Method Article
This video demonstrates a protocol for conducting single-fiber electrophysiological recordings on an in vitro mouse colorectum-nerve preparation.
Este vídeo mostra em pormenor um protocolo de fibra única gravação electrofisiológico in vitro utilizando uma preparação colorectum rato-do nervo. A abordagem permite a identificação imparcial e caracterização funcional de aferentes colorretais individuais. Gravações extracelulares de potenciais de acção propagadas (APs) que se originam a partir de um ou alguns aferente (ou seja, de fibra única) campos receptivos (RFS) na colorectum fascículos são feitos de fibras nervosas provocavam. O colorectum é removido quer com o pélvica (PN) ou splanchnic lombar (LSN) do nervo ligado e abertos longitudinalmente. O tecido é colocado numa câmara de registo, fixado plana e perfundidas com solução de Krebs oxigenada. Estimulação elétrica Focal é usado para localizar as terminações aferentes colorretais, que são ainda mais testadas por três estímulos mecânicos distintos (sem corte sondagem, acariciando mucosa e stretch circunferencial) para categorizar funcionalmente os aferentes em cinco mechanosensiaulas operatório. Endings respondendo a nenhum desses estímulos mecânicos são classificados como aferentes mecanicamente insensíveis (MIAs). Ambos mechanosensitive e MIAs pode ser avaliado para a sensibilização (ou seja, a resposta melhorada, limiar reduzida e / ou aquisição de mecanosensibilidade) por exposição localizada entre os FR para produtos químicos (por exemplo, sopa inflamatória (IS), a capsaicina, trifosfato de adenosina (ATP)). Nós descrevemos o equipamento e preparação de gravação colorectum-nervo, colheita de colorectum com anexado PN ou LSN, identificação de FR no colorectum, gravação de fibra única de fascículos, e aplicação localizada de produtos químicos para a RF. Além disso, os desafios de preparação e aplicação de estimulação mecânica padronizada também são discutidos.
Dor e hipersensibilidade são predominantes as queixas dos pacientes que sofrem de desordens gastrointestinais funcionais, incluindo o síndrome do intestino irritável (IBS), que existem na ausência de pathobiological causa aparente ou danos nos tecidos. Por exemplo, pacientes com SII exibem hipersensibilidade, incluindo respostas intensificadas para distensão rectal balão e aumento da sensibilidade na função normal do intestino, bem como a hipersensibilidade de referência somáticas (isto é, sensibilidade à palpação da zona abdominal) 1. Porque direccionamento aferentes colorectal tem provado ser eficaz no alívio da dor e hipersensibilidade em pacientes com IBS (por exemplo, a instilação intra-rectal de anestésicos locais 2,3; ingestão oral da guanilato ciclase C-agonista linaclotide 4-6), uma melhor compreensão do inervação aferente do colorectum é importante.
Aferentes viscerais, incluindo aferentes colorretais, São capazes de responder às modalidades químicos / em nutrientes e térmicos (por exemplo, 7-9). No entanto, aferentes viscerais que respondem a estímulos mecânicos (ou seja, aferentes mechanosensitive) ter sido o mais estudado porque estímulos mecânicos (por exemplo, distensão luminal, estiramento) são aqueles que normalmente dão origem a sensações conscientes, incluindo desconforto e dor 10-16. Além disso, as vísceras também são inervados por aferentes insensíveis mecanicamente (MIAs), vulgarmente designados por silenciosas ou dormir nociceptors 17. Em condições fisiológicas normais, MIAs não respondem ao estímulo mecânico ou ter resposta muito alta limiares 18, mas pode se tornar ativo e adquirir mecanosensibilidade em condições fisiopatológicas e contribuir para a hipersensibilidade.
Usando a preparação in vitro e protocolo descrito aqui, nós desenvolvemos e empregou uma estratégia de estímulo elétrico para o mar RCH para terminações receptivas, permitindo a identificação imparcial de ambas as terminações mechanosensitive e MIA no colorectum 19. A inervação colorectal é derivado splanchnic lombar (LSN) e do nervo pélvico (PN) vias, e inclui aferentes colorretal que podem ser classificados em cinco classes mechanosensitive (serosa, mucosa, muscular, músculo-mucosa, mesentérica) e uma classe MIA 20. Usando esta preparação in vitro, verificou-se que MIAs colorretais adquirido mecanosensibilidade (sensibilizar) após uma breve exposição de seus campos receptivos a uma sopa inflamatória (IS), que sensibilizados 71% dos MIAs na via PN e 23% das MIAs na via LSN 19. Nós também documentada sensibilização a longo prazo (até 28 dias) de MI As no contexto da hipersensibilidade visceral comportamentais de longa duração (isto é, nos ratos que receberam os tratamentos com zimosan intracolónica 21 ou ácido 2,4,6-trinitrobenzenossulfónico (TNBS) 22) .
jove_content "> Entre aferentes mechanosensitive, aferentes musculares e muscular-mucosas são as únicas classes que tonicamente codificam trecho circunferencial da colorectum (ou seja, são stretch-sensitive) e servir à codificação de nocivo distensão colorectal 23,24. Usando um computador controlado- força do actuador, foi aplicado um padrão, homogénea e reprodutível em rampa estiramento na direcção circunferencial do tecido colorectal achatada e mais categorizados aferentes sensíveis ao estiramento tão baixo limiar e de alto limiar 23. Além disso, o curso de tempo da sensibilização de estiramento aferentes sensíveis ao após zymosan intracolônica 21 ou 22 TNBS tratamento corresponde ao início, persistência e / ou recuperação de hipersensibilidade visceral comportamental, sugerindo um papel de aferentes colorretais sensíveis ao estiramento na dor visceral e hipersensibilidade.NOTA: Este protocolo foi revisto e aprovado pela Universidade de Pittsburgh Institutional Animal Care e do Comitê Use.
1. Preparação da solução de Krebs modificado e teste de droga Alíquotas
2. dissecção do tecido colorectum nervo-
Gravação 3. Single-fibra e localização do campo receptivo
4. Classificação Funcional de Mechanosensitive colorretais Aferentes
5. Chemical Aplicação / Modulação da Endings Receptivo
6. spikes Gravação e Discriminando AP
A configuração está ilustrada na Figura 1. Ela inclui uma câmara de tecido feito à medida que abriga o colorectum num compartimento de banho revestido de silicone e o nervo ligado num compartimento cheio com óleo mineral contígua. A câmara de dois compartimentos foi usinado a partir de um bloco sólido de plástico acrílico por uma máquina CNC; parte inferior de ambos os compartimentos foi posteriormente revestido com silicone firme para permitir a fácil pin para baixo do tecido colorretal. APs extracelulares de fascículos esmiuçadas são gravados usando, um amplificador diferencial alimentado por bateria de baixo ruído com uma alta taxa de rejeição de modo comum (CMRR ~ 60 dB). O ganho do amplificador é ajustado para a gama e x10,000 filtro de banda de 0,3 a 10 kHz. A estimulação eléctrica do colorectum é emitida por um estimulador opticamente acoplado em modo de corrente constante através de um eléctrodo concêntrico em contacto com a mucosa rectal. A estimulação mecânica (trecho colorectal e pontuada sondagem) é entregue por acomputer controlado força atuador. Um conversor AD e software apropriado supervisionar ambos os processos de estimulação e gravação através do envio de saídas de comando de tensão para iniciar estímulos mecânicos e eléctricos, bem como a gravação e digitalização dos sinais extracelulares AP a partir do amplificador diferencial. Para isolar a partir de fontes de ruído mecânicos e eléctricos, a câmara de tecido, do microscópio e do amplificador diferencial são colocados dentro de uma gaiola de Faraday montado sobre uma mesa de ar pneumático.
Como mostrado na Figura 2A, o colorectum com o nervo ligado é dissecado a partir de um rato, cortado ao longo da borda anti-mesentérica, e fixado plana na câmara de tecido revestido de silicone; o nervo é colocado sobre um espelho de vidro na câmara de gravação adjacentes. Exibido na figura 2B é um registro representante de um potencial de ação (AP), em resposta a estimulação elétrica da RF no limiar. A AP deste registro está atrás do art estímuloifact (•) por 49 ms, devido ao atraso na condução da RF para o eléctrodo de gravação, o que resulta numa velocidade de condução calculado de 0,43 m / seg, bem no intervalo de uma das fibras C não mielinizadas. Exibido na Figura 2C são respostas típicas de um aferentes a estímulos entregues em mão (sondagem do RF com monofilamentos von Frey, com 1 g, e acariciando mucosa fina da RF, 10 mg). Este registro contém dois aferentes facilmente discrimináveis; apenas o grande aferentes amplitude responde a acariciando. Como se mostra na Figura 2D, as respostas aferentes para sondagem também foram avaliados por uma força de accionamento controlado por computador, que proporciona ao mesmo local na colorectum uma série de forças mecânicas precisamente cronometrados e reprodutíveis (5, 10, 20, 40 e 80 mN, 5 duração sec). Da mesma forma, estiramento circunferencial do colorectum (0-170 mN em 5 mN / sec) é entregue pelo mesmo actuador com uma resposta representativa mostrada na Figura 2E .
Como mostrado na Figura 3, os aferentes colorrectais podem ser funcionalmente classificadas em seis classes que se baseiam os seus perfis de resposta a estímulos mecânicos três distintos (ver passo 4.2 acima). Todas as terminações aferentes, exceto para aferentes mesentéricos foram localizados pela estimulação elétrica (e-stim; coluna mais à esquerda, setas indicam artefato estímulo). Mecanicamente aferentes insensíveis (MIAs) não respondem a qualquer um dos três estímulos mecânicos. Em contraste, todas as terminações mechanosensitive responder a sondagem (0,4-1,4 g). Entre eles, terminações muscular e muscular-mucosas também são activadas por estiramento circunferencial (0-170 nM), e, portanto, são designadas por aferentes sensíveis ao estiramento; terminações muscular-mucosa também são ativados pelo toque (10 mg). Terminações da mucosa também são ativados pelo toque (10 mg), mas não esticar e terminações serosa não são ativados por qualquer trecho ou acariciando. Terminações mesentérica são identificados por mecanicamente bapressando o mesentério.
Exibido na figura 4A são respostas representativas de um aferentes sensíveis ao estiramento evocada por três trechos circunferenciais consecutivos separados por 5 min. Os números de pico estão uniformemente finalmente resolvido em três caixas e exibido como funções de estímulo-resposta na figura 4B, revelando alta reprodutibilidade tanto em magnitude de resposta (número pico) e limiar de resposta.
Esta preparação colorectum-nervo in vitro também permite a aplicação local de produtos químicos para aferentes terminações receptivas. A exposição a produtos químicos é restrita a regiões em torno do RF aferente colocando bronze ou tubagem de aço inoxidável sobre a mucosa colorrectal para isolar fisicamente a RF do resto do colorectum. Os resultados típicos seguintes aplicação de produtos químicos incluem: ativação direta dos aferentes mediante aplicação de uma solução hipertônica ácido (AHS 26; Figura 5A), não ativação, mas aquisição de mecanosensibilidade por um MIA após a aplicação de uma sopa inflamatória (IS 19; Figura 5B), aumento da resposta (ou seja, a sensibilização) ao estiramento mecânico após a aplicação de IS (Figura 5C), e redução da resposta ao estiramento mecânico após a aplicação de cGMP (Figura 5D).
Figura 1. Representação esquemática da montagem experimental. O nervo colorectum é colocado numa câmara de tecido de dois compartimentos isolados e, juntamente com a fase de cabeça amplificador diferencial a partir de outro equipamento electrónico por uma gaiola de Faraday. Cada RF aferentes é identificado por estimulação elétrica (e-stim) do colorectum e testado por três estímulos mecânicos: nylon monofilamento sondagem, acariciando mucosa, e trecho circunferencial. ttps: //www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/52310/52310fig1highres.jpg "target =" _ blank "> Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2. Uma imagem através do microscópio estereoscópico do colorectum dissecado com nervo pélvico em anexo (A) B -. E mostrar registros representativos. (B) Um potencial de ação (AP) evocados por estimulação elétrica (artefato de estímulo, •). (C) As respostas típicas de Hand-held monofilamento sondagem e mucosa acariciando. (D, E) As respostas a sondagem e para esticar circunferencial entregue pela força atuador controlado por computador, respectivamente. Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 4. respostas eferentes para reprodutível, estimulação mecânica controlada por computador. (A) As respostas de um muscular-mucosa umafferent a três vezes consecutivas em rampa trechos (0-170 mN a 5 mN / sec; 5 min de intervalo inter-estímulo). (B) Respostas (ação potenciais pontos) foram uniformemente finalmente resolvido em três caixas (0-57, 57-113 e 113-170 MN) e exibido como funções de estímulo-resposta; limiar de resposta é exibida na inserção. Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 5. respostas eferentes para a aplicação localizada químico para terminações receptivos. (A) Um exemplo de chemosensitivity de um aferentes serosal a aplicação da solução hipertônica ácida (AHS). (B) Um exemplo de aquisição de mecanosensibilidade (sensibilização) por um MIA terminando. Este MIA não respondeu diretamentepara uma sopa inflamatória (IS), mas respondeu a 1,4 g de monofilamento de sondagem depois. (C) de sensibilização (um aumento na magnitude da resposta e redução no limiar de resposta) para esticar de um aferentes muscular após a exposição de seu término para IS. (D) Atenuação da resposta para esticar por um aferentes muscular-mucosa após a exposição de seu final de monofosfato de guanosina cíclico (cGMP). Por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
A preparação in vitro colorectum-nervo descrito aqui tem provado ser uma abordagem poderosa para estudar funções de codificação neural de aferentes colorretais individuais, que bem complementa outras abordagens não-funcionais (por exemplo, estudos celulares, moleculares e histológicos) sobre os neurônios sensoriais viscerais ( veja o comentário 27 para detalhes). Mecanismos neuronais que contribuem para a nocicepção e hipersensibilidade colorectal longo prazo foram revelados e manipulações farmacológicas foram realizados que têm metas revelou que poderia aliviar a dor visceral. Os seguintes pontos-chave associados à implementação bem sucedida desta preparação são discutidas a seguir: 1) redução de ruído eléctrico, 2) aumento na detecção de sinal, e 3) a seleção de um estímulo padronizado para avaliar as mudanças de codificação aferentes. Além disso, são discutidas várias limitações desta técnica.
Potenciais de ação (APs) propagating intracelularmente ao longo do nervo axônios geralmente têm um potencial de membrana de 100-130 mV. No entanto, devido à pequena capacitância específica da membrana axonal este relativamente grande despolarização somente resulta em um pequeno deslocamento de carga eléctrica através da membrana celular, o que pode facilmente ser absorvido pelo tecido extracelular / fluido intersticial circundante (o qual tem uma impedância eléctrica consideravelmente inferior do que a membrana lipídica). Para a gravação extracelular de filamentos nervosos / axônios, o sinal elétrico é geralmente na faixa de microvolts, perto da magnitude do ruído térmico / branco associado com uma configuração típica de gravação bioelétrica, tornando a redução de ruído a primeira prioridade para gravação de sucesso. Para isolar de forma mais eficaz de ruído elétrico ambiente, ele pode ser útil para colocar a câmara de tecido, de gravação e de aterramento eletrodos, o amplificador diferencial (DC alimentado por bateria) e ao microscópio estereoscópico em uma gaiola de Faraday. Se artefato movimentos ocorrer, colocando a gaiola de Faraday sobre uma mesa de ar pneumático para amortecer a vibração mecânica é útil. O ideal é que a gravação e os eléctrodos de referência que entram no "+" e "-" portos do amplificador diferencial, respectivamente, deve ter comparável impedância em relação ao seu terreno comum e estar localizado perto uns dos outros. Assim, qualquer ruído externo será gravado sobre partes iguais pelos dois eletrodos para ser submetido ao rigoroso modo comum de rejeição pelo amplificador diferencial.
Na nossa configuração (Figura 2A), o eléctrodo de referência é mergulhado na solução de perfusão de Krebs na câmara de tecido enquanto que o eléctrodo de gravação está em contacto com um nervo filamento fino de impedância considerável. Esta configuração single-eletrodo com uma diferença de impedância não trivial geralmente não é ideal para redução de ruído. No entanto, esta configuração oferece a conveniência de colocação do filamento nervo finas sobre apenas um electrode, o que é particularmente atraente quando a gravação a partir do mouse filamentos nervosos colorretais de comprimento reduzido (10-15 mm). Com base em nossa experiência, a configuração single-eletrodo é aceitável quando o ruído de fundo de pico-a-pico é abaixo de 20 mV no registro. Caso contrário, a redução ainda mais o ruído exigiria uma configuração de gravação de dois eléctrodos, em que o filamento fino nervo tem que estar em contacto com ambos os eléctrodos de referência e de gravação, dispostas paralelamente umas às outras. Todas as grandes peças de metal dentro da gaiola de Faraday precisa ser aterrado de forma semelhante a estrela de um terreno comum, um bloco de cobre em nossa configuração. Cuidado deve ser tomado para evitar a formação de loops de terra.
Para assegurar a detecção de APs extracelular, o primeiro passo é a dissecção do tecido bem sucedida colorectum-nervo. Beliscar ou puxando o nervo durante a dissecção deve ser evitada, o que pode causar danos irreversíveis ao nervo e afetar a condução AP. O caule nervo dissecado também precisa de to ser livre de qualquer tecido do músculo ligado, que vaza de potássio quando danificado e pode bloquear a condução nervosa por despolarização. Esta habilidade dissecção é geralmente adquirida através da prática diligente ao longo de semanas a meses e exige um elevado nível de coordenação olho-mão e destreza no manuseio e uso de instrumentos cirúrgicos. Além disso, para evitar danos ao tecido colorectal, a estratégia de pesquisa eléctrica utiliza um eléctrodo concêntrica que tem um rombo, ponta arredondada e de diâmetro relativamente grande (externo Φ0.55 mm, interno Φ0.125 mm) e está ligada a um micromanipulador pela uma ponte em conformidade, resultando numa força mecânica modesto aplicado à superfície mucosa (~ 100 mg). A fim de adquirir um sinal maior no rastreio de gravação, a corrente transmembranar induzido por AP precisa de ser canalizado e "preso" no eléctrodo através da criação de uma pequena ponte de impedância entre o axónio do nervo (s) e a superfície do eléctrodo. Assim, o epineuro e perineuro que isolaro nervo precisa ser dissecado livre durante o processo de dividir o nervo em filamentos finos de ~ 10 mm de espessura. Porque a corrente transmembranar induzido por AP dissipa consideravelmente dentro de uma curta distância da membrana axonal um filamento mais fina do nervo geralmente resulta em uma melhor relação sinal-para-ruído devido à proximidade dos axónios mais perto da superfície do eléctrodo. Na câmara de óleo mineral, o espelho que o nervo é muitas vezes colocada sobre atrai uma camada fina de solução de Krebs (a superfície do vidro é hidrófilo). Assim, é necessário que o eléctrodo de registo e de filamentos nervo não estão em contacto com a superfície do espelho durante a gravação. Quaisquer gotas residuais de solução de Krebs, que fornecem uma ponte de baixa impedância entre o eletrodo e a superfície do espelho (ou seja, o desvio) irá reduzir significativamente a amplitude do sinal no registro.
Esta preparação colorectum-nervo permite o estudo de alterações funcionais de aferentes depois de exporFR para uma variedade de mediadores químicos e insultos in vitro, assim como no contexto de condições fisiopatológicas a longo prazo (por exemplo, colorectums tomadas de ratinhos tratados previamente). Uma medida objetiva de alterações funcionais de aferentes depende do seguinte: 1) um estímulo padronizado com alta precisão e reprodutibilidade e 2) as respostas aferentes que são robustas e reprodutível. Dos três estímulos mecânicos aplicados ao colorectum, estímulos da RF de sondagem e acariciando são frequentemente entregues por portáteis von monofilamentos Frey-like. Para sondagem, o monofilamento é geralmente calibrado para fornecer uma força perpendicular reprodutível quando dobra. Monofilamentos No entanto, von Frey-like (0,4 g) e 1 têm pequenos e diferentes diâmetros transversais em corte (0,2 e 0,3 mm, respectivamente), o que resulta numa alta tensão nominal quando aplicado perpendicularmente à superfície colorretal (124,8 kPa durante 0,4 ge 138,7 kPa para 1 g), um intenso estímulo mecânico, pontuada beyond da faixa fisiológica normal. Além disso, a extremidade afiada do filamento causa provável distribuição desigual de tensões focal com pico de tensão consideravelmente mais elevada do que a tensão nominal (concentração de tensão). Dado que o tamanho típico de RF (1 mm 2) é significativamente maior do que a secção transversal de um monofilamento, e a incapacidade de estimular de forma reprodutível o local idêntico com um monofilamento de mão, é comum observar as respostas a estímulos repetitivos que diferem significativamente em frequência e duração AP. Como um exemplo, as respostas a sondagem mostrado na Figura 2C pelo mesmo monofilamento de mão (1 g), o que provavelmente variou consideravelmente são contribuídos por uma incapacidade para sondar o local reprodutivelmente idênticos e duração variável e intervalo entre estímulos consecutivos. Mucosa afaga entregue por um filamento de mão é semelhante desafiador e também tende a evocar respostas variáveis do mesmo aferentes. Estímulo reprodutibilidade pode sermelhorada pela utilização de um computador controlado por força do actuador para proporcionar forças precisas sondagem (e estiramento). Para sondagem, usamos um monofilamento com um diâmetro maior (por exemplo, # 6,45, 1 mm), que cobre mais plenamente a RF aferentes típico 24,28. Controlado por computador estiramento circunferencial, ao contrário de outras abordagens de alongamento do tecido voltadas para o RF, permite a deformação homogénea em todo o comprimento do colorectum, tornando possível a correlação com a distensão colorectal na sua configuração cilíndrica original, baseada sobre o stress mecânico circunferencial comparável (isto é, 0 - 170 mN estiramento é equivalente a 0 - 45 mm Hg de pressão intraluminal 23). Como a força de estiramento é aplicada de maneira uniforme na borda anti-mesentérica, não diretamente para a RF, a tensão mecânica local evocado na RF aferentes é reprodutível entre aplicações consecutivas de stretch. Além disso, a faixa tipo L de Ca2 + bloqueador do canal de nifedipina adicionado ao banho de inhibit contração do músculo liso espontânea, contribui para a manutenção da conformidade colorretal entre os testes de estiramento em rampa 23. Finalmente, as respostas aferentes para o protocolo de estiramento em rampa provaram ser reprodutível com uma pequena variabilidade tanto na função limiar do estímulo-resposta e resposta (por exemplo, Figura 4). Assim, as respostas aferentes para esticar rampa têm sido amplamente utilizados como uma avaliação objetiva das mudanças de função aferentes em estudar os mecanismos neuronais de dor e hipersensibilidade visceral (por exemplo, 19-22,24,26,28-31).
A preparação colorectum-nervo é uma ferramenta poderosa para o estudo dos aferentes viscerais colorretais. Contudo, também tem algumas limitações. Em primeiro lugar, os axônios dos corpos celulares dos neurônios sensitivos no gânglio da raiz dorsal são seccionadas na preparação, o que impossibilitou o estudo das identidades moleculares desses corpos celulares (por exemplo, uma única célula RT-PCR ou transcriptome análise das diferentes classes de aferentes colorretais). Em segundo lugar, a baixa relação sinal-ruído da gravação de fibra única exige Dissecção / nervosas habilidades divisão cirúrgicos ideais e gravação de baixo ruído, limitando significativamente maior aplicação deste protocolo em outros laboratórios. Em terceiro lugar, esta preparação in vitro pode não ser aplicável para as investigações de factores sistémicos que modulam a sensação visceral, tais como o sistema nervoso autónomo, hormonas e citocinas, que circula microbiota intestinal, e modulação descendente a partir do sistema nervoso central.
The authors have nothing to disclose.
Supported by NIH award R01 DK093525 (GFG). We greatly appreciate the scientific review and grammatical editing of the manuscript by Dr. Amber Shaffer (University of Pittsburgh) and thank Michael Burcham for assistance in preparation of figures.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Leica MZ16 stereo microscope | Leica Microsystems Inc. | ||
Leica IC D camera | Leica Microsystems Inc. | ||
Amplifier | World Precision instruments, Inc. | SYS-DAM80 | Low-noise differential amplifier |
Two-compartment tissue chamber | Custom made | ||
Power1401 | Cambridge Electronic Design Limited | Power1401 | Data acquisition, analog signal input/out |
Spike2 v5.02 | Cambridge Electronic Design Limited | Software package that works with the Power1401 | |
Audio monitor | Natus | Am 8 | |
Square pulse stimulator | Natus | S48 | To deliver electrical stimuli |
Photoelectric isolation unit | Natus | PSIU6 | Stimulus isolation to reduce noise |
Concentric bipolar microelectrode | FHC Inc. | CBFFG75 | To deliver electrical stimuli |
Dual-mode lever system | Aurora Scientific Inc. | Series 300C | To deliver mechanical stimuli |
Forceps | Fine Science Tools | 11252-00 | Forceps with fine tips |
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