JoVE Journal

Biochemistry

Masz pełny dostęp do tej treści za pośrednictwem

Nanyang Technological University

Identification of Small Molecule-binding Proteins in a Native Cellular Environment by Live-cell Photoaffinity Labeling

We describe here a method for identification of small molecule-binding proteins using photoaffinity labeling. The advantage of this technique is that binding and covalent labeling of the target proteins occurs within the live cellular environment, removing the risk of disrupting native protein structure and binding conditions upon cell lysis.

Rozdziały w tym wideo

0:05

Title

0:43

Preparation of Cultured Cells

1:23

Treatment of Cells and Photocrosslinking

4:34

Attachment of Fluorescent Tag by Click Chemistry for Visualization of Labeled Proteins

5:48

Attachment of Biotin Tag by Click Chemistry for Affinity Purification of Labeled Proteins

8:54

Results: Live-cell Photoaffinity Labeling Identifies a Major Itraconazole-binding Protein

10:14

Conclusion

Powiązane Filmy

Używamy plików cookie, aby ulepszyć Twoje wrażenia z korzystania z naszej witryny.

Kontynuując korzystanie z naszej witryny lub klikając „Kontynuuj”, wyrażasz zgodę na akceptację naszych plików cookie.