우리는이 실험 기술의 발전 중에 기술 입력을 제공하는 박사 댄 그린 주셔서 감사합니다. 이 작품은 NIH 그랜트 R01 - EY016849A와 스미스 패밀리 새로운 탐정 수상에 의해 지원되었다.

부품 I : 텅스텐 - 인 - 유리 전극 제작 <ol><li> 흑연 반지 나트륨 질산 (0.71g/mL)와 물 1 녹아 수산화 칼륨 (0.34g/mL)의 집중 솔루션으로 가득한 비커에 배치되며, 비커는 수정된 재봉틀의 바느질 겨드랑이 위치 . </li><li> 텅스텐 와이어 (0.5mm 직경 6cm 길이)가 부분적으로 솔루션 (1-2cm) 잠겨 있도록 바느질 팔이 테이프로 붙여져 있습니다. </li><li> 2V은 흑연 반지에 바느질 팔과 부정적인 리드에 긍정적인 리드를 부착하여 텅스텐 와이어에 걸쳐 적용됩니다. </li><li> 재봉틀이 켜져 있고 텅스텐 와이어는 electrolytically 샵 포인트로 금속을 파 놓았 2 분에 대해 ~ 4Hz의 속도로 솔루션에 반복적으로 감소합니다. </li><li> 에칭 와이어는 수동 micromanipulator과 유리 피펫 (0.25mm OD, 0.175mm ID) 유리 풀러와 1mm 팁로 뽑았의 샤프트와 미세한지도 (40x 배율)에서 정렬 지점에 배치됩니다. 와이어 삽입하는 동안 움직임을 방지하기 위해 유리가 일시적으로 퍼티로 현미경 단계로 보안이됩니다. </li><li> 와이어는 조심스럽게 축 아래, 유리의 unpulled 끝에 고급이며, 1μm 개방을 통해 유리의 작은 조각은 유리에 텅스텐의 꽉 맞는를 나타내는, 비디오 팁을를 끊다을 볼 수 있습니다. 와이어 쥐 광섬유 레코딩을위한 팁 이외 5-10밀리미터 주변 연장해야합니다. </li><li> Cyanoacrylate는 유리의 unpulled 끝에 적용되고 1MΩ 전극은 일반적으로 최고의 작품 어디 경화 후 전기 임피던스가 측정됩니다. </li></ol> 부 II : Stereotaxic 설치 및 스파이크 기차 레코딩 <ol><li> 자극 디스플레이 시스템은 위치와 두뇌에 전극을 낮추는위한 stereotaxic기구 및 microdrive와 함께 비디오에 그림입니다. </li><li> 망막 스파이크 열차 레코딩을 수행하려면 생쥐가 anesthetized 나중에 마비입니다. 표준 절차 (삽화가되지 않음) 약물 전달 및 마비 동안 기계적 환기를위한 tracheal (Y - 튜브) 정맥의 대퇴 정맥의 정맥의 삽입 수술을 위해 사용됩니다. 실험 동물 터미널입니다. </li><li> 준비 절차 후, 동물은 난방 담요에 위치하고 있으며 머리는 귀 및 치아 바와 같은 쥐의 뇌 아틀라스 2 정의 stereotaxic 위치에 고정됩니다. </li><li> 직장 프로브가 삽입됩니다, 이것은 37 체온을 유지 homeothermic 제어 장치 ° C. 통해 난방 담요를 제어 </li><li> 심전도 및 모니터 심장 박동수를 측정하는 리드와 같은 금속 바늘이 사용됩니다. </li><li> 피부는 두개골 위에 개설하고 두개골 플레이트의 교차로는 (bregma) 노출됩니다. 맞춤 디자인 크로스바 프레임이 위치에 설정, 원형이 크로스바에 구멍 begma 주변 두개골에 표시된이며, 크로스바가 일시적으로 제거됩니다. </li><li> stereotaxic 시스템은 bregma 통해 안내 바늘을 위치하여 보정합니다. 5 mm 구멍이 표시된 위치에 두개골에 몰락하고 뼈가 두뇌를 노출, 제거됩니다. 퍼티 얇은 반지는 장소로 재설정됩니다 크로스바에 구멍 주위에 도장을 형성하기 위해 두개골에 구멍 주위에 배치됩니다. </li><li> 동물이 잠시 마취의 안정적인 비행기에있다면, 그것은 데이터 수집 중에 눈동자의 움직임을 방지하기 위해 중풍로 주입됩니다. 호흡 후 동물 기계적 통풍이 중지됩니다. 사용자 지정 프로그램은 실험을하는 동안 환기 및 생리 매개 변수를 추적하고 매개 변수가 정상 수준 밖에 나가서해야 보상 조치가 필요한 경우 실험자을 알려줍니다. </li><li> 가이드 바늘은 텅스텐 전극과 backloaded과 두뇌로 저하됩니다. 뇌 침투 후 크로스바 구멍은 한천 (표시되지 않음)으로 가득합니다, 그리고 microdrive 조립은 기계적 안정성에 대한 크로스바에 고정되어 있습니다. 팁는 광학 chiasm가있는 두개골 아래 8~9밀리미터에 대한 때까지 텅스텐 전극은 다음 가이드 바늘 아웃 (2μm/sec) 천천히 고급입니다. </li><li> 망막 신경절 세포에 속하는 스파이크 열차는 Visual 입력 자신의 반응에 의해 식별됩니다. 단일 광섬유의 분리시 기록된 세포의 수용 필드는 시각적 공간에서 매핑이며 응답 특성은 표류 통같이 또는 관심의 다른 시각적 패턴과 특징. 시스템의 안정성을 몇 시간 3의 단일 단위 레코딩을 허용합니다. </li></ol> 자료 성인 브라운 - 노르웨이 쥐 (250~400g)은 상업적인 공급 업체로부터 구입하여 규제 (12분의 12) 진한 / 라이트 사이클에 따라 보관되어 있었다. 마취는 마취제 하이드로 클로라이드와 xylazine (70과 2 MG / kg, 각각, 헨리 Schein 병원)의 intraperitoneal 주사로 유도하고 exper의 기간 동안 유지되었다카테터를 통해 정맥 호수 덱스 트로 오스와 혼합 마취제와 xylazine의 주입 (30 1 MG / ㎏ / HR) 및 gallamine의 triethiodide (40 MG / ㎏ / HR, 피셔 부동산) (0.13mm OD, 작은 부분 병원과 iment 오른쪽 대퇴 정맥에서). Gallamine는 눈동자의 움직임을 마비하는 혼합물에 포함되어 있습니다. 심장 박동과 혈압 변화에 의해 평가로 마취의 안정적인 비행기를 유지하는 데 필요한 같은 펌프 (WPI 병원)의 주입 속도가 조정되었습니다. 마비 후, 동물은 기계 최종 조류 CO 2 인 - 라인 측정 유지하기 위해 필요에 따라 조정 속도, 60-80 심호흡 / 분 (2cc 볼륨)에 tracheal 정맥을 통해 (하버드 장치, 모델 683) 통풍이되었습니다 capnometer (Novametrix 병원, 모델 710Sp) 30 %. 체온은 homeothermic 담요 제어 시스템 (하버드 장치 병원)​​을 통해 규제되었습니다. 체온, 최종 갯벌 CO 2, 심장 박동과 혈압이 지속적으로 LABVIEW 프로그램에 의해 실험을하는 동안 모니터링했다. 시각적 자극은 800x600 이상 픽셀의 해상도와 100 Hz에서에서 실행 소니 Multiscan 17e CRT 모니터 (30 CD / m 2의 휘도를 의미)에 발표했다. 데이터 수집 및 모니터 출력은 비디오 이미지 프로세서 (캠브리지 연구 시스템 병원, 비트 + +)와 Psychophysics 도구 상자 4 함께 Matlab와 LabView로 작성된 사용자 정의 소프트웨어와 제어했습니다. 동물 콘택트 렌즈 (안구 인스 트루먼 트의 병원)을 통해 16.5cm의 거리에 자극 디스플레이 (40.4 X 30.2 cm) 조회하고, 안과 솔루션은 촉촉한 눈을 유지하기 위해 실험 기간 동안 주기적으로 적용되었다. 자극에 액세스할 수 시야는 (공동 스토엘팅) 부동 테이블 (TMC 병원)의 표면 위에 고가 14cm stereotaxic 장치에있는 동물을 장착하고 함께 테이블에 옮겨 맞춤 설계 썰매에서 모니터 설정을 반대하여 최대화했습니다 코가에 대한 ± 100 데그 아크. 이것은 60 - 데그 이상 및 35 데그 눈높이 아래와 ± 42 - 데그 옆으로 모니터의 중심에서 확장 repositionable 표시 필드를 제공합니다. 텅스텐 electodes은 유리 팁을 형성하는 데 사용된 작은 부분 부동산과 프리드리히와 딤막 주식 회사 표준 micropippete 풀러 (셔터 인 스트 루먼트, 모델 P - 97)에서 얻은 사용자 borosilicate 유리에서 얻은 철사로 조작했다. 전극 임피던스 시험기는 박 - 전자에서 구입한했다. 전극은 전동 microdrive 시스템 (뉴 포트 병원, StepperMike)와 고급되었습니다. 심전도 및 시신경 신호는 높은 입력 임피던스 multielectrode 증폭기 (FHC 병원, X - 셀 3x4)으로 증폭하고 필터링되었습니다. 심장 박동은 윈도우 discriminator (WPI 병원, 모델 121)을 발견했다. 신경 행동 잠재력은 디지털 대못 discriminator (FHC 병원, APM)에 의해 0.1ms 해상도 감지와 시간 스탬프를했다. 스파이크 스파이크 discriminator은 시간이 자극에 잠겨 있었 있도록 비디오 이미지 프로세서에서 트리거 신호에 의해 문이되었다.

<ol>
	<li>Levick, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Another+tungsten+microelectrode.">Another tungsten microelectrode.</a> Med Biol Eng. 10 (4), 510-515 (1972).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat brain in stereotaxic coordinates. , (1998).</li><li>Freeman, D. K., Heine, W. F., Passaglia, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+maintained+discharge+of+rat+retinal+ganglion+cells.">The maintained discharge of rat retinal ganglion cells.</a> Vis Neurosci. 25 (4), 535-548 (2008).</li><li>Brainard, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+psychophysics+toolbox.">The psychophysics toolbox.</a> Spat Vis. 10, 433-436 (1997).</li></ol>

모든 실험 절차는 보스턴 대학에서 기관 애니멀 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.

광섬유 레코딩이 그대로 눈에 필요한 망막 정보 인코딩 및 전송에 관한 실험적 질문을 해결하기위한 매력적인 접근 방식입니다. 전극은 광학 chiasm이나 교차 및 교차되지 않은 시신경 섬유의 활동이 하나의 전극 침투로 기록될 수 트랙트의 위치에있는 경우 또한, 두 눈의 신호 특성이 거의 같은 생리적 상태에서 공부하실 수 있습니다. 광섬유 레코딩은 그들의 작은 크기에 아마도 때문에 설치류 같은 비전 연구에 사용되는 다른 인기있는 동물 모델에서 고양이의 공통점지만 없습니다. 우리는 쥐를의 단일 섬유 움직임에 성공할 수 있었던 없음 중 유사한 임피던스와 소재의 상업 전극의 다양한 시도가, 우리의 전극 수와 같은 몇 시간을 위해 녹음을 혼자하자. 이것은 전형적인 상업 자들의 넓은 무딘 팁 반대로 긴 날카로운 팁을 가지고 우리의 전극,의 특정 기하학이 신경절 세포 축삭 스파이크 열차의 신뢰성과 안정 절연을 위해 중요하다는 것을 의미합니다. 이 전극을 조작하는 방법을 보여주는 이외에도, 우리는 생체내 영상 neurophysiological 연구를위한 맞춤 설계 stereotaxic 시스템을 보여줍니다. 시스템은 환경 진동로부터 전자기 잡음의 높은 임피던스 microelectrode을 보호하기 위해 구성되어 있습니다. 이것은 특히 인근 위치 컴퓨터 모니터, 시간 연장 기간 동안 axons (같은 세포 기관에 비해)에 의해 만들어진 작은 행동 잠재력을 녹음 중요합니다. 그것은 시간 더 microvolts 수만의 순서에 소음의 일반적인 녹화 시간과 함께, 뛰어난 안정성과 신호 대 잡음 비율로 그렇게 않습니다. 이러한 기능은 망막이나 다른 뇌 영역의 신경 섬유의 생체내의 기록을 목표로 비전 연구자에 대한 설정이 특히 유용합니다.

single-unit in vivo recordings from the optic chiasm of rat

시각 세계에 대한 정보가 시신경을 만들어 망막 신경절 세포 axons의 행동 잠재력의 시퀀스에있는 두뇌에 전송됩니다.<em&gt; 생체내에서</em여러 동물 모델에서 신경절 세포 스파이크 열차&gt; 녹음 방법은 초기 시각 시스템 프로세스에 대한 알려진 무엇의 많은 발표와 시각 정보를 인코딩합니다. 그러나, 녹음 작은 직경 axons에 의해 해고 스파이크를 감지에 어려움을 가능성 때문에 가장 일반적인 동물 모델 중 하나 쥐에서 희귀되었습니다. 쥐를 포함한 여러 망막 질환 모델은 intraocular 또는, 시선을 방해하지 않고 신경절 세포의 기능 특성을 특성화를위한 필요 동기를 부여<em&gt; 체외에서</em&gt; 녹음. 여기, 우리는 anesthetized 암흑의 광학 chiasm에서 기록 신경절 세포 스파이크 열차에 대한 방법을 보여줍니다. 우리가 먼저 쥐의 단일 신경절 세포 axons에서 전기 활동을 선택할 수 있습니다 텅스텐 - 인 - 유리 전극을 조작하는 방법을 보여줍니다. 전극은 우리가 시도해야하는 모든 상업 사람 들보다 뛰어난 실력을 보이고. 그러면 우리의 맞춤 설계 stereotaxic 시스템을 설명<em&gt; 생체내에</em&gt; 비주얼 neurophysiology 실험 및 동물 준비 및 광학 chiasm의 신뢰성과 안정적인 전극 배치를위한 절차.

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Single-unit In vivo Recordings from the Optic Chiasm of Rat

망막 신경절 세포는 눈의 작업 잠재력의 시퀀스와 뇌로 영상 정보를 전송. 여기, 우리는 하나의 신경절 세포의 활동 잠재력을 기록하는 방법을 보여줍니다<em&gt; 생체내에</em&gt; anesthetized 쥐에서.

단일 유닛 생체내에서</em암흑의 광학 Chiasm에서> 레코딩

Information about the visual world is transmitted to the brain in sequences of action potentials in retinal ganglion cell axons that make up the optic ...

single-unit-in-vivo-recordings-from-the-optic-chiasm-of-rat

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Single-unit In vivo Recordings from the Optic Chiasm of Rat

11.6K 조회수.  Boston University. 망막 신경절 세포는 눈의 작업 잠재력의 시퀀스와 뇌로 영상 정보를 전송. 여기, 우리는 하나의 신경절 세포의 활동 잠재력을 기록하는 방법을 보여줍니다 생체내에 anesthetized 쥐에서.

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A Method for High Fidelity Optogenetic Control of Individual Pyramidal Neurons In vivo

Optogenetic methods have emerged as a powerful tool for elucidating neural circuit activity underlying a diverse set of behaviors across a broad range of species. Optogenetic tools of microbial origin consist of light-sensitive membrane proteins that are able to activate (e.g., channelrhodopsin-2, ChR2) or silence (e.g., halorhodopsin, NpHR) neural activity ingenetically-defined cell types over behaviorally-relevant timescales. We first demonstrate a simple approach for adeno-associated virus-mediated delivery of ChR2 and NpHR transgenes to the dorsal subiculum and prelimbic region of the prefrontal cortex in rat. Because ChR2 and NpHR are genetically targetable, we describe the use of this technology to control the electrical activity of specific populations of neurons (i.e., pyramidal neurons) embedded in heterogeneous tissue with high temporal precision. We describe herein the hardware, custom software user interface, and procedures that allow for simultaneous light delivery and electrical recording from transduced pyramidal neurons in an anesthetized in vivo preparation. These light-responsive tools provide the opportunity for identifying the causal contributions of different cell types to information processing and behavior.

A Method for High Fidelity Optogenetic Control of Individual Pyramidal Neurons In vivo

The recent development of neuroscience tools that combine genetics and optics, termed "optogenetics", enables control over neural circuit activity with an unprecedented level of spatial and temporal resolution. Here we provide a protocol for integrating in vivo recording with optogenetic manipulation of genetically-defined subsets of prefrontal cortical and subicular pyramidal neurons.

개별 피라미드 뉴런의 고 충실도 Optogenetic 제어하는​​ 방법<em&gt; 생체 내</em

Optogenetic methods  have emerged as a powerful tool for elucidating neural circuit activity  underlying a diverse set of behaviors across a broad range ...

연구

신경과학

A Guide to In vivo Single-unit Recording from Optogenetically Identified Cortical Inhibitory Interneurons

A major challenge in neurophysiology has been to characterize the response properties and function of the numerous inhibitory cell types in the cerebral cortex. We here share our strategy for obtaining stable, well-isolated single-unit recordings from identified inhibitory interneurons in the anesthetized mouse cortex using a method developed by Lima and colleagues1. Recordings are performed in mice expressing Channelrhodopsin-2 (ChR2) in specific neuronal subpopulations. Members of the population are identified by their response to a brief flash of blue light. This technique &#8211; termed &#8220;PINP&#8221;, or Photostimulation-assisted Identification of Neuronal Populations &#8211; can be implemented with standard extracellular recording equipment. It can serve as an inexpensive and accessible alternative to calcium imaging or visually-guided patching, for the purpose of targeting extracellular recordings to genetically-identified cells. Here we provide a set of guidelines for optimizing the method in everyday practice. We refined our strategy specifically for targeting parvalbumin-positive (PV+) cells, but have found that it works for other interneuron types as well, such as somatostatin-expressing (SOM+) and calretinin-expressing (CR+) interneurons.

A Guide to In vivo Single-unit Recording from Optogenetically Identified Cortical Inhibitory Interneurons

Here we describe our strategy for obtaining stable, well-isolated single-unit recordings from identified inhibitory interneurons in the anesthetized mouse cortex. Neurons expressing ChR2 are identified by their response to blue light. The method uses standard extracellular recording equipment, and serves as an inexpensive alternative to calcium imaging or visually-guided patching.

에 가이드<em&gt; 생체</emOptogenetically 확인 된 대뇌 피질의 억제의 interneurons에서&gt; 단일 단위 기록

A major challenge in neurophysiology has been to characterize the response properties and function of the numerous inhibitory cell types in the cerebral ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to monitor the disease course in the follow-up period. Changes in the VEP parameters closely correlate with pathological damage in the optic nerve. This protocol provides a detailed description about the rodent model of optic nerve microinjection, in which a partial demyelination lesion is produced in the optic nerve. VEP recording techniques are also discussed. Using skull implanted electrodes, we are able to acquire reproducible intra-session and between-session VEP traces. VEPs can be recorded on individual animals over a period of time to assess the functional changes in the optic nerve longitudinally. The optic nerve demyelination model, in conjunction with the VEP recording protocol, provides a tool to investigate the disease processes associated with demyelination and remyelination, and can potentially be employed to evaluate the effects of new remyelinating drugs or neuroprotective therapies.

Focal demyelination is induced in the optic nerve using lysolecithin microinjection. Visual evoked potentials are recorded via skull electrodes implanted over the visual cortex to examine the signal conduction along the visual pathway in vivo. This protocol details the surgical procedures underlying electrode implantation and optic nerve microinjection.

실험 시신경의 탈수 초화의 쥐 모델에서 시각 유발 전위 기록

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the electrical responses of the retina to light stimulation, while the VEP measures the corresponding functional integrity of the visual pathways from the retina to the primary visual cortex following the same light event. The ERG waveform can be broken down into components that reflect responses from different retinal neuronal and glial cell classes. The early components of the VEP waveform represent the integrity of the optic nerve and higher cortical centers. These recordings can be conducted in isolation or together, depending on the application. The methodology described in this paper allows simultaneous assessment of retinal and cortical visual evoked electrophysiology from both eyes and both hemispheres. This is a useful way to more comprehensively assess retinal function and the upstream effects that changes in retinal function can have on visual evoked cortical function.

This protocol describes simultaneous measurement of electroretinogram and visual evoked potentials in anesthetized rats.

전위도의 동시 녹화 및 마취 된 흰쥐의 비주얼 사건 관련 전위

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic tectum, is a popular model to study how neural circuits self-assemble. The ability to carry out whole cell patch clamp recordings from tectal neurons and to record RGC-evoked responses, either in vivo or using a whole brain preparation, has generated a large body of high-resolution data about the mechanisms underlying normal, and abnormal, circuit formation and function. Here we describe how to perform the in vivo preparation, the original whole brain preparation, and a more recently developed horizontal brain slice preparation for obtaining whole cell patch clamp recordings from tectal neurons. Each preparation has unique experimental advantages. The in vivo preparation enables the recording of the direct response of tectal neurons to visual stimuli projected onto the eye. The whole brain preparation allows for the RGC axons to be activated in a highly controlled manner, and the horizontal brain slice preparation allows recording from across all layers of the tectum.

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

In this paper, we discuss three brain preparations used for whole cell patch clamp recording to study the retinotectal circuit of Xenopus laevis tadpoles. Each preparation, with its own specific advantages, contributes to the experimental tractability of the Xenopus tadpole as a model to study neural circuit function.

준비 및 Xenopus laevis Tectal 신경의 전체 셀 패치 클램프 기록에 대 한 프로토콜

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...

Optogenetics Identification of a Neuronal Type with a Glass Optrode in Awake Mice

It is a major concern in neuroscience how different types of neurons work in neural circuits. Recent advances in optogenetics have enabled the identification of the neuronal type in in vivo electrophysiological experiments in broad brain regions. In optogenetics experiments, it is critical to deliver the light to the recording site. However, it is often hard to deliver the stimulation light to the deep brain regions from the brain&#39;s surface. Especially, it is difficult for the stimulation light to reach the deep brain regions when the optical transparency of the brain surface is low, as is often the case with recordings from awake animals. Here, we describe a method to record spike responses to the light from an awake mouse using a custom-made glass optrode. In this method, the light is delivered through the recording glass electrode so that it is possible to reliably stimulate the recorded neuron with light in the deep brain regions. This custom-made optrode system consists of accessible and inexpensive materials and is easy to assemble.

This work introduces a method to perform an optogenetic single-unit recording reliably from an awake mouse using a custom-made glass optrode.

깨어 있는 쥐에 유리 Optrode 신경 형식의 Optogenetics 식별

It is a major concern in neuroscience how different types of neurons work in neural circuits. Recent advances in optogenetics have enabled the ...

<meta charset="utf8"></head><body>Angled Silicon Multielectrode Recordings for Deep Brainstem Structures in Mice

Acute Single-Unit Multi-Electrode Recordings from the Brainstem of Head-Fixed Mice

Silicon multielectrode-based recordings are increasingly popular for studying neuronal activity at the temporal resolution of action potentials in many brain regions. However, recording neuronal activity from deep caudal structures like the brainstem using multi-channel probes remains challenging. A significant concern is finding a trajectory for probe insertion that avoids large blood vessels, such as the superior sagittal venous sinus and the transverse venous sinus. Injuring these large veins can cause extensive bleeding, damage to the underlying brain tissue, and potentially death. This approach describes targeting brainstem structures by coupling anterior coordinates with an angled approach, allowing the recording probe to penetrate the brain below high-risk vascular structures. Compared to a strictly vertical approach, the angled approach maximizes the number of brain regions that can be targeted. Using this strategy, the ventrolateral periaqueductal gray (vlPAG), a brainstem region associated with REM sleep, can be reproducibly and reliably accessed to obtain single-unit, multi-electrode recordings in head-fixed mice before and during sevoflurane anesthesia. The ability to record neuronal activity in the vlPAG and surrounding nuclei with high temporal resolution is a step forward in advancing the understanding of the relationship between REM sleep and anesthesia.

<meta charset="utf8"></head><body>저자 스포트라이트: Investigating Anesthesia-Induced Sleep Pathways and Neuronal Excitability in Mice (생쥐의 마취 유도 수면 경로 및 신경 흥분성 조사)

This protocol describes a method to obtain in vivo, high-density single-neuron recordings from the brainstem of head-fixed mice. This approach is deployed to measure the action potential firing of neurons in the ventrolateral periaqueductal gray - a brainstem region inactive during Rapid Eye Movement (REM) sleep - before and during general anesthesia.

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

Silicon multielectrode-based recordings are increasingly popular for studying neuronal activity at the temporal resolution of action potentials in many ...

Transconjunctival Approach for Injection into the Rat Optic Nerve

The rat serves as an important model for studying disorders of the optic nerve, including heritable, traumatic, neoplastic, and autoimmune conditions. Accessing the rat optic nerve for experimental manipulations and injections is challenging due to the small size of the orbit and the vascularity of the surrounding orbital tissues. Previous techniques have involved a cutaneous incision, which carries a higher risk of infection and requires wound closure. This study aims to describe a unique, less invasive, and potentially more efficient approach to accessing the rat optic nerve. A transconjunctival incision, along with a rat spinal cord hook, is used to isolate the optic nerve for experimental injections. In these experiments, an adenoviral vector is injected into the optic nerve with the goal of using this technique for direct gene therapy delivery in the future. This technique can also be applied by investigators requiring access to the rat optic nerve for other experimental studies, including drug delivery and optic nerve injury research.

This protocol describes a unique technique using a transconjunctival approach to access the rat optic nerve for injections.

쥐의 시신경에 주입하기 위한 경결막 접근법

The rat serves as an important model for studying disorders of the optic nerve, including heritable, traumatic, neoplastic, and autoimmune conditions. ...

단일 유닛 생체내에서 레코딩

요약

더 많은 비디오 탐색

이 비디오의 챕터

개별 피라미드 뉴런의 고 충실도 Optogenetic 제어하는 방법

에 가이드

실험 시신경의 탈수 초화의 쥐 모델에서 시각 유발 전위 기록

전위도의 동시 녹화 및 마취 된 흰쥐의 비주얼 사건 관련 전위

준비 및 Xenopus laevis Tectal 신경의 전체 셀 패치 클램프 기록에 대 한 프로토콜

깨어 있는 쥐에 유리 Optrode 신경 형식의 Optogenetics 식별

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

쥐의 시신경에 주입하기 위한 경결막 접근법

단일 유닛 생체내에서 레코딩

요약

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개별 피라미드 뉴런의 고 충실도 Optogenetic 제어하는​​ 방법

에 가이드

실험 시신경의 탈수 초화의 쥐 모델에서 시각 유발 전위 기록

전위도의 동시 녹화 및 마취 된 흰쥐의 비주얼 사건 관련 전위

준비 및 Xenopus laevis Tectal 신경의 전체 셀 패치 클램프 기록에 대 한 프로토콜

깨어 있는 쥐에 유리 Optrode 신경 형식의 Optogenetics 식별

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

Head-Fixed Mice의 뇌간에서 발생한 급성 단일 단위 다중 전극 기록

쥐의 시신경에 주입하기 위한 경결막 접근법

개별 피라미드 뉴런의 고 충실도 Optogenetic 제어하는 방법