쥐 모델에서 허혈성 전처리 효과를 연구하기 위한 표재성 하복부 동맥 축 플랩

이 수술 프로토콜은 이러한 수술의 결과를 개선하기 위해 근막 피부 피판에서 허혈성 전처리 요법을 연구하기 위한 신뢰할 수 있는 모델을 제공합니다. 이 프로토콜은 배우기 쉽고 재현 가능하며 신뢰할 수 있습니다. 다른 프로토콜과의 주요 차이점은 대퇴 혈관을 사용하여 허혈성 전처리를 유발하여 작은 혈관에 해를 끼치 지 않는다는 것입니다.

이는 결국 플랩 생존성을 개선하고 플랩 취약성의 중요한 기간을 줄이기 위해 자유 및 페디클 플랩 재건을 위한 허혈성 전처리 프로토콜을 최적화하는 것으로 이어질 수 있습니다. 이 방법은 재건 수술 분야에 기여할 수 있으며 허혈 재관류 손상 연구에 적합합니다. 시작하려면 적절하게 진정 된 동물을 앙와위 자세로 놓으십시오.

사타구니 주름 아래에서 xiphoid 과정의 수준 위까지 복부를 면도하십시오. 면도 부위에 제모 크림을 바르고 5분 정도 기다렸다가 청소하십시오. 멸균 스킨 펜과 자를 사용하여 먼저 동물의 복부 정중선을 표시 한 다음 사타구니 주름을 표시하십시오.

절개를하기 전에 사타구니 주름에서 두개골로 뻗어있는 수직 길이가 최대 6 센티미터이고 수평 너비가 약 3 센티미터 인 타원형 또는 직사각형을 그려 동물의 몸에 원하는 플랩의 위치를 표시하십시오. 이제 플랩 한계에 수직 인 5 개 또는 6 개의 등거리 표시를 그립니다. 그런 다음 Ragnell 가위를 사용하여 사타구니 주름에 3-4cm의 세로 절개를하십시오.

혈관이 손상되지 않도록 피부를 위로 당기십시오. 4개의 보석상 미세 수술 겸자를 사용하여 대퇴 및 상복부 혈관을 노출하고 식별하여 겸자를 열고 닫아 근막을 분리하고 사타구니 지방 패드 아래의 혈관에 접근합니다. 사타구니 절개를 사용하여 Ragnell 가위를 사용하여 플랩 절개를 시작합니다.

복부 근육의 피부와 결합 조직의 전체 두께를 훼손하는 데주의하십시오. 플랩의 끝이 처음에 주변 피부에서 분리되면 Ragnell 가위 팁을 사용하여 원위에서 근위 부분으로 훼손하여 플랩 조달을 계속하면서 플랩 주변의 천공 혈관과 피부 신경총 혈관을 소작하면서 플랩을 근육에서 분리합니다. 플랩이 완전히 수확되면 플랩을 부드럽게 위로 들어 올려 혈관을 시각화하여 피판과 함께 표재성 하상복부 동맥 또는 SIEA의 두 가지 전체를 캡슐화하는 것을 목표로 합니다.

다음으로, 플랩의 내측과 외측 모두에서 하측의 지방 패드를 분리하십시오. 양극성 소작을 사용하여 표재성 하복부 척추경을 손상시키지 않고 절개 부위의 경계에 가까운 지방 패드를 조심스럽게 소작하십시오. 플랩 적출 완료 후 대퇴 혈관 준비를 진행하기 전에 음경 정맥을 통해 동물에게 17.5 국제 단위의 헤파린 나트륨을 단회 투여합니다.

선박을 더 잘 볼 수 있도록 동물을 외로운 별 자체 유지 견인기 안에 넣으십시오. 이제 40X 배율의 수술용 현미경으로 작업하면서 4개의 미세 수술용 겸자 2개를 사용하여 표재성 상복부 혈관이 나타날 때까지 근위 및 원위 모두에서 대퇴 혈관을 해부합니다. 원위 대퇴 혈관에서 근막을 청소하고 동맥과 정맥에서 신경을 부드럽게 제거합니다.

8-0 사용 나일론 봉합사, 동맥과 정맥 아래의 미세 수술 바늘 홀더를 우회하여 원위 대퇴 혈관을 결찰하고, 봉합사를 잡고 상복부 혈관이 출현한 직후 이 혈관을 묶고 척추경 기원 후 1mm 거리를 남겨둡니다. 근위 대퇴 혈관에서 결합 조직을 청소하는 것과 동일한 과정을 반복하십시오. 그러나 효율적인 클램핑을 위해 동맥과 정맥을 서로 분리하십시오.

간헐적 허혈을 유도하려면 각 근위 대퇴 동맥과 정맥에 미세 수술 클램프를 별도로 배치합니다. 허혈성 손상이 완료되면 수술 전에 그려진 자국을 감싸는 원래 위치로 플랩을 봉합합니다. 내측의 사타구니 주름, 플랩 주위, 측면의 사타구니 주름에서 끝나는 3-0 나일론으로 런닝 봉합사를 사용하여 플랩을 봉합합니다.

플랩에 혈액 공급을 확인하려면 이전 주사에 대해 설명한 것과 동일한 기술과 도구를 사용하여 0.25밀리리터의 10% 멸균 플루오레세인 나트륨을 음경 정맥에 주입합니다. 3분 후, 366나노미터의 장파 UV 램프를 비추어 관류된 영역에 해당하는 형광 영역을 나타냅니다. 봉합 및 확인 후 분쇄 된 메트로니다졸을 봉합사를 따라 펴서 자동 절단을 방지하고 동일한 부위에 액체 붕대를 뿌립니다.

허혈성 전처리 기간이 끝날 때 상복부 혈액 공급에서 플랩을 제거하려면 플랩의 하부 경계를 따라 지방 패드보다 하위를 소작합니다. 수술 후 0일 또는 POD0에 즉각적인 정맥 형광 혈관 조영술은 SIEA 단독으로 플랩의 완전한 혈관화를 보여주었습니다. 전체 플랩 패들을 포함한 조직은 잘 관류되었습니다.

POD5 및 POD10에 대한 음성 대조군의 혈관 조영술은 플랩 패들의 완전한 생존력을 보여주었습니다. 먹이 용기에서 결찰을 수행하지 않은 이 그룹의 모든 동물은 건강을 유지했습니다. 양성 대조군의 경우, 결찰 직후 녹색 형광이 없어도 피판의 관류가 나타나지 않아 혈관신생이 없음을 증명했습니다.

이는 POD10에서 피부 패들의 85%의 괴사가 관찰된 상태에서 확인되었습니다. 흥미롭게도, 말단 팁은 생존 가능하고 신생 혈관화되었습니다. POD10에서 플랩 표면 생존율을 통계분석한 결과 음성대조군은 99.5%의 생존율을 보인 반면, 양성대조군은 11.25%의 생존율을 보였다.

허혈성 전처리를 연구하기 위한 실험군의 예는 13.67%의 생존율을 보였으며, 이는 특정 허혈성 전처리 프로토콜이 이 모델에서 비효율적임을 보여줍니다. 두 가지 주요 단계는 현미경으로 플랩 수확과 혈관 해부입니다. 가장 중요한 조언은 양질의 마이크로 기기를 사용하는 것입니다.

다음 목표는 허혈 기간과 리듬을 변경하여 다양한 허혈 전처리 프로토콜을 시도하여 초기 흐름 중단 후 최상의 플랩 생존 가능성을 허용하는 요법을 선택하는 것입니다. 이 기술은 허혈 융합 손상에 대한 좋은 모델을 제공함으로써 현대 재건 수술 및 재건 이식에 적용되는 허혈 전처리에 대한 새로운 발견으로 이어질 수 있습니다.