現在の研究は、(1)国家自然科学基金(81973877および82174408)、(2)中国国家重点研究開発プログラム(2020YFE0201600)、(3)上海最優先研究センター建設プロジェクト(2022ZZ01009)、(4)上海共同イノベーションセンター病院中医薬準備の産業変革、および(5)上海中医薬大学の予算内の研究プロジェクト(2021LK047)からの助成金によってサポートされています。

このプロトコルはサンプルとしてYiqi Jieduの煎じ薬の使用によって骨肉腫モデルマウスの詳しい強制経口の技術を記述する。この実験では、生後4週間の雄の胸腺マウス(BALB/cヌード)を使用し、上海中医薬大学実験動物センターのSPFグレードの飼育室で飼育しました。すべての動物実験は、上海中医薬大学動物管理委員会によって承認され、実験動物倫理綱領(動物倫理承認番号:PZSHUTCM2304060007)に準拠し、実験動物に関する国際的な要件に厳密に従って実施されました。
1. 素材
<ol><li>漢方薬(高麗人参42g、 Hedyotis diffusa 52.5g、有刺鉄線スカルキャップハーブ31.5g)、1mLシリンジ、12G/55mm肘強制経口注射針を入手します(図1)。</li>
</ol>2.投与量の決定
<ol><li>標準体重60kgの成人の1日投与量は、高麗人参12g、 Hedyotis diffusa 15g、とげのある頭蓋骨ハーブ9gで、合計36gの煎じ薬、つまり0.6gの煎じ薬/ kg体重です。体表面積11によると、標準体重60kgの成体と標準体重25gのマウスの等価用量12倍、低用量6倍、高用量24倍、および我々の予備データを参照して、本研究のマウスにYiqi Jiedu煎じ薬の20倍の用量比を使用し、 したがって、マウスの投与量は12gの煎じ薬/kg体重であった。</li>
	<li>次の式を使用して、各マウスの投与量を計算します。 マウスの投与量(スタンド体重)=成人の投与量(スタンド体重)×20(指定等価線量比)。 各マウスの1日の投与量は、200 μLで0.3 g [(12 gの煎じ薬/ 1000 g体重)x 25 g体重]で、最終濃度は1.5 g / mLです。.</li>
	<li>Yiqi Jiedu 煎じ薬群のマウス (n=7) の煎じ薬の総量を 28 日間強制経口投与して 58.8 g と計算します。これを 39.2 mL に濃縮し、最終濃度 1.5 g/mL にします。</li>
	<li>煎じ薬および強制経口投与段階での薬物損失の可能性を考慮し、計算の便宜上、合計126 g(高麗人参42 g、 Hedyotis diffusa 52.5 g、とげのある頭蓋骨ハーブ31.5 g)の煎じ薬を準備し、84 mLの最終容量に濃縮します。</li>
</ol>3. 細胞源と培養
<ol><li>ATCC細胞バンクからヒト由来の143B骨肉腫細胞を購入します。</li>
	<li>10 cmの細胞培養皿に、10% FBS、100 U/mLペニシリン、および100 μg/mLのストレプトマイシンを含む10 mLのMEM培地に1 x 106 143B細胞を播種します。</li>
	<li>143B細胞を5%CO2 インキュベーターで37°Cで細胞が80%〜90%コンフルエントになるまで培養します。</li>
</ol>4. モデリング手法
<ol><li>80%コンフルエント培養した143B細胞を回収し、6 mLの10%血清含有MEM培地に再懸濁し、基底膜マトリックスゲルと体積比1:1で混合して、最終濃度が1 x 107 細胞/mLの細胞懸濁液を作製します。</li>
	<li>10μLの細胞懸濁液を各胸腺マウスの左脛骨に注入して、以前の出版物12に記載されているように、in situ異種移植骨肉腫マウスモデルを確立します。手順の概要は次のとおりです。<ol><li>細胞をPBSで2回洗浄します。1.5 mLの0.25%トリプシンで細胞を3分間トリプシン処理します。6 mL の 10% 血清含有 MEM 培地を添加します。細胞を15 mLの遠心チューブに集めます。</li>
		<li>20 μL の細胞懸濁液を細胞計数プレートのチャンバーに吸引し、自動セルカウンターを使用して細胞濃度を計算します。細胞を室温で800 x g で5分間遠心分離します。</li>
		<li>上清をピペットで廃棄し、細胞ペレットを8.5 mg/mLの基底膜マトリックスに再懸濁し、氷上に置いてください。</li>
		<li>マウスを2%イソフルランと98%の酸素(酸素流量、2 L / min)に曝露して麻酔をかけます。麻酔中の乾燥を防ぐために、少量の獣医用軟膏を目に塗ります。</li>
		<li>換気の良い場所で手順全体を実行してください。骨肉腫細胞注射の前に、足をそっと触れて、各マウスが深い麻酔下にあることを確認してください。マウスにまだ Twitch や Jerk などの応答がある場合。マウスにけいれんやジャークなどの反応が残っている場合は、これらの反応が消えるまで、より長い時間待ちます。</li>
		<li>マウスを仰臥位に置きます。親指と人差し指でマウスの足首を持ち、ベタジンと70%エタノール綿棒を交互に3回交互に投与して脛骨の注射部位を消毒します。</li>
		<li>針を1mLのシリンジに取り付け、針先を脛骨の軸に平行な注射部位に向けます。針を経皮的に挿入して、脛骨プラットフォームを貫通して脛骨の遠位端に向かって穴を開けます。</li>
		<li>以前に氷上に置いた骨肉腫細胞懸濁液をマイクロボリュームシリンジにロードし、脛骨内の1 mLシリンジを骨肉腫細胞ロードマイクロボリュームシリンジと交換します。.約 10 μL (1 x 107 cells/mL) の骨肉腫細胞懸濁液を各胸腺マウスの脛骨にゆっくりと注入します。</li>
		<li>微量シリンジを注射部位から取り外し、綿棒で注射部位を約30秒間押します。マウスを清潔なケージに戻し、10分間回復を観察します。</li>
	</ol></li>
</ol>5.強制経口投与のための漢方薬煎じ薬処方の調製(図2)
<ol><li>ステップ2に従って投与量を計算します。</li>
	<li>高価なハーブの高麗人参を除くすべての煎じ薬草を、薬の表面より3 cm高いレベルの飲料水に30分間浸し、次に以下に説明するように煎じ薬を2回実行します。</li>
	<li>強い火で沸騰するまで加熱し、次に穏やかな火で15〜25分間加熱することにより、最初の煎じ薬を実行します。軽度の火とは、通常80°Cから100°Cの範囲の温度の低電力熱を指し、強火は通常200°Cから300°Cの範囲の高出力熱を指します。</li>
	<li>煎じ薬液を1つの容器に注ぎます。</li>
	<li>薬草を飲料水で加熱し、薬の表面を沈めるのに十分な量で強い火で沸騰させ、穏やかな火で15〜25分間加熱することにより、2回目の煎じ薬を実行します。</li>
	<li>手順5.4と同じ容器に煎じ薬液を注ぎます。</li>
	<li>高麗人参42gを別々に浸して煎じ、薬の表面より3cm高い飲料水で、高価です。</li>
	<li>浸した高麗人参を強い火で60分間加熱して、最初の煎じ薬を実行します。 手順5.4と同じ容器に煎じ薬液を注ぎます。</li>
	<li>中火で40分間加熱することにより、薬の表面を水没させるのに十分な量の飲料水で高麗人参の2回目の煎じ薬を実行します。手順5.4と同じ容器に煎じ薬液を注ぎます。 注意: 煎じ薬に使用される容器は、医薬品との化学反応の可能性を避けるために、キャセロール(臨床診療で最も一般的に使用される)、セラミック、ガラス、ステンレス鋼など、化学的に安定している必要があります。.異なるステップから得られたすべての煎じ薬液は、同じ容器に入れなければなりません。</li>
	<li>計量カップの口に輪ゴムで固定された3層のガーゼを使用して、煎じ薬液を混合してろ過します。</li>
	<li>ろ過した煎じ薬を鍋の強い火で沸騰させ、次に穏やかな火に変え、目標濃度(最終濃度1.5 g / mLの最終濃度で最終容量84 mL)に達するまで弱火を保ちます。</li>
	<li>1週間の胃内投与に必要な用量に従って、濃縮煎じ薬のアリコート21mLを調製し、アリコートを-20°Cの冷蔵庫に保管します。</li>
</ol>6. 強制経口避妊装置を用いたマウスへの強制経口投与
<ol><li>マウスケージの表面またはその他の粗い表面にマウスを置きます。</li>
	<li>右手の親指と人差し指でマウスの尻尾をつかみます。次に、左手の親指、人差し指、中指でマウスの首をつかみます。</li>
	<li>左手の残りの2本の指でマウスの尻尾を持ち、マウスの頭、首、体を一直線にします。 注意: つかむプロセス全体を通して、マウスをリラックスさせてください。マウスが動きにくい場合は、マウスがリラックスするまで把持プロセスを実行する必要があります。</li>
	<li>強制経口避妊薬を右手に持ち、体重20gのマウスに200μLの煎じ薬を装填します(100μLの煎じ薬調製剤/マウスの体重10g)。</li>
	<li>強制経口注射針を口の角から挿入し、舌をマウスの上顎に押し付けます。</li>
	<li>マウスの体を同じ方向に保ち、強制経口注射針が約10mm外側に残るまで、食道に沿って胃に向かってゆっくりと押します。 注:強制経口注射針が食道に入ると空洞感があります。マウスに挿入された強制経口注射針の長さは、胸骨の上部まで測定する必要があります。.強制経口注射針の全長は60mm(図3)であるため、煎じ薬をマウスの胃に注入する前に、約50mmの強制経口注射針をマウスの体内に挿入する必要があります。</li>
	<li>煎じ薬の処方をマウスの胃に注射します。抵抗にぶつかったり、口角から液体が出たりすると、強制経口注射針の位置がずれるため、避けなければなりません。さらに、煎じ薬式が厚い場合は、注入速度を遅くする必要があります。</li>
	<li>マウスを放し、10分間観察します。強制経口投与は、呼吸異常が認められず、マウスをケージに戻せば成功です(図4)。</li>
</ol>7.治療方針
<ol><li>Yiqi Jiedu 煎じ薬の治療効果を調べるには、対照群と Yiqi Jiedu 煎じ薬群を設定します。対照群のマウスには、生理食塩水を1日1回28日間投与する。Yiqi Jiedu煎じ薬群のマウスには、Yiqi Jiedu煎じ薬を1日1回28日間投与します。</li>
</ol>8.副作用
<ol><li>ケージに戻された後のマウスの状態を注意深く観察し、体重減少や餌が胃に入らないことによる精神状態の低下などを観察します。</li>
	<li>マウスは、食物による気管閉塞により呼吸困難や息切れを経験し、気管をきれいにしようとして咳をします。強制経口投与中にこれらの症状のいずれかが観察された場合は、直ちに強制経口投与を中止し、マウスを安楽死させてください。</li>
</ol>

骨肉腫マウスにおけるハーブ煎じ薬製剤と強制経口投与の標準化

<ol>
	<li>Gao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discussion+on+advantages+and+improvement+of+traditional+Chinese+medicine+decoction.">Discussion on advantages and improvement of traditional Chinese medicine decoction.</a> Chinese Community Physicians (Comprehensive Edition). (21), 12 (2005).</li><li>Chinese Pharmacopoeia Commission. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacopoeia of the People's Republic of China. , (2015).</li><li>An, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interpretation+on+specification+of+traditional+Chinese+medicine+decoction.">Interpretation on specification of traditional Chinese medicine decoction.</a> Herald Med. 42 (11), 1648-1652 (2023).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+strategies+in+standard+decoction+of+medicinal+slices.">Research strategies in standard decoction of medicinal slices.</a> China J Chinese Materia Medica. 41 (8), 1367-1375 (2016).</li><li>Luo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+soaking+traditional+Chinese+medicine+before+decoction+on+active+components.">Effect of soaking traditional Chinese medicine before decoction on active components.</a> Shanghai Yiyao. 40 (9), 63-64 (2019).</li><li>Liu, F., Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+standardization+of+decocting+methods+of+modern+decoction.">On the standardization of decocting methods of modern decoction.</a> Global Trad Chinese Med. 7 (5), 377-378 (2014).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+decocting+times+and+instrument+on+the+quality+of+decoction.">Influence of decocting times and instrument on the quality of decoction.</a> J Trad Chinese Med. 50 (6), 550-552 (2009).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbal+decoctosome+is+a+novel+form+of+medicine.">Herbal decoctosome is a novel form of medicine.</a> Sci China. Life Sci. 62 (3), 333-348 (2019).</li><li>Lan, Y., Hu, Y., Huang, W., Tang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflections+on+PK+-+PD+model+based+on+animal+experiments+for+study+of+Chinese+medicine.">Reflections on PK - PD model based on animal experiments for study of Chinese medicine.</a> Lishizen Med Materia Medica Res. 34 (2), 395-397 (2023).</li><li>Li, Y., Bai, M., Song, Y., Guo, H., Miao, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+and+reflection+on+standard+decoction+of+Chinese+materia+medica.">Research and reflection on standard decoction of Chinese materia medica.</a> Chinese Trad Herbal Drugs. 49 (17), 3977-3980 (2018).</li><li>. Estimating the maximum safe starting dose in initial clinical trials for therapeutics in adult healthy volunteers Available from: <a target="_blank" href="https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/estimating-maximum-safe-starting-dose-initial-clinical-trials-therapeutics-adult-healthy-volunteers">https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/estimating-maximum-safe-starting-dose-initial-clinical-trials-therapeutics-adult-healthy-volunteers</a> (2005)</li><li>Chang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratibial+osteosarcoma+cell+injection+to+generate+orthotopic+osteosarcoma+and+lung+metastasis+mouse+models.">Intratibial osteosarcoma cell injection to generate orthotopic osteosarcoma and lung metastasis mouse models.</a> J Vis Exp. (176), 63072 (2021).</li><li>He, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+animal+science.">Laboratory animal science.</a> , (2006).</li><li>Patten, A. R., Fontaine, C. J., Christie, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+different+animal+models+of+fetal+alcohol+spectrum+disorders+and+their+use+in+studying+complex+behaviors.">A comparison of the different animal models of fetal alcohol spectrum disorders and their use in studying complex behaviors.</a> Fronti Pedia. 2, 93 (2014).</li><li>Jones, C. P., Boyd, K. L., Wallace, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+mice+undergoing+serial+oral+gavage+while+awake+or+anesthetized.">Evaluation of mice undergoing serial oral gavage while awake or anesthetized.</a> J Am Assoc Lab Animal Sci. 55 (6), 805-810 (2016).</li><li>Recena Aydos, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonalcoholic+fatty+liver+disease+induced+by+high-fat+diet+in+C57bl/6+models.">Nonalcoholic fatty liver disease induced by high-fat diet in C57bl/6 models.</a> Nutrients. 11 (12), 3067 (2019).</li></ol>

著者らは、開示するものは何もないと宣言しています。

伝統的な漢方薬で処方されたハーブの臨床効果は、投与量と剤形に大きく関連しています。したがって、標準化された煎じ薬戦略および熟練した投与プロセスの確立は、臨床診療において、ならびに実験結果の信頼性を向上させるためにも必要である。
この研究では、まず、伝統的な漢方薬の臨床診療で使用される漢方薬の標準化された煎じ薬の詳細な戦略を提供し、科学的に煎じ薬を煎じるための人々の指導を容易にし、煎じ薬の品質と漢方薬の臨床効果を実質的に改善します。したがって、標準化が達成されれば、臨床診療における漢方薬の有効性の正確性と一貫性が向上します。
強制経口投与法は、前臨床試験における経口摂取法として広く適用されており、マウス、ラット、ウサギなどのさまざまな実験動物に適用でき、投与の容易さ、正確な投与量管理、薬物投与の臨床経路を模倣する能力などのいくつかの利点があります13。しかし、麻酔なしで誤った姿勢で固定すると、動物は苦戦し、研究者の健康を脅かし、実験の信頼性を低下させる可能性があります。したがって、標準化された強制経口法の確立は、これらの可能性を減らし、煎じ薬が誤って食道に入ったり、食道の損傷を引き起こしたりして、動物の死や実験の失敗を引き起こすことを避けるために重要です。
ここでは、骨肉腫モデルマウスに煎じ薬を送達するために強制経口投与ルートを選択しましたが、これは投与量を正確に測定し、実験全体を通して一貫した薬物送達を保証することができたからです。煎じ薬の処方を調製するために、まず、体重60kgの成人に使用した量の20倍の比率に基づいて、マウス用の煎じ薬の量を計算しました。浸し、沸騰するまで加熱して2回煎じます。濾過濃縮し、煎じ薬を-20°Cでアリコートで保存した。 強制経口投与を行うには、濃縮煎じ薬製剤200μLを強制経口装置にロードし、強制経口注射針を口に挿入し、強制経口注射針を胃に向かって静かに押し込み、煎じ薬をマウスの胃に注入します。私たちの発見の1つは、強制経口投与によるYiqi Jiedu煎じ薬の煎じ薬処方を受けたグループで観察された腫瘍増殖の有意な阻害です。対照群と比較して、Yiqi Jiedu煎じ薬群では腫瘍体積の明らかな減少が観察されました。これらの結果は、強制経口投与法が煎じ薬製剤の有効成分を標的部位に効果的に送達し、強力な抗腫瘍効果をもたらすことを示しています。さらに、実験期間中、マウスの全身状態と体重をモニタリングすることにより、強制経口投与法の安全性プロファイルを評価しました。Yiqi Jiedu煎じ薬強制経口投与群と対照群の間で体重変化や毒性の兆候に有意差は見られず、煎じ薬の強制経口投与は忍容性が高く、明らかな有害作用を引き起こさないことが示された。
強制経口投与法は、煎じ薬の処方を実験動物に送達するのに有効であることが証明されましたが、この投与方法に関連する潜在的な副作用と特定の制限を認識することが重要です。食物による気管閉塞を避けるために、強制経口投与中および経口後の呼吸困難、息切れ、咳などのマウスの状態を注意深く観察してください。それらのいずれかが現れたら、すぐに強制経口を止め、水平の硬いデスクトップで胸骨圧迫を行います。さらに、深刻な状態には、すぐに獣医師の助けが必要です。さらに、次の制限に細心の注意を払う必要があります。第一に、強制経口摂取は動物にストレスを誘発し、全体的な生理機能や治療への反応に影響を与える可能性があります。しかし、強制経口投与中は小さな餌針を使用し、マウスを優しく扱うことで、ストレスを最小限に抑えるための対策を講じました。さらに、強制経口投与は、動物への危害の可能性を回避するために標準化された技術が使用されることを保証するために、特別な訓練を受け、資格のある人によってのみ行うことができます14。第二に、煎じ薬フォーミュラの有効成分が抗腫瘍効果を発揮する正確なメカニズムは不明のままです。強制経口投与戦略は、ハーブ化合物の薬物動態と薬力学を変化させ、バイオアベイラビリティと治療効果に影響を与える可能性があります。.今後の研究では、強制経口投与による煎じ薬の抗腫瘍効果の根底にある正確なメカニズムの解明に焦点を当てるべきである。さらに、長期強制経口投与中にイソフルラン麻酔を適用すると、煎じ薬の不完全な摂取と未熟な強制経口技術による動物の死亡が減少することが研究で報告されています15。一方、煎じ薬に食用油を加えると、強制経口に関連する動物のストレスが軽減されます16。
結論として、漢方薬の標準化された煎じ薬プロセスとマウスの熟練した強制経口投与戦略を提供しました。これらの取り組みにより、実験マウスの食道損傷や死亡の可能性を回避するだけでなく、各実験動物が同量の漢方薬を投与できるようにすることで、実験結果の正確性と一貫性、および治療効果が向上します。私たちの研究は、骨肉腫マウスモデルにおける伝統的な漢方薬の煎じ薬処方の投与に対する強制経口戦略の有効性と安全性を示しています。これらの結果は、骨肉腫の治療におけるこの送達法の可能性を浮き彫りにし、伝統的な漢方薬投与の強制経口投与戦略を最適化するためのさらなる研究の基礎を築くものである。さらに、今後の研究では、煎じ薬製剤の有効成分の正確な作用メカニズムを調査し、他の治療法との潜在的な相乗効果を調査して、骨肉腫患者の治療結果を向上させる必要があります。したがって、これらの知見は、この投与方法の潜在的な利点と限界に光を当て、骨肉腫治療におけるその応用に関する貴重な洞察を提供します。

煎じ薬は、伝統的な漢方薬と液体の薬の最も一般的に使用される剤形です1,2。伝統的な漢方薬の煎じ薬は、ハーブを水に浸した後、水で煎じ、濾過してかすを捨てることによって処理されます。
煎じ薬の処方は、特に伝統的な中国医学における証拠に基づく治療の特徴に沿って、臨床的必要性に基づいて個別化できるため、経口投与によるこの剤形は、何千年もの間臨床診療に適用され、具体的でかけがえのない利点があります3,4.煎じ薬の品質は、臨床効果に直接関係しています。したがって、煎じ薬処方は、有効成分が最大限に抽出され、保護されるように、標準化された煎じ薬法の原則に基づいて調製する必要があります3。一方、煎じ薬対応薬は、臨床診療で使用される生の漢方薬の主な形態です。処方された煎じ薬の品質基準と製造方法は、中国薬局方2の規定に準拠している必要があります。さらに、処方された煎じ薬は、冷たい飲料水に少なくとも30分間浸してから、加熱して特別な医薬品ポットで煎じる必要があります5。研究によると、ほとんどの有効成分は2回煎じることによって抽出でき、医療機関における伝統的な漢方薬の煎じ薬室の管理に関する実践規範も、煎じ薬を2回行うように規定しています4,6,7。硬い食感のものや強壮剤などの特別な漢方薬が処方されている場合は、煎じ薬時間を延長することをお勧めします。処方された煎じ薬が浸されている容器から始めて、煎じ薬製剤と直接接触する煎じ薬器具および貯蔵容器は、化学的に安定しており、キャセロール、セラミック、ガラス、ステンレス鋼などの蓋が付いている必要があります。ただし、アルミニウムや通常のプラスチック製品は使用しないでくださいが、鉄やその他の腐食性器具は、治療効果を低下させ、有害な影響を引き起こす可能性のある化学反応を避けるために禁止する必要があります4,6,7。
臨床実験の実施には限界があるため、マウスなどのヒトの病気を媒介する小動物は、伝統的な漢方薬の煎じ薬を含むさまざまな介入の治療効果と包括的なメカニズムを調査するために医学研究でよく使用されます8,9;ただし、人間とは異なり、煎じ薬の処方は毎日調製し、混合し、臨床診療で1日2回新たに投与する必要があります。動物は自発的に薬を必要な用量で時間通りに服用することができず、現在、漢方薬に関連する動物実験のほとんどは、煎じ薬の強制経口投与です。in vivo動物実験に使用される煎じ薬式は、事前に調製し、分注し、-20°Cで保存し、使用直前に解凍する必要があります3,4,10。さらに、標準以下の動物の固定化と強制経口注射針の操作は、不必要な怪我や否定的な感情のリスクを高めます。したがって、経口薬物送達の重要な方法として、食道損傷や薬物のこぼれの可能性を回避し、各モデル動物に同量の処方された漢方薬を投与して正確な実験結果を得るために、熟練した強制経口投与技術が特に重要です。ここでは、漢方薬の煎じ薬の強制経口投与プロトコルを提供します。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>143B cell line</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-8303</td>
			<td>osteosarcoma cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia machine</td>
			<td>Shenzhen RWD Life Technology Co.,Ltd</td>
			<td>R500IP</td>
			<td>The Equipment of Anesthesia mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic cell counter</td>
			<td>Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd</td>
			<td>IC1000</td>
			<td>Counting cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BALB/c athymic mice</td>
			<td>Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.</td>
			<td>Male</td>
			<td>Animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barbed skullcap herb</td>
			<td>Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.</td>
			<td>20230606</td>
			<td>Decoction-ready medicines&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement Membrane Matrix</td>
			<td>Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd</td>
			<td>356234, BD, Matrigel</td>
			<td>re-suspende cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube (15 mL)</td>
			<td>Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>430790, Corning</td>
			<td>Centrifuge the cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm)</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd.</td>
			<td>C21014-12</td>
			<td>Component of gastric perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze</td>
			<td>Haishi Hainuo Group Co., Ltd.</td>
			<td>LC45</td>
			<td>Decoction filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ginseng</td>
			<td>Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>20220704-2</td>
			<td>Decoction-ready medicines&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hedyotis diffusa</td>
			<td>Shanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.</td>
			<td>2023071107</td>
			<td>Decoction-ready medicines&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd</td>
			<td>VETEASY</td>
			<td>Anesthesia mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-volume syringe</td>
			<td>Shanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd</td>
			<td>0-50 &#956;L</td>
			<td>Inject precise cells into the tibia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>Beyotime Biotechnology</td>
			<td>ST447</td>
			<td>wash the human osteosarcoma cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands</td>
			<td>Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td>XPJ</td>
			<td>Fixing gauze on the measuring cup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1 mL )</td>
			<td>Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd.</td>
			<td>SBM0040</td>
			<td>Component of gastric perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin (0.25%)</td>
			<td>Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>25200056, Gibco</td>
			<td>trypsin treatment of cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

gavage strategy for decoction formula of traditional chinese medicine in osteosarcoma model mice

煎じ薬は、伝統的な漢方薬で最も一般的に使用されている剤形であり、経口投与によって何千年もの間臨床診療に適用されており、患者の特定の症候群に基づいて迅速な効果、吸収の容易さ、および個別化された治療を特徴としています。煎じ薬の品質は、伝統的な漢方薬の臨床効果に直接関係しています。したがって、主観的要因によって引き起こされる煎じ薬の品質の違いを避けるために、煎じ薬処方の標準化プロセスが重要です。一方、臨床実験の実施には限界があるため、マウスなどのヒトの病気を媒介とする小動物は、漢方薬の煎じ薬を含むさまざまな介入の治療効果と包括的なメカニズムを調査するために医学研究によく使用されます。したがって、経口投与法として重要な経口投与法として、食道の損傷や薬剤のこぼれを防ぐために熟練した強制経口投与技術が特に重要であり、これにより、各モデル動物に均等な量の薬が投与され、正確な実験結果が得られます。さらに、煎じ薬調製剤の標準化された方法と熟練した強制経口投与戦略は、動物福祉を保護し、使用される動物の数を最小限に抑えるために必要です。ここでは、骨肉腫マウスモデルにおけるYiqi Jiedu煎じ薬を用いた煎じ薬処方と強制経口投与技術の詳細な標準化プロセスを報告しました。有効性は腫瘍体積によって評価された。従ってこのプロトコルは動物保護を最大にし、研究データの信頼性を改善し、生体 内の従来の漢方薬のための煎じ薬の方式の治療効果そして分子メカニズムを将来調査するための有効な作戦を提供する。

in vivoでの骨肉腫の増殖に対するYiqi Jiedu煎じ薬の阻害効果は、143B骨肉腫細胞を胸腺マウスの脛骨に注入することによって調製された脛骨内異種移植骨肉腫マウスモデルで決定されました。Yiqi Jiedu煎じ薬は、Yiqi Jiedu煎じ薬群のマウスに、143B注射の2日目から28日間強制経口投与した。生理食塩水を対照群のマウスに投与した。すべてのマウスを28日後に安楽死させた。結果は、Yiqi Jiedu煎じ薬群の腫瘍体積が対照群と比較して有意に減少していることを示しました(図5)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66177/66177fig01.jpg"> 図1:煎じ薬の消耗品。 煎じ薬は、(A)高麗人参、(B)Hedyotis diffusa、(C)とげのある頭蓋骨のハーブ、(D)目盛り付き計量カップ、(E)輪ゴム、(F)ガーゼ、(G)計量カップの口に3層のガーゼを輪ゴムで固定します。 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/66177/66177fig01large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66177/66177fig02.jpg"> 図2:漢方薬の煎じ薬調製。 (A)高麗人参以外の煎じ薬を30分間浸す。 (B)高麗人参を別々に30分間浸す。 (C)高麗人参を別々に煎じる。(D)漢方薬の濾過煎じ薬。(E)漢方薬の濃縮煎じ薬の保管。 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/66177/66177fig02large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66177/66177fig03.jpg"> 図3:強制経口投与の消耗品 通常の1mLシリンジにオリジナル針(左パネル)、オリジナル針1mLシリンジを12/55mmエルボ胃灌流針に交換して強制経口避妊薬をセット(右パネル)。 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/66177/66177fig03large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66177/66177fig04.jpg"> 図4:マウスへの強制経口投与の手順。 (A)ケージ表面のマウス。(B)マウスの尻尾を片手で掴んでいる。(C-D)マウスを片手で固定。(E)マウスの口から針を刺す。(F)強制経口投与の終了。 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/66177/66177fig04large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66177/66177fig05.jpg"> 図5:骨肉腫マウスモデルにおける煎じ薬の阻害効果。 (A)対照群とYiqi Jiedu煎じ薬介入群から採取された骨肉腫サンプル。エラーバーは標準偏差(n = 7)を表します(B)対照群(Ctrl)群とYiqi Jiedu煎じ薬介入群の間の腫瘍体積 の不対t 検定。Yiqi Jiedu 煎じ薬を 28 日間介入すると、腫瘍の体積が有意に抑制されます (p<0.05)。エラーバーは標準偏差(n = 7)を表します。(C)実験期間中のYiqi Jiedu強制経口投与群および対照群のマウスの体重。 <a href="https://www-jove-com.remotexs.ntu.edu.sg/files/ftp_upload/66177/66177fig05large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるには、ここをクリックしてください。</a>

著者スポットライト:強化された動物研究のための標準化されたハーブ煎じ薬プロトコル

プロトコルは例として骨肉腫のマウス モデルのYiqi Jieduの煎じ薬の煎じ薬の煎じ薬の方式および強制経口の技術の詳しい標準化プロセスを提供する。動物保護について説明し、研究データの信頼性を向上させ、in vivoでの煎じ薬処方の治療効果と分子メカニズムを調査するための効果的な戦略を提供します。

骨肉腫モデルマウスにおける漢方薬の煎じ薬の強制経口投与戦略

Decoction formula is the most commonly used dosage form in traditional Chinese medicine and applied in clinical practice for thousands of years by ...

この研究は、段階的な運用下での予防措置の準備についての詳細で標準化されたプロトコルを提供し、必要としている人々に参考資料を提供しています。私たちの研究は、正確な結果を得るために、各動物が均等に投与されることを保証します。私たちの研究は、動物保護を最大化し、約の研究結果の信頼性を向上させることを目的としています 煎じ薬製剤。

gavage-strategy-for-decoction-formula-traditional-chinese-medicine

Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Medicine

Gavage Strategy for Decoction Formula of Traditional Chinese Medicine in Osteosarcoma Model Mice

504 ビュー.  Shanghai University of Traditional Chinese Medicine. この研究は、段階的な運用下での予防措置の準備についての詳細で標準化されたプロトコルを提供し、必要としている人々に参考資料を提供しています。私たちの研究は、正確な結果を得るために、各動物が均等に投与されることを保証します。私たちの研究は、動物保護を最大化し、約の研究結果の信頼性を向上させることを目的としています 煎じ薬製剤。

ビデオ: 著者スポットライト:強化された動物研究のための標準化されたハーブ煎じ薬プロトコル

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the body, an additional extraction procedure is commonly required to release the active constituents from raw herbs. Water decoction is a classical extraction procedure that is still broadly used in the clinical settings. Here, we propose a detailed protocol for er-xian decoction (EXD) in order to apply herbal decoctions to experimental studies. The calculation of an animal-appropriate dose is described, as well as the four main steps of EXD: soaking, water decoction, filtration, and concentration. In addition, serum-containing EXD is introduced to rats as a means of in vitro validation. Here, rats were orally administered EXD for three days. Blood samples were then collected, inactivated, centrifuged, and filtered. The serum, diluted with the culture medium, can be utilized to treat cells or tissues in vitro. For example, EXD was applied to both in vivo and in vitro studies and demonstrated that EXD enhances osteogenesis. This protocol can be used as a reference for the preparation and application of herbal medicines.

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

Here, we present the preparation of an er-xian decoction (EXD) in four steps&#8212;soaking, decoction, filtration, and concentration&#8212;and demonstrate the administration of a prepared EXD-containing serum to rats. These methods are applicable to the in vivo and in vitro study of herbal decoctions such as traditional Chinese medicines.

漢方薬の準備：Er-Xian煎じ薬とEr-Xian含有血清<em&gt;インビボ</em&gt;と<em&gt;インビトロ</em&gt;実験

Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the ...

医学

Preparation Of Gushukang (GSK) Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang (GSK) granules, a marketed prescription in China, have bone-protective effects in treating POP. Before administration to the body, one standard preparation procedure is commonly required, which aims to promote the release of active constituents from raw herbs and enhance the pharmacological effects as well as therapeutic outcomes. This study proposes a detailed protocol for using GSK granules in in vivo and in vitro experimental assays. The authors first provide a detailed protocol to calculate the animal-appropriate dosages of granules for in vivo investigation: weighing, dissolving, storage, and administration. Second, this article describes protocols for micro-CT scanning and the measurement of bone parameters. Sample preparation, protocols for running the micro-CT machine and quantification of bone parameters were evaluated. Third, serum-containing GSK granules are prepared, and drug-containing serum is extracted for in vitro osteoclastogenesis and osteoblastogenesis. GSK granules were intragastrically administered twice per day to rats for three consecutive days. Blood was then collected, centrifuged, inactivated, and filtered. Finally, serum was diluted and used for performing osteoclastogenesis and osteoblastogenesis. The protocol described here can be considered a reference for pharmacological investigations of herbal prescription medicines, such as granules.

Preparation Of Gushukang GSK Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

This article provides a detailed protocol for preparing a working solution of Gushukang granules for animal studies and GSK granule containing serum for in vitro experiments. This protocol can be applied to pharmacological investigations of herbal medicines as well as prescriptions for both in vivo and in vitro experiments.

インビボおよびインビトロ実験用グシュカン(GSK)顆粒の調製

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang ...

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes methods for the fabrication of the high platform, establishes a rat model of asthma and measures changes in respiratory function using a noninvasive and real-time whole-body plethysmography (WBP) system.

喘息ラットモデルにおける鍼治療

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, establishing a method to determine the multi-component in vitro dissolution of RG is of great significance for quality control. This study uses the second paddle method of the fourth general rule 0931 from the Chinese Pharmacopoeia (2020 edition), compliant with apparatus 2 of the United States Pharmacopeia (USP). The dissolution apparatus was set to a rotation speed of 100 rpm with ultrapure water as the dissolution medium. A sample volume of 1 mL was collected at each timepoint. Furthermore, the cumulative dissolution of gallic acid, salidroside, and ethyl gallic acid in RG at different time points was determined by high-performance liquid chromatography (HPLC). Finally, the dissolution curves were drawn, and the curves were fitted to the GompertzMod, the Gompertz, the Logistic, and the Weibull equations. The results showed that the cumulative dissolution of gallic acid in RG was over 80% at 1 min, the cumulative dissolution of salidroside and ethyl gallic acid was over 65% at 5 min, and the cumulative dissolution of each index component decreased after 30 min. The curve fitting demonstrated that the GompertzMod equation was the best-fitting model for each index component of RG. In conclusion, the dissolution test method described in this protocol is simple, accurate, and reliable. It can characterize the dissolution behavior of the index components in RG in vitro, which provides a methodological reference for quality control of RG and quality evaluation of other ethnic compounds.

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Here, we test the dissolution of Rhodiola granules (RG) in vitro, draw dissolution curves of salidroside, gallic acid, and ethyl gallate in ultrapure water, and fit the curves to different mathematical models. This protocol provides information and guidance for in vivo bioequivalence and in vivo-in vitro correlation studies of RG.

チベット医学ロディオラ顆粒におけるマルチインデックス成分の in vitro 溶解測定

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, ...

Visualization of Metabolites Identified in the Spatial Metabolome of Traditional Chinese Medicine Using DESI-MSI

The medicinal use of traditional Chinese medicine is mainly due to its secondary metabolites. Visualization of the distribution of these metabolites has become a crucial topic in plant science. Mass spectrometry imaging can extract huge volumes of data and provide spatial distribution information about these by analyzing tissue slices. With the advantage of high throughput and higher accuracy, desorption electrospray ionization mass spectrometry imaging (DESI-MSI) is often used in biological research and in the study of traditional Chinese medicine. However, the procedures used in this research are complicated and not affordable. In this study, we optimized sectioning and DESI imaging procedures and developed a more cost-effective method to identify the distribution of metabolites and categorize these compounds in plant tissues, with a special focus on traditional Chinese medicines. The study will promote the utilization of DESI in metabolite analysis and standardization of traditional Chinese medicine/ethnic medicine for research-related technologies.

In this study, a series of methods are presented to prepare DESI-MSI samples from plants, and a procedure of DESI assembly installation, MSI data acquisition, and processing is described in detail. This protocol can be applied in several conditions for acquiring spatial metabolome information in plants.

DESI-MSIを用いた漢方薬の空間メタボロームで同定された代謝物の可視化

The medicinal use of traditional Chinese medicine is mainly due to its secondary metabolites. Visualization of the distribution of these metabolites has ...

Enema of Traditional Chinese Medicine for Patients with Severe Acute Pancreatitis

Severe acute pancreatitis (SAP) is characterized by high mortality rates, numerous complications, and extreme difficulties in treatment. A traditional Chinese medicine (TCM) enema has been widely utilized in clinical and experimental studies of SAP. It has been demonstrated to have beneficial effects in protecting pancreatic function and delaying disease progression. The procedure of TCM enema is to perfuse the Chinese medicinal liquid of raw rhubarb (Rheum officinale Baill. DaHuang) from the anus into the rectum and colon. Basic steps of the procedure include boiling the herbal solution in advance, using a disposable enema kit to assist patients in taking a left lying position, raising the patient's hip 10 cm, and carefully inserting the enema 30-35 cm into the anus, with a drip speed of 60-80 drops/min. The medicine liquid temperature should be equivalent to the patient's body temperature, typically between 37-39 &#176;C. The end of the enema operation should be slow, and Tui na (massage therapy) should be administered before extubation. The medication liquid should be kept in the rectum for more than 1 h. After issuing an enema, it is essential to observe the patient's feces and abdomen, and to evaluate the remission of abdominal signs and symptoms.

An enema is a type of traditional Chinese medicine (TCM) therapy used to treat severe acute pancreatitis (SAP). The therapy involves instilling a TCM liquid into the rectum and colon through the anus to keep the liquid in the intestine, absorbing through the intestinal mucosa. This study aims to standardize the enema procedure for SAP patients.

重症急性膵炎患者に対する漢方薬の浣腸

Severe acute pancreatitis (SAP) is characterized by high mortality rates, numerous complications, and extreme difficulties in treatment. A traditional ...

Objectification of Tongue Diagnosis in Traditional Medicine, Data Analysis, and Study Application

Tongue diagnosis is an essential technique of traditional Chinese medicine (TCM) diagnosis, and the need for objectifying tongue images through image processing technology is growing. The present study provides an overview of the progress made in tongue objectification over the past decade and compares segmentation models. Various deep learning models are constructed to verify and compare algorithms using real tongue image sets. The strengths and weaknesses of each model are analyzed. The findings indicate that the U-Net algorithm outperforms other models regarding precision accuracy (PA), recall, and mean intersection over union (MIoU) metrics. However, despite the significant progress in tongue image acquisition and processing, a uniform standard for objectifying tongue diagnosis has yet to be established. To facilitate the widespread application of tongue images captured using mobile devices in tongue diagnosis objectification, further research could address the challenges posed by tongue images captured in complex environments.

The present study employed U-Net and other deep learning algorithms to segment a tongue image and compared the segmentation results to investigate the objectification of tongue diagnosis.

伝統医学における舌診断の客観化、データ解析、研究応用

Tongue diagnosis is an essential technique of traditional Chinese medicine (TCM) diagnosis, and the need for objectifying tongue images through image ...

A Traditional Chinese Medicine Characteristic Therapy for Bronchial Asthma: Moxibustion

Bronchial asthma is a chronic inflammatory disease of the airway which can lead to symptoms such as recurrent wheezing, shortness of breath, chest tightness, or cough, as a result of increased airway reactivity. With high diurnal variation, these symptoms often occur or worsen at night or in the morning. By burning and roasting the Chinese medica above human acupoints, moxibustion is a type of treatment that stimulates the activity of the human meridians through drugs and heat stimulation to prevent and treat diseases. According to the principle of syndrome differentiation and treatment of traditional Chinese medicine, acupoints are selected on the corresponding parts, which has a definite effect. It is regarded as a characteristic traditional Chinese medicine therapy for bronchial asthma. This protocol elaborates the methods and steps of patient management, material preparation, selection of acupoints, operation, and postoperative nursing to ensure safe and effective moxibustion treatment to significantly improve the clinical symptoms and quality of life of patients with bronchial asthma.

This protocol presents a curative procedure of moxibustion in treating patients with bronchial asthma.

気管支喘息に対する漢方薬の特徴的な治療法:灸

Bronchial asthma is a chronic inflammatory disease of the airway which can lead to symptoms such as recurrent wheezing, shortness of breath, chest ...

ウサギモデルにおけるTuinaによる変形性膝関節症の治療

Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of Tuina in treating KOA has been confirmed, but the underlying mechanism needs to be investigated. This study aims to establish a scientifically feasible KOA rabbit model treated with Tuina to reveal the underlying mechanisms. For this, 18, 6-month-old normal-grade male New Zealand rabbits were randomly divided into sham, model, and Tuina groups, with 6 rabbits in each group. The KOA model was established by injecting 4% papain solution into the knee joint cavity. The Tuina group was intervened with Tuina combined with the knee joint rotary correction method for 4 weeks. Only the standard grasping and fixation were performed in sham and model groups. At the end of the 1-week intervention, the knee joint range of motion (ROM) was observed, and cartilage hematoxylin-eosin (HE) staining was done. The study shows that Tuina could inhibit chondrocyte apoptosis, repair cartilage tissue, and restore knee joint ROM. In conclusion, this study demonstrates the scientific feasibility of Tuina treatment for KOA model rabbits, highlighting its potential application in the study of KOA and similar knee joint-related conditions.

著者スポットライト:ウサギモデルを使用して、変形性膝関節症の治療におけるTuinaの有効性を探る 

The protocol describes a method for Tuina intervention in a rabbit model of knee osteoarthritis.

変形性膝関節症のウサギモデルにおける推拿介入

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of ...