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<em>In vivo</em> Imaging of Transgenic <em>Leishmania</em> Parasites in a Live Host

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Washington University School of Medicine

&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x8981;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316; Stat1&#xFF0C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &#xFF08;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#xFF09; &#x76D1;&#x7BA1;&#x56E0;&#x5B50;-1 (IRF-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x548C; IRF 2 &#x4EBA;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x66B4;&#x9732;&#x540E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x3001; SKBR3&#x3001; MDA468&#x3001; MCF7&#x3001; &#x548C; BT20&#x3002;&#x4ECE;&#x589E;&#x957F;&#x5316;&#x9A8C;&#x3001; &#x897F;&#x65B9;&#x67D3;&#x8272;&#x3001; &#x7535;&#x6CF3;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7387;&#x6539;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5; (EMSA) &#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x67D3;&#x8272;&#x7ED3;&#x679C;&#x6574;&#x7406;&#x6765;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE; Stat1&#x3001; IRF-1 &#x548C; IRF 2 &#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x5C06;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6709;&#x5173;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BF;&#x7624;&#x7CFB;&#x7684;&#x5176;&#x4ED6;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;&#x5730;&#x9AD8;&#x8F9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x884C;&#x4E2D;&#x7684;&#x6BCF;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;Stat1 &#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x8868;&#x660E;&#x529F;&#x80FD;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x897F;&#x65B9;&#x548C;&#x5730;&#x9AD8;&#x8F9B;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E; IRF 1 &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; IRF 2 &#x8868;&#x8FBE;&#x4E0A;&#x8C03;&#xFF0C;&#x5728;&#x6BCF;&#x884C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5171;&#x805A;&#x7126;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x67D3;&#x8272; Stat1&#x3001; IRF-1 &#x548C; IRF 2 &#x8BC1;&#x5B9E;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x548C;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x578B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x7B54;&#x590D;&#x4E2D;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4FE1;&#x606F;&#x3002;IRF 1 &#x523A;&#x6FC0;&#x4E0E;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x4E0E;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x751F;&#x957F;&#x6291;&#x5236;&#x4F53;&#x5916;&#x5448;&#x663E;&#x8457;&#x6B63;&#x76F8;&#x5173;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x56DB;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x4E0A;&#x8C03;&#x975E;&#x5747;&#x8D28;&#x6027;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5E72;&#x6270;&#x7D20; &gamma; &#x6FC0;&#x6D3B; Stat1 &#x548C;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8C03;&#x8282;&#x56E0;&#x5B50; 1 &#x548C; 2 &#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x3002;

The aim of the present work was to evaluate the induction and localization of Stat1, interferon (IFN) regulatory factor-1 (IRF-1), and IRF-2 after IFN-gamma exposure of human breast cancer cell lines, SKBR3, MDA468, MCF7, and BT20. Results from growth assays, Western staining, electrophoretic mobility shift assay (EMSA), and immunohistochemical staining were collated to test our hypothesis that immunohistochemical analysis of Stat1, IRF-1, and IRF-2 would provide additional information about the functionality of the IFN-gamma signaling pathway in human tumor lines. EMSA results showed that in each of four cell lines, Stat1 expression was increased and demonstrated functional activity after IFN-gamma stimulation. Western and EMSA analysis showed upregulation of IRF-1 but not IRF-2 in each cell line. Confocal microscopy of cells stained for Stat1, IRF-1, and IRF-2 confirmed the results and also provided novel information about the intracellular localization of proteins and intercellular variations in responses. The proportion of cells with IRF-1 stimulation and translocation was positively correlated with the IFN-gamma growth suppression in vitro. In conclusion, using four independent assays, we have demonstrated that heterogeneity in IFN-gamma-mediated upregulation of signal transduction proteins can be detected in vitro and that these differences can explain distinct cellular growth effects.

Localization of IFN-gamma-activated Stat1 and IFN regulatory factors 1 and 2 in breast cancer cells.

Le but de ce travail &eacute;tait d&#39;&eacute;valuer l&#39;induction et la localisation de Stat1, facteur r&eacute;glementaire de l&#39;interf&eacute;ron (IFN)-1 (IRF-1), et l&#39;IRF-2 apr&egrave;s une exposition de cancer du sein humain IFN-gamma cell lignes, SKBR3, MDA468 et MCF7 BT20. R&eacute;sultats des essais de croissance, coloration &agrave; l&#39;Ouest, test mobilit&eacute; &eacute;lectrophor&eacute;tique (EMSA) et la coloration immunohistochimique ont &eacute;t&eacute; rassembl&eacute;es pour tester notre hypoth&egrave;se que l&#39;analyse immunohistochimique de Stat1 IRF-1 et de l&#39;IRF-2 offrirait plus d&#39;informations sur la fonctionnalit&eacute; de la voie de signalisation de IFN-gamma dans les lign&eacute;es tumorales humaines. EMSA r&eacute;sultats ont montr&eacute; que dans chacune des quatre lign&eacute;es cellulaires, l&#39;expression de Stat1 a augment&eacute; et a d&eacute;montr&eacute; une activit&eacute; fonctionnelle apr&egrave;s stimulation de l&#39;IFN-gamma. Analyse Western et l&#39;EMSA a montr&eacute; r&eacute;gulation positive de l&#39;IRF-1 mais pas IRF-2 dans chaque lign&eacute;e cellulaire. La microscopie confocale de cellules color&eacute;es pour Stat1 et Fri-2 IRF-1 a confirm&eacute; les r&eacute;sultats et les informations nouvelles fournies au sujet de la localisation intracellulaire des prot&eacute;ines et intercellulaires variations dans les r&eacute;ponses. La proportion de cellules avec une stimulation IRF-1 et la translocation &eacute;tait en corr&eacute;lation positive avec la suppression de la croissance IFN-gamma in vitro. En conclusion, &agrave; l&#39;aide de quatre essais ind&eacute;pendants, nous avons d&eacute;montr&eacute; que l&#39;h&eacute;t&eacute;rog&eacute;n&eacute;it&eacute; dans l&#39;augmentation induite par l&#39;IFN-gamma des prot&eacute;ines de transduction du signal peut &ecirc;tre d&eacute;tect&eacute;e in vitro et que ces diff&eacute;rences peuvent expliquer les effets sur la croissance cellulaire distincts.

Localisation de l&#39;IFN-gamma activ&eacute;e Stat1 et IFN facteurs de r&eacute;gulation 1 et 2 dans les cellules canc&eacute;reuses du sein.

Lokalisierung von IFN-gamma-aktivierte Stat1 und IFN regulatorischen Faktoren 1 und 2 in Brustkrebszellen.

Lo scopo del presente lavoro &egrave; stato di valutare l&#39;induzione e la localizzazione di Stat1, interferone (IFN) regolamentazione factor-1 (IRF-1), e IRF-2 dopo l&#39;esposizione di IFN-gamma di cancro al seno umano cell lines, SKBR3, MDA468, MCF7 e BT20. Risultati dei saggi di crescita, macchia occidentale, analisi di spostamento di mobilit&agrave; elettroforetica (EMSA) e colorazione immunoistochimica erano fascicolati per testare la nostra ipotesi che l&#39;analisi di immunohistochemical di Stat1, IRF-1 e IRF-2 sarebbe fornire ulteriori informazioni sulle funzionalit&agrave; della via di segnalazione di IFN-gamma in linee tumorali umane. EMSA risultati hanno mostrato che in ciascuna delle quattro linee cellulari, Stat1 espressione era aumentato e ha dimostrato attivit&agrave; funzionale dopo stimolazione di IFN-gamma. Analisi occidentale e l&#39;EMSA ha mostrato sovraregolazione di IRF-1 ma non IRF-2 in ciascuna linea cellulare. Microscopia confocale delle cellule colorate per Stat1, IRF-1 e IRF-2 ha confermato i risultati e anche romanzo informazioni circa la localizzazione intracellulare di proteine e intercellulare variazioni nelle risposte. La percentuale di cellule con stimolazione IRF-1 e traslocazione &egrave; stata positivamente correlata con la soppressione di crescita di IFN-gamma in vitro. In conclusione, utilizzando quattro saggi indipendenti, abbiamo dimostrato che eterogeneit&agrave; in IFN-gamma-mediata upregulation delle proteine di trasduzione del segnale pu&ograve; essere rilevata in vitro e che queste differenze possono spiegare gli effetti distinti di crescita cellulare.

Localizzazione di IFN-gamma-attivato Stat1 e IFN normativi fattori 1 e 2 in cellule di cancro al seno.

&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; (IFN) &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x56E0; 1 (IRF-1)&#x3001;Stat1 &#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x3066; IRF-2 &#x3072;&#x3068;&#x4E73;&#x764C;&#x306E; IFN-&gamma; &#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;SKBR3&#x3001;MDA468&#x3001;MCF7 &#x3068; BT20&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x8A66;&#x91D1;&#x3001;&#x897F;&#x90E8;&#x67D3;&#x8272;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x306E;&#x79FB;&#x52D5;&#x6027;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x8A66;&#x91D1; (EMSA) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x67D3;&#x8272;&#x306E;&#x7D50;&#x679C; Stat1&#x3001;IRF-1&#x3001;IRF 2 &#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x306E; IFN-&gamma; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x308D;&#x3046;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7167;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3002;&#x5404;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E; 4 &#x884C;&#x306E; Stat1 &#x5F0F;&#x5897;&#x8CC7;&#x3057;&#x3001;IFN-&gamma; &#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x5B9F;&#x8A3C; EMSA &#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8A8D;&#x3081;&#x305F;&#x897F;&#x6D0B;&#x3068; EMSA &#x5206;&#x6790;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; IRF 1 &#x304C;&#x306A;&#x3044; IRF 2 &#x306E;&#x5404;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x884C;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; Stat1&#x3001;IRF-1&#x3001;IRF 2 &#x306E;&#x67D3;&#x8272;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3082;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x5909;&#x52D5;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B0;&#x898F;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;IRF 1 &#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F; in vitro &#x306E; IFN-&gamma; &#x6210;&#x9577;&#x6291;&#x5236;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E; IFN-&gamma; &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E0D;&#x5747;&#x4E00;&#x3092; in vitro &#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x660E;&#x77AD;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x306B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x304C; 4 &#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3002;

IFN &gamma; &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; Stat1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; IFN &#x898F;&#x5236;&#x8981;&#x56E0; 1 &#x3068; 2 &#x3067;&#x4E73;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3002;

&#xD604;&#xC7AC; &#xC791;&#xC5C5;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC720;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Stat1, &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; (IFN) &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 1 (IRF-1)&#xC758; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC720;&#xBC29;&#xC554;&#xC758; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; IRF-2 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;, SKBR3, MDA468, MCF7, &#xBC0F; BT20. &#xC131;&#xC7A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xC11C;&#xC591; &#xC5BC;&#xB8E9;, &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB3D9;&#xC131; &#xAD50;&#xB300; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; (EMSA), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; immunohistochemical &#xCC29; &#xC0C9;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; Stat1, IRF 1 &#xBC0F; IRF 2&#xC758; immunohistochemical &#xBD84;&#xC11D; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC885;&#xC591; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xAC83;&#xC774; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558; &#xD55C; &#xBD80;&#xC529; &#xC778;&#xC1C4; &#xD588;&#xB2E4;. EMSA &#xACB0;&#xACFC; &#xAC01;&#xAC01; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;, Stat1 &#xC2DD; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC0F; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC790;&#xADF9; &#xD6C4; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC591;&#xACFC; EMSA &#xBD84;&#xC11D; &#xAC01; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; IRF 1&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; IRF 2&#xC758; upregulation&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. Confocal &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; Stat1, IRF 1&#xC640; IRF 2 &#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xB4DC; &#xC140;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xACF5; &#xB41C; &#xC18C;&#xC124; &#xC815;&#xBCF4; &#xD655;&#xC778;. IRF 1 &#xC790;&#xADF9;&#xC640; &#xC804; &#xC140;&#xC758; &#xBE44;&#xC728;&#xC740; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; upregulation IFN-&#xAC10;&#xB9C8; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xBC0F; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;.

IFN-&#xAC10;&#xB9C8;-&#xD65C;&#xC131;&#xD654; Stat1 &#xBC0F; IFN &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC778; 1&#xACFC; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; 2&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;.

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la inducci&oacute;n y la localizaci&oacute;n de Stat1, factor regulador de interfer&oacute;n (IFN)-1 (Fig-1), y l&iacute;neas, SKBR3, MDA468 y MCF7 BT20 de la c&eacute;lula de IRF-2 despu&eacute;s de la exposici&oacute;n de IFN-gamma del c&aacute;ncer de mama humano. Se compilaron los resultados de ensayos de crecimiento, tinci&oacute;n occidental, an&aacute;lisis de cambio de movilidad electrofor&eacute;tica (EMSA) y tinci&oacute;n inmunohistoqu&iacute;mica para probar nuestra hip&oacute;tesis que an&aacute;lisis immunohistochemical de Stat1, IRF-1 y 2-IRF proporcionar&iacute;a informaci&oacute;n adicional acerca de la funcionalidad de la v&iacute;a de se&ntilde;alizaci&oacute;n de IFN-gamma en l&iacute;neas tumorales humanas. EMSA resultados mostraron que en cada una de las cuatro l&iacute;neas celulares, expresi&oacute;n de Stat1 aument&oacute; y demostr&oacute; actividad funcional despu&eacute;s del est&iacute;mulo de IFN-gamma. El an&aacute;lisis occidental y EMSA demostr&oacute; upregulation de IRF-1 pero no IRF-2 en cada l&iacute;nea celular. Microscopia confocal de c&eacute;lulas te&ntilde;idas de Stat1, IRF-1 y 2-IRF confirm&oacute; los resultados y tambi&eacute;n nueva informaci&oacute;n sobre la localizaci&oacute;n intracelular de prote&iacute;nas e intercelulares variaciones en las respuestas. La proporci&oacute;n de c&eacute;lulas con estimulaci&oacute;n de IRF-1 y desplazamiento se correlacion&oacute; positivamente con la supresi&oacute;n del crecimiento de IFN-gamma in vitro. En conclusi&oacute;n, utilizando cuatro ensayos independientes, hemos demostrado que puede detectarse en vitro heterogeneidad en upregulation mediada por IFN-gamma de las prote&iacute;nas de transducci&oacute;n de se&ntilde;al y que estas diferencias pueden explicar los efectos distintos de crecimiento celular.

Localizaci&oacute;n de IFN-gamma-activado Stat1 y IFN factores reguladores 1 y 2 en las c&eacute;lulas de c&aacute;ncer de mama.

&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x529F;&#x80FD;&#x662F;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x80F8;&#x82F7;&#x9178;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x9700;&#x8981; 5&#xFF0C;10-&#x7532;&#x57FA;&#x56DB;&#x6C22;&#x53F6;&#x9178; &#xFF08;5,10-CH(2)-THF)&#x3002;&#x7531;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x88C2;&#x89E3;&#x590D;&#x6742; &#xFF08;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#xFF09;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4ECE;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x5408;&#x6210; 5&#xFF0C;10-CH 2-&#x56DB;&#x6C22;&#x544B;&#x5583;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x4FE1;&#x606F;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A; L.&#x4E3B;&#x8981;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x5728;&#x56DB;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x57FA;&#x548C;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x5728;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x6BD2;&#x529B;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x901A;&#x8FC7; P &#x4E9A; (&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x8131;&#x7FA7;&#x9176; (GCVP)&#xFF09; &#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684; GCVP &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x8868;&#x793A;&#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x4E3A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#xFF0C;gcvP(-) &#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x91CD;&#x5927;&#x6D77;&#x5408;&#x4F1A;&#x6D3B;&#x52A8;&#x540E;&#x5C06;&#x7EB3;&#x5165; DNA &#x6807;&#x7B7E; [2-14 C] &#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x4ECE;&#x4F7F;&#x7528;&#x95F4;&#x63A5;&#x4F53;&#x5185;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;GcvP(-) &#x7A81;&#x53D8;&#x589E;&#x957F;&#x5DEE;&#x8FC7;&#x5269;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x6216;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x6700;&#x5C0F; &#xFF1B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8FD8;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86; L.&#x4E3B;&#x8981; promastigotes &#x7684;&#x6700;&#x4F73;&#x751F;&#x957F;&#x9700;&#x8981;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x3002;&#x867D;&#x7136; gcvP(-) promastigotes &#x548C; amastigotes &#x663E;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x611F;&#x67D3;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x654F;&#x611F;&#x6216;&#x8010;&#x836F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5F62;&#x5F0F;&#x663E;&#x793A;&#x5927;&#x5927;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x53CA;&#x75C5;&#x53D8;&#x7684;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x968F;&#x7740;&#x611F;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x6240;&#x4EE5;&#x505A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x590D;&#x5236;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x7EA6;&#x675F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x610F;&#x4E49;&#x7684;&#x6BD2;&#x6027;&#x4EE3;&#x8C22;&#x8981;&#x6C42;&#x89E3;&#x91CA;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x547C;&#x5401;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x56DB;&#x6C22;&#x5173;&#x952E;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E2D;&#x95F4; 5&#xFF0C;10-CH 2-&#x544B;&#x5583;&#xFF0C;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x3001; &#x548C;&#x80F8;&#x82F7;&#x9178;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4EA4;&#x754C; trypanosomatid &#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x79CD;&#x9525;&#x4F53;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x4F9D;&#x8D56; 2-&#x56DB;&#x6C22;&#x544B;&#x5583; 5&#xFF0C;10-CH &#x5408;&#x6210;&#x6D77;&#x6E7E;&#x5408;&#x4F5C;&#x59D4;&#x5458;&#x4F1A;&#x3002;

&#x7EBF;&#x7C92;&#x4F53;&#x7518;&#x6C28;&#x9178;&#x88C2;&#x89E3;&#x590D;&#x6742;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x539F;&#x751F;&#x52A8;&#x7269;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x81F4;&#x75C5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

For the human pathogen Leishmania major, a key metabolic function is the synthesis of thymidylate, which requires 5,10-methylenetetrahydrofolate (5,10-CH(2)-THF). 5,10-CH(2)-THF can be synthesized from glycine by the mitochondrial glycine cleavage complex (GCC). Bioinformatic analysis revealed the four subunits of the GCC in the L. major genome, and the role of the GCC in parasite metabolism and virulence was assessed through studies of the P subunit (glycine decarboxylase (GCVP)). First, a tagged GCVP protein was expressed and localized to the parasite mitochondrion. Second, a gcvP(-) mutant was generated and shown to lack significant GCC activity using an indirect in vivo assay after incorporation of label from [2-(14)C]glycine into DNA. The gcvP(-) mutant grew poorly in the presence of excess glycine or minimal serine; these studies also established that L. major promastigotes require serine for optimal growth. Although gcvP(-) promastigotes and amastigotes showed normal virulence in macrophage infections in vitro, both forms of the parasite showed substantially delayed replication and lesion pathology in infections of both genetically susceptible or resistant mice. These data suggest that, as the physiology of the infection site changes during the course of infection, so do the metabolic constraints on parasite replication. This conclusion has great significance to the interpretation of metabolic requirements for virulence. Last, these studies call attention in trypanosomatid protozoa to the key metabolic intermediate 5,10-CH(2)-THF, situated at the junction of serine, glycine, and thymidylate metabolism. Notably, genome-based predictions suggest the related parasite Trypanosoma brucei is totally dependent on the GCC for 5,10-CH(2)-THF synthesis.

The role of the mitochondrial glycine cleavage complex in the metabolism and virulence of the protozoan parasite Leishmania major.

Pour le pathog&egrave;ne humain Leishmania majeur, des fonctions m&eacute;taboliques essentielles est la synth&egrave;se de thymidylate, qui exige de 5, 10-m&eacute;thyl&egrave;net&eacute;trahydrofolate (5,10-CH(2)-THF). 5,10-CH 2-THF peut &ecirc;tre synth&eacute;tis&eacute;e &agrave; partir de glycine par le clivage de la glycine mitochondrial complex (GCC). L&#39;analyse bioinformatique a r&eacute;v&eacute;l&eacute; les quatre sous-unit&eacute;s du CCG dans le g&eacute;nome de majeur de L., et le r&ocirc;le du CCG dans le m&eacute;tabolisme du parasite et la virulence a &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute; au moyen d&#39;&eacute;tudes de la sous-unit&eacute; de P (d&eacute;carboxylase de la glycine (PPVUE)). Tout d&#39;abord, une prot&eacute;ine PPVUE marqu&eacute;e a &eacute;t&eacute; exprim&eacute;e et localis&eacute;e dans la mitochondrie de parasite. Deuxi&egrave;mement, un mutant de gcvP(-) a &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;r&eacute; et illustr&eacute; d&#39;un manque d&#39;activit&eacute; de la GCC &agrave; l&#39;aide d&#39;un test in vivo indirecte apr&egrave;s incorporation de l&#39;&eacute;tiquette, la glycine [C 2-14] dans l&#39;ADN. Le mutant gcvP(-) se d&eacute;veloppe mal en pr&eacute;sence de glycine exc&egrave;s ou s&eacute;rine minime ; Ces &eacute;tudes ont &eacute;galement &eacute;tabli que L. promastigotes majeurs exigent une s&eacute;rine pour une croissance optimale. Bien que les amastigotes et promastigotes gcvP(-) montr&eacute; virulence normale dans les infections de macrophages in vitro, les deux formes du parasite pathologie consid&eacute;rablement retard&eacute;e de r&eacute;plication et de la l&eacute;sion dans les infections des souris g&eacute;n&eacute;tiquement sensibles ou r&eacute;sistantes. Ces donn&eacute;es sugg&egrave;rent que, comme la physiologie du site infection change au cours de l&#39;infection, alors faire les contraintes m&eacute;taboliques sur la r&eacute;plication du parasite. Cette conclusion a une grande signification pour l&#39;interpr&eacute;tation des besoins m&eacute;taboliques de virulence. Enfin, ces &eacute;tudes attirer l&#39;attention dans les protozoaires trypanosomatide &agrave; la cl&eacute; m&eacute;tabolique interm&eacute;diaire 5,10-CH 2-THF, situ&eacute; &agrave; la jonction de la s&eacute;rine, glycine et thymidylate m&eacute;tabolisme. Notamment, ax&eacute;e sur le g&eacute;nome indique-t-elle que la connexes parasite Trypanosoma brucei est totalement d&eacute;pendant de la GCC pour la synth&egrave;se de 5, 10-CH 2-THF.

Le r&ocirc;le du clivage mitochondrial glycine complex dans le m&eacute;tabolisme et la virulence du parasite protozoaire Leishmania majeur.

F&uuml;r die Erreger der menschlichen Leishmania major ist eine wesentliche metabolische Funktion die Synthese von Thymidylat, wonach 5,10-Tetrahydrofolat (5,10-CH(2)-THF). 5,10-CH 2-THF kann durch die mitochondriale Glycin Spaltung komplexe (GCC) aus Glycin synthetisiert werden. Bioinformatische Analyse ergab die vier Untereinheiten des GCC im gro&szlig;en L. Genom und die Rolle des GCC in Parasit Stoffwechsel und Virulenz durch Studien &uuml;ber die P-Untereinheit (Glycin-Decarboxylase (GCVP)) beurteilt wurde. Zun&auml;chst war eine markierte GCVP-Protein ausgedr&uuml;ckt und auf die Parasiten Mitochondrium lokalisiert. Zweitens wurde eine gcvP(-) Mutante generiert und signifikante GCC-Aktivit&auml;t, die ein indirektes in-vivo-Testsystem nach Einbeziehung der Label aus [2-14 C] Glycin in DNA mit Mangel an gezeigt. Der gcvP(-)-Mutant wuchs schlecht in Anwesenheit von &uuml;bersch&uuml;ssigen Glycin oder Serin minimal; Diese Studien richtete auch, dass gro&szlig;e Promastigotes L. Serin f&uuml;r optimales Wachstum ben&ouml;tigen. Obwohl gcvP(-) Promastigotes und Amastigotes normaler Virulenz in Makrophagen Infektionen in vitro beide Formen des Parasiten zeigte erheblich verz&ouml;gerte Replikation und L&auml;sion Pathologie bei Infektionen von genetisch anf&auml;llig oder resistente M&auml;use zeigten. Diese Daten legen nahe, dass die Physiologie des Standortes Infektion im Verlauf der Infektion &auml;ndert, die metabolischen Beschr&auml;nkungen der Parasit Replikation auch. Diese Schlussfolgerung hat gro&szlig;en Bedeutung f&uuml;r die Auslegung der metabolischen Anforderungen f&uuml;r Virulenz. Schlie&szlig;lich aufmerksam diese Studien in Trypanosomatid Protozoen zu den wichtigsten metabolische Mittelstufe 5,10-CH 2-THF, liegt an der Kreuzung von Serin, Glycin und Thymidylat-Stoffwechsel. Insbesondere deuten Genom-basierte Vorhersagen der Verwandte Parasiten Trypanosoma Brucei v&ouml;llig abh&auml;ngig von den GCC f&uuml;r 5,10-CH 2-THF-Synthese.

Die Rolle der mitochondrialen Glycin Zwiespalt in den Stoffwechsel und die Virulenz der Protozoen-Parasiten Leishmania gro&szlig;e komplexe.

Per l&#39;agente patogeno umano Leishmania major, una fondamentale funzione metabolica &egrave; la sintesi di timidilato, che richiede 5,10-metilenetetraidrofolato (5,10-CH(2)-THF). 5,10-CH (2)-THF pu&ograve; essere sintetizzato dalla glicina da complesso di clivaggio glicina mitocondriale (GCC). L&#39;analisi bioinformatica ha rivelato le quattro subunit&agrave; del GCC nel genoma major L., e il ruolo del GCC nel metabolismo del parassita e virulenza &egrave; stato valutato attraverso studi della subunit&agrave; P (decarbossilasi glicina (GCVP)). In primo luogo, una proteina GCVP tagged &egrave; stato espresso e localizzata per il Mitocondrio parassita. In secondo luogo, un mutante di gcvP(-) &egrave; stato generato e mostrato mancanza di significative attivit&agrave; GCC utilizzando un test in vivo indiretta dopo incorporazione dell&#39;etichetta da [C 2-14] glicina nel DNA. Il mutante gcvP(-) &egrave; cresciuto poco in presenza di eccesso glicina o serina minimal; questi studi ha inoltre stabilirono che promastigotes major L. richiedono serina per una crescita ottimale. Sebbene amastigoti e gcvP(-) promastigotes hanno mostrato normale virulenza nelle infezioni dei macrofagi in vitro, entrambe le forme del parassita ha mostrato sostanzialmente ritardato replica e lesione patologia nelle infezioni di topi geneticamente sensibili o resistenti. Questi dati suggeriscono che, come la fisiologia del sito di infezione cambia durante il corso dell&#39;infezione, cos&igrave; fanno i vincoli metabolici sulla replica del parassita. Questa conclusione ha un grande significato per l&#39;interpretazione delle esigenze metaboliche di virulenza. Infine, questi studi richiamare l&#39;attenzione in trypanosomatid protozoi per la chiave metabolica intermedio 5,10-CH (2)-THF, situata all&#39;incrocio di Serina, glicina e timidilato metabolismo. In particolare, le previsioni basate su genoma suggeriscono il relativo parassita Trypanosoma brucei &egrave; totalmente dipendente da GCC per 5,10-CH (2)-sintesi THF.

Il ruolo del clivaggio di glicina mitocondriale complesso il metabolismo e la virulenza del parassita protozoo Leishmania major.

&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E; 5, 10-&#x30E1;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x8449;&#x9178; (5,10-CH(2)-THF)&#x3002; &#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x30C1;&#x30DF;&#x30B8;&#x30EB;&#x9178;&#x5408;&#x6210;&#x3067;&#x3059;&#x3002;5, 10-CH (2)-THF &#x306F;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x5206;&#x88C2;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306A; (GCC) &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x5408;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Bioinformatic &#x306E;&#x5206;&#x6790; L. &#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E; GCC &#x306E; 4 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068; P &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; (&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x30C7;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (GCVP)) &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066; GCC &#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x305F;.&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x3001;&#x30BF;&#x30B0; GCVP &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306B;&#x3001;gcvP(-) &#x5909;&#x7570;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x9593;&#x63A5; in vivo &#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; DNA &#x3078;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EB; [2-14 C] &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x5F8C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A; GCC &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GcvP(-) &#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x904E;&#x5270;&#x306A;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3084;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x305F;;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981; promastigotes L. &#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x6700;&#x9069;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;GcvP(-) promastigotes &#x3068; amastigotes &#x901A;&#x5E38;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;in vitro &#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5F62;&#x5F0F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3084;&#x8010;&#x6027;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3067;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x75C5;&#x5909;&#x306E;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x4E2D;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x3060;&#x304B;&#x3089;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5236;&#x7D04;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306F;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x8981;&#x4EF6;&#x306E;&#x89E3;&#x91C8;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x610F;&#x7FA9;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x79D1;&#x539F;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x4E2D;&#x9593; 5, 10-CH (2) &#x3078;&#x306E;&#x6CE8;&#x76EE;&#x3092;&#x547C;&#x3073;&#x51FA;&#x3059;-THF&#x3001;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x30C1;&#x30DF;&#x30B8;&#x30EB;&#x9178;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x70B9;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D1;&#x30CE;&#x30BD;&#x30FC;&#x30DE;&#x3067;&#x3059; 5, 10-CH (2) &#x7528;&#x306E; GCC &#x3092;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;-THF &#x5408;&#x6210;&#x3002;

&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x539F;&#x866B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3068;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3067;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30DF;&#x30C8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EA;&#x30A2; &#x30B0;&#x30EA;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x88C2;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

Leishmania &#xC8FC;&#xC694; &#xC778;&#xAC04; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;, &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0AC; &#xD568;&#xC218;&#xB294; thymidylate 5,10-methylenetetrahydrofolate (5,10-ch(2)-thf)&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xD569;&#xC131;. 5,10 &#xCC44;&#xB110; (2)-&#xB418; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4; (GCC)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD569;&#xC131; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bioinformatic &#xBD84;&#xC11D; L. &#xC8FC;&#xC694; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; GCC&#xC758; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; GCC&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; P &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; (&#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; decarboxylase (GCVP))&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD3C9;&#xAC00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCCAB;&#xC9F8;, &#xD0DC;&#xADF8; GCVP &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; mitochondrion&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB458;&#xC9F8;, gcvP(-) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; [2-(14) C] &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;&#xC758; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xC774; DNA&#xC5D0; &#xD6C4; &#xAC04;&#xC811; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; GCC &#xD65C;&#xB3D9; &#xBD80;&#xC871;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC;. GcvP(-) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCD08;&#xACFC; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xB610;&#xB294; &#xCD5C;&#xC18C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0;; &#xC874;&#xC7AC; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; L. &#xC8FC;&#xC694; promastigotes &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xC124;&#xB9BD;. GcvP(-) promastigotes &#xBC0F; amastigotes &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC77C;&#xBC18; &#xB3C5;&#xC131; macrophage &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678;, &#xBE44;&#xB85D; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xB450; &#xD615;&#xD0DC; &#xBAA8;&#xB450; &#xC720;&#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC800;&#xD56D; &#xC950;&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xBC0F; &#xBCD1; &#xBCC0;&#xC758; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559; &#xAC10;&#xC5FC; &#xACFC;&#xC815; &#xBCC0;&#xACBD;, &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300;&#xC0AC; &#xC81C;&#xC57D; &#xADF8;&#xB807;&#xAC8C; &#xC54A;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xB860;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D; &#xD574;&#xC11D;&#xC5D0; &#xD070; &#xC758;&#xBBF8;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0AC; &#xC911;&#xAC04; 5,10 &#xCC44;&#xB110; (2)-&#xB418;, &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0;, &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0;, &#xBC0F; thymidylate &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC758; &#xAD50;&#xCC28;&#xC810;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; trypanosomatid &#xC6D0;&#xC0DD; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC744; &#xBD88;&#xB7EC;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xAC8C;&#xB188; &#xAE30;&#xBC18; &#xC608;&#xCE21; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; Trypanosoma brucei 5,10 &#xCC44;&#xB110; (2)-&#xB418; &#xD569;&#xC131; &#xC6A9; GCC&#xC5D0; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC885;&#xC18D; &#xB41C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; Leishmania &#xC8FC;&#xC694; protozoan &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC758; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBBF8;&#xD1A0; &#xCF58; &#xB4DC;&#xB9AC; &#xC544; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC2E0; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Para el pat&oacute;geno humano comandante de Leishmania, una funci&oacute;n metab&oacute;lica dominante es la s&iacute;ntesis de timidilato, que requiere de 5, 10-Metilenotetrahidrofolato (5,10-CH(2)-THF). 5,10-CH 2-THF puede sintetizarse de glicina por el clivaje de la glicina mitocondrial complejo (GCC). An&aacute;lisis bioinform&aacute;tico revelaron las cuatro subunidades del CCG en el genoma de L. principal, y el papel del CCG en metabolismo del par&aacute;sito y virulencia se evalu&oacute; a trav&eacute;s de estudios de la subunidad de P (decarboxilasa de la glicocola (GCVP)). En primer lugar, una prote&iacute;na GCVP etiquetada fue expresada y localizada en la mitocondria del par&aacute;sito. En segundo lugar, un mutante de gcvP(-) fue generado y se muestra a la falta de actividad significativa del GCC usando un indirecto an&aacute;lisis in vivo despu&eacute;s de la incorporaci&oacute;n de etiqueta de glicina [2-14 C] en el ADN. El mutante gcvP(-) creci&oacute; mal en presencia de glicina exceso o serina m&iacute;nimo; Estos estudios tambi&eacute;n establecieron que los promastigotes principales L. requieren Serina para un crecimiento &oacute;ptimo. Aunque los amastigotes y gcvP(-) promastigotes mostr&oacute; virulencia normal en infecciones de macr&oacute;fagos in vitro, ambas formas del par&aacute;sito patolog&iacute;a substancialmente retrasada de la replicaci&oacute;n y lesi&oacute;n en infecciones de ratones gen&eacute;ticamente susceptibles o resistentes. Estos datos sugieren que, como la fisiolog&iacute;a del sitio infecci&oacute;n cambia durante el curso de la infecci&oacute;n, tambi&eacute;n lo hacen las restricciones metab&oacute;licas en la replicaci&oacute;n del par&aacute;sito. Esta conclusi&oacute;n tiene gran importancia para la interpretaci&oacute;n de necesidades metab&oacute;licas de virulencia. Por &uacute;ltimo, estos estudios llaman la atenci&oacute;n en protozoos Trypanosomatida a la clave metab&oacute;lico intermedio 5,10-CH 2-THF, situado en el cruce de metabolismo timidilato, glicina y serina. En particular, las predicciones basadas en el genoma sugieren que la relacionados con par&aacute;sito Trypanosoma brucei depende totalmente del GCC para s&iacute;ntesis de 5,10-CH 2-THF.

El papel de la divisi&oacute;n de la glicina mitocondrial complejo en el metabolismo y la virulencia del par&aacute;sito protozoo Leishmania major.

&#x76AE;&#x80A4;&#x9ECF;&#x819C;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x75C5;&#x662F;&#x7531;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B; Viannia &#x5C5E;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B; guyanensis &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x3002;&#x75C5;&#x7406;&#x540E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x4F20;&#x64AD;&#x5230;&#x9F3B;&#x54BD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5730;&#x65B9;&#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7076;&#x5F62;&#x6210;&#x6162;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#xFF0C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x75C5;&#x53D8;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4E86;&#x89E3;&#x5F97;&#x5F88;&#x5C11;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6027;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6709;&#x9AD8;&#x7684;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B; RNA &#x75C5;&#x6BD2;-1 (LRV1) &#x8D1F;&#x62C5;&#x662F;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; 3 (TLR3)&#xFF0C;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x77DB;&#x76FE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B; TLR3 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x5448;&#x73B0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x548C;&#x52A8;&#x7269;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x65E5;&#x76CA;&#x81A8;&#x80C0;&#x7684;&#x6B63;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x5173;&#x7CFB;&#x548C; parasitemia&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5728;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6027;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B; LRV1 &#x98A0;&#x8986;&#x7684;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x5E76;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x3002;

&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B; RNA &#x75C5;&#x6BD2;&#x63A7;&#x5236;&#x76AE;&#x80A4;&#x9ECF;&#x819C;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x75C5;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x6027;&#x3002;

Mucocutaneous leishmaniasis is caused by infections with intracellular parasites of the Leishmania Viannia subgenus, including Leishmania guyanensis. The pathology develops after parasite dissemination to nasopharyngeal tissues, where destructive metastatic lesions form with chronic inflammation. Currently, the mechanisms involved in lesion development are poorly understood. Here we show that metastasizing parasites have a high Leishmania RNA virus-1 (LRV1) burden that is recognized by the host Toll-like receptor 3 (TLR3) to induce proinflammatory cytokines and chemokines. Paradoxically, these TLR3-mediated immune responses rendered mice more susceptible to infection, and the animals developed an increased footpad swelling and parasitemia. Thus, LRV1 in the metastasizing parasites subverted the host immune response to Leishmania and promoted parasite persistence.

Leishmania RNA virus controls the severity of mucocutaneous leishmaniasis.

Leishmaniose cutan&eacute;o-muqueuse est provoqu&eacute;e par des infections par des parasites intracellulaires du sous-genre Leishmania Viannia, y compris les Leishmania guyanensis. La pathologie se d&eacute;veloppe apr&egrave;s la diffusion du parasite aux tissus nasopharyng&eacute;es, o&ugrave; les l&eacute;sions m&eacute;tastatiques destructrices forment avec une inflammation chronique. Actuellement, les m&eacute;canismes impliqu&eacute;s dans le d&eacute;veloppement des l&eacute;sions sont mal compris. Nous d&eacute;montrons que m&eacute;tastases parasites ont une forte charge de Leishmania virus &agrave; ARN-1 (LRV1) qui est reconnue par l&#39;h&ocirc;te Toll-like receptor 3 (TLR3) pour induire des chimiokines et cytokines pro-inflammatoires. Paradoxalement, ces r&eacute;ponses immunitaires de la m&eacute;diation TLR3 rendue souris plus sensibles aux infections, et les animaux ont d&eacute;velopp&eacute; une augmentation coussinet plantaire gonflement et la parasit&eacute;mie. Ainsi, LRV1 dans les m&eacute;tastases parasites subverti la r&eacute;ponse immunitaire h&ocirc;te &agrave; Leishmania et favoris&eacute; la persistance de parasite.

Virus &agrave; ARN de Leishmania contr&ocirc;le la gravit&eacute; de la leishmaniose cutan&eacute;o-muqueuse.

Mukokutane Leishmaniose verursacht durch Infektionen mit intrazellul&auml;re Parasiten von der Leishmania Viannia Untergattung, einschlie&szlig;lich Leishmania Guyanensis. Die Pathologie entwickelt nach Parasiten Verbreitung zu Nasen-Rachen-Geweben, wo destruktive metastasierendem L&auml;sionen mit chronischen Entz&uuml;ndungen bilden. Derzeit sind die Mechanismen, die L&auml;sion Entwicklung oft missverstanden. Hier zeigen wir, dass metastasierenden Parasiten eine hohe Belastung der Leishmania RNA-Virus-1 (LRV1), die von der Host-Toll-Like-Rezeptor 3 (TLR3) erkannt wird haben, um Proinflammatory Cytokines und Chemokine hervorzurufen. Paradoxerweise diese TLR3-vermittelte Immunantworten gerendert M&auml;use anf&auml;lliger f&uuml;r Infektionen, und die Tiere entwickelt, eine erh&ouml;hte Wegelagerer Schwellung und Parasitemia. So LRV1 in die metastasierenden Parasiten unterlaufen die Host Immunantwort auf Leishmania und Parasit Persistenz gef&ouml;rdert.

Leishmania-RNA-Virus steuert den Schweregrad der mukokutane Leishmaniose.

Leishmaniosi mucocutanea sono causata da infezioni da parassiti intracellulari del sottogenere Leishmania Viannia, compresi Leishmania guyanensis. La patologia si sviluppa dopo la diffusione del parassita ai tessuti rinofaringei, dove lesioni metastatiche distruttive formano con infiammazione cronica. Attualmente, i meccanismi coinvolti nello sviluppo di lesione sono capiti male. Qui vi mostriamo che metastasi parassiti hanno un elevato carico di Leishmania RNA virus-1 (LRV1) che &egrave; riconosciuto dal recettore Toll-like host 3 (TLR3) per indurre chemochine e citochine proinfiammatorie. Paradossalmente, queste risposte immunitarie mediate TLR3 reso topi pi&ugrave; suscettibili alle infezioni, e gli animali ha sviluppato un&#39;aumentata footpad gonfiore e parassitemia. Cos&igrave;, LRV1 nei parassiti metastasi sovvertito la risposta immunitaria alla Leishmania e promosso la persistenza del parassita.

Virus a RNA Leishmania controlla la gravit&agrave; della leishmaniosi mucocutanea.

&#x7C98;&#x819C;&#x76AE;&#x819A;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x75C7;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2; guyanensis &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2; Viannia &#x4E9C;&#x5C5E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x75C5;&#x7406;&#x5B66;&#x9F3B;&#x54BD;&#x982D;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x666E;&#x53CA;&#x5F8C;&#x7834;&#x58CA;&#x8EE2;&#x79FB;&#x75C5;&#x5909;&#x304C;&#x6162;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x706B;&#x3068;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x6240;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x5FB4;&#x306E;&#x9032;&#x5C55;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x8EE2;&#x79FB;&#x6027;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8; Toll &#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; 3 (TLR3) &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3084;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9AD8;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2; RNA &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;-1 &#xFF08;LRV1&#xFF09; &#x8CA0;&#x62C5;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x8AAC;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089; TLR3 &#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3084;&#x3059;&#x304F;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x8DB3;&#x8E60;&#x306E;&#x816B;&#x8139;&#x3068;&#x5BC4;&#x751F;&#x52D5;&#x7269;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;LRV1 &#x8EE2;&#x79FB;&#x6027;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2; subverted&#x3001;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x5316;&#x3092;&#x63A8;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2; RNA &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x7C98;&#x819C;&#x76AE;&#x819A;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5; &#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x75C7;&#x306E;&#x91CD;&#x75C7;&#x5EA6;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Mucocutaneous leishmaniasis &#xB4F1; Leishmania guyanensis Leishmania Viannia subgenus&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xACFC; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCD1; &#xB9AC; nasopharyngeal &#xC870;&#xC9C1; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xBCF4;&#xAE09; &#xD6C4; &#xB9CC;&#xC131; &#xC5FC;&#xC99D;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xAD34; &#xC804;&#xC774;&#xC131; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xACF3;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;, &#xBCD1; &#xBCC0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC774;&#xD574;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; metastasizing &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; proinflammatory cytokines &#xBC0F; chemokines &#xC720;&#xB3C4; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; 3 (TLR3)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xB294; &#xB192;&#xC740; Leishmania RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;-1 (LRV1) &#xBD80;&#xB2F4;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5ED;&#xC124;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; TLR3 &#xC911;&#xC7AC; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5; &#xB80C;&#xB354;&#xB9C1; &#xC950;, &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB354; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD558; &#xACE0; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB178;&#xC0C1; &#xAC15;&#xB3C4; &#xBD93;&#xAE30;&#xC640; parasitemia &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, metastasizing &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC5D0; LRV1 Leishmania&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC11C;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; &#xC2B9;&#xACA9;.

Leishmania RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; mucocutaneous leishmaniasis&#xC758; &#xC2EC;&#xAC01;&#xB3C4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Leishmaniasis mucocut&aacute;nea es causada por infecciones con par&aacute;sitos intracelulares del subg&eacute;nero Leishmania Viannia, incluyendo Leishmania guyanensis. La patolog&iacute;a se desarrolla despu&eacute;s de la difusi&oacute;n del par&aacute;sito a los tejidos nasofar&iacute;ngeos, donde se forman las lesiones metast&aacute;ticas destructivas con inflamaci&oacute;n cr&oacute;nica. Actualmente, los mecanismos implicados en el desarrollo de la lesi&oacute;n son poco conocidos. Aqu&iacute; mostramos que extenderse por met&aacute;stasis par&aacute;sitos tienen una alta carga de Leishmania RNA virus-1 (LRV1) que es reconocida por el receptor Toll-like de anfitri&oacute;n 3 (TLR3) para inducir quimiocinas y citocinas proinflamatorias. Parad&oacute;jicamente, estas respuestas inmune mediada por TLR3 prestados ratones m&aacute;s susceptibles a la infecci&oacute;n, y los animales desarrollaron un bandolero mayor inflamaci&oacute;n y parasitemia. As&iacute;, LRV1 en los par&aacute;sitos extenderse por met&aacute;stasis hab&iacute;a subvertido la inmunorespuesta del anfitri&oacute;n a Leishmania y hab&iacute;a promovido la persistencia del par&aacute;sito.

Virus de ARN de Leishmania controla la severidad de la leishmaniasis mucocut&aacute;nea.

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&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x5185;&#x810F;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x75C5;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75AB;&#x82D7;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x4F46;&#x65B0;&#x9648;&#x4EE3;&#x8C22;&#x6D3B;&#x8DC3;&#xFF0C;&#x5229;&#x4EC0;&#x66FC;&#x539F;&#x866B;&#x3002;

There are currently no effective vaccines for visceral leishmaniasis, the second most deadly parasitic infection in the world. Here we describe a novel whole-cell vaccine approach using Leishmania infantum chagasi promastigotes treated with the psoralen compound amotosalen (S-59) and low doses of ultraviolet A radiation. This treatment generates permanent, covalent DNA crosslinks within parasites, and results in Leishmania organisms termed killed but metabolically active (KBMA). In this report, we characterize the in vitro growth characteristics of both KBMA-L. major and KBMA-L. infantum chagasi (KBMA-Lic). Concentrations of S-59 that generate optimally attenuated parasites were identified. Like live L. infantum chagasi, KBMA-Lic parasites were able to initially enter liver cells in vivo after intravenous infection. However, whereas live L. infantum chagasi infection leads to hepatosplenomegaly in mice after six months, KBMA-Lic were undetectable in the organs of mice at this time point. In vitro, KBMA-Lic retained the ability to enter macrophages and induce nitric oxide production. These characteristics of KBMA-Lic correlated with the ability to prophylactically protect mice via subcutaneous vaccination at levels similar to vaccination with live, virulent organisms. Splenocytes from mice vaccinated with either live L. infantum chagasi or KBMA-Lic displayed similar cytokine patterns in vitro. These results suggest that KBMA technology is a potentially safe and effective novel vaccine strategy against the intracellular protozoan L. infantum chagasi. This approach may represent a new method for whole-cell vaccination against other complex intracellular pathogens.

Killed but metabolically active Leishmania as a novel whole-cell vaccine for visceral leishmaniasis.

Il ya actuellement aucun vaccin efficace pour la leishmaniose visc&#xE9;rale, la deuxi&#xE8;me infection parasitaire la plus meurtri&#xE8;re dans le monde. Nous d&#xE9;crivons ici une approche de nouveaux vaccins &#xE0; germes entiers en utilisant Leishmania infantum promastigotes chagasi trait&#xE9;s avec le compos&#xE9; psoral&#xE8;ne amotosalen (S-59) et de faibles doses de rayonnements ultraviolets A. Ce traitement g&#xE9;n&#xE8;re permanents, r&#xE9;ticulations covalentes ADN au sein de parasites, et les r&#xE9;sultats dans les organismes Leishmania appel&#xE9; tu&#xE9;, mais m&#xE9;taboliquement active (KBMA). Dans ce rapport, nous caract&#xE9;risons le caract&#xE9;ristiques de croissance in vitro de deux KBMA-L. majeur et KBMA-L. infantum chagasi (KBMA-Lic). Les concentrations de S-59 qui g&#xE9;n&#xE8;rent des parasites att&#xE9;nu&#xE9;s de fa&#xE7;on optimale ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s. Comme en direct chagasi L. infantum, KBMA-Lic parasites ont pu d&#x26;#39;abord p&#xE9;n&#xE9;trer dans les cellules du foie in vivo apr&#xE8;s l&#x26;#39;infection par voie intraveineuse. Cependant, alors que L. infantum en direct chagasi infection conduit &#xE0; une h&#xE9;patospl&#xE9;nom&#xE9;galie chez la souris apr&#xE8;s six mois, KBMA-Lic &#xE9;taient ind&#xE9;tectables dans les organes de souris &#xE0; ce point dans le temps. In vitro, KBMA-Lic conserv&#xE9; la capacit&#xE9; d&#x26;#39;entrer dans les macrophages et induisent la production d&#x26;#39;oxyde nitrique. Ces caract&#xE9;ristiques de KBMA-Lic en corr&#xE9;lation avec la capacit&#xE9; de prot&#xE9;ger les souris prophylactique par la vaccination sous-cutan&#xE9;e &#xE0; des niveaux similaires &#xE0; la vaccination avec les organismes vivants, virulents. Spl&#xE9;nocytes provenant de souris vaccin&#xE9;es avec soit en direct chagasi L. infantum ou KBMA-Lic affich&#xE9;es profils de cytokines similaires in vitro. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que la technologie est KBMA une nouvelle strat&#xE9;gie potentiellement efficace et sans danger vaccin contre le protozoaire intracellulaire L. infantum chagasi. Cette approche peut repr&#xE9;senter une nouvelle m&#xE9;thode pour l&#x26;#39;ensemble de la cellule de vaccination contre d&#x26;#39;autres pathog&#xE8;nes intracellulaires complexes.

Tu&#xE9; mais m&#xE9;taboliquement actif Leishmania comme un roman vaccin &#xE0; cellules enti&#xE8;res contre la leishmaniose visc&#xE9;rale

Derzeit gibt es keine wirksame Impfstoffe f&uuml;r Leishmaniose, die zweite die meisten t&ouml;dlichen parasit&auml;re Infektion in der Welt. Hier beschreiben wir einen neuartige ganz-Zelle Impfstoff Ansatz Leishmania Infantum Chagasi Promastigotes behandelt mit Psoralen zusammengesetzte Amotosalen (S-59) und niedrige Dosen von Ultraviolett eine Strahlung. Diese Behandlung generiert dauerhafte, kovalente DNA Querverbindungen innerhalb von Parasiten und Leishmania Organismen genannt get&ouml;tet aber metabolisch aktiven (KBMA) f&uuml;hrt. In diesem Bericht wir charakterisieren die in-vitro Wachstumseigenschaften der beiden KBMA-L. Major und KBMA-L. Infantum Chagasi (KBMA-Lic). S-59-Konzentrationen, die optimal abgeschw&auml;chte Parasiten zu generieren wurden identifiziert. Wie L. Infantum Chagasi Leben, konnten KBMA-Lic Parasiten zun&auml;chst Leberzellen in-vivo nach intraven&ouml;ser Infektion geben. W&auml;hrend Leben L. Infantum Chagasi Infektion f&uuml;hrt zu Hepatosplenomegalie bei M&auml;usen nach sechs Monaten, waren KBMA-Lic jedoch in den Organen von M&auml;usen zu diesem Zeitpunkt nicht nachweisbar. In-vitro-KBMA-Lic behielt die F&auml;higkeit, Makrophagen eingeben und Stickstoffmonoxid-Produktion zu induzieren. Diese Merkmale des KBMA-Lic korreliert mit der F&auml;higkeit, M&auml;use &uuml;ber subkutane Impfung auf Ebenen Impfung mit live, virulenten Organismen &auml;hnlich vorbeugend zu sch&uuml;tzen. Splenocytes von M&auml;usen mit live L. Infantum Chagasi oder KBMA-Lic geimpft angezeigt &auml;hnliche Cytokine Muster in-vitro. Diese Ergebnisse legen nahe, dass die KBMA Technologie eine potentiell sichere und wirksame neuartige Impfstoff-Strategie gegen die intrazellul&auml;re Protozoen L. Infantum Chagasi. Dieser Ansatz kann eine neue Methode f&uuml;r ganz-Zell-Impfung gegen andere komplexe intrazellul&auml;re Krankheitserreger darstellen.

Aber metabolisch aktiven Leishmania get&ouml;tet, als einen Roman ganz-Zell-Impfstoff gegen Leishmaniose.

Non ci sono attualmente vaccini efficaci per la leishmaniosi viscerale, il secondo pi&ugrave; infezione mortale parassita in tutto il mondo. Qui descriviamo un approccio romanzo vaccino a cellule intere utilizzando Leishmania infantum chagasi promastigotes trattata con il amotosalen composto di psoraleni (S-59) e basse dosi di raggi ultravioletti una radiazione. Questo trattamento genera permanente, covalente legami crociati del DNA all&#39;interno parassiti e si traduce in Leishmania organismi chiamati ucciso ma metabolicamente attivo (KBMA). In questa relazione, caratterizzano le caratteristiche di crescita in vitro di entrambi KBMA-L. major e KBMA-L. infantum chagasi (KBMA-Lic). Concentrazioni di S-59 che generano parassiti attenuati in modo ottimale sono stati identificati. Come vivere L. infantum chagasi, KBMA-Lic parassiti sono stati in grado di entrare inizialmente in vivo le cellule del fegato dopo l&#39;infezione per via endovenosa. Tuttavia, considerando che vivo infezione da L. infantum chagasi conduce a epatosplenomegalia nei topi dopo sei mesi, KBMA-Lic erano rilevabili negli organi di topi a questo punto del tempo. In vitro, KBMA-Lic ha mantenuto la capacit&agrave; di entrare in macrofagi e inducono la produzione di ossido nitrico. Queste caratteristiche di KBMA-Lic correlata con la capacit&agrave; di proteggere profilattico topi tramite vaccinazione sottocutanea a livelli simili di vaccinazione con organismi vivi, virulenti. Splenocytes da topi vaccinati con live L. infantum chagasi o KBMA-Lic visualizzato simile cytokine pattern in vitro. Questi risultati suggeriscono che la tecnologia KBMA &egrave; una strategia di vaccino romanzo potenzialmente sicuro ed efficace contro il protozoo intracellulare L. infantum chagasi. Questo approccio potrebbe rappresentare un nuovo metodo per cellule intere vaccinazione contro altri patogeni intracellulari complesse.

Leishmania ucciso ma metabolicamente attivo, come un romanzo vaccino a cellule intere per la leishmaniosi viscerale.

&#x5185;&#x81D3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x75C7;&#x3001;&#x4E16;&#x754C;&#x3067;&#x4E8C;&#x756A;&#x76EE;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x81F4;&#x547D;&#x7684;&#x306A;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BD;&#x30E9;&#x30EC;&#x30F3;&#x5316;&#x5408;&#x7269;amotosalen&#xFF08;S-59&#xFF09;&#x3068;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x306E;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x3067;&#x6CBB;&#x7642;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;infantum chagasi&#x524D;&#x97AD;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x65B0;&#x898F;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306F;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x5185;&#x3067;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;DNA&#x67B6;&#x6A4B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;KBMA&#xFF09;&#x6BBA;&#x3055;&#x306A;&#x304F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;KBMA-L&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x7279;&#x6027;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x30E1;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3068;KBMA-L&#x3002; infantum chagasi&#xFF08;KBMA-LIC&#xFF09;&#x3002;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x5F31;&#x6BD2;&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;S-59&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;L. infantum chagasi&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;KBMA-LIC&#x5BC4;&#x751F;&#x866B;&#x306F;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;L. infantum chagasi&#x611F;&#x67D3;&#x304C;6&#x30F6;&#x6708;&#x5F8C;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x809D;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;KBMA-LIC&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x3001;KBMA-LIC&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x305F;&#x3002; KBMA-LIC&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x4E88;&#x9632;&#x7684;&#x306B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x76AE;&#x4E0B;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;L. infantum chagasi&#x307E;&#x305F;&#x306F;KBMA-LIC&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x813E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;KBMA&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x539F;&#x866B;L. infantum chagasi&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x5B89;&#x5168;&#x304B;&#x3064;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6226;&#x7565;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;

&#x5185;&#x81D3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;&#x75C7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6BBA;&#x3055;&#x306A;&#x304F;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6D3B;&#x6027;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E5;&#x30DE;&#x30CB;&#x30A2;

&#xD604;&#xC7AC; &#xB0B4;&#xC7A5; leishmaniasis, &#xC138;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; Leishmania infantum chagasi promastigotes psoralen &#xCEF4;&#xD30C;&#xC6B4;&#xB4DC; amotosalen (S-59)&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558; &#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC790;&#xC678;&#xC120;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCE58;&#xB8CC; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;, &#xB0B4; &#xC601;&#xAD6C;, &#xACF5;&#xC720; DNA crosslinks&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; Leishmania &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xAC00; &#xB418; &#xB098; &#xC0AC;&#xB9DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; metabolically &#xD65C;&#xC131; (KBMA) &#xACB0;&#xACFC;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB450; KBMA L.&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC131;&#xC7A5; &#xD2B9;&#xC131; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC8FC; &#xBC0F; KBMA L. infantum chagasi (KBMA Lic). &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; &#xAC10;&#xC1E0; &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; S-59&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. L. infantum chagasi &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xCC98;&#xB7FC; KBMA Lic &#xAE30;&#xC0DD;&#xCDA9; &#xCC98;&#xC74C; &#xC815; &#xB9E5; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD6C4; &#xAC04;&#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB4E4;&#xC5B4;&#xAC08; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; L. infantum chagasi &#xAC10;&#xC5FC; &#xC950;&#xC5D0; hepatosplenomegaly&#xC5D0; 6 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xD6C4; &#xB9AC;&#xB4DC;, &#xBC18;&#xBA74; KBMA Lic&#xC774; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC950;&#xC758; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. KBMA Lic&#xB294; &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; &#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0;. KBMA Lic&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC740; prophylactically &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;, &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC744; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xD53C;&#xD558; &#xC811;&#xC885;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC950;&#xB97C; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD00;. Splenocytes &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; L. infantum chagasi &#xB610;&#xB294; KBMA Lic&#xC640; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4; &#xC678; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; cytokine &#xD328;&#xD134; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; KBMA &#xAE30;&#xC220;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; protozoan L. infantum chagasi&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC548;&#xC804; &#xD558; &#xACE0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBC31;&#xC2E0; &#xC804;&#xB7B5; &#xC81C;&#xC548;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xCCB4;-&#xC138;&#xD3EC; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB0B4;&#xC7A5; leishmaniasis &#xC18C;&#xC124; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xBC31;&#xC2E0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xB9DD; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; metabolically &#xD65C;&#xC131; Leishmania.

Actualmente no hay vacunas efectivas para la leishmaniasis visceral, la segunda infecci&#xF3;n parasitaria m&#xE1;s mortal en el mundo. Aqu&#xED; se describe una novela de c&#xE9;lulas enteras enfoque de la vacuna con el protozoo Leishmania infantum chagasi promastigotos tratados con el compuesto de psoraleno amotosaleno (S-59) y dosis bajas de radiaci&#xF3;n ultravioleta. Este tratamiento genera entrecruzamientos covalentes de ADN permanentes, dentro de los par&#xE1;sitos, y los resultados en los organismos de Leishmania denominada muerto, pero metab&#xF3;licamente activa (KBMA). En este informe, se caracteriza el crecimiento in vitro de las caracter&#xED;sticas de ambos KBMA-L. importante y KBMA-L. infantum chagasi (KBMA-LIC). Las concentraciones de S-59 que generan par&#xE1;sitos &#xF3;ptimamente atenuadas fueron identificados. Al igual que en vivo L. infantum chagasi, KBMA-Lic par&#xE1;sitos fueron capaces de entrar en un principio las c&#xE9;lulas del h&#xED;gado in vivo despu&#xE9;s de la infecci&#xF3;n por v&#xED;a intravenosa. Sin embargo, mientras que L. infantum chagasi en vivo infecci&#xF3;n conduce a la hepatoesplenomegalia en ratones despu&#xE9;s de seis meses, KBMA-Lic. fueron indetectables en los &#xF3;rganos de los ratones en este punto del tiempo. In vitro, el Lic. KBMA-mantienen la capacidad de entrar en los macr&#xF3;fagos e inducir la producci&#xF3;n de &#xF3;xido n&#xED;trico. Estas caracter&#xED;sticas de KBMA-Lic. correlaciona con la capacidad de proteger profil&#xE1;cticamente ratones a trav&#xE9;s de la vacunaci&#xF3;n subcut&#xE1;nea a niveles similares a la vacunaci&#xF3;n con organismos vivos, virulentas. Los esplenocitos de los ratones vacunados con ya sea en vivo o de L. infantum chagasi KBMA-Lic muestran los patrones de citoquinas similar in vitro. Estos resultados sugieren que la tecnolog&#xED;a KBMA es una estrategia novedosa vacuna potencialmente segura y eficaz contra el protozoo intracelular L. infantum chagasi. Este enfoque puede representar un nuevo m&#xE9;todo para c&#xE9;lulas enteras vacunaci&#xF3;n contra otros pat&#xF3;genos intracelulares complejos.

Suzanne M. Hickerson

Department of Molecular Microbiology

Washington University School of Medicine

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

Suzanne M. Hickerson

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Molecular Microbiology

Washington University School of Medicine

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

Department of Molecular Microbiology