JoVE Journal

Developmental Biology

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Nanyang Technological University

リコンビナーゼ媒介カセット交換を用いて、マウス胚性幹細胞における構造と機能の研究

タンパク質は、多くの場合、異なる細胞機能を発揮することができ、複数のドメインを含みます。遺伝子ノックアウト(KO)は、この機能的多様性を考慮していません。ここでは、様々な機能ドメインまたはタンパク質の変異体の分子解剖を可能KO胚性幹細胞における組み換え媒介カセット交換(RMCE)ベースの構造と機能のアプローチを報告しています。

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この動画の章

0:05

Title

1:11

The RMCE Principle

2:15

Isolation of RMCE-compatible Knockout Mouse ES Cells

5:22

Isolate RMCE-compatible Knockout ES Cells

7:29

Generation of an RMCE-compatible Targeting Vector Using Recombination Cloning

9:25

RMCE-mediated ES Cell Targeting of Rescue Constructs to the R26 Locus and Differentiation of ES Cells in Embryoid Bodies

12:41

Results: Cystic EB Formation Using Recombinase Mediated Cassette Exchange

14:27

Conclusion

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