This work is supported by a Baylor University Research Council grant and by a research grant from the Epilepsy Foundation.

以下の実験で使用した成体雄マウスを作製し、暗14時間の光と10時間（20時6:00時間）概日周期で、22℃の周囲温度でベイラー大学で飼育しました。マウスは、食物および水を自由に摂取アクセスを与えました。マウスへのすべての手順は、実験動物の管理と使用に関する健康ガイドラインの国立研究所を遵守していたし、動物プロトコルは、ベイラー大学動物実験委員会によって承認されました。マウスは、昼前/午後で試験しました。研究者の下にあるすべての手順については臭いを除去し、汚染を防ぐために手袋を着用しなければなりません。 非社会的な臭気の調製<ol><li>新鮮な非社会的な匂いにテストの毎日を準備します。 注：研究者は臭いを準備するために手袋を使用する必要があります。 <ol><li>水各10mlで3遠心管を埋めます。 </li><li>ピペット15ミリリットル＆＃にバナナエキス100μlの160; 1秒15ミリリットルコニカルチューブに円錐管とアーモンドエキス100μlの：100希釈。 注：第15ミリリットル管が水のみが含まれます。 </li></ol></li></ol>社会においの調製<ol><li>発生する朝のテストに新たな社会的臭気を準備します。少なくとも3日間洗浄し、マウスの同じ番号が含まれていなかった2つのケージから社会匂いを取得します。試験対象と同じ性別のマウスからの社会的臭気を取得します。 注：これらは、室温で保存すると、強力で一貫性のある臭いを維持するために4~6時間以内に使用すべきです。 <ol><li>決定どのように多くの社会的な臭気綿棒を作成する必要があります。テストされている各マウスは、社会臭い1、および社会的臭気2から3からの3つの綿棒が表示されます。 </li><li>汚れたケージの下部にジグザグ状に綿棒を拭くことによって社会的な臭いを準備します。先端にしがみついて、余分な寝具を振り払います。 </li><li>蓋付きまたはパラフィルムで覆われたビーカー内の大きなガラスの瓶に保管スワブ。社会臭1と社会臭い2秒ごとに1つのコンテナを指定します。 </li></ol></li><li>実験的な試験室の外に臭気源ケージを維持します。 </li></ol>試験マウスの3順化<ol><li>手袋の上に置き、試験しようとするマウスを計量し、上にワイヤ蓋と除去された水のボトルとクリーンケージに個別に配置します。 </li><li>マウスは試験室以外の部屋で45分間、新しいケージに順応することを可能にします。部屋には異常な臭いや騒音がないことを確認します。 </li><li>テストは約45分かかりますので、現在のマウスをテストする前に権利を順応さクリーンケージにテストされるべき次のマウスを置くことによって順化時間をずらします。 </li></ol>テストルームの4準備<ol><li>新鮮な綿棒、実験用テープ、社会的な臭気スワブを含むボトル、n個のチューブを入れます試験室で蓋付きの社会的な臭気、マイクロピペット、2タイマ、および廃液ボトル。 </li><li>試験室は、臭気、騒音、明るい光の適度に自由であることを確認してください。香りのコロンまたはローションを着用しないでください。 注：観察者は、試験期間中にガムや飴を噛むされるべきではないと強い臭気食品への露出を制限するようにしてください。 </li></ol> 5.テスト手順<ol><li>試験室に、そのケージに順応させたマウスを持参し、着席しながら閲覧するための快適な高さにカウンターの上にケージを置きます。 </li><li> 2分毎にのために行の各臭気を3回提示します。 表1に見ることができる提示順序を使用してください。 <ol><li>綿棒、再キャップ臭気源の先端までに試験される香りで、付臭剤のピペットを50μl。ケージのワイヤー上部を持ち上げ、水のボトル口に綿棒の無香料、木製の端を挿入し、pushinGトップへのワイヤの下側から貫通長さ。臭気汚染が回避されるように、指を含め、何にも綿の先端に触れないようにしてください。 </li><li>綿の終了の約1インチをケージに垂れ下がるまで水ボトル開口部を介して綿棒を描き続けています。ラボのテープを使用して、ケージの側面に綿棒の木の端を貼り付けます。 注：蓋が戻ってケージの上に落下させないように注意して、試験マウスを乱す大きな音を発生させます。 </li><li>すぐに2分間のタイミングを開始します。 2分間のプレゼンテーションを時間を計るために1つのタイマーを使用してください。 2分間の試験中に香りをスニッフィング費やした累積時間を記録します。独立したストップウォッチを使用して、動物のスニッフィングの行動をカウントします。動物の鼻が鼻〜2センチメートルまたは先端に近いと綿の先端に向かって配向されたときにアクティブな盗聴が定義されています。 </li><li>各試験の終了後、ワイヤカバーを上げ、国連を通じて下方に引いて、綿棒を削除蓋のderside（これはワイヤーに触れ綿棒を防止することによって臭気汚染を回避します）。 500ミリリットル廃棄ボトルで使用されるスワブを密封します。 </li><li>準備し、次の綿棒を挿入し、タイミングを開始します。各試行間間隔の間に約1分を許可します。各香りは2分毎にのために、3回連続で提示されるまで操作を続行します。 </li></ol></li><li>マウスはすべての試験を完了した後は、試験室の外のゴミ箱に使用綿棒を含む廃棄ボトルを空にすることができます。そのホームケージにマウスを返します。 </li></ol> 6.分析<ol><li> ANOVAは、ニューマン·クールズ続いて、双方向または重大な馴化を決定するために、同様の事後検定（連​​続した同じ匂いスニッフィング少ない時間）、およびdishabitutation（より多くの時間の新しい香りをスニッフィング）を用いた匂い条件ごとに各グループのデータを分析します。 </li></ol>

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</ol>

The authors have nothing to disclose.

本論文で得られた結果は、マウスに最適です。マウスはすぐに慣れ、その後、新規の臭いに強い反応を示しています。この方法における重要なステップの一つは、悪臭の製造です。研究者は、汚染を防止するために、互いから臭気を分離するために細心の注意を取る必要があります。もう一つの重要な側面は、綿棒の提示です。研究者はマウスが先端を調査することができるように綿の先端の最高のロケーションを解決する必要があるが、先端に裂けていません。試験の重要な成分は、悪臭の選択です。我々は3つの非社会的臭気を提示し、それは追加の匂いを含めることは困難ではないであろう。一つの注意点は、互いに著しく異なる匂いを選択することです。似た匂いが順次提示されている場合は、1つは、「床効果」を観察することができます。さらに、マウスは、あまりにも多くの新たな臭気を提示するときの応答を低減するために始めることができます。研究者は含めることを希望する場合dditional臭いは、彼/彼女はテストの別の日を含めることができます。これは、各マウスをテストするのに約1時間かかります。また、1は実験条件としてそれらを含める前に、対照マウスにおける臭いの選択のトラブルシューティングを行う必要があります。 嗅覚馴化/脱馴化は社会的行動を調査する際に含めるための重要なテストです。 3室社会的行動試験は、一般的に、マウスにおける社会的行動の障害を調べるために使用されます。このテストでは、実験動物は、新規オブジェクトと室の異なる端部にカップの下に配置されている小説のマウスを調査する条件を含みます。試験はまた、新規のマウスを1つのカップの下に配置され、別のマウス（馴染みのマウス）は、他のカップの下に配置されている状態を含むことができます。研究者はその後、実験マウスは、2つの区別できるかどうかを調べます。嗅覚があるため、主な感覚モダリティのマウスは、他のマウス9-11を識別するために使用します、障害嗅覚は、このタスクの能力を損なう可能性があります。障害の嗅覚は、データの誤った解釈につながる可能性があります。例えば、実験者はマウスが使い慣れたマウスと比較して、新規のマウスを使ってより多くの時間を費やしていないことを観察することができます。これはテストされているマウスでは、社会的障害や障害のある社会的記憶の証拠を示すために表示されることがあります。しかし、単純な解釈は、動物が適切に動物を検出できないことが考えられます。 嗅覚馴化/脱馴化試験は自閉症のマウスモデルを明確に有用でした。自閉症の一つの頻繁に使用されるマウスモデルはBTBR T + TF / J（BTBR）マウス株です。これは、自閉症の3つのコア行動特性に強い表面的妥当性を持つ近交系です。ただし、1の懸念は、彼らの社会的行動の赤字が損なわ嗅覚系によるものであるかどうかをされています。ヤンらはBTBR株はhabituの使用を介して嗅覚障害を有するかどうかを調べエーション/脱馴化試験12。彼らは非社会的な臭気のための水、アーモンド臭、およびバナナ臭の3プレゼンテーションを使用していました。そして、彼らは129 / SvlmJとB6マウス株から調製した社会的な臭気を使用していました。 BTBR株は非社会的な臭いに慣れと脱馴化を示しました。マウスは、最初の社会的な匂いに居住を証明したが、第2の社会的臭気に脱馴化を示さありませんでした。一つの可能​​性は、彼らが異なる社会的臭気を区別することができないかもしれないということです。 2社会的な刺激が提示されている場合、これは社会的行動テストで自分の能力を損なう可能性があります。自閉症の異なるマウスモデルを模索し、これらのマウスに変化しているものに新たな洞察を提供することができる場合、これは重要な考慮事項です。 慣れと脱馴化は、学習の基本的な非結合機構です。これらの学習の原理は、複雑かつ単純な生物13,14の多数のタイプにおいて実証されています。しかし、これらの機構学習のマウス嗅覚行動にまれに調査したが、このシステムは、行動試験の大きな電池の一部として測定することが重要であるされています。このテストは、セットアップして実行するために安価である、試験の一日だけを必要とし、いくつかのマウスは、1日以内に試験することができます。このテストの主な目的は、嗅覚機能を調べることです。テストの結果は、社会的行動テストや臭気成分を含む他のテストの誤解を軽減することができます。 すべてのタスクでのマウスの動作を調べるとき、いくつかの考慮事項があります。マウスの株、動物の性別、一日の時間を検討する必要があるすべての要因です。研究者は、混合菌株を使用している場合は、臭気の調査行動のよりばらつきがある可能性があります。我々は、混合FVB株からデータを発表しました。これらは、非社会的臭気テストでよく（ 図3）を行います。彼らは大量のOのための社会的な匂いを調査し、が、F時、彼らは社会的な臭気（ 図4）の繰り返しプレゼンテーションに慣れを示さありませんでした。マウスは、馴化を実証するためのより多くの試験を受けることが必要になる場合があります。私たちは、ほとんどの株のために有用である一般的な方法を提供してきました。初めて任意の株の挙動を調べるしかし、上記の要因を考慮すべきです。対照動物の性能を調べることによって、研究者は、選択した臭気を調整する必要があり、臭気が提示された回数、照明条件、試験のための一日の時間、および動物のセックス。これは、他のマウスの動作についても同様であるとこのタイプのテストで考慮されるべきです。我々は簡単に購入できます臭いが含まれています。研究者は、彼らは純粋な臭気を使用していないことを懸念している場合、それらは、Sigma-Aldrichから発注を検討してください。彼らは、1,600以上の香り原材料のデータベースを持っています。これは、研究者は、純粋な臭気を使用できるようになりますが、コストとすることができますいくつかの研究室への法外な。 実験者が検討する必要がありますいくつかのテスト条件があります。多くのテストでは、動物は、それがで試験する部屋に順応されている。このプロトコルでは、我々は一つの部屋に実験動物を順化および他でそれをテストしました。新しい部屋に移動したときにいくつかの興奮を引き起こします。全てのマウスは、試験マウスと同じ部屋に収容されている場合は、すべてのマウスは新規な臭気にさらされるので、私たちは手順をこのように行います。実験者が検討する必要があります2つのオプションがあります。最初は、我々は、上記のものです。もう一つは、それがテストを開始後、部屋に順応させるために部屋に動物を移動させることです。テストが完了した後、次いで順化させ部屋に置か次の動物を持っています。これは可能であるが、ほぼ実験の時間を倍増します。我々が使用するオプションは、実験中に試験室に試験動物を移動することでした。これは、LをもたらしますESSのテスト時間。ノベルティ誘導さ覚醒に関するテスト効率と関心のバランスがあります。実験者は、彼らの実験のために最善であるかを決定する必要があります。 このプロトコルは、人のスコア行動リアルタイム、それは彼らの行動を記録するカメラで動物の行動を研究するために、ますます人気となっていることを特徴とします。動物行動のビデオ記録の使用にはいくつかの利点があります。一つは、部屋内の人間の調査員がマウスの行動に影響を与える可能性があることです。実際、ある研究は、男性実験者を持つことが15をテストされているマウスの疼痛感受性に影響を与えることができることを見出しました。もう一つの懸念は、結果が唯一の研究者からのものであるということです。ビデオを使用することにより、複数の観察者が行動を獲得することができます録音。一つは、その後、スコアリングは、より一貫性のある測定値になりますオブザーバーの間でどのように信頼性の高い測定することができます。もう一つの利点は、ビデオのフレーム速度が減少し、プロもよいことができることです行動のより正確な測定を見よ。カメラの使用は、容易にこの方法を導入することができます。セットアップは、ラボスペース設定に依存します。カメラを使用することの欠点は、スコアの時間が大幅に増加することです。行動を獲得するために、2つ以上の観察者を必要とする結果を生成するのに必要な時間が増加します。これは、研究室に労働負担が増加し、多くのノックアウト株をスクリーニングする場合、いくつかの状況では禁止することができます。別の欠点は、複数のカメラを必要とすることができることです。カメラは固定された位置になります。マウスが動物を見るために、観察者を禁止するようにして臭気を調査する場合には、裁判を排除する必要があるかもしれません。これは、簡単に視力の彼らのラインを調整することにより、動物のビューを調整することができ、個々に懸念の少ないです。しかし、このプロトコールに記載された方法は、容易に、我々はDESCプロトコルに有意な変化なしにビデオ記録を含むように調整することができリーベ。

マウスは、他の個人を認識するため、食品を見つける、新しい環境をナビゲートするための嗅覚に依存していて、性行動1-3。これは、研究者は、実験動物が食物を伴う行動試験、社会的相互作用、またはマウスからの応答を誘発することを目的と任意の臭いを投与する前香りの機能感を持っているかどうかを確立することが不可欠です。行動試験の他のタイプが実行される前に、臭いを検出し、区別するマウスの能​​力を確立すべきであるので、臭覚障害または異なる臭気を区別できないことは、行動パラダイムの多種多様な偽陽性または陰性につながる可能性があります。 嗅覚馴化/脱馴化試験は、最初、1980年代4に記載しました。試験は博士によるマウスでの使用に適合されています。ムーヤンとジャクリーン·クローリー5。これは、研究者はESTAを可能にする、シンプルで安価な試験でありますマウスが検出され、悪臭を区別することができますblish。テストの嗅覚に加えて、この試験は、研究者がマウスの一般的な動作を観察することを可能にし、早期のテスト計画において行われる必要があります。マウスの移動に関する定性的観察は、不安、活動のレベル、および食品の臭いに対する社会的な匂いに対する反応の兆候は、テストを行うことが可能性がある新たな分野をシグナリングすることができます。 この試験では、様々な悪臭に浸した綿棒を3回行のマウスに提示されます。臭気の各繰り返し提示すると、マウスは、その後の各プレゼンテーションでそれを調査するより少ない時間を費やして、綿棒に慣らすます。新たな臭気が提示されると、脱馴化が発生し、典型的なマウスは、現在および以前の臭気5とを区別できることを示し、綿棒を調べる多 ​​くの時間を過ごすことになります。この試験は、一度に1つのマウスに投与し、45分ACCを備えていますlimation期間は、試験の45分が続きます。 この試験は、実施するのが容易であるが、それは、マウスの嗅覚システムに関する高度な問題を調査するために使用することができます。このような埋設食品検査として嗅覚のその他の人気の試験は、単に臭覚障害の有無を確立します。しかし、嗅覚差別と慣れ試験は、研究者がマウスで臭気を検出する能力を持っているが、異なる匂いとを区別することができないだけで判断することができます。馴化と脱馴化のパターンは、新しい変異体が臭気6,7を区別することができることを確立するために使用されています。驚くべき研究では、FadoolとのKv1.3チャネルの遺伝子標的欠失を有するそのマウスを示すために臭いの複雑な混合物を使用した同僚は、マウス8、通常よりも良い非常によく似た匂いを識別することができる「スーパーsmellers」です。 新しいノックアウトマウスモデルを調べるときには、establisに便利です時間の基本的な感覚​​のタスクの正常な動作の存在。テスト計画の初期に行われた場合、臭気差別や慣れテストが調査員に異常な行動を観察する機会を与えてくれます。これらの観​​察結果は、変異体の特性を交絡に起因するその後の検査で偽陽性または陰性の結果を防ぐことができます。研究者は、社会的行動を調査し続けている基本的な嗅覚機能を確認する必要性は、ますます重要になります。変異株における嗅覚を調べることに加えて、この試験は、すべての匂い刺激に対する薬理学的治療は、特に社会的な匂い刺激に対する動物の応答を増加させるかどうかなど、またはそれらの応答が増加した場合、特定の問題に対処するために使用することができます。

<table><tbody><tr><td>Mouse cage</td><td>Allentown</td><td>Standard mouse cage</td><td></td></tr><tr><td>Wire lid</td><td>Allentown</td><td>BCU Mouse WBL 2500</td><td></td></tr><tr><td>Bedding</td><td>Harlan</td><td>7090 Sani-Chips</td><td></td></tr><tr><td>Cotton swabs</td><td>VWR</td><td>89031-270</td><td>6&amp;rdquo; wooden handle</td></tr><tr><td>Banana extract</td><td>McCormick</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Almond extract</td><td>McCormick</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laboratory tape</td><td>VWR</td><td>89098-062</td><td></td></tr><tr><td>Stop watch</td><td>VWR</td><td>62374-000</td><td></td></tr><tr><td>Nitrile gloves</td><td>VWR</td><td>82026</td><td></td></tr><tr><td>Timing device</td><td>VWR</td><td>61161-350</td><td></td></tr><tr><td>15 ml conical tubes</td><td>VWR</td><td>89003-294</td><td></td></tr><tr><td>2 L beakers&amp;nbsp;</td><td>Pyrex</td><td>1003</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Parafilm</td><td>PM-992</td><td>4&amp;rdquo; x 250&amp;rsquo;</td></tr><tr><td>1 L bottle with cap</td><td>VWR</td><td>89000-240</td><td></td></tr></tbody></table>

testing for odor discrimination and habituation in mice

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the mouse can discriminate between non-social odors and social odors, whether the mouse habituates to a repeatedly presented odor, and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented with a novel odor. Since many social behavior tests measure the experimental animal&#8217;s response to a familiar or novel mouse, false positives can be avoided by establishing that the animals can detect and discriminate between social odors. There are similar considerations in learning tests such as fear conditioning that use odor to create a novel environment or olfactory cues as an associative stimulus. Deficits in the olfactory system would impair the ability to distinguish between contexts and to form an association with an olfactory cue during fear conditioning. 
In the odor habitation/dishabituation test, the mouse is repeatedly presented with several odors. Each odor is presented three times for two minutes. The investigator records the sniffing time directed towards the odor as the measurement of olfactory responsiveness. A typical mouse shows a decrease in response to the odor over repeated presentations (habituation). The experimenter then presents a novel odor that elicits increased sniffing towards the new odor (dishabituation). After repeated presentation of the novel odor the animal again shows habituation. This protocol involves the presentation of water, two or more non-social odors, and two social odors. In addition to reducing experimental confounds, this test can provide information on the function of the olfactory systems of new knockout, knock-in, and conditional knockout mouse lines.

記載されたプロトコルに続いて、結果は10成人（生後90〜120）の雄のC57BL / 6Jマウスと8つの雄FVB混合背景株（生後50〜70）を使用して記録しました。試験は、複数日にわたって単一の研究者によって行われました。グラフ上の各点は、臭気を調査費やした平均時間を表します。 水に浸した綿棒が最初に導入された場合、マウスはこの新規オブジェクト（：最初の3つのデータ点図1）を調査する多くの時間を費やしています。それぞれの連続した​​プレゼンテーションでは、短い時間では、馴化を示し、綿棒を調査に費やされています。新たな臭気が導入されると、時間の上昇は、マウスが新しい臭いと前の（：アーモンドデータポイント図1）とを区別できることを示し、綿棒を調査費やしあります。この場合も、それぞれの連続した​​プレゼンテーションで、より少ない時間が臭気を調査に費やされます。マウスはかなりのDを示します3件の試験F（2,18）= 3.8の上に水の綿棒をスニッフィング時間でecrease、P &lt;0.05。繰り返しアーモンド臭F（2,18）= 3.6、P &lt;0.05で提示されたとき、彼らは同様のパターンを示しています。第三の臭いによって彼らはまだ慣れが実証されていますが、この試験により、動物は床効果（ 図1：バナナデータポイント）に達しています。行動が行動を測定する能力は、任意のより低い信頼できないほど低い場合に床効果があります。バナナ臭F（2,18）= 2.5、P &lt;0.1で提示されたとき、彼らは3回の試験的な変化を示していません。しかし、臭気の全9プレゼンテーションの二元配置ANOVAは、時間F（8,72）= 3.8、P &lt;0.001を超える有意な効果を示しています。 慣れや差別の同じパターンは、非社会的な臭気のある、社会的な臭気で見ることができます。しかし、マウスは、社会的な臭気（ 図2）を調査し、より多くの時間を費やしています。 Tをスニッフィング費やされた時間の有意な減少がありますすべての6試験はF（2,18）= 6.1、P &lt;0.01を合わせた彼の社会的な臭気。しかし、最初の3回の試験F（2,18）= 3.0、P = 0.076以上の限界効果がありました。これは、いくつかの慣れではなく最初の社会的な香りをスニッフィング時間の短縮の統計学的に有意な量があった示唆しています。動物が社会的臭気の第二のプレゼンテーション中に社会的な臭気F（2,18）= 6.1、P &lt;0.01を調査した時間の量の有意な減少がありました。 私たちは、男性のFVB混在背景株方法を繰り返しました。水に浸した綿棒が最初に導入された場合、マウスはこの新規オブジェクト（：最初の3つのデータ点図3）調査多大な時間を費やしています。それぞれの連続した​​プレゼンテーションでは、短い時間では、馴化を示し、綿棒を調査に費やされています。新たな臭気が導入されると、スワブの調査に費やした時間で上昇は、マウスは、新しい臭気Aを区別できることを示し、ありますND前のもの（ 図3：アーモンドのデータポイント）。この場合も、それぞれの連続した​​プレゼンテーションで、より少ない時間が臭気を調査に費やされます。マウスは、3回の試験F（2,14）= 13.3、P &lt;0.001に水の綿棒をスニッフィング時間の有意な減少を示しています。繰り返しアーモンド臭F（2、14）= 12.7、p &lt;0.001で提示されたとき、彼らは同様のパターンを示しています。この株では、まだ3回の試験全体で有意な差がありました。第三の臭いによって彼らはまだ慣れ実証されている（ 図3：バナナデータポイント）が、バナナの匂いF（2,14）= 3.04、pは提示されたとき、床効果により、彼らは3回の試験的変化を示していません= 0.08。しかし、臭気の全9プレゼンテーションの二元配置ANOVAは、時間F（8,56）= 9.6、P &lt;0.001を超える有意な効果を示しています。 慣れや差別の同じパターンは、非社会的な臭気のある、社会的な匂いでは見られませんでした。重要なのは、ありませんでしたすべての6試験はF（5,35）= 0.16、P = 0.97組み合わせた場合の社会的臭気をスニッフィング費やされた時間の減少。データは、マウスは、2つの社会的な臭気の繰り返しプレゼンテーションに慣れていないことを示唆しています。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/52615/52615fig1.jpg" /> 図1：平均時間は、雄C57BL / 6Jマウスのための非社会的臭気を調査費やし各データポイントは、動物が特定の非社会的な臭気を調査費やした平均時間を表します。エラーバーは平均の標準誤差を表します。アスタリスク（*）は、グループの馴化を表示して有意な差（p &lt;0.05）を示します。 <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/52615/52615fig2.jpg" /> 図2：平均時間は、雄C57BL / 6Jマウスのための社会的な臭気を調査費やした各データポイントは、動物SPEN平均時間を表します。tは特定の社会的臭気を調査します。エラーバーは平均の標準誤差を表します。アスタリスク（*）は、グループの馴化を表示して有意な差（p &lt;0.05）を示します。 <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/52615/52615fig3.jpg" /> 図3：平均時間は、男性FVB混在背景株について非社会的な匂いを調査費やした各データポイントは、動物が特定の非社会的な臭気を調査費やした平均時間を表します。エラーバーは平均の標準誤差を表します。アスタリスク（*）は、グループの馴化を表示して有意な差（p &lt;0.05）を示します。 <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/52615/52615fig4.jpg" /> 図4：平均時間は、男性FVB混在背景株に対する社会的な臭気を調査費やした各データは、represenを指します。動物が特定の社会的臭気を調査費やした平均時間TS。エラーバーは平均の標準誤差を表します。 <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="190"><colgroup><col /></colgroup><tbody><tr height="19"><td height="19" style="height:19px;width:189px;">臭気</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">水</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">水</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">水</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">アーモンド</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">アーモンド</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">アーモンド</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">バナナ</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">バナナ</td></tr><tr height="20"><td height= &quot;20&quot;スタイル= &quot;高さ：20px;&quot;&gt;バナナ</td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">不慣れな社会臭1 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">不慣れな社会臭1 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">不慣れな社会臭1 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">不慣れな社会臭2 </td></tr><tr height="20"><td height="20" style="height:20px;">不慣れな社会臭2 </td></tr><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;">不慣れな社会臭2 </td></tr></tbody></table> 表1

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Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor.

マウスにおける臭気差別と馴化のためのテスト

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

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Nanyang Technological University

Research

JoVE Journal

Behavior

17.7K ビュー.  Baylor University. This manuscript describes a protocol to examine the olfactory system of rodents. The olfactory habituation/dishabituation test will allow investigators to determine whether a mouse habituates to a repeatedly presented odor and whether the mouse demonstrates dishabituation when presented a novel odor. 

ビデオ: Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

The Attentional Set Shifting Task: A Measure of Cognitive Flexibility in Mice

Cognitive impairment, particularly involving dysfunction of circuitry within the prefrontal cortex (PFC), represents a core feature of many neuropsychiatric and neurodevelopmental disorders, including depression, post-traumatic stress disorder, schizophrenia and autism spectrum disorder. Deficits in cognitive function also represent the most difficult symptom domain&#160;to successfully treat, as serotonin reuptake inhibitors and tricyclic antidepressants have only modest effects. Functional neuroimaging studies and postmortem analysis of human brain tissue implicate the PFC as being a primary region of dysregulation in patients with these disorders. However, preclinical behavioral assays used to assess these deficits in mouse models which can be readily manipulated genetically and could provide the basis for studies of new treatment avenues have been underutilized. Here we describe the adaptation of a behavioral assay, the attentional set shifting task (AST), to be performed in mice to assess prefrontal cortex mediated cognitive deficits. The neural circuits underlying behavior during the AST are highly conserved across humans, nonhuman primates and rodents, providing excellent face, construct and predictive validity.

The goal of this protocol is to perform a behavioral assay such as the attentional set shifting task (AST) to assess prefrontal cortex-mediated cognitive flexibility in mice.

注意のセットシフトタスク：マウスにおける認知の柔軟性の測定

Cognitive impairment, particularly involving dysfunction of circuitry within the prefrontal cortex (PFC), represents a core feature of many ...

行動学

Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected with aging and is a strong predictor of neurodegenerative diseases. Thus, olfaction testing is used as a non-invasive diagnostic method to detect neurological deficits early on. In order to understand the mechanisms underlying olfactory network susceptibility, olfactory research in rodents has gained momentum in the past decade.
Here, we present a very simple, time efficient and reproducible olfactory testing method of innate odor perception and sensitivity in mice without the need of any prior food or water restriction. The tests are performed in a familiar environment to the mice, require only the scents and a 2 min session of odorant exposure. The analysis is performed, post-hoc, using computer-assisted commands on ImageJ and can be, therefore, carried out from start to end by one researcher.
This protocol does not require any special hardware or setup and is indicated for any laboratory interested in testing olfactory perception and sensitivity.

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

シンプルでコンピュータ支援嗅覚テストマウス用

Olfaction is highly conserved among species and is required for reproduction and survival.
In humans, olfaction is also one of the senses that is affected ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is fairly simple and can be completed over 3 days: habituation day, training day, and testing day. During training, the mouse is allowed to explore 2 identical objects. On test day, one of the training objects is replaced with a novel object. Because mice have an innate preference for novelty, if the mouse recognizes the familiar object, it will spend most of its time at the novel object. Due to this innate preference, there is no need for positive or negative reinforcement or long training schedules. Additionally, the ORT can also be modified for numerous applications. The retention interval can be shortened to examine short-term memory, or lengthened to probe long-term memory. Pharmacological intervention can be used at various times prior to training, after training, or prior to recall to investigate different phases of learning (i.e., acquisition, early or late consolidation, or recall). Overall, the ORT is a relatively low-stress, efficient test for memory in mice, and is appropriate for the detection of neuropsychological changes following pharmacological, biological, or genetic manipulations.

The object recognition test (ORT) is a simple and efficient assay for evaluating learning and memory in mice. The methodology is described below.

マウスの記憶・学習の調査のための新規オブジェクト認識テスト

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible circuitry. In addition, this area's unique ability to generate new neurons throughout an organism's lifetime makes it an attractive system for developmental and regenerative biologists alike. Such interest necessitates a means for a quick, yet reliable assessment of olfactory function. Many tests of olfactory ability are complex, variable or not specifically designed for mice. Also, some tests are sensitive to memory deficits as well as defects in olfactory abilities, confounding obtained results.
Here, we describe a simple battery of tests designed to identify defects in olfactory sensitivity and preference. First, an initial general health assessment allows for the identification of animals suitable for further testing. Second, mice are exposed to various dilutions of scents to ascertain whether there is a threshold difference. Third, mice are presented with various scents, both attractive and aversive, that allow for the assessment of olfactory preference. These simple studies should make the initial characterization of olfactory behavior accessible for labs of varied resources and expertise.

Fundamental, yet unique properties of the rodent olfactory system have led to its increasing study among biologists. A relatively simple assessment of its function is then also needed. Here we describe sensitive tests for the characterization of mouse olfactory sensitivity and preference.

成体マウスでの嗅覚行動試験

The rodent olfactory system is of increasing interest to scientists, studied, in part, in systems biology because of its stereotyped, yet accessible ...

生物学

吸入環境汚染物質によるマウスの嗅覚障害の評価

Studying the Effects of Inhaled Environmental Pollutants on Olfactory Function in Mice

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental pollutants exposure may impair olfaction; thereby, there is an urgent need for methods to evaluate the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfaction. Mice are ideal models for olfactory experiments because of their highly developed olfactory system and behavioral characteristics. To assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice, a detailed buried food test and social odor discrimination experiment is provided, including the experiment preparation, the selection and construction of experimental facilities, the testing process, and indexes of time. Meanwhile, timekeeping equipment, operational details, and the experimental environment are discussed to ensure the success of the assay. Zinc sulfate is used as the treatment to demonstrate the feasibility of the experimental approach. The protocol provides a simple and clear operational process for assessing the effects of inhaled environmental pollutants on olfactory function in mice.

著者スポットライト:空気中の汚染物質の嗅覚効果の評価-埋設食品と社会的臭気試験

This paper provides a detailed description of the buried food test and social odor discrimination experiment to assess the effects of inhaled environmental pollutants exposure on olfactory function in mice.

マウスの嗅覚機能に及ぼす吸入環境汚染物質の影響の研究

Olfactory impairment is a significant public health problem and independently predicts the risk of neurodegenerative diseases. Inhaled environmental ...

環境学

Investigating Migraine-Like Behavior Using Light Aversion in Mice

Migraine is a complex neurological disorder characterized by headache and sensory abnormalities, such as hypersensitivity to light, observed as photophobia. Whilst it is impossible to confirm that a mouse is experiencing migraine, light aversion can be used as a behavioral surrogate for the migraine symptom of photophobia. To test for light aversion, we utilize the light/dark assay to measure the time mice freely choose to spend in either a light or dark environment. The assay has been refined by introducing two critical modifications: pre-exposures to the chamber prior to running the test procedure and adjustable chamber lighting, permitting the use of a range of light intensities from 55 lux to 27,000 lux. Because the choice to spend more time in the dark is also indicative of anxiety, we also utilize a light-independent anxiety test, the open field assay, to distinguish anxiety from light-aversive behavior. Here, we describe a modified test paradigm for the light/dark and open field assays. The application of these assays is described for intraperitoneal injection of calcitonin gene-related peptide (CGRP) in two mouse strains and for optogenetic brain stimulation studies.

Rodents are not able to report migraine symptoms. Here, we describe a manageable test paradigm (light/dark and open field assays) to measure light aversion, one of the most common and bothersome symptoms in patients with migraines.

マウスの光嫌悪を用いた片頭痛様行動の調査

Migraine is a complex neurological disorder characterized by headache and sensory abnormalities, such as hypersensitivity to light, observed as ...

Assessment of Mouse Judgment Bias through an Olfactory Digging Task

Judgment biases (JB) are differences in the way that individuals in positive and negative affective/emotional states interpret ambiguous information. This phenomenon has long been observed in humans, with individuals in positive states responding to ambiguity 'optimistically' and those in negative states instead showing 'pessimism'. Researchers aiming to assess animal affect have taken advantage of these differential responses, developing tasks to assess judgment bias as an indicator of affective state. These tasks are becoming increasingly popular across diverse species and fields of research. However, for laboratory mice, the most widely used vertebrates in research and a species heavily relied upon to model affective disorders, only one JB task has been successfully validated as sensitive to changes in affective state. Here, we provide a detailed description of this novel murine JB task, and evidence of its sensitivity to mouse affect. Though refinements are still necessary, assessment of mouse JB opens the door for answering both practical questions regarding mouse welfare, and fundamental questions about the impact of affective state in translational research.

This article provides a detailed description of a novel mouse judgment bias protocol. Evidence of this olfactory digging task's sensitivity to affective state is also demonstrated and its utility across diverse research fields is discussed.

嗅覚掘削作業によるマウス判定バイアスの評価

Judgment biases (JB) are differences in the way that individuals in positive and negative affective/emotional states interpret ambiguous information. This ...

Olfactory Assays for Mouse Models of Neurodegenerative Disease

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process and may be a useful behavioral marker for early detection. Earlier detection in neurodegenerative disease is a major goal in the field because this is when neuroprotective therapies have the best potential to be effective. Therefore, in preclinical studies testing novel neuroprotective strategies in rodent models of neurodegenerative disease, olfactory assessment could be highly useful in determining therapeutic potential of compounds and translation to the clinic. In the present study we describe a battery of olfactory assays that are useful in measuring olfactory function in mice. The tests presented in this study were chosen because they measure olfaction abilities in mice related to food odors, social odors, and non-social odors. These tests have proven useful in characterizing novel genetic mouse models of Parkinson&#8217;s disease as well as in testing potential disease-modifying therapies.

Impairment in olfactory function is a common feature in many neurodegenerative disorders including Parkinson, Alzheimer, and Huntington diseases. In the present article, we describe a set of tests for assessing olfaction discrimination and detection in mice that can be used to measure olfactory abilities in mouse models of neurodegenerative diseases.

神経変性疾患のマウスモデルのための嗅覚アッセイ

In many neurodegenerative diseases and particularly in Parkinson&#8217;s disease, deficits in olfaction are reported to occur early in the disease process ...

マウスにおける臭気差別と馴化のためのテスト

要約

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