La nostra ricerca mira a identificare le anomalie a livello di circuito derivanti dall'esposizione al trauma durante le varie fasi dello sviluppo neurologico, abbiamo sviluppato un modello di trauma fisico della prima adolescenza per comprendere meglio l'impatto del trauma infantile sul funzionamento del cervello adulto. I professionisti della salute comportamentale stanno assistendo a un aumento dei pazienti che soffrono degli impatti duraturi degli abusi infantili. Tuttavia, la maggior parte dell'attuale ricerca sui roditori si concentra sull'esposizione al trauma in età adulta o sull'impatto dell'abbandono infantile.
Nessuno di questi affronta direttamente le sfide uniche osservate negli adulti che hanno una storia di abusi infantili. Il nostro protocollo produce un fenotipo evitante coerente in oltre due terzi degli animali sconfitti in età adulta. Inoltre, utilizzando maschi più giovani senza esperienza di riproduzione ospitati con femmine, il nostro protocollo è in grado di produrre maschi CFW robustamente aggressivi senza l'uso di ulteriori topi adulti B6 per istigare l'aggressività, aumentando la facilità e l'attuazione accurata del protocollo.
La nostra ricerca contribuirà alla crescente comprensione di come l'esposizione al trauma in diverse fasi dello sviluppo abbia un impatto biologico, comportamentale e anatomico unico sul cervello e, si spera, aiuterà nello sviluppo di nuove tecnologie di trattamento per le persone che hanno subito abusi infantili. Per iniziare, accoppia i maschi CFW con le femmine CFW OVX per una settimana per consentire l'esperienza sessuale e aumentare l'aggressività territoriale nel maschio. Dopo una settimana, rimuovi la femmina CFW OVX dalla gabbia e mettila in una gabbia pulita e vuota.
Quindi introdurre lo stimolo C57 maschio nella gabbia con il CFW maschio per un minuto e registrare la latenza dell'attacco. Successivamente, rimuovere lo stimolo C 57 maschio e riposizionare la femmina CFW OVX nella gabbia con il maschio CFW prima di riportarla nella stanza di stabulazione Gruppo House CFW maschi che non attaccano o mostrano una latenza di attacco superiore a 30 secondi in due o più giorni. Utilizzare questi maschi CFW non aggressivi come animali stimolo durante i test di interazione sociale in campo aperto.
Quando i maschi adolescenti di C57 hanno quattro settimane, pesare ogni animale e registrare il peso. Separare gli animali in due coorti uguali, controllare e sconfiggere assicurandosi che i pesi tra le due coorti non siano significativamente diversi. Una casa di controllo adolescente C57 su un lato di una partizione in plexiglass con un altro controllo adolescente C57 sull'altro lato della partizione.
L'undicesimo giorno di casa, ogni adolescente di controllo accanto a un diverso adolescente di controllo con una partizione in plexiglass tra i due per il resto dell'esperimento. Pesare e registrare il peso dell'adolescente C57 che deve essere sconfitto. Le ferite più grandi di quattro millimetri di diametro mostrate qui in scala, richiedono l'eutanasia immediata dell'animale da esperimento.
Quindi rimuovi la femmina CFW OVX dalla gabbia con il maschio CFW residente e alloggiala con altre femmine OVX. Successivamente, introduci l'adolescente C 57 nella gabbia del maschio CFW residente e avvia il cronometro. Rimuovi l'adolescente dalla gabbia dopo 30 morsi o cinque minuti, a seconda dell'evento che si verifica per primo e registra i dati dell'attacco.
Quindi posiziona il divisorio in plexiglass al centro della gabbia del residente maschio CFW, assicurandoti che il residente CFW sia da un lato e l'adolescente sconfitto dall'altro. L'11° giorno, ospita gli adolescenti sconfitti accanto ad altri adolescenti sconfitti con un divisorio di plexiglass tra di loro per tutta la durata dell'esperimento. Abituare il controllo e gli animali sconfitti alla sala prove per un'ora.
Registra tutte le sessioni con il software di tracciamento degli animali. Posiziona la tazza di filo metallico contro la parete sinistra dell'arena acrilica di 44 x 44 x 44 centimetri nel punto medio della parete. Disegna una zona di interazione circolare di due centimetri attorno alla tazza.
Ora posiziona il C 57 nell'angolo dell'arena con una tazza di filo vuota per 150 secondi. Quindi rimuovi il C 57 dall'arena e mettilo in una gabbia pulita e vuota. Posiziona un maschio adulto CFW non aggressivo e sconosciuto all'interno della coppa del filo e posiziona la coppa del filo all'interno dell'arena.
Reintrodurre il C 57 nell'arena con il CFW contenente la coppa di filo per 150 secondi. Dopo aver riportato entrambi gli animali nelle rispettive gabbie, pulisci l'arena con acqua ed etanolo al 70% per pulire eventuali aree con urina o feci prima di testare il successivo C 57. Calcola il periodo di tempo in cui ogni punto del corpo si trova all'interno della zona di interazione sia per la sessione con la tazza vuota che per la sessione con la tazza contenente CFW.
Dividi il tempo trascorso nella zona di interazione con la tazza contenente CFW per il tempo trascorso nella zona di interazione con la tazza vuota per produrre il rapporto di interazione sociale. Eseguire l'interazione sociale in campo aperto in qualsiasi momento dopo il periodo di sconfitta di 10 giorni, a seconda della finestra di sviluppo di interesse. Gli animali sconfitti hanno mostrato una riduzione significativa sia del rapporto di interazione sociale che del tempo di interazione sociale grezzo rispetto ai controlli in tutti i punti temporali testati.
La riduzione più pronunciata del rapporto di interazione sociale e del tempo si è verificata due settimane dopo la sconfitta, con gli animali sconfitti che hanno mostrato un aumento del tempo trascorso con una tazza vuota. Le mappe di calore hanno confermato che i topi sconfitti hanno trascorso più tempo negli angoli e meno tempo nella zona di interazione in tutti i punti temporali.
