이 프로토콜은 돼지 모델에서 췌장 이식의 불안정한 절차에 대한 단계별 접근 방식을 제공하는 데 도움이 될 것입니다. 이 기술은 인간에서 관찰되는 것과 거의 동일한 단계를 따르므로 임상 실습에서 복제할 수 있는 가장 가까운 모델입니다. 돼지의 내장 구조와 혈관은 인간과 비교할 때 매우 약합니다.
따라서 수술을 처음 하는 사람에게는 가장 큰 도전이 됩니다. Bovie의 전기 소작의 순수한 절단 모드를 사용하여 xiphisternum에서 symphysis pubis까지 정중선 절개를 하는 것으로 시작합니다. 부상을 방지하기 위해 남근 너머 절개 부위의 아래쪽 부분에 있는 요도 측면을 유지해야 합니다.
수술 부위에 대한 노출을 최적화하기 위해 비장과 간 손상을 방지하기 위해 자체 유지 복벽 견인기를 배치하십시오. 췌장의 머리를 동원하려면 조수의 도움을 받아 췌장 십이지장 홈에 대항력을 제공하십시오. 간하 IVC에서 췌장 실질의 십이지장엽 사이의 무혈성 근막 평면을 따라 해부합니다.
위에 놓인 문맥에서 연결 엽의 완전한 동원을 보장하기 위해 문맥의 양쪽 측면에 있는 근막을 따라 해부하여 췌장 고리 동원을 시작합니다. 가장 안전한 방법은 문맥의 양쪽을 따라 해부를 시작하고 시계 방향 또는 시계 반대 방향으로 조직을 분리하는 것입니다. 다음으로, 췌장 조직과 부모 조직 사이의 접합부를 확인하고 실질에 가깝게 유지하면서 밑에있는 비장 정맥에서 꼬리를 해부하기 시작합니다.
실크 3-0 넥타이를 사용하여 비장 정맥을 손상시키지 않도록주의하면서 작은 정맥 지류를 실질에 합자하고 나눕니다. 췌장 코퍼스 동원을 위해, 실질을 대장과 위로부터 분리하는 조직의 얇은 층을 따라 해부하여 infrapyloric 영역을 따라 얇은 혈관 아케이드를 보존하십시오. 그런 다음 췌장 십이지장 동원을 위해 십이지장의 C 루프를 따라 얇은 혈관 아케이드를 보존하면서 견인, 반대 견인에 의해 췌장 십이지장 홈의 날카로운 절개로 듀오의 C- 루프에서 실질을 분리합니다.
다음으로 췌장 덕트를 확인하십시오. 실크 2-0 넥타이로 라이게이트하고 나누어 십이지장 C-루프에 덕트의 약 3-5mm 그루터기를 유지하고 십이지장 혈관 아케이드에서 멀리 떨어져 있습니다. 문맥 양쪽의 연결엽, 십이지장, 결장 사이의 접합부에서 실질을 해부하여 동원의 마지막 부분을 완료합니다.
문맥의 앞쪽에 있는 연결엽을 분할하여 표본을 대량으로 추출합니다. 실질 분할은 문맥 주위의 원주 위치 때문에 표본을 추출하는 데 필요합니다. 해부 부위를 따라 지혈을 보장하고 십이지장에 부상과 혈관 혼잡이 있는지 검사하십시오.
문합을 위해 가장자리를 다듬어 이식 문맥과 근위 대동맥 끝을 준비합니다. 준비된 이식편을 얼음 욕조에 UW 용액과 함께 장기 백에 넣습니다. 췌장 꼬리에서 코어 바늘 생검을 채취하여 포르말린에 보관하고 급속 동결합니다.
나중 단계에서 RNA를 추출합니다. Prolene 6-0을 사용하여 8자 방식으로 생검 부위를 봉합합니다. 오른쪽 요관을 식별하고 근막을 따라 해부하여 대정맥 박리를 시작하여 하대정맥 위의 후복막 덮개에서 요관을 분리합니다.
대동맥의 측면 경계를 따라 해부하여 밑에 있는 가자미근에서 노출시킵니다. 다음으로, 대동맥 간 홈을 따라 해부하여 IVC에서 대동맥을 분리합니다. Satinsky의 혈관 클램프 배치 시험을 통해 대동맥과 IVC의 적절한 동원을 보장합니다.
첫 번째 조수와 자세를 바꾸고 왼쪽의 장 루프를 수축시켜 문합을 위해 주요 혈관을 노출시켜 수술 부위를 준비합니다. IVC와 대동맥에 시험 클램프를 배치하여 문합에 대한 두 혈관의 적절한 동원을 재평가합니다. IVC에 혈관 측면 물림 클램프를 배치한 후 혈관 전벽에 작은 구멍을 만들고 Potts 가위를 사용하여 두개골 및 꼬리 방향으로 적절한 크기로 확장합니다.
IV 캐뉼라의 유연한 덮개를 사용하여 헤파린 처리 식염수로 내강을 세척합니다. Prolene 6-0 이중 바늘을 사용하여 IVC에 모서리 안쪽에서 바깥쪽으로 봉합사를 만들고 문맥을 이식합니다. 코들 코너 봉합사를 고정하고 이식편과 수용 정맥의 후벽을 따라 바늘 중 하나를 연속적으로 실행합니다.
전벽을 바깥쪽에서 연속적으로 고정하고 문합의 내강을 헤파린 식염수로 세척한 후 전벽 중앙에 매듭을 고정합니다. 그런 다음 문합에서 멀리 떨어진 이식 문맥에 불독의 혈관 클램프를 놓고 수혜자 IVC에서 측면 물림 클램프를 천천히 놓습니다. 정맥 보충 및 문합으로 인한 주요 출혈을 확인하십시오.
다음으로, 혈관의 후내벽을 따라 요추 가지를 손상시키지 않고 대동맥에 측면 물림 클램프를 놓습니다. 마취 전문의에게 중심 정맥 카테터를 통해 헤파린과 메틸프레드니솔론을 주사하도록 지시하십시오. 혈관의 전벽에 구멍을 뚫고 혈관 벽을 따라 해부되지 않도록 주의하면서 두개골과 꼬리 쪽으로 확장합니다.
헤파린 처리 된 식염수로 내강을 세척하십시오. 그리고 Prolene 6-0 이중 바늘을 사용하여 낙하산 기술로 이식편 대동맥의 근위 끝을 수혜자 대동맥 개구부에 연속적으로 봉합합니다. 혈관의 전벽에 마지막 매듭을 묶기 전에 헤파린 처리 된 식염수로 내강을 세척하십시오.
재관류를 시작하기 전에 평균 혈압의 급격한 감소에 대한 혈역학적 변화를 확인하십시오. 침습성 혈압을 분 단위로 모니터링하고 목표 평균 혈압을 45 내지 50 밀리미터의 수은으로 유지하기 위해 승압제 및 유체 예압의 용량 적정을 수행한다. 그런 다음 실질, 대동맥주위 부위 및 문맥주위 부위의 주요 출혈을 평가하여 정맥에서 불독 클램프를 제거한 후 지혈을 유지합니다. 대동맥 클램프를 풀고 동맥 문합 부위에서 출혈이 있는지 확인합니다.
합자와 지혈 봉합으로 출혈 지점을 고정하십시오. 마취 전문의에게 중심 정맥 카테터를 통해 트라넥삼산 바이알을 주사하도록 요청하십시오. 이식편 부종과 혈종을 피하기 위해 이 재관류 단계에서 췌장의 공격적인 취급을 최소화하는 것이 중요합니다.
장간막 비틀림이 없는지 확인한 후, 십이지장 공장 접합부에서 40-50cm 떨어진 공장 루프를 분리하고 이식편에 가깝게 가져옵니다. 폴리디옥사논 4-0 봉합사를 사용하여 좌우 연속 방식으로 수용자 공장에 이식편 십이지장을 문합합니다. 이식편 주변과 문합 부위에서 지혈을 확인하십시오.
그런 다음 재관류 후 1시간 후에 췌장 꼬리에서 3개의 코어 바늘 생검을 실시합니다. 포르말린에 보관하고 급속 동결하고 나중에 RNA를 추출합니다. Prolene 6-0으로 생검 부위를 8자 모양으로 봉합합니다.
잔류 걸레를 평가하고 지혈을 확보한 후 폴리디옥사논 0 바늘을 사용하여 복부 직근을 연속적으로 봉합하고 하부 정중선을 요도에서 멀리 유지합니다. 연속 Silk 0 봉합사를 사용하여 피부를 닫습니다. 목에 피하 터널을 만들고 중심 정맥 카테터를 터널 아래에 묻고 그 위에 놓인 피부를 실크 0-0 절단 바늘로 봉합하여 고정합니다.
혈액 가스 분석에서 안정적인 평균 혈압과 pH 및 젖산 수준의 개선 추세를 확인한 후 동맥 카테터를 제거하고 혈관을 결찰하여 목에 지혈을 확보합니다. Silk 0 봉합사로 위에 놓인 피부를 연속적으로 닫습니다. 재관류 1시간 후 평균 심박수는 평균 분당 135회였고, 평균 혈압은 약 37밀리리터의 수은이었다.
이 수치는 동물을 다시 펜으로 옮기기 전에 5가지 경우 모두에서 테이퍼링하고 중단할 수 있는 고용량의 노르에피네프린 주입 하에서 유지되었습니다. 젖산 수치는 재관류 후 3시간 동안 수술실에서 모니터링되었습니다. 5마리의 동물 모두 임상적으로 깨어 있었고, 재관류 후 5-6시간 이내에 사지의 활동적인 움직임과 호흡 패턴에 의해 분명해졌습니다.
수술 후 아밀라아제, 혈청 리파아제 및 혈청 젖산 탈수소효소 수치를 처음 3일 동안 모니터링했습니다. 수술 후 3일째에 120분 동안 포도당 내성 검사를 실시하였다. 이어서, 혈액 샘플을 회수하여 2분, 5분, 10분, 20분, 30분, 60분, 90분 및 120분에 글루코스 수준에 대해 처리하였다.
췌장 절제술 중 췌장 주변의 혈관 아케이드를 꼼꼼하게 다루는 것이 중요합니다. 그리고 이 단계를 신중하게 수행하면 수술이 끝날 때 십이지장에 좋은 혈관 공급이 보장되며, 이는 췌장 절제술 후 성공의 핵심 결정 요인입니다. 이 기술은 돼지 모델에서 이식을 통한 기계 관류 옵션을 열었고 생존 모델을 확립했습니다.
