samples. Reverse phase SPE is performed with octadecyl-silica sorbent and elution is done with 200 &#181;l of methanol 50% v/v. Eluent is diluted by adding di-water to lower the amount of methanol. After preparing manually the SPE column, the overall procedure is performed automatically within 1 hr. At the end of the process, estradiol concentration is measured by using a commercial enzyme-linked immune-sorbent assay (ELISA). 100-fold pre-concentration is achieved and the methanol content in only 10% v/v. Full recoveries of the molecule are achieved with 1 ng/L spiked de-ionized and synthetic sea water samples.

A protocol for the extraction and pre-concentration of estradiol from water samples by using an automated and miniaturized system is presented.

Um método simples para a extração automatizada de fase sólida das amostras de água para análise imunológica de Pequenas Poluentes

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and ...

The Benthic Exchange of O2, N2 and Dissolved Nutrients Using Small Core Incubations

The measurement of sediment-water exchange of gases and solutes in aquatic sediments provides data valuable for understanding the role of sediments in nutrient and gas cycles. After cores with intact sediment-water interfaces are collected, they are submerged in incubation tanks and kept under aerobic conditions at in situ temperatures. To initiate a time course of overlying water chemistry, cores are sealed without bubbles using a top cap with a suspended stirrer. Time courses of 4-7 sample points are used to determine the rate of sediment water exchange. Artificial illumination simulates day-time conditions for shallow photosynthetic sediments, and in conjunction with dark incubations can provide net exchanges on a daily basis. The net measurement of N2 is made possible by sampling a time course of dissolved gas concentrations, with high precision mass spectrometric analysis of N2:Ar ratios providing a means to measure N2 concentrations. We have successfully applied this approach to lakes, reservoirs, estuaries, wetlands and storm water ponds, and with care, this approach provides valuable information on biogeochemical balances in aquatic ecosystems.

The Benthic Exchange of O2, N2 and Dissolved Nutrients Using Small Core Incubations

Here, we present small core incubations for the measurement of sediment-water gas and solute exchange. These will provide reliable measurements of sediment-water exchange that assess the role of sediment in influencing biological and biogeochemical processes in aquatic ecosystems.

A Bolsa Benthic de O<sub&gt; 2</sub&gt;, N<sub&gt; 2</sub&gt; e nutrientes dissolvidos Usando pequeno núcleo incubações

The measurement of sediment-water exchange of gases and solutes in aquatic sediments provides data valuable for understanding the role of sediments in ...

Tracking Infiltration Front Depth Using Time-lapse Multi-offset Gathers Collected with Array Antenna Ground Penetrating Radar

A Ground Penetrating Radar (GPR) system based on a ground-coupled, densely populated antenna array was used to collect data during an infiltration experiment conducted at a test site near the Tottori Sand Dune, Japan. The antenna array used in this study consists of 10 transmitting antennas (Tx) and 11 receiving antennas (Rx). For this experiment, the system was configured to use all possible Tx-Rx pairings, resulting in a Multi-Offset Gather (MOG) consisting of 110 Tx-Rx combinations. The array was left stationary at a position directly above the infiltration area and data were collected every 1.5 seconds using a time-based trigger. Common-Offset Gather (COG) and Common Mid-Point (CMP) data cubes were reconstructed from the MOG data during post-processing. There have been few studies that used time-lapse CMP data to estimate changes in velocity of propagation. In this study, electromagnetic (EM) wave velocity was estimated heuristically at 1-minute intervals from the reconstructed CMP data through curve fitting, using the hyperbola equation. We then proceeded to calculate the depth of the wetting front. The evolution of the wetting front over time obtain through this method is consistent with the observations from a soil moisture sensor which was placed at a depth below 20 cm. The results obtained in this study demonstrate the ability of such array GPR system to monitor a subsurface dynamic process like water infiltration accurately and quantitatively.

Here we present a Ground Penetrating Radar (GPR) system based on a ground-coupled, densely populated antenna array for monitoring the dynamic process of subsurface water infiltration. A time-lapse radar image of the infiltration process allowed estimating the depth of the wetting front during the course of the infiltration process.

Infiltração, profundidade da frente usando o lapso de tempo offset multi reúne de rastreamento coletados com matriz chão de antena Radar de penetração

A Ground Penetrating Radar (GPR) system based on a ground-coupled, densely populated antenna array was used to collect data during an infiltration ...

Experimental Methods of Dust Charging and Mobilization on Surfaces with Exposure to Ultraviolet Radiation or Plasmas

Electrostatic dust transport has been hypothesized to explain a number of observations of unusual planetary phenomena. Here, it is demonstrated using three recently developed experiments in which dust particles are exposed to thermal plasma with beam electrons, beam electrons only, or ultraviolet (UV) radiation only. The UV light source has a narrow bandwidth in wavelength centered at 172 nm. The beam electrons with the energy of 120 eV are created with a negatively biased hot filament. When the vacuum chamber is filled with the argon gas, a thermal plasma is created in addition to the electron beam. Insulating dust particles of a few tens of microns in diameter are used in the experiments. Dust particles are recorded to be lofted to a height up to a few centimeters with a launch speed up to 1 m/s. These experiments demonstrate that photo and/or secondary electron emission from a dusty surface changes the charging mechanism of dust particles. According to the recently developed &#34;patched charge model&#34;, the emitted electrons can be re-absorbed inside microcavities between neighboring dust particles below the surface, causing the accumulation of enhanced negative charges on the surrounding dust particles. The repulsive forces between these negatively charged particles may be large enough to mobilize and lift them off the surface. These experiments present the advanced understanding of dust charging and transport on dusty surfaces, and laid a foundation for future investigations of its role in the surface evolution of airless planetary bodies.

Dust charging and mobilization is demonstrated in three experiments with exposure to thermal plasma with beam electrons, beam electrons only, or ultraviolet (UV) radiation only. These experiments present the advanced understanding of electrostatic dust transport and its role in shaping the surfaces of airless planetary bodies.

Métodos experimentais de poeira e mobilização sobre superfícies com exposição à radiação ultravioleta ou Plasmas de

Electrostatic dust transport has been hypothesized to explain a number of observations of unusual planetary phenomena. Here, it is demonstrated using ...

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current measures to combat such pathogens have proved too conservative and, thus, not sufficiently effective, and they can potentially pose environmental risks. Therefore, it is extremely necessary to identify host-resistance factors to assist in controlling plant diseases naturally through the identification of resistant germplasm, the isolation and characterization of resistance genes, and the molecular breeding of resistant cultivars. In this regard, there is need to establish an accurate, rapid, and large-scale inoculation method to breed and develop plant resistance genes. The rice blast fungal pathogen Magnaporthe grisea causes severe disease symptoms and yield losses. Recently, M. grisea has emerged as a model organism for studying the mechanisms of plant-fungal pathogen interactions. Hence, we report the development of a plant virulence test method that is specific for M. grisea. This method provides for both spray inoculation with a conidial suspension and wounding inoculation with mycelium cubes or droplets of conidial suspension. The key step of the wounding inoculation method for detached rice leaves is to make wounds on plant leaves, which avoids any interference caused by host penetration resistance. This spray/wounding protocol contributes to the rapid, accurate, and large-scale screening of the pathotypes of M. grisea isolates. This integrated and systematic plant infection method will serve as an excellent starting point for gaining a broad perspective of issues in plant pathology.

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

Here, we present a protocol to test plant virulence with the plant pathogen Magnaporthe grisea. This report will contribute to the large-scale screening of the pathotypes of fungi isolates and serve as an excellent starting point for understanding the resistant mechanisms of plants during molecular breeding.

O teste de infecção da planta: Spray e inoculação mediada por ferimento com o de patógeno vegetal Magnaporthe Grisea

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current ...