クロマトグラフィーカラムのバンドの広がりは、その効率によって測定されます。これは、理論段数 (N) によって決まります。理論段理論では、分離カラムは、固定相と移動相の間で溶質の平衡化が起こる、連続した一連の仮想段で構成されているとされています。
理論段数が多いほど、カラム効率が高く、分離能力が向上します。段の高さは帯域幅と分離品質に影響し、カラム効率に反比例します。理論段数 (N) は、カラムの長さ (L) を段の高さ (H) で割って計算されます。次の式で示されます。
H を最小限に抑えることは、効率を高め、カラムの長さを短くするために重要です。
段の高さは、拡散係数が異なるため、溶質によって異なります。ガスクロマトグラフィーでは 0.1 ~ 1 mm、高速液体クロマトグラフィーでは約 10 µm、キャピラリー電気泳動では 1 µm 未満です。
カラム効率は、クロマトグラフのバンドがガウス形状になることが多いため、単位長さあたりの分散として定義できます。理論段数は、保持時間と、底辺または高さの半分でのピーク幅にも関係します。理論段は抽象的な概念であり、その数はカラムと溶質の特性によって異なるため、溶質によって異なることに注意してください。
充填カラムでは、理論段に相当する高さ (HETP) は、カラムの性能を表す重要なパラメーターです。HETP は、1 つの理論段に必要なカラムの長さを示し、充填カラム効率の設計と評価に不可欠です。HETP 値が低いほど、カラム効率が高く、分離能力が向上していることを意味します。
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