ハイスループットシーケンシングを利用し全体プロテイン飽和突然変異誘発ライブラリの機能評価のためのプロトコル

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11:36 min

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July 3rd, 2016

DOI :

10.3791/54119-v

July 3rd, 2016

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Michael Allen Stiffler¹, Subu K Subramanian¹, Victor H Salinas¹, Rama Ranganathan¹

¹Green Center for Systems Biology, University of Texas Southwestern Medical Center

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113 TEM 1

この動画の章

0:05

Title

0:43

Synthesis of NNS Sub-libraries for Each Amino Acid Position by Two-step PCR Site-directed Mutagenesis

1:53

Cloning of NNS Sub-libraries into Selection Vectors

3:47

Selection of the TEM-1 Whole-Protein Saturation Mutagenesis Library for Antibiotic Resistance

5:51

High Throughput Sequencing to Determine Fitness Effects of Mutations

8:44

Results: High Throughput Sequencing from Whole-Protein Saturation Mutagenesis

10:16

Conclusion

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