We wish to thank the study participants for making this work possible and the staff at the NIHR Southampton Biomedical Research Centre and the Wellcome Trust Clinical Research Facility, University Hospital Southampton for assistance with study measurements.
This work was supported by the NIHR Southampton Biomedical Research Centre, Nutrition, the MRC Lifecourse Epidemiology Unit and the University of Southampton. This report is independent research by the NIHR BRC Funding Scheme. The views expressed in this publication are those of the authors and not necessarily those of the NHS, the NIHR or the Department of Health. AMB is supported by a NIHR Clinical Research Fellowship, HPP is supported by the NIHR Southampton Biomedical Research Centre.

윤리 문 : 우리는 우리의 기관 내에서 다음과 근육 조직 검사 절차에 대한 설명은 이제 다음과 같습니다. 근육 생검 절차는 하트 퍼 드셔 연구위원회 번호 07 / Q0204 / 68에 의해 승인 된 하트 퍼 드셔 감소증 연구에 사용된다. 모든 참가자는 동의서 (20)를 기록했다. 참고 : 하나의 작업자가 불안을​​ 줄이고 그들은 항상 편안 것을 보장하기 위해 대화에 참가자를 참여 할 수있는 조수의 도움 절차를 수행 할 수 있습니다. 프로 시저 객실은 싱크대 높이 조절 소파, 깨끗한 표면과 절차 트롤리 장착해야합니다. 1. 참가자를 준비합니다 (그림 2) <ol><li> 소파에 누워서 편안하게 누워 참가자를 요청합니다. 사타구니 주름에서 선호 허벅지를 노출. 노출 된 허벅지에서 일회용 흡수 시트를 확산. 다리가 절차 전반에 걸쳐 직선과 편안한 남아 있는지 확인하지만,허벅지는 광근 lateralis 윤곽을 순간적으로 긴장된다. </li><li> 슬개골의 전방 골극에서 가상 선 아래로 마크 프로 시저 사이트 약 3 분의 2. </li></ol> 2. 피부를 준비합니다 (그림 2) <ol><li> 멸균 면도날과 제안 생검 부위를 둘러싸는 직경 약 4cm로 피부를 면도 알콜 면봉으로 피부를 깨끗하게. 주 :이 치료 과정 동안 상처 후속 머리 포획을 방지하기위한 것이다. 이 단계는 운영자의 선호도에 따라 선택적이다. </li><li> 국소 마취제로 피부와 상부 밴드를 침투. 다음 23 G 바늘로 피하 조직에 깊이 침투 2 % 리도카인의 피하 소포를 높이기 위해 25 G 바늘을 사용합니다. 생검 부위의 피하 조직의 함량에 따라 1 인치 적어도 반 투과하고자합니다. 이 깊이 덮는 FAS를 보장하기에 충분해야중앙 정보국 (CIA)은 마취됩니다. 행동 마취에 대한 5 분 - 2를 허용합니다. 바늘이나 메스 블레이드 팁으로 부드럽게 피부를 프로빙하여 마취를 확인합니다. </li></ol> 3. 멸균 필드를 준비합니다 (그림 2) <ol><li> 비누로 손을 씻고 멸균 가운 착용 할 때까지 깨끗한 손을 유지한다. 프로 시저 트롤리에 멸균 필드를 작성하기 전에 멸균 장갑 손을 커버. </li><li> 2 % 클로르헥시딘 / 이소 프로필 알코올 용액 또는 요오드 계 소독제 피부 생검 부위를 소독. 생검 부위를 노출시키는 개구 접착제로 멸균 드레이프 적용뿐만 아니라 멸균 필드를 유지한다. </li></ol> 4. 절차를 수행합니다 (그림 2) <ol><li> 아래 및 상부 밴드를 통해 피부에 10mm 절개 - 크기 11 메스로, 5합니다. 하나 인치 깊이 평균화 절반, 대퇴골의 장축에 직각으로 절개를 통해서 conchotome의 폐쇄 팅 팁을 삽입한다. 필요한 사용하는 경우자유로운 손을 잡고 conchotome의 선단이 근육 내 개폐하면서 생검 부위를 둘러싸는 대퇴부를지지한다. </li><li> 근육을 잘라 180 ° - (90)를 통해 conchotome을 돌립니다. conchotome을 철회하고 멸균 생리 식염수로 적신 멸균 거즈에 팁을 엽니 다. 필요한 경우, 충분한 근육 조직을 얻기 위해, 하나의 상처 부위에서의 절차를 반복한다. 얼음에 배치 된 용기에 거즈를 전송합니다. 로컬 기관 프로토콜에 따라 근육 처리 준비 실험실 용기를 옮긴다. </li></ol> 5. 사후 절차 (그림 2) <ol><li> 최대 5 분 동안 상처에 직접 압력을 적용합니다. 잠재적 흉터 조직을 제거하고 steri - 스트립 실수로 제거하는 경우 상처 재개 방지 직각 대향로 상처 평행 배치함으로써 steri - 스트립 상처습니다. steri - 스트립에 멸균 흡수 드레싱을 놓고 두 층 넥타이압축 붕대와 테이프로 고정합니다. </li><li> 시술 후 4 일 - 그들이 드레싱 변화 3을 수행해야합니다으로 참가자에게 상처 드레싱 방법을 설명한다. 참가자가 나중에 저녁에 자기 전에 압축 붕대를 제거했는지 확인하십시오. </li></ol> 6. 포스트 생검 조언 <ol><li> 이 부드러운 운동에 의해 완화 될 수있다 (예.를 산책) 일부 허벅지 강성을 경험하는 것이 일반적입니다 참가자를 알립니다. 같은 아세트 아미노펜 같은 간단한 진통제를 사용합니다. 최대 2 주뿐만 아니라 상처 감염의 잠재적 인 합병증 지속될 수 생검 사이트 주위에 일시적인 마비에 대한 참가자를 경고한다. </li></ol> 제목 포스트 절차 7. 지침 <ol><li> (예를 들면, 달리기, 무거운 등반 등) 72 시간 동안 활발한 활동을 방지하기 위해 참가자를 요청합니다. 72 시간 - 48 물에 침수를 방지하기 위해 참가자를 요청합니다. 그러나 participan 지시드레싱 건조를 유지하기 위해 샤워를 갖는 경우 t는 집착 필름 또는 생검 사이트 주위에 비슷한 포장합니다. </li><li> 4 일 1 주일 후 steri - 스트립을 제거 - 3 후 드레싱을 변경하는 참가자에게 물어보십시오. 참고 : 참가자가 후 조직 검사 관리, 예비 드레싱 및 절차를 수행 할 책임이 팀의 비상 연락처 정보에 대한 작성 지침을 제공한다. </li></ol>

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	<li>Dubowitz, V., Sewry, C. A., Oldfords, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Muscle Biopsy: A Practical Approach. , (2013).</li><li>Parent, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duchenne+De+Boulogne:+a+pioneer+in+neurology+and+medical+photography.">Duchenne De Boulogne: a pioneer in neurology and medical photography.</a> Can J Neurol Sci. 32 (3), 369-377 (2005).</li><li>Hayot, M., Michaud, A., Koechlin, C., Caron, M. A., Leblanc, P., Prefaut, C., Maltais, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+microbiopsy:+a+validation+study+of+a+minimally+invasive+technique.">Skeletal muscle microbiopsy: a validation study of a minimally invasive technique.</a> Eur Respir J. 25 (3), 431-440 (2005).</li><li>O'Rourke, K. S., Blaivas, M., Ike, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+needle+muscle+biopsy+in+a+university+rheumatology+practice.">Utility of needle muscle biopsy in a university rheumatology practice.</a> J Rheumatol. 21 (3), 413-424 (1994).</li><li>O'Rourke, K. S., Ike, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+biopsy.">Muscle biopsy.</a> Curr Opin Rheumatol. 7 (6), 462-468 (1995).</li><li>Bergstrom, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+electrolytes+in+man.">Muscle electrolytes in man.</a> Scand J Clin Lab Invest. 14, (1962).</li><li>Edwards, R., Young, A., Wiles, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Needle+biopsy+of+skeletal+muscle+in+the+diagnosis+of+myopathy+and+the+clinical+study+of+muscle+function+and+repair.">Needle biopsy of skeletal muscle in the diagnosis of myopathy and the clinical study of muscle function and repair.</a> N Engl J Med. 302 (5), 261-271 (1980).</li><li>Edwards, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+needle-biopsy+of+skeletal+muscle+in+diagnosis+and+research.">Percutaneous needle-biopsy of skeletal muscle in diagnosis and research.</a> Lancet. 2 (7724), 593-595 (1971).</li><li>Edwards, R. H., Round, J. M., Jones, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Needle+biopsy+of+skeletal+muscle:+a+review+of+10+years+experience.">Needle biopsy of skeletal muscle: a review of 10 years experience.</a> Muscle Nerve. 6 (9), 676-683 (1983).</li><li>Shanely, R. A., Zwetsloot, K. A., Triplett, N. T., Meaney, M. P., Farris, G. E., Nieman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skeletal+muscle+biopsy+procedures+using+the+modified+Bergstrom+technique.">Human skeletal muscle biopsy procedures using the modified Bergstrom technique.</a> J Vis Exp. (91), e51812 (2014).</li><li>Coggan, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+biopsy+as+a+tool+in+the+study+of+aging.">Muscle biopsy as a tool in the study of aging.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 50, 30-34 (1995).</li><li>Henriksson, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term='Semi-open'+muscle+biopsy+technique.+A+simple+outpatient+procedure.">'Semi-open' muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure.</a> Acta Neurol Scand. 59 (6), 317-323 (1979).</li><li>Dorph, C., Nennesmo, I., Lundberg, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+conchotome+muscle+biopsy.+A+useful+diagnostic+and+assessment+tool.">Percutaneous conchotome muscle biopsy. A useful diagnostic and assessment tool.</a> J Rheumatol. 28 (7), 1591-1599 (2001).</li><li>Poulsen, M. B., Bojsen-Moller, M., Jakobsen, J., Andersen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+conchotome+biopsy+of+the+deltoid+and+quadricep+muscles+in+the+diagnosis+of+neuromuscular+disorders.">Percutaneous conchotome biopsy of the deltoid and quadricep muscles in the diagnosis of neuromuscular disorders.</a> J Clin Neuromuscul Dis. 7 (1), 36-41 (2005).</li><li>Dietrichson, P., Mellgren, S. I., Skre, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+biopsy+with+the+percutaneous+conchotome+technique.">Muscle biopsy with the percutaneous conchotome technique.</a> J Oslo City Hosp. 30 (5), 73-79 (1980).</li><li>Dietrichson, P., Coakley, J., Smith, P. E., Griffiths, R. D., Helliwell, T. R., Edwards, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conchotome+and+needle+percutaneous+biopsy+of+skeletal+muscle.">Conchotome and needle percutaneous biopsy of skeletal muscle.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 50 (11), 1461-1467 (1987).</li><li>Andonopoulos, A. P., Papadimitriou, C., Melachrinou, M., Meimaris, N., Vlahanastasi, C., Bounas, A., Georgiou, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymptomatic+gastrocnemius+muscle+biopsy:+an+extremely+sensitive+and+specific+test+in+the+pathologic+confirmation+of+sarcoidosis+presenting+with+hilar+adenopathy.">Asymptomatic gastrocnemius muscle biopsy: an extremely sensitive and specific test in the pathologic confirmation of sarcoidosis presenting with hilar adenopathy.</a> Clin Exp Rheumatol. 19 (5), 569-572 (2001).</li><li>Helliwell, T. R., Coakley, J., Smith, P. E., Edwards, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+morphology+and+morphometry+of+the+normal+human+tibialis+anterior+muscle.">The morphology and morphometry of the normal human tibialis anterior muscle.</a> Neuropathol Appl Neurobiol. 13 (4), 297-307 (1987).</li><li>Patel, H. P., Jameson, K. A., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+influences,+muscle+morphology,+and+sarcopenia+in+community-dwelling+older+men.">Developmental influences, muscle morphology, and sarcopenia in community-dwelling older men.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 67 (1), 82-87 (2012).</li><li>Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hertfordshire+Sarcopenia+Study:+design+and+methods.">Hertfordshire Sarcopenia Study: design and methods.</a> BMC Geriatrics. 10 (1), 43 (2010).</li><li>Anderson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+the+biopsy+procedure+and+assessment+of+skeletal+muscle+biopsies.">Recommendations for the biopsy procedure and assessment of skeletal muscle biopsies.</a> Virchows Arch. 431 (4), 227-233 (1997).</li><li>Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Cooper, C., Stewart, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Feasibility+and+Acceptability+of+Muscle+Biopsy+in+Epidemiological+Studies:+Findings+from+the+Hertfordshire+Sarcopenia+Study+(HSS).">The Feasibility and Acceptability of Muscle Biopsy in Epidemiological Studies: Findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS).</a> J Nutr Health Aging. 15 (1), 10-15 (2011).</li><li>Charifi, N., Kadi, F., Feasson, L., Costes, F., Geyssant, A., Denis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+microvessel+tortuosity+in+the+vastus+lateralis+muscle+of+old+men+in+response+to+endurance+training.">Enhancement of microvessel tortuosity in the vastus lateralis muscle of old men in response to endurance training.</a> J Physiol. 554 (Pt 2), 559-569 (2004).</li><li>Frontera, W. R., Suh, D., Krivickas, L. S., Hughes, V. A., Goldstein, R., Roubenoff, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+fiber+quality+in+older+men+and+women.">Skeletal muscle fiber quality in older men and women.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 279 (3), C611-C618 (2000).</li><li>He, J., Watkins, S., Kelley, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+lipid+content+and+oxidative+enzyme+activity+in+relation+to+muscle+fiber+type+in+type+2+diabetes+and+obesity.">Skeletal muscle lipid content and oxidative enzyme activity in relation to muscle fiber type in type 2 diabetes and obesity.</a> Diabetes. 50 (4), 817-823 (2001).</li><li>Patel, H. P., Al-Shanti, N., Davies, L. C., Barton, S. J., Grounds, M. D., Tellam, R. L., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lean+mass,+muscle+strength+and+gene+expression+in+community+dwelling+older+men:+findings+from+the+Hertfordshire+Sarcopenia+Study+(HSS).">Lean mass, muscle strength and gene expression in community dwelling older men: findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS).</a> Calcif Tissue Int. 95 (4), 308-316 (2014).</li><li>Peterson, C. M., Johannsen, D. L., Ravussin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+mitochondria+and+aging:+a+review.">Skeletal muscle mitochondria and aging: a review.</a> J Aging Res. 2012, 194821 (2012).</li></ol>

None declared.

참가자의 안전을 보장하고 효율적으로 근육 생검을 수행하기 위해,이 프로토콜 내의 중요한 단계에 주목하는 것이 중요하다. 참가자들은 조심스럽게 출혈 가난한 상처 치유 등의 합병증을 방지하기 위해 제외 기준을 고려하여 선택해야합니다. 절차 전반에 걸쳐 엄격한 무균 필수적이다. 올바른 기술을 적용, 참가자의 편안함을 보장 참가자의 조직에 불필요한 외상을 최소화하고 분석을위한 충분한 샘플 수율을 수 있습니다. 때때로, 그 참가자가 과도한 피하 지방 조직을 보유하고, 특히 근육 시료를 수득하기가 어려울 수있다. 과도한 출혈도 절차를 진행하기로 결정이 이루어해야하는 경우 참가자의 신중한 선택 후 발생할 수 있습니다. 최대 5 분 동안 상처 부위에 직접 압력이 지혈을 촉진 멍을 최소화 할 필요가있다. 출혈을 최소화하기위한 또 다른 방법이다로컬 혈관 수축의 원인이됩니다 에피네프린과 리도카인을 사용합니다. 그러나, 에피네프린을 사용해야합니다 이후 분석과주의를 방해 할 수 있습니다. 이 절차를 수행하는 동안 에피네프린을 사용하지 않는 저자의 기본 설정입니다. 다중 분석 현미경 화상 분석, 조직 화학 및 분자 분석 방법의 진보가 주어 근육 조직에서 수행 될 수있다. 이러한 형태의 근육 등을 평가 등., 섬유 조성물, 섬유 단면적, 혈관염, 단 섬유 수축 활성 RNA 분석, 단백질뿐만 아니라 효소 활성 23,24,25,19,26,27. 통상적 근병증의 임상 진단 과정에서 사용 된 사용하지만, 근육 생검은 점점 연구에서 수행된다. 예를 들어, 이전의 모폴로지 근육 발달에 영향 낮은 출생 체중과 근육 감소증 (19) 사이의 연결을 설명 할 수 있음을 보여 주었다. 이 기술, 미의 잠재적 한계다른 반 열린 기법 LAR은 형태, 즉, 근육 섬유 유형은 전체 근육 그룹의 대표가되지 않을 수도있는 위치들에 한정되는 것을 포함한다. 웨일 Blakesley의 conchotome와 근육 생검이 가능하고 허용 절차입니다. 이 절차는 버그 스트롬 다른 생검 방법에 대안적인 방법을 제공한다. 마스터하기 쉬운 및 분석을위한 좋은 샘플 수율을 제공합니다. 합병증이 낮고 불편 상술 엄격한 무균 상태로 유지 포스트 생검 케어 광범위한 통보가 주어진 순서로 표준화 기술을 사용하여 수행 될 때 최소로 유지.

근 질환 및 기타 신경 근육 퇴행성 질환의 진단을위한 골격 근육을 얻는 것은 허용 환자 1 무기력하지 않은 안전하고 효율적인 방법을 사용합니다. 역사적으로, 분석을 위해 근육 조직을 얻는 방법은 전신 마취 또는 사후 부검에서 수행 개방 생검을 포함했다. 이러한 기술은 근육의 직접적인 시각화를 허용 근육의 큰 부분이 될 수 생검. 이러한 기술은 입원과 회복의 관점에서 환자에게이 잠재적 인 단점을 감안할 때, 경피적 &#39;반 열린&#39;근육 조직 검사 방법이 대안으로 소개되었다. 이 기술은 제 투관침과 자기 구성 바늘을 사용하는 일반적인 마취이없이 생체로부터 근육 시료를 수득 할 수 있었다 뒤센 (1806-1875)에서 수행 하였다. 그 후, 생검 바늘의 다양한 형태 3,4,5- 사용되었다. 그러나, 생검 N1962 년 버그 스트롬에 의해 개발 eedle는 가장 일반적으로 임상에서 사용하고있다; 두 어린이와 성인뿐만 아니라 연구 6,7,8,9,10있다. 그것은 날카로운 투관침, 절단 캐 뉼러와 조직 후 조직 검사를 추방하기 위해 추진로드를 보유하고있다. 샘플링 11,9 반복 한 후이 절차에서 얻은 근육 수율은 25 -293 mg의 범위에보고되었다. Henriksson은 (그림 1) 12 대체 세미 오픈 근육 생검 방법으로 1979 년 웨일 - Blakesley의 conchotome을 소개했다. 장비는 버그 스트롬 구조와는 달리 하나의 구조와 날카로운 물고 팁 forcep처럼 설계되어 있습니다. 팁의 크기는 4 mm 내지 폭 6mm의 범위 일 수있다. 팅 팁의 두 대향 에지 때 중공 근육 포착을 보장이 형성된다. conchotome는 1-5 삽입 - 10 ㎜ 피부 절개 scalpe 등 근육과 근막 상부를 관통하는 투관침에 대한 필요성을 회피L은 근육까지 추적하는데 사용될 수있다. 이 방법은 조작성 13,14 높은 수준의 조직 침투를 제어 허용한다. 그것은 과도한 압력이 잠재적 예를 들어, 신경 혈관 또는 기본 뼈 구조가 손상 될 수 있습니다 사이트에 특히 유용합니다., 전 경골근 15,14의 사이트에서. conchotome를 사용하여 근육 수익률은 변수가 될 수 있으며, 우리의 실천 (20) - 근육의 200 mg을 반복 샘플링 후의되었습니다. 버그 스트롬 바늘 위에 conchotome의 하나의 잠재적 인 장점은 제공 기동성 높은 이외에 팅 선단이 뾰족하거나 버그 스트롬의 투관침 (16)을 구성만큼 자주 교체 할 필요가 없다는 것이다. 웨일 Blakesley의 conchotome를 사용하여 근육 조직 검사의 전반적인 목표는 모두 진단 및 resear에 대한 조직 화학 및 분자 분석을 가능하게 근육 조직의 충분한 양을 얻을 수있다채널 연구. 그것은 쉽게 배울 수있는 간단하고 안전한 방법입니다. 이 기술, 조직 검사에 적합한 근육은 이두근, 삼두근, 삼각근, 비복근, 경골근, 가자미근과 sacrospinals 17,15,7,18,14을 포함한다. 이 대퇴부 신경 혈관 내의 주요 구조로서 피할 광근 lateralis의 최 외측 부분은 생검 가장 일반적으로 사용되는 위치이다. 그것은 전방 골극과 슬개골에 합류 가상 선 아래로 약 3 분의 2 식별된다. 근육 형태 데이터는 광근로부터 유도 예 myofibre 영역 myofibre 비율 모세관 밀도 샘플링 연구 11,19 사이의 비교를 허용 문헌에서 널리 사용할 lateralis.

<table><tbody><tr><td>Weil-Blakesley conchotome</td><td>Gebr&amp;uuml;der Zepf Medizintechnik, D&amp;uuml;rbheim, Germany</td><td>None</td><td>6 mm biting tip</td></tr><tr><td>5 ml 2% lidocaine</td><td>Generic use</td><td>None</td><td>One 5 ml vial should suffice for adequate anaesthesia</td></tr><tr><td>Alcohol swab</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>5 ml syringe</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>25 G and 23 G sterile needles</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>Sterile scalpel size 11</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>Sterile gauze squares</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>Sodium chloride 0.9% 10 ml</td><td>Fannin</td><td>1122/002/001</td><td></td></tr><tr><td>Steri-Drape&amp;trade; Small Drape with Adhesive Aperture</td><td>3M</td><td>1020</td><td></td></tr><tr><td>ChloraPrep 2% w/v /70% v/v cutaneous solution&amp;nbsp;</td><td>CareFusion</td><td>270400</td><td>Two</td></tr><tr><td>Steri-Strip&amp;trade; 1/4 inch x 3 inch Reinforced Adhesive Skin Closures</td><td>3M</td><td>R1541</td><td></td></tr><tr><td>PRIMAPORE sterile dressing 15 cm x 8 cm</td><td>Smith &amp;amp;&amp;nbsp;&lt;br/&gt; Nephew</td><td>66000318</td><td></td></tr><tr><td>Cotton crepe bandage Hospicrepe 233 7,5 cm x 4,5 m</td><td>Hartmann</td><td>915562</td><td></td></tr><tr><td>Flexible cohesive bandage Co-Plus LF</td><td>BSN medical</td><td>2904565</td><td></td></tr><tr><td>Disposable absorbent sheet</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>Micropore or transpore tape</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>Sterile gown with sterile paper towels</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr><tr><td>Sterile gloves</td><td>Generic use</td><td>None</td><td></td></tr></tbody></table>

human vastus lateralis skeletal muscle biopsy using the weil-blakesley conchotome

웨일 - Blakesley의 conchotome를 사용하여 경피적 근육 생검 잘 모두 임상 및 연구 사례에 설립된다. 그것은 안전하고 효과적이고 내약성 기술이다. 6 mm 폭 중공 - 웨일 - Blakesley의 conchotome는 4 날카로운 물고 팁이있다. 그것은 5를 통해 삽입 - 10 mm의 피부 절개 및 제어 조직 침투 였는데 될 수있다. 팁 열고 조직 내에서 폐쇄하고 근육을 잘라 90 -180 °를 회전합니다. 얻어진 근육의 양은 샘플링 조직학 및 분자 연구 모두 처리 할 수​​ 290 mg의 20 밀리그램에서 변화 할 수있다 반복 다음과 같다. 상처 활동의 정상적인 수준의 절차에 따라 즉시 다시 시작할 수 있지만, 건조하고 격렬한 신체 활동은 약 72 시간 동안 최소한으로 유지 될 필요가있다. 주의는 주체, 전체 무균 및 사후 절차 관리의 선택에 지불하는 경우이 절차는 안전하고 효과적이다. 오른쪽과 왼쪽 모두 Vastus의 lateralis는 참가자의 선호에 따라 조직 검사에 적합하다.

전술 한 과정은 모두 임상 연구 설정 안전하고 좋다. 조직 검사가 진단 과정의 일부로서 수행 될 때, 근육은 환자의 증상과 근육 약화의 증상에 따라 선택해야합니다. 조직 검사 사이트는 이전의 부상, 경축 또는 계측 21,1 없어야한다. 연구에서는 당뇨병 환자의 공복 또는 제외 등의 표준화 된 조건은 19해야 할 수 있습니다. 이러한 와파린 같은 항응고제를 중지하고 응고 시간이 절차 전에 확인해야합니다. 경험이 크게 초과 22 출혈의 위험을 증가시키지 않는 있듯이 75mg의 용량 단순 아스피린이 계속 될 수있다. 또한, 고려 상처 치유를 손상 약물을 복용 참가자들에게 주어져야한다. 본질적으로, 약물을 중단의 위험이 각각의 방법의 이점에 대해 칭량해야케이스. 참가자 선정시, 국소 마취제, 요오드 / 클로르헥시딘 및 상처 드레싱에 대한 잠재적 인 알레르기의 상세한 역사를 얻을 수 있어야하고 필요에 따라 대안이 사용된다. 참가자들은 피부의 증가 발적, 지역 붓기 또는 물집으로 나타날 수 알레르기 반응의 드물지만 잠재적 인 발생에 대한 경고해야한다. 항히스타민와 드레싱 (들) 및 치료 이러한 상황 제거에서 / 스테로이드가 필요할 수 있습니다. 20 분 - 절차는 약 15 걸립니다. 창상 감염의 위험을 최소화하기 위해 무균에주의하는 것이 중요하다. 절차 참가자 중 일부 불편 함이 발생할 수 있습니다. 날카로운 통증의 발생은 국소 마취제의 추가 침투를 필요로 할 수 있습니다. 절차 후, 허벅지 강성은 일반적으로 경험하고 (걷기, 예.) 부드러운 운동에 의해 완화 될 수있다. 하트 퍼 드셔 감소증에서연구 (HSS)는 통증 시각적 상사 척도 (VAS) (0mm에서 규모 - 100mm에 &#39;고통&#39;- &#39;가 될 수있는만큼 나쁜 통증&#39;)로 측정 한 통증 점수 7 mm의 중간에 일반적으로 낮았다 절차 및 4mm 동안이 연구의 연구 주제를 제안 시술 후 일일 3 %로 1 %에서 절차 최소한의 고통 (22) (자료 표) 문헌에보고 상처 합병증의 국지적 인 속도 범위를 발견하고 주로 상처 혈종을 포함 형성 13,9,14. 한 연구는 심각한 부 근막 혈종 및 후속 심 부정맥 혈전증 (13)을 설명했다. HSS (3 주 동안 흉터 밑에 하드 덩어리로서 설명) 상처 합병증의 비율은 1 % (22)이었다. 참가자는 피부와 피하 조직을 절개 할 필요가 주어진 작은 절개 부위 주위에 마비가 발생할 수 있습니다. 우리의 경험이 마비가 과도하고있다 완전히 하나 또는 두 개의 꼬마 내에 해결했다<html> KS. 대표 조직 학적 결과에 대해, 우리는 이전에 개발 영향과 근육의 형태 (19) 사이의 관계를 연구 하였다. 본 연구에서는 48 낮은 출생 체중 (≤3.18 kg) 남자는 47 이상 출생 체중 (≥3.63 kg) 남성 4,903 μm의 2 (1354 μm의 2)와 4644 μm의 2 (1022 μm의 2)이었다 내가에게 myofibre 지역 (SD)를 입력 말은, 평균 유형 II myofibre 지역 반면 4046 μm의 2 (1166 μm의 2) 각각 낮은 및 높은 출생 체중의 남성 3,859 μm의 2 (1127 μm의 2)이었다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53075/53075fig1.jpg" /> 웨일 - Blakesley Conchotome 그림 1. 이미지. 6mm 물고 끝 웨일 - Blakesley의 conchotome 본 연구에 사용된다.5 / 53075fig1large.jpg &quot;대상 =&quot;_ 빈 &quot;&gt;이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/53075/53075fig2.jpg" /> 웨일 - Blakesley Conchotome를 사용하여 그림 2. 근육 생검 기법. (A) 다리는 사타구니 주름에 노출되었다. 광근 lateralis을 통해 조직 검사 영역은, 머리의 면도 리도카인 침투 및 살균 세정, 표시되었다. 생검 영역을 분리 하였다. 피부 위에 놓인 끈 다음 크기 (11) 메스로 구멍이 있었다. (B) conchotome은 메스로 만든 근육을 절제 90 °를 회전 트랙에 삽입했다. CD. 5 -. 10 mm의 상처가 steri - 스트립 폐쇄 (이전 22 발표) 입고 된 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53075/53075fig2large.jpg" target="_blank">LAR을 보려면 여기를 클릭하십시오</a>이 그림의 게르 버전입니다. <img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/53075/53075fig3.jpg" /> 그림 3. Steri - 스트립 응용 프로그램. steri- 스트립은 작은 절개에 평행하게 적용됩니다. 이 방법은 치료의 좋은 비율과 관련된다 일반적으로 일주일 이내에. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53075/53075fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/53075/53075fig4.jpg" /> 광근의 Lateralis 그림 4. 근육 생검. <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/53075/53075fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td><stroNG&gt; 시각 아날로그 스케일 통증 점수 (mm) </td><td> 중간 (분위 범위 [IQR]) </td></tr><tr><td> 절차 중 </td><td> 7 (1-34) </td></tr><tr><td> 어느 날 게시물 절차 </td><td> 4 (0-16) </td></tr><tr><td> 세븐 일 후 절차 </td><td> 1 (0-4) </td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td> 매일 활동 재개 </td><td> N (%) </td></tr><tr><td> 일일 후 </td><td> 60 (65 %) </td></tr><tr><td> 이일 후 </td><td> 26 (28 %) </td></tr><tr><td> 이상 이일 </td><td> 7 (7 %) </td></tr></tbody></table> 표 1. 통증 시각 아날로그 척도 (VAS) 점수와 하트 퍼 드셔 감소증 연구에서 Conchotome 근육 생검 후 93 연구 참가자의 활동의 재개. &#39;고통&#39;에 - 통증 규모는 0mm에서 원거리100mm의 최대 - &#39;나쁜 통증이 될 수 있습니다&#39;. 참가자의 대부분은 일반적인 일일 활동 하루 후 절차를 재개.

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Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

This video demonstrates the technique of percutaneous muscle biopsy of the human vastus lateralis using the Weil-Blakesley conchotome.

사람의<em&gt; 광근의 Lateralis</em&gt; 웨일 - Blakesley Conchotome를 사용하여 골격 근육 생검

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

human-vastus-lateralis-skeletal-muscle-biopsy-using-weil-blakesley

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

16.6K 조회수.  University of Southampton, University Hospital Southampton. This video demonstrates the technique of percutaneous muscle biopsy of the human vastus lateralis using the Weil-Blakesley conchotome.

비디오: Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

Isolation and Quantitative Immunocytochemical Characterization of Primary Myogenic Cells and Fibroblasts from Human Skeletal Muscle

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated from human muscle biopsy samples using enzymatic digestion and their myogenic properties studied in culture. Quantitatively, the two main adherent cell types obtained from enzymatic digestion are: (i) the satellite cells (termed myogenic cells or muscle precursor cells), identified initially as CD56+ and later as CD56+/desmin+ cells and (ii) muscle-derived fibroblasts, identified as CD56&#8211; and TE-7+. Fibroblasts proliferate very efficiently in culture and in mixed cell populations these cells may overrun myogenic cells to dominate the culture. The isolation and purification of different cell types from human muscle is thus an important methodological consideration when trying to investigate the innate behavior of either cell type in culture. Here we describe a system of sorting based on the gentle enzymatic digestion of cells using collagenase and dispase followed by magnetic activated cell sorting (MACS) which gives both a high purity (&#62;95% myogenic cells) and good yield (~2.8 x 106 &#177; 8.87 x 105 cells/g tissue after 7 days in vitro) for experiments in culture. This approach is based on incubating the mixed muscle-derived cell population with magnetic microbeads beads conjugated to an antibody against CD56 and then passing cells though a magnetic field. CD56+ cells bound to microbeads are retained by the field whereas CD56&#8211; cells pass unimpeded through the column. Cell suspensions from any stage of the sorting process can be plated and cultured. Following a given intervention, cell morphology, and the expression and localization of proteins including nuclear transcription factors can be quantified using immunofluorescent labeling with specific antibodies and an image processing and analysis package.

The main adherent cell types derived from human muscle are myogenic cells and fibroblasts. Here, cell populations are enriched using magnetic-activated cell sorting based on the CD56 antigen. Subsequent immunolabelling with specific antibodies and use of image analysis techniques allows quantification of cytoplasmic and nuclear characteristics in individual cells.

인간의 골격근에서 기본 근육 조직 세포와 섬유 아 세포의 분리 및 정량 면역 세포 화학 특성

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated ...

연구

발생학

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

경골 신경 절개 - 마우스의 탈 신경에 의한 골격근의 위축에 대한 표준 모델

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

의학

Isolation, Culture, Characterization, and Differentiation of Human Muscle Progenitor Cells from the Skeletal Muscle Biopsy Procedure

The use of primary human tissue and cells is ideal for the investigation of biological and physiological processes such as the skeletal muscle regenerative process. There are recognized challenges to working with human primary adult stem cells, particularly human muscle progenitor cells (hMPCs) derived from skeletal muscle biopsies, including low cell yield from collected tissue and a large degree of donor heterogeneity of growth and death parameters among cultures. While incorporating heterogeneity into experimental design requires a larger sample size to detect significant effects, it also allows us to identify mechanisms that underlie variability in hMPC&#160;expansion capacity, and thus allows us to better understand heterogeneity in skeletal muscle regeneration. Novel mechanisms that distinguish the expansion capacity of cultures have the potential to lead to the development of therapies to improve skeletal muscle regeneration.

We present techniques for isolating, culturing, characterizing, and differentiating human primary muscle progenitor cells (hMPCs) obtained from skeletal muscle biopsy tissue. hMPCs obtained and characterized through these methods can be used to subsequently address research questions related to human myogenesis and skeletal muscle regeneration.

골격 근 생검 절차에서 인간 근육 선조 세포의 격리, 배양, 특성화 및 분화

The use of primary human tissue and cells is ideal for the investigation of biological and physiological processes such as the skeletal muscle ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly effective. This video describes the percutaneous biopsy technique using a modified Bergstr&#246;m needle to obtain skeletal muscle tissue samples from the vastus lateralis of human subjects. The Bergstr&#246;m needle consists of an outer cannula with a small opening (&#8216;window&#8217;) at the side of the tip and an inner trocar with a cutting blade at the distal end. Under local anesthesia and aseptic conditions, the needle is advanced into the skeletal muscle through an incision in the skin, subcutaneous tissue, and fascia. Next, suction is applied to the inner trocar, the outer trocar is pulled back, skeletal muscle tissue is drawn into the window of the outer cannula by the suction, and the inner trocar is rapidly closed, thus cutting or clipping the skeletal muscle tissue sample. The needle is rotated 90&#176;&#160;and another cut is made. This process may be repeated three more times. This multiple cutting technique typically produces a sample of 100-200 mg or more in healthy subjects and can be done immediately before, during, and after a bout of exercise or other intervention. Following post-biopsy dressing of the incision site, subjects typically resume their activities of daily living right away and can fully participate in vigorous physical activity within 48-72 hr. Subjects should avoid heavy resistance exercise for 48 hr to reduce the risk of herniation of the muscle through the incision in the fascia.

The purpose of this video is to present the modified Bergstr&#246;m skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

수정 된 버그 스트롬 기술을 이용하여 인간의 골격 근육 생검 절차

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Preparation and Respirometric Assessment of Mitochondria Isolated from Skeletal Muscle Tissue Obtained by Percutaneous Needle Biopsy

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining samples of human Vastus lateralis, isolating mitochondria from minimal amounts of skeletal muscle tissue, and plate based respirometric profiling using an extracellular flux (XF) analyzer. Comparison of respirometric profiles obtained using 1.0, 2.5 and 5.0 &#956;g of mitochondria indicate that 1.0 &#956;g is sufficient to measure respiration and that 5.0 &#956;g provides most consistent results based on comparison of standard errors. Western blot analysis of isolated mitochondria for mitochondrial marker COX IV and non-mitochondrial tissue marker GAPDH indicate that there is limited non-mitochondrial contamination using this protocol. The ability to study mitochondrial respirometry in as little as 20 mg of muscle tissue allows users to utilize individual biopsies for multiple study endpoints in clinical research projects.

Methods for biopsy of Vastus lateralis, preparation of purified mitochondria, and respirometric profiling are described. The use of small muscle volume makes this technique suitable for clinical research applications.

경피적 바늘 생검에 의해 획득 골격근 조직에서 고립 된 미토콘드리아의 준비 및 호흡계 평가

Respirometric profiling of isolated mitochondria is commonly used to investigate electron transport chain function. We describe a method for obtaining ...

Semi-automated Analysis of Mouse Skeletal Muscle Morphology and Fiber-type Composition

For years, distinctions between skeletal muscle fiber types were best visualized by myosin-ATPase staining. More recently, immunohistochemical staining of myosin heavy chain (MyHC) isoforms has emerged as a finer discriminator of fiber-type. Type I, type IIA, type IIX and type IIB fibers can now be identified with precision based on their MyHC profile; however, manual analysis of these data can be slow and down-right tedious. In this regard, rapid, accurate assessment of fiber-type composition and morphology is a very desirable tool. Here, we present a protocol for state-of-the-art immunohistochemical staining of MyHCs in frozen sections obtained from mouse hindlimb muscle in concert with a novel semi-automated algorithm that accelerates analysis of fiber-type and fiber morphology. As expected, the soleus muscle displayed staining for type I and type IIA fibers, but not for type IIX or type IIB fibers. On the other hand, the tibialis anterior muscle was composed predominantly of type IIX and type IIB fibers, a small fraction of type IIA fibers and little or no type I fibers. Several image transformations were used to generate probability maps for the purpose of measuring different aspects of fiber morphology (i.e., cross-sectional area (CSA), maximal and minimal Feret diameter). The values obtained for these parameters were then compared with manually-obtained values. No significant differences were observed between either mode of analysis with regards to CSA, maximal or minimal Feret diameter (all p &#62; 0.05), indicating the accuracy of our method. Thus, our immunostaining analysis protocol may be applied to the investigation of effects on muscle composition in many models of aging and myopathy.

Immunohistochemical staining of myosin heavy chain isoforms has emerged as the state-of-the-art discriminator of skeletal muscle fiber-type (i.e., type I, type IIA, type IIX, type IIB). Here, we present a staining protocol along with a novel semi-automated algorithm that facilitates rapid assessment of fiber-type and fiber morphology.

마우스 골격 근육 형태와 섬유 형 구성의 반 자동화 된 분석

For years, distinctions between skeletal muscle fiber types were best visualized by myosin-ATPase staining. More recently, immunohistochemical staining of ...

Nerve Stimulator-guided Injection of Autologous Stem Cells Near the Equine Left Recurrent Laryngeal Nerve

Recurrent laryngeal neuropathy (RLN) commonly affects horses and is characterized by abnormal respiratory sounds and exercise intolerance. The recurrent laryngeal nerve shows lesions of demyelination. The benefit of applying stem cells to demyelinated nerves has been demonstrated in various animal models. The aim of the study was to test the feasibility and safety of a peri-neuronal injection of autologous muscle-derived mesenchymal stem cells to the left recurrent laryngeal nerve in healthy horses by using an electrical nerve stimulator.
Muscle-derived stems cell are obtained from five healthy Standardbred horses by sampling 20 mg of muscle tissue with a semi-automatic 14 G biopsy needle from the triceps muscle. Movements of the larynx are monitored via upper-airway video endoscopy. The left recurrent laryngeal nerve is approached with an insulated nerve block needle. Nerve stimulation is applied, starting at 2 mA, and the successful abduction of the left arytenoid is monitored. The stimulation intensity is reduced progressively. When a loss of the motor response is observed at 0.5 mA, 107 autologous muscle-derived stem cells are injected. Two examiners, who are blinded to the time point, score the laryngeal function of the horses prior to the treatment and at day 1, day 7, and day 28 after the injection of the cells. In a sixth horse, 1 mL of 2% lidocaine is injected to further confirm the correct positioning of the needle. This leads to a temporary paralysis of the left arytenoid cartilage.
This study proves that the recurrent laryngeal nerve can be approached with the help of an electrical nerve stimulator and that the electrical stimulation of the nerve is well tolerated by the horses. No modification of the laryngeal function was observed in any of the horses after the injection of the stem cells. Further studies should be conducted to describe the effects of a peri-neuronal injection of autologous muscle-derived mesenchymal stem cells to horses suffering from RLN.

Here, we present a protocol to inject autologous muscle-derived stem cells in the proximity to the recurrent laryngeal nerve with the help of an electrical nerve stimulator. This novel technique may become useful for the treatment of equine recurrent laryngeal neuropathy.

말 왼쪽된 회귀 후 두 신경 근처 헌 혈 줄기 세포의 신경 자극을 유도 주사

Recurrent laryngeal neuropathy (RLN) commonly affects horses and is characterized by abnormal respiratory sounds and exercise intolerance. The recurrent ...

Immunolabelling Myofiber Degeneration in Muscle Biopsies

The necrosis of muscle fibres (myonecrosis) plays a central role in the pathogenesis of several muscle conditions, including muscular dystrophies. Therapeutic options addressing the causes of muscular dystrophy pathogenesis are expected to alleviate muscle degeneration. Therefore, a method to assay and quantify the extent of cell death in muscle biopsies is needed. Conventional methods to observe myofiber degeneration in situ are either poorly quantitative or rely on the injection of vital dyes. In this article, an immunofluorescence protocol is described that stains necrotic myofibers by targeting immunoglobulin G (IgG) uptake by myofibers. The IgG uptake method is based on cell features characterizing the necrotic demise, including 1) the loss of plasma membrane integrity with the release of damage-associated molecular patterns and 2) the uptake of plasmatic proteins. In murine cross-sections, the co-immunolabelling of myofibers, extracellular matrix proteins, and mouse IgG allows clean and straightforward identification of myofibers with necrotic fate. This simple method is suitable for quantitative analysis and applicable to all species, including human samples, and does not require the injection of vital dye. The staining of necrotic myofibers by IgG uptake can also be paired with other co-immunolabelling.

Described here is a protocol for direct immunolabelling of necrotic myofibers in muscle cryosections. Necrotic cells are permeable to serum proteins, including immunoglobulin G (IgG). Revealing the uptake of IgG by myofibers allows the identification and quantification of myofibers that undergo necrosis regardless of muscle condition.

근육 생검에 있는 면역 표지하는 Myofiber 변성

The necrosis of muscle fibres (myonecrosis) plays a central role in the pathogenesis of several muscle conditions, including muscular dystrophies. ...

생물학

Collection of Skeletal Muscle Biopsies from the Superior Compartment of Human Musculus Tibialis Anterior for Mechanical Evaluation

The mechanical properties of contracting skeletal fibers are crucial indicators of overall muscle health, function, and performance. Human skeletal muscle biopsies are often collected for these endeavors. However, relatively few technical descriptions of biopsy procedures, outside of the commonly used musculus vastus lateralis, are available. Although the biopsy techniques are often adjusted to accommodate the characteristics of each muscle under study, few technical reports share these changes to the greater community. Thus, muscle tissue from human participants is often wasted as the operator reinvents the wheel. Expanding the available material on biopsies from a variety of muscles can reduce the incident of failed biopsies. This technical report describes a variation of the modified Bergstr&#246;m technique on the musculus tibialis anterior that limits fiber damage and provides fiber lengths adequate for mechanical evaluation. The surgery is an outpatient procedure that can be completed in an hour. The recovery period for this procedure is immediate for light activity (i.e., walking), up to three days for the resumption of normal physical activity, and about one week for wound care. The extracted tissue can be used for mechanical force experiments and here we present representative activation data. This protocol is appropriate for most collection purposes, potentially adaptable to other skeletal muscles, and may be improved by modifications to the collection needle.

This technical report describes a variation of the modified Bergstr&#246;m technique for the biopsy of the musculus tibialis anterior that limits fiber damage.

기계적 평가를 위한 인간 근육 티비아리스 전방의 우수한 구획에서 골격 근육 생검 의 컬렉션

The mechanical properties of contracting skeletal fibers are crucial indicators of overall muscle health, function, and performance. Human skeletal muscle ...

Isolation of Mitochondria from Mouse Skeletal Muscle for Respirometric Assays

Most of the cell&#39;s energy is obtained through the degradation of glucose, fatty acids, and amino acids by different pathways that converge on the mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) system, which is regulated in response to cellular demands. The lipid molecule Coenzyme Q (CoQ) is essential in this process by transferring electrons to complex III in the electron transport chain (ETC) through constant oxidation/reduction cycles. Mitochondria status and, ultimately, cellular health can be assessed by measuring ETC oxygen consumption using respirometric assays. These studies are typically performed in established or primary cell lines that have been cultured for several days. In both cases, the respiration parameters obtained may have deviated from normal physiological conditions in&#160;any given organ or tissue.
Additionally, the intrinsic characteristics of cultured single fibers isolated from skeletal muscle impede this type of analysis. This paper presents an updated and detailed protocol for the analysis of respiration in freshly isolated mitochondria from mouse skeletal muscle. We also provide solutions to potential problems that could arise at any step of the process. The method presented here could be applied to compare oxygen consumption rates in diverse transgenic mouse models and study the mitochondrial response to drug treatments or other factors such as aging or sex. This is a feasible method to respond to crucial questions about mitochondrial bioenergetics metabolism and regulation.

Here, we describe a detailed method for mitochondria isolation from mouse skeletal muscle and the subsequent analysis of respiration by Oxygen Consumption Rate (OCR) using microplate-based respirometric assays. This pipeline can be applied to study the effects of multiple environmental or genetic interventions on mitochondrial metabolism.

호흡 측정을 위한 마우스 골격근으로부터 미토콘드리아의 분리

Most of the cell&#39;s energy is obtained through the degradation of glucose, fatty acids, and amino acids by different pathways that converge on the ...

사람의

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