The research work presented in this manuscript was supported by a grant (HL107319 to Alan Daugherty and HL107326 to Lisa A. Cassis) from the National Institutes of Health of the United States of America. The content in this manuscript is solely the responsibility of the authors and does not necessarily represent the official views of the National Institutes of Health. The publication of this manuscript was sponsored by DURECT Corporation.

윤리 문 : 마우스 연구가 켄터키 기관 동물 관리 및 사용위원회 (: 2006-0009 IACUC 프로토콜 번호) 대학의 승인을 수행한다. 마우스는 케타민 (~ 210 ㎎ / ㎏)과 자일 라진의 과다 복용 칵테일 (~ 30 ㎎ / ㎏)를 사용하여 종단에서 안락사된다. AngII 금액의 1. 계산 참고 :이 프로토콜은 4 남성 LDL 수용체의 4 주간 AngII (1000 NG / ㎏ / 분)의 주입의 예를 사용합니다 - / - 마우스는 포화 지방이 풍부한 음식을 공급. <ol><li> 주입에 필요한 AngII의 양을 계산하기 전에 마우스를 연구 무게. </li><li> 실험에 필요한 AngII 질량을 계산하는 템플릿 (표 1)를 사용합니다. 템플릿의 4 단계에서 &quot;펌핑 속도&quot;로 펌프의 지시에 표시된 &quot;펌핑 평균 속도&quot;를 사용합니다. 수동 5 및 단계 6 - - 템플릿에, 레코드 1 단계 (10)는 자동으로 산출된다. <ol><li> 템플릿에서, 가정마우스를 4 주간 AngII 1,000 NG / kg / 분의 투여시 체중 1g을 얻게 될 것이다. 참고 : 각 마우스는 마우스의 변형과 다이어트 등 많은 변수에 따라 달라집니다 매우 다른 체중 증가가있을 수 있습니다. 우리는 일상적으로 이전의 연구에서 우리 자신의 경험을 바탕으로 &quot;0&quot;또는 &quot;1g&quot;를 사용합니다. </li><li> 각 펌프는 약 250 μl를 필요로하기 때문에, 각 마우스 AngII 용액 300 μL 총 부피를 계산. </li></ol></li></ol> AngII 2. 해산 <ol><li> 저장소는 -20 ° C에서 AngII 유리 병을 동결 건조. 열기 전에 실온으로 AngII 바이알 평형. </li><li> 멸균 플라스틱 튜브로 계산 AngII 질량 (표 1에 나타낸 바와 같이 7.3 mg)을 단다. 주 : AngII의 수용액을 유리에 결합에 대한 강한 친 화성을 갖기 때문에 당 머크 인덱스, 용해 유리 튜브를 사용하지 않는다. </li><li> (1,200 μ를 멸균 식염수의 계산 된 볼륨을 추가동결 건조 AngII, 캡을 포함하는 플라스틱 튜브에 L), 용액이 깨끗해질 때까지 반전에 의해 충분히 혼합한다. </li><li> 라벨 마우스 번호 # 1, # 2, # 3, 캡 개별 멸균 플라스틱 튜브에 # 4 (0.5-1.5 mL)을 첨가 하였다. 단계 1.2 표 1에 계산 된 체중에 기초하여 각각의 마우스에 대한 층류 후드 AngII 용액을 제조 하였다. <ol><li> 예를 들어, 튜브 # 1, 다음 296.4 μL AngII 솔루션에 피펫 3.6 μL 멸균 생리 식염수와 아래로 부드럽게 피펫 팅에 의해 철저하게 섞는다. </li></ol></li><li> (; 멸균 4 ㎖) 모자와 플라스틱 튜브에 라벨 마우스 번호. 이러한 단계는 3.13에 기술 된 바와 같이 펌프를 배양에 사용된다. </li></ol> 3. 삼투 펌프 충전 <ol><li> 펌프의 본체와 흐름 중재자 (그림 1) : 두 개의 분리 된 부분으로 펌프를 얻습니다. 각 상자에 개별 포장되어 10 펌프 몸과 흐름 사회자가 있습니다. 로트 번호를 기록합니다. 참고 : 항상 착용장갑은 펌프의 외부 케이스에 손에서 전송 된 오일은 부정적인 기능을 펌핑 영향을 미칠 것 때문이다. 임플란트에서 감염의 위험을 피하기 위해, 멸균 장갑, 거즈, 튜브, 충전 니들을 사용하고, 펌프를 제조 보트 무게. </li><li> 이 번 열 저장 될 수 없기 때문에, 연구에 필요한 펌프 몸과 흐름 중재자의 수를 엽니 다. 10 개 이상의 펌프가 필요하면, 다른 로트 번호에서 펌프는 다른 평균 채우기 볼륨 및 펌프 속도를 가지고 있기 때문에 펌프의 로트 번호가, 한 연구에 대한 동일한 지 확인합니다. </li><li> (본체와 사회자 흐름을 모두 포함) 각 펌프의 무게를 측정하고, 소수점 이하 4 자리까지 무게를주의 (예를 들어, 마우스 #의 1.1443 g의 1). 템플릿 (표 1)에서 &quot;펌프 무게 빈&quot;라이 중량은, 충전 비율을 계산하는 데 사용된다. </li><li> 1 CC 멸균 주사기 펌프 충전 바늘을 부착하고주의 깊게 적절에서 AngII 솔루션 주사기를 채우번호 플라스틱 튜브. 이는 주사기로 공기를 흡입 피하는 것이 중요하다. </li><li> 바늘 아래에 위치되는 동안 주사기로부터 심하게 모든 공기 방울을 제거한다. 펌프로 거품의 도입을 방지하기 위해이 위치에 바늘 / 주사기를 유지합니다. </li><li> 조심스럽게 펌프 본체에 충전 바늘을 삽입합니다. 펌프에 바늘의 끝 부분을 진행합니다. 단단히 펌프의 하단에있는 바늘의 끝 부분을 올려 놓지 마십시오. </li><li> AngII 용액 펌프를 채우기 위해 천천히 주사기의 플런저를 밀어 넣습니다. 펌프 내부의 어두운 그림자는 충전 수준을 나타냅니다. 충전 부피는 지시에 따라, 약 246 μL이다. </li><li> 펌프를 충전 중지하고 유체의 비드가 펌프에서 상승으로 조심스럽게 즉시 바늘을 제거합니다. </li><li> 갭은 유동 중재자의 헤드와 펌프 본체의 상부 (도 1) 사이에 볼 수없는 때까지 펌프 본체의 상단에 구멍을 통해 펌프로 유동 중재자를 삽입한다. </li><li> moderat의 삽입또는 펌프 본체에 흐름 사회자의 오프닝에서 일부 유체 누출로 이어집니다. 조심스럽게 사회자의 배치하는 동안 누출 수있는 모든 여분의 유체를시킨다. </li><li> 충전 펌프를 달아. 템플릿에 &quot;채워진 펌프 무게&quot;의 무게를 기록한다. </li><li> 채우기 비율 (%) = ( &quot;작성&quot;펌프 무게 - &quot;빈&quot;)을 계산하면 1,000 / 볼륨 × 100을 채울 의미 X. <ol><li> 비율을 채우는 것은 같거나 100 %보다 커야한다, 표 1에 나타낸 바와 같이, 이상적으로는 비 충진 계산. 충전율이 경우 리필 펌프 &lt;95 % (즉, 기포 펌프에 연루 존재할 수있다). </li></ol></li><li> 사회자 헤드가 위쪽으로 향하도록 표시 4 ML 튜브 (단계 2.5)에 충전 펌프를 놓습니다. 펌프를 충당하기 위해 멸균 생리 식염수의 충분한 볼륨을 추가합니다. 주입 될 때까지 생리 식염수 튜브 펌프를 유지합니다. </li><li> 37 ºC 인큐베이터에 넣어 튜브. 품어 부분 프라이밍을 허용 한 다음 마우스에 이식 O / N (최소 12 시간)을 펌프. 펌프AngII의 ING 쥐 수술의 사전 AngII 주입하는 동안 발생하는 잠재적 인 스트레스를 복구 할 수 있습니다 주입 후 약 24 시간을 시작합니다. </li></ol> 펌프 주입 4. 준비 <ol><li> 오토 클레이브 (중력 모드, 건조 사이클, 15 분) 거즈, 면봉과 가위, 지혈, 집게, 스테이플을 포함하여 수술 도구, 스테이플러 적어도 일일 수술 전에. </li><li> 프로 시저 방, 이소 플루 란을 사용하여 마취에 대한 기화기를 준비합니다. 층류 후드에서 멸균 커튼을 열고 이소 플루 란 마취 코 콘을 배치합니다. 층류 후드에 betadine, 70 % 에탄올, 멸균 수, 구슬 살균기, 살균 handrub, 면봉, 거즈, 및 충전 펌프를 놓습니다. </li><li> 돈 마스크와 가운은 다음 깨끗한 손으로 층류 후드에서 외부 드레이프를 엽니 다. 멸균 장갑을 착용하고 멸균 내부 팩을 엽니 다. </li></ol> 펌프 주입 5. 수술 <ol><li> 유도 참의 장소 마우스2 % - 1.5의 유량으로 유입 이소 플루 란으로 BER. 드러 누움 후 3 분 - 추가 2 마우스를 모니터합니다. 왼쪽 또는 오른쪽 어깨에 1/4 정도의 크기의 영역을 면도. </li><li> 이소 플루 란 유출 (그림 2A)에 연결된 콘과 같은 높이의 코, 층류 후드에 마우스를 놓습니다. 외과 의사의 지배적 인 손으로 마우스의 머리를 놓습니다. 마취 동안 건조를 방지하기 위해 마우스의 눈에 수의사 연고를 사용합니다. 마우스가 수술 전에 통증 자극에 대한 응답이 없음을 확인합니다. 예를 들어, 페달 반응은 통증에 대한 좋은 지표이다. </li><li> 면봉과 70 % 에탄올 세 잎사귀 뒤에 betadine로 면도 부위를 닦아주십시오. 돈 또는 멸균 장갑을 변경합니다. </li><li> 앞 다리의 견갑골을 통해 귀 뒤에 ~ 1cm의 절개를하는 수술 메스를 사용합니다. 이 절개는 꼬리에 수직이어야한다. 단지 피부가 아닌 기본 조직을 잘라주의하십시오. </li><li> 홀드 그렇게해야한 손으로 EPS는 절개를 열고, 지혈제 (그림 2B)를 사용하여 피부 아래 피하 터널을 만들기 위해 다른 손을 사용합니다. </li><li> 꼬리쪽으로 지혈 팁을 사전 및 펌프 주머니를 만듭니다. 이것은 조심스럽게 주머니를 열어 피부 아래 지혈의 턱을 열어 수행 할 수 있습니다. 절개에서 지혈을 철회. </li><li> 마우스 (그림 2C)의 후면에 위치 사회자 머리 절개로 펌프를 삽입합니다. 조심스럽게 주머니에 완전히 펌프를 밀어 넣습니다. 전혀 긴장하거나 피부의 스트레칭으로 상처를 닫습니다 충분한 여유 공간이 있어야합니다. </li><li> 펌프를 삽입 한 후, 견고하므로 가장자리가 만나는 직선화, 절개의 양면 핀치하고 (도 2d)를 닫고 1 또는 2 창상 클립을 배치했다. 상처의 완전한 밀폐가되도록 절개 부위를 검사하고 펌프 사이트에 직접 가압하지 않은 것. </li><li> 국소 리도카인 크림을 적용코 콘에서 깨끗한면 swab.Remove 마우스로 (4 % 중량 / 중량), 그리고이 의식을 회복 할 때까지 가열 패드에 놓습니다. 복구 후, 마우스의 케이지에 반환됩니다. </li><li> 마우스 사이에 10 초 동안 비드 살균기로 수술 도구를 놓습니다. 악기를 사용하기 전에 냉각 시키십시오. 마우스 사이의 살균 handrub 청소 장갑. 전체 복구가 달성 될 때까지 마우스를 모두 모니터링 할 수 있습니다. </li><li> 밀접하게 수술 후 마우스를 모니터링합니다. 마우스가 곤란, 탈수 또는 명백한 체중 감소의 흔적을 보여줍니다 경우 - (0.3 ml의 0.2) 피하 멸균 식염수의 덩어리를 주입한다. 처음 10 일 동안 적어도 하루에 두 번 쥐를 관찰하고, 이후에 적어도 한 번 매일. 어떤 마우스 AngII 주입하는 동안 죽을 경우 즉시 부검을 수행합니다. 수술 후 7-14일 사이에 상처 클립을 제거합니다. </li></ol> 6. 수확, 수리, 청소 및 대동맥의 영상 <ol><li> OPE를 절단, 복부 마우스 흉부와 복강을 열고 잘라N 우심방은 대동맥에서 혈액을 제거하는 심장의 좌심실을 통해 식염수로 관류 한 다음 대동맥 (27)를 수확. </li><li> 48 시간 27 - 24 4 % 파라 포름 알데히드 또는 10 % 중성 완충 포르말린 적어도 3 ㎖를 포함하는 플라스틱 튜브에 수확 대동맥를 놓습니다. </li><li> 조심스럽게 외막 조직을 제거합니다. 핀 검은 색 왁스에 핀 대동맥. 같은 배율 대동맥 이미지를 획득. 도 3에 도시 된 바와 같이, 보정 각 이미지에 눈금자를 포함한다. </li></ol> 대동맥의 7 욕실 얼굴 영상 <ol><li> 대동맥 궁의 외부 및 내부 곡률을 통해 길이 방향으로 열려있는 대동맥을 절단하고, 무명, 왼쪽 경동맥, 왼쪽 쇄골 하 동맥을 포함한 열린 주요 가지를 잘라. 외부 외막이 검은 색 왁스에 인접 누워 평면 핀 대동맥. </li><li> 같은 배율에서 대동맥의 내막 표면의 얼굴 사진 엉 취득. 쇼로, 교정 각 이미지의 통치자를 포함그림 4 명. </li></ol>

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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smooth+muscle+cell+deletion+of+low-density+lipoprotein+receptor-related+protein+1+augments+angiotensin+II-induced+superior+mesenteric+arterial+and+ascending+aortic+aneurysms.">Smooth muscle cell deletion of low-density lipoprotein receptor-related protein 1 augments angiotensin II-induced superior mesenteric arterial and ascending aortic aneurysms.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35 (1), 155-162 (2015).</li><li>Daugherty, A., Rateri, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+experimental+designs+for+atherosclerosis+studies+in+mice.">Development of experimental designs for atherosclerosis studies in mice.</a> Methods. 36 (2), 129-138 (2005).</li><li>Henriques, T. A., Huang, J., D'Souza, S. S., Daugherty, A., Cassis, L. 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(27), e1291 (2009).</li></ol>

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AngII 피하을 제공 삼투 펌프는 쥐에서 대 동맥류를 유발하는 일상적인 방법입니다. 많은 실험실에서 데이터를 기반으로,이 AAAS 3,4와 마우스에 TAAS 22-26 모두를 연구하는 신뢰성과 재현성 방법이다 일관된 연구 결과가 있었다. 따라서,이 마우스 모델은 인간의 대동맥 동맥류의 몇 가지 기능이 되풀이되었습니다 이러한 파괴적인 질병에 기계적인 통찰력을 제공하는 모델로 간주됩니다. 노화는 인간 AAAS 위험 인자 인 반면, 체계적 생쥐 AngII 유도 AAAS 대한 연구되지 ​​않았다. 48 주 4,5,7 - 그러나, 빈도와 AngII 유도 AAAS의 심각도는 8 세의 나이에 쥐 비슷 나타납니다. TAA 형성에 명백한 연령에 따른 차이를 보이지 않았다 (24) 주 22 ~ 26, - 현재, 8 세의 나이에 쥐 AngII 유도 TAAS를보고 몇 연구가있다. 여성 마우스는 AngII 4,28 주입 수컷 마우스에 비해 AAAS의 훨씬 낮은 발병률을 가지고있다. 그것은 AngII 유도 AAAS의 빈도는 각각 30 % 이하 대비 50 % 이상이다 normo-cholesterolemic 마우스, 하이퍼보다 훨씬 높다는 것을 주목할 가치가있다. AngII 주입하는 동안 모두 normo- 및 콜레스테롤 혈증 쥐 - (30 % 약 10) 또한, 대동맥 파열이 자주있다. 1000 NG / kg의 속도로 AngII의 주입 / 분은 LDL 수용체와 같은 콜레스테롤 혈증 마우스로 - / - 마우스는 서양 다이어트 또는 아포 지단백 (의 apoE)를 공급 - / - 마우스는 정상 또는 서양 음식을 공급, AAA에 최대 효과가있다 개발 3,4,29. 이 주입 속도는 혈증 마우스에서 관심 유전자를 조작이 AAAS을 감소 할 것으로 예상되는 연구에 최적이다. 콜레스테롤 혈증 마우스의 조작이 AAAS을 확대 할 것으로 예상되는 경우, 500 NG / ㎏ / 분 또는 30 이하의 속도로 AngII을 주입하는 것이 좋습니다. AAAS 대조적으로, 더 데모가 없다남성 성 또는 고 콜레스테롤 혈증과 AngII 유도 TAAS (25) 사이의 nstrated 협회. 관심의 유전자 조작이 TAAS을 확대 할 것으로 예상된다 경우, 유사 AAAS에, 우리는 AngII 주입 1,000 NG / ㎏ / 분보다 낮은 주입 속도를 권장합니다. 그것은 AngII 유도 동맥류의 빈도와 심각도 개별 생쥐들과 연구 사이에 차이가 아는 것도 중요하다. 쥐 대동맥 동맥류를 개발하지 않는 경우, 하나의 잠재적 인 가능성이 AngII가 성공적으로 마우스에 전달되지 수도 있다는 것입니다. AngII의 높은 주입 속도의 검증을 위해, 예컨대 1,000 NG / kg / 분, 혈압 측정은 비 침습적 꼬리 - 커프 방법 (31)을 사용하기에 앞서 및 AngII 주입 동안에 권장된다. 1,000 NG / kg의 속도로 주입 AngII / 분 마우스에서 수축기 혈압을 증가시킨다. 또한, 혈장 레닌 농도는 AngII는 R에 부정적인 의견을 가지고 있기 때문에 AngII 주입 중 또는 종료에 측정 할 수있다enin 분비. 따라서, AngII 주입 혈장 레닌 농도의 감소로 이어집니다. AngII 주입 마우스는 명백한 대동맥 병변, 혈압의 증가없이, 플라즈마 레닌 집중력을 저하가없는 경우에는 AngII가 이식 된 삼투압 미니 펌프를 통하여 효율적으로 전달되지 않았 음을 나타낼 것이다. 우리는이 연구에서이 마우스를 제거 추천 할 것입니다. 그것은 몇 가지 마우스가 증가 수축기 혈압에도 불구하고 대 동맥류를 개발하고 혈장 레닌 농도를 감소하지 않도록주의하는 것이 중요하다. 이 마우스는 연구에 남아 있어야한다. 요약하면, AngII 주입은 마우스에서 대 동맥류를 유도하는 삼투 펌프를 이용하여 피하 주입에 의해 달성된다. 이 방법은 AAAS과 TAAS 모두를 연구하는 데 사용되는 지정된 기간에 대한 정의 속도로 지속적으로 AngII을 제공합니다.

대동맥 동맥류는 죽음에 이르게 보통 파열을 예고하고 대동맥의 영구 내강 확장을 나타낸다. 이 질병은 각각 복부 대 동맥류 (AAAS) 및 흉부 대 동맥류 (TAAS)로 불린다 복부 및 흉부 대동맥 지역 모두에서 발생합니다. 때문에 분자 메커니즘 및 병태 생리 학적 과정의 불완전한 이해, 대 동맥류의 두 유형의 확장 또는 파열을 방지 할 수있는 입증 된 약물 치료가 없다. 이 환자의 샘플을 수집하고 AAAS의 메커니즘을 정의에 집중 직접 인간 연구를 실험을 수행하기 어렵 기 때문에 자주 동물 모델에서 외삽되었다. 일반적으로 사용되는 동물 모델 쥐에 안지오텐신 II (AngII)의 피하 주입입니다. 이러한 내 대동맥 엘라 스타 제 관류 또는 개복술 1, 2를 필요로 염화칼슘의 요정 대동맥 응용 프로그램이 운전 방식으로 마우스에 AAAS을 유도하기위한 다른 수술 방법에 비해D는 체강 내에 엔트리를 필요 최소한의 수술 3,4- 전문성을 요구하지 않는다. AAAS을 유도하는 삼투 펌프를 통해 AngII의 피하 주입은 초기에 낮은 밀도 지단백 (LDL) 수용체에보고 - / - 마우스의 apoE 년 이후 포화 지방이 풍부한 다이어트 (3)를 공급하고, - / - 마우스는 일반 실험실 다이어트 (4)를 공급. 많은 최근의 연구는 또한 AngII가 normolipidemic 마우스 5-7 AAAS을 유도 것을 증명하고있다. 주입 AngII의 접근 방식은 AAAS을 유도하고이 모델은 인간의 AAAS에서 관찰 된 많은 기능을 되풀이되었습니다 때문에 분자 메커니즘뿐만 아니라 (예 : 5-15) 잠재적 인 치료 전략의 개발을 탐험하기 위해 적용되었습니다. 예를 들어, 흡연, 노화, 남성 성 인간 AAAS의 위험 요소는 마우스 (16, 17)에 AngII 유도 AAAS을 증가. 인간의 AAAS와 고 콜레스테롤 혈증의 협회는 설명이 필요합니다. 그러나, 보유 될일관된 엉 콜레스테롤 혈증 쥐 18 AAAS을 AngII가 유도 증대있다. 쥐 AngII 유도 AAAS의 병리는 매우 이질적인하고 깊은 식세포 침투, 콜라겐 저하, 혈전 형성과 해상도, 신생 혈관 19-21 특징이다. 인간의 AAAS의 가장 일반적인 infrarenal 대동맥 위치는 대조적으로, 생쥐에서 AAAS는 부신 대동맥 지역에서 발생 AngII은 유도. AngII 유도 AAAS의 또 다른 유비쿼터스 기능은 전층 혈전증으로 이어지는, 전층 중간 휴식 시간입니다. 그것은 인간의 AAAS의 병리학 적 개발이 독점적으로 인해 초기 단계에서 동맥류 조직의 부족으로 연구되지 ​​않았기 때문에 전층 엘라스틴 파열 인간에 발생하는지 불분명하다. 쥐에 AngII 주입은 주로 가장 일반적인 영역은 인간 TAAS입니다 상행 대동맥으로 제한됩니다 흉부 대동맥 지역의 깊은 확장에 이르게 <s&gt; 19,22-26입니다. AngII 유도 AAAS 마찬가지로, TAAS는 인간 TAAS (25)의 많은 기능을 요점을 되풀이 AngII 주입하는 동안 유도. 그러나 AngII 유도 AAAS 달리 AngII 유도 TAAS는 고 콜레스테롤 혈증과 연관되지 않으며, 성별 차이가 없다. 마우스에 피하 AngII 주입의 전반적인 목표는 병리학 적 특징과 AAAS 및 TAAS의 분자 메커니즘을 연구하는 것입니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="711">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angiotensin II</td>
			<td>Bachem</td>
			<td>H-1705</td>
			<td>compound used to induce aortic aneurysms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alzet Osmotic Pumps</td>
			<td>DURECT Corporation</td>
			<td>Alzet Model 2004</td>
			<td>feasible for 28-day infusion in mice weighed &#62; 20 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saturated fat-enriched diet</td>
			<td>Harlan Teklad</td>
			<td>TD.88137</td>
			<td>42% calories/calories to stimulate hypercholesterolemia in LDL receptor -/- mice</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

subcutaneous angiotensin ii infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals. This article introduces a standard protocol used to induce aortic aneurysms via subcutaneous infusion of angiotensin II (AngII) from implanted osmotic pumps. This protocol includes calculation of AngII amount and dissolution, osmotic pump filling, implantation of osmotic pumps subcutaneously, observation after pump implantation, and harvest of aortas to visualize aortic aneurysms in mice. Subcutaneous infusion of AngII through osmotic pumps following this protocol is a reliable and reproducible technique to induce both abdominal and thoracic aortic aneurysms in mice. Infusion durations range from a few days to several months based on the purpose of the study. AngII 1,000 ng/kg/min is sufficient to provide maximal effects on abdominal aortic aneurysmal formation in male hypercholesterolemic mouse models such as apolipoprotein E deficient or low-density lipoprotein receptor deficient mice. Incidence of abdominal aortic aneurysms induced by AngII infusion via osmotic pumps is 5 - 10 times lower in female hypercholesterolemic mice and also lower in both genders of normocholesterolemic mice. In contrast, AngII-induced thoracic aortic aneurysms in mice are not hypercholesterolemia or gender-dependent. Importantly, multiple features of this mouse model recapitulate those of human aortic aneurysms.

4 남성 LDL 수용체 - / - 프로토콜 절에 설명 된 마우스는 AngII 주입 4 주 후에 안락사시켰다. 대동맥은 수확 청소 및 대동맥 딜레이 션을 시각화하기 위해 몇 군데 있었다. (도 3A AAAS), 상승 영역의 확장 (TAAS;도 3b), 또는 두 영역의 확장 (AAAS 및 TAAS 모두의 존재도 3에 도시 된 바와 같이, 대동맥 부신 영역의 확장을 포함하여 여러 가지 다른 특징이도를 3C), 형태 반면 한 마우스에서) 그림 3D (심하게 정상이었다. 도 3a에 적색 선으로 도시 한 바와 같이 복부 대동맥의 팽창은, 부신 영역의 생체 최대 폭을 측정하여 정량화된다. 도 4에 도시 된 바와 같이 팽창 대동맥 오름차순 측정하기 위해 대동맥을 절개하고 고정 하였다. 내막 표면적 차에 의해 둘러싸인 상승 대동맥 영역 (영역에서 측정했다그림 4A)에서 전자 빨간색 선은 TAAS을 정량한다. 눈금자는 모두도 3 및도 4에 도시 된 바와 같이, 측정 값을 표준화 각 화상에 포함시켰다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53191/53191fig1.jpg" /> . 본체와 흐름 사회자 : 충전 삼투 펌프 그림 1. 대표 이미지는 각 펌프는 두 개의 분리 된 부분이 포함되어 있습니다. AngII와 펌프 본체를 작성 후, 흐름은 중재자 펌프를 밀봉하도록 삽입된다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53191/53191fig2.jpg" /> 펌프 주입 수술의 그림 2. 공정 (A) 마우스는 이소 플루 란과 산소를 방출 지속적 인 코 콘 층류 후드에 배치됩니다.; (B) 직선 지혈제는 피하 터널을 만드는 피부 절개에 삽입되고; (C)는 펌프를 통해 삽입<html> 피부 절개 부드럽게; (D) 피부 절개는 펌프 삽입 후 스테이플. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53191/53191fig3.jpg" /> 주입 마우스의 그림 3. 대동맥 이미지 (생체) AngII AngII 1000 NG / ㎏ / 분은 남성 LDL 수용체에 주입되었다 -. / - 이십팔일을위한 마우스. (A)는 혈전증 AAAS 수반; 레드 라인 (2.05 mM)을 부신 지역에서 최대 대동맥 폭의 측정을 보여줍니다. 심하게 정상 복부 대동맥과 대동맥 팽창 (TAA)를 오름차순 (B) (C) 상승과 부신 대동맥 지역 (TAAS 및 AAAS) 모두에서 심오한 딜레이 션; (D) 오름차순 또는 부신 대동맥 영역 중 하나의 명백한 팽창과 심하게 정상 대동맥. 4.jpg &quot;/&gt; 그림 AngII AngII 1000 NG / ㎏ / 분은 남성 LDL 수용체에 주입 된 주입 쥐에서 흉부 대동맥 지역의 4 욕실 얼굴 이미지 - 이십팔일을 위해 마우스 -. /. 빨간 선으로 설명 표면 영역은 대동맥 궁의 일부를 포함하여 상승하는 대동맥 영역을 나타냅니다. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> 1 </td><td colspan="2"> 용량이 필요 </td><td></td><td> 1,000 </td><td colspan="2"> NG / ㎏ / 분 </td><td></td></tr><tr><td> (2) </td><td colspan="3"> 체중 (최대 마우스)를 시작합니다 </td><td> 24.8 </td><td> G </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 3 </td><td colspan="3"> 예상 총 체중 증가 </td><td> 1 </td><td> G </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4 </td><td> 펌핑 속도 </td><td></td><td></td><td> 0.25 </td><td> μL / 시간 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> (5) </td><td colspan="2"> 뉴마우스의 mber </td><td></td><td> 4 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> (6) </td><td colspan="2"> 동물에 대한 시간당 복용량 </td><td></td><td> 1518 </td><td> NG </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7 </td><td> 진한 필요 </td><td></td><td></td><td> 6072 </td><td> NG / μL </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8 </td><td colspan="2"> 300 UL 솔루션 </td><td></td><td> 1.82 </td><td colspan="2"> 밀리그램 / 300 μL </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td colspan="2"> 솔루션 NEEDED </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9 </td><td colspan="2"> 총 AngII (mg)을 </td><td></td><td> 7.3 </td><td> 밀리그램 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> (10) </td><td colspan="2"> 식염수에 용해 및# 160; </td><td></td><td> 1,200 </td><td> μL </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 쥐 </td><td> 체중 </td><td> 희석 배수 </td><td colspan="2"> 볼륨 (μL) </td><td colspan="2"> 펌프 중량 (g) </td><td> 채워진 비율 </td></tr><tr><td> # </td><td> (G) </td><td></td><td> AngII </td><td> 식염 </td><td> 빈 </td><td> 채우는 </td><td> (%) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 24.5 </td><td> 1.0 </td><td> 296.4 </td><td> 3.6 </td><td> 1.1443 </td><td> 1.3877 </td><td> (99) </td></tr><tr><td> (2) </td><td> 23.0 </td><td> 0.9 </td><td> 278.2 </td><td> 21.8 </td><td> 1.1677 </td><td> 1.4145 </td><td> (100) </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 24.8 </td><td> 1.0 </td><td> 300.0 </td><td> 0.0 </td><td> 1.1438 </td><td> 1.3904 </td><td> (100) </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 21.8 </td><td> 0.9 </td><td> 263.7 </td><td> 36.3 </td><td> 1.1438 </td><td> 1.3904 </td><td> (100) </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="7"> 희석 배수 = 최대 마우스의 마우스 / 체중 체중 </td><td></td></tr></tbody></table><table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> 쥐 </td><td> 체중 </td><td> 희석 배수 </td><td colspan="2"> 볼륨 (μL) </td><td colspan="2"> 펌프 중량 (g) </td><td> 채워진 비율 </td></tr><tr><td> # </td><td> (G) </td><td></td><td> AngII </td><td> 식염 </td><td> 빈 </td><td> 채우는 </td><td> (%) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 24.5 </td><td> 1.0 </td><td> 296.4 </td><td> 3.6 </td><td> 1.1443 </td><td> 1.3877 </td><td> (99) </td></tr><tr><td> (2) </td><td> 23.0 </td><td> 0.9 </td><td> 278.2 </td><td> 21.8 </td><td> 1.1677 </td><td> 1.4145 </td><td> (100) </td></tr><tr><td> 3 </td><td> 24.8 </td><td> 1.0 </td><td> 300.0 </td><td> 0.0 </td><td> 1.1438 </td><td> 1.3904 </td><td> (100) </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 21.8 </td><td> 0.9 </td><td> 263.7 </td><td> 36.3 </td><td> 1.1438 </td><td> 1.3904 </td><td> (100) </td></tr></tbody></table> 표 1 : 삼투 펌프를 통해 28 일간의 주입을위한 계산.

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Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

삼투 펌프의 피하 주입 화합물의 연장하고 일관된 전달을위한 편리한 방법을 제공합니다. 이러한 접근은 마우스에서 복부 및 흉부 대동맥 동맥류 모두 광범위하게 연구하기 위해 사용되었다.

삼투압을 이용하여 피하 안지오텐신 II 주입 쥐에서 유도 대동맥 동맥류 펌프

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

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Nanyang Technological University

Research

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Medicine

36.9K 조회수.  University of Kentucky.  삼투 펌프의 피하 주입 화합물의 연장하고 일관된 전달을위한 편리한 방법을 제공합니다. 이러한 접근은 마우스에서 복부 및 흉부 대동맥 동맥류 모두 광범위하게 연구하기 위해 사용되었다. 

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Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

연구

의학

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

In vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate the human disease provide a valuable platform for research into disease pathophysiology and for the preclinical evaluation of novel therapies. We present a variety of methods to generate subcutaneous or orthotopic human HCC xenografts in immunodeficient mice that could be utilized in a variety of research applications. With a focus on the use of primary tumor tissue from patients undergoing surgical resection as a starting point, we describe the preparation of cell suspensions or tumor fragments for xenografting. We describe specific techniques to xenograft these tissues i) subcutaneously; or ii) intrahepatically, either by direct implantation of tumor cells or fragments into the liver, or indirectly by injection of cells into the mouse spleen. We also describe the use of partial resection of the native mouse liver at the time of xenografting as a strategy to induce a state of active liver regeneration in the recipient mouse that may facilitate the intrahepatic engraftment of primary human tumor cells. The expected results of these techniques are illustrated. The protocols described have been validated using primary human HCC samples and xenografts, which typically perform less robustly than the well-established human HCC cell lines that are widely used and frequently cited in the literature. In comparison with cell lines, we discuss factors which may contribute to the relatively low chance of primary HCC engraftment in xenotransplantation models and comment on technical issues that may influence the kinetics of xenograft growth. We also suggest methods that should be applied to ensure that xenografts obtained accurately resemble parent HCC tissues.

Human tumor xenografts in immunodeficient mice are valuable tools to study cancer biology. Specific protocols to generate subcutaneous and intrahepatic xenografts from human hepatocellular carcinoma cells or tumor fragments are described. Liver regeneration induced by partial hepatectomy in recipient mice is presented as a strategy to facilitate intrahepatic engraftment.

면역 결핍 마우스의 피하 및 간내 인간의 간세포 암 이종 이식의 생성

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound and aortic blood pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is raised then lowered incrementally by intravenous infusion of vasoactive drugs phenylephrine and sodium nitroprusside. Aortic diameter is measured for each pressure step to characterize the pressure-diameter relationship of the ascending aorta. Stiffness indices derived from the pressure-diameter relationship can be calculated from the data collected. Calculation of arterial compliance is described in this protocol.
This technique can be used to investigate mechanisms underlying increased aortic stiffness associated with cardiovascular disease and aging. The technique produces a physiologically relevant measure of stiffness compared to ex vivo approaches because physiological influences on aortic stiffness are incorporated in the measurement. The primary limitation of this technique is the measurement error introduced from the movement of the aorta during the cardiac cycle. This motion can be compensated by adjusting the location of the probe with the aortic movement as well as making multiple measurements of the aortic pressure-diameter relationship and expanding the experimental group size.

Measuring Ascending Aortic Stiffness In Vivo in Mice Using Ultrasound

We describe a technique for measuring aortic stiffness from its pressure-diameter relationship in vivo in mice. Aortic diameter is recorded by ultrasound and aortic pressure is measured invasively with a solid-state pressure catheter. Blood pressure is changed incrementally and the resulting diameter is measured.

오름차순 대동맥 강성 측정<em&gt; 생체</em&gt; 초음파를 사용하여 마우스의

We present a protocol for measuring in vivo aortic stiffness in mice using high-resolution ultrasound imaging. Aortic diameter is measured by ultrasound ...

Evaluation of Stem Cell Properties in Human Ovarian Carcinoma Cells Using Multi and Single Cell-based Spheres Assays

Years of research indicates that ovarian cancers harbor a heterogeneous mixture of cells including a subpopulation of so-called &#8220;cancer stem cells&#8221; (CSCs) responsible for tumor initiation, maintenance and relapse following conventional chemotherapies. Identification of ovarian CSCs is therefore an important goal. A commonly used method to assess CSC potential in vitro is the spheres assay in which cells are plated under non-adherent culture conditions in serum-free medium supplemented with growth factors and sphere formation is scored after a few days. Here, we review currently available protocols for human ovarian cancer spheres assays and perform a side-by-side analysis between commonly used multi cell-based assays and a more accurate system based on single cell plating. Our results indicate that both multi cell-based as well as single cell-based spheres assays can be used to investigate sphere formation in vitro. The more laborious and expensive single cell-based assays are more suitable for functional assessment of individual cells and lead to overall more accurate results while multi cell-based assays can be strongly influenced by the density of plated cells and require titration experiments upfront. Methylcellulose supplementation to multi cell-based assays can be effectively used to reduce mechanical artifacts.

In vitro spheres assays are commonly used to identify cancer stem cells. Here we compare single with multi cell-based spheres assays. The more laborious single cell-based assays or methylcellulose supplementation give more accurate results while multi cell-based assays performed in liquid medium can be highly influenced by cell density.

다중 및 단일 세포 기반 분야 분석 실험을 사용하여 인간의 난소 암 세포의 줄기 세포 특성의 평가

Years of research indicates that ovarian cancers harbor a heterogeneous mixture of cells including a subpopulation of so-called &#8220;cancer stem ...

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It is well established that synapse loss and ensuing neurodegeneration are the best predictors for memory impairments in AD. Latest studies have emphasized the neurotoxic role of soluble amyloid-beta oligomers (A&#946;o) that begin to accumulate in the human brain approximately 10 to 15 yr before the clinical symptoms become apparent. Many reports indicate that soluble A&#946;o correlate with memory deficits in AD models and humans. The A&#946;o-induced neurodegeneration observed in neuronal and brain slice cultures has been more challenging to reproduce in many animal models. The model of repeated A&#946;o infusions shown here overcome this issue and allow addressing two key domains for developing new disease modifying therapies: identify biological markers to diagnose early AD, and determine the molecular mechanisms underpinning A&#946;o-induced memory deficits at the onset of AD. Since soluble A&#946;o aggregate relatively fast into insoluble A&#946; fibrils that correlate poorly with the clinical state of patients, soluble A&#946;o are prepared freshly and injected once per day during six days to produce marked cell death in the hippocampus. We used cannula specially design for simultaneous infusions of A&#946;o and continuous infusion of A&#946;o antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps. This innovative in vivo method can now be used in preclinical studies to validate the efficiency of new AD therapies that might prevent the deposition and neurotoxicity of A&#946;o in pre-dementia patients.

To study the effects of A&#946;o in vivo, we developed a model based on repeated hippocampal infusions of soluble A&#946;o coupled with continuous infusion of A&#946;o antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps to counteract the neurotoxic effect of A&#946;o.

만성 아밀로이드 - 베타 올리고머 주입의 동물 모델에서 신경 퇴행은 삼투 펌프와 항체 치료 인 퓨즈에 의해 상쇄되어

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

마우스의 최소 침습 가로 대동맥 수축

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

Full-root Aortic Valve Replacement by Stentless Aortic Xenografts in Patients with Small Aortic Roots

In patients with small aortic roots who need an aortic valve replacement with biological valve substitutes, the implantation of the stented pericardial valve might not meet the functional needs. The implantation of a too-small stented pericardial valve, leading to an effective orifice area indexed to a body surface area less than 0.85 cm2/m2, is regarded as prosthesis-patient mismatch (PPM). A PPM negatively affects the regression of left ventricular hypertrophy and thus the normalization of left ventricular function and the alleviation of symptoms. Persistent left ventricular hypertrophy is associated with an increased risk of arrhythmias and sudden cardiac death. In the case of predictable PPM, there are three options: 1) accept the PPM resulting from the implantation of a stented pericardial valve when comorbidities of the patient forbid the more technically demanding operative technique of implanting a larger prosthesis, 2) enlarge the aortic root to accommodate a larger stented valve substitute, or 3) implant a stentless biological valve or a homograft. Compared to classical aortic valve replacement with stented pericardial valves, the full-root implantation of stentless aortic xenografts offers the possibility of implanting a 3-4 mm larger valve in a given patient, thus allowing significant reduction in transvalvular gradients. However, a number of cardiac surgeons are reluctant to transform a classical aortic valve replacement with stented pericardial valves into the more technically challenging full-root implantation of stentless aortic xenografts. Given the potential hemodynamic advantages of stentless aortic xenografts, we have adopted full-root implantation to avoid PPM in patients with small aortic roots necessitating an aortic valve replacement. Here, we describe in detail a technique for the full-root implantation of stentless aortic xenografts, with emphasis on the management of the proximal suture line and coronary anastomoses. Limitations of this technique and alternative options are discussed.

Full-root aortic valve replacement by stentless aortic xenograft is a viable option in patients with small aortic roots. We describe, a technique for the full-root implantation of stentless aortic xenografts, with emphasis on the management of the proximal suture line and coronary anastomoses, and discuss its limitations and alternative options.

작은 대동맥 근위 대동맥을 가진 환자에서 스텐트리스 대동맥 이식편을 이용한 대동맥 판막 치환술

In patients with small aortic roots who need an aortic valve replacement with biological valve substitutes, the implantation of the stented pericardial ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to perform a partial thoracotomy to visualize the transverse aortic arch. However, the surgical trauma caused by the thoracotomy in open-chest models changes the respiratory physiology as the ribs are dissected and left unattached after chest closure. To prevent this, we established a minimally invasive, closed chest approach via lateral thoracotomy. Herein we approach the aortic arch via the 2nd intercostal space without entering the chest cavities, leaving the mouse with a less traumatic injury to recover from. We perform this operation using standard laboratory settings for open chest TAC procedures with equal survival rates. Apart from maintaining physiological breathing patterns due to the closed chest approach, the mice seem to benefit by showing rapid recovery, as the less invasive technique appears to facilitate a fast healing process and to reduce immune response after trauma.

Here, we present a protocol of Transverse Aortic constriction (TAC) via a lateral thoracotomy. This technique is a minimally invasive, closed chest surgical procedure aiming to simulate pressure overload and heart failure in mice utilizing standard TAC laboratory settings.

마우스에 가로 대동맥 수축 유도를 폐쇄 가슴 모델

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Improved Registration of 3D CT Angiography with X-ray Fluoroscopy for Image Fusion During Transcatheter Aortic Valve Implantation

The fusion of 3D anatomical models derived from high-fidelity pre-interventional computed tomography angiography (CTA), and x-ray (XR) fluoroscopy to facilitate anatomical guidance is of huge interest for complex cardiac interventions like TAVI procedures with cerebral protection. Co-registration of CTA and XR has been introduced either based on additional intraoperative non-/contrast-enhanced cone-beam computed tomography (CBCT) or two separate aortograms. With the related increase of radiation exposure and/or contrast agent (CA) dose, a potential additional risk for the patient is introduced. Here, we propose a modified co-registration approach making use of arteriograms of the iliofemoral arteries, routinely performed during the femoral puncture and sheath introduction. On-the-fly refinement of the co-registration during the on-going procedure enables accurate co-registration without any additional angiograms, thus reducing CA, XR dose and procedure time, while simultaneously improving operator confidence and procedure safety.

The aim of this study was to improve the co-registration for image fusion (IF) of pre-interventional CT data with real-time x-ray (XR) fluoroscopy during transfemoral transcatheter aortic valve implantation (TAVI).

간 대동맥 밸브 주입 하는 동안 이미지 퓨전에 대 한 x 선 Fluoroscopy와 3D CT 혈관의 등록 향상

The fusion of 3D anatomical models derived from high-fidelity pre-interventional computed tomography angiography (CTA), and x-ray (XR) fluoroscopy to ...

Electrocardiogram Recordings in Anesthetized Mice using Lead II

The electrocardiogram is a valuable tool for evaluating the cardiac conduction system. Animal research has helped generate novel genetic and pharmacological information regarding the electrocardiogram. However, making electrocardiogram measurements in small animals in vivo, such as mice, has been challenging. To this end, we used an electrocardiogram recording method in anesthetized mice with many advantages: it is a technically simple procedure, is inexpensive, has short measuring time, and is affordable, even in young mice. Despite the limitations with using anesthesia, comparisons between control and experimental groups can be performed with enhanced sensitivity. We treated mice with agonists and antagonists of the autonomic nervous system to determine the validity of this protocol and compared our results with previous reports. Our ECG protocol detected increased heart rates and QTc intervals on treatment with atropine, decreased heart rates and QTc intervals after carbachol treatment, and higher heart rates and QTc intervals with isoprenaline but did not note any change in ECG parameters on administration of propranolol. These results are supported by previous reports, confirming the reliability of this ECG protocol. Thus, this method can be used as a screening approach to making ECG measurements that otherwise would not be attempted due to high cost and technical difficulties.

We present an ECG protocol that is technically easy, inexpensive, fast, and affordable in small mice, and can be performed with enhanced sensitivity. We suggest this method as a screening approach for studying pharmacological agents, genetic modifications, and disease models in mice.