Chronic Intermittent Ethanol Vapor Exposure Paired with Two-Bottle Choice to Model Alcohol Use Disorder

私たちの研究は、障害を使用したアルコールの分野に関係していました。この研究は、確立されたAlco依存性マウスモデルで一般的に使用される方法論を強調しています。このモデルは、慢性的な間欠性エタノール蒸気と2本のボトル選択パラダイムを組み合わせたものです。

CIEの2つのボトル選択パラダイム。自動化された2本のボトル選択装置は、スーパータッチの頻度を記録することにより、マウスの飲酒行動を監視することができます。これにより、飲酒セッション中の飲酒のタイミングなど、消費量を超えた追加情報を取得することができます。

アルコールを用いた疾患に関する前臨床試験では、全脳イメージング、化学遺伝学、各種ウイルス性遺伝子組換えマウスを用いた光遺伝学などのアプローチが、この分野の研究を進めるためによく用いられています。計算モデリングなどの他のアプローチも使用されます。アルコール依存症のための2本のボトル選択CIEモデルは、長年にわたって確立されてきました。

しかし、私たちは、このアプローチの採用を、より広範な研究コミュニティにとってより容易に利用できるようにしたいと考えています。障害を使用してアルコールを研究するために使用される他の技術と比較してください。2つのボトルの選択とCIEパラダイムには、重大な離脱症状の誘発やアルコール摂取のエスカレーションの進行など、翻訳の関連性が高まるいくつかの利点があります。

このアプローチは、アルコール依存によって引き起こされる関連する神経生物学的変化を研究するために使用するのに理想的です。居住を開始するには、照明が消える30分前に、グループに収容されたマウスを個々の飲用ケージに移動します。各飲料ボトルの容量を記録し、マウスに2時間飲ませます。

飲酒期間終了後のボトルの量を記録します。次に、マウスを少なくとも2週間のベースライン2ボトル選択飲酒にさらして、安定したエタノール摂取を確立します。マウスに水筒と15%エタノールが入った2本目のボトルを与えて、マウスをテストします。

2時間の飲用期間の前後の各ボトルの容量を記録します。マウスがエタノール摂取量の安定したベースラインを達成したら、摂取量に基づいてマウスを2つのグループに分け、ホームケージに戻します。マウスにエタノール-ピラゾール溶液を腹腔内注射します。.

すべてのエアコントロールと他のグループに、生理食塩水と混合した同じピラゾール用量を注入します。.注射後、エアコントロールマウスを自宅のケージに入れ、CIEケージをベイパーチャンバー内に置きます。ドアをロックし、ポンプを適切な蒸気レベルに設定します。

次に、実験の実行時間を設定し、ベイパーシステムがオフになる30分前にCIEベイパーチャンバー制御画面でスタートを押します。マウスの血中エタノール濃度を測定します。血液を採取した後、CIEの翌週にマウスを2本選択試験に戻します。

血液サンプルを208Gで摂氏4度で1.0分間遠心分離し、血漿を分離します。酸素率エタノール分析装置を使用して、血中エタノール濃度を測定します。3週間の最初のベースラインエタノール摂取量は、CIEの前にキログラムあたり2.00±0.21グラムで安定しました。

Bonferroniの事後試験では、CIEマウスは、ベースラインの飲用量と比較して、蒸気後6週目にエタノール摂取量が大幅に増加したことが示されました。CIEマウスは、PV6の非依存性マウスよりも有意に多くのエタノールを消費した。ボンフェローニの事後試験では、PV6では、エタノール依存マウスは、自身のベースラインマウスおよび非依存性マウスと比較して、エタノール摂取量が有意に高かったことも示されました。

CIEグループの分析された血中エタノール濃度は、デシリットルあたり週平均173.12ミリグラムを示しました。