私たちのプロトコルは、マウスのグルコースレベルを監視するための簡単で安価な方法を提供します。この技術の主な利点は、困難な顕微手術を必要とせず、出血やマウスの取り扱いを伴わないことです。この方法は、肥満および糖尿病のマウスモデルにおけるとらえどころのないグルコース管理表現型を同定するために使用することができる。
このプロトコルを試みる間、最も重要なステップは、カニューレを皮膚の下に挿入し、カニューレを所定の位置に保つために内側の縫合糸を締めることです。麻酔をかけたマウスの背中の正中線を剃り始め、脱毛クリームを使用して完全な脱毛を確実にします。センサーを開いてロードします。
次に、センサーをセンサー取り付け装置に取り付けて、センサーのテープとカニューレ側を露出させます。カニューレは針から空です。カニューレの両側のテープに2つの5-0テーパーポイント縫合糸を縫合します。
背側の皮膚の準備のために、鋭いハサミを使用して背骨の上の剃った領域の中央に2ミリメートルの切開を行います。カニューレをポケットに簡単に挿入できるように、皮膚の下に鈍いエッジを持つ小さな鉗子を簡単に挿入して小さな皮下ポケットを形成します。切開部の両側の皮膚に縫合糸を通します。
センサーを挿入する場合は、センサーをセンサー取り付け装置から完全に取り外し、センサーを鉗子で保持して、周囲のテープがそれ自体に付着しないようにします。カニューレを皮下ポケットに慎重に挿入します。両側の縫合糸を引っ張り、締めて結び、センサーをしっかりと固定します。
これにより、粘着テープが時間の経過とともに緩むと、カニューレが皮下ポケットから滑り落ちるのを防ぎ、縫合糸の端を切り取って廃棄します。センサーを囲む粘着テープを貼り、センサーの周囲に8本の不連続縫合糸を行い、テープで留めたセンサーの境界を皮膚に貼り付けます。センサーをアクティブにします。
カニューレが挿入され、CGMが正常にアクティブ化されたら、レシーバーを使用してデータを収集します。提供されたコードを使用した1台のマウスからの3日間の生の出力データをここに示します。軸パラメータ、および他のすべてのパラメータは、コード内で変調できます。
ここでは、わかりやすくするために3日間のデータを示しています。皮下ポケットを作り、いくつかの縫合糸を追加することで、センサーのカニューレをより長く所定の位置に留まらせることができます。この技術を使用して取得された連続データにより、特定のマウス系統におけるとらえどころのない代謝表現型を明らかにすることができました。